Upload
dacia
View
42
Download
0
Embed Size (px)
DESCRIPTION
Baktériumok által közvetített génterápia kísérletes bélgyulladás esetén egereknél. Pálffy Roland, Behuliak Michal, Gardlík Roman, Jáni Peter, Celec Peter. Patofiziológiai Intézet, Orvosi Kar, Molekuláris Biológiai Tanszék, Természettudományi Kar, Comenius Egyetem, Pozsony, Szlovákia - PowerPoint PPT Presentation
Citation preview
Baktériumok által közvetített génterápia kísérletes bélgyulladás esetén egereknél
Pálffy Roland, Behuliak Michal, Gardlík Roman, Jáni Peter, Celec Peter
Patofiziológiai Intézet, Orvosi Kar, Molekuláris Biológiai Tanszék, Természettudományi Kar, Comenius Egyetem, Pozsony, Szlovákia
Bevezetés
• Gyulladásos bélbetegségek (IBD) – Morbus Crohn– Colitis ulcerosa
• IBD állatmodellek– Trinitro-benzolszulfón sav (TNBS)– dextrán nátrium szulfát (DSS)
SOD és MCP-1
Bevezetés
• Baktériumok a Crohn betegségben– Probiotikumok– Genetikailag modifikált probiotikumok
• Lactococcus lactis • Steidler et al. 2000 a Braat et al. 2004
– Baktofekció• Escherichia coli • Castagliuolo et al. 2005
– TGFbeta-1
Bevezetés
Bevezetés
Bevezetés
• Baktofekció
Célok
• antioxidatív és gyulladásellenes génterápia hatásának megfigyelése dextrán-szulfát nátrium sóval kezelt egereken
Metódusok
• 40 Balb/c egér• DSS protokoll (Rochat et al., 2007)
– enyhe colitis model– 10 nap 1%DSS az ivóvízben – 10 nap paralel kezelés
• Baktérium adagolás– SL7207 (Darji et al. 1997) – 20 Mio minden nap – gyomorszonda
Metódusok
• Átvitt gének– SOD1 (Cu-Zn szuperoxid-dizmutáz )
• Antioxidatív génterápia
– 7ND-MCP-1 (monocitákat kemoatraktáló protein 1 mutáns formája)• Gyulladásellenes génterápia pcDNA3
5860 bpBGH pA
SV40 poly A
SV40 promoter
CMV promoter
SV40 origin of replication
ColE1 origin
Neomycin ORF
Ampicillin ORF
hSOD2
Metódusok
• 4 csoport
– CTRL + médium– DSS + médium– DSS + SL7207/SOD1– DSS + SL7207/7ND-MCP1
Metódusok
• folyamatos megfigyelés– fekáliák állaga– testsúly
• gyulladás mediátorok (ELISA segítségével)– IL-1, IL-6 és TNFalfa a vastagbél mintákban
• hisztológia
Eredmények
Eredmények
Eredmények
Eredmények
Eredmények
Eredmények
Eredmények
Összegzés
• az 1%-os dextrán-szulfát nátrium só oldatos kezelés könnyű bélgyulladást váltott ki a Balb/c egereknél
• a génterápia hatása nem volt követhető a gyulladás serkentő citokinek szintjének változásával
• a vastagbélszövet hisztológiai indexe javult a génterápia hatására atenuált Salmonella Typhimurium SL7207 baktérium felhasználásával
Köszönöm figyelmüket!