Konelab/T Series LIPASE (Colorimetric).pdf · Konelab™ / T Series LIPASE (Colorimetric) g hts reserved. ... Refer to the Reference Manual and Application Notes for an automated

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Konelab™ / T Series LIPASE (Colorimetric)

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INTENDED USE For the in vitro quantitative determination of the lipase concentration in human serum and human plasma on Konelab analyzers. All test results must be interpreted with regard to the clinical context.

SUMMARY (1) Lipases are enzymes which hydrolyze glycerol esters of long fatty acids. The enzyme and its cofactor colipase are produced in the pancreas, lipase being also secreted in small amounts by the salivary glands as well as by gastric, pulmonary and intestinal mucosa. Bile acids and colipase form micellar complexes with the lipids and bind lipase on the substrate / water interface. Determination of lipase is used for investigation of pancreatic disorders. In acute pancreatitis the lipase concentrations rise to 2-50 fold the upper reference limit within 4-8 hours after begin of abdominal pain peaking at 24 hours and decreasing within 8 to 14 days. Elevated lipase values can also be observed in chronic pancreatitis and obstruction of the pancreatic duct.

PRINCIPLE OF THE PROCEDURE Enzymatic color test. A synthetically produced lipase substrate (1.2-o-dilauryl-rac-glycero-3-glutaric acid-(6-methylresorufin) ester) is added to a microemulsion which is specifically split by lipase in the presence of colipase and bile acids. The combination of colipase and bile acids makes this specific and reliable for pancreatic lipase without any reaction due to lipolytic enzymes or esterases. The reagent composition has been thoroughly optimised so there are no serum matrix effects. The generated methylresorufin-ester is spontaneously degraded to methylresorufin. The absorbance by this red dye is directly proportional to the lipase activity in the sample. Lipase catalyses the reaction

1.2-o-Dilauryl-rac-glycero-3-glutaric acid(6-methylresorufin) ester < Lipase / Colipase_ >

1.2-o-Dilauryl-rac-glycerin + Glutaric acid-(6-methylresorufin)-ester

Glutaric acid-(6-methylresorufin)-ester spontaneous degradation_ >

Glutaric acid + Methylresorufin The increase in absorbance is determined photometrically

REAGENT INFORMATION Reagent A: 4 x 20 ml Reagent B: 2 x 10 ml

Concentrations of the reagents Reagent A: Goods buffer (pH 8.0) 50 mmol/l Taurodesoxycholate 4.3 mmol/l Desoxycholate 8 mmol/l Calcium chloride 15 mmol/l Colipase 2.2 mg/l Detergent, Preservative Reagent B: Tartrate Buffer (pH 4.0) 7.5 mmol/l Taurodesoxycholate 17 mmol/l Color Substrate 0.65 mmol/l Coemulgator, Stabilizer, Preservative

Precautions For in vitro diagnostic use only. Exercise the normal precautions required for handling all laboratory reagents. As many other clinical reagents contain lipase or high concentrations of detergents, avoid carry over! Special care should be taken in combination with Triglycerides, HDL, LDL and total Cholesterol reagents. Pipettes and other glassware must be cleaned thoroughly after being used for other assays.

Preparation Reagents are ready for use. Note: Check that there are no bubbles in the bottleneck or on the surface of the reagent when you insert the reagent vials or vessels in the Konelab analyzer.

Storage and Stability Reagents in unopened vials are stable at 2…8 °C until the expiration date printed on the label. Do not freeze the reagents. Once opened the reagents are stable at least for two months if contamination is avoided. Refer to the Application Notes of your Konelab analyzer for the on board stability of reagents.

SPECIMEN COLLECTION

Sample Type Serum or heparin plasma can be used.

Precautions Human samples should be handled and disposed of as if they were potentially infectious.

StorageStability: 7 days at 20…25 °C 7 days at 4…8 °C 1 year at - 20 °C

TEST PROCEDURE Refer to the Reference Manual and Application Notes for an automated procedure on your Konelab analyzer. Any application which has not been validated by Thermo Fisher Scientific Oy cannot be performance guaranteed and therefore must be evaluated by the user.

Materials provided Reagents as described above.

Materials required but not provided THIS PACKAGE INSERT IS APPLICABLE FOR USE OUTSIDE THE US. ANY REFERENCE TO THE KONELAB SYSTEMS ALSO REFERS TO THE T SERIES.

Calibrator and controls as indicated below. Washing liquid to eliminate risks of cross-contamination, e.g. WashFluid, code 981842.

Calibration Use eCal, code 981830 according to the instructions given to your Konelab analyzer.

Traceability: Refer to the package insert of eCal.

Quality Control Use quality control samples at least once a day and after each calibration and every time a new bottle of reagent is used. Available controls: Nortrol, code 981043 Abtrol, code 981044 The control intervals and limits must be adapted to the individual laboratory requirements. The results of the quality control samples should fall within the limits pre-set by the laboratory.

CALCULATION OF RESULTS The results are calculated automatically by the Konelab analyzer using a calibration curve.

Calibration Curve (example)

Lipase

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Activity (U/l)

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Konelab 20/30/60. The calibration curve is lot dependent.

LIMITATIONS OF THE PROCEDURE

Interference Criterion: Recovery within ± 10 % of initial values. Bilirubin: No interference found up to 1000 µmol/l (60 mg/dl). Hemoglobin: No interference found up to 5 g/l of hemoglobin. Lipemia: No interference found up to 6.9 mmol/l (600 mg/dl) of triglycerides. Ascorbic acid: No interference found up to 1700 µmol/l (30 mg/dl) of ascorbic acid. For Lipase assay Konelab sw version 6.6 or later is highly recommended. If sw version earlier than 6.6 is used, please, ask for special instructions for washing.

EXPECTED VALUES (7) Serum and plasma: ≤ 60 U/l The quoted values should serve as a guide only. It is recommended that each laboratory verify this range or derives a reference interval for the population that it serves.

MEASURING RANGE 16 - 200 U/l Extended measuring range after secondary dilution: 16 - 1000 U/l.

PERFORMANCE CHARACTERISTICS The results obtained in individual laboratories may differ from the given performance data.

Detection limit 8 U/l The detection limit represents the lowest measurable concentration/activity that can be distinguished from zero. It is calculated as the concentration of zero sample + 3 SD (within run, n=20).

Imprecision (result unit U/l) Mean

36.7 Mean 54.0

SD CV% SD CV% Within run 0.8 2.2 1.1 2.0 Between day 2.1 5.7 3.2 6.0 Total 2.5 6.8 3.8 7.0

A precision study was performed using the NCCLS Document EP5-A as a guideline and Konelab 30 during 10 days, with the number of measurements being n = 40.


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Method comparison A comparison study was performed using commercially available lipase method as a reference. Linear regression (result unit U/l): y = 1.09 x - 7.8 r = 0.996 n = 101

LITERATURE 1. Lorentz K. Lipase. In: Thomas L, editor. Clinical laboratory diagnostics. 1st ed.

Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998. p. 95-7. 2. Tietz N, Shuey DF. Lipase in serum - the elusive enzyme: an overview. Clin Chem

1993;39:746-56. 3. Lott J, Patel ST, Sawhney AK, Kazmierczak SC, Love JE. Assays of serum lipase:

analytical and clinical considerations. Clin Chem 1986;32:1290-1302. 4. Leybold A, Junge W. Importance of colipase for the measurement of serum lipase

activity. Adv Clin Enzymol 1986;4:60-7. 5. Borgström B. The action of bile salts and other detergents on pancreatic lipase and

the interaction with colipase. Biochimica et Biophysika Acta 1977;488:381-91. 6. Gargouri Y, Julien R, Bois A, Verger R, Sarda L. Studies on the detergent inhibition

of pancreatic lipase activity. J of Lipid Research 1983;24:1336-42. 7. Junge W, Abicht K, Goldman J. Evaluation of the colorimetric liquid assay for

pancreatic lipase on Hitachi analyzers in 7 clinical centres in Europe. Clin Chem Lab Med 1999;37, Special suppl:469.

MANUFACTURER Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Date of revision (yyyy-mm-dd) 2008-09-24

Changes from previous version

PERFORMANCE CHARACTERISTICS: The results obtained in individual laboratories may differ from the given performance data.

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Konelab™ / T Series LIPASE (Colorimetric) 981846 4 x 20 ml + 2 x 10 ml

ANWENDUNGSBEREICH Zur quantitativen In-vitro-Bestimmung der Lipasekonzentration in Humanserum und Humanplasma mit Konelab-Analysengeräten. Alle Testergebnisse müssen mit Bezug zum klinischen Zusammenhang interpretiert werden.

ZUSAMMENFASSUNG (1) Lipasen sind Enzyme, die Glycerinester langer Fettsäuren hydrolysieren. Das Enzym und sein Cofaktor Colipase werden im Pankreas produziert, Lipase wird auch in kleinen Mengen von den Speicheldrüsen sowie von Magen-, Lungen- und Darmschleimhaut ausgeschieden. Gallensäuren und Colipase bilden micellare Komplexe mit den Lipiden und binden Lipase an der Substrat/Wasser-Grenzfläche. Die Bestimmung der Lipase erfolgt zur Diagnose von Pankreaserkrankungen. Bei akuter Pankreatitis steigen die Lipase-Konzentrationen innerhalb von 4-8 h nach Beginn der Bauchschmerzen auf das 2-50-fache der Obergrenze des Referenzbereichs, erreichen das Maximum nach 24 h und fallen innerhalb von 8-14 Tagen wieder ab. Erhöhte Lipase-Werte können auch bei chronischer Pankreatitis und bei Pankreasgangverschluss beobachtet werden.

TESTPRINZIP Enzymatischer Farbtest Ein synthetisch hergestelltes Lipasesubstrat (1.2-o-Dilauryl-rac-glycero-3-glutarsäure-(6-methylresorufin)-ester) wird einer Mikroemulsion zugesetzt, die spezifisch durch Lipase in Gegenwart von Colipase und Gallensäuren gespalten wird. Die Kombination von Colipase und Gallensäuren stellt die spezifische Erfassung von Pankreaslipase sicher, ohne dass lipolytische Enzyme oder Esterasen reagieren. Durch die sorgfältig optimierte Reagenzien-zusammensetzung werden Serummatrix-Einflüsse vermieden. Der entstehende Methylresorufinester zerfällt spontan zu Methylresorufin. Die Extinktionsänderung durch diesen roten Farbstoff ist direkt proportional zur Lipaseaktivität in der Probe. Lipase katalysiert folgende Reaktion:

1.2-O-Dilauryl-rac-glycero-3-glutarsäure-(6-methylresorufin)-ester < Lipase /Colipase >

1.2-o-Dilauryl-rac-glycerin + Glutarsäure-(6-methylresorufin)-ester

Glutarsäure-(6-methylresorufin)-ester Spontaner Zerfall >

Glutarsäure + Methylresorufin Der Extinktionsanstieg wird photometrisch gemessen.

REAGENZDATEN Reagenz A: 4 x 20 ml Reagenz B: 2 x 10 ml

Konzentrationen der Reagenzien Reagenz A: Goods Puffer (ph 8.0) 50 mmol/l Taurodesoxycholat 4.3 mmol/l Desoxycholat 8 mmol/l Calciumchlorid 15 mmol/l Colipase 2.2 mg/l Detergenz, Konservierungsmittel Reagenz B: Tartrat-Puffer (pH 4.0) 7.5 mmol/l Taurodesoxycholat 17 mmol/l Farbsubstrat 0.65 mmol/l Coemulgator, Stabilisator, Konservierungsmittel

Sicherheitsmaßnahmen Nur zur In-vitro-Diagnose. Befolgen Sie die üblichen Sicherheitsmaßnahmen beim Umgang mit Laborreagenzien. Viele andere klinisch-chemische Reagenzien enthalten Lipase oder hohe Konzentrationen an Detergenzien. Kontaminationen und Verschleppungen sind zu vermeiden, im Besonderen bei Triglycerid-, HDL-, LDL- und Gesamtcholesterin-Reagenzien. Küvetten und andere Glasgeräte müssen sorgfältig gespült werden, wenn sie vorher für andere Tests verwendet wurden.

Vorbereitung Die Reagenzien sind gebrauchsfertig. Hinweis: Achten Sie darauf, dass sich im Flaschenhals oder auf der Reagenzoberfläche keine Luftblasen befinden, wenn Sie die Fläschchen in das Konelab-Analysengerät einsetzen.

Lagerung und Haltbarkeit Die ungeöffneten Reagenzien sind bei 2...8 °C bis zum Ablauf des auf dem Etikett angegebenen Verfallsdatums haltbar. Reagenzien nicht einfrieren! Nach dem Öffnen sind die Reagenzien mindestens 2 Monate haltbar, wenn Kontaminationen vermieden werden. Die Haltbarkeit der Reagenzien nach dem Einsetzen in das Konelab-Analysengerät ist in den entsprechenden Applikationshinweisen enthalten.

UNTERSUCHUNGSMATERIAL

Probenart Es kann Serum oder Heparin-Plasma verwendet werden.

Sicherheitsmaßnahmen Proben, die Humanserum enthalten, sind als potenziell infektiös zu betrachten und dementsprechend zu behandeln und zu entsorgen.

LagerungHaltbarkeit: 7 Tage bei 20…25 °C

7 Tage bei 4…8 °C 1 Jahr bei - 20 °C

TESTDURCHFÜHRUNG Angaben zur Automatisierung mit dem Konelab-Analysengerät entnehmen Sie bitte dem Bedienungshandbuch und den Applikationshinweisen. Bei Verwendung von Applikationen, die nicht durch Thermo Fisher Scientific Oy validiert wurden, kann keine Garantie für die angegebenen Leistungsdaten übernommen werden. Für die Validation derartiger Applikationen ist daher der Anwender selbst verantwortlich.

Lieferumfang Reagenzien wie oben beschrieben.

Erforderliches, jedoch nicht im Lieferumfang enthaltenes Material Kalibrator und Kontrollen wie nachstehend angegeben. Waschflüssigkeit, um das Risiko einer Verschleppung auszuschließen, z.B. WashFluid, Bestellnr. 981842

DIESE PACKUNGSBEILAGE IST FÜR DEN GEBRAUCH AUSSERHALB DER USA VORGESEHEN. JEDER VERWEIS AUF KONELAB-SYSTEME BEINHALTET AUCH DIE T SERIES.

Kalibrierung Verwenden Sie den eCal, Bestellnr. 981830, gemäß den Anweisungen zum Konelab-Analysengerät.

Rückverfolgbarkeit: Siehe Packungsbeilage von eCal.

Qualitätskontrolle Mindestens einmal täglich sowie nach jeder Kalibrierung und bei jeder Verwendung eines neuen Reagenzfläschchens eine Qualitätskontrolle durchführen. Lieferbare Kontrollen: Nortrol, Bestellnr. 981043 Abtrol, Bestellnr. 981044 Die Kontrollintervalle und -grenzen müssen den Erfordernissen des Labors angepasst werden. Die Ergebnisse der Qualitätskontrollen müssen innerhalb der vom Labor vorgegebenen Grenzwerte liegen.

BERECHNUNG DER ERGEBNISSE Die Ergebnisse werden vom Konelab-Analysengerät automatisch mithilfe einer Bezugskurve errechnet.


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Bezugskurve (Beispiel)

Konelab 20/30/60. Die Bezugskurve ist chargenabhängig.

GRENZEN DES VERFAHRENS

Störfaktoren Kriterium: Wiederfindung innerhalb von ± 10% der Ausgangswerte. Bilirubin: Keine Interferenzen bis zu 1000 µmol/l (60 mg/dl). Hämoglobin: Keine Interferenzen bei Zugabe von Hämoglobin bis zu 5 g/l. Lipämie: Keine Interferenzen bei Zugabe von Triglyceriden bis zu 6.9 mmol/l (600 mg/dl). Ascorbinsäure: Keine Interferenzen bei Zugabe von Ascorbinsäure bis zu 1700 µmol/l (30 mg/dl). Für den Lipase-Test wird nachdrücklich die Konelab-Softwareversion 6.6 oder höher empfohlen. Falls Sie eine frühere Version als 6.6 verwenden, erkundigen Sie sich bitte nach speziellen Anweisungen für das Waschen.

REFERENZBEREICHE (7) S Plasmaerum und : ≤ 60 U/l Die angegebenen Werte dienen nur als Richtwerte. Es wird empfohlen, dass jedes Labor diesen Bereich überprüft oder einen Referenzbereich für die eigene Patientengruppe ermittelt.

MESSBEREICH 16 - 200 U/l

essbereich nach automatischer Verdünnung: Erweiterter M16 - 1000 U/l

LEISTUNGSEIGENSCHAFTEN Die Ergebnisse einzelner Laboratorien können von den angegebenen Leistungsdaten abweichen.

Nachweisgrenze 8 U/l. Die Nachweisgrenze stellt die unterste messbare Konzentration/Aktivität dar, die von null unterschieden werden kann. Sie wird als Konzentration der Nullprobe + 3 SD (in der Serie, n = 20) berechnet.

Impräzision (Ergebnisse in U/ll) Mi rt ttelwe

36.7 Mi rt ttelwe

54.0 SD CV% SD CV% In der Serie 0.8 2.2 1.1 2.0 Von Tag zu Tag 2.1 5.7 3.2 6.0 Total 2.5 6.8 3.8 7.0

Es wurde 10 Tage lang eine Reliabilitätsstudie gemäß NCCLS-Richtlinie EP5-A mit dem Analysengerät Konelab 30 durchgeführt (n = 40).

Vergleich der Methoden Es wurde eine Vergleichsstudie mit einem im Handel erhältlichen Lipasetest als Referenz durchgeführt.

ineare Re nisse in U/l): L gression (Ergeb - 7.8 y = 1.09 x

r = 0.996 n = 101

LITERATUR 1. Lorentz K. Lipase. In: Thomas L, editor. Clinical laboratory diagnostics. 1st ed.








HERSTELLER Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Tel.: +358 9 329 100, Fax: +358 9 3291 0300

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Datum der Überarbeitung (JJJJ-MM-TT) 2008-09-24

Änderungen gegenüber der vorherigen Fassung

LEISTUNGSEIGENSCHAFTEN: Die Ergebnisse einzelner Laboratorien können von den angegebenen Leistungsdaten abweichen.

FR

Konelab™ / Gamme T LIPASE (Colorimetric) LIPASE (colorimétrique)

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CETTE NOTICE EST VALABLE POUR UTILISATION EN DEHORS DES ÉTATS-UNIS. TOUTE RÉFÉRENCE AUX SYSTÈMES KONELAB FAIT ÉGALEMENT RÉFÉRENCE À LA GAMME T.

UTILISATION Pour la détermination quantitative in vitro de la concentration en lipase dans le sérum ou le plasma humains au moyen des analyseurs Konelab. Tous les résultats de tests doivent être interprétés en tenant compte du contexte clinique.

RÉSUMÉ (1) Les lipases sont des enzymes qui hydrolysent les esters de glycérol et d’acides gras à longue chaîne. Cette enzyme et son cofacteur, la colipase, sont produites par le pancréas ; la lipase est également sécrétée en faibles quantités par les glandes salivaires, ainsi que par les muqueuses gastrique, pulmonaire et intestinale. Les acides biliaires et la colipase forment des complexes micellaires avec les lipides et lient la lipase à l’interface substrat/eau. Le dosage de la lipase s’utilise pour le diagnostic des troubles pancréatiques. Lors de pancréatite aiguë, les concentrations en lipase atteignent 2 à 50 fois la limite supérieure de l’intervalle de référence dans un délai de 4 à 8 heures après l’apparition de la douleur abdominale, atteint un maximum après 24 heures et diminue ensuite en 8 à 14 jours. On observe également une élévation de la lipase lors de pancréatite chronique et d’obstruction du canal de Wirsung.

PRINCIPE DE LA PROCEDURE Test enzymatique colorimétrique. On ajoute un substrat synthétique de la lipase (6-méthylrésorufine-ester de l’acide 1.2-o-dilauryl-rac-glycéro-3-glutarique) à une microémulsion spécifiquement clivée par la lipase en présence de colipase et d’acides biliaires. L’association de colipase et d’acides biliaires rend ce test spécifique et fiable pour la lipase pancréatique sans aucune réaction due à des enzymes lipolytiques ou à des estérases. La composition du réactif a été soigneusement optimisée de manière à éviter tout effet de matrice du sérum. Le méthylrésorufine-ester généré est spontanément dégradé en méthylrésorufine. L’absorbance due à ce colorant rouge est directement proportionnelle à l’activité de la lipase dans l’échantillon. La lipase catalyse la réaction

6-méthylrésorufine-ester d’acide 1.2-o-dilauryl-rac-glycéro-3-glutarique < lipase / colipase>

1.2-o-dilauryl-rac-glycérine + 6-méthylrésorufine-ester d’acide glutarique

6-méthylrésorufine-ester d’acide glutarique dégradation spontanée _ >

Acide glutarique + méthylrésorufine L’augmentation de l'absorbance est déterminée par photométrie.

INFORMATIONS SUR LES REACTIFS Réactif A : 4 x 20 ml Réactif B : 2 x 10 ml

Concentrations des réactifs Réactif A : Tampon de Goods (pH 8.0) 50 mmol/l Taurodésoxycholate 4.3 mmol/l Désoxycholate 8 mmol/l Chlorure de calcium 15 mmol/l Colipase 2.2 mg/l Détergent, conservateur Réactif B : Tampon tartrate (pH 4.0) 7.5 mmol/l Taurodésoxycholate 17 mmol/l Substrat coloré 0.65 mmol/l Coémulsifiant, stabilisateur, conservateur

Précautions Usage diagnostique in vitro uniquement. Respecter les précautions habituelles requises lors de la manipulation de tout réactif de laboratoire. Comme un grand nombre d’autres réactifs cliniques contiennent de la lipase ou de fortes concentrations de détergents, éviter toute contamination ! Prendre des précautions toutes particulières lors de l’utilisation simultanée de réactifs Triglycérides, Cholestérol HDL, Cholestérol LDL et Cholestérol total. Les pipettes et la vaisselle utilisés doivent être soigneusement nettoyés après avoir été utilisés pour d’autres tests.


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Préparation Les réactifs sont prêts à l’emploi. Remarque : S’assurer de l’absence de bulles au niveau du goulot du flacon ou à la surface du réactif lors de la mise en place des flacons ou récipients de réactifs dans l’analyseur Konelab.

Conservation et stabilité Les réactifs contenus dans les flacons scellés sont stables à 2…8 °C jusqu’à la date de péremption figurant sur l’étiquette. Ne pas congeler les réactifs. Après ouverture, les réactifs sont stables pendant au moins deux mois si l’on évite toute contamination. Se référer à la fiche d’application de l’analyseur Konelab en ce qui concerne la stabilité des réactifs dans l’appareil.

PRELEVEMENT DES ECHANTILLONS

Type d’échantillon On peut utiliser des échantillons de sérum ou de plasma hépariné.

Précautions Les échantillons d’origine humaine doivent être manipulés et éliminés comme des matériaux potentiellement infectieux.

StockageStabilité : 7 jours à 20…25 °C 7 jours à 4…8 °C 1 an à -20 °C

PROCEDURE DE TEST Se référer au manuel de référence et à la fiche d’application pour une description de la procédure automatisée sur l’analyseur Konelab. Toute application n’ayant pas été validée par Thermo Fisher Scientific Oy ne peut pas être garantie en ce qui concerne ses performances et doit par conséquent être évaluée par l’utilisateur.

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Matériel fourni Réactifs comme décrits ci-dessus.

Matériel requis mais non fourni Calibrateur et contrôles comme indiqué ci-dessous. Liquide de lavage pour éliminer le risque de contamination, croisée, par exemple WashFluid, code 981842.

Calibration Utiliser le calibrateur eCal, code 981830, conformément aux instructions correspondant à votre modèle d’analyseur Konelab.

Traçabilité : Se référer à la notice du calibrateur eCal.

Contrôle de qualité Utiliser les échantillons de contrôle de qualité au moins une fois par jour, après chaque calibrage et chaque fois que l’on entame un nouveau flacon de réactif. Contrôles disponibles : Nortrol, code 981043 Abtrol, code 981044 Les intervalles et les limites de contrôle doivent être adaptés aux besoins de chaque laboratoire. Les résultats des échantillons de contrôle de qualité doivent se situer dans la plage de tolérance prédéfinie par le laboratoire.

CALCUL DES RESULTATS Les résultats sont calculés automatiquement par l’analyseur Konelab à l’aide d’une courbe de calibrage.

Courbe de calibrage (exemple)

Konelab 20/30/60. La courbe de calibrage dépend du lot.

LIMITES DE LA PROCEDURE

Interférence Critère : Récupération se situant dans les limites de ± 10 % des valeurs initiales. Bilirubine : Aucune interférence observée jusqu’à 1000 µmol/l (60 mg/dl). Hémoglobine : Aucune interférence observée jusqu’à 5 g/l d’hémoglobine. Lipémie : Aucune interférence observée jusqu’à 6.9 mmol/l (600 mg/dl) de triglycérides. Acide ascorbique : Aucune interférence observée jusqu’à 1700 µmol/l (30 mg/dl) d’acide ascorbique. Pour le dosage de la lipase, le logiciel Konelab version 6.6 ou ultérieure est fortement recommandé. Si l’on utilise une version du logiciel antérieure à 6.6, demander des instructions particulières concernant le lavage.

VALEURS ATTENDUES (7) Sérum et plasma : ≤ 60 U/l Les valeurs citées sont données à titre indicatif uniquement. Il est recommandé que chaque laboratoire établisse les valeurs physiologiques pour la population qui constitue sa clientèle.

DOMAINE DE MESURE 16 - 200 U/l Domaine de mesure étendu après dilution secondaire : 16 - 1000 U/l.

CARACTERISTIQUES EN MATIERE DE PERFORMANCES Les résultats obtenus dans chaque laboratoire peuvent différer des données de performances indiquées.

Limite de détection 8 U/l La limite de détection représente la plus faible concentration/activité mesurable qu’il est possible de distinguer de zéro. Elle est calculée comme la concentration d’un échantillon zéro + 3 ET (répétabilité, n=20).

Imprécision (unité du résultat : U/l) Moyenne

36.7 Moyenne

54.0 ET CV % ET CV % Répétabilité 0.8 2.2 1.1 2.0 Reproductibilité 2.1 5.7 3.2 6.0 Total 2.5 6.8 3.8 7.0

L’étude de précision a eu lieu conformément aux directives du document NCCLS EP5-A et sur un analyseur Konelab 30 pendant 10 jours, le nombre de mesures étant de n = 40.

Comparaison de méthodes Une étude de comparaison a été réalisée en utilisant comme référence une méthode commerciale de dosage de la lipase. Régression linéaire (unités du résultat : U/l) : y = 1.09 x - 7.8 r = 0.996 n = 101

BIBLIOGRAPHIE 1. Lorentz K. Lipase. In: Thomas L, editor. Clinical laboratory diagnostics. 1st ed.








FABRICANT Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FIN-01621 Vantaa Tél. +358 9 329 100, télécopie +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Date de révision (aaaa-mm-jj) 2008-09-24

Modifications par rapport à la version précédente

CARACTÉRISTIQUES EN MATIÈRE DE PERFORMANCES: Les résultats obtenus dans chaque laboratoire peuvent différer des données de performances indiquées.

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Konelab™ / Série T LIPASE (Colorimetric)

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LIPÁZA (kolorimetricky)

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URČENÉ POUŽITÍ Pro kvantitativní stanovení koncentrace lipázy in vitro v lidském séru a plazmě na analyzátorech Konelab. Všechny výsledky testů musejí být interpretovány s ohledem na klinický kontext.

SHRNUTÍ (1) Lipázy jsou enzymy, které hydrolyzují glycerolestery mastných kyselin s dlouhým řetězcem. Enzym a jeho kofaktor kolipáza je produkován v pankreatu. Lipáza je též v malém množství vylučována slinnými žlázami, sliznicí gastrointestinální soustavy a sliznicí plic. Žlučové kyseliny a kolipáza tvoří micelární komplexy s lipidy a váží lipázu na rozhranní substrát/voda. Stanovení lipázy se používá pro vyšetření poruch pankreatu. U akutní pankreatitidy se koncentrace lipázy zvyšuje během 4 až 8 hodin po začátku abdominální bolesti na dvou až padesátinásobek horního referenčního limitu; maxima dosahuje po 24 hodinách a snižuje se během 8 až 14 dnů. Zvýšené hodnoty lipázy lze též zjistit u chronické pankreatitidy a obstrukce pankreatického vývodu.

PRINCIP POSTUPU Enzymatický barevný test Synteticky produkovaný substrát lipázy (6-methylresorufin ester kyseliny 1.2-o-dilauryl-rac-glycerol-3-glutarové) je přidán do mikroemulze, která je lipázou specificky štěpena za přítomnosti kolipázy a žlučových kyselin. Přítomnost kolipázy a žlučových kyselin zajišťuje přesnost a spolehlivost stanovení pankraetické lipázy, přičemž nevzniká žádná reakce v důsledku lipolytických enzymů nebo esteráz. Složení reagencií bylo dokonale optimalizováno tak, že nedochází k matrix efektu séra. Vytvořený methylresorufin ester se spontánně rozkládá na methylresorufin. Absorbance tohoto červeného barviva je přímo úměrná aktivitě lipázy ve vzorku. Lipáza katalyzuje reakci

6-methylresorufin ester kyseliny 1.2-o-dilauryl-rac-glycerol-3-glutarové < Lipáza / kolipáza >

1.2-o-dilauryl-rac-glycerin + 6-methylresorufin ester kyseliny glutarové

6-methylresorufin ester kyseliny glutarové spontánní rozklad_ >

Kyselina glutarová + Methylresorufin Zvýšení absorbance je stanoveno fotometricky.

INFORMACE O REAGENCIÍCH Reagens A: 4 x 20 ml Reagens B: 2 x 10 ml

Koncentrace reagencií Reagens A: Pufr (Good) (pH 8.0) 50 mmol/l Taurodeoxycholát 4.3 mmol/l Deoxycholát 8 mmol/l Chlorid vápenatý 15 mmol/l Kolipáza 2.2 mg/l Detergent, konzervační prostředek Reagens B: Vinanový pufr (pH 4.0) 7.5 mmol/l Taurodeoxycholát 17 mmol/l Barevný substrát 0.65 mmol/l Koemulgátor, stabilizátor, konzervační prostředek

Zvláštní opatření Určeno pouze pro diagnostické použití in vitro. Používejte běžná bezpečnostní opatření vyžadovaná pro manipulaci se všemi laboratorními reagencii. Vzhledem k tomu, že mnoho dalších klinických reagencií obsahuje lipázu nebo vysoké koncentrace detergentů, zabraňte přenosové chybě („carry over“)! Zvláštní péči je nutné věnovat měřením, při nichž jsou též použita reagencia pro stanovení triglyceridů, cholesterolu HDL, LDL a celkového cholesterolu. Pipety a další laboratorní sklo musejí být před dalším použitím pečlivě umyty.

Příprava Reagencia jsou připravená k použití. Poznámka: Překontrolujte, zda při vkládání lahviček nebo nádob s reagencii do analyzátoru Konelab nejsou v hrdle lahvičky nebo na povrchu reagens bubliny.

Uchovávání a stabilita Reagencia v neotevřených lahvičkách jsou stabilní při teplotě 2…8 °C, a to do data ukončení použitelnosti vytištěného na štítku. Reagencia nezmrazujte. Je-li zabráněno kontaminaci, jsou reagencia po otevření stabilní nejméně po dobu dvou měsíců. Údaje o stabilitě reagencií „on-board“ naleznete v aplikačních poznámkách svého analyzátoru Konelab.

ODBĚR VZORKŮ

Typ vzorků Lze použít sérum nebo heparinizovanou plazmu.

Zvláštní opatření S lidskými vzorky je nutné nakládat a likvidovat je, jako by byly potenciálně infekční.

Uchovávání

Stabilita 7 dní při 20…25 °C 7 dní při 4…8 °C 1 rok při - 20 °C

POSTUP TESTU Údaje o automatizovaném postupu práce na analyzátoru Konelab naleznete v Referenčním manuálu a aplikačních poznámkách. Nelze zaručit provedení žádné aplikace, která nebyla validována společnosti Thermo Fisher Scientific Oy . Taková aplikace proto musí být hodnocena uživatelem.

Dodané materiály Reagencia uvedená výše.

Požadované, avšak nedodávané materiály Kalibrátor a kontrolní materiály uvedené dále. Promývací tekutina, jež zabrání riziku křížové kontaminace, např. WashFluid, kód 981842

Kalibrace Používejte kalibrátor eCal, kód 981830 podle návodu, který vám byl dodán s analyzátorem Konelab.

Sledovatelnost: Viz příbalový leták kalibrátoru eCal.

Řízení jakosti Používejte vzorky pro řízení jakosti alespoň jednou denně, po každé kalibraci a vždy, když použijete novou lahvičku reagens. Dostupné kontrolní materiály: Nortrol, kód 981043 Abtrol, kód 981044 Intervaly a limitní hodnoty kontrolních materiálů musejí být upraveny podle požadavků jednotlivých laboratoří. Výsledky vzorků pro řízení jakosti by měly vyhovovat limitním hodnotám přednastaveným laboratoří.

VÝPOČET VÝSLEDKŮ Výsledky jsou automaticky vypočteny analyzátorem Konelab pomocí kalibrační křivky.

Kalibrační křivka (příklad)

Konelab 20/30/60. Kalibrační křivka je závislá na konkrétní šarži.

OMEZENÍ POSTUPU

Interference Kritérium: Recovery v rozpětí ± 10 % počátečních hodnot. Bilirubin: Až do 1 000 µmol/l (60 mg/dl) nebyla zjištěna interference. Hemoglobin: Až do 5 g/l hemoglobinu nebyla zjištěna interference. Lipémie: Až do 6.9 mmol/l (600 mg/dl) triglyceridů nebyla zjištěna interference. Kyselina askorbová: Až do 1 700 µmol/l (30 mg/dl) kyseliny askorbové nebyla zjištěna interference. Pro vzorek lipázy se důrazně doporučuje použití softwaru verze 6.6 nebo vyšší. Pokud použijte verzi softwaru nižší než 6.6, vyžádejte si zvláštní pokyny pro mytí.

PŘEDPOKLÁDANÉ HODNOTY (7) Sérum a plazma: ≤ 60 U/l Uvedené hodnoty by měly sloužit pouze jako vodítko. Doporučuje se, aby každá laboratoř toto rozpětí ověřila nebo odvodila referenční interval pro populaci, jíž poskytuje služby.

ROZPĚTÍ MĚŘENÍ 16 - 200 U/l Rozšířené rozpětí měření po sekundárním ředění: 16 - 1000 U/l.

CHARAKTERISTIKY ÚČINNOSTI Výsledky získané v jednotlivých laboratořích se mohou od uvedených dat účinnosti lišit.

Limitní hodnota detekce 8 U/l Limitní hodnota detekce představuje nejnižší měřitelnou koncentraci/aktivitu, kterou lze odlišit od nulové hodnoty. Vypočítává se jako koncentrace nulového vzorku + 3 SD (v rámci série, n = 20).

Lipáza

0

0,01

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0,03

0,04

0,05

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0 20 40 60 80 100

Aktivita (U/l)

Ode

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TENTO PŘÍBALOVÁ INFORMACE JE URČENA PRO POUŽITÍ MIMO ÚZEMÍ USA. KAŽDÁ ZMÍNKA O SYSTÉMECH KONELAB SE ROVNĚŽ TÝKÁ SÉRIE T.


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Nepřesnost (výsledky v jednotkách U/l) Střední hodnota

36.7 Střední hodnota

54.0 SD % CV SD % CV V rámci série 0.8 2.2 1.1 2.0 Mezi dny 2.1 5.7 3.2 6.0 Celkem 2.5 6.8 3.8 7.0

ghts

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Byla provedena studie přesnosti podle pokynů v dokumentu NCCLS EP5-A pomocí analyzátoru Konelab 30 trvající 10 dní, v níž byl počet měření n = 40.

Srovnání metod Byla provedena komparativní studie, při níž byla jako referenční metoda použita komerčně dostupná metoda pro stanovení lipázy. Lineární regrese (jednotky výsledku U/l): y = 1.09 x - 7.8 r = 0.996 n = 101

SEZNAM LITERATURY 1. Lorentz K. Lipase. In: Thomas L, editor. Clinical laboratory diagnostics. 1st ed.








VÝROBCE Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O.Box 100, FI-01621 Vantaa Tel.: +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Datum revize (rrrr-mm-dd) 2008-09-24 Změny oproti předchozí verzi

CHARAKTERISTIKY ÚČINNOSTI: Výsledky získané v jednotlivých laboratořích se mohou od uvedených dat účinnosti lišit.

EL

Konelab™ / Σειρά T LIPASE (Colorimetric) ΛΙΠΑΣΗ (Χρωματομετρική)

981846 4 x 20 ml + 2 x 10 ml

ΠΡΟΟΡΙΖΟΜΕΝΗ ΧΡΗΣΗ Για τον in vitro ποσοτικό προσδιορισμό της συγκέντρωσης της λιπάσης σε ανθρώπινο ορό ή πλάσμα χρησιμοποιώντας αναλυτές Konelab. Όλα τα αποτελέσματα της εξέτασης πρέπει να ερμηνεύονται σε σχέση με τις κλινικές συνθήκες.

ΠΕΡΙΛΗΨΗ (1) Οι λιπάσες είναι ένζυμα που υδρολύουν τους εστέρες γλυκερόλης των μακρών λιπαρών οξέων. Το ένζυμο και το συνένζυμό του συνλιπάση παράγονται στο πάγκρεας, και η λιπάση εκκρίνεται επίσης σε μικρές ποσότητες από τους σιελογόνους αδένες καθώς επίσης και από το γαστρικό πνευμονικό και εντερικό επιθήλιο. Τα χολικά οξέα και η συνλιπάση σχηματίζουν σύμπλοκα με τα λίπη και δεσμεύουν τη λιπάση στο υπόστρωμα/ υδατοδιαλυτή επιφάνεια. Ο υπολογισμός της λιπάσης χρησιμοποιείται για διερεύνηση των παγκρεατικών διαταραχών. Σε οξεία παγκρεατίτιδα οι συγκεντρώσεις λιπάσης αυξάνονται 2-50 φορές ως προς το ανώτερο φυσιολογικό όριο αναφοράς μετά την κορύφωση του κοιλιακού άλγους στις 24 ώρες και μειώνονται σε 8 με 14 μέρες. Αυξημένες τιμές λιπάσης μπορεί επίσης να παρατηρηθούν σε χρόνια παγκρεατίτιδα και απόφραξη του παγκρεατικού πόρου.

ΑΡΧΗ ΤΗΣ ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑΣ Ενζυματική χρωματική εξέταση. Ένα συνθετικά παραγόμενο υπόστρωμα λιπάσης (1.2-ο-διλαυρυλο-ρακ-γλύκερο-3γλουταρικό οξύ-(6 μεθυλορεσορουφίνη) εστέρας) προστίθεται στο μικροαμάγαλμα, το οποίο διαλύεται ειδικά από τη λιπάση παρουσία και λιπάσης και χολικών οξέων. Ο συνδυασμός της συνλιπάσης και των χολικών οξέων την καθιστά ειδική και αξιόπιστη για την παγκρεατική λιπάση χωρίς αντίδραση εξαιτίας λιπολυτικών ενζύμων ή εστερασών. Η σύνθεση των αντιδραστηρίων έχει βελτιστοποιηθεί ώστε να μην υπάρξουν επιδράσεις ορού μητρικής ουσίας. Ο παραγόμενος μεθυλορεσορουφικός εστέρας μετατρέπεται αυτόματα σε μεθυλορεσορουφίνη. Η απορροφητικότητα αυτού της ερυθράς χρωστικής είναι άμεσα ανάλογη στη δραστηριότητα της λιπάσης στο δείγμα.

Η λιπάση καταλύει την αντίδραση

1.2-ο-διλαυρυλο-ρακ-γλυκερο-3-γλουταρικό οξύ (6-μεθυλορεσορουφίνη) εστέρας < Λιπάση / Συνλιπάση_ >

1.2-ο-διλαυρυλο-ρακ-γλυκερίνη + 3Γλουταρικό οξύ (6-μεθυλορεσορουφίνη) εστέρας

Γλουταρικό οξύ-(6-μεθυλορεσορουφίνη)-εστέρας αυτόματη μετατροπή_ >

Γλουταρικό οξύ + Μεθυλορεσορουφίνη Η αύξηση στην απορρόφηση καθορίζεται φωτομετρικά

ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΑΝΤΙΔΡΑΣΤΗΡΙΩΝ Αντιδραστήριο Α: 4 x 20 ml Αντιδραστήριο Β: 2 x 10 ml

Συγκεντρώσεις των αντιδραστηρίων Αντιδραστήριο Α: Ρυθμιστικό διάλυμα (pH 8.0) 50 mmol/l Ταυροδεσοξυκολάτη 4.3 mmol/l Δεσοξυκολάτη 8 mmol/l Χλωριούχο Ασβέστιο 15 mmol/l Συνλιπάση 2.2 mg/l Απορρυπαντικό, Συντηρητικό Αντιδραστήριο Β: Ρυθμιστικό Διάλυμα Τρυγικού (pH 4.0) 7.5 mmol/l Ταυροδεσοξυκολάτη 17 mmol/l Έγχρωμο Υπόστρωμα 0.65 mmol/l Coemulgator, Σταθεροποιητής, Συντηρητικό

Προφυλάξεις Για in vitro διαγνωστική χρήση μόνο. Εφαρμόζετε τις κανονικές προφυλάξεις που απαιτούνται για το χειρισμό όλων των εργαστηριακών αντιδραστηρίων. Καθώς πολλά άλλα κλινικά αντιδραστήρια περιέχουν λιπάση ή υψηλές συγκεντρώσεις, αποφύγετε την υπερφόρτωση. Χρειάζεται ειδική προσοχή σε συνδυασμό με τα Τριγλυκερίδια, HDL, LDL και αντιδραστήρια ολικής Χοληστερόλης. Οι πιπέττες και άλλα γυαλικά θα πρέπει να καθαρίζονται πλήρως αφού χρησιμοποιηθούν για άλλες μεθόδους.

Προετοιμασία Τα αντιδραστήρια είναι έτοιμα προς χρήση. Σημείωση: Ελέγξτε ότι δεν υπάρχουν φυσαλίδες στο λαιμό ή στην επιφάνεια του φιαλιδίου αντιδραστηρίου όταν εισάγετε τα φιαλίδια ή τα δοχεία αντιδραστηρίων στην αναλυτή Konelab.

Αποθήκευση και Σταθερότητα Τα αντιδραστήρια σε φιαλίδια που δεν έχουν ανοιχτεί είναι σταθερά στους 2...8 °C μέχρι την ημερομηνία λήξης που αναγράφεται στην ετικέτα. Μην καταψύχετε τα αντιδραστήρια. Όταν ανοίξετε τα αντιδραστήρια, αυτά μένουν σταθερά για τουλάχιστον για δύο μήνες αν αποφευχθεί η επιμόλυνση. Ανατρέξτε στις Σημειώσεις Εφαρμογών του αναλυτή Konelab για την σταθερότητα των αντιδραστηρίων όταν αυτά είναι τοποθετημένα στο μηχάνημα.

ΣΥΛΛΟΓΗ ΔΕΙΓΜΑΤΩΝ

Τύπος δείγματος Μπορεί να χρησιμοποιηθεί ορός ή ηπαρινισμένο πλάσμα.

Προφυλάξεις Τα ανθρώπινα δείγματα πρέπει να χρησιμοποιούνται και να απορρίπτονται σαν να ήταν δυνητικά μολυσματικά.

Αποθήκευση Σταθερότητα: 7 ημέρες σε 20…25 °C 7 ημέρες σε 4…8 °C 1 έτος σε -20 °C

ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑ ΕΞΕΤΑΣΗΣ Ανατρέξτε στα φυλλάδια του Εγχειριδίου Αναφοράς και των Σημειώσεων Εφαρμογών για μια αυτόματη διαδικασία του αναλυτή σας Konelab. Η καλή λειτουργία οποιασδήποτε εφαρμογής που δεν έχει επικυρωθεί από την Thermo Fisher Scientific Oy , δεν μπορεί να έχει εγγύηση απόδοσης και επομένως πρέπει να εκτιμηθεί από το χρήστη.

Παρεχόμενα Υλικά Αντιδραστήρια όπως περιγράφονται παραπάνω.

Υλικά που απαιτούνται αλλά δεν παρέχονται

ΑΥΤΟ ΤΟ ΕΝΘΕΤΟ ΣΥΣΚΕΥΑΣΙΑΣ ΠΡΟΤΙΘΕΤΑΙ ΓΙΑ ΧΡΗΣΗ ΕΚΤΟΣ ΤΩΝ ΗΠΑ. ΟΠΟΙΑΔΗΠΟΤΕ ΑΝΑΦΟΡΑ ΣΤΑ ΣΥΣΤΗΜΑΤΑ KONELAB ΑΝΑΦΕΡΕΤΑΙ ΕΠΙΣΗΣ ΣΤΗ ΕΙΡΑ T.

Βαθμονομητής και υλικά ελέγχου όπως περιγράφεται παρακάτω. Υγρό έκπλυσης για να ελαχιστοποιηθούν οι κίνδυνοι της διασταυρούμενης επιμόλυνσης, π.χ. Υγρό Έκπλυσης, κωδικός 981842.

Βαθμονόμηση Χρησιμοποιήστε το eCal, κωδικός 981830 σύμφωνα με τις οδηγίες που δίνονται στον αναλυτή Konelab.

Ανιχνευσιμότητα Ανατρέξτε στο ένθετο της συσκευασίας του eCal.

Ποιοτικός Έλεγχος Χρησιμοποιήστε δείγματα ποιοτικού ελέγχου τουλάχιστον μια φορά την ημέρα και μετά από βαθμονόμηση καθώς επίσης και κάθε φορά που χρησιμοποιείτε καινούργια φιάλη αντιδραστηρίου. Διαθέσιμα υλικά ελέγχου: Nortrol, κωδικός 981043 Abtrol, κωδικός 981044 Τα διαστήματα και τα όρια των υλικών ελέγχου πρέπει να προσαρμόζονται στις απαιτήσεις του κάθε εργαστηρίου. Τα αποτελέσματα των δειγμάτων ποιοτικού ελέγχου πρέπει να εμπίπτουν εντός των ορίων που έχει προκαθορίσει το εργαστήριο.

ΥΠΟΛΟΓΙΣΜΟΣ ΤΩΝ ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΩΝ Τα αποτελέσματα υπολογίζονται αυτόματα από τον αναλυτή Konelab με χρήση καμπύλης βαθμονόμησης.


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Καμπύλη βαθμονόμησης (παράδειγμα)

Konelab 20/30/60. Η καμπύλη βαθμονόμησης εξαρτάται από την παρτίδα.

ΠΕΡΙΟΡΙΣΜΟΙ ΤΗΣ ΔΙΑΔΙΚΑΣΙΑΣ

Παρεμβολές Κριτήριο: Ανάκτηση εντός ±10 % των αρχικών τιμών. Χολερυθρίνη: Δε βρέθηκε παρεμβολή έως 1000 μmol/l (60 mg/dl). Αιμοσφαιρίνη: Δεν βρέθηκε παρεμβολή μέχρι 5 g/l αιμοσφαιρίνης. Λιπιδιαιμία: Δε βρέθηκε παρεμβολή έως 6.9 mmol/l (600 mg/dl) των τριγλυκεριδίων. Ασκορβικό οξύ: Δε βρέθηκε παρεμβολή έως 1700 μmol/l (30 mg/dl) ασκορβικού οξέος. Για τη μέτρηση της λιπάσης η έκδοση 6.6 ή μεταγενέστερη του λογισμικού Konelab συνιστάται ανεπιφύλακτα. Αν χρησιμοποιείται έκδοση του λογισμικού προγενέστερη του 6.6, ζητήστε οδηγίες για την πλύση.

ΑΝΑΜΕΝΟΜΕΝΕΣ ΤΙΜΕΣ (7) Ορός και Πλάσμα: ≤ 60 U/l Οι προαναφερθείσες τιμές πρέπει να εκλαμβάνονται ως οδηγός μόνον. Συνιστάται το κάθε εργαστήριο να διεξάγει την επαλήθευση αυτού του εύρους τιμών ή να παράγει ένα διάστημα αναφοράς για τον πληθυσμό με τον οποίο ασχολείται.

ΕΥΡΟΣ ΜΕΤΡΗΣΗΣ 16 -200 U/l Εκτεταμένο εύρος μέτρησης μετά από δευτερογενή αραίωση: 16 - 1000 U/l.

ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΤΙΚΑ ΑΠΟΔΟΣΗΣ Τα αποτελέσματα που λαμβάνονται σε ξεχωριστά εργαστήρια πιθανόν να διαφέρουν από τα δεδομένα απόδοσης.

Όριο ανίχνευσης 8 U/l Το όριο ανίχνευσης αντιπροσωπεύει τη χαμηλότερη συγκέντρωση/ενεργότητα που μπορεί να μετρηθεί και να διακριθεί από το μηδέν. Υπολογίζεται ως η συγκέντρωση του δείγματος μηδέν + 3 SD (εντός της εκτέλεσης, n=20).

Ανακρίβεια (μονάδα αποτελεσμάτων U/l) Μέση τιμή

36.7 Μέση τιμή

54.0 SD CV% SD CV% Εντός της εκτέλεσης 0.8 2.2 1.1 2.0 Μεταξύ ημερών 2.1 5.7 3.2 6.0 Συνολικό 2.5 6.8 3.8 7.0

Διεξάχθηκε μελέτη ακριβείας χρησιμοποιώντας ως κατευθυντήριο οδηγό το Έγγραφο του NCCLS EP5-A και το Konelab 30 σε διάρκεια 10 ημερών, με τον αριθμό των μετρήσεων να είναι n = 40.

Σύγκριση μεθόδου Διεξάχθηκε μια συγκριτική μελέτη χρησιμοποιώντας ως αναφορά μια εμπορικά διαθέσιμη μέθοδο λιπάσης. Γραμμική παλινδρόμηση (μονάδα αποτελεσμάτων U/I): y = 1.09 x -7.8 r = 0.996 n = 101

ΒΙΒΛΙΟΓΡΑΦΙΑ 1. Lorentz K. Lipase. In: Thomas L, editor. Clinical laboratory diagnostics. 1st ed.








ΚΑΤΑΣΚΕΥΑΣΤΗΣ Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland

Λιπάση

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Δραστηριότητα (U/l)

Απόκριση

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Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Τηλ. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Ημερομηνία αναθεώρησης (εεεε-μμ-ηη) 2008-09-24

Αλλαγές από την προηγούμενη έκδοση

ΧΑΡΑΚΤΗΡΙΣΤΙΚΑ ΑΠΟΔΟΣΗΣ: Τα αποτελέσματα που λαμβάνονται σε ξεχωριστά εργαστήρια πιθανόν να διαφέρουν από τα δεδομένα απόδοσης.

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Konelab™ / Serie T LIPASE (Colorimetric) LIPASA (Colorimétrico)

981846 4 x 20 ml + 2 x 10 ml

ESTE PROSPECTO ES PARA USO FUERA DE EE. UU. TODAS LAS REFERENCIAS A LOS SISTEMAS KONELAB SE REFIEREN TAMBIÉN A LA SERIE T.

USO PRETENDIDO Para la determinación cuantitativa in vitro en analizadores Konelab de la concentración de lipasa en suero y plasma humanos. Todos los resultados del test deben interpretarse en función del contexto clínico.

RESUMEN (1) Las lipasas son enzimas que hidrolizan ésteres de glicerol con ácidos grasos de cadena larga. La enzima y su cofactor la colipasa se producen en el páncreas; la lipasa también es segregada en pequeñas cantidades por las glándulas salivales y la membrana mucosa gástrica, pulmonar e intestinal. Los ácidos biliares y la colipasa forman complejos micelares con los lípidos y unen la lipasa con la interfase sustrato/agua. La determinación de la lipasa de utiliza en la investigación de trastornos pancreáticos. En la pancreatitis aguda, las concentraciones de lipasa aumentan hasta 2-50 veces el límite de referencia superior a las 4-8 horas de iniciarse el dolor abdominal, alcanzan su máximo a las 24 horas y disminuyen a los 8-14 días. También se observan valores elevados de lipasa en la pancreatitis crónica y la obstrucción del conducto pancreático.

PRINCIPIO DEL PROCEDIMIENTO Test de color enzimático. Se añade un sustrato de lipasa producido sintéticamente (1.2-o-dilauril-rac-glicero-3-ácido glutárico-(6-metilresorufina)-éster) a una microemulsión que es dividida de forma específica por la lipasa en presencia de la colipasa y los ácidos biliares. La combinación de la colipasa y los ácidos biliares hace que esto resulte específico y seguro para la lipasa pancreática sin que haya reacciones debido a enzimas lipolíticas o esterasas. La composición del reactivo se ha optimizado minuciosamente para que no se produzcan efectos matriciales en el suero. El metilresorufina-éster generado se degrada espontáneamente en metilresorufina. La absorbencia de este tinte rojo es directamente proporcional a la actividad de la lipasa en la muestra. La lipasa cataliza la reacción.

1.2-o-Dilauril-rac-glicero-3-ácido glutárico-(6-metilresorufina)-éster <Lipasa / Colipasa >

1.2-o-Dilauril-rac-glicerina + Ácido glutárico-(6-metilresorufina)-éster

Ácido glutárico-(6-metilresorufina)-éster egradación espontánea_ >

Ácido glutárico + Metilresorufina El aumento de absorbencia se determina fotométricamente.

INFORMACIÓN SOBRE EL REACTIVO Reactivo A: 4 x 20 ml Reactivo B: 2 x 10 ml

Concentración de los reactivos Reactivo A: Tampón Good (pH 8.0) 50 mmol/l Taurodesoxicolato 4.3 mmol/l Desoxicolato 8 mmol/l Cloruro de calcio 15 mmol/l Colipasa 2.2 mg/l Detergente, Conservante Reactivo B: Tampón tartrato (pH 4.0) 7.5 mmol/l Taurodesoxicolato 17 mmol/l Sustrato de color 0.65 mmol/l Coemulgador, Estabilizador, Conservante

Precauciones Sólo para uso diagnóstico in vitro. Adopte las medidas de precaución habituales para manipular reactivos de laboratorio. Dado que muchos otros reactivos clínicos contienen lipasa o concentraciones altas de detergente, es necesario evitar el arrastre de material. Debe tenerse especial cuidado en combinación con reactivos de triglicéridos y de colesterol HDL, LDL y total. Las pipetas y demás instrumentos de vidrio deben limpiarse a fondo si se han utilizado en otros ensayos.

Preparación Los reactivos están listos para su uso. Nota: Compruebe que no haya burbujas en el cuello de la botella ni en la superficie del reactivo cuando inserte los viales o recipientes en el analizador Konelab.


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Almacenamiento y estabilidad Los reactivos sin abrir son estables a 2…8 °C hasta la fecha de caducidad impresa en la etiqueta. No congele los reactivos. Una vez abiertos, los reactivos son estables durante al menos dos meses siempre que no hayan sufrido ningún tipo de contaminación. Consulte las notas de la aplicación del analizador Konelab para determinar la estabilidad de los reactivos una vez abiertos y puestos en el analizador.

RECOGIDA DE MUESTRAS

Tipo de muestra Puede utilizarse suero o plasma con heparina.

Precauciones Las muestras de origen humano deben manejarse y desecharse como si se tratase de material potencialmente infeccioso.

Almacenamiento

Estabilidad: 7 días a 20…25 °C 7 días a 4…8 °C 1 año a - 20 °C

PROCEDIMIENTO DEL TEST Consulte el procedimiento automático para el analizador Konelab en el manual del analizador y las notas de la aplicación. No puede garantizarse la fiabilidad de ninguna aplicación no aprobada por Thermo Fisher Scientific Oy , por lo que deberá evaluarla el usuario.

Materiales suministrados

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Los reactivos descritos anteriormente.

Materiales requeridos pero no suministrados Calibrador y controles descritos a continuación. Detergente líquido para eliminar el riesgo de contaminación cruzada, p. ej., WashFluid, código 981842.

Calibración Utilice eCal, código 981830, de acuerdo con las instrucciones suministradas para el analizador Konelab.

Trazabilidad: Consulte el prospecto del paquete de eCal.

Control de calidad Utilice muestras de control de calidad al menos una vez al día, después de cada calibración y cada vez que se utilice un nuevo frasco de reactivo. Controles disponibles: Nortrol, código 981043 Abtrol, código 981044 Los intervalos y límites de control deben adaptarse a los requisitos de cada laboratorio. Los resultados de las muestras de control de calidad deben estar dentro de los límites establecidos por el laboratorio.

CÁLCULO DE RESULTADOS El analizador Konelab calcula los resultados automáticamente por medio de una curva de calibración.

Curva de calibración (ejemplo)

Konelab 20/30/60. La curva de calibración depende del lote.

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

Interferencias Criterio: recuperación entre ± 10% de los valores iniciales. Bilirrubina: sin interferencias encontradas hasta 1000 µmol/l (60 mg/dl). Hemoglobina: sin interferencias encontradas hasta 5 g/l de hemoglobina. Lipemia: sin interferencias encontradas hasta 6.9 mmol/l (600 mg/dl) de triglicéridos. Ácido ascórbico: sin interferencias encontradas hasta 1700 µmol/l (30 mg/dl) de ácido ascórbico. Para el ensayo de lipasa se recomienda una versión de software Konelab 6.6 o posterior. Si utiliza una versión de software anterior a la 6.6, solicite instrucciones especiales de lavado.

VALORES PREVISTOS (7) Suero y plasma: ≤ 60 U/l Los valores mencionados sirven sólo de referencia. Se recomienda que cada laboratorio verifique este rango o derive un intervalo de referencia para la población a la que atiende.

RANGO DE MEDIDA 16 - 200 U/l Rango de medida aumentado después de la segunda dilución: 16 - 1000 U/l

CARACTERÍSTICAS DEL RESULTADO Los resultados obtenidos en cada laboratorio pueden diferir de los datos de resultados presentados.

Límite de detección 8 U/l El límite de detección representa la concentración/actividad más baja mensurable que puede distinguirse de cero. Se calcula como la concentración de muestra cero + 3 SD (intraserie, n=20).

Imprecisión (unidad de resultado U/l) Media

36.7 Media 54.0

SD CV% SD CV% Intraserie 0.8 2.2 1.1 2.0 Interdiario 2.1 5.7 3.2 6.0 Total 2.5 6.8 3.8 7.0

En el estudio de precisión realizado según las directrices del documento EP5-A del NCCLS se utilizó el analizador Konelab 30 durante 10 días, siendo el número de medidas n =40.

Comparación de métodos Se realizó un estudio comparativo usando como referencia un método con lipasa comercialmente disponible. Regresión lineal (unidad de resultado U/l): y = 1.09 x - 7.8 r = 0.996 n = 101

BIBLIOGRAFÍA 1. Lorentz K. Lipase. In: Thomas L, editor. Clinical laboratory diagnostics. 1st ed.








FABRICANTE Thermo Fisher Scientific Oy Lipasa

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Fecha de revisión (aaaa-mm-dd) 2008-09-24

Cambios desde la versión anterior

CARACTERÍSTICAS DEL RESULTADO: Los resultados obtenidos en cada laboratorio pueden diferir de los datos de resultados presentados.

ET

Konelab™ / T Seeria LIPASE (Colorimetric) LIPAAS (kolorimeetriline analüüs)

981846 4 x 20 ml + 2 x 10 ml

PAKENDI INFOLEHT ON KOOSTATUD KASUTAMISEKS VÄLJASPOOL USA-D. KONELAB SYSTEMSI VIITED KEHTIVAD ÜHTLASI T SEERIA KOHTA.

SIHTOTSTARVE Kvantitatiivseks in vitro lipaasi kontsentratsiooni määramiseks inimese seerumis või plasmas Konelabi analüsaatorite abil. Katsetulemuste tõlgendamisel tuleb alati arvesse võtta kliinilist tausta.


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KOKKUVÕTE (1) Lipaasid on ensüümid, mis hüdrolüüsivad pikkade rasvhapete glütseroolestreid. Ensüümi ja selle kofaktorit kolipaasi toodetakse pankreases, väikestes kogustes eritatakse lipaasi ka süljenäärmete, mao, kopsude ja soolte limaskestade poolt. Sapphapped ja kolipaas moodustavad lipiididega mitsellkomplekse ning seovad lipaasi substraadi/vee piirpinnal. Lipaasi määramist kasutatakse pankrease haiguste uurimisel. Akuutsete pankreatiitide korral tõuseb lipaasi kontsentratsioon pärast valu algust alakõhus 4 - 8 tunni jooksul 2 - 50 korda üle normaaltaseme, saavutab maksimumi 24 tunni möödudes ning langeb tagasi normaaltasemele 8 kuni 14 päeva jooksul. Kõrgenenud lipaasi kontsentratsiooni võib jälgida ka krooniliste pankreatiitide ning kõhunäärmejuha obstruktsiooni korral.

MEETODI PÕHIMÕTE Ensüümidele tuginev värvitest Sünteetilisel teel saadud lipaasi substraat (1.2-o-dilaurüül-rac-glütsero-3-glutaarhape-(6-metüülresorufiin) ester lisatakse mikroemulsioonile, mis laguneb koliapaasi ja sapphapete juuresolekul lipaasi toimel spetsiifilisel viisil. Koliapaasi ja sapphapete kombinatsioon muudab meetodi pankrease lipaaside määramisel spetsiifiliseks ja töökindlaks, vältides ükskõik milliseid reaktsioone lipolüütiliste ensüümide või esteraaside olemasolu tõttu. Seerumi maatriksi poolt tekitatavate efektide vältimiseks on reagendi koostis hoolikalt optimeeritud. Tekkiv metüülresorufiinester degradeerub spontaanselt metüülresorufiiniks. Selle punase värvaine poolt põhjustatud neeldumine on otseselt proportsionaalne lipaasi aktiivsusega proovis. Lipaas on alltoodud reaktsioonis katalüsaatoriks:

1.2-o-dilaurüül-rac-glütsero-3-glutaarhape(6-metüülresorufiin) ester <lipaas / kolipaas>

1.2-o-dilaurüül-rac-glütseriin + glutaarhappe(6-metüülresorufiin)ester

Glutaarhappe(6-metüülresorufiin)ester spontaanne degradatsioon_ >

Glutaarhape + metüülresorufiin Neelduvuse tõus määratakse fotomeetriliselt.

TEAVE REAKTIIVIDE KOHTA Reaktiiv A: 4x20 Reaktiiv B: 2x10

Reaktiivide kontsentratsioonid Reaktiiv A: Goods’i puhver (pH 8.0) 50 mmol/l Taurodesoksükolaat 4.3 mmol/l Desoksükolaat 8 mmol/l Kaltsiumkloriid 15 mmol/l Kolipaas 2.2 mg/l Pesuvahend, säilitusaine Reaktiiv B: Tartraatpuhver (pH 4.0) 7.5 mmol/l Taurodesoksükolaat 17 mmol/l Värvisubstraat 0.65 mmol/l Kaasemulgaator, stabilisaator, säilitusaine

Hoiatused Kasutamiseks ainult in vitro diagnostikas. Kõigi laborireaktiivide käsitsemisel tuleb rakendada tavapäraseid ettevaatusabinõusid. Kuna paljud kliinilised reaktiivid sisaldavad lipaase või suurtes kontsentratsioonides pesemisaineid, siis tuleb nendega kokkupuudet vältida. Eriliselt hoolikas tuleb olla triglütseriidide, HDL, LDL ja kõigi kolesterooli reaktiivide suhtes. Pipetid ja teised klaasist laborinõud tuleb hoolikalt pesta, kui neid kasutati muude analüüside juures.

Ettevalmistamine Reaktiivid on kasutusvalmis. Märkus. Enne reaktiiviviaalide või -nõude viimist Konelab analüsaatorisse tuleb kontrollida, et pudelikaelas ega reaktiivi pinnal ei oleks mulle.

Säilitamine ja stabiilsus Avamata viaalides püsivad reaktiivid temperatuuril 2 … 8 °C stabiilsena sildile trükitud aegumistähtajani. Reaktiive ei tohi külmutada. Avatud viaalis olev reaktiiv püsib stabiilsena vähemalt kahe kuu jooksul, kui välditakse selle saastumist. Teavet analüsaatoris asuvate reaktiivide stabiilsuse kohta leiate Konelab analüsaatori tehnilistest märkustest.

PROOVIDE VÕTMINE

Proovi tüüp Kasutada võib seerumi- või hepariiniga plasmaproove.

Hoiatused Inimpäritolu proovid tuleb käsitsemisel ja kõrvaldamisel lugeda võimalikeks nakkusallikateks.

Säilitamine

Stabiilsus: 7 päeva temperatuuril 20 … 25 °C 7 päeva temperatuuril 4 … 8 °C 1 aasta temperatuuril - 20 °C

KATSEPROTSEDUUR Teave automaatse katseprotseduuri läbiviimise kohta Konelab analüsaatoril on esitatud kasutusjuhendis ja tehnilistes märkustes. Thermo Fisher Scientific Oy poolt valideerimata rakendusviiside korral pole võimalik garanteerida vastavaid sooritusnäitajaid, mistõttu peab neid hindama lõppkasutaja.

Komplekti kuuluvad ained Eespool kirjeldatud reaktiivid.

Komplekti mittekuuluvad vajalikud ained Allpool kirjeldatud ained kalibreerimiseks ja kontrollimiseks. Pesemisvedelik ristsaastamise vältimiseks, nt WashFluid, kood 981842.

Kaliibrimine Kasutage eCal’i (kood 981830) vastavalt Konelab analüsaatori juhendile.

Jälgitavus: Juhinduda eCal pakendi infolehest.

Kvaliteedikontroll Kvaliteedikontrolliproove viiakse läbi vähemalt kord päevas, pärast iga kaliibrimist ja iga kord, kui kasutusele võetakse uus reaktiivipudel. Saadaval on järgmised kontrollproovid: Nortrol, kood 981043 Abtrol, kood 981044 Kontrollitavad vahemikud ja piirid tuleb kohaldada laborite individuaalsetele vajadustele. Kontrollimiste tulemused peavad jääma labori poolt eelnevalt määratud piiridesse.

TULEMUSTE ARVUTAMINE Konelab analüsaator arvutab tulemused automaatselt kaliibrimiskõvera järgi.

Kaliibrimiskõver (näide)

Konelab 20/30/60. Kaliibrimiskõver on eri partiide puhul erinev.

PROTSEDUURI PIIRANGUD

Segavad mõjud Tingimus: taastumine ± 10% algväärtuse suhtes. Bilirubiin: kontsentratsioonini kuni 1000 µmol/l (60 mg/dl) pole segavaid tegureid leitud. Hemoglobiin: hemoglobiini kontsentratsioonini kuni 5 g/l pole segavaid tegureid leitud. Lipeemia: triglütseriidide kontsentratsioonini kuni 6.9 mmol/l (600 mg/dl) pole segavaid tegureid leitud. Askorbiinhape: triglütseriidide kontsentratsioonini kuni 1700 µmol/l (30 mg/dl) pole segavaid tegureid leitud. Seadme Lipase Konelab puhul on ülimalt soovitatav kasutada tarkvaraversiooni 6.6 või uuemat. Kui kasutatakse vanema versiooniga tarkvara kui 6.6, küsige seadme pesemiseks eraldi juhiseid.

OODATAVAD TULEMUSED (7) Seerum ja plasma: ≤ 60 U/l Toodud väärtused on orienteeruvad. Kõigil laboritel on soovitatav seda vahemikku kontrollida või tuletada ise etalonvahemik teenindatava populatsiooni seas.

MÕÕTEPIIRKOND 16 - 200 U/l Laiendatud mõõtepiirkond pärast sekundaarset lahjendust: 16 - 1000 U/l.

SOORITUSNÄITAJAD Individuaalsetes laborites saadavad tulemused võivad erineda esitatud sooritusnäitajatest.

Avastamispiir 8 U/l Avastamispiir on madalaim mõõdetav nullist eristatav kontsentratsioon/aktiivsus. See arvutatakse vastavalt valemile: nullproovi kontsentratsioon + 3 SD (katseseeriasisene, n=20).

Ebatäpsus (tulemuse ühik U/l) Keskmine

36.7 Keskmine

54.0 SD CV% SD CV% Katseseeriasisene 0.8 2.2 1.1 2.0 Erinevatel päevadel 2.1 5.7 3.2 6.0 Summaarne 2.5 6.8 3.8 7.0

Vastavalt NCCLS dokumendi EP5-A suunistele viidi Konelab 30 peal 10 päeva jooksul läbi täpsusuuring mõõtmiste arvuga n = 40.

Meetodite võrdlus Võrdleval uuringul kasutati etalonina üldkättesaadavat lipaasi meetodit. Lineaarne regressioon (tulemuse ühik U/l): y = 1.09 x - 7.8 r = 0.996 n = 101

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KIRJANDUS 1. Lorentz K. Lipase. In: Thomas L, editor. Clinical laboratory diagnostics. 1st ed.








TOOTJA Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Tel. +358 9 329 100, Faks +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Teksti läbivaatamise kuupäev (aaaa-kk-pp) 2008-09-24

Muudatused võrreldes eelmise versiooniga

SOORITUSNÄITAJAD: Individuaalsetes laborites saadavad tulemused võivad erineda esitatud sooritusnäitajatest.

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Konelab™ / T Sorozat LIPASE (Colorimetric) LIPÁZ (kolorimetriás)

981846 4 x 20 ml + 2 x 10 ml

RENDELTETÉS Emberi szérum és plazma lipáz koncentrációjának in vitro kvantitatív meghatározásához Konelab analizátorokban. Minden vizsgálati eredményt a klinikai képpel összefüggésben kell értékelni.

ÖSSZEGZÉS (1) A lipázok enzimek, melyek a hosszú zsírsavak glicerinésztereit hidrolizálják. Az enzim és kofaktora, a kolipáz, a hasnyálmirigyben képződik, emellett kis mennyiségben választanak ki lipázt a nyálmirigyek, a gyomor- és bélnyálkahártya, valamint a tüdő. Az pesavak és a kolipáz a lipidekkel micellákat képeznek és a lipideket megkötik a szubsztrát / víz határfelületen. A lipáz meghatározását a hasnyálmirigy zavarainak vizsgálataiban használják fel. Akut hasnyálmirigy-gyulladásban a lipáz koncentrációk a hasi fájdalom kezdetét követő 4-8 órával a felső határérték 2-50-szeresére emelkednek, a csúcsot 24 óra elmúltával érik el, majd 8-14 nap alatt visszasüllyednek. Emelkedett lipáz értékek figyelhetők meg krónikus hasnyálmirigy-gyulladásban, valamint a hasnyálmirigy kivezetőcsövének elzáródásakor is.

AZ ELJÁRÁS ALAPELVE Enzimatikus kolorimetriás vizsgálat. A vizsgálat során szintetikus lipáz szubsztrát (1.2-o-didodecil-rac-glicero-3-glutársav-(6-metil-rezorufin)-észter) kerül hozzáadásra a mikroemulzióhoz, ahol kolipáz és epesavak jelenlétében annak specifikus hasítása következik be. A kolipáz és az epesavak együttes jelenléte teszi a reakciót megbízhatóvá és a hasnyálmirigy-lipázra specifikussá, ezért azt a lipolitikus enzimek és az észterázok nem zavarják. A reagens összetétele gondosan optimalizált, így nem fordul elő szérum mátrix hatás. A képződött metil-rezorufin-észter spontán metil-rezorufinra bomlik. E piros festék abszorbanciája egyenesen arányos a minta lipáz aktivitásával. A lipáz katalizálja a reakciót

1.2-o-didodecil-rac-glicero-3-glutársav-(6-metil-rezorufin)-észter <__Lipáz / Kolipáz__>

1.2-o-didodecil-rac-glicerin + glutársav-(6-metil-rezorufin)-észter

Glutársav-(6-metil-rezorufin)-észter spontán bomlás_ >

Glutársav + metil-rezorufin Az abszorbancia növekedése fotometriával meghatározható

REAGENSEK ADATAI A reagens: 4 x 20 ml B reagens: 2 x 10 ml

A reagensek koncentrációi A reagens: Goods puffer (pH 8.0) 50 mmol/l Taurodezoxikolát 4.3 mmol/l Dezoxikolát 8 mmol/l Kalcium-klorid 15 mmol/l Kolipáz 2.2 mg/l Detergens, tartósítószer

B reagens: Tartarát puffer (pH 4.0) 7.5 mmol/l Taurodezoxikolát 17 mmol/l Színes szubsztrát 0.65 mmol/l Koemulgeátor, stabilizátor, tartósítószer

Óvintézkedések Kizárólag in vitro diagnosztikus használatra. Tartsa be a laboratóriumi reagensek kezelésére vonatkozó szokásos előírásokat. Mivel számos más klinikai reagens tartalmaz lipázt vagy magas koncentrációban detergenst, ügyeljen az átvitel ("carry over") elkerülésére! Különös gonddal kell eljárni a Trigliceridek, a HDL, az LDL és az Összkoleszterin reagensekkel történő kombináláskor. Az egyéb vizsgálatokhoz használt pipettákat és más edényeket használat után alaposan meg kell tisztítani.

Előkészítés A reagensek használatra készek. Megjegyzés: Ellenőrizze, hogy nincs-e buborék az üveg nyakánál vagy a reagens felszínén, amikor reagenst tartalmazó üvegeket, illetve edényeket tesz a Konelab analizátorba.

Tárolás és stabilitás Felbontatlan üvegben tárolt reagensek 2...8 °C között a címkén feltüntetett lejárati időpontig stabilak. Ne fagyassza le a reagenseket. Az egyszer már felnyitott reagensek a szennyeződés elkerülése mellett két hónapig stabilak. A reagensek elemzőkészüléken belüli stabilitásához olvassa el a Konelab analizátorhoz tartozó Alkalmazási tudnivalókat.

MINTAVÉTEL

A minta típusa Használjon szérumot vagy heparinos plazmát.

Óvintézkedések Az emberi mintákat úgy kell kezelni és kidobni, mintha azok fertőzőek lennének.

Tárolás

Stabilitás: 7 nap 20…25 °C-on 7 nap 4…8 °C-on 1 év - 20 °C-on

A VIZSGÁLATI ELJÁRÁS Automatizált eljárás kivitelezéséhez olvassa el a Konelab analizátorhoz tartozó Használati kézikönyvet és Alkalmazási tudnivalókat. Nem garantálható semmilyen olyan alkalmazás eredménye, amelyet a Thermo Fisher Scientific Oy nem hagyott jóvá, ezért ezeket a felhasználónak kell értékelnie.

Szolgáltatott anyagok A fent leírt reagensek.

EZ A TÁJÉKOZTATÓ AZ EGYESÜLT ÁLLAMOKON KÍVÜLI HASZNÁLATRA VONATKOZIK. A KONELAB RENDSZEREKRE TETT MINDEN UTALÁS A T SOROZATRA IS VONATKOZIK.

Szükséges, de nem szolgáltatott anyagok Az alább leírt kalibrátorok és kontrollok. A keresztszennyeződés kockázatának csökkentésére használható mosófolyadék pl.: WashFluid, kód: 981842.

Kalibrálás A Konelab analizátorhoz csatolt használati utasításnak megfelelően a 981830 katalógusszámú „eCal” kalibrátort használja.

Nyomonkövethetőség: Az alkalmazáshoz olvassa el az eCal oldat csomagjában található tájékoztatót.

Minőségellenőrzés Használjon minőségellenőrző mintákat naponta legalább egyszer, minden kalibrálás után, illetve minden új üveg reagens felnyitásakor. Rendelkezésre álló kontrollminták: Nortrol, kód 981043 Abtrol, kód 981044 Az ellenőrzési intervallumokat és határértékeket az aktuális laboratóriumi követelményekhez kell igazítani. A minőségellenőrző minták eredményeinek a laboratórium által előre beállított határértékek közé kell esniük.

AZ EREDMÉNYEK KISZÁMÍTÁSA Az eredményeket a Konelab analizátor automatikusan kiszámítja egy kalibrációs görbe segítségével.

Kalibrációs görbe (példa) Konelab 20/30/60. A kalibrációs görbe cikkszámtól függ.

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AZ ELJÁRÁS KORLÁTAI

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Interferencia Kritérium: Az értékek a kezdeti értékek ± 10 %-án belül maradnak. Bilirubin: Nem észlelhető interferencia 1000 µmol/l (60 mg/dl) értékig. Hemoglobin: Nem észleltek interferenciát 5 g/l hemoglobinszintig. Lipaemia: Nem észleltek interferenciát 6.9 mmol/l (600 mg/dl) triglicerid koncentrációig. Aszkorbinsav: Nem észlelhető interferencia 1700 µmol/l (30 mg/dl) aszkorbinsav koncentrációig. A lipázvizsgálathoz a Konelab szoftver 6.6-os vagy annál magasabb verzióját javasoljuk. Ha a 6.6-osnál alacsonyabb szoftververziót használ, a mosáshoz kérjen további utasításokat.

VÁRHATÓ ÉRTÉKEK (7) Szérum és plazma: ≤ 60 U/l A feltüntetett értékek kizárólag tájékoztató jellegűek. Minden laboratórium esetében ajánlott a normál tartomány megerősítése, illetve a kiszolgált populációra jellemző referenciaintervallum kialakítása.

MÉRÉSI TARTOMÁNY 16 - 200 U/l Kiterjesztett mérési tartomány másodlagos hígítás után: 16 - 1000 U/l.

TELJESÍTMÉNY JELLEMZŐK Az egyes laboratóriumokban nyert értékek különbözhetnek a megadott teljesítmény adatoktól.

Detektálási határérték 8 U/l A detektálási határérték az a legkisebb mérhető koncentráció/aktivitás, amely még megkülönböztethető a nullától. Kiszámítása a következő: nulla minta koncentrációja + 3 SD (mérés közben n=20).

Pontatlanság (eredmény egység U/l) Középérték

36.7 Középérték

54.0 SD CV% SD CV% Mérés közben 0.8 2.2 1.1 2.0 Napok közt 2.1 5.7 3.2 6.0 Teljes 2.5 6.8 3.8 7.0

Az NCCLS EP5-A dokumentumának előírásai alapján pontossági mérést végeztek 10 napon keresztül a Konelab 30 analizátorral, 40-es mérésszámmal (n=40).

Módszerösszehasonlítás Összehasonlítási tanulmány készült referenciaként egy másik forgalomban lévő lipáz módszer használatával. Lineáris regresszió (eredmény egység U/l): y = 1.09 x - 7.8 r = 0.996 n = 101

IRODALOM 1. Lorentz K. Lipase. In: Thomas L, editor. Clinical laboratory diagnostics. 1st ed.








GYÁRTÓ Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Ellenőrzés időpontja (éééé-hh-nn) 2008-09-24

Változtatások az előző változathoz képest

TELJESÍTMÉNY JELLEMZŐK: Az egyes laboratóriumokban nyert értékek különbözhetnek a megadott teljesítmény adatoktól.

IT

Konelab™ / Serie T LIPASE (Colorimetric) LIPASI (Colorimetrico)

981846 4 x 20 ml + 2 x 10 ml

USO CONSIGLIATO Prodotto impiegato per la determinazione quantitativa in vitro della concentrazione di lipasi nel siero e nel plasma umani con analizzatori Konelab. Tutti i risultati del test devono essere interpretati in riferimento al contesto clinico specifico.

SOMMARIO (1) Le lipasi sono enzimi che idrolizzano gli esteri del glicerolo di acidi grassi a catena lunga. L’enzima e il suo cofattore colipasi sono prodotti nel pancreas; la lipasi è secreta in piccole quantità anche dalle ghiandole salivari oltre che dalla mucosa gastrica, polmonare e intestinale. Gli acidi biliari e la colipasi formano complessi micellari con i lipidi e legano la lipasi all’interfaccia tra substrato e acqua. La determinazione della lipasi è utilizzata per la ricerca delle malattie del pancreas. Nella pancreatite acuta i livelli di concentrazione della lipasi aumentano di 2-50 volte il limite massimo di riferimento entro 4-8 ore dall’insorgenza del dolore addominale, raggiungendo il picco più elevato dopo 24 ore e diminuendo nuovamente nell’arco di 8 -14 giorni. Valori elevati di lipasi si possono osservare anche in presenza di pancreatite cronica e ostruzione del dotto pancreatico.

PRINCIPIO DELLA PROCEDURA Test con colorazione enzimatica. Un substrato sintetico della lipasi (1.2-o-dilauril-rac-glicero-3-acido glutarico-(6-metilresorufina) estere) viene aggiunto ad una microemulsione che viene specificamente scissa dalla lipasi in presenza di colipasi e acidi biliari. La combinazione di colipasi e acidi biliari la rende specifica ed affidabile per la lipasi pancreatica senza alcuna reazione dovuta ad enzimi lipolitici o esterasi. La composizione del reagente è stata ottimizzata in modo da non dare effetti provocati dalla matrice siero. Il metilresorufina-estere generato viene degradato spontaneamente in metilresorufina. L’assorbanza di questo colorante rosso è direttamente proporzionale all’attività della lipasi nel campione. La lipasi catalizza la reazione

1.2-o-Dilauril-rac-glicero-3-acido glutarico(6-metilresorufina) estere <Lipasi / Colipasi >

1.2-o-Dilauril-rac-glicerina + acido glutarico-(6-metilresorufina)-estere

Acido glutarico-(6-metilresorufina)-estere degradazione spontanea_ >

Acido Glutarico + Metilresorufina L'aumento dell'assorbanza è misurato per via fotometrica

INFORMAZIONI SUI REAGENTI Reagente A: 4 x 20 ml Reagente B: 2 x 10 ml

Le concentrazioni dei reagenti Reagente A: Tampone Good (pH 8.0) 50 mmol/l Taurodesossicolato 4.3 mmol/l Desossicolato 8 mmol/l Cloruro di calcio 15 mmol/l Colipasi 2.2 mg/l Detergente, conservante Reagente B: Tampone tartrato (pH 4.0) 7.5 mmol/l Taurodesossicolato 17 mmol/l Colore substrato 0.65 mmol/l Coemulgatore, stabilizzante, conservante

Precauzioni Solo per uso diagnostico in vitro. Rispettare le normali precauzioni previste per l'utilizzo di tutti i reagenti di laboratorio. Come molti altri reagenti clinici contiene lipasi o concentrazioni elevate di detergenti, evitare l’effetto carry over! Prestare massima cura in combinazione con reagenti per trigliceridi, HDL, LDL e colesterolo totale. Le pipette e l’altra vetreria di laboratorio devono essere puliti a fondo immediatamente dopo l’uso per successivi dosaggi.

Preparazione I reagenti sono pronti all'uso. Nota: Controllare che non siano presenti bolle sul collo del flacone o sulla superficie del reagente durante l'inserimento di vial o recipienti di reagente nell'analizzatore Konelab.

Conservazione e stabilità I reagenti in flaconi intatti sono stabili fino alla data di scadenza indicata sull'etichetta, se conservati a una temperatura di 2...8 °C. Non congelare i reagenti. Una volta aperti, i reagenti sono stabili almeno per due mesi se preservati dalla contaminazione batterica. Per la stabilità dei reagenti sullo strumento, vedere le note applicative dell'analizzatore Konelab in uso.

RACCOLTA DEL CAMPIONE

Tipo di campione È possibile utilizzare siero o plasma eparinizzato.

Precauzioni I campioni umani devono essere maneggiati e smaltiti come campioni potenzialmente infetti.

Conservazione

Stabilità: 7 giorni a 20…25 °C 7 giorni a 4…8 °C 1 anno a - 20 °C

IL PRESENTE INSERTO NELL’IMBALLO PUO’ ESSERE APPLICATO AL DI FUORI DEGLI STATI UNITI. EVENTUALI RIFERIMENTI A KONELAB SYSTEMS SI RIFERISCONO ANCHE ALLA SERIE T.


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PROCEDURA ANALITICA Per le procedure automatiche, consultare il manuale d'uso e le note applicative dell'analizzatore Konelab impiegato. Tutte le applicazioni non esplicitamente approvate da Thermo Fisher Scientific Oy , non possono essere garantite in termini di prestazioni e dovranno pertanto essere valutate dall'utilizzatore.

Materiali inclusi nel kit I reagenti sopra descritti.

Materiali necessari ma non inclusi nel kit Calibratore e controlli indicati di seguito. Liquido di lavaggio per eliminare eventuali rischi di contaminazione crociata, ad esempio WashFluid, codice 981842.

Calibrazione Utilizzare eCal, codice 981830 conformemente alle istruzioni dell'analizzatore Konelab in uso.

Tracciabilità: Fare riferimento all'inserto nell'imballo dell’eCal.

Controllo qualità Utilizzare i campioni del controllo di qualità almeno una volta al giorno, dopo ogni calibrazione e ogni volta che si utilizza un nuovo flacone di reagente. Controlli disponibili: Nortrol, codice 981043 Abtrol, codice 981044 Gli intervalli e i limiti del controllo devono essere adattati ai requisiti dei singoli laboratori. I risultati dei campioni del controllo di qualità devono rientrare nei limiti di variabilità stabiliti a priori dal laboratorio.

CALCOLO DEI RISULTATI I risultati vengono calcolati automaticamente dall'analizzatore Konelab in base ad una curva di calibrazione.

Curva di calibrazione (esempio)

Konelab 20/30/60. La curva di calibrazione dipende dal lotto.

LIMITI DELLA PROCEDURA

Interferenze Criterio: Recupero entro ± 10 % del valore iniziale. Bilirubina: Non sono state rilevate interferenze fino a 1000 µmol/l (60 mg/dl). Emoglobina: Non sono state rilevate interferenze fino a 5 g/l di emoglobina. Lipemia: Non sono state rilevate interferenze fino a 6.9 mmol/l (600 mg/dl) di trigliceridi. Acido ascorbico: Non sono state rilevate interferenze fino a 1700 µmol/l (30 mg/dl) di acido ascorbico. Per il test Lipase si raccomanda vivamente l'utilizzo della versione Konelab sw 6.6 o una ancora più aggiornata. Qualora si utilizzi una versione sw più vecchia rispetto alla 6.6, si prega di chiedere istruzioni speciali per il lavaggio.

INTERVALLO DI RIFERIMENTO (7) Siero e plasma: ≤ 60 U/l I valori citati dovranno servire esclusivamente come riferimento. Si raccomanda ad ogni laboratorio di verificare l'applicabilità di questo intervallo alla propria popolazione di pazienti e, se necessario, di determinare appositi intervalli di riferimento.

INTERVALLO DI MISURAZIONE 16 - 200 U/l Intervallo di misurazione ampliato dopo la seconda diluizione: 16 - 1000 U/l.

CARATTERISTICHE PRESTAZIONALI I risultati ottenuti nei singoli laboratori possono differire dai dati sulle prestazioni riportati.

Limite di rilevamento 8 U/l Il limite di rilevamento rappresenta la concentrazione/attività misurabile più bassa che può essere distinta da zero. È calcolato come la concentrazione misurata nel campione zero + 3 DS (entro la serie, n=20).

Imprecisione (risultati espressi in U/l) Media

36.7 Media 54.0

DS CV% DS CV% Entro la serie 0.8 2.2 1.1 2.0 Fra la serie 2.1 5.7 3.2 6.0 Totale 2.5 6.8 3.8 7.0

È stato eseguito uno studio di precisione conformemente al protocollo NCCLS documento EP5-A come linea guida e utilizzando un analizzatore Konelab 30 per 10 giorni, con un numero di misurazioni pari a n = 40.

Metodo di confronto È stato eseguito uno studio comparato utilizzando un metodo per la lipasi disponibile in commercio come riferimento. Regressione lineare (risultato espresso in U/I): y = 1.09 x - 7.8 r = 0.996 n = 101

BIBLIOGRAFIA 1. Lorentz K. Lipase. In: Thomas L, editor. Clinical laboratory diagnostics. 1st ed.








PRODUTTORE Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Data della revisione (aaaa-mm-gg) 2008-09-24

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Modifiche rispetto alla versione precedente

CARATTERISTICHE PRESTAZIONALI: I risultati ottenuti nei singoli laboratori possono differire dai dati sulle prestazioni riportati.

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ŠIOS PAKUOTĖS INFORMACINIS LAPELIS TINKAMAS NAUDOTI UŽ JAV RIBŲ. BET KOKIA NUORODA Į

KONELAB SYSTEMS APIMA IR T PRODUKTŲ SERIJĄ.

PASKIRTIS Skirtas in vitro kiekybiniam lipazės koncentracijos nustatymui žmogaus serume ir plazmoje, naudojant Konelab analizatorius. Visi tyrimų rezultatai turi būti interpretuojami atsižvelgiant į klinikinį kontekstą.

SANTRAUKA (1) Lipazė yra enzimai, kurie hidrolizuoja ilgųjų riebalinių rūgščių glicerolio eterius. Enzimai ir jų kofermentas kolipazė yra sintetinami kasoje, lipazė taip pat nedideliais kiekais sintetinama seilių liaukose bei virškinamojo trakto, plaučių ir žarnų gleivinėje. Tulžies rūgštys ir micelių kolipazė jungiasi su lipidais ir suriša lipazę į substratą/vandeninį junginį. Lipazės kiekio matavimai yra naudojami diagnozuojant kasos veiklos sutrikimus. Aštrių kasos sutrikimų atveju lipazės koncentracija pakyla iki 2-50 kartų virš viršutinės ribos 4-8 valandų nuo pilvo skausmų pradžios bėgyje, didžiausia koncentracija pasiekiama po 24 valandų bei sumažėja per 8-14 dienų. Padidintos lipazės koncentracijos yra stebimos chroniško pankreatito ir kasos latako obstrukcijos atvejais.

PROCEDŪROS PRINCIPAS Enziminis spalvinis testas. Sintetinės kilmės lipazės substratas (1.2-o-dilauril-rak-glicero-3-gliutarinės rūgšties-(6-metilresorufinas) eteris) yra pridedamas į mikroemulsiją, kuri kanalizuojant lipazėi skyla esant kolipazėi ir tulžies rūgštims. Kolipazės ir tulžies rūgščių derinio dėka šis preparatas yra tinkamas pankreatinei lipazei diagnozuoti bei dėl lipolitinių enzimų ir eteratų nesukelia pašalinių reakcijų. Reagento sudėtis yra optimizuota, todėl nėra serumo matricos efekto. Susidaręs metilverolsulfino eteris savaime skyla į metilverolsulfiną. Šių raudonų dažų absorbcija yra tiesiogiai proporcinga lipazės aktyvumui mėginyje. Lipazė katalizuoja šią reakciją:

1.2-o-Dilauril-rak-glicero-3-gliutarininės rūgšties(6-metilrezorufino) eteris < Lipazė / kolipazė >

1.2-o-Dilauril-rak-glicerinas + gliutarinė rūgšties-(6-metilrezorufino)-eteris

Gliutarinė rūgšties-(6-metilrezorufino)-eteris spontaniškas skilimas_ >

Gliutarinė rūgštis + metilrezorufinas Absorbcijos gebos padidėjimas yra nustatomas fotometriškai.

INFORMACIJA APIE REAGENTUS A reagentas: 4 x 20 ml B reagentas: 2 x 10 ml


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Reagentų koncentracijos Reagentas A: Tri-buferis (pH 8.0) 50 mmol/l Taurodezoksicholatas 4.3 mmol/l Dezoksicholatas 8 mmol/l Kalcio chloridas 15 mmol/l Kolipazė 2.2 mg/l Detergentas, konservantas Reagentas B: Tartrato buferis (pH 4.0) 7.5 mmol/l Taurodezoksicholatas 17 mmol/l Spalvinis substratas 0.65 mmol/l Koemulgatorius, stabilizatorius, konservantas

Atsargumo priemonės Tik in vitro diagnostiniam naudojimui. Laikykitės įprastų atsargumo priemonių, kurios būtinos dirbant su laboratoriniais reagentais. Atsargiai elkitės su lipaze, kaip ir su daugeliu kitų klinikinių regentų, sudėtyje turinčių lipazę ar dideles detergentų koncentracijas. Laikykitės ypatingo atsargumo naudodami kartu su tokiomis medžiagomis kaip Triglycerides, HDL, LDL ir visais Cholesterol reagentais. Prieš naudojant su kitais mėginiais naudotas pipetes ir kitus stiklinius įrankius būtina kruopščiai išvalyti.

Paruošimas Reagentai paruošti naudojimui. Pastaba: Kai dedate reagento buteliukus ar indus į Konelab analizatorių, patikrinkite ar prie buteliuko kaklelio arba reagento paviršiuje nėra burbuliukų.

Saugojimas ir pastovumas Reagentai uždarytuose buteliukuose yra pastovūs prie 2…8 °C temperatūros iki galiojimo datos, užrašytos ant etiketės. Neužšaldykite reagentų. Savo Konelab analizatoriaus Naudojimo instrukcijoje rasite informaciją apie reagentų stabilumą. MĖGINIŲ SURINKIMAS Mėginio rūšis Galima naudoti serumą arba heparino plazmą.

Atsargumo priemonės Su žmonių mėginiais reikia dirbti ir juos šalinti taip, lyg jie būtų potencialiai užkrečiami.

Laikymo sąlygos

Stabilus: 7 dienas esant 20…25 °C 7 dienas esant 4…8 °C 1 metams esant - 20 °C

TYRIMO TVARKA Informacija apie Konelab analizatoriaus naudojimo automatizuotą procedūrą pateikiama Naudojimo žinyne ir Naudojimo instrukcijose. Prietaisą naudojant Thermo Fisher Scientific Oy nenurodytoms procedūroms, negalima garantuoti tyrimo sėkmės ir todėl jo pritaikomumą turi įvertinti vartotojas.

Skiriamos medžiagos Prieš tai aprašyti reagentai.

Būtinos, bet neskiriamos medžiagos Toliau aprašytos kontrolinės medžiagos ir kalibratorius. Ploviklis, skirtas išvengti abipusio užteršimo grėsmės, pvz. WashFluid, kodas 981842.

Kalibravimas Pagal Jūsų Konelab analizatoriaus naudojimo instrukcijas naudokite eCal, kodas 981830.

Sietis: Žr. eCal pakuotėje esantį informacinį lapelį.

Kokybės valdymas Naudokite kokybės valdymo mėginius bent kartą per dieną ir po kiekvieno kalibravimo, taip pat kiekvieną kartą, kai naudojate naują reagento buteliuką. Kontrolinės medžiagos: Nortrol, kodas 981043 Abtrol, kodas 981044 Kontrolės intervalai ir apribojimai turi būti pritaikyti individualios laboratorijos poreikiams. Kokybės valdymo mėginių rezultatai turi patekti į iš anksto laboratorijos nustatytas ribas.

REZULTATŲ APSKAIČIAVIMAS Konelab analizatorius automatiškai apskaičiuoja rezultatus, naudojant kalibravimo kreivę.

Kalibravimo kreivė (pavyzdys)

Konelab 20/30/60. Kalibravimo kreivė priklauso nuo partijos.

PROCEDŪROS RIBOTUMAI

Interferencija Kriterijus: pradinių verčių atstatymas + 10% tikslumu. Bilirubinas: Iki 1000 µmol/l (60 mg/dl) interferencija nepastebėta. Hemoglobinas: Iki 5 g/l hemoglobino hemolizate interferencija nepastebėta. Lipemija: Iki 6.9 mmol/l (600 mg/dl) trigliceridų interferencija nepastebėta. Askorbo rūgštis: Iki 1700 µmol/l (30 mg/dl) trigliceridų interferencija nepastebėta. Lipazės tyrimui atlikti rekomenduojama naudoti Konelab sw 6.6 arba vėlesnę versiją. Jei naudojate senesnę nei 6.6 sw versiją, skaitykite specialias plovimo instrukcijas.

NUMATOMOS VERTĖS (7) Serumas ir plazma: ≤ 60 U/l Šios vertės turi būti naudojamos tik kaip orientyras. Rekomenduojama, kad kiekviena laboratorija patikrintų šį diapazoną ar nustatytų atskaitos intervalą aptarnaujamai populiacijai.

MATAVIMO SRITIS 16 - 200 U/l Praplėsta matavimo sritis antrą kartą atskiedus: 16 - 1000 U/l.

EKSPLOATACIJOS CHARAKTERISTIKOS Individualiose laboratorijose gauti rezultatai gali skirtis nuo pateiktų duomenų.

Aptikimo ribos 8 U/l Aptikimo riba žymi žemiausią išmatuojamą koncentraciją/ aktyvumą, kurį galima atskirti nuo nulio. Ji apskaičiuojama kaip nulinio mėginio koncentracija + 3 SD (serijoje, n=20).

Netikslumas (rezultatų vienetas vnt/I) Vidutinis

36.7 Vidutinis

54.0 SD CV% SD CV% Serijoje 0.8 2.2 1.1 2.0 Kas dieną 2.1 5.7 3.2 6.0 Viso 2.5 6.8 3.8 7.0

Tikslumo studija atlikta pagal gaires, išdėstytas NCCLS dokumente EP5-A, 10 dienų naudojant Konelab 30, matavimų skaičius buvo n = 40.

Metodų palyginimas Palyginimų studija atlikta, kaip etaloną naudojant komerciškai prieinamą Lipazé metodą. Linijinė regresija (rezultatų vienetas U/I): y = 1.09 x - 7.8 r = 0.996 n = 101

LITERATŪRA 1. Lorentz K. Lipase. In: Thomas L, editor. Clinical laboratory diagnostics. 1st ed.








GAMINTOJAS Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Tel. +358 9 329 100, Faksas +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Peržiūros data (mmmm-mm-dd) 2008-09-24

Pokyčiai nuo ankstesnės versijos

EKSPLOATACIJOS CHARAKTERISTIKOS: Individualiose laboratorijose gauti rezultatai gali skirtis nuo pateiktų duomenų.

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PAREDZĒTĀ LIETOŠANA Lipāzes in vitro kvantitatīvai noteikšanai cilvēka sērumā un cilvēka plazmā ar Konelab analizatoriem. Visi testa rezultāti ir jāņem vērā, vadoties pēc klīniskā konteksta.

KOPSAVILKUMS (1) Lipāzes ir enzīmi kuri hidrolizē glicerola esterus no garām taukskābju ķēdēm. Enzīms un tā kofaktora kolipāze ir producēti pankreasā, lipāze atrodama arī nelielā daudzumā izdalīta no siekalu dziedzeriem kā arī no kuņģa, plaušu un zarnu trakta mukozes. Žults skābe un kolipāze no micelāriem kompleksiem ar lipīdiem un saistitā lipaze ar substrātu / ūdens savienojumu. Lipāzes noteikšanu izmanto lai izmeklētu pankreatīta slimības. Pie akūta pankreatīta lipāzes koncentrācija uzceļas no 2 līdz 50 noraditām augstakām iedaļām, ierobežojas 4-8 stundu laikā no abdominālo sāpju sākuma, maksimumu sasniedz 24 stundās un nokrītas 8 līdz 14 dienu laikā. Paaugstinātas lipāzes vērtības var tikt novērotas pie hroniska pankereatīta un pankreas kanāla obstrukcijas.

PROCEDŪRAS PRINCIPS Enzimātiskais krāsu tests. Sintētiski producēts lipāzes substrāts (1.2-o-dilauril-rak-glicero-3-glutarik skābes-(6-metilresorufīna) esteris) ir pievienots mikroemulsijai kurai ir īpaša sķelšanās ar lipāzi kolipāzes un žults skābes klātbūtnē. Salikums no kolipāzes un žults skābes dara tos īpašus un drošus pankreas lipāzei bez jebkādas lipolītisko enzīmu vai esterāzes reakcijas vajadzības. Reaģentu kompozīcija ir bijusi rūpīgi optimizēta, tā serumā nav matriksa effekts. Radītais metilresorufīna-esteris ir spontāni degradēts par metilresorufīnu. Šīs sarkanās krāsas absorbance ir tieši proporcionāla lipāzes aktivitatei piemerā. Lipāze katalizē reakciju:

1.2-o-Dilauril-rak-glicero-3-glutarik skābe(6-metilresorufīns) esteris < Lipāze / Kolipāze >

1.2-o-Dilauril-rak-glicerīns + Glutarik skābe-(6-metilresorufīns)-esteris

Glutarik skābe-(6-metilresorufīns)-esteris spontāna degradācija_ >

Glutarik skābe + Metilresorufīns Absorbcijas palielinājums ir noteikts fotometrikāli

REAĢENTU INFORMĀCIJA Reaģents A: 4 x 20 ml Reaģents B: 2 x 10 ml

Reaģentu koncentrācijas Reaģents A: Preču buferšķīdums (pH 8.0) 50 mmol/l Taurodezoksiholāts 4.3 mmol/l Dezoksiholāts 8 mmol/l Kalcija hlorīds 15 mmol/l Kolipāze 2.2 mg/l Tīrīšanas līdzeklis, Konservants Reaģents B: Tartrāta buferšķīdums, (pH 4.0) 7.5 mmol/l Taurodezoksiholāts 17 mmol/l Krāsu Substrāts 0.65 mmol/l Koemulgators, Stabilizētājs, Konservants

Piesardzības pasākumi Tikai in vitro diagnostikas vajadzībām. Nodrošiniet parastos piesardzības pasākumus, kas jāievēro attiecībā uz rīkošanos ar visiem laboratorijas reaģentiem. Tā kā daudzi citi klīniskie reaģenti satur lipāzi vai augstu mazgāšanas līdzekļu koncentrāciju, izvairieties pārnest! Īpaši rūpīgi apejaties ar triglicerīdu kombinācijām, HDL, LDL un kopējiem holesterolu reaģentiem. Pipetes un citus stikla piederumus pēc lietošanas rūpigi jānotīra, pirms izmantošanas citām analīzēm.

Sagatavošana Reaģenti ir gatavi lietošanai. Piezīme: Ievietojot reaģenta pudelītes vai traukus Konelab analizatorā, pārliecinieties, ka pudelītes kakliņā vai uz reaģenta virsmas nav burbuļi.

Uzglabāšana un stabilitāte Reaģenti neatvērtās pudelītēs ir stabili 2…8 °C temperatūrā līdz uzglabāšanas laika, kas uzdrukāts uz etiķetes, beigām. Nesasaldējiet reaģentus. Vienreiz atvērts reaģents ir stabils vismaz 2 mēnešus, ja tas nav piesārņots. Vadieties pēc sava Konelab analizatora pielietojuma piezīmēm, lai iegūtu informāciju par ievietoto reaģentu stabilitāti.

PARAUGU IEGŪŠANA

Parauga tips Var izmantot serumu vai heparīna plazmu.

Piesardzības pasākumi Ar no cilvēkiem iegūtajiem paraugiem ir jārīkojas un no tiem jāatbrīvojas tā, it kā tie būtu iespējami infekciozi.

Uzglabāšana

Stabilitāte: 7 dienas pie 20…25 °C 7 dienas pie 4…8 °C 1 gadu pie - 20 °C

PĀRBAUDES PROCEDŪRA Vadieties pēc Uzziņas Rokasgrāmatas un Pielietojuma Piezīmēm, lai iegūtu informāciju par sava Konelab analizatora automātisko procedūru. Jebkāds pielietojums, kuru nav apstiprinājis Thermo Fisher Scientific Oy , nevar sniegt garantētu rezultātu, tādeļ tas jāizvērtē pašam lietotājam.

Piegādātie materiāli Iepriekš aprakstītie reaģenti.

Nepieciešamie, taču nepiegādātie materiāli Kalibrators un kontroles, kas aprakstītas tālāk. Mazgāšanas šķīdums lai novērstu krustošanas-piesārņošanas risku, piem. WashFluid, code 981842.

Kalibrēšana Lieto eCal, kods 981830, saskaņā ar instrukcijām, kas dotas jūsu Konelab analizatoram. ŠIS IEPAKOJUMA PIELIKUMS IR PIELIETOJAMS

ĀRPUS ASV. JEBKURA ATSAUKSME UZ KONELAB SISTĒMU ATSAUCAS ARĪ UZ T SĒRIJU.

Meklēšana: Attiecībā uz pakojumu ievietojiet eCal.

Kvalitātes Kontrole Izmantojiet kvalitātes kontroles paraugus vismaz reizi dienā, pēc katras kalibrācijas un ikreiz, kad tiek izmantota jauna reaģenta pudele. Pieejamās kontroles: Nortrol, kods 981043 Abtrol, kods 981044 Kontroles intervāli un ierobežojumi ir jāpiemero individuālajām laboratorijas prasībam. Kvalitātes kontroles paraugu rezultātiem ir jāsakrīt ar laboratorijas iepriekš noteiktajiem limitiem.

REZULTĀTU APRĒĶINĀŠANA Konelab analizators automātiski aprēķina rezultātus, izmantojot kalibrēšanas līkni.

Kalibrēšanas līkne (piemērs)

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Konelab 20/30/60. Kalibrēšanas līkne ir atkarīga no daudzuma.

PROCEDŪRAS IEROBEŽOJUMI

Mijiedarbiba Kritērijs: Atjaunošana ± 10 % robežās no sakotnējām vērtībām. Bilirubīns: Interference nav novērota līdz 1000 µmol/l (60 mg/dl) Hemoglobīns: Hemoglobīna koncentrācija lidz 5 g/l interference nav novērota. Lipēmija: interference nav novērota līdz aptuveni 6.9 mmol/l (600 mg/dl) Askorbīnskābe: Askorbīnskābei interference nav atrasta līdz 1700 µmol/l (30 mg/dl). Lipāžu pārbaudei ieteicams izmantot Konelab sw versiju 6.6 vai jaunāku. Ja tiek izmantota vecāka sw versija, lūdziet atsevišķu mazgāšanas instrukciju.

PAREDZAMĀS VĒRTĪBAS (7) Serumā un plasmā: ≤ 60 U/l Pēdiņās ietvertās vērtības ir jāuztver tikai kā uzziņas vērtības. Ieteicams, lai katra laboratorija verificētu šo diapazonu vai izstrādātu uzziņas intervālu populācijai, kam tā darbojas.

MĒRĪŠANAS DIAPAZONS 16 - 200 U/l Paplašināts mērīšanas diapazons pēc sekundāras atšķaidīšanas: 16 - 1000 U/l.

VEIKTSPĒJAS RAKSTUROJUMS Rezultāti, kas iegūti atšķirīgās laboratorijās, var atšķirties no dotajiem veiktspējas datiem.

Uztveršanas robeža 8 U/l Uztveršanas robeža ir zemākā izmērāmā koncentrācija/aktivitāte, ko var atšķirt no nulles. Tā tiek aprēķināta kā nulles parauga koncentrācija + 3 SD (darbības laikā, n=20).

Neprecizitāte (rezultāta vienība U/l) Vidējais

36.7 Vidējais

54.0 SD CV% SD CV% Darbības laikā 0.8 2.2 1.1 2.0 Ar dienas starpību 2.1 5.7 3.2 6.0 Kopā 2.5 6.8 3.8 7.0

Precizitātes izpēte tika veikta saskaņā ar NCCLS Dokumentu EP5-A, ka rokasgramatu izmantojot un Konelab 30, 10 dienu laikā, kur mērījumu skaitlis bija n = 40.


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Metodes salīdzināšana Salīdzināšanas izpēte tikai veikta, izmantojot komerciāli pieejamu lipāzes metodi kā atsauci. Lineārā regresija (rezultāta vienība U/l): y = 1.09 x - 7.8 r = 0.996 n = 101

LITERATŪRA 1. Lorentz K. Lipase. In: Thomas L, editor. Clinical Laboratory Diagnostics. 1st ed.




activity. 5. 37 °C, Part. Adv Clin Enzymol 1986;4:60-7. 6. Borgström B. The action of bile salts and other detergents on pancreatic lipase and




RAŽOTĀJS Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Talr. +358 9 329 100, Fakss +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Pārskatīšanas datums (gggg-mm-dd) 2008-09-24

Veiktās izmaiņas

VEIKTSPĒJAS RAKSTUROJUMS: Rezultāti, kas iegūti atšķirīgās laboratorijās, var atšķirties no dotajiem veiktspējas datiem.

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Konelab™ / Seria T LIPASE (Colorimetric) LIPASE (metoda kolorymetryczna)

981846 4 x 20 ml + 2 x 10 ml

PRZEZNACZENIE Do analiz ilościowych stężenia lipazy w ludzkiej surowicy, osoczu lub moczu, w warunkach in vitro, w analizatorach Konelab. Wyniki wszystkich testów należy interpretować w kontekście danych klinicznych.

OMÓWIENIE (1) Lipazy to enzymy hydrolizujące estry glicerolu i długołańcuchowych kwasów tłuszczowych. Enzymy te wraz z kofaktorem - kolipazą są produkowane w trzustce. Lipaza jest także wydzielana w małych ilościach przez gruczoły ślinowe, a także przez śluzówkę żołądka, płuc i jelit. Kwasy żółciowe i kolipaza tworzą z kwasami żółciowymi kompleksy micelarne oraz wiążą lipazę na granicy faz substrat/woda. Poziom lipazy oznacza się przy diagnostyce zaburzeń funkcji trzustki. W ostrym zapaleniu trzustki stężenie lipazy rośnie, przekraczając w ciągu 4-8 godzin od początku bólu brzucha 2-50-krotnie górną granicę wartości referencyjnych. Stężenie osiąga szczyt po 24 godzinach i spada przez 8 do 14 dni. Podwyższone wartości stężenia lipaz obserwuje się także w przewlekłym zapaleniu trzustki oraz niedrożności przewodu trzustkowego.

ZASADA DZIAŁANIA TESTU Jest to enzymatyczny test barwny. Do mikroemulsji, która jest specyficznie rozbijana przez lipazę w obecności kolipazy i kwasów żółciowych, dodaje się syntetyczny substrat dla lipazy (ester kwasu 1.2-o-dilaurylo-rac-glicero-3-glutarowego (6-metylorezorufiny)). Połączenie kolipazy i kwasów żółciowych sprawia, że test ten jest pewny i specyficzny dla lipazy trzustkowej, nie dając żadnych reakcji z enzymami lipolitycznymi lub esterazami. Połączenie odczynników dokładnie zoptymalizowano tak, że nie występują efekty ze strony macierzy osocza. Wytworzony ester metylorezorufiny ulega spontanicznej degradacji do metylorezorufiny. Poziom absorbancji tego czerwonego barwnika jest bezpośrednio proporcjonalny do aktywności lipazy w próbce. Lipaza katalizuje reakcję

Ester kwasu 1.2-o-dilaurylo-rac-glicero-3-glutarowego (6-metylorezorufiny)

< Lipaza / Kolipaza > Gliceryna 1.2-o-dilaurylo-rac + kwas glutarowy (6-metylorezorufiny)

Ester kwasu glutarowego (6-metyloresorufiny)

spontaniczna degradacja_ > Kwas glutarowy + metylorezorufina

Wzrost absorbancji określa się fotometrycznie.

INFORMACJE O ODCZYNNIKACH Odczynnik A: 4 x 20 ml Odczynnik B: 2 x 10 ml

Stężenia odczynników Odczynnik A: Bufor ogólny (pH 8.0) 50 mmol/l Taurodezoksycholan 4.3 mmol/l Dezoksycholan 8 mmol/l Chlorek wapnia 15 mmol/l Kolipaza 2.2 mg/l Detergent, konserwant Odczynnik B: Bufor winianowy (pH 4.0) 7.5 mmol/l Taurodezoksycholan 17 mmol/l Substrat barwny 0.65 mmol/l Koemulgator, stabilizator, konserwant

Środki ostrożności Do stosowania wyłącznie w diagnostyce in vitro. Należy przestrzegać standardowych środków ostrożności obowiązujących podczas pracy ze wszystkimi odczynnikami laboratoryjnymi. Ponieważ lipazę lub detergenty w dużym stężeniu zawierają także inne odczynniki chemiczne, należy unikać ich przenoszenia! Szczególną ostrożność należy zachować w połączeniu z odczynnikami do oznaczania triglicerydów, HDL, LDL i cholesterolu całkowitego. Przed użyciem pipet i szkła laboratoryjnego do innych analiz należy je dokładnie wyczyścić.

Przygotowanie oznaczenia Odczynniki są gotowe do użycia. Uwaga: Wkładając fiolki lub naczynia z odczynnikami do analizatora Konelab, należy się upewnić, ze w szyjce naczynia ani na powierzchni odczynnika nie ma pęcherzyków powietrza.

Przechowywanie i stabilność Odczynniki zachowują stabilność do dnia upływu terminu ważności podanego na etykiecie, o ile są przechowywane w temperaturze 2...8 °C w zamkniętych fiolkach. Nie należy zamrażać odczynników. Po otwarciu odczynnik zachowuje stabilność przez 2 miesiące, pod warunkiem, że nie dopuści się do jego zanieczyszczenia. Dane dotyczące stabilności odczynników do oznaczeń cholesterolu znajdujących się w analizatorze Konelab przedstawiono w Uwagach dotyczących obsługi analizatora Konelab.

POBIERANIE PRÓBEK

Typ próbki Do testu można stosować próbki surowicy lub heparynizowanego osocza.

Środki ostrożności Materiał biologiczny pochodzenia ludzkiego powinien być traktowany jako potencjalnie zakaźny.

Przechowywanie

Trwałość: 7 dni w 20…25 °C 7 dni w 4…8 °C 1 rok w -20 °C

SPOSÓB WYKONANIA TESTU Informacje dotyczące zautomatyzowanej procedury stosowanej w analizatorach Konelab przedstawiono w Instrukcji obsługi i Uwagach dotyczących obsługi. Nie gwarantuje się odpowiedniej wydajności żadnych zastosowań, które nie otrzymały atestu firmy Thermo Fisher Scientific Oy . Tego typu zastosowania powinny zostać poddane walidacji przez Użytkowników.

Dostarczone materiały Odczynniki zgodnie z opisem powyżej.

Materiały niezbędne do wykonania badania, lecz nie dostarczone w komplecie Kalibratory i odczynniki wzorcowe, zgodnie z opisem poniżej. Płyn do płukania stosowany celem wykluczenia ryzyka zanieczyszczenia krzyżowego, np. WashFluid, kod 981842.

NINIEJSZA ULOTKA OPAKOWANIA PRZEZNACZONA JEST DO STOSOWANIA POZA GRANICAMI USA. WSZELKIE ODNIESIENIA DO SYSTEMÓW KONELAB ODNOSZĄ SIĘ RÓWNIEŻ DO SERII T.

Kalibracja Należy stosować odczynnik eCal, nr kat. 981830, zgodnie z instrukcjami dołączonymi do analizatora Konelab.

Zgodność z normami: Patrz wkładki informacyjne dołączone do odczynników eCal.

Kontrola jakości Należy badać próbki kontroli jakości co najmniej raz dziennie oraz po każdej kalibracji i po rozpoczęciu stosowania nowej butelki odczynnika. Dostępne odczynniki kontrolne: Nortrol (nr kat. 981043) Abtrol (nr kat. 981044) Przedziały czasowe i limity kontroli jakości należy dostosować do wymogów poszczególnych pracowni analitycznych. Wyniki próbek używanych do kontroli jakości powinny zawierać się w granicach ustalonych w danej pracowni analitycznej.

OBLICZANIE WYNIKÓW Wyniki są obliczane automatycznie w analizatorze Konelab na podstawie krzywej kalibracyjnej.


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Krzywa kalibracyjna (przykład)

Konelab 20/30/60. Przebieg krzywej kalibracyjnej zależy od partii odczynników.

OGRANICZENIA PROCEDURY

Zakłócenia Kryterium: Wartość odzysku wynosi ±10% wartości początkowych. Bilirubina: nie stwierdzono zakłóceń w przypadku stężeń do 1000 µmol/l (60 mg/dl). Hemoglobina: nie stwierdzono zakłóceń w przypadku hemoglobiny w stężeniach do 5 g/l. Lipemia: nie stwierdzono zakłóceń w przypadku triglicerydów w stężeniach do 6.9 mmol/l (600 mg/dl). Kwas askorbinowy: nie stwierdzono zakłóceń w przypadku stężeń kwasu askorbinowego do 1700 µmol/l (30 mg/dl). Do oznaczania lipazy zaleca się stosowanie Konelab sw wersji 6.6 lub wyższej. W przypadku stosowania wersji niższej niż 6.6 należy uzyskać specjalne instrukcje dotyczące mycia.

OCZEKIWANE WAurowica i

RTOŚCI (7) S osocze: ≤ 60 U/l Przedstawione wielkości należy traktować jedynie jako wartości orientacyjne. Zaleca się, by w każdej pracowni analitycznej zweryfikowano podane zakresy lub ustalono własny przedział referencyjny dla badanej populacji.

ZAKRES POMIAROWY 16 - 200 U/l

akres pomiarowy po powtórnym rozcieńczeniu: Rozszerzony z16 - 1000 U/l.

CHARAKTERYSTYKA WYDAJNOŚCIOWA Wyniki uzyskane w poszczególnych pracowniach analitycznych mogą się różnić od podanych parametrów wydajnościowych.

Granica wykrywalności 8 U/l Granica wykrywalności, oznaczająca najniższe mierzalne stężenie (aktywność), które można odróżnić od zera. jest obliczana jako stężenie próbki zerowej + 3 SD (w jednej serii, n=20).

Niedokładność (wynik w U/l) Ś a redni

36.7 Ś a redni

54.0 SD CV% SD CV% W jednej serii 0.8 2.2 1.1 2.0 W różnych dniach 2.1 5.7 3.2 6.0 Sumarycznie 2.5 6.8 3.8 7.0

Badanie precyzji przeprowadzono na podstawie wytycznych zawartych w dokumencie NCCLS EP5-A, w analizatorze Konelab 30, wykonując 40 oznaczeń w ciągu 10 dni.

Porównanie metod Przeprowadzono badanie porównawcze, stosując dostępną w handlu metodę lipazową w charakterze metody referencyjnej. Regresja liniowa (wynik w U/l): y = 1.09 x - 7.8 r = 0.996 n = 101

LITERATURA 1. Lorentz K. Lipase. In: Thomas L, editor. Clinical laboratory diagnostics. 1st ed.








PRODUCENT Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa tel. +358 9 329 100; faks +358 9 3291 0300

Lipazy

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Aktivitás (U/l)

Odc

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www.thermo.com/konelab

Data zatwierdzenia (rrrr-mm-dd) 2008-09-24

Zmiany w stosunku do poprzedniej wersji

CHARAKTERYSTYKA WYDAJNOŚCIOWA: Wyniki uzyskane w poszczególnych pracowniach analitycznych mogą się różnić od podanych parametrów wydajnościowych.

PT

Konelab™ / Série T LIPASE (Colorimetric) LIPASE (Colorimétrico)

981846 4 x 20 ml + 2 x 10 ml

ESTE FOLHETO INFORMATIVO É APLICÁVEL PARA USO FORA DOS E.U.A. QUALQUER REFERÊNCIA AOS SISTEMAS KONELAB TAMBÉM SE REFERE À SÉRIE T.

USO PRETENDIDO Para a determinação quantitativa in vitro da concentração de lipase no soro e plasma humanos nos analisadores Konelab. Todos os resultados dos testes devem ser interpretados tendo em conta o contexto clínico.

SUMÁRIO (1) As lipases são enzimas que hidrolizam os ésteres de glicerol de ácidos gordos longos. A enzima e o seu cofactor colipase são produzidos no pâncreas, sendo a lipase igualmente segregada em pequenas quantidades pelas glândulas salivares, assim como pela mucosa gástrica, pulmonar e intestinal. Os ácidos biliares e a colipase formam complexos micelares com os lípidos e ligam a lipase na interface substrato/água. A determinação da lipase é utilizada para a investigação de distúrbios pancreáticos. Na pancreatite aguda as concentrações de lipase sobem até 2-50 vezes o limite de referência superior 4-8 horas após o início da dor abdominal, atingindo o pico no espaço de 24 horas e diminuindo no espaço de 8 a 14 dias. Valores elevados de lipase também podem ser observados na pancreatite crónica e na obstrução do ducto pancreático.

PRINCÍPIO DO PROCEDIMENTO Teste enzimático colorimétrico. Um substrato de lipase sinteticamente produzido (1.2-o-dilauril-rac-glicero-3-ácido glutárico-(6-metilresorufina)-éster) é adicionado a uma microemulsão que é especificamente separada pela lipase na presença da colipase e dos ácidos biliares. A ombinação da colipase e dos ácidos biliares torna-o específico e fiável para a lipase pancreática sem qualquer reacção devido às enzimas lipolíticas ou esterases. A composição dos reagentes foi devidamente optimizada por forma a não haver efeitos de matriz de soro. O éster metilresorufina gerado é espontaneamente degradado para metilresorufina. A absorvância por este corante vermelho é directamente proporcional à

stra. actividade da lipase na amo lipase catalisa a reacção: A

1.2-o-Dilauril-rac-glicero- 6-metilresorufina)-éster 3-ácido glutárico (

<Lipase / Colipase > 1.2-o-Dilauril-rac-glicerina + ácido glutárico-(6-metilresorufina)-éster

Ácido glutár a)-éster ico-(6-metilresorufin

degradação espontânea _ > Ácido glutárico + Metilresorufina

O aumento da absorvância é determinado fotometricamente

INFORMAÇÕES DOS REAGENTES Reagente A: 4 x 20 ml Reagente B: 2 x 10 ml

Concentrações dos reagentes R A: eagente Tampão Goods (pH 8.0) 50 mmol/l Taurodesoxicolato 4.3 mmol/l Desoxicolato 8 mmol/l Cloreto de cálcio 15 mmol/l

2.2 mg/l Colipase Detergente, Conservante

eagente R B:

Tampão Tartrato (pH 4.0) 7.5 mmol/l Taurodesoxicolato 17 mmol/l

0.65 mmol/l Substrato de cor Coemulgador, Estabilizador, Conservante

Precauções Só para uso diagnóstico in vitro. Adopte as precauções habitualmente requeridas para o manuseamento dos reagentes de laboratório. Dado que muitos outros reagentes clínicos contêm lipase ou altas concentrações de detergentes, evite transferências! Deve ter-se um cuidado especial em combinação com reagentes de Triglicéridos, HDL, LDL e Colesterol total. As pipetas e outros materiais de vidro devem ser devidamente limpos após a sua utilização noutros ensaios.

Preparação Reagentes prontos a usar. Nota: Certifique-se de que não há nenhuma bolha no gargalo do frasco ou na superfície do reagente quando inserir os frascos ou as ampolas do reagente no analisador Konelab.


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Armazenamento e estabilidade Os reagentes que se encontram em frascos fechados permanecem estáveis até à data indicada no rótulo, desde que mantidos a 2…8°C. Não congelar os reagentes. Uma vez abertos, os reagentes mantêm-se estáveis durante pelo menos dois meses se a contaminação for evitada. Consulte as Notas de aplicação do analisador Konelab para obter mais informações sobre a estabilidade dos reagentes quando inseridos no analisador.

COLHEITA DA AMOSTRA

Tipo de amostra Pode utilizar-se soro ou plasma de heparina.

Precauções As amostras humanas devem ser manuseadas e eliminadas como se fossem potencialmente infecciosas.

Armazenamento

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Estabilidade: 7 dias a 20…25°C 7 dias a 4…8°C 1 ano a - 20°C

PROCEDIMENTO Consulte o Manual de referência e as Notas de aplicação para obter mais informações sobre o procedimento automático do analisador Konelab. Qualquer aplicação não validada pela Thermo Fisher Scientific Oy não pode ter o desempenho garantido e, por isso, tem de ser avaliada pelo utilizador.

Materiais fornecidos Reagentes conforme descrito acima.

Materiais necessários mas não incluídos Calibrador e controlos conforme indicado abaixo. Líquido de lavagem para eliminar os riscos de contaminação cruzada, ex.: Fluido de Lavagem, código 981842.

Calibragem Utilize eCal, código 981830 de acordo com as instruções fornecidas com o analisador Konelab.

Rastreabilidade: Consulte o folheto informativo de eCal.

Controlo de qualidade Utilize amostras de controlo de qualidade pelo menos uma vez por dia, depois de cada calibragem e sempre que utilizar uma garrafa de reagente nova. Controlos disponíveis: Nortrol, código 981043 Abtrol, código 981044 Os intervalos e limites do controlo devem ser adaptados aos requisitos individuais de cada laboratório. Os resultados das amostras de controlo de qualidade devem ficar dentro dos limites predefinidos pelo laboratório.

CÁLCULO DE RESULTADOS Os resultados são calculados automaticamente pelo analisador Konelab com uma curva de calibragem.

Curva de calibragem (exemplo)

Konelab 20/30/60. A curva de calibragem depende do lote.

LIMITAÇÕES DO PROCEDIMENTO

Interferência Critério: Recuperação dentro de ± 10% dos valores iniciais. Bilirrubina: Nenhuma interferência detectada até 1000 µmol/l (60 mg/dl). Hemoglobina: Nenhuma interferência detectada até 5 g/l de hemoglobina. Lipemia: Nenhuma interferência detectada até 6.9 mmol/l (600 mg/dl) de triglicéridos. Ácido ascórbico: Nenhuma interferência detectada até 1700 µmol/l (30 mg/dl) de ácido ascórbico. Para o teste de lipase recomenda-se vivamente o Konelab sw versão 6.6 ou superior. Se for usada uma versão anterior a 6.6, solicite instruções especiais para a lavagem.

VALORES DE REFERÊNCIA (7) Soro e plasma: ≤ 60 U/l Os valores indicados devem servir apenas como uma referência. Recomendamos que cada laboratório verifique este intervalo ou obtenha um intervalo de referência para a população que serve.

INTERVALO DE MEDIÇÃO 16 - 200 U/l Intervalo de medição alargado depois da diluição secundária: 16 - 1000 U/l.

CARACTERÍSTICAS DE DESEMPENHO Os resultados obtidos em laboratórios individuais podem diferir dos dados de desempenho fornecidos.

Limite de detecção 8 U/l O limite de detecção representa a concentração/actividade mensurável mais baixa passível de ser distinguida de zero. É calculado como a concentração da amostra de zero + 3 DS (ensaio, n=20).

Imprecisão (unidade do resultado U/l) Média

36.7 Média 54.0

DS CV% DS CV% Ensaio 0.8 2.2 1.1 2.0 Vários dias 2.1 5.7 3.2 6.0 Total 2.5 6.8 3.8 7.0

Efectuou-se um estudo de precisão utilizando o Documento EP5-A da NCCLS e um analisador Konelab 30 durante 10 dias, com um número de medições equivalente a n = 40.

Comparação de métodos Efectuou-se um estudo comparativo utilizando um método disponível no mercado como referência. Regressão linear (unidade do resultado U/l): y = 1.09 x - 7.8 r = 0.996 n = 101

LITERATURA 1. Lorentz K. Lipase. In: Thomas L, editor. Clinical laboratory diagnostics. 1st ed.








FABRICANTE Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Data de revisão (yyyy-mm-dd) 2008-09-24

Alterações em relação à versão anterior

CARACTERÍSTICAS DE DESEMPENHO: Os resultados obtidos em laboratórios individuais podem diferir dos dados de desempenho fornecidos.

Lipase

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Actividade (U/l)

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LIPASE (Colorimetric) LIPÁZA (Kolorimetrická analýza) 981846 4 x 20 ml + 2 x 10 ml

POUŽITIE Na in vitro kvantitatívne stanovenie koncentrácie lipázy v ľudskom sére a plazme v analyzátoroch Konelab. Všetky výsledky testov musia byť interpretované s ohľadom na klinický kontext.

ZHRNUTIE (1) Lipázy sú enzýmy, ktoré hydrolyzujú estery glycerolu a dlhých mastných kyselín. Enzým a jeho kofaktor kolipáza sa tvoria v pankrease, lipáza sa v malých množstvách vylučuje aj zo slinných žliaz, ako aj gastrickej, pulmonálnej a intestinálnej mukózy. Žlčové kyseliny a kolipáza tvoria micelárne komplexy s lipidmi a viažu lipázu na rozhranie substrát/voda. Stanovovanie lipázy sa využíva pri diagnostike ochorení pankreasu. Koncentrácia lipázy sa pri akútnej pankreatitíde zvyšuje na 2-50 násobok horného limitu referenčnej hodnoty počas 4-8 hodín po vzniku abdominálnej bolesti, vrcholí po 24 hodinách a znižuje sa počas 8-14 dní. Zvýšené hladiny lipázy môžeme pozorovať aj pri chronickej pankreatitíde a obštrukcii ductus pancreaticus..

PRINCÍP METÓDY Enzymatický kolorimetrický test. Synteticky produkovaný substrát lipázy (ester (6- metylrezorufín) kyseliny 1.2-o-dilauryl-rac-glycero-3-glutárovej) sa pridáva k mikroemulzii, ktorá sa špecificky štiepi prostredníctvom lipázy v prítomnosti kolipázy a žlčových kyselín. Test je špecifický a spoľahlivý pre pankreatickú lipázu, keďže prebieha v prítomnosti kolipázy a žlčových kyselín, bez reakcie spôsobenej lipolytickými enzýmami alebo esterázami. Zloženie činidiel bolo dôkladne optimalizované, aby sa predišlo nežiadúcim vplyvom zo séra. Vytvorený ester metylrezorufínu sa spontánne degraduje na metylrezorufín. Absorbancia týmto červeným farbivom je priamo úmerná aktivite lipázy vo vzorke. Lipáza katalyzuje reakciu.

Ester (6-metylrezorufín) kyseliny 1.2-o-dilauryl-rac-glycero-3-glutárovej < Lipáza / Kolipáza >

1.2-o-dilauryl-rac-glycerín + Ester (6-metylrezorufín)kyseliny glutárovej

Ester (6-metylrezorufín)kyseliny glutárovej spontánna degradácia>

Kyselina glutárová + metylrezorufín Zvýšenie absorbancie je určené fotometricky

INFORMÁCIE O ČINIDLÁCH Činidlo A: 4 x 20 ml Činidlo B: 2 x 10 ml

Koncentrácie činidiel Činidlo A: Goodov pufer (pH 8.0) 50 mmol/l Taurodezoxycholát 4.3 mmol/l Dezoxycholát 8 mmol/l Chlorid vápenatý 15 mmol/l Kolipáza 2.2 mg/l Detergent, konzervačná látka Činidlo B: Tartrát pufer (pH 4.0) 7.5 mmol/l Taurodezoxycholát 17 mmol/l Farebný substrát 0.65 mmol/l Koemulgátor, stabilizátor, konzervačná látka

Varovanie Len na in vitro diagnostiku. Dodržujte normálne bezpečnostné opatrenia, ktoré sú nevyhnutné pri manipulácii so všetkými laboratórnymi činidlami. Keďže mnoho klinických činidiel obsahuje lipázu, alebo vysokú koncentráciu detergentov, vyhnite sa prenosu! Špeciálna opatrnosť je nutná najmä v kombinácii s triglyceridmi, HDL, LDL a činidlami pri testovaní celkového cholesterolu. Pipety a laboratórne sklo sa musia dôkladne umyť, ak sa používajú na iné testy.

Príprava Činidlá sú pripravené na použitie. Poznámka: Pred vložením nádobiek do analyzátora Konelab skontrolujte, či sa v hrdle nádobky, alebo na povrchu činidla nenachádzajú bubliny.

Uskladnenie a trvanlivosť Činidlá v neotvorených nádobách sú stabilné pri 2…8 °C až do exspiračnej doby vytlačenej na štítku. Činidlá nezmrazujte. Po otvorení sú činidlá stabilná minimálne 2 mesiace ak nedôjde ku kontaminácii. Informácie o stabilite činidiel nájdete v Používateľskej príručke vášho analyzátora Konelab.

ODBER VZORIEK

Typ vzorky Môžete používať sérum, alebo heparinizovanú plazmu.

Varovanie Manipulujte a znehodnocujte ľudské vzorky ako potenciálne infekčný materiál.

Uskladnenie

Trvanlivosť: 7 dní pri 20…25 °C 7 dní pri 4…8 °C 1 rok pri - 20 °C

TESTOVACÍ POSTUP Automatický postup použitia analyzátora Konelab nájdete v manuáli a Používateľskej príručke. Meranie postupom, ktorý nie je validizovaný firmou Thermo Fisher Scientific Oy nie je garantované a musí byť vyhodnotené užívateľom.

Poskytnuté materiály Činidlá popísané vyššie.

Materiály potrebné, ale neposkytované Kalibrátor a kontroly uvedené nižšie. Premývací roztok na elimináciu skríženej kontaminácie, napr. WashFluid, kód 981842.

Kalibrácia Použite eCal, kód 981830 v súlade s inštrukciami k vášmu Konelab analyzátoru.

Odvoditeľnosť: Pozrite si prosím príručku eCal. TENTO PRÍBALOVÝ LETÁK JE URČENÝ PRE

KRAJINY MIMO USA. AKÁKOĽVEK ZMIENKA SYSTÉMOV KONELAB SA VZŤAHUJE AJ NA SÉRIU T.

Kontrola kvality Používajte vzorky na kontrolu kvality aspoň raz denne a vždy, keď použijete novú fľašku s činidlom. Dostupné kontroly: Nortrol, kód 981043 Abtrol, kód 981044 Intervaly a rozmedzia kontrolných hodnôt sa musia prispôsobiť individuálnym požiadavkám laboratória. Výsledné hodnoty kontrolných vzoriek by mali byť v rozmedzí vopred stanoveným laboratóriom.

VÝPOČET VÝSLEDKOV Výsledky sa automaticky vypočítajú Konelab analyzátorom pomocou kalibračnej krivky.

Kalibračná krivka (príklad)

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Aktivita (U/l)

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Konelab 20/30/60. Kalibračná krivka závisí od šarže.

OBMEDZENIA METODIKY

Interferencie Kritérium: Návrat k východziemu stavu ±10% počiatočných hodnôt. Bilirubín: Bez interferencie do 1000 µmol/l (60 mg/dl). Hemoglobín: Bez interferencie do 5 g/l hemoglobínu. Lipémia: Bez interferencie do 6.9 mmol/l (600 mg/dl) triglyceridov. Pre test obsahu lipázy odporúčame použiť softvér Konelab, verzia 6.6. alebo vyššia. Ak použijete softvérovú verziu staršiu ako 6.6., žiadajte o špeciálne inštrukcie pri praní.

OČAKÁVANÉ HODNOTY (7) Sérum a plazma: ≤ 60 U/l Tieto hodnoty slúžia len ako smernica. Odporúča sa, aby si každé laboratórium prispôsobilo rozsah referenčných hodnôt na konkrétnu populáciu.

MERACÍ ROZSAH 16 - 200 U/l Rozšírený merací rozsah po sekundárnom rozriedení: 16 - 1000 U/l.

PREVÁDZKOVÉ CHARAKTERISTIKY Výsledky získané v jednotlivých laboratóriách sa môžu líšiť od daných prevádzkových dát. Hranica citlivosti detekcie 8 U/l Hranica citlivosti detekcie reprezentuje najnižšiu merateľnú koncentráciu/aktivitu, ktorá sa dá odlíšiť od nuly. Vypočíta sa ako koncentrácia nulovej vzorky + 3 SD (počas procesu, n=20).

Nepresnosť (výsledok v jednotkách U/I) Priemer

36.7 Priemer

54.0 SD CV% SD CV% Počas procesu 0.8 2.2 1.1 2.0 Medzi jednotlivými dňami 2.1 5.7 3.2 6.0 Celkovo 2.5 6.8 3.8 7.0

Vykonala sa štúdia presnosti v súlade so smernicami NCCLS dokumentu EP5-A s prístrojom Konelab 30 počas 10 dní, s počtom meraní n = 40.

Porovnanie metódy Vykonala sa porovnávacia štúdia s použitím komerčne dostupnej metódy na meranie lipázy ako referencie. Lineárna regresia (výsledok v jednotkách U/I): y = 1.09 x - 7.8 r = 0.996 n = 101


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BIBLIOGRAFIA 1. Lorentz K. Lipase. In: Thomas L, editor. Clinical laboratory diagnostics. 1st ed.








VÝROBCA Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300 www.thermo.com/konelab

Dátum revízie (RRRR-MM-DD) 2008-09-24

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PREVÁDZKOVÉ CHARAKTERISTIKY: Výsledky získané v jednotlivých laboratóriách sa môžu líšiť od daných prevádzkových dát.

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SV

Konelab™ / T Serien LIPASE (Colorimetric) LIPAS (kolorimetrisk)

981846 4 x 20 ml + 2 x 10 ml

AVSEDD ANVÄNDNING För kvantitativ bestämning in vitro av lipaskoncentration i humant serum och humant plasma på Konelab-analysatorer. Alla testresultat måste tolkas med hänsyn till det kliniska sammanhanget.

SAMMANFATTNING (1) Lipaser är enzymer som hydroliserar glycerolestrar av långa fettsyror. Enzymet och dess kofaktor kolipas produceras i bukspottkörteln. Lipas utsöndras även i små mängder av spottkörtlarna samt av slemhinnor i mage, lungor och tarmar. Gallsyra och kolipas bildar micellkomplex med lipiderna och binder lipas på gränsytan substrat/vatten. Bestämning av lipas används för undersökning av sjukdomar i bukspottkärteln. Vid akut pankreatit stiger lipaskoncentrationen till 2-50 gånger den övre referensgränsen inom 4-8 timmar efter buksmärtor startar. Smärtan är maximal vid 24 timmar och avtar inom 8 till 14 dagar. Förhöjda lipasvärden kan även noteras vid kronisk pankreatit och obstruktion av ductus pancreaticus.

TESTPRINCIP Enzymatisk färgtest. Ett syntetiskt producerat lipassubstrat (1.2-o-dilauryl-rac-glycero-3-glutarsyra-(6-metylresorufin)ester) läggs till i en mikroemulsion som specifikt klyvs av lipas i närvaro av kolipas och gallsyra. Kombinationen av kolipas och gallsyra gör detta specifikt och pålitligt för pankreatisk lipas utan någon reaktion, på grund av lipolytiska enzymer eller esteraser. Reagenssammansättningen har optimerats noga så att inga serummatrixeffekter uppstår. Den metylresorufin-ester som bildas bryts spontant ner till metylresorufin. Absorbans av detta röda färgämne är direkt proportionell mot lipasaktivitet i provet. Lipas katalyserar reaktionen

1.2-o-Dilauryl-rac-glycero-3-glutarsyra(6-methylresorufin)ester < Lipas/Kolipas >

1.2-o-Dilauryl-rac-glycerin + Glutarsyra-(6-metylresorufin)-ester

Glutarsyra-(6-metylresorufin)-ester spontan nedbrytning_ >

Glutarsyra + Metylresorufin Ökningen i absorbans bestäms fotometriskt

REAGENSINNEHÅLL Reagens A: 4 x 20 ml Reagens B: 2 x 10 ml

Koncentrationer av reagenser Reagens A: Goods-buffert (pH 8.0) 50 mmol/l Taurodesoxycholat 4.3 mmol/l Desoxycholat 8 mmol/l Kalciumklorid 15 mmol/l Kolipas 2.2 mg/l Rengöringsmedel, Konserveringsmedel Reagens B: Tartratbuffert (pH 4.0) 7.5 mmol/l Taurodesoxycholat 17 mmol/l Färgsubstrat 0.65 mmol/l Koemulgator, Stabiliseringsmedel, Konserveringsmedel

Försiktighetsåtgärder Endast för in vitro-diagnostik. Vidta normala försiktighetsåtgärder som vid all hantering av laboratorireagenser. I likhet med andra kliniska reagenser som innehåller lipas eller hög koncentration av rengöringsmedel, undvik kvardröjande effekt av tidigare behandling! Var särskilt noga vid kombination med triglycerider, HDL, LDL och totalt kolesterol-reagenser. Pipetter och annat material av glas måste rengöras ordentligt efter att ha använts för andra analyser.

Beredning Reagenserna är färdiga för användning. Obs: Kontrollera att det ej finns bubblor i flaskhalsen eller på ytan av reagensen då behållarna placeras i Konelab-analysatorn.

Förvaring och hållbarhet Reagens i oöppnad behållare är hållbar vid 2…8 °C till på etiketten angivet utgångsdatum. Reagenserna får ej frysas. När de öppnats är reagenserna hållbara i minst två månader om kontamination undviks. Se Application Notes för aktuell Konelab-analysator för information om reagensernas hållbarhet i instrumentet.

PROVTAGNING

Provmaterial Serum och heparinplasma kan användas.

Försiktighetsåtgärder Humana prover ska behandlas som potentiellt smittförande, både vid hantering och kassering.

Förvaring

Hållbarhet: 7 dagar vid 20…25 °C 7 dagar vid 4…8 °C 1 år vid - 20 °C

TESTUTFÖRANDE Se Handhavandemanualen och Application Notes för automatiskt utförande på aktuell Konelab-analysator. Varje applikation som ej har validerats av Thermo Fisher Scientific Oy , kan ej garanteras vad gäller prestanda och måste därför utvärderas av användaren.

Bifogat material Reagenser enligt ovan.

Erforderligt material som ej medföljer Kalibrator och kontroller enligt nedan. Rengöringsvätska för att eliminera riskerna för korskontamination, t.ex. Rengöringsvätska, artikelnr. 981842.

Kalibrering Använd eCal, artikelnr. 981830, enligt instruktionerna för Konelab-analysatorn.

DENNA BIPACKSEDEL GÄLLER UTOM USA. EVENTUELLA HÄNVISNINGAR TILL KONELAB SYSTEMS AVSER ÄVEN T SERIEN.

Spårbarhet: Läs bipacksedeln för eCal.

Kvalitetskontroll Använd kvalitetskontrollprover minst en gång om dagen, efter varje kalibrering och varje gång en ny reagensflaska används. Tillgängliga kontroller: Nortrol, artikelnr 981043 Abtrol, artikelnr 981044 Kontrollens intervall och gränser måste anpassas till laboratoriets egna krav. Resultaten från kvalitetskontrollproven bör ligga inom de av laboratoriet fastställda gränserna.

RESULTATBERÄKNING Resultaten beräknas automatiskt av Konelab-analysatorn med hjälp av en kalibreringskurva.

Kalibreringskurva (exempel)

Lipas

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0,01

0,02

0,03

0,04

0,05

0,06

0 20 40 60 80 100

Aktivitet (U/l)

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(A/m

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Konelab 20/30/60. Kalibreringskurvan är batchberoende.


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BEGRÄNSNINGAR I UTFÖRANDET

Interferens Kriterium: Utbyte inom ±10 % av initialvärdena. Bilirubin: Ingen interferens har konstaterats upp till 1000 µmol/l (60 mg/dl). Hemoglobin: Ingen interferens har konstaterats upp till 5 g/l hemoglobin. Lipemi: Ingen interferens har konstaterats upp till 6.9 mmol/l (600 mg/dl) triglycerider. Askorbinsyra: Ingen interferens har konstaterats upp till 1700 µmol/l (30 mg/dl) askorbinsyra. För lipasanalys rekommenderas Konelab sw-version 6.6 eller senare. Om en sw-version tidigare än 6.6 används, be att få särskilda tvättinstruktioner.

REFERENSOMRÅDE (7) Serum och plasma: ≤ 60 U/l Angivna värden är endast avsedda som vägledning. Vi rekommenderar att varje laboratorium verifierar detta område eller fastställer ett referensintervall för populationen som betjänas.

MÄTOMRÅDE 16 - 200 U/l Utökat mätområde efter sekundär spädning: 16 - 1000 U/l.

UTFÖRANDETS KARAKTERISTIKA Resultaten som erhålls vid varje enskilt laboratorium kan skilja sig från angivna data för prestanda.

Detektionsgräns 8 U/l Detektionsgränsen representerar lägsta mätbara koncentration/aktivitet som kan skiljas från noll. Den beräknas som koncentrationen av nollprov + 3 SD (standardavvikelser) (inom serien, n=20).

Imprecision (resultatenhet U/l) Medel

36.7 Medel 54.0

SD CV% SD CV% Inom serie 0.8 2.2 1.1 2.0 Mellandags 2.1 5.7 3.2 6.0 Totalt 2.5 6.8 3.8 7.0

En precisionsstudie har utförts enligt anvisningarna i NCCLS Dokument EP5-A med Konelab 30 under 10 dagar. Antalet mätningar var n = 40.

Metodjämförelse En jämförelsestudie har utförts med en kommersiellt tillgänglig lipasmetod som referens. Linjär regression (resultatenhet U/l): y = 1.09 x - 7.8 r = 0.996 n = 101

LITTERATUR 1. Lorentz K. Lipase. In: Thomas L, editor. Clinical laboratory diagnostics. 1st ed.








TILLVERKARE Thermo Fisher Scientific Oy Clinical Diagnostics Finland Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa Tel. +358 9 329 100, Fax +358 9 3291 0300

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www.thermo.com/konelab

Rev. datum (åååå-mm-dd) 2008-09-24

gÄndringar från tidigare utgåva

UTFÖRANDETS KARAKTERISTIKA: Resultaten som erhålls vid varje enskilt laboratorium kan skilja sig från angivna data för prestanda.

Documents

Konelab/T Series LIPASE (Colorimetric).pdf · Konelab™ / T Series LIPASE (Colorimetric) g hts reserved. ... Refer to the Reference Manual and Application Notes for an automated