LAPORAN RESMI PRAKTIKUM

BAKTERIOLOGI

‘‘ PEWARNAAN ZIEHL NEESLSEN DAN KINYOUN GABBET ’’

Penyusun :

Melawati firdaus (16)

ANALIS KESEHATAN

INSTITUT ILMU KESEHATAN

KEDIRI

2015

PEWARNAAN KINYOUN GABBET

Tempat Pratikum

Tempat : Laboratorium Bakteriologi

A. Prinsip :

Bakteri Tahan Asam

Bakteri yang jika diwarnai dengan carbol fuchsin dan dapat dipanaskan

sampai menguap maka lapisan lilin menjadi lunak sehingga cat dapat terikat kuat

oleh bakteri dan setelah dicuci dan dilunturkan dengan alkohol HCL 5% dapat

luntur pada saat digenangi Methylen Blue catnya tidak terserap sehingga bakteri

tetap berwarna merah.

Bakteri Tidak Tahan Asam

Bakteri jika diwarnai dengan carbon fuchsin dan dipanaskan sampai

menguap tidak menyerap dengan kuat sehingga setelah dicuci dan diberi alkohol

HCL 5% akan luntur dan pada saat digenangi Methylen Blue mampu mengikat

cat tersebut sehingga bakteri berwarna biru

B. Alat

Mikroskop

Obyek glass

Lampu spirtus

Ose bulat

Korek api

C. Bahan

Carbon fuchsin

Alkohol HCL 5%

Methylen Blue

Biakan kuman

Oil immersi

Xylol

D. Prosedur dan Skema Kerja

Prosedur :

1. Sediaan difiksasi

2. Sediaan digenangi dengan carbol fuchsin

3. Panasi sediaan sampai menguap, jangan sampai mendidih

Sediaan difiksasi

Sediaan digenangi dengan carbol fuchsin

Panasi sediaan sampai menguap, jangan sampai mendidih

Sediaan dicuci

Lunturkan dengan alkohol HCL 5% selama 30 detik

Cat dibuang dan dicuci dengan air

Sediaan digenangi dengan methylen blue selama 1-2 menit

Cuci dengan air kran dan keringkan

Setelah kering di amati dibawah mikroskop dengan obyektif 100x

4. Cat dibuang dan dicuci dengan air

5. Lunturkan dengan alkohol HCL 5% selama 30 detik

6. Sediaan dicuci

7. Sediaan digenangi dengan methylen blue selama 1-2 menit

8. Cuci dengan air kran dan keringkan

9. Setelah kering di amati dibawah mikroskop dengan obyektif 100x

Skema

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Hasil

Pewarnaan Ziehl Nielsen

- Bentuk : batang

- Warna : biru

- Susunan : menyebar

- Sifat : tidak tahan asam

B. Pembahasn

Komposisi cat fuchsin

1. Cat induk fuchsin 10 ml

Phenol peka 4 ml

Aquadest 100 ml

2. Basic fuchsin 1 gram

Alkohol 96% 10 ml

Carbolic acid Kristal 5 gram

Aquadest 100 ml

Komposisi alkohol HCL 5%

1. HCL pekat 5 ml

2. Alkohol 96% 100 ml

Komposisi leoffler methylen lue

1. Cat induk methylen blue 30 ml

2. 10% NaOH/KOH 0,1 ml

3. Aquadest 100 ml

Kuman tahan asam akan berwarna merah

Kuman tidak tahan asam akan berwarna biru

Yang termasuk bakteri tahan asam

1. Mycobacterium tuberculse

2. Mycobacterium leprae

Yang termasuk bakteri tidak tahan asam

1. Escheria colli

2. Shigella

3. Salmonella thypi

4. Kuman golongan coccus

Dalam pewrnaan ziehl nielsen perlu dipanaskan karena bakteri tahan asam

mempunyai lapisan lemak atau lilin dan jika dipanaskan lapisan lilin akan lunak

atau terbuka sehingga mudah menyerap carbol fuchsin

Pemanasan ini bertujuan untuk melunakkan lapisan lilin sehingga mudah

diwarnai, jika sampai mendidih sediaan akan rusak dan sulit diamati dibawah

mikroskop

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan

Jadi pengamatan dengan menggunakan mikroskop dengan pewarnaan Ziehl

Nielsen dihasilkan bakteri bentuk batang,warna biru,susunan menyebar, sifat tidak tahan

asam.

B. Saran

a. Menggunakan APD yang lengkap

b. Menjalankan pratikum sesuai dengan prosedur

c. Mematuhi peraturan yang ada

DAFTAR PUSTAKA

Dewa, Hendro. 2012. Pewarnaan BTA ( Bakteri Tahan Asam). [online].

http://aiiudewa.blogspot.com/2013/12/laporan-bakteri-tahan-asam.html

Fitri Nurrahmi. 2012. Pewarnaan Ziehl Neelsen. [online].

http://mediblock.blogspot.com/2012/10/pratktikum-mikrobiologi-1-

pewarnaan.html . Tanggal diakses 20 November 2013

PUSTAKALay, B. W. 1994. Analisis Mikroba di Laboratorium. Jakarta: PT. Raga

Grafindo Persada.

Runa, Fathya. 2013. Pewarnaan Bakteri Tahan Asam. [online]. http://fathya-runa.blogspot.

com/2013/01/pewarnaan-bakteri-tahan-asam-bta-metode.html

Syahrurachman, dkk. 1994. Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran Edisi Revisi. Jakarta: UI

Press.

PEWARNAAN ZIELH NEELSON

Tempat Pratikum

Tempat : Laboratorium Bakteriologi

A. Prinsip

Bakteri Tahan Asam

Bakteri yang jika diberi cat kinyoun mengikat kuat sehingga setelah di cuci

dan diberi alkohol tidak sampai luntur, dan bila diberi cat gabbet tidak menyerap

sehingga bakteri berwarna merah.

Bakteri Tidak Tahan Asam

Bakteri yang jika diberi cat kinyoun tidak menyerap dengan kuat, sehingga

setelah dicuci dan diberi alkohol akan luntur, dan saat diberi cat gabbet bakteri

tersebut mampu mengikat cat gabbet dengan kuat sehingga bakteri berwarna

biru.

B. Alat :

1) Mikroskop

2) Objek glass

3) Lampu spirtus

4) Ose bulat

5) Korek api

C. Bahan :

1. Suspensi kuman

2. Cat kinyoun

3. Cat gabbet

4. Oil immerse

5. Xylol

D. Prosedur dan Skema Kerja

Prosedur

1. Siapakan objek glass yang bersih

2. Ambil sediaan dengan menggunakan ose bulat yang telah disterilkan

3. Sebelum dan sesudah mengambil sediaan tabung diflaming dulu

4. Sediaan difiksasi

Sediaan difiksasi

Sediaan degenangi cat kinyoun selama 3 menit

Cat dibuang dan dicuci dengan air kran

Sediaan digenangi dengan cat gabbet selama 1 menit

Cat dibuang dan dicuci dengan air kran

Keringkan

Periksa dibawah mikroskop dengan pembesaran 100x

5. Sediaan degenangi cat kinyoun selama 3 menit

6. Cat dibuang dan dicucidengan air kran

7. Sediaan digenangi dengan cat gabbet selama 1 menit

8. Cat dibuang dan dicuci dengan air kran

9. Keringkan

10. Periksa dibawah mikroskop dengan pembesaran 100x

Skema

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Hasil

Pewarnaan Kinyoun Gabbet

Bentuk : batang

Warna : merah

Susunan : menyebar

Sifat : tahan asam

B. Pembahasan

Komposisi cat kinyoun

1. Fuchsin basic 4 ml

2. Phenol pekat 8 ml

3. Alkohol 96% 20 ml

4. Aquadest 300 ml

Komposisi cat gabbet

1. Methilen blue 1 gram

2. Asam sulfat pekat 200 ml

3. Alkohol 96% 30 ml

4. Aquadest 50 ml

Yang termasuk BTA positif

1. Microbacterium leprae

2. Microbacterium tubercoluse

Yang termasuk BTA negatif

1. E. Colli

2. Shigella

3. Salmonella thypi

4. Kuman golongan cocus

BTA positif hasilnya akan berwarna biru

BTA negative hasilnya akan berwarna biru

Dalam pewarnaan kinyoun gabbet tidak perlu dipanaskan karena cat

mengandung phenol pekat yang mampu membuka lapisan lilin atau lemak pada

bakteri

Macam-macam pengecatan BTA

1. Metode Ziehl Nielsen

2. Metode Kinyoun Gabbet

3. Tan Tian Hook

Tidak semua bakteri dapat atau bisa dilakukan pewarnaan karena bakteri itu

sifatnya ada yang tahan asam dan ada yang tidak tahan asam

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan

Jadi pengamatan dengan menggunakan pewarnaan kinyoun gabbet dihasilkan

bakteri bentuk batang,warna biru,susunan menyebar, sifat tidak tahan asam.

B. Saran

1) Menggunakan APD yang lengkap

2) Menjalankan pratikum sesuai dengan prosedur

3) Mematuhi peraturan yang ada

DAFTAR PUSTAKA

Lisbantul, Ana. 2012. Pewarnaa Bakteri Tahan Asam. [online].

http://analisbantul.blogspot.com/2012/09/pewarnaan- bakteri-tahan-asam.html

Dewa, Hendro. 2013. Laporan Bakteri Tahan Asam. [online].

http://aiiudewa.blogspot.com/2013/12/laporan-bakteri-tahan-asam.html

Runa, Fathya. 2013. Pewarnaan Bakteri Tahan Asam. [online]. http://fathya - runa.blogspot.

com/2013/01/pewarnaan-bakteri-tahan-asam-bta-metode.html