2008 - Identificación y caracterización de filamentosas en biorreactores de EDAR del sector petroquímico

Documentación presentada en: V Jornadas de Transferencia de Tecnología sobre Microbiología del Fango Activo.

Publicación: Memorias de la jornada ISBN: 978-84-613-0712-8 Lugar de celebración: Sevilla

Fecha: 30-31/10/2008

CONTROL MICROBIOLÓGICO OPERACIONAL EN ELTRATAMIENTO DE AGUAS DE LA INDUSTRIA FENOL-ACETONA Y SÍNTESIS DE AMINAS A. Zornoza1,2, E. Reina2, R. F. López3

1Grupo Aguas de Valencia. EDAR Quart Benager, 46014 Valencia, (E-mail: [email protected]). 2Asociación Científica Grupo Bioindicacion de Sevilla (GBS), EDAR La Ranilla. San José de Palmete s/n, Sevilla 41006. Apdo 7279 (E-mail: [email protected]). 3CEPSA

“Caracterización de bacterias filamentosas en biorreactores

de estaciones depuradoras de sector petroquímico”.

A. Zornoza1,2

Se han tomado 24 muestras de bioreactores en 4 estaciones depuradoras

de las distintas factorías de la empresa CEPSA: planta de Palos de la Frontera,

Guadarranque, refinería la Rábida y Gibraltar-San Roque. El análisis

microscópico convencional de las bacterias filamentosas se ha llevado a cabo

en base a los trabajos de Eikelboom (2000, 2006). Se han descrito 20 bacterias

filamentosas que responden a diferentes características morfológicas y

tinciones diferenciales. Para poder ser estudiadas por el equipo investigador

han sido nombradas con un código interno numérico precedido de unas siglas,

quedando de la forma: “CP-XX”.

A continuación se exponen las bacterias que han sido descritas hasta la

fecha dentro del presente estudio.

V Jornadas de Transferencia de Tecnología sobre Microbiología del Fango Activo. Sevilla, 30 y 31 de Octubre de 2010

1

mailto:[email protected]

CP-01 (Palos de la frontera)

400x 1000x Descripción

Bacteria filamentosa similar al tipo 0041/0675.

• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Rectos y

ligeramente curvados. Extendiéndose desde el flóculo y libre en el

espacio interflocular. Filamento con un tono oscuro, lo cual dificulta la

observación de algunas características como son la morfología

celular y los septos celulares. En algunas ocasiones se aprecia un

ligero aumento del diámetro celular en el ápice del filamento, además

de “huecos” a lo largo del tricoma y extremos. También es común

encontrar filamentos con pequeños espacios en los septos celulares

dando la impresión de cadena de células.

• LONGITUD TRICOMA: < 200 µm.

• MORFOLOGÍA CELULAR: Rectangular.

• DIÁMETRO CELULAR: aprox. 1 µm.

• VAINA (reacción a cristal violeta): Presencia.

• GRAM: Negativo.

• NEISSER: Negativo. Débil reacción a gránulos neisser.

• PHA: Ausencia.

• CRECIMIENTO ADHERIDO: Ausencia.

• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Sin constricciones. Septos celulares

difícilmente visibles.


2


400x 1000x

Descripción

Bacteria filamentosa similar a Micothrix parvicella.

• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Torcidos,

curvados. Libre y extendiéndose desde el flóculo. Es frecuente la

presencia de filamentos cortos (aprox. 50 um) formando “manojos”.

También se observan filamentos muy finos y mas largos con

abundantes estrechamientos (similar al tipo 0211).


• MORFOLOGÍA CELULAR: No se observa.

• DIÁMETRO CELULAR: < 1 µm.

• VAINA (reacción a cristal violeta): Ausencia.

• GRAM: Positivo.

• NEISSER: Negativo. Gránulos neisser (respuesta débil).

• PHA: Negativo.


• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: No se observan.


3


400x 1000x

Descripción

Bacteria filamentosa similar a Nostocoida limícola y M.parvicella.


curvados, irregular. Libre y extendiéndose desde el flóculo.


• MORFOLOGÍA CELULAR: Ovales, esféricas. Aunque no siempre es

apreciable.


• VAINA (reacción a cristal violeta): Ausencia

• GRAM: Fuertemente positivo.

• NEISSER: Negativo. Gránulos neisser positivo.

• PHA: Negativo.


• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Son observables cuando se aprecia las

morfología de las células.


4


1000x 1000x

Descripción

Bacteria filamentosa ramificada.

• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Organismo

ramificado que se sitúa preferentemente dentro del flóculo.

Ramificaciones cortas en 90 º y en forma de “Y”.


• MORFOLOGÍA CELULAR: Se observan formas alargadas similares a

gruesos bacilos sin constricciones pronunciadas.

• DIÁMETRO CELULAR: > 1 µm.



• NEISSER: Negativo.

• PHA: Negativo.


• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Observables.


5

CP-05 (Palos de la frontera, Gibraltar, Rábida y Guadarranque)

1000x 400x

Descripción

Bacteria filamentosa similar a Haliscomenobacter hydrossis.

• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Rectos y

extendiéndose desde el flóculo.


• MORFOLOGÍA CELULAR: Rectangular (difícilmente observable).


• VAINA (reacción a cristal violeta): Ausencia

• GRAM: Negativo


• PHA: Negativo.


• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Septos difícilmente observables sin

constricciones.


6


100x 400x

Descripción

Bacteria filamentosa similar al IF-50 (Eikelboom, 2006).


curvados. Libre e intraflocular.

• LONGITUD: < 200 µm.

• MORFOLOGÍA CELULAR: Esférica.





• PHA: Negativo.

• CRECIMIENTO ADHERIDO: No se observa.

• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Septos y constricciones claramente

observables.


7

CP-07 (Guadarranque)



• FORMA, ASPECTO Y SITUACIÓN DE LOS FILAMENTOS: Curvados,

torcidos. Libre en el espacio interflocular aunque también se puede

observar dentro del flóculo. Cadena de células claramente

separadas.


• MORFOLOGÍA CELULAR: Esférica, oval, discoidal.



• GRAM: Negativo.


• PHA: Positivo.



observables.


8

CP-08 (Guadarranque, Gibraltar, Rábida)

400x 1000x

Descripción

Bacteria filamentosa del tipo Nostocoida limicola III (posiblemente Isosphaera

sp.).


curvados. Libre y dentro del flóculo.


• MORFOLOGÍA CELULAR: Oval, esférica.



• GRAM: Negativo.


• PHA: Negativo.



observables.


9


400x 1000x

Descripción


• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Rectos, torcidos,

ligeramente curvados. Extendiéndose desde el flóculo. Es

característico ver bandas muy oscuras a lo largo de los septos.

• LONGITUD DEL TRICOMA: > 200 µm.




• GRAM: Negativo

• NEISSER: Ligera cubierta débil con gránulos centrales. Variable.

• PHA: Negativo.

• CRECIMIENTO ADHERIDO: Se observa.

• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Sin constricciones. Septos claramente

observables.


10


400x 1000x

Descripción


• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Rectos, curvados.

Extendiéndose desde el flóculo. Es frecuente observar inclusiones a

lo largo del filamento de tonalidad mas clara.

• LONGITUD DEL TRICOMA: > 200 µm.

• MORFOLOGÍA CELULAR: Cuadrada (difícilmente observable).



• GRAM: Negativo.


• PHA: Positivo.

• CRECIMIENTO ADHERIDO: Presencia.

• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Sin constricciones. Septos difícilmente

observables.


11

CP-11 (Gibraltar, Rábida)

400x 1000x

Descripción

Bacteria filamentosa similar morfológicamente al tipo IF-6 (Eikelboom, 2006).

• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Filamentos rectos,

torcidos y ligeramente curvados. Se extienden normalmente desde el

flóculo aunque a veces se puede observar libre. Ocasionalmente se

observa extremos torcidos (similar a H.hydrossis) y huecos debido a

pérdida celular (similar al tipo 0041/0675).


• MORFOLOGÍA CELULAR: Rectangular, cuadrada.



• GRAM: Negativo.


• PHA: Negativo.

• CRECIMIENTO ADHERIDO: Algunas partes del filamento presenta

materia adherida, mostrándose con frecuencia de forma discontinua

en forma de “anillos”.

• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Sin constricciones. Se aprecian septos.


12

CP-12 (Rábida)


Bacteria filamentosa similar al tipo IF-65 y IF-12 (Eikelboom, 2006).

• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Filamento recto y

curvado que se extiende desde el flóculo, aunque a veces se

presenta libre. Es frecuente observar filamentos en forma de

“manojos”. Los filamentos muestran un tono bastante claro.





• GRAM: Negativo. Se aprecian alternancia de partes más y menos

intensas.

• NEISSER: Negativo. Gránulos neisser positivo

• PHA: Negativo.




13

CP-13 (Gibraltar)

400x 1000x

Descripción

Bacteria filamentosa similar al tipo IF-54 (Eikelboom, 2006).


torcidos y ligeramente curvados. Se extienden principalmente desde

el flóculo, aunque también se puede encontrar libre. Es frecuente

observar filamentos en forma de “manojos”. A veces aparecen

puntos negros a lo largo del filamento y ocasionalmente el ápice del

mismo de mayor diámetro y redondeado.


• MORFOLOGÍA CELULAR: Cuadrada, rectangular.

• DIÁMETRO CELULAR: aprox.1 µm.


• GRAM: Negativo.

• NEISSER: Positivo (púrpura).

• PHA: Positivo.




14

CP-14 (Gibraltar)

400x 1000x

Descripción

Bacteria filamentosa similar al tipo 1701.


torcidos y ligeramente curvados. Se extienden principalmente desde

el flóculo. En ocasiones presenta falsas ramificaciones. Se observa

la vaina perfectamente cuando faltan células.


• MORFOLOGÍA CELULAR: Bacilar.

• DIÁMETRO CELULAR: aprox.1 µm.


• GRAM: Positivo


• PHA: Negativo.


• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Se aprecian septos con constricciones

claramente visibles.


15

CP-15 (Gibraltar)

400x 1000x

Descripción

Bacteria filamentosa similar a Monilibacter batavus (Eikelboom, 2006).

• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Filamentos

torcidos, curvados y enrollados. Se encuentran principalmente dentro

del flóculo, aunque también se pueden ver libres en el espacio

interflocular. Es frecuente encontrar además de ramificaciones,

células agrupadas en tétradas, asi como ramificaciones formando

“lazos”.


• MORFOLOGÍA CELULAR: Oval, esférica.



• GRAM: Negativo.


• PHA: Positivo.


• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Se aprecian septos con constricciones

claramente visibles.


16

CP-16 (Gibraltar)



• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Filamento recto y

ligeramente curvado. Se extiende desde el flóculo. Los filamentos

muestran un tono oscuro, lo que dificulta en algunas ocasiones

algunas características.


• MORFOLOGÍA CELULAR: Rectangular (a veces es difícil ver).



• GRAM: Negativo

• NEISSER: Variable (color púrpura).

• PHA: Negativo.

• CRECIMIENTO ADHERIDO: Presencia (incidental).

• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Se aprecian septos (difícil de ver) sin

constricciones.


17

CP-17 (Gibraltar)

400x 1000x

Descripción

Bacteria filamentosa similar al tipo Nostocoida limicola III.

• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Filamento torcido,

curvado y enrollado (irregular). Se sitúa dentro así como

extendiéndose desde el flóculo.


• MORFOLOGÍA CELULAR: discoidal



• GRAM: Negativo.


• PHA: Negativo.


• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Se aprecian septos y constricciones.


18

CP-18 (Gibraltar)

400x 1000x

Descripción

Bacteria filamentosa ramificada.

• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Filamento

ramificado que se sitúa intraflocularmente así como extendiéndose

desde el flóculo. Ramificaciones aproximadamente en 45 º. Se

observan largos tricomas sin ramificación.




• VAINA(reacción a cristal violeta) : Ausencia.

• GRAM: Fuertemente positivo

• NEISSER: Negativo. Gránulos neisser fuertemente positivo.

• PHA: Negativo.


• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: No se aprecian septos ni constricciones.


19

CP-19 (Gibraltar)

400x 1000x

Descripción

Bacteria filamentosa similar al tipo 1851.

• FORMA, SITUACIÓN, ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Filamento recto,

curvado que se extiende desde el flóculo.

• LONGITUD: < 200 µm.

• MORFOLOGÍA CELULAR: Rectangular (difícilmente observable).



• GRAM: Negativa

• NEISSER: Negativa

• PHA: Negativo.

• CRECIMIENTO ADHERIDO: Presencia (incidental).

• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: Septos difícilmente observables sin

constricciones.


20

CP-20 (Gibraltar)

1000x 1000x

Descripción

Bacteria filamentosa similar a M. parvicella pero mucho mas fina.

• FORMA, SITUACIÓN Y ASPECTO DE LOS FILAMENTOS: Filamento torcido,

curvado. Interior y extendiéndose desde el flóculo.



• DIÁMETRO CELULAR: < 0,5 µm.


• GRAM: Positivo.

• NEISSER: Negativo

• PHA: Negativo


• SEPTOS Y CONSTRICCIONES: No se observa.


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2008 - Identificación y caracterización de filamentosas en biorreactores de EDAR del sector petroquímico