laporan identifikasi mikroba A3.doc

8/17/2019 laporan identifikasi mikroba A3.doc

1/15

LAPORAN

IDENTIFIKASI MIKROORGANISME BERDASARKAN MORFOLOGI

DAN REAKSI BIOKIMIA

Oleh:

Kelompok A – 3

Tsulsiyh !h"oh Pu#"i $%&''%(%(%()%*

Fe+i Puspi# De,i $%&''%(%(%()3*

-i.y+i+/ D,i As#u#i $%&''%(%(%())*

Lu"esi 0e+y $%&''%(%(%()1*

2e"o+i Bu.i M/4i"oh $%&''%(%(%()5*

E6 -ul+."i $%&''%(%(%(73*

Risk Ill 8 $%&''%(%(%(7)*

I+#+ Fh"i S6i#"i $%&''%(%(%(75*

A+9" Ri+ Rhyu $%&''%(%(%(1%*

Mil Nu" Aih $%&''%(%(%(13*

Mo+i 8i+u".h AS $%&''%(%(%(1)*

A.i+. N.i Nu4li $%&''%(%(%(15*

LABORATORI;M BIOLOGI FARMASI

FAK;LTAS FARMASI

;NI2ERSITAS 0EMBER

'(%)


2/15

BAB I

PENDA


3/15

%.+. emahami sifat bakteri-bakteri yang dapat diidentifikasi dengan

media selektif.


4/15

BAB II

TIN0A;AN P;STAKA

'=% I.e+#i4iksi >k#e"i >e".s"k+ mo"4olo/i

opulasi bakteri tumbuh sangat cepat ketika mereka disertakan dengan

gii dan kondisi lingkungan yang memungkinkan mereka untuk berkembang.

elalui pertumbuhan ini, berbagai !enis bakteri kadang-kadang akan

menghasilkan koloni yang khas dalam penampilan. Beberapa koloni mungkin

akan berarna, ada yang berbentuk lingkaran, sementara yang lain tidak

teratur. arakteristik koloni (bentuk, ukuran, arna, dll) yang diistilahkan

sebagai 0koloni morfologi1. orfologi koloni adalah cara para ilmuan dapat

mengidentifikasi bakteri. orfologi koloni dapat ditin!au dari berbagai aspek

yaitu : shape (bentuk), edge (tepi 2 pinggir), ele3ation (ketinggian), sie

(ukuran), surface (permukaan), consistency (kekentalan 2 kepadatan), odor

(bau), opacity (transparansi) dan chromogenesis (pigmentasi).

'=' I.e+#i4iksi >k#e"i >e".s"k+ u9i >iokimi

&!i biokimia bakteri merupakan suatu cara atau perlakuan yang

dilakukan untuk mengidentifikasi dan mendeterminasi suatu biakan murni

bakteri hasil isolasi melalui sifat - sifat fisiologinya. Suatu bakteri tidak dapat

dideterminasi hanya berdasarkan sifat-sifat morfologinya sa!a, sehingga perlu

diteliti sifat-sifat biokimianya dan faktor-faktor yang mempengaruhi

pertumbuhannya.

Berikut beberapa u!i Biokimia yang digunakan untuk identifikasi

bakteri antara lain:

%. 4eaksi 5ermentasi arbohidrat (6ula-gula)

5ermentasi merupakan salah satu akti3itas biokimia yang

dilakukan oleh mikroba. 5ermentasi adalah proses pengubahan senyaa

makromolekul organik men!adi senyaa yang lebih sederhana oleh

akti3itas mikrobia pada kondisi anaerob.5ermentasi dapat menghasilkan

berbagai senyaa akhir, contohnya fermentasi karbohidrat yang dapat


5/15

menghasilkan berbagai senyaa asam seperti asam laktat dan propionet,

ester-ester, keton dan gas (elcar, #$$7).

#. &!i katalase

&!i katalase merupakan suatu pengu!ian terhadap bakteri tertentu

untuk mengetahui apakah bakteri tersebut merupakan bakteri aerob,

anaerob fakultatif, atau anaerob obligat. 8an digunakan unrtuk mengetahui

kemampuan mikroorganisme untuk menguraikan hydrogen peroksida

dengan menghasilkan enim katalase. Bakteri yang memerlukan oksigen

manghasilkan hidrogen peroksida (#O#) yang sebenarnya beracun bagi

bakteri sendiri. 9amun mereka dapat tetap hidup dengan adanya

antimetabolit tersebut karena mereka menghasilkan enim katalase yang

dapat mengubah hidrogen peroksida men!adi air dan oksigen dengan

reaksi sebagai berikut :##O ##O O# (;olk dan


6/15

BAB III

METODE KER0A

3=% -k#u .+ Temp# Pelks++ P"k#ikum

ari, tanggal : Senin, > 9o3ember #$%>


7/15


8/15

Pseudomonas

aeruginosa

edia Escherich

ia coli

Staphyloc

occus

aureus

Bacillus

subtilis

Kleb.

pneumoniae

Strep α

haemolyti

cus

ac "onkey

E.coli

Kleb pneumonia

engkilat

, arna

agar

men!adi

merahkarena E.

coli

emecah

laktosa

- - engkilat,

diameter #

mm, arna

agar

men!adikemerahan,

con3eE

-

B' engkilat Suram

(bakteri

tumbuh

dalam

engkilat

, ada ona

bening

- Bentuk

irreguler,

mengkilat,

Bentuk effuse, arna agar !adi hi!au

kebiruan


9/15

media

B')

con3eE

edia amilum agar Setelah

ditetesi

iodium

tidak

ter!adi

perubaha

n

- Setelah

ditetesi

iodium,

arna

koloni

bakteri

berubah

men!adi

kuning

keemasan

- -


10/15

Skim milk agar - - Suram,

ada ona

beningkarena

bakteri

Bacillus

subtilis

bersifat

proteolitik

- -

&=' Pem>hs+

&='=% Pe">e.+ se#ip y+/ .i/u+k+

edia ac "onkey meruapakan media selektif dan diferensial

yang mempunyai keistimeaan memilah bakteri enteric gram

negatif dari campuran bakteri yang memfermentasikan laktosa,

karena dalam ac "onkey agar terdapat laktosa crystal 3iolet dan

neural red bile salt. Sehingga media ini dapat membedakan bakteriyang memfermentasi laktosa berupa koloni berarna merah muda

dan nonfermentasi laktosa koloni tidak berarna. omposisi media

ac "onkey antara lain :

%. %7 gram/C ancreatic 8igest of 6elatin

#. %$/C Cactose

+. %,>/C ancreatic 8igest of "asein

. %/C "rystal ;iolet

>. %,>/C eptic 8igest of 'nimal issue

@. >/C Sodium "hloride

7. +$ mg/C9eutral 4ed

F. %,>/C Bile Salt iEture

edia B' (Blood 'gar late)

edia agar darah disebut media uni3ersal karena dapat digunakan

untuk menumbuhkan beragam !enis bakteri. edia agar darah !uga


11/15

dapat membedakan bakteri hemolitik dan bakteri non hemolitik,

yang ditandai oleh adanya ona (halo) disekitar koloni .edia B'

(Blood 'gar late) digunakan sebagai media isolasibakteri coccus

gram positif.

edia 'milum 'gar

edia amilum agar merupakan media yang dibuat dengan bahan

padat yaitu amilum. edia ini digunakan untuk u!i hidrolisis

amilum dari bakteri yang mampu memproduksi G-amilase sehingga

mampu menguraikan amilum dengan eksoenim amilolitik. ati

yang terhidrolisis di sekeliling koloni akan membentuk areal bening. Sedangkan pati yang tidak terhidrolisis akan

memnghasilkan arana biru tua apabila ditetesi dengan yodium %

H.

edia Skim ilk 'gar

edia skim milk agar merupakan media yang terdiri dari "'

steril dan susu skim. Susu skim digunakan sebagai sumber substrat.

Susu skim merupakan susu yang mengandung protein tinggi +,7H

dan lemak $,%H. Susu skim mengandung kasein sebagai protein

susu dimana akan dipecah oleh mikroorganisme proteolitik men!adi

senyaa nitrogen terlarut sehingga pada koloni dikelilingi area

bening yang menun!ukkan mikroba tersebut memiliki akti3ita

sproteolitik.

edia skim milk mempunyai komposisi > gram kasein, #.> gram

ekstrak yeast, % gram skim milk agar, % gram glukosa, dan %$.>

gram agar.

&='=' Pe">e.+ me.i umu+ .+ me.i selek#i4

edia selektif ( selective media) adalah media formulasi untuk

menghambat pertumbuhan mikroba tertentu dan menumbuhkan

mikroba yang diinginkan. edia selektif pada dasarnya adalah

media untuk mikroba yang diinginkan ditambah faktor penghambat

untuk mikroba lain yang dapat hidup di media sama. edia selektif

bermanfaat untuk menyeleksi mikroba tertentu (khususnya galur


12/15

tertentu). 8iantara media yang digunakan dalam praktikum yang

termasuk media selektif adalah media ac "onkey.

edia umum adalah media yang digunakan untuk menumbuhkan

satu atau lebih kelompok mikroba secara umum. edia umum

mengandung at-at yang umum diperlukan oleh sebagian besar

mikrooganisme dan dipakai !uga sebagi komponen dasar untuk

membuat media pembiakan lain. 8iantara empat media yang

digunakan dalam praktikum yang termasuk media umum adalah

media B' (blood agar palte).

&='=3 Reksi y+/ #e"9.i p. se#ip me.i selek#i4

Iang termasuk media selektif dari keempat media yang digunakan

dalam praktikum ini adalah media ac "onkey. 4eaksi yang ter!adi

pada media ac "onkey adalah pemecahan laktosa. elalui reaksi

pemecahan laktosaini dapat dibedakan antara bakteri gram negatif dan

gram positif melalu reaksi pemecahan laktosa. bakteri yang

memfermentasi laktosa berupa koloni berarna merah mudasedangkan bakteri yang tidak memfermentasikan laktosa tidak

berarna.

&='=& Bk#e"i y+/ .p# .ii.e+#i4iksi .e+/+ me.i selek#i4

edia selektif pada praktikum kali iniadalh media ac "onkey.

Bakteri yang dapat diidentifikasi dengan media ac "onkey adalah

bakteri gram negatif yang mempunyai kemampuan memfermentasi

glukosa. oloni bakteri memfermentasikan laktosa berarna merah

bata dan dapat dikelilingi oleh endapan garam empedu. Jndapan ini

disebabkan oleh penguraian laktosa men!adi asam yang akan bereaksi

dengan garam empedu.Bakteri yang tidak memfermentasikan laktosa

biasanya bersifat patogen. 6olongan bakteri ini tidak memperlihatkan

perubahan pada media. Ani berarti arna koloninya sama dengan

arna media.


13/15

Beberapa contoh pertumbuhan koloni pada ac "onkey 'gar :

Salmonella dan Shigella : serupa media

Escherichia coli: merah dikelilingi ona keruh

Enterobacter dan Klebsiella : merah muda dan mukoid

Enterococcus dan Staphylococcus : kecil dan tidak terang tembus


14/15

BAB 2

PEN;T;P

)=% Kesimpul+

8ari prktikum yang dilakukan, diperoleh kesimpulan sebagai berikut :

• 'da media yang digunakan dalam identifikasi mikkrooganisme

dalam praktikum kali ini, yaitu media ac "onkey, media B',

media amilum agar, dan skim milk agar.

• 8ari keempat media yang termasuk media selektif adalah media

ac "onkey dan yang termasuk media umum adalah media B'.

)=' S"+

8ari praktikum yang dilakukan diperoleh kesimpulan berikut ini:

• &ntuk keselamatan ker!a setiap praktikan dia!ibkan untuk

mematuhi tata tertib dan tata ker!a di laboratorium mikrobiologi,

• engenalan alat dan bahan sangat berguna bagi praktikan untuk

melakukan berbagai praktikum, khususnya praktikum

mikrobiologi,

• rosedur-prosedur seperti sterilisasi merupakan prosedur yang

harus dilakukan dalam setiap praktikum mikrobiologi.


15/15

DAFTAR P;STAKA

"olome, DS. Jt al. #$$%. Laboratory Exercises in Microbiology.

Documents

laporan identifikasi mikroba A3.doc