Interpretacion Del Hemograma Canino y Felino

Interpretacin del hemogramaCanino y Felino.

Alan H. Rebar, DVM, PhD

Nestl Purina Pet Care Company Interpretacin del Hemograma Canino y Felino

Clinical Handbook Series

Nestl Purina PetCare CompanyCheckerboard Square

St. Louis, Missouri

Interpretacin del Hemograma Canino y FelinoAlan H. Rebar, DVM, PhD


Publicado por The Gloyd Group. Inc.Wilmington, Delaware

2003 por Nestl Purina PetCare CompanyDerechos reservados.Impreso en Argentina

Nestl Purina PetCare Company: Checkerboard Square. St. Louis, Missouri, 63188Primera impresin 1998

Este libro es protegido por copyright

Interpretacin del Hemograma Canino y Felino

Lminas de laboratorio reproducidas con el permiso de Alan Rebar, DVM, PhD.Fotografas de Terence Roberts Photography.


3

Nestl Purina Pet Care Company Interpretacin del Hemograma Canino y Felino 5

Contenido

Introduccin............................................................................................................ 7

Parte I

Captulo 1Leucocitos en Perodos de Salud y Enfermedad ..................................................... 11

Captulo 2Eritrocitos en Perodos de Salud y Enfermedad ..................................................... 21

Captulo 3Plaquetas en Perodos de Salud y Enfermedad ....................................................... 31

Parte II

Captulo 4Interpretacin de Hemogramas ............................................................................... 37

Captulo 5Casos de Estudio ..................................................................................................... 43

Parte III

Cuadro 1.

Valores Hematolgicos de Referencia para Perros y Gatos ................................... 83

ndice de Figuras ..................................................................................................... 84

Glosario de Trminos ............................................................................................. 87

Bibliografa Sugerida ......................................................................................................... 89

Nestl Purina Pet Care Company Interpretacin del Hemograma Canino y Felino

Introduccin

La presente monografa, Interpretacinde Hemogramas para Perros y Gatos, sedivide en tres partes. La Parte Icomprende los Captulos 1 al 3; losCaptulos 4 y 5 constituyen la Parte II.Los captulos debern leerse yestudiarse en secuencia con el fin depotenciar al mximo su utilidad. LaParte III contiene numerosos materialesde referencia y otras fuentes.

La Parte I (Captulos 1, 2 y 3) estdestinada a que el lector se familiaricecon la fisiologa y patofisiologa bsicasdel sistema hematopoytico del perro yel gato. No tiene la intencin de ser untratado profundo sobre el tema sino msbien se centra en aquellos aspectos dela fisiologa hematopoytica que sonms tiles a la hora de comprender loscambios perifricos que ocurren en lasangre durante las enfermedades.

La Parte II (Captulos 4 y 5) estdestinada a desarrollar un enfoquesistemtico para la interpretacin de lamorfologa y los datos perifricos de lasangre, como as tambin a darle allector la oportunidad de practicar esteenfoque con una serie de casos clnicosreales. Debido a una cuestin denecesidad, existe una redundancia en laParte I y la II; sin embargo, la mismaservir para que el lector afiance sucomprensin sobre la fisiopatologahematolgica y su relacin con lainterpretacin de hemogramas.

La Parte III incluye: Cuadro 1. ValoresHematolgicos de Referencia paraPerros y Gatos, que enumera los valores

normales de la sangre; un completondice de Figuras que describe todas lasfotografas de las lminas portaobjetosutilizadas en este libro; un Glosario deTrminos que contiene las definicionesde aquellas palabras que se encuentransubrayadas a lo largo del texto; y unamplio listado de Lecturas Sugeridassobre el tema de la hematologa caninay felina.

7

Parte I

VISION GENERAL

Desde una perspectiva funcional, los leucocitoscirculantes, o glbulos blancos, pertenecen a dos sis-temas: el sistema fagoctico y el sistema inmunoctico.

Los dos sistemas inmunolgicos son funcional-mente interdependientes. El sistema fagoctico estformado por los granulocitos y el sistema monocito-/macrfago. El sistema inmunoctico est compuestopor linfocitos circulantes T y B. Los factores produci-dos por los monocitos/macrfagos influencian pro-fundamente la funcin de los linfocitos y diversosproductos de los linfocitos, a su vez, influencian lafuncin de los fagocitos.

Los fagocitos (es decir, granulocitos, sistema mo-nocito/macrfago) constituyen la primera lnea de de-fensa contra los microorganismos invasores; son atra-dos a los focos de infeccin y all, por un proceso defagocitosis, ingieren y destruyen bacterias y cualquierotro agente en contacto. Por lo tanto, se puede consi-derar a los fagocitos como el sistema inmunolgicono-especfico.

En contraposicin, el sistema inmunoctico consti-tuye el sistema inmunolgico especfico. Sus clulasejecutadoras (es decir, los linfocitos T y B) son respon-sables tanto de la produccin de la inmunidad humo-ral en la forma de anticuerpos dirigidos contra antge-nos especficos, como de la inmunidad celular, al pro-ducir citoquinas especficas.

Los siguientes prrafos exploran ms detallada-mente la estructura y funcin de cada sistema.

EL SISTEMA FAGOCTICO

El Proceso Fagoctico

El proceso de fagocitosis se ha estudiado amplia-mente y se divide en varias etapas.

La etapa inicial es la quimiotaxis. En esta fasetemprana, todas las clulas fagocticas son mviles yson atradas a los focos de inflamacin e infeccinpor un gradiente creciente de pequeas molculas co-nocidas como quimiotaxinas. Entre las quimiotaxinasms potentes se encuentran:

lipopolisacridos (componentes de membranasbacterianas),

fragmentos activos del complemento, complejos antgeno-anticuerpo, y ciertos productos de los linfocitos.Una vez que los fagocitos entraron al rea de infla-

macin e infeccin, deben adherirse al o a los mi-croorganismos con el fin de continuar el proceso defagocitosis.

La Adherencia (etapa II) se produce con ms facili-dad si los organismos han sido opsonizados; es decir,recubiertos por anticuerpos o fragmentos del comple-mento. Los fagocitos tienen receptores en sus super-ficies para aquellas opsoninas que facilitan la adheren-cia. El proceso de opsonizacin representa una de lasinteracciones entre el sistema inmunolgico especfi-co y el no-especfico: los inmunocitos producen anti-cuerpos, los fagocitos se adhieren a esos anticuerpos.

Luego, los organismos adheridos deben ser inter-nalizados (etapa III). Esto se logra por la invaginacinde la membrana superficial de la clula y la formacinde una vacuola fagoctica alrededor del organismo.En forma prcticamente simultnea, el sistema micro-tubular y citoesquelticode la clula desplaza losgrnulos citoplasmticoshacia las vacuolas fagocti-cas. La fusin de las res-pectivas membranas permi-te el contacto ntimo entreel contenido del grnulo yel microorganismo; se lograas la aniquilacin y diges-tin del microorganismo.

Los Granulocitos

NeutrfilosLos neutrfilos son los granulocitos circulantes

predominantes y se distinguen con facilidad en la pe-


Captulo 1: Leucocitos en Perodos de Salud y Enfermedad

Distintos Leucocitos CirculantesPertenecen a Distintos Sistemas

Inmunolgicos

Sistema Inmunolgico Sistema InmunolgicoNo-especfico Especfico

Fagoctico Inmunoctico

Granulocitos Linfocitos BMonocitos/Macrfagos Linfocitos T

Las Etapas de La Fagocitosis

I. Quimiotaxis

II. Adherencia

III. Internalizacin

lcula sangunea perifrica debido a las siguientes ca-ractersticas morfolgicas (Fig. 1):

circular medida: de 12.0 a 15.0 de dimetro abundante citoplasma granular rosa plido ncleos lobulados con cromatina concentrada

y tincin profunda

La mencionada apariencia morfolgica provee in-dicios significativos en cuanto a su estado funcional.La cromatina con tincinprofunda y concentrada su-giere un ncleo madurocon heterocromatina pre-dominantemente inactiva.El citoplasma granular rosa-do sugiere abundante pro-tena pero poca maquina-ria (ARN citoplasmticocon tincin azul) para pro-ducir protena adicional.

El neutrfilo circulantees un fagocito completamente diferenciado capaz deidentificar, ingerir, aniquilar y digerir microorganismosinvasores. Dos clases de grnulos, los grnulos espec-ficos y los lisosomas, completan su citoplasma. Losgrnulos especficos contienen sustancias, tales comolas protenas catinicas y lactoferrina, que estn invo-lucradas en la aniquilacin de bacterias. Los lisoso-mas contienen enzimas digestivas que actan para di-solver los organismos una vez aniquilados.

Si bien el neutrfilo es un mecanismo de aniquila-cin de bacterias altamente efectivo, se encuentra dealguna manera limitado por su propio alto grado desofisticacin y diferenciacin. Los neutrfilos son in-capaces de dividirse, de recargar su contenido granu-lar o de regenerar la membrana de la superficie perdi-da en la internalizacin durante la fagocitosis de orga-nismos. Como consecuencia de ello, su perodo de vi-da es extremadamente corto (de horas a das).

A pesar de que los neutrfilos funcionan princi-palmente como fagocitos, vale la pena destacar queestas clulas tambin funcionan como clulas secreto-

rias. Tanto cuando ocurre una fusin de grnulos convacuolas fagocticas como cuando los neutrfilos ago-tados se destruyen, molculas biolgicamente activasse liberan al microambiente. Entre ellas se encuen-tran las prostaglandinas, los fragmentos del comple-mento y las aminas biolgicamente activas. Claramen-te, al liberar estas molculas reguladoras al microam-biente, los neutrfilos (y, de hecho, todos los fagoci-tos) funcionan como moderadores de la respuesta in-flamatoria sistmica y local.

Los recuentos normales de neutrfilos perifricosen perros y gatos oscilan entre 3.000/l y 12.000/l.En perodos de salud, slo rara vez se observan neu-trfilos inmaduros (clulas en banda) (menos de300/l cuando los recuentos de glbulos blancos sonnormales). Tanto el aumento (neutroflia) como la dis-minucin (neutropenia) de la cantidad de neutrfilosson clnicamente significativos, en especial en enfer-medades inflamatorias. De igual forma, los aumentosrelativos en la cantidad de clulas en banda (llama-dos "desviacin a la izquierda") tambin son extrema-damente importantes desde el punto de vista clnico.Para comprender la interpretacin de la cantidad deneutrfilos perifricos es importante comprender pri-mero la cintica de los neutrfilos, es decir, la dinmi-ca de la produccin, circulacin y utilizacin de neu-trfilos dentro de los tejidos.

Los neutrfilos se producen en la mdula sea,circulan temporalmente en el flujo sanguneo perifri-co (el pool circulante), se marginan en las paredes delos vasos sanguneos (el pool marginal) y migran al in-terior de los tejidos. Dentro de la mdula, existen trespools de neutrfilos con sus respectivos predeceso-res:

1) el pool de proliferacin, formado por los mielo-blastos y promielocitos divididos, y los primeros mie-locitos,

2) el pool de maduracin, formado por los ltimosmielocitos no divididos, los metamielocitos y las clu-las en banda, y

3) el pool de depsito, formado por los neutrfi-los maduros.

En general, la produccin de un neutrfilo a partirde un mieloblasto demora alrededor de 5 das. Elpool de depsito contiene una provisin de neutrfi-los maduros para aprximadamente 5 das. En otraspalabras, si la produccin de glbulos blancos se inte-rrumpiera en el da 1 y la demanda tisular, y la vidamedia circulante, fueran normales; pasaran 5 das (da6) antes de que se notara una reduccin en las canti-dades de neutrfilos en los recuentos perifricos. Losneutrfilos que abandonan el pool de depsito resi-den en el pool circulante (desde donde se los recogeal extraer muestras de sangre) slo por 6 a 8 horas an-tes de marginarse y por ltimo ser llevados quimio-tcticamente a los tejidos para cumplir su funcin fa-goctica. Por cada neutrfilo en el pool circulante,existe por lo menos un neutrfilo en el pool margi-nal.

Nestl Purina Pet Care Company Interpretacin del Hemograma Canino y Felino12

Fig. 1. Neutrfilos circulantes normales

Granulocitos

Neutrfilos

Eosinfilos

Basfilos

Cuando se desarrollan focos inflamatorios en lostejidos, la produccin de quimiotaxinas origina un au-mento en la liberacin de neutrfilos a la sangre, unacortamiento de la vida media circulante de neutrfi-los con mayor marginacin, y un aumento en la canti-dad de neutrfilos que salen a los tejidos. Debido algran pool de depsito de neutrfilos en la mdula, enla mayora de los casos de inflamacin, el movimientode neutrfilos a la sangre es mayor que el movimientode neutrfilos a los tejidos; el resultado final es la neu-trofilia perifrica. En poco tiempo, el pool de depsi-to de neutrfilos maduros que se encuentra en la m-dula se reduce al punto en donde grandes cantidadesde clulas en banda son llevadas a la sangre perifri-ca. La neutrofilia con una desviacin a la izquierda(es decir, desviacin a la izquierda regenerativa) es elclsico leucograma que indica inflamacin aguda (ac-tiva) en perros y gatos.

Los focos inflamatorios liberan no slo qimiotaxi-nas sino tambin factores estimuladores de colonias(CSF, por su sigla en ingls), que originan un aumentoen la produccin de neutrfilos. Si la inflamacin nose resuelve rpidamente, la produccin medular deneutrfilos establecer un nuevo equilibrio con la de-manda tisular. Por ltimo, el recuento de neutrfilosvolver a la normalidad y la desviacin a la izquierdatender a desaparecer. El clsico leucograma que in-dica inflamacin crnica presenta un compartimentode neutrfilos normal o casi normal.

En casos poco comunes de severa inflamacinaguda, la demanda tisular es tan grande que la salidade neutrfilos desde la sangre puede de hecho exce-der el influjo de neutrfilos desde la mdula. En estasocasiones, la neutropenia con una desviacin a la iz-quierda (es decir, desviacin a la izquierda degenerati-va) se desarrolla rpidamente y constituye un indicioinequvoco sobre la existencia de una inflamacinaplastante. En los perros y gatos, este hallazgo mere-ce un pronstico reservado.

Eosinfilos

Se lo denomina eosinfilo debido a sus distintivosgrnulos citoplasmticos color rojo-anaranjado (eosi-noflicos), que son circulares y de variados tamaos(Fig. 2) en los perros y tienen forma de barra en losgatos (Fig. 3). Los mencionados grnulos contienenno slo enzimas hidrolticas y peroxidasa (al igual quelos grnulos de los neutrfilos), sino tambin un n-cleo de protenas bsicas que facilitan la gran compa-tibilidad de los grnulos para con la tincin eosina.

Al igual que los neutrfilos, los eosinfilos respon-den quimiotcticamente a los productos bacterianos ya los fragmentos del complemento. Adems, son atra-dos preferentemente no slo a la histamina y al factorquimiotctico eosinfilo de anafilaxis (ECF-A, por susigla en ingls) liberado por los mastocitos, sino tam-bin a ciertos productos liberados por los linfocitos

activados. Desde una perspectiva funcional, los eosi-nfilos son bactericidas in vitro, pero es incierto hastaqu grado lo son. Sin embargo, es claro su rol en lamoderacin de reacciones de hipersensibilidad; loseosinfilos elaboran antihistaminas (aminooxidasas) yprostaglandinas que inhiben la desgranulacin de losmastocitos.

Una segunda funcin importante de los eosinfi-los es su rol en el control de infecciones parasitarias.Por medio de ligaduras mediante complemento y/oanticuerpos, los eosinfilos se fijan en la superficie deparsitos helmintos y liberan el contenido de sus gr-nulos al microambiente. Las principales protenas b-sicas de los grnulos causan daos considerables en lasuperficie del parsito, lo cual le produce la muerte.

Los eosinfilos poseen una vida media circulantemucho menor a la de los neutrfilos (de minutos a va-rias horas, en comparacin a las 4 a 8 horas de losneutrfilos), por lo tanto, los recuentos perifricospueden ser muy irregulares entre muestra y muestra.Consecuentemente, la eosinofilia (un aumento) sloes significativa cuando persiste en el tiempo. La inter-pretacin ms exacta de una eosinofilia persistente esla presencia de una reaccin de hipersensibilidad sis-tmica.

Las infecciones parasitarias slo se asocian a la eo-


Fig. 2.Eosinfilo canino normal (izquierda), linfocito reactivo(derecha).

Fig. 3. Eosinfilo felino normal.

sinofilia persistente si tienen una fase sistmica. Porejemplo: en los perros, las infecciones de triquina, quese alojan en el tracto intestinal, no provocan eosinofi-lia circulante. Por el contrario, las infecciones por el"gusano del corazn" (heartworm), en donde hay pre-sencia de parsitos circulantes, pueden provocar unamarcada eosinofilia. Otras causas de eosinofilias per-sistentes en perros son: mastocitosis sistmica, derma-titis por picadura de pulga con hipersensibilidad sist-mica, gastroenteritis alrgica, bronquitis alrgica y ato-pa. En los gatos, se deben considerar como causas elasma felino, el complejo granuloma eosinoflico (sist-mico, no oral), la mastocitosis sistmica, la enferme-dad por el "gusano del corazn" (heartworm), y la gas-troenteritis alrgica. En la opinin del autor, la eosino-penia (una disminucin) es menos constante y msdifcil de interpretar que la eosinofilia.

Basfilos

Los basfilos (Figs. 4, 5, 6) se observan slo ocasio-nalmente en la periferia de los frotis sanguneos. Sonlevemente ms grandes que los neutrfilos, tienen ci-toplasma de color lavanda plido y ncleos verdadera-mente segmentados. Los basfilos de perros y gatos con frecuencia contienen slo unos pocos grnuloscitoplasmticos distintivos de color azul profundo

a prpura; y que pueden ser identificados errnea-mente como monocitos. Adems del ncleo verdade-ramente segmentado, lo cual es til para diferenciar alos basfilos de los monocitos, otro hecho muy carac-terstico de los basfilos es que con frecuencia sepueden observan lo que parecen ser pequeas vacuo-las en el ncleo que en realidad son grnulos basof-licos recubriendo al ncleo-.

Los basfilos no son fagocticos. No obstante, jueganun rol esencial en el proceso inflamatorio. Sus grnu-los citoplamticos contienen histamina y heparina. Lahistamina es uno de los principales mediadores de larespuesta inflamatoria aguda, al producir una mayorpermeabilidad vascular. La heparina es un anticoagu-lante que modera el microambiente inflamatorio al in-hibir la formacin de fibrina.La basofilia slo se observa rara vez; y cuando se pre-senta, casi siempre lo hace junto con la eosinofilia.

EL SISTEMA MONOCITO/MACRFAGO

El sistema monocito/macrfago representa la segundaramificacin del sistema fagoctico y el nexo principalentre el sistema inmunolgico especfico y el no-espe-cfico. Anteriormente se conoca a este grupo de c-lulas como el sistema reticuloendotelial, y comprendeno slo los monocitos circulantes sino tambin losmacrfagos fijos del hgado, del bazo, del cerebro y delos ndulos linfticos.Los monocitos son los precursores de todos los ma-crfagos. Se originan en la mdula sea, circulan enla sangre perifrica y se alojan en los tejidos, en don-de se diferencian ms segn sea necesario. Entre lasclulas diferenciadas del sistema monocito/macrfagose encuentran los macrfagos activados, las clulasepiteloides, y las clulas gigantes inflamatorias multi-nucleadas. Adems de su rol como fagocitos, los ma-crfagos tambin cumplen las siguiente funciones:

modificar antgenos de manera tal que puedanser identificados por los inmunocitos (clulas proce-sadoras de antgenos).

liberar numerosos mediadores inflamatoriosque reclutan neutrfilos, otros monocitos y linfocitos


Fig. 4. Basfilo canino normal.

Fig. 5. Basfilo canino normal.

Fig. 6. Basfilo felino normal (izquierda), neutrfilo normal(derecha).

hacia los focos infl a m a t o ri o s regular los depsitos de hierro .

La nica clula del sistema monocito/macrfago quen o rmalmente se observa en la sangre peri f rica es elm o n o c i t o . La naturaleza inmadura del monocito se su-gi e re por su morfologa (Fi g . 7 ) . El ncleo tiene un fo r-mato irregular con un patrn de cromatina delicada a fi-namente gra nular que sugi e re el predominio de eucro-matina activa . El citoplasma es ab u n d a n t e , con fre c u e n-cia va c u o l a d o , y de un color que oscila entre gris y azul,lo que sugi e re un alto contenido de ARN citoplasmticop e ro poca cantidad de pro t e n a . Los monocitos que seo b s e rvan en una lmina portaobjeto de la sangre peri f -rica se encuentran aproximadamente en la misma etapade desarrollo que el mielocito medular de la serie degra nu l o c i t o s . En contraposicin a los gra nu l o c i t o s , q u ese almacenan en la mdula, los monocitos son libera d o sinmediatamente a la circulacin a medida que se pro d u-c e n . Tienen una limitada capacidad facogtica inmedia-t a , p e ro como se mencion anteri o rm e n t e , poseen uni m p o rtante potencial para desarro l l a rse en clulas eje-c u t a d o ras completamente armadas una vez alojados enlos tejidos.H i s t ri c a m e n t e , la monocitosis peri f rica ha sido inter-p retada como indicio de una inflamacin crnica. L a sclulas del sistema monocito/macrfago se considera-ban principalmente como las clulas limpiadoras de lai n flamacin que eran re clutadas hacia las lesiones crni-cas con el fin de eliminar los restos luego de que la acti-vidad neutroflica hubiera localizado el principal pro c e-so de la enfe rm e d a d . Si bien es innegable la funcinesencial de limpieza que tiene el sistema monocito/ma-c r fago en la inflamacin crnica, a h o ra compre n d e-mos que estas clulas poseen un rol mu cho ms impor-tante en el proceso infl a m a t o ri o . Ms an, ya que losmonocitos pro l i fe ra t i vos son liberados y acumu l a d o sen la sangre peri f rica en lugar de almacenarse en lam d u l a , la monocitosis peri f rica puede ocurrir muy r-pidamente (en tan solo 12 hora s ) . C o n s e c u e n t e m e n t e ,la mejor interpretacin clnica de la monocitosis es sim-plemente cuando existe necrosis tisular y una demandade fago c i t o s i s . La monocitosis puede ocurrir tanto coni n flamaciones agudas como con crnicas.

EL SISTEMA INMUNOCTICO

El sistema inmunolgico especfico o inmunocticoest compuesto tanto por los linfocitos circulantes co-mo por los linfocitos que se encuentran en los rga-nos linfoides primarios (mdula sea y timo) y secun-darios (ndulo linftico, bazo, placas de Peyer y teji-dos linfoides asociados a los bronquios).Las clulas del sistema inmunoctico responden espe-cficamente a los antgenos al experimentar una ex-pansin clonal y una diferenciacin hacia clulas eje-cutadoras altamente especializadas y clulas de me-moria. Las clulas ejecutadoras se clasifican en doscategoras principales:

1) Linfocitos clulas T, las cuales liberan diversas molculas biolgicamente activas conocidas como linfocinas y juegan un rol principal en lainmunidad celular.

2) Linfocitos clulas B, las cuales producen inmunoglobulinas (anticuerpos) y constituyen el sistema inmunolgico humoral.

Ambas categoras de clulas,T y B, se pueden subdivi-dir an ms en varios subgrupos teniendo en cuentalos rasgos caractersticos de la superficie de las clu-las.Los subgrupos de clulas T abarcan:

clulas colaboradoras (T helper): son necesariaspara la completa expresin de la respuesta inmunol-gica,

clulas supresoras: disminuyen o moderan larespuesta inmunolgica, y

clulas nulas (esencialmente carecen de rasgoscaractersticos en su superficie): son las clulas asesi-nas naturales (NK, por su sigla en ingls) y las clulasasesinas (K, por su sigla en ingls).

las clulas NK liberan molculas biolgicamenteactivas capaces de destruir otras clulas o microorga-nismos.

las clulas K participan en la citotoxicidad quedepende de anticuerpos.Los subgrupos de clulas B producen preferentemen-te inmunoglobulinas que pertenecen a una clase enparticular:

IgG


Fig. 7. Monocitos caninos normales. Fig. 8. Linfocito pequeo normal (ncleo circular), tres neutr-filos, y clula en banda normal (derecha).

IgD IgM IgE IgA

Adems de la obvia interaccin entre las categoras delinfocitos y las subcategoras, los linfocitos tambin in-fluencian y son influenciados por los fagocitos. Entrelas linfocinas que producen las clulas T y B se en-cuentran numerosas molculas que son quimiotcti-cas tanto para los granulocitos como para los monoci-tos/macrfagos. Algunos productos de los linfocitospueden afectar la produccin de fagocitos en la m-dula. La opsonizacin, como ya lo hemos visto, con-duce a una fagocitosis mejorada.En los ltimos aos, los conocimientos acerca del sis-tema inmunoctico y sus complejas funciones se am-pliaron en forma impresionante. El estudio de los lin-focitos y sus diversos roles ha evolucionado convir-tindose en la ciencia de la inmunologa, cuyo anlisisva ms all del alcance de este captulo. En su lugar,la siguiente seccin tratar acerca de los linfocitos cir-culantes y la interpretacin de los cambios en la mor-fologa y la cantidad circulante.

Funcin y estructura normales de los linfocitos

Los linfocitos circulantes abarcan representantes delas categoras de clulas T, clulas B y clulas nulas.En la mayora de las especies, aproximadamente el70% de los linfocitos circulantes son clulas T, del 10%al 15% son clulas B y el resto est formado por clu-las nulas. Las clulas normales de las distintas catego-ras no pueden diferenciarse morfolgicamente utili-zando las tinciones hematolgicas de rutina de Roma-nowsky.Los linfocitos circulantes normales poseen las siguien-tes caractersticas morfolgicas:

forma circular, con un dimetro que mide de9.0 a 12.0 .

Ncleos grandes, circulares, excntricos conpatrones de cromatina condensada y densa intensidadde tincin.

Escaso citoplasma de color azul plido, usual-mente observable slo de un lado del ncleo.Por lo general, los linfocitos circulantes son "clulasde memoria" de larga vida que van y vienen entre lasangre, los ndulos linfticos y la linfa en busca de lapresencia de antgenos, para los cuales fueron previa-mente sensibilizados. Una vez estimulados por talesantgenos, los linfocitos experimentan una transforma-cin blstica o activacin. La activacin es un proce-so normal. Sin embargo, un aumento relativo o abso-luto en la cantidad de linfocitos activados (tambinconocido como inmunocitos) indica una estimulacinantignica.Morfolgicamente, los linfocitos con transformacinblstica son en general ms heterogneos que los lin-focitos no estimulados (Figs. 9 a 13). Son ms gran-

des que los linfocitos no estimulados, tienen ncleosms grandes y ms delicados y mucha cantidad de ci-toplasma de color azul profundo. Morfolgicamente,los linfocitos B activados no se pueden diferenciar delos linfocitos T activados. Sin embargo, las clulas Bcompletamente diferenciadas son clulas plasmticasmorfolgicamente distintas (Fig. 14). Las clulas plas-mticas poseen ncleos circulares excntricos conncleos groseramente condensados, plidas zonas pe-rinucleares claras (zonas de Golgi), y abundante cito-plasma de color azul profundo. Es poco frecuente en-contrar clulas plasmticas en los frotis sanguneos,


Fig. 11. Linfocito reactivo (centro) y cuatro neutrfilos.

Fig. 10. Linfocito reactivo (centro abajo), tres neutrfilos, y unmonocito (centro arriba).

Fig. 9. Linfocito (reactivo, activado) con transform a c i nblstica.

con excepcin de los casos de tumor en clulas plas-mticas (mieloma mltiple).Los recuentos normales de linfocitos se encuentranentre 1000/l y 5000/l en los perros, y en los gatosla cantidad puede llegar hasta 7000/l. Los recuentosentre 1000/l y 1500/l se consideran linfopeniasmarginales. Tanto la linfopenia como la linfocitosisson casos clnicos relativamente comunes.La linfopenia con valores de 700/l a 1500/l proba-blemente sea un reflejo de los altos niveles de gluco-corticoides circulantes (es decir, reaccin al stress), endonde hay un aumento en la cantidad de linfocitosque se marginan a lo largo de las paredes de los vasoso, en condiciones an ms crnicas, pueden destruir-se por accin de las lisinas. En casos de linfopeniams marcada, se deben considerar procesos que blo-queen el patrn circulatorio normal de los linfocitos(de sangre a tejido a linfa y de nuevo a sangre). Entreellos se encuentran los linfosarcomas, en donde loslinfocitos que salen de la sangre quedan atrapados enndulos linfticos masivamente agrandados, y las efu-siones quilosas, en donde la ruptura linftica conduceal secuestro de linfocitos (y protenas) en las cavida-des corporales.La linfocitosis ocurre en casos de inflamacin con es-timulacin antignica, leucemia linfoctica y linfosar-comas con estados leucmicos. En casos de linfocito-sis leucmica, los linfocitos circulantes son casi siem-pre linfoblastos anormales. Estas clulas son msgrandes de lo normal y tienen ncleos con menor in-tensidad de tincin que contienen grandes nuclolos.Con frecuencia, las leucemias tambin se encuentranacompaadas de marcadas anemias no-regenerativas.En los gatos, la linfocitosis tambin se puede producirfisiolgicamente, cuando la excitacin (es decir, libera-cin de epinefrina) provoca un aumento del flujo san-guneo que desplaza los linfocitos marginados llevn-dolos al flujo circulante en donde fcilmente puedenextraerse muestras y contarse. En gatos, se han obser-vado linfocitosis fisiolgicas con recuentos de linfoci-tos de hasta 20.000/l. En estos casos, los linfocitosson morfolgicamente normales y no existe anemia.

MORFOLOGA ANORMAL DE LEUCOCITOS

Toxicidad de Neutrfilos

Se observa toxicidad en los neutrfilos cuando las to-xinas circulantes interfieren en el desarrollo y en ladiferenciacin de los precursores de los neutrfilosen la mdula sea. En los perros y gatos, la toxicidadcomnmente se produce por las toxinas bacterianascirculantes. Sin embargo, la necrosis tisular, varios me-dicamentos y numerosas toxinas no-especficas comoel plomo son capaces de interferir en el desarrollo delos neutrfilos. La mejor manera de interpretar losneutrfilos txicos en la sangre es como indicadoresde la presencia de toxemia sistmica no especificada.

Debido a que la toxicidad indica una detencin en lamaduracin, la etapa de desarrollo afectada es impor-tante al momento de evaluar el pronstico o medir larespuesta a la terapia. No es posible tal interpretacinen los casos en donde tanto los neutrfilos maduroscomo las clulas en banda han sido igualmente afecta-dos. Sin embargo, en los casos en donde los neutrfi-los maduros son txicos y las clulas en banda sonnormales, la morfologa sugerira que la toxemia sist-mica se est solucionando. Por el contrario, en los ca-sos en donde las clulas en banda son txicas perolos neutrfilos maduros son normales, la morfologasugiere un agravamiento de la enfermedad.


Fig. 14. Clula plasmtica completamente diferenciada.

Fig. 13. Linfocito reactivo.

Fig. 12. Linfocito reactivo.

Desde el punto de vista morfolgico, los neutrfilostxicos presentan una variedad de alteraciones quereflejan detenciones en el desarrollo tanto sea cito-plasmtico como nuclear o ambos (Fig. 15 a 18). Laforma ms comn de toxicidad en los neutrfilos deperros y gatos es la basofilia espumosa del citoplas-ma. Se trata de un reflejo ante la retencin de ARN ci-toplasmtico y la imposibilidad de las clulas afecta-das para formar su complemento normal de protenasy grnulos citoplasmticos. Los cuerpos de Dhle,una seal relativamente pequea de toxicidad en losneutrfilos de los gatos pero una seal de marcada to-xicidad en los neutrfilos de los perros, son simple-mente precipitados intracitoplasmticos de ARN yaparecen como inclusiones citoplasmticas basoflicasazules.Algunos neutrfilos txicos son extremadamentegrandes; este es un reflejo ante la detencin en la ma-duracin nuclear, que se caracteriza por la imposibili-dad de las clulas en desarrollo para dividirse correc-tamente. Las formas nucleares extraas y los ncleosmltiples iguales tambin indican detenciones en lamaduracin nuclear.


Fig. 17. Dos neutrfilos txicos y una clula en banda. Note laforma irregular atpica.

Fig. 16. Clula gigante en banda txica con citoplasmabasoflico espumoso y enorme ncleo irregular.

Fig. 15. Clula en banda txica con citoplasma basoflicoespumoso.

Linfocitos Atpicos

"Linfocito atpico" es un trmino utilizado para descri-bir a un grupo heterogneo de clulas circulantespertenecientes a la serie linfoide que poseen una va-riedad de anormalidades ya sean nucleares como cito-plasmticas o ambas. Los linfocitos atpicos son mor-folgicamente distintos a los linfocitos reactivos (in-munocitos, linfocitos activados), que son linfocitosnormales estimulados por antgenos.Las caractersticas nucleares y citoplasmticas deter-minan la clasificacin atpica. En algunas ocasiones,los linfocitos que contienen grandes nuclolos angula-res son clasificados como atpicos, aunque estas clu-las pueden simplemente encontrarse reactivas. Loslinfocitos con ncleos fisurados (ncleos con formade Reider) se consideran atpicos. La presencia degrandes grnulos citoplasmticos azurfilos en los lin-focitos tambin se considera como atpica (Fig. 19).Se desconoce an el significado de observar linfocitosatpicos en los frotis sanguneos. Histricamente, sepensaba que los linfocitos atpicos indicaban infeccio-nes virales. Ahora sabemos que esta asociacin esconfusa; existen enfermedades en los animales ocasio-nadas por diversas causas que pueden aumentar lacantidad de linfocitos circulantes tpicos. Se debe te-ner en cuenta la presencia de linfocitos atpicos en lasangre, pero no se debe realizar una interpretacin enparticular basndose slo en este hecho.


Fig. 19. Linfocitos atpicos.

Fig. 18. Dos neutrfilos txicos con cuerpos de Dhle.

VISIN GENERAL

Las principales funciones del eritrn, o glbulos rojos(GR), son las siguientes:

acumular oxgeno en la superficie alveolar delpulmn,

transportarlo y liberarlo a todas las clulas delcuerpo,

reemplazar el oxgeno liberado con el gas resi-dual, el dixido de carbono, y

transportar al dixido de carbono nuevamenteal alvolo en donde se lo podr remover del cuerpopor medio de la expiracin.Para cumplir estas funciones, los glbulos rojos de losmamferos se convirtieron en vehculos transporado-res, altamente sofisticados aunque simples, compues-tos por hemoglobina (una protena transportadora so-luble) sellada en una membrana celular protectora.Esta estructura les proporciona a los glbulos rojosgran flexibilidad, permitindoles circular por los espa-cios vasculares ms sinuosos. Los caminos metabli-cos de los glbulos rojos, la gluclisis y el shunt de lahexosa-monofosfato, sirven principalmente para man-tener la integridad de la membrana celular y la mol-cula de hemoglobina.En perodos de salud, la masa circulante de glbulosrojos, y por lo tanto la capacidad transportadora deoxgeno, se mantiene notablemente constante da ada y ao a ao. Para cada especie, el perodo de vidade los glbulos rojos es limitado y programado conanterioridad. La produccin de nuevos glbulos ro-jos, regulada por los niveles eritropoyticos circulan-tes, se encuentra inversamente relacionada al perodode vida de los glbulos rojos. En los perros, el pero-do de vida de los glbulos rojos circulantes es deaproximadamente 100 das; por lo tanto, diariamenteslo alrededor del 1% de los glbulos rojos circulan-tes mueren y deben ser reemplazados. El promediodel perodo de vida de los glbulos rojos de los gatoses menor (aproximadamente 80 das); por lo tanto, serequiere un ndice de produccin de glbulos rojosun tanto mayor con el fin de mantener la masa nor-mal de glbulos rojos circulantes.La morfologa de los glbulos rojos tambin es nicapara cada especie. Los glbulos rojos de los perrostienen un dimetro que mide de 6.5 a 7.0 , poseenprominentes reas plidas en el centro, son uniforme-mente circulares y presentan poca variabilidad en ta-mao y forma de clula a clula (Fig. 1). El VolumenCorpuscular Medio (VCM) es de 60 femtolitros (fl) a75 fl. Aproximadamente el 1% de los glbulos rojosson ms grandes de lo normal y tienen una tincin deun matiz azulado con las pelculas de tincin de Ro-manowsky; estos son glbulos rojos inmaduros cono-cidos como policromatfilos (Fig. 2). Su matiz azula-do es un reflejo del alto contenido de ARN citoplas-

mtico y del reducido contenido de hemoglobina.Los glbulos rojos normales de los perros presentanuna moderada tendencia a formar pilas o filas (forma-cin de rouleau).

Los glbulos rojos de los gatos son ms pequeos quelos de los perros, tienen un dimetro que mide de 5.0 a 6.0 , su VCM es de 40 fl a 55 fl y el rea plidaen el centro es mnima. La proporcin de policroma-tfilos es mayor en los gatos que en los perros (hasta2% en gatos). Esto es un reflejo del menor perodo devida de los glbulos rojos en los gatos y, por lo tanto,una mayor produccin medular y una mayor libera-cin de reticulocitos. Existe una marcada formacinde rouleau en los gatos.Los trastornos del eritrn son esencialmente trastor-nos de la masa de los glbulos rojos (es decir, recuen-to total de glbulos rojos, hematocrito y hemoglobi-na). La masa de glbulos rojos puede incrementarse(policitemia) o disminuirse (anemia). Los siguientesprrafos detallan los enfoques de diagnstico paraevaluar ambas enfermedades.


Captulo 2: Eritrocitos en Perodos de Salud y Enfermedad

Morfologa de Glbulos Rojos

Perros Gatos

De 6.5 a 7.0 de dimetro, De 5.0 a 6.0 de dimetroUniformemente circulares

Prominentes reas Mnimas reas plidas en el centro plidas en el centro

VCM = 60 fl a 75 fl VCM = 40 fl a 55 fl

Moderada formacin de rouleau Marcada formacin de rouleaux

Fig. 1. Frotis sanguneo canino normal. Ampliacin con esc-ner. Los glbulos rojos son uniformes en tamao, forma y co-lor, y presentan una prominente rea plida en el centro.

POLICITEMIA

Se diagnostica policitemia cuando se aumentan lasmedidas de la masa de los glbulos rojos. La policite-mia puede ser relativa o absoluta.La policitemia relativa es el resultado de la hemocon-centracin (deshidratacin) y es, ampliamente, la for-ma ms comn de policitemia en perros y gatos. Laenfermedad se caracteriza por un elevado nivel deprotenas totales como as tambin por el aumento enlos recuentos totales de glbulos rojos y en los hema-tocritos; y se la revierte al restablecer el volumen san-guneo normal.La policitemia absoluta puede ser tanto secundariacomo primaria. La policitemia absoluta secundaria seproduce como resultado del aumento en la produc-cin de eritropoyetina, ya sea apropiado, como res-puesta compensatoria ante enfermedades en dondeexiste una oxigenacin reducida de los tejidos (porejemplo: enfermedades cardacas o neumona) comoinapropiado, tales los casos poco comunes de enfer-medades renales o neoplasia renal. En la policitemiasecundaria no existen anormalidades morfolgicas dela sangre perifrica. La policitemia absoluta primariaconstituye la policitemia vera, un trastorno mieloproli-ferativo poco comn. La policitemia vera se caracteri-za por una incrementada produccin de glbulos ro-jos en la mdula pero ninguna anormalidad morfolgi-ca en la sangre perifrica. La enfermedad se diagnos-tica al descartar las causas secundarias de policitemiay demostrar que los valores de gas en sangre son nor-males a pesar del aumento en las medidas de la masade los glbulos rojos.

ANEMIA

La anemia es uno de los sndromes ms comunes enla medicina veterinaria y se encuentra asociada a unaamplia gama de enfermedades especficas. Las ane-

mias se clasifican en dos importantes categoras: rege-nerativas y no-regenerativas.La anemia regenerativa se caracteriza por una apropia-da respuesta de la mdula sea que libera una mayorcantidad de glbulos rojos inmaduros normales a lasangre. La anemia regenerativa se produce como re-sultado tanto de una prdida de sangre (hemorragia)como de una hemlisis.En la anemia no-regenerativa, la respuesta de la mdu-la es ineficaz o inadecuada y no se liberan suficientescantidades de glbulos rojos inmaduros a la sangre.Las causas de la anemia no-regenerativas son varias ycon frecuencia se requiere un examen de la mdulasea en busca de la diferenciacin.El primer paso para clasificar una anemia como rege-nerativa o no-regenerativa es la evaluacin del frotissanguneo perifrico (Figs. 2, 3). Un aumento en lacantidad de policromatfilos en el frotis sugiere rege-neracin. Debido a que los policromatfilos son msgrandes que las clulas maduras y contienen menoshemoglobina, el Volumen Corpuscular Medio (VCM)puede aumentar y la Concentracin de HemoglobinaCorpuscular Media (CHCM) puede reducirse.Si existe una policromasia significativa, el hecho dedeterminar la cantidad de reticulocitos permitir eva-luar la regeneracin con mayor precisin. Esto se lo-gra al mezclar una pequea cantidad de sangre conEDTA y una cantidad idntica de una tincin vital, co-mo por ejemplo el nuevo azul de metileno. Se deja in-cubar esta mezcla a tempera t u ra ambiente por tre i n t a


Fig. 2. Pelcula sangunea canina con aumento de policroma-sia. Ampliacin con escner. Los policromatfilos son azula-dos y generalmente ms grandes que las clulas maduras.

Anemia

I. Anemias Regenerativas:

Anemia por Prdida de Sangre/Hemorrgica

Anemias Hemolticas

Anemias hemolticas inmunomediadas

Anemia hemoltica por cuerpos de Heinz

Anemias hemolticas infecciosas

Haemobartonelosis

Babesiosis

Anemia hemoltica hereditaria

Anemia hemoltica microangioptica

Anemia metablica con glbulos rojos

espiculados

II. Anemias No-Regenerativas:

Anemias por Alteraciones en la Maduracin

Alteracin en la maduracin del ncleo

Alteracin en la maduracin del citoplasma

Anemias Hipoproliferativas

Ocasionada por enfermedades inflamatorias

Ocasionada por reduccin de eritropoyetina

Anemia mieloptsica

Ocasionada por toxicidad medular

minutos y luego se realizan los frotis sanguneos seca-das al aire. El ARN citoplasmtico en los glbulos ro-jos inmaduros se precipita por accin del nuevo azulde metileno como un retculo azul oscuro. A las clu-las que contienen este precipitado se las identifica co-

mo reticulocitos (Figs. 4, 5).En los perros, se cuentan todas las clulas con retcu-lo en el momento de realizar un recuento de reticulo-citos. En los gatos, se pueden identificar tres clasesde reticulocitos y se los distingue por la cantidad deretculo presente:

1) reticulocitos punteados: tienen slo precipitados focales,

2) reticulocitos agregados: contienen una extensa red de retculo, y

3) reticulocitos intermedios: tienen cantidades intermedias de precipitado.

En los gatos, slo se recuentan los reticulocitos agre-gados.Se utilizan los recuentos absolutos de reticulocitos pa-ra verificar la presencia o ausencia de la regeneracin.El nmero de reticulocitos apropiados por cada 1000glbulos rojos se registra y se convierte a un porcen-taje. Para obtener el recuento absoluto de reticuloci-tos, luego se multiplica este porcentaje por el recuen-to total de glbulos rojos. Un recuento absoluto dereticulocitos superior a 80.000/l indica regeneracintanto en los perros como en los gatos.

ANEMIAS REGENERATIVAS

Anemia por prdida de sangre

En las anemias hemorrgicas, el perodo de vida delos glbulos rojos circulantes es normal pero, los gl-bulos rojos se pierden del cuerpo debido a un sangra-do externo. Una historia de sangrados o hallazgos fsi-cos compatibles con la prdida de sangre generalmen-te hacen que el diagnstico sea bastante obvio en es-tos casos. El grado de regeneracin en las anemiaspor prdida de sangre es moderado (no ms de dos otres veces lo normal) y es una consecuencia de la dis-minucin de hierro que acompaa a la prdida deglbulos rojos. La disponibilidad de hierro para incor-porarse a la hemoglobina influencia en forma directaal ndice de produccin de glbulos rojos y, por lotanto, al grado de reticulocitosis perifrica.Casos de prdida de sangre severa o crnica puedende hecho ser no-regenerativos debido a la falta de hie-rro. La anemia por deficiencia de hierro, la ltima eta-pa de la anemia por prdida de sangre, se encuentradescripta en Alteracin en la Maduracin del Citoplas-


Fig. 3 . Mayor ampliacin de la Fig. 2. Representa una anemiaregenerativa con marcada policromasia. Observe la importan-te separacin de los glbulos rojos.

Fig. 4 . Pequea ampliacin de una pelcula sangunea con tin-cin de nuevo azul de metileno. Los reticulocitos sobresalendebido al retculo con tincin azul visible en esta ampliacin.Esto representa una anemia altamente regenerativa.

Fig. 5 . Mayor ampliacin de la Fig. 4. Son obvios los reticulo-citos con el retculo azul precipitado. En los perros, se recuen-tan todos; en los gatos, se recuentan slo aquellos con precipi-tado abundante (reticulocitos agregados). Tambin se encuen-tran presentes algunos leucocitos.

Frmula para el Recuento Absoluto de Reticulocitos

# reticulocitos/1000 glbulos rojos

convertir a %

x el recuento total de glbulos rojos

ma en la seccin titulada Anemias No-Regenerativasde este captulo.

Anemias hemolticas

La caracterstica esencial de las anemias hemolticases el perodo de vida ms corto de los glbulos rojos.La hemlisis puede producirse intravascularmente amedida que los glbulos circulan o extravascularmen-te dentro de los macrfagos del hgado y el bazo. Enambos casos, el hierro se conserva en el cuerpo y seencuentra disponible fcilmente para la reincorpora-cin a la hemoglobina. Como resultado de ello, lasanemias hemolticas con frecuencia son ms altamen-te regenerativas que las anemias por prdida de san-gre y tienen recuentos de reticulocitos que a vecesexceden tres veces lo normal.En varias formas de anemia hemoltica, existen indica-dores morfolgicos especficos de la etiologa subya-cente. Entre ellas se encuentran las anemias hemolti-cas inmunomediadas, la anemia hemoltica por cuer-pos de Heinz, las anemias hemolticas infecciosas, laanemia hemoltica hereditaria, la anemia hemolticamicroangioptica, y la anemia metablica con glbu-los rojos espiculados.

Anemias hemolticas inmunomediadasLa hemlisis inmunomediada se produce cuando loscomplejos antgeno-anticuerpo se forman en la super-ficie de los glbulos rojos circulantes. El anticuerpopuede dirigirse contra un antgeno en la misma mem-brana del glbulo rojo (anemia hemoltica autoinmu-ne) o contra un anticuerpo extrao (por ejemplo: me-dicamento, agente infeccioso) llevado o ligado a la su-perficie del glbulo rojo. Independientemente del lu-gar de la actividad del anticuerpo, el complejo antge-no-anticuerpo activa al complemento, que conducetanto a la lisis intravascular como a la eliminacin deglbulos rojos por parte de los macrfagos en el bazoy el hgado.Las anemias hemolticas inmunomediadas son ane-mias regenerativas tpicas, caracterizadas por una mar-cada policromasia y anisocitosis (tamao celular varia-ble Fig. 6). La presencia de cantidades significativasde esferocitos es un indicador morfolgico especficode hemlisis inmunomediada, aunque pueden apare-cer en pequeas cantidades en otras enfermedades.Los esferocitos son circulares, ms pequeos de lonormal, con fuerte intensidad de tincin y carecen deun rea plida en el centro (Fig. 7). Son ms difcilesde reconocer en los gatos que en los perros debido aque los glbulos rojos de los gatos son normalmentebastante pequeos y carecen de un rea plida en elcentro (Fig. 8).Otra caracterstica de las anemias hemolticas inmuno-mediadas es la autoaglutinacin (aglomeracin tridi-mensional de glbulos rojos). La autoaglutinacin, re-sultado de un verdadero enlace entrecruzado realiza-do por anticuerpos, confirma el diagnstico de

enfermedad inmunomediada.La autoaglutinacin debe diferenciarse de la forma-cin de rouleau. Ello se logra al realizar el siguienteprocedimiento: colocar una gota de sangre con EDTAbien mezclada en un portaobjeto, agregarle una canti-dad igual o ligeramente mayor de solucin salina iso-tnica, colocar la cubierta de vidrio sobre la mezcla yevaluar la hmeda preparacin final bajo el microsco-pio (Fig. 9). Si persiste la aglomeracin, la autoagluti-nacin est presente. La formacin de rouleau, resul-


Fig. 8. Anemia hemoltica inmunomediada en gatos. Los esfe-rocitos son numerosos pero menos obvios debido a la falta delrea plida en el centro de los glbulos rojos normales.

Fig. 7. Un segundo caso de anemia hemoltica inmunomediadaen perros, con numerosos esferocitos.

Fig. 6. Anemia hemoltica inmunomediada en perros. La ane-mia es altamente regenerativa con marcada policromasia. Unesferocito (flecha).

tado de la atraccin entre los glbulos rojos en base ala carga de la superficie, se disipar por el efecto dedilucin de la solucin salina.Ante la ausencia de autoaglutinacin, se puede confir-mar la hemlisis inmunomediada con un examen di-recto de antiglobulina (DAT, por su sigla en ingls).Este examen se lleva a cabo al mezclar los glbulosrojos sospechados bien lavados con anti-complemen-tos y diluciones seriales de anti-IgG especficas de es-pecies disponibles comercialmente. La evidencia mi-croscpica de la aglutinacin de glbulos rojos confir-ma el diagnstico.

Anemia hemoltica por cuerpos de HeinzLos cuerpos de Heinz son masas de hemoglobina pre-cipitada que se forman cuando se produce un aumen-to en los niveles de oxidantes circulantes que doble-gan los mecanismos de defensa bioqumicos de losglbulos rojos y daan la globina. La presencia decuerpos de Heinz interfiere con la flexibilidad de losglbulos rojos, reduciendo su perodo de vida. Losglbulos que contienen cuerpos de Heinz o estn de-sintegrados por accin de las lisinas al apretarse enlos sinuosos espacios vasculares (hemlisis intravascu-lar) o estn atrapados en el bazo y son eliminados porlos macrfagos (hemlisis extravascular). Debido aque los cuerpos de Heinz con frecuencia se adosan ala membrana interior de los glbulos rojos, se los pue-de reconocer en los frotis sanguneos perifricos co-mo proyecciones similares a tetillas en la superficiede los glbulos rojos (Fig. 10). Tienen las mismas pro-piedades de tincin que la hemoglobina normal continciones de Romanowsky, pero se tien de color azulmarino con el nuevo azul de metileno (Fig. 11).Las distintas especies difieren en su sensibilidad a laformacin de cuerpos de Heinz y a la anemia hemol-tica por cuerpos de Heinz. Los perros son muy resis-tentes a la formacin de cuerpos de Heinz; la sola de-mostracin de cuerpos de Heinz en los frotissanguneos es suficiente para confirmar el diagnsticode anemia hemoltica por cuerpos de Heinz en los pe-rros.En contraposicin, la hemoglobina de los gatos se oxi-da fcilmente y la formacin de cuerpos de Heinz esbastante comn. De hecho, an en perodos de salud,hasta el 10% de los glbulos rojos normales de los ga-tos contienen cuerpos de Heinz. En trastornos meta-blicos como por ejemplo hipertiroidismo, diabetesmellitus, o enfermedades del hgado, la cantidad deglbulos rojos con cuerpos de Heinz puede aumentarconsiderablemente (hasta 80% o ms) sin la presenciade hemlisis o anemia (Fig. 12). Por lo tanto, paradiagnosticar en los gatos una anemia hemoltica porcuerpos de Heinz no slo se requiere la presencia decuerpos de Heinz, sino tambin la presencia de unaanemia altamente regenerativa.En los gatos, la mayor parte de los casos de anemiahemoltica por cuerpos de Heinz se produce por eluso de medicamentos oxidantes, como por ejemplo la

aspirina. Por el contrario, en los perros la anemia he-moltica por cuerpos de Heinz inducida por medica-mentos es relativamente poco comn. La causa msfrecuente de hemlisis espontnea por cuerpos deHeinz en los perros es la ingesta de grandes cantida-des de cebollas crudas, que contienen el oxidante, N-propil bisulfuro.

Anemias hemolticas infecciosasLas anemias hemolticas infecciosas abarcan a la lep-tospirosis, la haemobartonelosis y la babesiosis. Noexisten indicadores morfolgicos especficos de la he-mlisis inducida por bacterias Por el contrario, tantoen la haemobartonelosis como en la babesiosis, se ob-servan agentes etiolgicos en los frotis sanguneos pe-rifricas.

Haemobartonelosis La haemobartonelosis se produce tanto en perros co-mo en gatos. En los perros, la enfermedad no es co-mn y se presenta casi exclusivamente en pacientesesplenectomizados o inmunosuprimidos. Clnicamen-te, la haemobartonelosis canina se presenta como unaanemia hemoltica tpica con marcada policromasia yanisocitosis en los frotis sanguneos perifricos de ru-tina. Los organismos Haemobartonella canis se ven


Fig. 10. Anemia hemoltica por cuerpos de Heinz en el perro.Varios glbulos con proyecciones similares a una nariz (cuer-pos de Heinz) y varios policromatfilos.

Fig. 9. Preparacin hmeda diluida por solucin salina que de-muestra la autoaglutinacin.

como cadenas de pequeos (0.5 ) cuerpos basofli-cos en la superficie de los glbulos rojos. (Fig. 13).En los gatos, la enfermedad puede ser primaria o pre-sentarse como secundaria a trastornos inmunosupresi-vos primarios, como por ejemplo la peritonitis infec-ciosa felina (FIP, por su sigla en ingls) o infeccionespor el virus de la leucemia felina (FeLV, por su sigla eningls).La haemobartonelosis felina primaria es una anemiahemoltica tpica con todos los signos correspondien-tes a una marcada regeneracin de glbulos rojos(Fig. 14). Tambin puede estar presente la aglutina-cin, lo que sugiere un componente inmunolgico ala enfermedad. Al igual que en los perros, los organis-mos Haemobartonella (Haemobartonella felis) se venen la superficie de los glbulos rojos. Por lo generalson ligeramente ms grandes que los H. canis y se pre-sentan como cadenas, cuerpos basoflicos individualeso en forma de anillos. La esplenomegalia es un hallaz-go clnico comn en los gatos con haemobartonelo-sis. La haemobartonelosis felina primaria respondebien a las tetraciclinas y tiene un buen pronstico pa-ra su recuperacin.La haemobartonelosis felina secundaria es mucho mscomn y su pronstico es poco satisfactorio. La ane-mia generalmente es no-regenerativa debido a que lamdula est suprimida y no puede responder. El diag-nstico se basa en la presencia de una gran cantidadde organismos en los frotis sanguneos. Se los eliminacon una terapia de tetraciclinas, pero esto no resuelvela enfermedad subyacente. Debido a la estrecha rela-cin entre la haemobartonelosis y los virus inmunosu-presivos, en todos los casos de haemobartonelosis feli-na se deben realizar los exmenes para la det e c c i ndel virus de inmu n o d e ficiencia fe l i n a , la peritonitis in-fecciosa felina y el virus de la leucemia fe l i na.

BabesiosisLa babelosis es una anemia hemoltica producida porla garrapata y es relativamente poco comn en los pe-rros. El organismo causante, Babesia canis, es un pro-tozoo con forma de lgrima que mide de 2.0 a 2.5 de largo.Los organismos B. canis se encuentran en cantidadesvariables dentro de los glbulos rojos en los frotissanguneos de los animales afectados (Fig. 15). Laanemia con frecuencia es acelerada al comienzo ypuede ser bastante severa y altamente regenerativa. Amenudo existe un componente hemoltico inmuno-mediado de la enfermedad; se pueden observar esfe-rocitos en cantidades significativas. Se han registradocasos con poca cantidad de organismos que inicial-mente fueron diagnosticados errneamente comoanemia hemoltica inmunomediada. El tratamientoinapropiado de estos pacientes con esteroides produ-jo una reduccin en la eliminacin de organismos porparte de los macrfagos esplnicos y una acumula-cin concomitante de organismos en la sangre. Al rea-lizar una nueva evaluacin, los organismos son fcil-

mente apreciables y

se puede realizar el diagnstico correcto.

Anemia hemoltica hereditariaExisten dos clases de anemias hemolticas hereditariasrelacionadas con deficiencias de enzimas glicolticasen los perros: la deficiencia de piruvato quinasa y ladeficiencia de fosfofructoquinasa.


Fig. 13 . Haemobartonelosis canina. Varios glbulos tienen ca-denas de organismos basoflicos en sus superficies. Varios po-licromatfilos y un esquistocito.

Fig. 12 . Hipertiroidismo felino. Numerosos glbulos tienencuerpos de Heinz obvios que se proyectan desde sus superfi-cies, pero no hay presencia de anemia.

Fig. 11. Anemia hemoltica por cuerpos de Heinz en el perro,tincin de nuevo azul de metileno. Varios glbulos con cuerposde Heinz (arriba izquierda). Dos reticulocitos con retculosagregados (centro derecha).

La deficiencia de piruvato quinasa se describe en Ba-senjis y Beagles y se la caracteriza como una anemiahemoltica crnica con recuentos de reticulocitos ex-tremadamente altos.Un acortamiento en el perodo de vida de los glbu-los rojos es reflejo de la disminucin de la produc-cin de ATP y de la estabilidad reducida de la mem-brana de los glbulos rojos. La deficiencia de piruva-to quinasa generalmente se diagnostica entre los 3 y 6meses de edad cuando la anemia es moderadamentesevera. A partir de all los valores de los hematocritoscontinan bajando lentamente a medida que la capa-cidad compensatoria de la mdula se deteriora. La en-fermedad puede terminar en un agotamiento medular,en una mielofibrosis o en ambas.La deficiencia de fosfofructoquinasa se describe endos Springer Spaniels. La enfermedad es menos graveque la deficiencia de piruvato quinasa y se caracterizapor una hemlisis crnica moderada con episodiossuperpuestos de hemlisis ms severa relacionadacon el ejercicio o el calor excesivo.

Anemia hemoltica microangiopticaTodas las enfermedades hemolticas descriptas hastael momento se han caracterizado por alteraciones in-ducidas tanto en forma intrnseca como extrnseca enlos glbulos rojos circulantes, las cuales conducen aun acortamiento del perodo de vida de los glbulosrojos. El mencionado acortamiento tambin se puedeproducir cuando los glbulos rojos normales se venforzados a circular por lechos vasculares anormales.Este caso se denomina hemlisis microangioptica.La hemlisis microangioptica se puede presentar enenfermedades en donde se altera la morfologa de loslechos capilares, como por ejemplo: la coagulopataintravascular diseminada, en donde los lmenes capi-lares se distorsionan por el depsito de fibrina; el he-mangiosarcoma, en donde existe coagulopata intra-vascular localizada; la glomerulonefritis, en donde laestructura de los copetes de los glomrulos puedeobliterarse; y otros casos de enfermedades cardacas,en donde los patrones del flujo sanguneo sufren mar-cadas alteraciones. La hemlisis microangiopticacon fragmentacin de glbulos rojos tambin puedeser un aspecto de la enfermedad del "gusano del cora-zn" (heartworm).En los perros, la hemlisis microangioptica se carac-teriza por la presencia de fragmentos de glbulos ro-jos llamados esquistocitos (Fig. 16); en los gatos, espoco comn observar fragmentos. El grado de ane-mia, y por lo tanto, el grado de regeneracin, es de le-ve a moderado.

Anemia metablica con glbulos rojos espiculadosEn los perros, las anemias con glbulos rojos espicula-dos estn relacionadas con algunos casos de enferme-dades hepticas o renales. Estas formas anormales deglbulos rojos probablemente se producen por un in

correcto metabolismo de los lpidos y por una modi-ficacin secundaria en la relacin fosfolpidos/coleste-rol libre del plasma. Los lpidos plasmticos anorma-les se equilibran con los lpidos que se encuentran enla membrana de los glbulos rojos y as se forman losglbulos espiculados. Los glbulos rojos espiculadosson menos flexibles que los normales y de este modose produce algn grado de hemlisis. A pesar delcomponente hemoltico, estas anemias son complejas yge n e ralmente no-re ge n e ra t i vas debido a la inhab i l idad


Fig. 15. Babesiosis canina. El glbulo (centro) tiene dosorganismos con forma de lgrima. Un glbulo rojo (arribaderecha) con un solo organismo.

Fig. 16 Hemlisis microangioptica en coagulopataintravascular diseminada (CID). Numerosos esquistocitos.

Fig. 14 . Haemobartonelosis felina. Varios policromatfilos. Elglbulo rojo (centro) tiene varios cuerpos de Haemobartonellaprominentes.

de la mdula para responder en forma apropiada.Los glbulos rojos espiculados pertenecen a dos cla-ses bsicas: acantocitos y crenocitos (glbulos rojoscrenados, "burr cells"). Los acantocitos son glbulosrojos que tienen en su superficie de 2 a 10 despunta-das y elongadas proyecciones similares a dedos (Fig17). Los crenocitos (glbulos rojos crenados, "burrcells") son glbulos rojos de forma oval con mrgenes

arrugados (Fig. 18). Si bien ambas clases de glbulospueden encontrarse en enfermedades tanto hepticascomo renales, por lo general los acantocitos se rela-cionan con enfermedades hepticas y los crenocitosson ms comunes en las enfermedades renales.

Anemias no-regenerativas

Las anemias no-regenerativas se pueden clasificar endos grandes categoras: anemias por alteraciones en lamaduracin y anemias hipoproliferativas. En la mayorparte de los casos, se requiere una evaluacin de lamdula sea para proporcionar un diagnstico defini-tivo con respecto a cualquiera de las clases de ane-mias no-regenerativas.

Anemias por alteraciones en la maduracinLas anemias por alteraciones en la maduracin son elresultado de anormalidades adquiridas en la mdulasea, en las cuales se detiene el desarrollo nuclear ocitoplasmtico de los precursores de los glbulos ro-jos. La alteracin puede ocurrir solamente en los pre-cursores de los glbulos rojos o puede afectar todaslas lneas celulares proliferativas de la mdula. La m-dula generalmente es hipercelular; sin embargo, dadoque la incrementada cantidad de glbulos rojos inma-duros normales no se libera a la circulacin, la eritro-poyesis no es efectiva.

Anemia por alteracin en la maduracin del ncleoLa anemia por alteracin en la maduracin del ncleoes relativamente comn en los gatos pero bastantepoco frecuente en los perros. Clnicamente, es unaanemia no-regenerativa de leve a severa relacionadacon la leucopenia y la trombocitopenia. La pancito-penia indica un trastorno medular que involucra to-das las lneas celulares.En los frotis sanguneos se observan cantidades varia-bles de glbulos rojos completamente hemoglobiniza-dos (macrocitos), excesivamente grandes. Si son losuficientemente numerosos en la sangre, el VCM seeleva mientras que la CHCM se mantiene normal.Tambin se pueden observar en los frotis sanguneosocasionales glbulos rojos nucleados anormales (Fig.19). Estos glbulos por lo general son bastante gran-des y tienen importantes ncleos inmaduros con cito-plasma completamente hemoglobinizado. Esta morfo-loga indica un desarrollo nuclear detenido en la m-dula; los mencionados glbulos se denominan megalo-blastos.La morfologa en el frotis sanguneo perifrico es indi-cativa de una anemia por alteracin en la maduracindel ncleo. Sin embargo, para obtener un diagnsticodefinitivo, se requiere una evaluacin de la mdula.Las muestras de mdula son hipercelulares con au-mentada actividad en todas las lneas celulares. Lasmencionadas lneas celulares presentan un desarrollonuclear detenido y un desarrollo citoplasmtico nor-mal. Numerosos megaloblastos se observan entre


Fig. 17. Hemangiosarcoma heptico en el perro. Dos acantoci-tos (centro). Un esquistocito (izquierda). Tambin estn pre-sentes numerosas clulas diana, que pueden ser precursorasde acantocitos. La policromasia indica una anemia ligeramen-te regenerativa.

Fig. 18. Glomerulonefritis canina. Numerosos crenocitos (gl-bulos rojos crenados, "burr cells").

Fig. 19 . Virus de la leucemia felina (pelcula sangunea perif-rica). Dos megaloblastos.

los precursores de los glbulos rojos (Fig. 20). Losgranulocitos poseen citoplasma normal pero la mayorparte de los ncleos carecen de cromatina y con pocafrecuencia maduran una vez transcurrida la fase demielocito. Los megacariocitos son ms pequeos delo normal y contienen slo uno o dos ncleos en lu-gar de los 8 a 16 normales.En los gatos, la causa ms comn de anemia por alte-racin en la maduracin del ncleo es el virus de laleucemia felina, que parece interferir directamente enla sntesis de ADN. En los perros, la anemia por altera-cin en la maduracin del ncleo se produce por de-ficiencia de vitamina B12 o de cido flico funcional.Ellas pueden ser verdaderas deficiencias nutricionaleslo cual es poco comn en los animales o inducidaspor medicamentos, que provocan un bloqueo de fola-to. Los agentes quimioteraputicos tales como meto-trexato y dilatina son conocidos antagonistas del fo l a t o .

Anemia por alteracin en la maduracin del citoplasmaLa anemia por alteracin en la maduracin del citoplas-ma se cara c t e riza por un desarrollo nu clear normal yun desarrollo citoplasmtico detenido (es decir, falta dehemoglobinizacin norm a l ) . La causa principal en to-

dos los animales es la deficiencia de hierro . La anemiapor deficiencia de hierro es la etapa final de la prd i d ade sangre .Pa rt i c u l a rmente en los perro s , la anemia por defi c i e n-cia de hierro es morfo l gicamente distintiva . Los gl-bulos rojos son ms pequeos de lo normal y poseenex age radas reas plidas en el centro . Los ndices deglbulos rojos con frecuencia mu e s t ran VCM y CHCMre d u c i d o s . Los glbulos rojos carentes de hierro sonms frgiles de lo norm a l ; los frotis sanguneos a menu-do tienen cantidades signifi c a t i vas de fragmentos deglbulos rojos (Fi g . 2 1 ) .

Anemias hipoproliferativasLas anemias hipoproliferativas no-regenerativas son lasanemias ms comunes en los animales domsticos.En la mayor parte de los casos, los hallazgos en la san-gre perifrica no son especficos y por lo tanto, esesencial realizar una evaluacin de la mdula sea.Las anemias hipoproliferativas se clasifican en cuatrocategoras generales: anemia ocasionada por enferme-dades inflamatorias, anemia ocasionada por reduccinde eritropoyetina, anemia mieloptsica y anemia oca-sionada por toxicidad medular.

Anemia ocasionada por enfermedades inflamatorias

La anemia ocasionada por enfermedades inflamatoriases la ms comn de todos los sndromes anmicos.Se trata de una anemia no-regenerativa, normocrmi-ca, normoctica, leve a moderada que no posee carac-tersticas morfolgicas distintivas. El diagnstico espresuntivo, basado en la evidencia de una enfermedadinflamatoria, por ejemplo, un leucograma que de-muestra inflamacin. Los hallazgos en la mdula season de apoyo; entre ellos se encuentran: hiperplasiagranuloctica, hipoplasia eritroide leve, hiperplasia declula plasmtica, y acumulacin de hemosiderina(hierro) en los macrfagos de la mdula.

Anemia ocasionada por reduccin de eritropoyetina

En gran cantidad de casos de enfermedades renalesen etapa terminal, la produccin de eritropoyetinapor parte del rin se ve reducida. Esto produce unaanemia no-regenerativa, normocrmica y normoctica.En animales hipotiroideos, tambin se produce unadisminucin de la eritropoyetina circulante principal-mente debido a la reduccin de las demandas meta-blicas de oxgeno al nivel de los tejidos. Una vezms, el resultado final es una anemia no-regenerativa,normocrmica y normoctica.

Anemia mieloptsicaLos sndromes mieloptsicos son enfermedades en lascuales una poblacin celular anormal reemplaza la


Fig. 20 . Frotis de mdula sea del mismo caso de la Fig. 19.Un gran megaloblasto (derecha).

Fig. 21 . Anemia por deficiencia de hierro. Numerosos glbu-los rojos poseen exageradas reas plidas en el centro; algu-nos son ms pequeos de lo normal. Un fragmento de glbulorojo (esquistocito centro).

mdula sea normal. Las poblaciones anormales pue-den ser tanto benignas (por ej.: fibrocitos en la mielo-fibrosis) o malignas (por ej.: leucemia). Debido alreemplazo de la mdula, la citopenia de una o ms l-neas celulares es tpica en la sangre perifrica. Lasanemias son severas y no-regenerativas. Con frecuen-cia la leucopenia tambin es bastante severa, y lascantidades de plaquetas son ms variables.En la mayora de los casos, la morfologa de los glbu-los rojos perifricos no es importante. Sin embargo,en algunos casos de mielofibrosis en perros, la poiqui-locitosis es marcada. Una forma particular de poiqui-locito, el dacriocito, ha sido relacionado con la mielo-fibrosis en los perros (Fig. 22). Los dacriocitos soneritrocitos con forma de lgrima.Cada vez que se sospeche la existencia de un sndro-me mieloptsico (es decir, cada vez que exista la pre-sencia de citopenias severas), se debe indicar un exa-men de mdula sea. Los aspirados de mdula seaen casos de sndromes mieloptsicos pueden ser hi-percelulares y con diagnstico inmediato o hipocelu-lares (puncin seca) y sin diagnstico; por lo tanto, encasos sospechosos se debern realizar tanto aspiradosde mdula como biopsias del centro de la mdulasea. Los aspirados medulares de los casos de mielofi-brosis son siempre hipocelulares.

Anemias ocasionadas por toxicidad medularLa citotoxicidad de la mdula se puede producir poretiologas tanto infecciosas como no infecciosas. En-tre las causas infecciosas se encuentran enfermedadestales como infecciones por parvovirus felino y cani-no, infeccin por el virus de la leucemia felina, infec-cin por el virus de inmunodeficiencia felina, y erli-quiosis canina. Adems de la citotoxicidad medulardirecta, algunos de estos agentes pueden producir su-presin medular inmunomediada secundaria. Entrelas causas no infecciosas de toxicidad medular se en-cuentran varias etiologas, tales como toxicidad de losestrgenos, agentes quimioteraputicos del cncer, yradiacin ionizante.El indicador de toxicidad medular en la sangre perif-rica es la citopenia progresiva de una o ms lneas ce-lulares. Los indicios clnicos dependen de cules l-neas celulares estn afectadas y cun severamente loestn. En el caso de los glbulos rojos, el grado deanemia puede ser bastante severo y se trata de unaanemia no-regenerativa. Los pacientes con esta clasede anemia son letrgicos y poseen membranas muco-sas extremadamente plidas. Los pacientes con trom-bocitopenia severa pueden presentarse con trastornossangrantes mientras que aquellos pacientes con gra-nulocitopenia severa pueden presentarse debido a en-fermedades inflamatorias secundarias.Al igual que con los sndromes mieloptsicos, se re-quieren aspirados de mdula y biopsias del centro dela mdula sea para realizar el diagnstico. En casosde toxicidad medular aguda, la necrosis de la mdula

sea puede observarse histolgicamente. Entre losindicios citolgicos de toxicidad aguda en las clulasprecursoras de la mdula se encuentran basofilia y va-cuolacin citoplasmtica, vacuolacin nuclear, formasnucleares extraas, y disociacin citonuclear. En ca-sos de toxicidad medular de duracin ms prolonga-da, la alteracin principal es la hipocelularidad; estodebe evaluarse histolgicamente por medio de biop-sias de mdula. Si la enfermedad se caracteriza por lahipocelularidad de todas las lneas celulares, se la pue-de denominar una anemia aplsica. El pronstico enestos casos es reservado.


Fig. 22. Mielofibrosis en el perro. Un dacriocito (centro y cen-tro arriba) y numerosos ovalocitos.


Captulo 3: Plaquetas en Perodos de Salud y Enfermedad

VISION GENERAL

Las plaquetas son el tercer componente celular dela sangre perifrica; no obstante ello, con frecuenciano son muy tenidas en cuenta en el momento de eva-luar la sangre perifrica tanto en forma cuantitativacomo cualitativa. Dado que el 90% o ms de los tras-tornos hemorrgicos en los perros y gatos se produ-cen por anormalidades en la funcin o cantidad de lasplaquetas, la importancia clnica de estas clulas nodebera subestimarse. Ms an, las plaquetas contie-nen una cantidad significativa de molculas biolgica-mente activas que moderan casos tales como inflama-cin, neovascularizacin, trombosis, hemostasis, fibri-nolisis y coagulacin.

En los frotis sanguneos de rutina, las plaquetas sereconocen como fragmentos citoplasmticos, discoi-des y anucleados que contienen cantidades variablesde grnulos de color prpura. Ultra estructuralmente,son mucho ms complejas. La forma se mantiene apa-rentemente a travs de la interaccin de un espiralmicrotubular citoplasmtico y un esqueleto de mem-brana con actina ubicado por debajo de la membranaplasmtica. La membrana plasmtica presenta nume-rosas invaginaciones, las cuales forman el sistema ca-nalicular abierto (SCA). En el centro del espiral mi-crotubular se encuentran los principales organelos delas plaquetas: dos clases de grnulos (alfa y densos), elsistema tubular denso (STD), mitocondria, lisosomas yperoxisomas. (Ver Fig. 1)

La membrana plasmtica y el SCA se encuentrancubiertos por un glicocalix de glicoprotenas al cualse adhieren los factores de coagulacin y las protenasplasmticas, como por ejemplo las inmunoglobulinas.Dentro del glicocalix existen receptores para los di-versos agonistas plaquetarios que inician las fases deactivacin de las plaquetas. La membrana plasmticaes rica en fosfolpidos, que dan surgimiento a prosta-glandinas y leucotrienos, importantes mediadores mo-leculares del medio inflamatorio. La propia membra-na plasmtica es tambin la principal fuente del factorplaquetario 3 (PF3), un co-factor de coagulacin.

Ambas clases de grnulos plaquetarios contienentambin un sinnmero de molculas activadas biolgi-camente que son importantes para la coagulacin dela sangre y para otros procesos vitales, y que se libe-ran durante la activacin plaquetaria. Los grnulosdensos constituyen una fuente de ATP (adenosin tri-fosfato),ADP (adenosin difosfato), serotonina y calcio.Los grnulos alfa contienen y en ltima instancia libe-ran, factor plaquetario 4 (PF4), factor de von Wille-brand (VWF), fibringeno y factor de coagulacin V.

El STD proviene de retculo endoplasmtico y esel lugar en donde se realiza la sntesis de prostaglandi-nas en las plaquetas. El calcio, un importante compo-nente en la agregacin plaquetaria, tambin se en-cuentra almacenado en altas concentraciones en elSTD.

PRODUCCIN DE PLAQUETAS

Al igual que todas las clulas sanguneas circulan-tes, las plaquetas se originan en la mdula sea. Elprimer precursor reconocible de la plaqueta es el me-gacarioblasto. Los megacarioblastos sufren una endo-mitosis (divisin nuclear sin divisin citoplasmtica) yforman los megacariocitos. Los megacarioblastos po-seen una ploida de ADN de 2N a 4N. Los megacario-citos completamente desarrollados pueden tener unaploida de hasta 64N. Debido a que estas clulas nose dividen a medida que maduran, la cantidad de me-gacariocitos medulares es relativamente baja. Sin em-bargo, a medida que sufren la endomitosis se vuelvenbastante grandes y fcilmente reconocibles en las pre-paraciones medulares citolgicas e histolgicas. Lamanera en la que las plaquetas efectivamente se for-man a partir de los megacariocitos an contina sien-do poco clara. Tambin se debate el lugar principalde la trombopoyesis. Existe alguna evidencia acercade que en diversas especies el lugar predominante pa-ra la formacin de plaquetas es el pulmn en lugar dela mdula. Sin embargo, est claro que la produccinde plaquetas se regula por la masa completa de pla-quetas de todo el cuerpo y no por el nmero de pla-quetas. Varios factores de crecimiento estn involu-

GRNULOS ALFAProtenas adhesivas

VWF trombospondina fibringeno

Moduladores de crecimiento

PF4 Trombospondina TGF-

Factores de Coagulacin

factor V HMWK factor XI fibringeno

SISTEMA TUBULAR DENSO sntesis de

prostaglandina calcio ++

GRNULOS DENSOS ATP ADP calcio ++ serotonina

FACTORESCITOPLASMTICOS factor XIIIESPIRAL

MICROTUBULAR

MEMBRANA PLASMTICA glicoprotena protenas plasmticas factores de coagulacin PF3

SISTEMA CANALICULARABIERTO glicoprotenas protenas plasmticas factores de coagulacin

TGF-: factor de crecimiento transformante

HMWK: Kiningeno de alto peso molecular

Fig. 1. Ultra estructura de la plaqueta.

Modificado de Plow EF and Ginsberg MH: Molecular basis of platelet function.In Hoffman R, et al. (Eds): Hematology: Basic Principles and Practice. NewYork, Churchill Livingstone, 1991, pp 1165-1176

crados en la etapa inicial de la megacariocitopoyesis,entre ellos se incluyen: GM-CSF (factor estimulante decolonias granulocito-macrfago), interleucina 3 (IL 3),IL 6, y el factor estimulante de colonias de megacario-cito. La diferenciacin de megacariocitos a plaquetastambin se controla por factores de crecimiento, en-tre los que se incluyen: trombopoyetina, eritropoyeti-na, GM-CSF y IL 3. Las propias plaquetas contienenmolculas biolgicamente activas (por ej.: PF 4) queinhiben la produccin de megacariocitos, lo que su-giere que tambin puede existir una contra-reaccinnegativa que ayuda a regular la trombopoyesis.

DESTRUCCIN DE PLAQUETAS

Al igual que ocurre con todas las clulas circulan-tes, las plaquetas tienen un perodo de vida limitado.Las plaquetas de los perros circulan por aproximada-mente cinco a siete das, mientras que las plaquetasde los gatos sobreviven slo un poco ms de un da.Las clulas del sistema monocito/macrfago son res-ponsables de la eliminacin de las plaquetas agotadas.Cerca de la mitad son eliminadas por los macrfagosesplnicos y un tercio por los macrfagos del hgado.

FUNCIN DE LAS PLAQUETAS

El rol principal de la plaqueta se lleva a cabo en lahemostasis, en donde cumple tres funciones:

formar el tapn plaquetario primario, actuar como andamio para el depsito de fi b ri n a , y influenciar la retraccin del cogulo.Al realizar estas funciones, las plaquetas sufren

una compleja serie de episodios descriptos colectiva-mente como activacin plaquetaria. Si bien los episo-dios de la activacin pueden describirse secuencial-mente, en realidad, se trata de un proceso dinmicoen donde mltiples episodios ocurren en forma simul-tnea.

Un primer paso de la activacin plaquetaria es laadherencia de plaquetas. En circunstancias normales,las plaquetas circulantes no se adhieren a las paredesvasculares intactas. Sin embargo, cuando las superfi-cies endoteliales se lesionan, las plaquetas rpidamen-te se adhieren a las protenas adherentes del subendo-telio expuesto, entre las que se encuentran el colge-no, la fibronectina y el VWF.

La exposicin de las plaquetas a la trombina, pre-sente como resultado de la activacin simultnea dela cascada de coagulacin, conduce a un cambio en laforma de las plaquetas. Las plaquetas discoides sereunen y desarrollan numerosos filamentos en la su-perficie llamados filapodia. El resultado final es un au-mento del rea de la superficie, que sirve para incre-mentar las posibilidades de la interaccin plaqueta-plaqueta que es crtica para la formacin del tapnplaquetario. La exposicin a la trombina tambin pro-

duce la secrecin granular. El ADP liberado reclutaotras plaquetas al rea. El calcio liberado de las pla-quetas probablemente sea importante en las reaccio-nes de coagulacin. Entre los contenidos liberadospor los grnulos se encuentran: la serotonina, que pro-duce la contraccin vascular; las molculas de adhe-rencia adicionales; los promotores e inhibidores de lacoagulacin; y los promotores de crecimiento, que es-timulan la proliferacin fibroblstica y la formacin dela matriz del tejido conectivo.

El paso final de la formacin del tapn plaquetariollamada agregacin se produce cuando las plaquetasactivadas se unen con el fibringeno. Inicialmente, laagregacin es una reaccin reversible. Sin embargo,con el tiempo el proceso se torna irreversible.

La activacin plaquetaria y la formacin del tapnplaquetario interactan con la cascada de coagulacinde mltiples maneras. El tapn plaquetario propor-ciona una expansin de la superficie sobre la cual seproducen diversas reacciones enzimticas de la casca-da. La unin de fibringeno y trombina a las superfi-cies plaquetarias facilitan ms an la coagulacin., lomismo que lo hacen los co-factores de coagulacin li-berados por las plaquetas en el momento de la secre-cin granular. El factor XIII (factor estabilizante de fi-brina), una enzima que cataliza el entrecruzamiento yla estabilizacin de la fibrina, es liberado por el cito-plasma plaquetario en el momento de la liberacingranular. El entrecruzamiento de la fibrina junto conla interaccin entre el receptor plaquetario de fibrin-geno y la actina plaquetaria, conduce a la retraccindel cogulo, el ltimo paso de la coagulacin.

TRASTORNOS DE LAS PLAQUETAS

Los trastornos plaquetarios se clasifican en dos ca-tegoras principales: anormalidades cuantitativas yanormalidades cualitativas.

Las anormalidades cuantitativas comprenden latrombocitosis y la trombocitopenia. Estas anormalida-des, en especial la trombocitopenia, son ampliamentelas ms importantes y predominantes. Ambas se en-cuentran descriptas en detalle ms adelante.

Las anormalidades cualitativas comprenden: las al-teraciones hereditarias de la funcin plaquetaria en laEnfermedad de von Willebrand, el Sndrome de Che-diak Higashi, y la tromboastenia canina hereditaria.Las mencionadas anormalidades adquieren alteracio-nes funcionales asociadas a terapias con ciertos medi-camentos y a enfermedades sistmicas. Las anormali-dades cualitativas se diagnostican una vez que se des-cartan otras causas de hemorragia. Por lo general, lasalteraciones funcionales plaquetarias no pueden diag-nosticarse a partir de los datos hematolgicos de ruti-na; es por ello que se requiere la realizacin de ex-menes especiales. Estos exmenes se encuentran fue-ra del alcance de este texto y, por lo tanto, no serntratados aqu


Trombocitopenia

TrombocitopeniaLa trombocitopenia, o reduccin en la cantidad de

plaquetas circulantes, se produce debido a uno de loscuatro mecanismos siguientes:

aumento en la utilizacin peri f rica de plaquetas, aumento en la destruccin de plaquetas, aumento en la secuestro de plaquetas, y disminucin de la produccin de plaquetas en

la mdula sea.Los mecanismos se encuentran resumidos en la

Fig. 2.

Aumento en la utilizacin perifrica

El aumento en la utilizacin perifrica se producecuando existe un aumento en la demanda sistmicade plaquetas. Esto sucede en dos estados: coagulopa-ta intravascular diseminada (CID) y prdida de san-gre.

La CID es un sndrome secundario relacionadocon una enfermedad severa subyacente. En la mayorparte de los casos, el proceso subyacente es inflama-torio, pero la CID slo se presenta en algunos casosde neoplasia, necrosis tisular marcada y shock. Inde-pendientemente de la causa inicial, la CID es un sn-drome en donde la excesiva estimulacin de la casca-da de coagulacin conduce al consumo perifricotanto de factores de coagulacin como de plaquetas.

Clnicamente, los animales con una CID completa-mente desarrollada con frecuencia se presentan comopacientes de emergencia con trastornos hemorrgi-cos. Tambin pueden producirse sndromes subclni-cos de la CID. Entre los hallazgos de laboratorio seencuentran la trombocitopenia, la prolongacin deltiempo de tromboplastina parcial activado (APTT, porsu sigla en ingls) y del tiempo de protrombina en unpaso (OSPT, por su sigla en ingls), la disminucin delos niveles de fibringeno, y una mayor cantidad deproductos separados por fibrina. Cuando se presen-tan tres de las anormalidades de laboratorio recindescriptas, entonces se confirma el diagnstico deCID. En los perros, un hallazgo de laboratorio adicio-nal puede ser la presencia de esquistocitos en losfrotis sanguneos perifricos. Con muy poca frecuen-cia se observan esquistocitos en gatos con CID.

La trombocitopenia secundaria a la prdida desangre es leve. Si se observa una trombocitopenia se-vera (recuento de plaquetas de 40.000/l o menor)asociada a prdida de sangre, entonces probablemen-te la trombocitopenia sea la causa en lugar del resulta-do de la hemorragia.

Aumento en la destruccin de plaquetas

Al igual que la trombocitopenia por utilizacin, la

trombocitopenia por destruccin est relacionadacon un acortamiento del perodo de vida de las pla-quetas circulantes, pero en este caso, como resultadode una eliminacin inmunomediada. Como ocurre enla hemlisis inmunomediada, la trombocitopenia in-munomediada puede ser un verdadero sndrome au-toinmune producido por los anticuerpos antiplaqueta-rios circulantes, o puede ser secundaria a una terapiacon medicamentos, enfermedades infecciosas o neo-plasia.

Para el mdico general, el diagnstico especficode trombocitopenia inmunomediada puede ser un de-safo. El grado de trombocitopenia es por lo generalmarcado, con un recuento de 20.000/l o menor. Sepueden realizar aspirados de mdula sea para calcu-lar la cantidad de megacariocitos. La mayor parte delos casos de trombocitopenia inmunomediada se ca-racteriza por un aumento en la cantidad de megaca-riocitos, aunque casos poco comnes poseen cantida-des reducidas. La trombocitopenia por utilizacintambin posee cantidades normales o superiores demegacariocitos. Los indicios clnicos, la historia clni-ca y dems datos de laboratorio, entre ellos pruebasde coagulacin, son tiles para descartar la tromboci-topenia por utilizacin, y de ese modo, realizar undiagnstico presuntivo de trombocitopenia inmuno-mediada. Se puede considerar la realizacin de ex-menes especiales para la trombocitopenia inmunome-diada (por ej.: examen PF 3, examen de anticuerpo an-timegacariocito), aunque el valor de los mismos esdiscutible.

Una vez que se descart a ron otras causas de tro m b o-citopenia y se realiz un diagnstico pre s u n t i vo de tro m-bocitopenia inmu n o m e d i a d a , se puede establecer una te-rapia inmu n o s u p re s i va . De resultar ex i t o s a , la propia te-rapia es suficiente para confi rmar el diag n stico.


Utilizacin prdida de sangre CID

Destruccin inmunomediada

(primaria o secundaria)

Secuestro endotoxemia hepatomegalia hipotermia esplenomegalia

Produccin enfermedad sea

intramedular

Plaquetas

Secuestro de plaquetas

La trombocitopenia puede presentarse en casosde hepatomegalia y esplenomegalia como resultadodel secuestro de plaquetas en los rganos agrandados.Esta enfermedad es mucho ms frecuente en seres hu-manos que en animales, y es muy poco comn en pe-rros y gatos. Se ha demostrado que la hipotermia pro-duce ssecuestro de plaquetas en el hgado. Se presu-me que la trombocitopenia en casos de endotoxemiaes al menos parcialmente el resultado del secuestroen el pulmn.

Trombocitopenia hipoproliferativa

La trombocitopenia hipoproliferativa es el resulta-do directo de la megacariocitopoyesis reducida. En lamayor parte de los casos, existe una reduccin en laproduccin de por lo menos una de las lneas celula-res; los hemogramas generalmente reflejan anemia y/oleucopenia adems de trombocitopenia. Las biopsiasde la mdula sea revelan una reduccin en la canti-dad de precursores de cada una de las lneas celularesafectadas. Para una correcta evaluacin, por lo gene-ral se necesitan realizar aspirados y biopsias de mdu-la. La causa especfica es con frecuencia poco clara yentre ellas se pueden encontrar enfermedades infec-ciosas, toxicidad y mielosupresin por medicamentos,mielofibrosis, enfermedad medular inmunomediada ycncer.

Trombocitosis

La trombocitosis

Documents

Interpretacion Del Hemograma Canino y Felino