Hoff Et Al 1985 an Appraisal of Bone Marrow Biopsy in Assessment of Sick Dogs

8/13/2019 Hoff Et Al 1985 an Appraisal of Bone Marrow Biopsy in Assessment of Sick Dogs

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An A p p r a i s a l o f B o n e Marrow B i o p s y i n A s s e s s m e n t o f S i c k D o g sB . H o f f , J . H . Lumsden a n d V . E . O . V a l l i *

ABSTRACTDogs were c l a s s i f i e d i n t o a n u m b e r

o f d i s e a s e c a t e g o r i e s a c c o r d i n g t oh e m a t o l o g i c a l , c y t o l o g i c a l a n d sero-c h e m i c a l c h a n g e s . A s p i r a t i o n a n d coreb o n e marrow b i o p s i e s were e x a m i n e di n 1 2 8 d o g s i n t h e v a r i o u s d i s e a s e c a t e -g o r i e s a n d c o m p a r e d t o marrow s a m -p l e s i n 3 6 d o g s w h i c h a p p e a r e d c l i n i -c a l l y n o r m a l . D i f f e r e n t i a l c e l l c o u n t son b o n e marrow s m e ar s were ex a m -i n e d i n r e l a t i o n t o t h e b l o o d v a r i a b l e si n a l l a n i m a l s . B l o o d a n d b o n e marrowd a t a ( g r o u p m e a n s ) were c o m p a r e damong t h e n o r m a l a n d d i s e a s e groups.A n e m i a , r e s p o n s i v e a n d p o o r l yr e s p o n s i v e was t h e m o s t f r e q u e n tb l o o d a b n o r m a l i t y . Most d o g s i n t h et h r o m b o c y t o p e n i a g r o u p had i n -c r e a s e d n u m b e r s o f m e g a k a r y o c y t e s i nt h e marrow b u t two d o g s h a d am a r k e d d e c r e a s e . T h e f r e q u e n c y o fs e r i o u s a l t e r a t i o n o f marrow p r o d u c -t i o n o f t h e e r y t h r o i d , m y e l o i d a n dm e g a k a r y o c y t i c s e r i e s wa s l e s s t h a na n t i c i p a t e d . Marrow h e m o p o i e s i s wasn o t s i g n i f i c a n t l y c o m p r o m i s e d i n d o g sw i t h lymphoma or i n d o g s w i t h o t h e rt y p e s o f cancer.Bone marrow e x a m i n a t i o n wa snecessary f o r t h e d i a g n o s i s o f m y e l o f i -b r o s i s a n d p a n c y t o p e n i a a n d was veryh e l p f u l i n t h e groups w i t h i n s u f f i c i e n tc h a n g e i n t h e b l o o d t o p e r m i t a d e f i n i -t i v e d i a g n o s i s t o b e m a d e .

The m y e l o i d - e r y t h r o i d r a t i o was au s e f u l i n d i c a t o r o f marrow responsew h i l e t h e e r y t h r o i d m a t u r a t i o n i n d e xa n d t h e m y e l o i d m a t u r a t i o n i n d e xwere u s e f u l f o r i d e n t i f i c a t i o n o f a l t e r e dp a t t e r n s o f m a t u r a t i o n ( i n e f f e c t i v eh e m o p o i e s i s ) . The r e t i c u l o c y t e r e -sp o n se i n a b s o l u t e numbers i s t h e moste f f i c i e n t a n d c l i n i c a l l y r e l e v a n t mea-sure o f e r y t h r o i d r e s p o n s e .K e y w o r d s : D o g s , bone marrow,b l o o d , h e m a t o l o g y , h e m a t o l o g i c a l

d i s e a s e s , h e m a t o p o i e s i s , m y e l o i d -e r y t h r o i d r a t i o .

RESUMEC e t t e e t u d e p o r t a i t s ur 1 2 8 c h i e n sa t t e i n t s d e d i v e r s e s m a l a d i e s , que l e s

a u t e u r s d i v i s e r e n t e n un c e r t a i n nom-b r e d e groupes, d ' a p r e s l e s c h a n g e -m e n t s h e m a t o l o g i q u e s , c y t o l o g i q u e se t s e r o l o g i q u e s q u ' i l s a f f i c h a i e n t . I l se x a m i n e r e n t d e s b i o p s i e s o s s e u s e s d et o u s ce s c h i e n s e t l e s c o m p a r e r e n t ac e l l e s d e 3 6 t e m o i n s . I l s a n a l y s e r e n t l e sn u m e r a t i o n s c e l l u l a i r e s d i f f e r e n t i e l l e sd e s b i o p s i e s os s e u s e s e n t e n a n t compted e s p a r a m e t r e s s a n g u i n s , c h e z t o u s l e sc h i e n s . I l s comparerent a u s s i l amoyenne d e s r e s u l t a t s d e s examens d usang e t d e l a m o e l l e o s s e u s e d e s c h i e n sd e s d i v e r s gr o u p e s avec c e l l e d e st e m o i n s .Une a n e m i e n o r m a l e m e n t ou med i o c r e m e n t r e g e n e r a t r i c e s ' a v e r a l ' a -n o r m a l i t e s a n g u i n e l a p l u s f r e q ue nt e.La p l u p a r t d e s c h i e n s a t t e i n t s d et h r o m b o c y t o p e n i e a f f i c h a i e n t unea u g m e n t a t i o n d u n o m b r e d e l e u r sm e g a k a r y o c y t e s m e d u l l a i r e s , t a n d i squ e d e u x e n p r e s e n t a i e n t u ne d i m i n u -t i o n marquee. Une a l t e r a t i o n s e r i e u s ed e l a p r o d u c t i o n m e d u l l a i r e d e s c e l -l u l e s d e s l i g n e e s e r y t h r o i d e e tm y e l o i d e , a i n s i qu e d e s m e g a k a r y o -cytes se r e v e l a e n d e V a d e s p r e v i s i o n s .P a r a i l l e u r s , I ' h e m o p o i e s e m e d u l l a i r ene s ' a v e r a pas s e r i e u s e m e n t c o m p r o -m i s e , c h e z l e s c h i e n s a t t e i n t s d e l y m -phome m a l i n ou d ' a u t r e s cancers.L ' e x a m e n d e l a m o e l l e o s s e u s es ' a v e r a n e c e s s a i r e p o u r l e d i a g n o s t i c d el a m y e l o f i b r o s e e t d e l a p a n c y t o p e n i e ;i l se r e v e l a a u s s i t r e s u t i l e d a n s l e sgroupes q u i s o u f f r a i e n t d ' u n c h a n g e -ment s a n g u i n i n s u f f i s a n t p o u r p e r m e t -t r e d e poser un d i a g n o s t i c d e f i n i t i f .Le r a p p o r t e n t r e l e s c e l l u l e sm y e l o i d e s e t e r y t h o i d e s se r e v e l a un

i n d i c e u t i l e d e l ' a c t i v i t e m e d u l l a i r e ,t a n d i s qu e l ' i n d i c e d e m a t u r a t i o n d e sc e l l u l e s e r y t h r o i d e s e t c e l u i d e s c e l l u l e sm y e l o i d e s f a c i l i t e r e n t l ' i d e n t i f i c a t i o nd e s a l t e r a t i o n s d e s p r o f i l s d e m a t u r a -t i o n , l o r s d ' h e m o p o i E s e i n s u f f i s a n t e .L e nombre a b s o l u d e r e t i c u l o c y t e s s er e v e l a l a m e s u r e c l i n i q u e l a p l u s e f f i -cace e t l a p l u s s i g n i f i c a t i v e d el ' e r y t h r o p o i e s e .Mots c l e s : c h i e n s , m o e l l e o sseuse,sang, h e m a t o l o g i e , m a l a d i e s d u sang,h e m o p o k e s e , r a p p o r t e n t r e l e s c e l l u l e sm y e l o Y d e s e t e r y t h r o i d e s .

INTRODUCTIONB o n e marrow b i o p s y i s c o n s i d e r e d a

v a l u a b l e a d j u n c t t o t h e s t u d y o f d i s -eases o f t h e h e m o p o i e t i c t i s s u e s . T h e r eare many r e p o r t s r e g a r d i n g t h e u s e o fb o n e marrow e x a m i n a t i o n i n d o g s b u tt h e r e are f e w d e t a i l e d c l i n i c a l s t u d i e so f marrow c h a n g e s i n s p e c i f i c d i s e a s ec o n d i t i o n s . The t e c h n i q u e h a s b e e ns a f e i n a l m o s t a l l c i r c u m s t a n c e s , e v e ni n t h r o m b o c y t o p e n i c s t a t e s 1 - 1 7 ) , b u tv e t e r i n a r i a n s h a v e b e e n h e s i t a n t t o u s emarrow b i o p s y r o u t i n e l y as an a i d t od i a g n o s i s . The reasons f o r t h i s r e s i s -t a n c e are n o t c l e a r b u t may i n c l u d el a c k o f t r a i n i n g a n d p r a c t i c e i n c o l l e c -t i o n , e v a l u a t i o n a n d i n t e r p r e t a t i o n o fb o n e marrow b i o p s i e s .The o b j e c t i v e o f t h i s w o r k was t oe v a l u a t e t h e p e r i p h e r a l b l o o d a n db o n e marrow f i n d i n g s i n c l i n i c a l l yn o r m a l d o g s a n d d o g s w i t h v a r i o usd i s e a s e s . We f e l t t h a t t h e c h a n g e s i nt h e b l o o d w o u l d b e r e f l e c t e d b yc h a n g e s i n t h e bone marrow t h a tw o u l d b e o f d i a g n o s t i c a n d p r o g n o s t i cs i g n i f i c a n c e .

MATERIALS AND METHODSS a m p l e s o f p e r i p h e r a l b l o o d , serum

Can J Comp M e d 1 9 8 5 ; 4 9 : 3 4 - 4 2 .

* D e p a r t m e n t o f P a t h o l o g y , O n t a r i o V e t e r i n a r y C o l l e g e , U n i v e r s i t y o f G u e l p h , G u e l p h , O n t a r i o N I G 2W 1 . P r e s e n t a d d r e s s o f s e n i o r a u t h o r : O n t a r i oM i n i s t r y o f A g r i c u l t u r e a n d F o o d , V e t e r i n a r y L a b o r a t o r y S e r v i c e s , Box 3 6 1 2 , G u e l p h , O n t a r i o NIH 6 R 8 .S u b m i t t e d J a n u a r y 2 8 , 1 9 8 3 .

3 4


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a n d b o n e marrow f r o m 3 6 d o g s t h a tw e r e c o n s i d e r e d c l i n i c a l l y n o r m a l a n d1 2 8 d o g s w i t h v a r i o u s d i s e a s e s w e r es t u d i e d f r o m J u n e 1 9 8 1 t o May 1 9 8 2 .The 3 6 c l i n i c a l l y n o r m a l d o g s u s e da s r e f e r e n c e a n i m a l s w e r e o f m i x e db r e e d a n d e s t i m a t e d t o b e o n e t o t h r e ey e a r s o f a g e . T h e s e d o g s w e r e d i v i d e di n t o t w o g r o u p s b a s e d u p o n h e m a t o -l o g i c a l i n f o r m a t i o n , p r i m a r i l y r e l a t e dt o l o w e r y t h r o c y t e v a l u e s . T w e n t y o n ew e r e a s s i g n e d t o t h e r e f e r e n c e g r o u pn o r m a l h e m a t o l o g y a n d 1 5 t o r e f e r -e n c e g r o u p a b n o r m a l h e m a t o l o g y( T a b l e I I . T w e n t y - n i n e o f t h e 3 6 d o g sw e r e s t r a y s ( A n i m a l C a r e C o m m i t t e ea p p r o v a l ) w h e r e a s s e v e n d o g s w e r ep r e c o n d i t i o n e d f o r s i x w e e k s .T h e c l i n i c a l l y a b n o r m a l d o g s w e r ed i v i d e d i n t o t e n d i s e a s e g r o u p s ( T a b l eI . Some o f t h e a n i m a l s w e r e i n c l u d e di n m o r e t h a n o n e g r o u p . D o g s w e r ec l a s s i f i e d a s a n e m i c o n t h e b a s i s o fh e m a t o c r i t ( H c t ) , h e m o g l o b i n ( H b )a n d r e d b l o o d c e l l c o u n t (RBC)( H c t < 0 . 3 7 L / L , Hb


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o n l y c o r e b i o p s i e s w e r e o b t a i n e d .A l l r e f e r e n c e d o g s a n d 2 4 d o g s o f t h ed i s e a s e d g r o u p w e r e b i o p s i e d w i t h i n2 4 h o u r s p r e c e e d i n g d e a t h o r e u t h a n a -s i a . B i o p s i e s w e r e a l s o c o l l e c t e d f r o mt h e f e m u r o f t h e s e d o g s w i t h i n o n eh o u r f o l l o w i n g d e a t h . T h e f e m ur w a sr e m o v e d a n d h e m i s e c t i o n e d f o r e a s e o fs a m p l i n g . T h e b o n e m a r r o w p a r t i c l es m e a r s a n d s q u a s h p r e p a r a t i o n s w e r er o u t i n e l y s t a i n e d u s i ng W r i gh t ' s s t a i na n d t h e P r u s s i a n b l u e r e a c t i o n f o ri r o n .A d i f f e r e n t i a l c o u n t o n 1 , 0 0 0n u c l e a t e d c e l l s w e r e m a d e f r o m t h eW r i g h t ' s s t a i n e d b o n e m a r r o w s m e a r so n e a c h o f t h e 1 6 4 d o g s . N o m e n c l a t u r ea n d c r i t e r i a f o r c e l l i d e n t i f i c a t i o n a r et h o s e o f t h e C o m m i t t e e f o r C l a r i f i c a -t i o n o f t h e N o m e n c l a t u r e o f C e l l s a n dD i s e a s e s o f t h e B l o o d a n d B l o o d -F o r m i n g O r g a n s ( 1 9 4 8 - 1 9 5 0 ) , a s d e -s c r i b e d b y S c h a l m ( 2 0 ) . R e t i c u l o e n -d o t h e l i a l c e l l s a s u s e d h e r e i n r e f e r s t ob a r e n u c l e i w i t h c r i b r i f o r m c h r o m a t i np a t t e r n a n d p r o m i n e n t n u c l e o l i ( 2 0 ) .T h e b o n e m a r r o w a s p i r a t i o n s a m p l e( 1 - 2 mL) w a s f i x e d i n 1 0 % f o r m a l i n f o rp a r t i c l e s e c t i o n i n g ( 1 2 , 1 4 , 1 5 ) . P a r a f f i ns e c t i o n s , 3 - 6 , u m t h i c k , w e r e p r e p a r e du s i n g P e t i r f i ' s d o u b l e e m b e d d i n gm e t h o d a n d w e r e s t a i n e d u s i n g h e m a -t o x y l i n a n d e o s i n , G i e m s a , P r u s s i a nb l u e r e a c t i o n t o d e m o n s t r a t e h e m o s i -d e r i n , M a s s o n - t r i c h r o m e f o r c o l l a g e na n d G o r d o n - S w e e t ' m e t h o d f o r r e t i -c u l i n f i b r e s .T h e m y e l o i d - e r y t h r o i d ( M : E ) r a t i o ,t h e e r y t h r o i d m a t u r a t i o n i n d e x ( E M I )a n d t h e m y e l o i d m a t u r a t i o n i n d e x( M M I ) , w e r e c a l c u l a t e d i n a n a t t e m p tt o e v a l u a t e t h e e r y t h r o i d a n d m y e l o i dm a r r o w r e s p o n s e . T h e e r y t h r o i d m a t -u r a t i o n i n d e x ( E M I ) i s t h e sum o f e r y -t h r o i d m a t u r a t i o n p h a s e c e l l s ( p o l y -c h r o m a t i c r u b r i c y t e s , n o r m o c h r o m i cr u b r i c y t e s a n d m e t a r u b r i c y t e s ) d i v i d e db y t h e s u m o f e r y t h r o i d p r o l i f e r a t i v ep h a s e c e l l s ( r u b r i b l a s t s , p r o r u b r i c y t e s ,b a s o p h i l i c r u b r i c y t e s ) . T h e m y e l o i dm a t u r a t i o n i n d e x (M M I ) i s t h e s u m o fm y e l o i d m a t u r a t i o n p h a s e c e l l s( m e t a m y e l o c y t e s , b a n d a n d s e g m e n t e dn e u t r o p h i l s ) d i v i d e d b y t h e s u m o fm y e l o i d p r o l i f e r a t i v e p h a s e c e l l s ( m y e -l o b l a s t s , p r o m y e l o c y t e s a n d m y e l o -c y t e s ) . T h e s e r a t i o s ( E M I a n d MMI)w e r e d e t e r m i n e d i n o r d e r t o d e t e c ta s y n c h r o n y o f m a t u r a t i o n a n d t o t e s tt h e v a l u e o f t h e s e i n d i c e s i n i n t e r p r e t a -t i o n o f v a r i o u s d i s e a s e c o n d i t i o n s .

C e l l u l a r i t y w a s a s s e s s e d b y s u b j e c -t i v e e v a l u a t i o n o f a s p i r a t e d g r a n u l e sa n d r e c o r d e d a s p e r c e n t c e l l u l a r i t y( T a b l e I I - I V ) .T h e p e r i p h e r a l b l o o d a n d b o n e m a r -r o w r e s u l t s f o r e a c h d o g w e r e r e c o r d e db y g r o u p u s i n g a r e c o r d a d m i n i s t r a -t i o n p r o g r a m ( M a b r a , I . P . S h a r pA s s o c i a t e s , T o r o n t o , O n t a r i o ) , e x a m -i n e d f o r G a u s s i a n d i s t r i b u t i o n , l o gt r a n s f o r m e d i f n o n - G a u s s i a n , a n a -l y z e d u s i n g a n a l y s i s o f v a r i a n c e(ANOVA) (APL S h a r p U n i v e r s i t y o fG u e l p h s t a t i s t i c s p r o g r a m , J . H i n e s ,D e p a r t m e n t o f M a t h e m a t i c s a n d S t a -t i s t i c s , U n i v e r s i t y o f G u e l p h ) a n d l e a s ts i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e ( L S D ) ( 3 8 ) t oi n d i c a t e t h e p r e s e n c e o f s i g n i f i c a n t d i f -f e r e n c e s b e t w e e n m e a n v a l u e s f o r t h ed e s i g n a t e d g r o u p s . D e s c r i p t i v e s t a t i s -t i c s w e r e d e t e r m i n e d f o r e a c h g r o u p(APL S h a r p U n i v e r s i t y o f G u e l p h s t a -t i s t i c s p r o g r a m , 2 2 D S T A T ) .

RESULTST h e o b s e r v a t i o n s f r o m p e r i p h e r a lb l o o d a n d b o n e m a r r o w s t u d i e s a r er e c o r d e d i n T a b l e s I I , I I I a n d I V . T h es e r u m i r o n , u n b o u n d i r o n - b i n d i n g a n dt o t a l i r o n b i n d i n g c a p a c i t y o f t h e v a r -i o u s g r o u p s a r e r e c o r d e d i n T a b l e V . Ac o m p a r i s o n w i t h t h e l i t e r a t u r e o nc y t o l o g i c a l e x a m i n a t i o n o f b o n e m a r -r o w o f t h e d o g i s p r e s e n t e d i n T a b l eV I .I n c r e a s e s i n M:E w e r e f o u n d f o r t h ep o o r l y r e s p o n s i v e a n e m i a , r e n a l f a i l u r ea n d m y e l o f i b r o s i s g r o u p s ( g r o u p s 3 , 7a n d 8 r e s p e c t i v e l y ) . G r o u p mean b o n emarrow t o t a l g r a n u l o c y t e s w e r e

d e c r e a s e d o n l y i n a n i m a l s w i t h r e s p o n -s i v e a n e m i a ( g r o u p 4 . A l o w e r meanM:E w a s n o t f o u n d f o r t h e r e s p o n s i v ea n e m i a a n d IHA g r o u p s , a l t h o u g ht h e r e w a s a n i n c r e a s e i n t o t a l e r y t h r o i dc e l l s . H o w e v e r , i n t h e r e s p o n s i v e a n e -m i a s ( g r o u p 4 a n d 5 ) t h e M:E w a sb e l o w o n e . T h e M:E r a t i o f o r t h et h r o m b o c y t o p e n i a g r o u p w a s 2 . 7 w i t ha p e r i p h e r a l r e t i c u l o c y t o s i s . T h e M:Ew a s i n c r e a s e d f o r a n i m a l s w i t h m y e l o -f i b r o s i s ( g r o u p 8 ) a n d w a s h i g h e r b u tn o t s i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t f o r a n i m a l sw i t h n e u t r o p e n i a , n e u t r o p h i l i a , l y m -phoma a n d c a n c e r o t h e r t h a n l y m -phoma ( g r o u p s 9 , 1 0 , 1 1 a n d 1 2r e s p e c t i v e l y ) .The t o t a l e r y t h r o i d c e l l s a r ei n c r e a s e d i n t h e r e s p o n s i v e a n e m i a

g r o u p s ( 4 a n d 5 ) b u t r e d u c e d i n t h ea n i m a l s w i t h m y e l o f i b r o s i s , l y m -phoma a n d c a n c e r o t h e r t h a n l y m -phoma ( g r o u p s 8 , 1 1 a n d 1 2 r e s p e c -t i v e l y ) . T h e n u m b e r s o f l a t e r u b r i c y t e sa r e r e d u c e d i n a l l b u t t h e r e s p o n s i v ea n em i a a n d t h r o m b o c y t o p e n i a g r o u p s .T h e r e n a l f a i l u r e g r o u p a n d t h e m y e -l o f i b r o s i s g r o u p s h a d i n c r e a s e d b o n em a r r o w n e u t r o p h i l s a n d i n c r e a s e dMMI. A d e c r e a s e w a s n o t e d i n t h eb o n e marrow e o s i n o p h i l s i n a l lg r o u p s .A p o o r p r o g n o s i s a s s o c i a t e d w i t hm a r r o w m e t a s t a s i s c o u l d b e d e m o n -s t r a t e d o n l y i n a n i m a l s w i t h l y m -phoma a n d m a s t c e l l t um o r s w h e r e

t h e r e w e r e s u f f i c i e n t c a s e s f o r c o m p a r -i s o n . S i x t e e n o f 3 4 d o g s w i t h l y m -phoma h a d t u m o r c e l l s i n t h e b o n em a r r o w . F i f t e e n o f t h e s e 1 6 d o g s l i v e d< 3 m o n t h s a n d e i g h t d o g s e i t h e r d i e do r w e r e e u t h a n i z e d i n 6 m o n t h s .

I n t h e I T P g r o u p t h e r e w e r e s i x o ft e n d o g s w i t h i n c r e a s e d n u m b e r s o fs m a l l i m m a t u r e m e g a k a r y o c y t e s w i t hc y t o p l a s m i c v a c u o l a t i o n , i n c r e a s e db a s o p h i l i a a n d d e c r e a s e d g r a n u l a t i o n .I n t w o d o g s n o m e g a k a r y o c y t e s w e r ev i s i b l e i n t h e b o n e m a r r o w b i o p s i e s .One o f t h e s e d o g s d i e d i n a b l e e d i n gd i a t h e s i s a n d t h e o t h e r h a d a p r o -t r a c t e d r e c o v e r y l a s t i n g s e v e r a l w e e k s .T h e e i g h t d o g s w i t h m e g a k a r y o c y t e s a l lr e c o v e r e d i n t w o t o f i v e d a y s a f t e r t h e r -a p y w i t h s t e r o i d s a n d / o r v i n c r i s t i n e .

T h e d o g s w i t h m y e l o f i b r o s i s a l l h a d d r y t a p s o n b o n e marrow a s p i r a t i o n .D i a g n o s i s w a s c o n f i r m e d o n t h e h i s t o -l o g i c a l s e c t i o n o f t h e c o r e b i o p s y . Onr e t r o s p e c t i v e e x a m i n a t i o n , a l l d o g sw i t h m y e l o f i b r o s i s h a d o v a l o c y t e s i nt h e p e r i p h e r a l b l o o d s m e a r s . F o u rd o g s r e c o v e r e d and t h e f i b r o s i sd e c r e a s e d w i t h s t e r o i d a n d / o r c y c l o -p h o s p h a m i d e t h e r a p y . One d o g h a d at r a n s f u s i o n r e a c t i o n a n d w a s e u t h a n -i z e d . T h e r e m a i n i n g f o u r d o g s w e r ec l i n i c a l l y n o r m a l o n e y e a r p o s t d i a g n o -s i s . T h r e e w e r e l o s t t o f o l l o w u p .

O f t h e t e n d o g s w i t h m a s t - c e l lt u m o r , f o u r h a d c l u s t e r s o f m a s t c e l l si n t h e b o n e m a r r o w . T h e s e f o u r a n i m -a l s e i t h e r d i e d o r w e r e e u t h a n i z e dw i t h i n f o u r d a y s . The r e m a i n i n g s i xd o g s w e r e c l i n i c a l l y n o r m a l a t 9 0 d a y sp o s t d i a g n o s i s .

3 6


4/9

'TABLE I I R e s u l t s o f A n a l y s i s o n P e r i p h e r a l B l o o d a n d B o n e M a r r o w f r o m N o r m a l a n d D i s e a s e d D o g sR e f e r e n c e w i t h R e f e r e n c e A n e m i a A n e m i aN o r m a l H e m a t o l o g y A b n o r m a l H e m a t o l o g y P o o r l y R e s p o n s i v e R e s p o n s i v e( g r o u p 1 ( g r o u p 2 ) ( g r o u p 3 ) ( g r o u p 4 )Mean R a n g e Mean R a n g e Mean R a n g e Mean R a n g e( n = 2 1 ) ( n = 1 5 ) ( n = 6 0 ) ( n = 1 5 )

P e r i p h e r a l B l o o dWBCRBCHbHCTMCVMCHMCHCS e g sB a n d sL y m p h o c y t e s

U n i t s1 0 9 / Ll 0 / L1 0 1 2 / Lg / LL/Lf Lp gg / L, u L

9 . 46 . 91 6 30 . 4 56 62 4

3 6 45 9 2 2

M L 6 8M L 2 0 5 3M o n o c y t e s , u LE o s i n o p h i l s ALB a s o p h i l s ,LR u b r i c y t e s , u LI m m a t u r e g r a n u l o c y t i c ALD i s i n t e g r a t e d M A LP l a t e l e t s x 1 0 9 / LP l a t e l e t e s t i m a t e x 1 0 9 / LP r o t e i n b g / LP o l y c h r o m a s i a NR e t i c u l o c y t e s A b s o l u t e r e t i c u l o c y t e s 1 0 / L

7 9 45 4 5

450

4 32 5 06 50 . 10 . 65 0

B o n e Marrow D i f f e r e n t i a l 1 0 0 0 C e l l sR u b r i b l a s t - p r o r u b r i c y t e 1 2 . 2E a r l y r u b r i c y t e 6 8 . 3L a t e r u b r i c y t e 2 5 1 . 2M e t a r u b r i c y t e 3 0 . 9T o t a l e r y t h r o i d 3 6 2 . 7L y m p h o c y t e 6 0 . 6P l a s m a 2 0 . 5M o n o c y t e / m a c r o p h a g e 1 4 . 9R e t i c u l o e n d o t h e l i a l 3 . 4M y e l o b l a s t - p r o m y e l o - m y e l o c y t e 5 5 . 9M e t a m y e l o c y t e 1 1 1 . 7B a n d 1 1 7 . 6N e u t r o p h i l s 1 8 5 . 9E o s i n o p h i l s 4 6 . 4B a s o p h i l s 0 . 8U n i d e n t i f i e d c e l l s 0 . 7B a r e n u c l e i 1 9 . 3T o t a l g r a n u l o c y t e s 5 1 8 . 2M:E 1 . 6EMI 3 . 6MM 8 . 8C e l l u l a r i t y 5 0 . 9

6 . 6 - 1 4 . 45 . 9 - 8 . 11 4 0 - 1 9 90 . 3 8 - 0 . 5 45 7 - 7 22 1 - 2 6

3 5 5 - 3 8 23 4 8 3 - 1 0 5 1 2

8 . 25 . 6 a1 3 2 a0 . 3 6 a6 42 33 7 05 2 6 2

0 - 4 3 6 2 61 2 4 1 - 3 0 6 8 1 3 6 82 1 9 - 1 4 5 6

0 - 2 6 1 80 - 8 10-10900 - 6 5 4

1 7 5 - 4 0 05 7 - 7 3

0 - 10 - 2 . 43 0 - 8 0

0 - 2 34 0 - 9 47 8 - 3 4 18 - 7 3

1 5 9 - 5 2 22 3 - 1 2 96 - 4 46 - 4 00 - 1 1

1 9 - 1 3 44 9 - 2 6 07 1 - 1 6 28 5 - 3 0 41 2 - 9 00 - 30- 90 - 5 2

3 2 8 - 6 9 20 . 6 - 4 . 41 . 3 - 4 . 93 . 6 - 2 6 . 74 0 - 6 0

5 9 58 3 8

0

44 60

2 6 26 20 . 10 . 65 01 3 . 16 2 . 2

2 2 4 . 83 9 . 53 3 9 . 6

6 7 . 11 6 . 71 5 . 31 . 55 7 . 11 4 1 . 91 3 4 . 31 6 3 . 25 4 . 70 . 70 . 11 8 . 7

5 5 1 . 81 . 73 . 71 0 . 45 3 . 3

3 . 4 - 1 8 . 7 1 6 . 94 . 7 - 6 . 8 4 . l a9 9 - 1 6 0 g o a0 . 2 7 - 0 . 4 3 0 . 2 6 a5 9 - 6 9 6 42 1 - 2 6 2 3 a

3 5 6 - 3 7 5 3 4 9 a1 4 9 6 - 1 4 5 8 5 1 0 6 0 0

0 - 1 9 6 l O l a3 2 7 - 2 8 7 5 3 4 0 00 - 1 8 7 0

1 8 3 - 2 4 9 00

0 - 6 00 - 5 6 10

1 5 0 - 4 0 05 3 - 7 0

0 - 0 . 50 - 2 . 43 0 - 8 0

3 . 0 - 2 3 . 63 5 - 9 2

1 2 8 - 3 6 47 - 9 6

2 2 1 - 4 8 33 0 - 1 0 93 - 3 41 - 3 00 - 7

1 5 - 1 0 45 7 - 2 4 27 1 - 2 2 06 3 - 2 6 33 0 - 7 70 - 30 - 20 - 7 0

4 3 5 - 7 0 30 . 9 - 2 . 82 . 2 - 6 . 54 . 1 - 3 9 . 24 5 - 6 5

1 1 4 23 2 8

0

1 2 63 1 29 51 0 5

2 8 96 60 . 71 . 76 5

1 2 . 27 0 . 2172.8a2 9 . 82 8 1 . 69 6 . 91 4 . 0 a2 4 . 56 . 76 0 . 91 2 1 . 51 2 2 . 2

2 2 1 . 42 6 . 6 a0 . 80 . 22 2 . 65 5 3 . 6

6.4a2.7a

1 3 . 663. 8aa S u p e r s c r i p t i n d i c a t e s s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e from r e f e r e n c e mean ( P < 0 . 0 5 )b T S - M e t e r , A m e r i c a n O p t i c a l , B u f f a l o , N . Y . 1 4 2 1 5

DISCUSSIONT h e g o a l o f t h i s s t u d y was t o d e t e r -m i n e t h e d i a g n o s t i c a n d p o s s i b l yp r o g n o s t i c v a l u e o f e x a m i n i n g t h eb o n e marrow i n s i c k d o g s . We a t t e m p -

t e d t o c o r r e l a t e t h e p e r i p h e r a l b l o o da n d b o n e marrow d a t a from 1 2 8 d o g sw i t h a v a r i e t y o f d i s e a s e s . Th e d o g swere p l a c e d i n t o d i s e a s e c a t e g o r i e s

a c c o r d i n g t o h e m a t o l o g i c a l a n d c y t o -l o g i c a l d a t a a n d a n u m b e r o f c h a r a c -t e r i s t i c s o f b o n e marrow were com-p a r e d among t h e d i s e a s e groups. Thes y s t e m o f c l a s s i f i c a t i o n i s f a r f r o m per-f e c t , b u t i t i s a n a t t e m p t b y t h e a u t h o r st o show t h e v a r i o us d i s e a s e groups asc l e a r l y as p o s s i b l e . Some o f t h e s eg ro u p s o v e r l a p p e d .

D o g s w i t h p o o r l y r e s p o n s i v e ane-

m i a f o r m e d t h e l a r g e s t group a n dr e p r e s e n t s a very common c l i n i c a lc o n d i t i o n . T h i s g r o u p i n c l u d e d a var-i e t y o f d i s e a s e s a n d 4 8 o f t h e 6 0 a n i m -a l s h a d n e o p l a s i a , t h r o m b o c y t o p e n i a ,r en a l d i s ea s e o r m y e l o f i b r o s i s . A f e wd o g s h a d e n d o c r i n e d i s o r d e r s , b l o o dl o s s a n d o t h e r immune m e d i a t e d d i s -e a s e s . I n a case o f h i s t o p l a s m o s i s , t h ep a r a s i t e s were f i r s t s e e n i n marrow

37

2 . 1 - 1 2 81 . 2 - 6 . 23 0 - 1 3 40 . 1 0 - 0 . 3 64 9 - 7 91 5 - 2 6

3 0 0 - 4 1 11 6 4 -5 9 3 0 00 - 2 0 5 8 00 - 1 2 0 0 0 00 - 5 4 0 10 - 1 5 8 20 - 00 - 2 9 4 00 - 1 6 4 6 40 - 3 8 4 07 - 5 7 5

5 0 - 7 0 03 8 - 1 0 80 - 10 - 3 . 20 - 1 1 80 - 2 90 - 2 0 20 - 4 9 60 - 2 0 37 - 7 4 52 - 9 5 71 - 6 40 - 4 8 40 - 2 0 80 - 2 8 10 - 3 8 00 - 3 4 12 5 6 40 - 1 6 80 - 1 60 - 50 - 1 4 92 9 2 30 . 1 - 9 60 - 1 00 - 8 0 . 58 - 1 0 0

3 0 . 6 a3 . 3 a8 0 a0 . 2 4 a7 4 a2 5

3 4 1 a1 8 0 0 0 a2 9 0 0 a1 5 3 82 4 3 33 4 5 a0

4 a3 3 31 0 81 3 51 8 4 a6 79 . 8 a1 2 . 12 9 02 3 . 6 a1 5 3 . 5 a3 1 0 . 54 8 . 15 3 5 . 6 a3 3 . 71 0 . 6 a1 5 . 12 . 74 1 . 79 2 . 31 0 3 . 91 3 0 . 52 0 . 3 a1 . 10 . 11 3 . 73 8 9 . 3 a0 . 82 . 5 a9 . 87 1 . I a

6 . 8 - 9 7 . 41 . 6 - 4 . 94 9 - 1 1 70 . 1 3 - 0 . 3 56 1 - 8 52 2 - 3 02 9 2 - 4 7 9

4 6 0 0 - 3 8 0 0 00 - 1 1 7 0 0

1 4 7 - 3 8 9 60 - 9 0 7 20 - 1 4 7 90 - 00 - 40 - 3 8 9 60 - 8 8 88 - 4 0 02 0 - 3 0 05 - 9 20 . 5 - 2 92 . 3 - 3 0

8 7 - 5 4 05 - 5 8

5 8 - 3 6 01 1 0 - 4 6 71 5 - 8 12 6 5 - 7 1 11 8 - 8 85 - 4 12 - 4 10 - 1 1 5 - 6 82 8 - 1 5 04 4 - 1 7 12 6 - 2 4 57 - 4 50 - 1 10 - 10 - 7 4

2 0 3 - 6 1 50 . 3 - 2 . 20 . 7 - 4 . 42 . 8 - 2 7 . 55 0 - 8 5


5/9

TABLE I I I . R e s u l t s o f A n a l y s i s o f P e r i p h e r a l B l o o d a n d B o n e M a r r o w f r o m N o r m a l a n d D i s e a s e d D o g sR e f e r e n c eN o r m a l IHA I T P R e n a l F a i l u r e M y e l o f i b r o s i sH e m a t o l o g y ( g r o u p 5 ) ( g r o u p 6 ) ( g r o u p 7 ) ( g r o u p 8 )Mean Mean R a n g e Mean R a n g e Mean R a n g e Mean R a n g e( n = 2 1 ) ( n = 8 ) ( n = 1 0 ( n = S ) ( n = 5 )

P e r i p h e r a l B l o o dWBCRBCHbHCTMCVMCHMCHCS e g sB a n d sL y m p h o c y t e sM o n o c y t e sE o s i n o p h i l sB a s o p h i l sR u b r i c y t e sI m m a t u r e g r a n u l o c y t i cD i s i n t e g r a t e dP l a t e l e t sP l a t e l e t e s t i m a t eP r o t e i n bP o l y c h r o m a s i aR e t i c u l o c y t e sA b s o l u t e r e t i c u l o c y t e s

U n i t s1 0 9 / L1 0 ' 2 / Lg / LL / Lf Lp gg / L, u L, u LA u LA u L, u L, u LA u L, u L, u Lx 1 0 9 / Lx 1 0 9 / Lg / Lx 1 0 / L

B o n e M a r r o w D i f f e r e n t i a l 1 0 0 0 C e l l sR u b r i b l a s t - p r o r u b r i c y t eE a r l y r u b r i c y t eL a t e r u b r i c y t eM e t a r u b r i c y t eT o t a l e r y t h r o i dL y m p h o c y t e sP l a s m aM o n o c y t e s / m a c r o p h a g e sR e t i c u l o e n d o t h e l i a lM y e l o b l a s t - p r o m y e l o - m y e l o c y t eM e t a m y e l o c y t eB a n dN e u t r o p h i l sE o s i n o p h i l sB a s o p h i l sU n i d e n t i f i e d c e l l sB a r e n u c l e iT o t a l g r a n u l o c y t e sM:EEM IM M IC e l l u l a r i t y

9 . 46 . 91 6 30 . 4 56 62 43 6 4

5 9 2 26 82 0 5 37 9 45 4 545

04 32 5 06 50 . 10 . 65 01 2 . 26 8 . 32 5 1 . 23 0 . 93 6 2 . 76 0 . 62 0 . 51 4 . 93 . 45 5 . 91 1 1 . 71 1 7 . 61 8 5 . 94 6 . 40 . 80 . 71 9 . 35 1 8 . 21 . 63 . 68 . 85 0 . 9

3 1 . 8 a3 . 1 a7 7 a0 . 2 3 a7 6 a2 6 a3 3 8 a1 9 0 0 0 a2 9 0 0 a1 6 9 65 9 53 6 105 6 0 0 a4 8 79 22 0 42 0 07 19 . 61 0 . 42 9 0

2 5 . 11 5 3 . 63 0 9 . 04 5 . 95 3 3 . 6 a

3 1 . 91 3 . 81 9 . 33 . 44 5 . 58 2 . 91 0 4 . 41 3 1 . 42 0 . 6 a1 . 90 . 11 3 . 03 8 7 . 50 . 92 . 68 . 87 1 . 9 a

6 . 8 - 9 7 . 41 . 6 - 4 . 64 9 - 1 1 70 . 1 3 - 0 . 3 56 1 - 8 52 2 3 02 9 2 - 4 7 94 6 0 0 - 3 8 0 0 00 - 1 2 0 0 06 6 2 - 3 8 9 62 3 1 - 3 4 9 0

0 - 1 3 2 40 - 00 - 3 6 0 0 00 - 3 8 9 60 7 3 8

3 9 - 4 0 01 0 0 - 3 0 06 4 - 9 20 . 5 - 2 95 . 5 - 2 3 . 5

1 2 0 - 5 1 05 - 5 8

5 8 - 3 6 01 1 0 - 4 6 71 5 - 6 82 6 5 - 7 1 11 8 - 6 35 - 4 15 - 4 10 - 1 11 8 - 6 84 2 - 1 3 54 4 - 1 7 12 6 - 2 4 58 - 4 50 - 1 10 - 10 - 4 8

2 0 3 - 6 1 50 . 3 - 2 . 20 . 7 - 4 . 42 . 8 - 2 4 . 65 0 - 8 0

1 8 . 3 a4 . l a9 4 a0 . 2 7 a6 72 33 3 l a

1 2 0 0 01 2 6 6 81 2 9 42 3 1 8 a3 4 2

04 3 61 1 03 62 96 24 . 21 0 . 9

2 3 01 5 . 08 9 . 42 0 9 . 02 7 . 73 4 1 . 15 1 . 71 1 . 71 6 . 41 . 58 5 . 81 3 4 . 01 1 7 . 71 8 9 . 32 4 . 5 82 . 80 . 62 6 . 35 5 8 . 12 . 72 . 3 a7 . 46 9 . 5 a

7 . 4 - 3 1 . 21 . 8 - 7 . 23 8 - 1 8 10 . 1 3 - 0 . 4 94 9 - 8 51 5 - 2 92 5 5 - 3 6 45 9 0 - 2 8 0 0 00 - 3 9 8 41 4 7 - 2 7 1 57 5 0 - 4 7 0 60 - 1 0 8 60 - 0

0 - 3 8 5 00 - 1 1 0 00 - 3 6 28 - 9 4

5 0 - 7 10 - 1 30 . 6 - 3 01 1 - 5 4 02 - 3 3

3 3 - 1 9 05 0 - 3 7 41 - 5 29 6 - 6 4 48 - 1 3 94 - 2 81 - 9 60 - 53 4 - 2 8 1

6 4 - 3 8 02 9 - 1 9 42 3 - 3 8 77 - 5 60 - 1 60 - 50 - 1 4 93 0 4 - 8 3 90 . 5 - 7 . 11 . 5 - 3 . 91 . 1 - 1 2 . 45 0 - 8 5

1 4 . 13 4 88 l a0 . 2 3 a6 82 5

3 4 81 1 5 0 08 0

1 2 7 51 0 5 41 0 2

0001 4 7

3 3 07 10 . 1

2 59 . 44 9 4 a1 7 1 O2 9 . 42 5 9 . 2

9 2 . 67 . 6 81 0 . 65 . 86 0 . 61 0 2 . 41 1 4 . 83 2 5 . 2 a1 4 . 8 a0 . 207 . 06 2 0 . 02 3 . 8 a4 . 01 6 . 65 7 . 0

8 . 2 - 2 3 . 51 . 8 - 5 . 4 74 4 - 1 2 70 . 1 2 - 0 . 3 66 5 - 7 12 3 - 2 4

3 3 8 - 3 6 25 5 7 0 - 1 9 2 0 00 - 2 3 51 0 1 2 - 1 7 2 2

1 6 4 - 2 5 8 50 - 3 2 60 - 00 - 00 - 00 - 5 7 4

2 5 0 - 4 5 05 5 - 1 0 8

0 . 1 - 0 . 10 - 4 01 - 1 50 - 9 40 - 4 0 20 - 3 18 - 5 1 6

1 3 - 2 2 62 - 1 90 - 2 20 - 1 91 5 - 1 2 1

3 3 - 1 7 27 0 - 1 6 31 8 5 - 4 8 07 - 2 3 00 - 10 - 00 - 1 94 5 1 - 8 4 31 . 0 - 9 60 1 05 . 3 - 5 4 . 1

5 0 - 7 0

6 . 22 . 3 a5 0 80 . 1 5 86 52 2 8

3 3 l a4 1 1 12 4 3

1 6 0 43 5 62 8 7

04 307 6

5 7 52 6 76 60 . 200

6 . 46 3 . 49 8 . 6 a2 0 . 81 8 9 . 2 81 1 8 . 01 0 . 0 81 4 . 86 . 03 1 . 07 9 . 67 6 . 03 8 8 . 0 a2 2 . 8 a0 . 40 . 26 3 . 85 9 7 . 86 . l a1 . 8 a3 0 . 44 8 . 0

3 . 6 - 9 . 91 . 2 - 3 . 83 0 - 8 20 . 1 0 - 0 . 2 45 7 - 7 92 0 - 2 5

3 1 3 - 3 4 22 0 5 2 - 5 2 4 60 - 9 9 08 8 5 - 2 9 7 01 4 4 - 6 9 30 - 9 4 60 - 00 - 1 7 7

00 - 1 7 2

2 2 0 - 3 5 06 1 - 7 10 - 1004 - 82 8 - 1 2 93 8 - 1 6 32 - 5 8

9 0 - 3 5 87 8 - 2 0 44 - 2 68 - 3 20 - 1 48 - 6 03 2 - 1 4 41 8 - 1 5 22 4 2 - 5 6 40 - 6 80 - 20 - 10 - 1 3 44 6 1 - 6 7 62 . 7 - 1 1 . 30 . 8 - 2 . 89 . 0 - 8 0 . 53 0 - 7 5

' S u p e r s c r i p t i n d i c a t e s s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e f r o m r e f e r e n c e mean ( P < 0 . 0 5 )b T S - M e t e r , A m e r i c a n O p t i c a l , B u f f a l o , N . Y . 1 4 21 5m a c r o p h a g e s . I n c a s e s w i t h p a n c y -t o p e n i a a n d m y e l o i d d y s p l a s i a a m a r -r o w s a m p l e w a s n e c e s s a r y f o r ad i a g n o s i s .MYELOID ERYTHROID RATIO

T h e M:E r e p o r t s r e l a t i v e m y e l o i dv e r s u s e r y t h r o i d h e m o p o i e s i s a n dm u s t b e i n t e r p r e t e d i n r e l a t i o n t o t h ea b s o l u t e n u m b e r o f b l o o d e r y t h r o -c y t e s a n d g r a n u l o c t y e s . I n c r e a s e s i nM:E w e r e o b s e r v e d i n t h e p o o r l yr e s p o n s i v e a n e m i a , r e n a l f a i l u r e a n d

m y e l o f i b r o s i s g r o u p s ( g r o u p s 3 , 7 a n d8 r e s p e c t i v e l y ) w h e r e t h i s c h a n g ea p p a r e n t l y i n d i c a t e s r e d u c e d e r y t h r o -p o i e s i s r a t h e r t h a n i n c r e a s e d m y e l o -p o i e s i s ( T a b l e s I I a n d I I I . G r o u pmean b o n e marrow t o t a l g r a n u l o c y t e sw e r e n o t i n c r e a s e d f i r a n y g r o u p w h i l emarrow t o t a t - e r y t h r o i d c e l l s w e r ed e c r e a s e d i n t h e p o o r l y r e s p o n s i v ea n e m i a a n d m y e l o f i b r o s i s g r o u p s( g r o u p s 3 a n d 8 r e s p e c t i v e l y ) .A l t h o u g h n o t s i g n i f i c a n t , M:E l e s st h a n o n e w a s f o u n d f o r t h e r e s p o n s i v e

a n e m i a a n d IHA g r o u p s , a p p a r e n t l yd u e t o r e l a t i v e l y i n c r e a s e d n u m b e r s o fe r y t h r o i d c e l l s .The r e f e r e n c e g r o u p M:E v a l u e s d i f -f e r s l i g h t l y f r o m t h e v a l ue s o f S c h a l m( 2 0 ) b u t c o m p a r e w e l l w i t h t h e v a l u e so f M e l v e g e r a n d V a n l o o n ( 2 9 ) a n dM e y e r a n d B l o o m ( 2 8 ) ( T a b l e V I ) . TheM:E r a t i o i n c l i n i c a l l y n o r m a l d o g s i sg e n e r a l l y b e t w e e n 1 . 0 a n d 2 . 0 . M e l -v e g e r e t a l ( 2 9 ) c o m p a r e d t h e c y t o l o g yo f a s p i r a t e s f r o m t h e s t e r n u m a n d t h er i b o f f i v e B e a g l e d o g s I t o 1 . 5 y e a r s o f

3 8


6/9


7/9

l y m p h o m a a n d 4 . 9 f o r d o g s w i t hc a n c e r o t h e r t h a n l y m p h o m a ( g r o u p s1 1 a n d 1 2 r e s p e c t i v e l y ) s u g g e s t s ad e p r e s s i o n o f e r y t h r o g e n e s i s . M y e -l o p h t h i s i s may h a v e b e e n s i g n i f i c a n t i nt h e 1 6 o f 3 4 d o g s w i t h lymphoma t h a th a d t u m o r c e l l s i n t h e b o n e m a r r o w( 3 1 ) . H o w e v e r , d e c r e a s e d e r y t h r o p o i e -s i s i s c h a r a c t e r i s t i c o f a l l m a l i g n a n c i e sa n d i s n o t l i m i t e d t o h e m o p o i e t i cc a n c e r ( 1 4 ) . F u r t h e r , i n h i b i t i o n o fs t e m c e l l f u n c t i o n i s m o r e a f e a t u r e o ft h e m y e l o p r o l i f e r a t i v e r a t h e r t h a n t h el y m p h o p r o l i f e r a t i v e d i s e a s e s ( 3 9 ) .ERYTHROID RESPONSE

I n d o g s w i t h p o o r l y - r e s p o n s i v ea n e m i a ( g r o u p 3 ) t h e RBC, H b , MCV,r e t i c u l o c y t e c o u n t a n d t o t a l e r y t h r o i db o n e m a r r o w c o u n t s h a d u p p e r l i m i t sw i t h i n t h e r a n g e o f t h e r e f e r e n c e d o g sb u t w h e n e x a m i n e d i n d i v i d u a l l y t h eh i g h v a l u e s w e r e f o u n d t o o r i g i n a t ef r o m t w o d o g s . T h e s e d o g s h a d b e e nc l a s s i f i e d i n t h e p o o r l y r e s p o n s i v eg r o u p b e c a u s e o f l o w h e m a t o c r i t s a n dr e t i c u l o c y t e c o u n t s . B o t h d o g s h a dn e o p l a s i a . A n o t h e r d o g w i t h a n MCVo f 7 9 ( r a n g e 4 9 - 7 9 ) h a d e a r l y m y e l o f i -b r o s i s d e m o n s t r a t e d o n r e p e a t e d b i o p -s i e s . T h e e r y t h r o c y t e s w e r e c o n s i s t e n t -l y l o w a t 1 . 2 x 1 0 ' 2 / L w h i l e t h e MCVr e m a i n e d h i g h . A n o t h e r d o g h a d ar e t i c u l o c y t e c o u n t w h i c h v a r i e d f r o m 0t o 1 1 8 x 1 0 9 / L w i t h 3 . 2 x 1 0 ' 2 / LR B C ' s a n d w a s m o n i t o r e d f o r a p e r i o do f o n e m o n t h w i t h o ut a n i n c r e a s e i nh e m a t o c r i t . T h e d o g e v e n t u a l l y d i dr e c o v e r f r o m a n i m m u n e m e d i a t e da n e m i a ( C o o m b s p o s i t i v e ) , bu t w a sp l a c e d i n t h i s g r o u p b e c a u s e o f p o o rr e s p o n s e .T h e e r y t h r o i d m a t u r a t i o n i n d e x(EM I w a s s i m i l a r i n b o t h t h e r e s p o n -s i v e a n d p o o r l y r e s p o n s i v e a n e m i ag r o u p s bu t l o w e r t h a n t h e r e f e r e n c eg r o u p ( T a b l e I I . T h i s w o u l d b ee x p e c t e d i n r e s p o n s i v e a n e m i a s w i t hn o r m a l s t e m c e l l i n p u t a n d p r e m a t u r er e l e a s e o f r u b r i c y t e s c a u s i n g a n a p p a r -e n t s h i f t t o i n c r e a s e d i m m a t u r i t y . T h eg r o u p w i t h r e s p o n s i v e a n e m i a h a da p p r o x i m a t e l y t w i c e a s many i m m a -t u r e e r y t h r o i d p r e c u r s o r s a s t h e o t h e rg r o u p s . C o m p a r i n g t h e s e r e s u l t s t o t h ep e r i p h e r a l b l o o d , i t c a n b e s e e n t h a tt h e l o w e r m a t u r a t i o n i n d e x ( E M I ) i nt h e t w o g r o u p s o f a n e m i c a n i m a l s( g r o u p 3 a n d 4 ) d o e s n o t s u g g e s t t h em a r k e d v a r i a t i o n i n p r o d u c t i o n t h a tc a n b e s e e n i n t h e i r a b s o l u t e mean r e t i -

TABLE V . S e r u m I r o n , U n b o u n d I r o n - b i n d i n g a n d T o t a l I r o n B i n d i n g C a p a c i t y b o f 1 6 4 D o g sR e f e r e n c e d o g sR e f e r e n c e d o g s A b n o r m a l A n e m i a A n e m i aN o r m a l H e m a t o l o g y H e m a t o l o g y P o o r l y R e s p o n s i v e R e s p o n s i v eMean R a n g e Mean R a n g e Mean R a n g e Mean R a n g e( n = 2 1 ) ( n = 1 5 ) ( n = 6 0 ) ( n = l 5 )

S I 2 0 1 0 - 4 3 1 7 7 - 3 0 2 5 4 - 6 8 4 0 a 9 - 1 1 3UIBC 3 2 5 - 5 4 3 5 1 9 - 5 8 2 4 1 9 - 7 8 2 3 0 - 7 0TIBC 5 2 3 6 - 6 4 5 3 3 7 - 6 8 4 6 0 - 5 8 6 1 3 3 - 1 1 3 S a t . 4 0 2 0 - 8 9 3 6 1 4 - 5 6 5 1 8 - 1 0 0 6 1 1 5 - 1 0 0Immune H e m o l y t i c T h r o m b o -A n e m i a c y t o p e n i a R e n a l F a i l u r e M y e l o f i b r o s i sMean R a n g e Mean R a n g e Mean R a n g e Mean R a n g e( n = 8 ) ( n = 1 0 ) ( n = 5 ) ( n = 5 )

S I 4 0 a 1 3 - 8 3 2 4 9 - 3 7 1 8 1 2 - 2 4 s s a 4 5 - 6 4UIBC 2 1 0 - 7 0 3 9 1 - 5 1 1 7 0 - 4 4 - c TIBC 5 6 3 3 - 8 3 6 0 3 5 - 7 8 3 5 1 9 - 6 8 - - S a t . 6 5 1 6 - 1 0 0 4 0 1 5 - 9 7 6 2 3 5 - 1 0 0C a n c e r O t h e rN e u t r o p h i l i a N e u t r o p e n i a Lymphoma t h a n L ym ph oma

Mean R a n g e Mean R a n g e Mean R a n g e Mean R a n g e( n = 5 5 ) ( n = 1 2 ) ( n = 3 4 ) ( n = 3 7 )S I 2 3 4 - 1 1 2 2 2 5 - 3 8 2 8 a 5 - 6 8 2 2 5 - 3 7UIBC 2 5 0 - 7 0 3 1 1 9 - 4 5 2 0 0 - 6 0 1 8 0 - 3 6T I B C 4 6 1 9 - 1 1 3 5 2 3 7 - 6 7 4 8 5 - 7 4 4 0 5 - 6 8 S a t . 4 8 9 - 1 0 0 4 0 1 3 - 6 2 5 9 1 8 - 1 0 0 5 9 3 3 - 1 0 0

a S u p e r s c r i p t i n d i c a t e s s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c e f r o m r e f e r e n c e mean ( P < 0 . 0 5 )b y m o l / LC N o r e s u l t s a v a i l a b l e

c u l o c y t e s ( 6 5 x 1 0 9 / L f o r p o o r l y -r e s p o n s i v e a n d 2 9 0 x 1 0 9 / L f o rr e s p o n s i v e a n e m i a ) . T h u s a s a g r o u pt h e a n e m i c d o g s w i t h p o o r r e t i c u l o c y t er e s p o n s e c a n b e c o n c l u d e d t o h a v en o r m a l m a t u r a t i o n o f t o o f e w e r y -t h r o i d p r e c u r s o r s .I t i s a p p a r e n t t h a t t h e m e a n a b s o l u t en u m b e r o f p e r i p h e r a l b l o o d r e t i c u l o -c y t e s i s t h e m o s t r e l i a b l e i n d e x o f e f f e c -t i v e e r y t h r o p i e s i s . F u r t h e r r e v i e w o ff i v e i n d i v i d u a l c a s e s i n d i c a t e d t h a tt h o s e d o g s w i t h t h e h i g h e s t r e t i c u l o -c y t e c o u n t s ( > 2 5 0 x 2 0 9 / , L ) a l s o h a dt h e l o w e s t E M I . T h e r e f o r e a v e r ya c t i v e p e r i p h e r a l r e t i c u l o c y t e r e s p o n s ei n d i c a t e s e r y t h r o i d h y p e r p l a s i a w i t hs y n c h r o n o u s m a t u r a t i o n .A s w o u l d b e e x p e c t e d t h e MCV o ft h e g r o u p s w i t h p o o r l y r e s p o n s i v ea n e m i a w a s s i m i l a r t o t h e c o n t r o l sw h i l e t h e m e a n MCV o f t h e r e s p o n s i v ea n e m i a g r o u p w a s 1 0 . 2 f L h i g h e r . I nt h e g r o u p w i t h p o o r l y r e s p o n s i v ea n e m i a t h e MCH w a s s i m i l a r t o t h ec o n t r o l g r o u p . T h u s , t h e r e d c e l l s i nt h e r e s p o n s i v e g r o u p w a s l a r g e r a n dc o n t a i n e d more h e m o g l o b i n on a na b s o l u t e b a s i s (MCH) t h a n t h e r e dc e l l s i n t h e n o n r e s p o n s i v e g r o u p .T h e r e w a s some v a r i a t i o n i n r e f e r -e n c e v a l u e s b e t w e e n a u t h o r s ( T a b l e

V ) , e s p e c i a l l y i n r e g a r d t o t h e p r o l i f e r -a t i v e s t a g e s o f t h e r u b r i c y t i c a n d g r a -n u l o c y t i c s e r i e s . T h e l a r g e r n u m b e r s o fd o g s e x a m i n e d i n t h i s s t u d y ( 2 1 )t o g e t h e r w i t h t h e u n c e r t a i n b a c k -g r o u n d o f t h e r e f e r e n c e a n i m a l s maye x p l a i n s o m e o f t h e d i f f e r e n c e s .I t w a s n o t e d t h a t s i g n i f i c a n t t h r o m -b o c y t o s i s d i d n o t o c c u r w i t h t h er e s p o n s i v e a n e m i a g r o u p . T h r o m b o -c y t o s i s i s u s u a l l y r e p o r t e d i n r e s p o n -s i v e a n e m i a s ( 2 0 , 2 5 , 3 1 ) . T h e r a n g e o fp l a t e l e t n u m b e r s i n t h e r e s p o n s i v ea n e m i a g r o u p ( 8 - 4 0 0 x 1 0 9 / L ) w a sv e r y w i d e a n d i n c l u d e d f o u r c a s e s o ft h r o m b o c y t o p e n i a . T h e r e f o r e some o ft h e a n i m a l s i n c l u d e d i n t h e r e s p o n s i v ea n e m i a g r o u p w e r e l i k e l y c o m p l i c a t e db y c o n c u r r e n t I T P ( E v a n s S y n d r o m e )( 3 1 ) . T h e mean p l a t e l e t c o u n t o f t h eIHA g r o u p w i t h o u t t h e f o u r a n i m a l sw i t h p r o b a b l e I T P i s much h i g h e r( 3 2 0 x 1 0 9 / L ) , w h i c h i s i n a g r e e m e n tw i t h t h e r e s p o n s e r e p o r t e d i n immunem e d i a t e d a n e m i a .MYELOID RESPONSEThe m y e l o i d m a t u r a t i o n i n d e x(M MIa t u r a t i o n p h a s e / p r o l i f e r a -t i v e p h a s e ) w a s n o t d i f f e r e n t i n a n y o ft h e d i s e a s e p r o c e s s e s , b u t t h e g r o u pm e a n s v a r i e d f r o m a l o w o f 7 . 4 w i t h

4 0


8/9

I T P t o a h i g h o f 3 0 . 4 w i t h m y e l o f i b r o -s i s . T h i s l a c k o f s i g n i f i c a n t d i f f e r e n c eb e t w e e n m e a n s i s i n c o n t r a s t w i t h t h ee r y t h r o i d s y s t e m a n d i s l i k e l y d u e t o al a c k o f s t o r a g e p o o l c e l l s i n t h e e r y -t h r o i d s y s t e m a n d a g r e a t v a r i a t i o nb e t w e e n a n i m a l s w i t h i n d i s e a s e g r o u p si n r e l e a s e o f g r a n u l o c y t e s i n r e s p o n s et o p e r i p h e r a l d e m a n d s . A s i g n i f i c a n td i f f e r e n c e w a s n o t e d b e t w e e n t h em e a n b o n e m a r r o w n e u t r o p h i l c o u n t si n t h e r e n a l f a i l u r e a n d t h e m y e l o f i b r o -s i s g r o u p s ( g r o u p s 7 a n d 8 ) a n d t h er e f e r e n c e g r o u p . T h i s i n c r e a s e i n b o n em a r r o w n e u t r o p h i l s may b e d u e t oi m p a i r e d r e l e a s e a s n o p e r i p h e r a l n e u -t r o p h i l i a w a s n o t e d i n t h e s e a n i m a l s .P a r t o f t h i s c h a n g e may b e d u e t o s h i f t si n M : E , h o w e v e r , b o t h g r o u p s 7 a n d 8h a v e i n c r e a s e d MMI w h i c h s u g g e s t st h a t i n e f f e c t i v e m y e l o p o i e s i s may b ep a r t i a l l y r e s p o n s i b l e f o r t h e marrown e u t r o p h i l s ( l a t e a s y n c h r o n y ) ( 4 2 , 4 3 ) .T h e M M I s h o u l d b e u s e f u l t o i d e n t i f yi n e f f e c t i v e m y e l o p o i e s i s i n a n i m a l sw i t h m y e l o d y s p l a s i a r e s u l t i n g i n n e u -t r o p e n i a w i t h h y p e r p l a s t i c marrowa n d i n c r e a s e d marrow g r a n u l o c y t er e s e r v e s .T h e r e w a s a d i f f e r e n c e b e t w e e n t h em e a n s o f p e r i p h e r a l b l o o d e o s i n o p h i l sf o r t h e r e f e r e n c e a n d o t h e r g r o u p s . T h er e f e r e n c e g r o u p m e a n o f 4 . 6 % i s h i g h e rt h a n o t h e r w o r k e r s r e p o r t ( T a b l e V I ) .T h i s may be d u e t o t h e s o ur c e o f a n i m -a l s s i n c e l a b o r a t o r y d o g s w e r ee m p l o y e d i n o t h e r s t u d i e s ( 2 8 , 2 9 ) . T h eb o n e m a r r o w e o s i n o p h i l l e v e l s w e r el o w i n a l l g r o u p s o f d i s e a s e s a n i m a l s .W i t h p r o l o n g e d s t e r o i d a d m i n i s t r a -t i o n , e o s i n o p h i l p r o d u c t i o n i s r e d u c e d ,a s s h o w n b y l o w e r i n g o f t h e t o t a l m a r -r o w e o s i n o p h i l s a n d d e c r e a s e d m i t o t i cr a t e i n t h e p r e c u r s o r s ( 3 6 ) . T h e b o n em a r r o w e o s i n o p h i l s may b e i n c r e a s e da f t e r b r i e f s t r e s s d u e t o a r e d u c e dr e l e a s e c o i n c i d e n t w i t h p e r i p h e r a lb l o o d e o s i n o p e n i a ( 3 6 ) . T h e h i g h l e v e lo f s t e a d y o f s t a t e e o s i n o p o i e s i s i n o u rr e f e r e n c e d o g s may b e r e l a t e d t o l a c k o fp r e c o n d i t i o n i n g .LYMPHOMA

B o n e marrow i n v o l v e m e n t w a sf o u n d i n 1 6 o f t h e 3 4 d o g s w i t h l y m -p h o m a ( 4 7 ) . T h e t u m o r i n v o l v e m e n ti n t h e marrow a p p e a r s t o h a v e p r o g -n o s t i c s i g n i f i c a n c e s i n c e e x t e n s i v e b o n em a r r o w i n v o l v e m e n t w a s a s s o c i a t e dw i t h a p o o r p r o g n o s i s ( 1 4 ) . T h e l e v e l o fd e t e c t i o n o f marrow i n f i l t r a t i o n w a s

g r e a t e r w i t h c o r e b i o p s i e s t h a n w i t ha s p i r a t e s m e a r s a n d c o u l d b e f u r t h e ri n c r e a s e d b y b i l a t e r a l b i o p s i e s . O t h e rmarrow s t r o m a l r e a c t i o n s a l s oa p p e a r e d t o h a v e p r o g n o s t i c v a l u e .MYELOFIBROSIS

F i v e d o g s w i t h n o n r e s p o n s i v e a n e -m i a w e r e f o u n d t o h a v e m y e l o f i b r o s i sw h e n e x a m i n e d b y c o r e b i o p s y ( T a b l eI I I , g r o u p 8 . No u n d e r l y i n g m y e l o p r o -l i f e r a t i v e d i s o r d e r c o u l d b e i d e n t i f i e d i nt h e s e a n i m a l s a n d m a r r o w a s p i r a t e sw e r e p o o r l y c e l l u l a r . T h e r a p y w i t h s t e -r o i d s a n d c y c l o p h o s p h a m i d e w a s f o l -l o w e d b y a d e c r e a s e i n m a r r o w s t r o m aa n d i m p r o v e d m a r r o w f u n c t i o n i nt h r e e d o g s . I n m o s t c a s e s t h e c a u s e o fm y e l o f i b r o s i s i s u n k n o w n . I n m y e l o -p r o l i f e r a t i v e d i s o r d e r s , p a r t i c u l a r l y o ft h e m e g a k a r y o c y t i c s e r i e s , t h e r e i s ar a p i d d e v e l o p m e n t o f m y e l o s c l e r o s i s( 4 0 , 4 1 ) . T h i s a s s o c i a t i o n h a s n o t b e e nw e l l d e f i n e d i n a n i m a l s .MEGAKARYOCYTIC RESPONSE

M e g a k a r y o c y t e n u m b e r s v a r i e df r o m m a r k e d l y i n c r e a s e d i n s i x d o g s t on o r m a l i n t w o d o g s a n d d e c r e a s e d i nt w o d o g s . O t h e r w o r k e r s ( 3 4 ) r e p o r t a na b s e n c e o r d e c r e a s e d n u m b e r o f m e g -a k a r y o c y t e s i n t h e b o n e m a r r o w d u r -i n g t h e e a r l y p h a s e o f I T P a n di n c r e a s e d n u m b e r s d u r i n g l a t e r c o m -p en s a t o r y p h a s e ( 3 4 ) . A v e r y l o wn u m b e r o r a b s e n c e o f m e g a k a r y o c y t e sh a s b e e n a s s o c i a t e d w i t h v e r y p o o rp r o g n o s i s b y s o m e w o r k e r s p o s s i b l yd u e t o a n t i b o d i e s d i r e c t e d a g a i n s tm e g a k a r y o c y t e p r e c u r s o r s r a t h e r t h a n

p l a t e l e t s ( 3 4 ) . I n o u r s t u d y , o f t h e twod o g s w i t h d e c r e a s e d m e g a k a r y o c y t e so n e r e c o v e r e d o v e r a p e r i o d o f t h r e ew e e k s . T h e o t h e r d i e d w i t h a b l e e d i n gd i a t h e s i s a f t e r a p r o l o n g e d i l l n e s s . I ta p p e a r s t h a t t h o s e c a s e s o f I T P w i t hh y p o p l a s i a o f e a r l y p r e c u r s o r s h a v e ap o o r e r p r o g n o s i s t h a n c a s e s w h e r em e g a k a r y o c y t e n u m b e r s a r e n o r m a l o ri n c r e a s e d . I n t h e m y e l o f i b r o s i s g r o u p ,m e g a k a r y o c y t e n u m b e r s w e r e n o r m a lo r i n c r e a s e d i n f o u r o f t h e f i v e d o g s ,w h i l e t h e m o r p h o l o g y o f t h e m e g a k a -r y o c y t e s a p p e a r e d t o b e n o r m a l .HEMOSIDERIN AND SERUM IRON

I n o u r s t u d y marrow h e m o s i d e r i nw a s e v a l u a t e d w i t h r e s p e c t t o q u a n t i t y( i n c r e a s e d , n o r m a l , o r d e c r e a s e d ) a n dd i s t r i b u t i o n ( p r e d o m i n a n t l y f i n e g r a -n u l e s , b o t h f i n e a n d c o a r s e o r p r e d o m -i n a n t l y c o a r s e g r a n u l e s ) . On t h e b a s i so f s u b j e c t i v e e v a l u a t i o n t h e r e f e r e n c ed o g s a l l h a d a d e q ua t e a m o u n t s o fh e m o s i d e r i n p r e s e n t i n t h e m a r r o w ,m o s t l y a s f i n e g r a n u l e s w i t h o r w i t h o u tsome c o a r s e g r a n u l e s . I n g e n e r a l b o t ht h e amount a n d c o a r s e n e s s o f marrowh e m o s i d e r i n i n c r e a s e s w i t h a g e . T h ea n i m a l s w i t h n e o p l a s i a o r c h r o n i ci n f l a m m a t o r y c o n d i t i o n s h a d a d e -q u a t e marrow i r o n s t o r e s bu t amarked p r e d o m i n a n c e o f c o a r s eh e m o s i d e r i n i n t h e marrow m a c r o -p h a g e s . T h i s f i n d i n g i s c o n s i s t e n t w i t hd e c r e a s e d t u r n o v e r a n d a p p a r e n ta v a i l a b i l i t y o f i r o n f o r e r y t h r o p o i e s i s 3 7 .S e r u m i r o n l e v e l s w e r e e l e v a t e d i nt h e r e s p o n s i v e a n e m i a , I H A , m y e l o f i -

TABLE V I . C y t o l o g i c a l E x a m i n a t i o n o f C a n i n e B o n e MarrowP r e s e n t S t u d y M e l v e g e r a n d S c h a l m , M e y e r a n dN o r m a l h e m a t o l o g y V a n L o o n , 1 9 6 9 1 9 7 5 B l o o m , 1 9 4 3n=21 n=5 n=? n= 1 0x S . D . x S . D . x x

R u b r i b l a s t sP r o r u b r i c y t e sR u b r i c y t e sM e t a r u b r i c y t e sT o t a l E r y t h r o i d C e l l sM y e l o b l a s t sP r o g r a n u l o c y t e sM y e l o c y t e sM e t a m y e l o c y t e sB a n d n e u t r o p h i l sS e g sE o sT o t a l M y e l o i d C e l l sM:E r a t i oL y m p h o c y t e sM o n o c y t e sP l a s m a c e l l s

1 . 2 0 . 6 6 . 5 0 . 4 5 0 . 23 . 93 1 . 9 1 . 9 2 7 . 6 4 . 4 1 2 5 . 03 . 1 i 1 . 8 1 .3 6 . 3 7 . 8 3 4 . 7 4 . 7 4 6 . 40 . 9 0 . 2 0 . 05 . 6 2 . 4 2 . 1 0 . 4 1 . 36 . 3 1 . 0 9 . 01 1 . 2 4 . 4 7 . 9 2 . 4 7 . 51 1 . 8 2 . 6 1 1 . 3 2 . 2 1 3 . 61 8 . 6 5 . 7 2 3 . 5 1 . 3 1 8 . 44 . 6 2 . 2 2 . 5 0 . 3 0 . 3

5 1 . 8 8 . 6 5 5 . 2 5 . 9 5 3 . 41 . 6 0 . 8 1 . 7 0 . 4 1 . 26 . 1 2 . 7 8 . 1 2 . 7 0 . 21 . 5 0 . 8 0 . 0 0 . 0 0 . 02 . 1 0 . 8 0 . 7 0 . 3 0 . 0

1 . 02 . 53 5 . 23 8 . 7

0 . 63 . 8

2 3 . 51 8 . 51 . 74 8 . 51 . 49 . 81 . 20 . 8

4 1


9/9

b r o s i s a n d l y m p h o m a g r o u p s . I n t h er e s p o n s i v e a n em i a a n d immune h e m o -l y t i c a n e m i a g r o u p s ( T a b l e V ) e l e v a t e ds e r u m i r o n l e v e l s ( 4 0 , u m o l / L ) w e r em o s t l i k e l y d u e t o r e c y c l i n g o f h e m o -g l o b i n f r o m d e s t r o y e d o r d a m a g e d r e dc e l l s . W i t h m a r r o w d a m a g e , i n e f f e c -t i v e e r y t h r o p o i e s i s o r p a r e n c h y m a li r o n o v e r l o a d , t h e s e r u m i r o n t e n d s t or i s e , l e a d i n g t o f u l l s a t u r a t i o n i n m o r es e v e r e c a s e s ( 3 5 ) . T h i s may e x p l a i n t h er i s e s e e n w i t h t h e m y e l o f i b r o s i s a n dl y m p h o m a g r o u p s i n o u r s t u d y ( T a b l eV ) .I t i s h o p e d t h a t t h e d a t a p r e s e n t e dh e r e w i l l e n c o u r a g e o t h e r s t o m o r ee f f e c t i v e l y u s e b o n e m a r r o w e x a m i n a -t i o n i n c l i n i c a l d i a g n o s i s .

REFERENCES1 . BURKHARDT R , FRISCH B , BARTL R .B o n e b i o p s y i n h a e m a t o l o g i c a l d i s o r d e r s . JC l i n P a t h o l 1 9 8 2 ; 3 5 : 2 5 7 - 2 8 4 .2 . BRYNES RK, MCKENNA RW , SUND-BERG RD . B o n e m a r r o w a s p i r a t i o n a n dt r e p h i n e b i o p s y . Am J C l i n P a t h o l 1 9 7 8 ; 7 0 :7 5 3 - 7 5 9 .3 . PENNY RHC, CARLISLE C H . T h e b o n em a r r o w o f t h e d o g : a c o m p a r a t i v e s t u d y o fb i o p s y m a t e r i a l o b t a i n e d f r o m t h e i l i a cc r e s t , r i b a n d s t e r n u m . J S m a l l A n i m P r a c t

1 9 7 0 ; 1 1 : 7 2 7 - 7 3 4 .4 . BATJER J D . P r e p a r a t i o n o f o p t i m a l b o n em a r r o w s a m p l e s . L a b Me d 1 9 7 9 ; 1 0 :1 0 1 - 1 0 6 .5 . KREHBIEL J D . W E L LS RG. C o l l e c t i o n ,s t a i n i n g a n d i n t e r p r e t a t i o n o f b o n e marrows p e c i m e n s i n t h e d i a g n o s t i c l a b o r a t o r y .P r o c Am A s s o c V e t L a b D i a g n o s t 1 9 7 9 :1 9 9 - 2 0 4 .6 . JAMES L P , SCHUMACHER HR. V a l u eo f i m p r i n t p r e p a r a t i o n s o f b o n e m a r r o wb i o p s i e s i n h e m a t o l o g i c d i a g n o s i s . C a n c e r1 9 8 0 ; 4 6 : 1 7 3 - 1 7 7 .7 . PENNY RHC. T h e b o n e m a r r o w o f t h e d o ga n d c a t . J S m a l l Anim P r a c t 1 9 7 4 ; 1 5 :5 5 3 - 5 6 2 .8 . JAMSHIDI K , SWAIM WR. B o n e m a r -r o w b i o p s y w i t h u n a l t e r e d a r c h i t e c t u r e : ane w b i o p s y d e v i c e . J L a b C l i n Me d 1 9 7 1 ; 7 7 :3 3 5 - 3 4 2 .9 . NEIMAN R S . T h e r e l a t i v e m e r i t s o f b o n em a r r o w b i o p s y a n d p a r t i c l e s e c t i o n s t e c h -

n i c s . Am J C l i n P a t h o l 1 9 7 7 ; 6 7 : 3 0 8 - 3 0 9 .1 0 . FRANKEL K . B o n e m a r r o w b i o p s y a n da s p i r a t i o n . Am J C l i n P a t h o l 1 9 7 6 ; 6 6 :6 1 6 - 6 1 7 .1 1 . HOFFBRAND A V . B o n e - m a r r o w a s p i r a -t i o n a n d t r e p h i n e b i o p s y . B r Me d J 1 9 8 0 ;2 8 0 - 2 8 1 .1 2 . RYWLIN AM, MARVAN P , ROBINSONM J . A s i m p l e t e c h n i c f o r t h e p r e p a r a t i o n o fb o n e m a r r o w s m e a r s a n d s e c t i o n s . Am JC l i n P a t h o l 1 9 7 0 ; 5 3 : 3 8 9 - 3 9 3 .1 3 . L UKES H J , TINDLE B J . An a p p r o a c h t ob o n e m a r r o w e v a l u a t i o n b y p a t h o l o g i s t s .P r o c E i g h t h W o r l d C o n g r e s s o f A n a t o m i c a la n d C l i n i c a l P a t h o l o g y 1 9 7 2 ; 2 6 2 : 8 6 - 9 2 .1 4 . RYWLIN AM . H i s t o p a t h o l o g y o f t h e b o n em a r r o w . B o s t o n : L i t t l e , B r o w n a n d Com-p a n y , 1 9 7 6 .1 5 . BARTT R , FRISCH B , BURLCHARDTR . B o n e m a r r o w b i o p s y r e v i s i t e d . K a r g e r ,1 9 8 2 .1 6 . LEWIS, H B , REBAR AH. B o n e m a r r o we v a l u a t i o n i n v e t e r i n a r y p r a c t i c e . S a i n tL o u i s : R a l s t o n P u r i n a C o . , 1 9 7 9 .1 7 . DEBRUYN PH. S t r u c t u r a l s u b s t r a t e s o fm a r r o w f u n c t i o n . S e m i n H e m a t o l 1 9 8 1 ; 1 8 :1 7 9 - 1 8 3 .1 8 . WEISS L . H a e m o p o i e s i s i n m a m m a l i a nb o n e m a r r o w . C i ba F o un d a t i o n S y m p o -s i u m 1 9 8 1 ; 8 4 : 5 - 8 .1 9 . REUTNER T F , WESTON J K , MAX-WELL R E , THOMPSON RQ. E v a l u a t i o no f p e r i p h e r a l b l o o d a n d b o n e m a r r o w i n 2 8s e l e c t e d m o n g r e l d o g s . F e d P r o c 1 9 5 4 ; 1 3 :3 9 7 .2 0 . SCHALM OW , JAIN N C , CARROLL E J .V e t e r i n a r y h e m a t o l o g y . 3 r d e d . P h i l a d e l -p h i a : L e a F e b i g e r , 1 9 7 5 .

2 1 . WESTERMAN MP. B o n e m a r r o w n e e d l eb i o p s y : An e v a l u a t i o n a n d c r i t i q u e . S e m i nH e m a t o l 1 9 8 1 ; 1 8 : 2 9 3 - 3 0 0 .2 2 . JAMES L P , STASS S A , SCHUMACHERHR. V a l u e o f i m p r i n t p r e p a r a t i o n s o f b o n emarrow b i o p s i e s i n h e m a t o l o g i c d i a g n o s i s .C a n c e r 1 9 8 0 ; 4 6 : 1 7 3 - 1 7 7 .2 3 . SEARCY G P . B o n e m a r r o w f a i l u r e i n t h ed o g a n d c a t . I n : K i r k RW . C u r r e n t v e t e r i -n a r y t h er a p y I I I . 7 t h e d . P h i l a d e l p h i a : W. B .S a u n d e r s C o . , 1 9 8 0 : 4 1 3 4 1 6 .2 4 . REKERS P E , COULTER MA. A h e m a t o -l o g i c a l a n d h i s t o l o g i c a l s t u d y o f t h e b o n emarrow a n d p e r i p h e r a l b l o o d o f t h e a d u l td o g . Am J Med S c i 1 9 4 8 ; 2 1 6 : 6 4 3 - 6 5 5 .2 5 . MIALE J B . L a b o r a t o r y m e d i c i n e h e m a t o l -o g y . S a i n t L o u i s : T h e C . V . M o s b y C o . ,1 9 7 7 .2 6 . FRANKEN P , WENSIN T , SCHOTMANA J H . T h e b o n e marrow o f t h e h o r s e . Z e n -t r a l b l V e t e r i n a r m e d [ A ] 1 9 8 2 ; 2 9 : 2 3 - 2 7 .2 7 . V A N L OON E J , CLARK B C . H e m a t o l o g y

o f t h e p e r i p h e r a l b l o o d a n d b o n e m a r r o w o ft h e d o g . J L a b C l i n Med 1 9 4 3 ; 2 8 :1 5 7 5 - 1 5 7 9 .2 8 . MEYER L M, BLOOM F . T h e b o n e m a r -r o w o f n o r m a l d o g s . Am J Me d S c i 1 9 4 3 ;2 0 6 : 6 3 7 - 6 4 1 .2 9 . ME LVEGER B E , EARL F L , VAN LOONE J . S t e r n a l b o n e m a r r o w b i o p s y i n t h e d o g .L a b Anim C a r e 1 9 6 9 ; 1 9 : 8 6 6 - 8 6 8 .3 0 . M U L LIG AN R . Q u a n t i t a t i v e s t u d i e s o n t h eb o n e m a r r o w o f t h e d o g . A n a t R e c 1 9 4 1 ; 7 9 :1 0 1 - 1 0 8 .3 1 . WILLIAMS JW . H e m a t o l o g y . 2 n d e d .M c G r a w - H i l l B o o k C o m p a n y , 1 9 7 7 .3 2 . VALLI V E , MCSHERRY B J , DUNHAMBM , JACOBS RM , LUMSDEN J H . H i s -t o c y t o l o g y o f l y m p h o i d t u m o r s i n t h e d o g ,c a t a n d c o w . V e t P a t h o l 1 9 8 1 ; 1 8 : 4 9 4 - 5 1 2 .3 3 . KRAUSE J R . An a p p r a i s a l o f t h e v a l u e o ft h e b o n e m a r r o w b i o p s y i n t h e a s s e s s m e n to f p r o l i f e r a t i v e l e s i o n s o f t h e b o ne m a r r o w .H i s t o p a t h o l o g y 1 9 8 3 ; 7 : 6 2 7 - 6 4 4 .3 4 . JAIN N C , SWITZER JW . A u t o i m m u n et h r o m b o c y t o p e n i a i n d o g s a n d c a t s . S y m -p o s i u m o n c l i n i c a l h e m a t o l o g y . V e t C l i nN o r t h Am 1 9 8 1 ; 1 1 : 4 2 1 - 4 3 4 .3 5 . HI L L M AN R S , FINCH C A . R e d c e l lm a n u a l . 4 t h e d . P h i l a d e l p h i a : F . A . D a v i sC o m p a n y , 1 9 7 7 .3 6 . MAHMOUND A F , AUSTEN K F . T h ee o s i n o p h i l i n h e a l t h a n d d i s e a s e . Ne w Y o r k :G r u n e a n d S t r a t t o n , 1 9 8 0 .3 7 . FELDMAN B F . T h e a n e m i a o f i n f l a m m a -t o r y d i s e a s e i n t h e d o g . P h . D . T h e s i s , 1 9 7 8 .3 8 . STEEL R G , TORRIE J H . P r i n c i p l e s a n dp r o c e d u r e s o f s t a t i s t i c s . Ne w Y o r k :M c G r a w - H i l l , 1 9 8 0 .3 9 . VAN BEEKUM D W, PRINS M EF,HAGENBEEK A . T h e m e c h a n i s m s o f i n h i -b i t i o n o f h e m o p o i e s i s i n a c u t e l e u k e m i a .B l o o d C e l l s 1 9 8 1 ; 7 : 9 1 - 1 0 3 .4 0 . CASTRO-MALASPINA H , RABEL-L INO EM, YEN A , NACHMAN R L ,MOORE M AS. Hu man m e g a k a r y o c y t es t i m u l a t i o n o f p r o l i f e r a t i o n o f b o n e marrowf i b r o b l a s t s . B l o o d 1 9 8 1 ; 5 7 : 7 8 1 - 7 8 7 .4 1 . BIRD T , PROCTOR S J . M a l i g n a n t m y e -l o s c l e r o s i s . M y e l o p r o l i f e r a t i v e d i s o r d e r o rl e u k e m i a ? Am J C l i n P a t h o l 1 9 7 7 ; 6 7 :5 1 2 - 5 2 0 .4 2 . LINMAN JW , BAGBY G C . T h e p r e l e u -k e m i c s y n d r o m e ( H e m o p o i e t i c d y s p l a s i a ) .C a n c e r 1 9 7 8 ; 4 2 : 8 5 4 - 8 6 4 .

4 3 . BENNETT J M , CATOVSKY D , DANIELMT, FLANDRIN G , GALTON DAG,GRALNICK HR, SULTAN C . P r o p o s a l sf o r t h e c l a s s i f i c a t i o n o f t h e m y e l o d y s p l a s t i cs y n d r o m e s . B r J H a e m a t o l 1 9 8 2 ; 5 1 :1 8 9 - 1 9 9 .

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Hoff Et Al 1985 an Appraisal of Bone Marrow Biopsy in Assessment of Sick Dogs