ok ilaca direnli tberkloz (D-TB) olgularnda rifampisin ve izoniazid direncinin hzl molekler tans ve diren gen blge mutasyonlarnn aratrlmas Glsm Ar, Can Bimen, Onur Karaman, M.evket Dereli, Serir Aktou zkan

Dr.Suat Seren Gs Hast. ve Cerrahisi Eitim ve Aratrma Hastanesi, zmir

Bu almadaHerhangi bir kar atmas yoktur.

Son yllarda, molekler yntemlerle ila direncine neden olan mutasyonlarn tanmlanmas, D-TB olgularnn tansnda, antimikobakteriyel direncin saptanmasnda ve baz TB hastalarnn tedavi planlamasndaki zorluklarn almasnda kullanlmaktadr.

Ama: Bu almada yayma pozitif solunum yolu rneklerinden ve/veya reyen kltr veya daha nce reme saptanan olgularn remi kltrlerinden LPA (Line Probe Assay) yntemiyle D-TB erken ve hzl tansna ynelik olarak izoniazid ve rifampisin direncine en sk neden olduu bilinen diren gen blge (rpoB, katG ve inhA) mutasyonlarnn aratrlmas amaland.

Gere ve Yntem: almamza 09.2009-02.2011 tarihleri arasnda tberkloz servisinde yatan D-TB tanl 16 olgu ile tedavi baarszl, nks ve tedaviyi terkten dnen ve yeniden tedavi rejimi balanan 13 olgu, toplam 29 olgu alnd.

14 hastada direkt yayma pozitif rnekten 15 hastada reme saptanan kltrden molekler yntemle rifampisin ve izoniyazide zgl rpoB, katG ve inhA gen blgelerinde mutasyon aratrld.

Hasta rneklerine ayn zamanda, ARB boyama, kltr ve BACTEC 460 sistemi ile ila duyarllk testi uyguland.

rneklerde srasyla DNA ekstraksiyonu, direnli blgelere zg ncller kullanlarak diren blgesinin PCR ile oaltlmas ve hibridizasyon ilemleri, Genotype MDRTB Plus ver 1.0 (Hain Lifesciences) kiti kullanlarak yapld. Gen blge mutasyonlar nitrosellloz stripler zerinde oluan bant paternlerine gre deerlendirildi.

Konjugat kontrolAmplifikasyon kontrolMTB kompleks kontrol rpoB

katG

inhA1: Mutasyon yok (RIF ve INH duyarl), 2: rpoB ve katGde mutasyon (MDR), 3: rpoB ve katGde mutasyon (MDR), 4: rpoB, katG ve inhAda mutasyon (MDR)5: rpoB, katG ve inhAda mutasyon (MDR) Hasta rneklerinin GenoType MTBDR plus Paternleri

Bulgular:

28 rnek 22 D-TB M.tuberculosis 5 drt ilaca duyarl kompleks 1 kltr negatif 1 rnek M.intracellulare

Kltrde MTB remesi saptanan 27 hasta molekler yntemle pozitif olarak, M. intracellulare olarak saptanan 1 hasta ise negatif olarak belirlendi.

la duyarllk testi ile karlatrldnda, D olarak saptanan 22 rnein tmnde molekler yntemle (%100) rifampisin direnli, 21 (%95.5) rnekte ise izoniyazid direnli olarak deerlendirildi.

Drt ilaca duyarl 5 hasta rneinde ise mutasyon saptanmad.

Direkt yayma (+) rnekten ve kltrden allan molekler diren testi sonular 2 gn

BACTEC 460 sistemi ile kltr, identifikasyon ve ila duyarllk testi sresi ortalama 24,9 gn (+5,36)Kltrden allan molekler diren testi raporlama sresi ortalama 15,2 gn (+4,38) (p

HR Direnci saptanan 3 olguda (2si tedavi baarszl, 1 olgu tedaviyi terkten dnen olgu) yeniden tedavi rejimi ile kr saland. 1 hastann da tedavisi devam etmektedir.

Sonu: Molekler yntemle HR direncinin saptanmas D-TB tansnda yol gstericidir. D-TB tan ve tedavi balama sresini ksaltmaktadr.

WHO 2009 TB Rehberi: