Penargetan basil Mycobacterium tuberculosis rendah oksigen microenvironments,seperti granuloma caseous, telah dihipotesiskanmemiliki potensi untuk mempersingkat terapi untuk TB aktif(TB) dan mencegah reaktivasi infeksi laten. Kami sebelumnyamelaporkan bahwa setelah dosis rendah M. tuberculosis infeksi, proporsi yang samakera cynomolgus mengembangkan penyakit aktif atau lateninfeksi dan bahwa hewan yang terinfeksi secara laten diaktifkan kembali setelah netralisasiTNF. Menggunakan model ini kita sekarang menunjukkan bahwa kemoprofilaksiskera cynomolgus laten terinfeksi 6 mo dariisoniazid (INH) efektif mencegah anti-TNF antibodi-inducedreaktivasi. Demikian pula, 2-mo pengobatan hewan laten dengankombinasi INH dan rifampisin (RIF) adalah sangat efektif untuk mencegahreaktivasi penyakit dalam model ini. Metronidazole (MTZ),yang memiliki aktivitas hanya melawan anaerobik, bakteri nonreplicating,sama efektifnya dengan salah satu dari perawatan ini dalam mencegah reaktivasiinfeksi laten. Karena lesi hipoksia juga terjadi selamaTB aktif, kita lanjut menunjukkan bahwa penambahan MTZ ke INH / RIFefektif diobati hewan dengan TB aktif dalam 2 mo. Penyembuhanlesi dikaitkan dengan perubahan yang berbeda di seluler patologi,dengan pergeseran ke arah lesi fibrosis dan kalsifikasi semakin. KamiData dalam model primata non-manusia dari dukungan TB aktif dan latenmenargetkan bakteri dalam lingkungan hipoksia untuk mencegahreaktivasi infeksi laten dan mungkin memperpendek durasiterapi pada TB aktif.Meskipun manusia infeksi Mycobacterium tuberculosisdapat menyebabkan tuberkulosis aktif utama (TB), lebih khusushasilnya secara klinis asimtomatik laten infeksi (1). TersembunyiInfeksi didefinisikan sebagai tes kulit Tuberkulin positif atau IFN-γ release assay dan tidak adanya tanda-tanda dan gejala klinisdari penyakit aktif. Definisi ini mungkin mencakup berbagaidari hasil penyakit, mulai dari penyakit aktif subklinis untuksterilisasi dari organisme penyebab infeksi (1), pada kenyataannya, mungkin lebihtepat untuk label "laten" infeksi sebagai TB tanpa gejala. Latenterinfeksi kekebalan-kompeten orang diasumsikan memiliki10% seumur hidup risiko reaktivasi. Risiko meningkat dengan kekebalankompromi, seperti infeksi HIV bersamaan atau pengobatan denganimunosupresif agen, seperti TNF-penetral obat (2, 3).Sebuah 2 miliar orang diperkirakan telah terinfeksi secara laten dengan M. tuberculosis,menyediakan reservoir besar untuk reaktivasi mungkin. Karenasetiap kasus menular TB diharapkan dapat menimbulkan 2.6-7,8 infeksi baru, memenuhi target kontrol arus global membutuhkanmeningkatkan diagnostik dan terapi untuk infeksi laten (4).

Pengobatan TB aktif untuk obat-rentan penyakit melibatkanstandar "jangka pendek" Terapi yang terdiri dari 2 mo pengobatandengan isoniazid (INH), rifampisin (RIF), pirazinamid (PZA), danetambutol (ETH), diikuti oleh 4 bulan tambahan INH danRIF (http://www.cdc.gov/TB/topic/treatment/default.htm). Itupanjang ini rejimen standar menyebabkan kepatuhan miskin dantingkat kelulusan. Ketersediaan regimen pendek yang efektif akanmemiliki dampak yang besar pada pengobatan tuberkulosis di seluruh dunia (5).M. tuberculosis laten infeksi secara rutin diobati dengan INHselama 9 mo (6). Dalam metaanalisis dari 11 uji klinis, profilaksispengobatan dengan INH sendiri untuk 6-12 mo mengurangi risiko selanjutnyamengembangkan TB sebesar 60% (7). Namun hepatitis, klinikterjadi pada sampai dengan 3% dari orang yang menerima INH (8). Kepatuhan denganini tentu saja pengobatan jangka kemoterapi tetap menjadi masalah besar,dan pilihan yang lebih pendek telah diuji, meskipun efek sampingtelah dicatat untuk ini juga (6, 9, 10). INH terutama efektifterhadap basil replikasi, menunjukkan bahwa M. tuberculosisbasil yang mereplikasi selama infeksi laten klinis, setidaknya secara sporadis.The INH rejimen berlarut-larut yang diperlukan untuk keberhasilan kemungkinanmencerminkan periode nonreplication oleh sub-populasi M. tuberculosisbasil dalam orang dengan infeksi laten dan menunjukkan bahwamenargetkan basil nonreplicating efektif dapat mempersingkat terapi.Ciri histopatologis TB adalah granuloma, danspektrum jenis granuloma yang diamati dalam TB manusia.Hipoksia adalah fitur kunci pembeda jenis tertentu granuloma(11-13). Kami menunjukkan bahwa caseous granuloma, sebuahjenis umum terlihat pada TB manusia, yang hipoksia dalam berbagai hewanModel (guinea babi, kelinci, dan primata bukan manusia), sedangkannonnecrotizing granuloma (terutama terdiri dari makrofagdengan limfosit jarang) tidak hipoksia (11). Murine granulomakurang-terorganisir koleksi makrofag dan limfosittanpa nekrosis caseous pusat dan umumnya tidakhipoksia (11, 13). M. tuberculosis tumbuh di bawah kondisi oksigen rendahtidak rentan terhadap INH (14). Dengan demikian, pada infeksi latendan aktif, basil penyakit yang bertahan di daerah hipoksia tidak bisasecara efisien dan cepat dibersihkan oleh INH. Yang jelas klinisutilitas INH dalam pengobatan profilaksis TB laten karena ituparadoks. Yang lain obat yang digunakan untuk pengobatan TB aktifjuga terutama efektif terhadap organisme tumbuh, meskipunRIF memiliki khasiat beberapa di bawah rendah-kondisi oksigen (14), yangdapat berkontribusi untuk jangka yang diperlukan untuk menyembuhkan TB.Metronidazole (MTZ) adalah "alat" untuk mengatasi senyawa

pentingnya menargetkan lingkungan hipoksia dalam pengobatanstrategi untuk TB. Metronidazole membutuhkan aktivasi reduktif olehrantai pernapasan, yang terjadi aerobik dan anaerobik,tetapi di bawah kondisi aerobik single-elektron berkurangspesies bereaksi dengan molekul oksigen sehingga pengurangan yang produktif("Bersepeda sia-sia"). Jika itu radikal hadir dalamhipoksia kondisi itu menyebabkan kerusakan DNA (15). MTZ dapat membunuhM. tuberculosis tumbuh in vitro di bawah hipoksia tetapi tidak aerobikkondisi (14). MTZ sama efektifnya dengan RIF untuk mengurangi bac-Author kontribusi: P.L.L. dan J.L.F. dirancang penelitian; PLL, VD, PJJ, CJ, LV, MBG,E.K., dan J.L.F. melakukan penelitian; E.K. kontribusi reagen baru / alat analitik; P.L.L.,V.D., M.B.G., E.K., C.E.B., dan J.L.F. menganalisis data, dan PLL, VD, MBG, EK, CEB, danJ.L.F. menulis kertas.Para penulis menyatakan tidak ada konflik kepentingan.Artikel ini adalah PNAS Langsung Submission. E.J.R. adalah editor tamu yang diundang olehEditorial Dewan.Lihat Komentar pada halaman 13890.1to siapa korespondensi harus ditangani. E-mail: joanne@pitt.edu.Artikel ini berisi informasi yang mendukung online di www.pnas.org/lookup/suppl/doi:10.1073/pnas.1121497109/-/DCSupplemental.14.188-14.193 | PNAS | 28 Agustus 2012 | vol. 109 | no. 35 www.pnas.org/cgi/doi/10.1073/pnas.1121497109terial beban pada kelinci dengan TB aktif, terutama yang memiliki caseousgranuloma (11). MTZ tidak efektif terhadap M. tuberculosisinfeksi pada model tikus atau marmut (12, 16). Dalam manusiauji klinis, MTZ tidak meningkatkan tingkat konversi sputum, tetapitidak meningkatkan tanda-tanda klinis penyakit (17). Kami berhipotesis bahwaobat yang bekerja di bawah kondisi hipoksia, seperti MTZ,akan mempengaruhi M. tuberculosis basil yang berada di daerah hipoksia, baikdi TB aktif dan laten, dan bisa memperpendek terapi dengan menghilangkanpopulasi yang refrakter terhadap obat standar. Untuk menguji inihipotesis, kami menggunakan primata non-manusia baik ditandaimodel TB aktif dan laten yang mengulangi spektrumpenyakit dan granuloma jenis terlihat dalam TB manusia (18, 19).HasilFarmakokinetik Studi dan Seleksi Dosis untuk Pengobatan. Konsentrasiprofil waktu yang ditetapkan untuk INH, RIF, danMTZ dikelola oleh gavage baik sebagai obat tunggal atau dalam kombinasi.Parameter farmakokinetik standar dihitungdari profil lima sampai enam hewan untuk masing-masing obat (Tabel 1). Adibandingkan dengan eksposur dicapai pada manusia di klinis digunakandosis ditampilkan. MTZ paparan pada kera setelah pemberian oral

dari 25 mg / kg berada dalam kisaran paparan dicapaimanusia pada dosis standar 400 mg. Untuk INH dan RIF, yangDosis yang digunakan diproduksi eksposur yang sedikit lebih rendah dibandingkanterlihat pada subyek manusia yang menerima dosis terapi standar.Ini dosis telah disetujui oleh dokter hewan fasilitas dan dipilihuntuk percobaan pengobatan. Mengingat halflife relatif singkatdari MTZ (20), rejimen dua kali sehari dipilih dalam perjanjiandengan dua kali atau administrasi tiga kali sehari dalam terapi manusia.Hasil kami menunjukkan bahwa variabilitas dalam paparan meningkat ketikaobat diberikan dalam kombinasi selama beberapa hari (Tabel S1).Menariknya, hewan dengan paparan INH sangat rendah ditemukanmemiliki konsentrasi yang signifikan dari metabolit utama yang asetil-INH, menunjukkan bahwa monyet dapat diklasifikasikan sebagai lambat atau cepatasetilator, mirip dengan manusia, di mana variabilitas ini dimediasioleh polimorfisme dalam enzim NAT-2.Short-Course MTZ atau INH / RIF Apakah yang Efektif 6 mo INH dalam MencegahReaktivasi Infeksi laten. Kera cynomolgus terinfeksidengan inokulum yang rendah (25 cfu) dari M. tuberculosis (strain Erdman)mengembangkan TB primer dan infeksi laten dalam kira-kira samaproporsi (18, 19). Kami mengembangkan ukuran hasil kuantitatifpenyakit pada nekropsi, termasuk skor patologi kotor danpenentuan nomor bakteri (19), meningkatkan penggunaanini hewan model untuk studi khasiat obat. Pada nekropsi, kamidiperoleh sampel banyak dari granuloma, lobus paru-paru, dadakelenjar getah bening, dan situs paru dan digunakan kuantitatifalat kami kembangkan dan dijelaskan secara rinci sebelumnya untuk mencetak golpatologi kotor, beban bakteri, dan diseminasi (19). Inisistem penilaian membedakan klinis didefinisikan aktif, laten, dandiaktifkan kembali TB pada kera (19, 21). Sifat outbred dari keramemperkenalkan variabilitas substansial antara binatang dalam halperkembangan penyakit dan respon terhadap terapi, sama seperti pada manusia,yang membuat ini sebuah model yang menantang tapi realistis untuk pengujianterapi.Menentukan kemanjuran obat terhadap TB laten (yaitu, pencegahanreaktivasi) yang menantang, dan uji klinis manusiamembutuhkan sejumlah besar subyek dengan tahun masa tindak lanjut, karenatingkat reaktivasi alam rendah. Pada kera, bakteriangka umumnya sangat rendah selama infeksi laten dan hanyapeningkatan pada reaktivasi (19, 22). Dengan demikian, kita mengasumsikan bahwahanya membandingkan jumlah bakteri pada monyet laten dengan dantanpa terapi obat tidak akan memberikan sensitivitas yang cukupuntuk mengidentifikasi obat berkhasiat melawan hadir basil dalam laten

hewan. Jangka pendek (4-8 minggu) anti-TNF antibodi pengobatanmenyebabkan reaktivasi di sedikitnya 70% dari kera dengan infeksi laten(22). Strategi kami adalah untuk menguji efektivitas obat dalammencegah TNF netralisasi yang disebabkan reaktivasi (Gambar 1A),penalaran yang baik sebagai obat yang efektif akan mengurangi bakteribeban ke titik di mana reaktivasi tidak terjadi dengan anti-TNF terapi, atau populasi bakteri yang paling rentan terhadap reaktivasiakan selektif terpengaruh oleh obat.Anti-TNF pengobatan antibodi menyebabkan reaktivasi di 9 dari 11terinfeksi secara laten hewan kontrol, menurut patologi kotor,bakteri beban, dan penyebaran bakteri (Gambar 2A). Kami menggunakanini kuantitatif langkah di nekropsi, daripada lebih halusdan tanda-tanda klinis yang ambigu, untuk menentukan apakah obat-diperlakukanhewan diaktifkan kembali infeksi laten setelah anti-TNF pengobatanselama 5 minggu. Mirip dengan uji klinis pada manusia, INH selama 6 mo mengakibatkanpada monyet yang tidak menunjukkan tanda-tanda penyakit reaktivasi (Gambar2A). Empat dari INH-hewan diperlakukan lima tampaknya harus benar-benardisterilkan oleh pengobatan ini (basil ada dikultur daribanyak sampel pada nekropsi). Untuk lebih memvalidasi model initerhadap data yang ada klinis pada manusia, kami diperlakukan tujuh latenterinfeksi kera dengan INH dan RIF dalam kombinasi sekali sehari,selama 2 mo. INH ditambah perawatan RIF signifikan mengurangi reaktivasiinfeksi laten (Gbr. 2A).Kami sebelumnya menunjukkan bahwa lesi caseous dari monyetdengan TB aktif yang positif untuk pewarnaan pimonidazole (11),yang menandai wilayah hipoksia. Monyet laten memiliki caseous sebagaiserta granuloma fibrocalcific, dan granuloma dari latenmonyet yang positif untuk pewarnaan pimonidazole (Gambar S1), mengindikasikanhipoksia daerah granuloma. Untuk menentukan apakahTabel 1. Parameter farmakokinetik dari INH, RIF, dan setelah MTZlisan administrasi untuk kera cynomolgous, dan perbandingandengan eksposur pada subyek manusia pada dosis klinis digunakanGrup INH RIF MTZCynomolgous keraDosis (mg / kg) 15 20 25Cmax (mg / mL) 6,5 (3,1) 4,1 (2,9) 10,6 (7,8)tmax (h) 1.2 (0.4) 5.3 (2.8) 5.7 (2.0)AUC [0-24] (mg * h / mL) 13,7 (5,5) 50,7 (49,5) 86,6 (44,1)t1 / 2 (h) 1.3 (0.6) n.d. † 7 sampai> 15 (5.0)Manusia subyek pada dosis klinis digunakanDosis (mg / kg) 5,0 10,0 7,0AUC [0-24] (mg * h / mL) 17 (FA), 30 (SA) [28-29] 80-120 [32-33] 80-100 [30-31]

Nilai yang ditampilkan adalah sarana (SD). AUC [0-24], area di bawah kurva dari 0 sampai24 jam, Cmax, konsentrasi puncak dalam plasma, FA, asetilator cepat, nd, tidakditentukan, SA, asetilator lambat, tmax, saat konsentrasi puncak dalam plasmasetelah dosis, t1 / 2, eliminasi jelas paruh.Penghapusan fase † tidak tercapai.Gambar. 1. Studi desain untuk studi terapi obat di M. tuberculosis-terinfeksikera. (A) Obat pengobatan monyet terinfeksi secara laten, dengan selanjutnyaanti-TNF antibodi (adalimumab) pengobatan untuk menginduksi reaktivasi,dengan nekropsi. (B) Obat pengobatan monyet TB aktif, dengannekropsi. H, INH, R, RIF, Z, PZA, E, ETH, M, MTZ.Lin et al. PNAS | 28 Agustus 2012 | vol. 109 | no. 35 | 14.189MIKROBIOLOGI MELIHAT KOMENTARobat itu hanya efektif terhadap bakteri di lingkungan hipoksiadapat mencegah reaktivasi, kami diperlakukan 10 latenhewan yang terinfeksi dengan MTZ dua kali sehari selama 2 mo (Gbr. 1A). MTZterbukti sama efektifnya dengan INH / RIF dalam mencegah anti-TNF-diinduksi reaktivasi, dengan skor cfu dalam kisaran yang sama seperti latendiobati dan INH-diobati monyet (Gbr. 2A). Dalam kedua INH /RIF dan kelompok MTZ, dua monyet itu tampaknya disterilkanoleh pengobatan, yang merupakan frekuensi yang lebih rendah dibandingkan sterilisasi6-mo INH rejimen. Tak satu pun dari kontrol anti-TNF-diobatimonyet yang steril (yaitu, M. tuberculosis ditumbuhkan darijaringan dari semua monyet kontrol). Data ini menunjukkan bahwa jangka pendekpengobatan dengan MTZ saja secara substansial mengurangi reaktivasidari infeksi laten serta INH selama 6 bulan atau shortcourseKombinasi INH / RIF pengobatan.Metronidazole dengan INH / RIF Apakah Efektif Melawan TB aktif. Aktif TBdalam menyajikan model primata, seperti pada manusia, sebagai spektrum daripenyakit mulai dari minimal untuk fulminan (18, 19, 23). Untuk inistudi kami menggunakan kriteria yang diterbitkan sebelumnya untuk menentukan bahwamonyet memiliki TB paru aktif sebelum memulai pengobatan,termasuk perubahan nafsu makan, penurunan berat badan, X-ray temuan, batuk,positif M. tuberculosis pertumbuhan dari lavage bronchoalveolar(BAL) atau aspirat lambung, atau sedimentasi eritrosittingkat (19). Ada bukti sejarah untuk kemanjuran kombinasiterapi pada primata bukan manusia (24). Untuk memfasilitasi rejimenperbandingan kami diperlakukan empat hewan TB aktif denganstandar manusia "fase intensif," terdiri rejimen empat-obatdari INH / RIF / PZA / ETH selama 2 mo. Tiga binatang dinekropsi,dan satu binatang dirawat untuk mo 4 tambahan INH / RIF untukmeniru full-length manusia standar rejimen kemoterapi (Gambar1B). Standard 6-mo terapi benar-benar dapat menyembuhkan TB aktif

primata (Gbr. 2B). Kami beralasan bahwa INH / RIF / PZA / ETH untuk2 mo adalah kontrol yang baik untuk jangka pendek lainnya (2 mo) perawatan;rejimen ini mengurangi beban bakteri dibandingkan dengan TB aktifmonyet (Gbr. 2B). INH / RIF selama 2 mo mengurangi beban bakteridalam lima dari tujuh monyet, dengan tiga dari monyet menjadirupanya disterilkan (Gbr. 2B). Namun, mengingat keragamanhasil dengan INH / RIF, dimana monyet dengan bakteri yang tinggibeban bisa ditafsirkan sebagai responden lambat atau pengobatankegagalan, skor secara statistik tidak berbeda nyatadibandingkan dengan kelompok kontrol yang aktif.Hipotesis kami adalah bahwa menambahkan MTZ untuk pengobatan INH / RIF(Gambar 1B) akan meningkatkan efektivitas keseluruhan dengan membunuh bakteridi microenvironments hipoksia mana INH dan RIF kurangefektif. Penambahan MTZ dua kali sehari dengan INH / RIF harianrejimen pengobatan tampaknya efektif memperlakukan semua hewan dansecara signifikan mengurangi beban bakteri dan penyebaran dibandingkandengan kontrol (Gambar 2B). Namun, tidak ada yang signifikanperbedaan skor antara INH cfu / RIF dan INH / RIF / MTZ.Kami memisahkan data beban bakteri (cfu skor) dari toraksKelenjar getah bening dari yang lesi paru-paru untuk menentukan apakah MTZmemiliki efek yang lebih diucapkan pada salah satu kompartemen.Kedua INH / RIF dan INH / RIF / MTZ lebih efektif terhadapparu lesi dibandingkan terhadap kelenjar getah bening terinfeksi toraks (Gbr. S2).Keduanya rejimen efektif dalam mengurangi bakteri ekstrapulmonalbeban: 71,4% dari kontrol aktif memiliki pertumbuhan M. tuberculosisdari situs luar paru (biasanya hati atau limpa), dibandingkandengan 28,5% dengan INH / RIF dan 33,3% dengan INH / RIF / MTZ.Sebuah ukuran hasil yang digunakan pada manusia untuk menilai kemanjuran pengobatanadalah dahak negatif konversi untuk pertumbuhan M. tuberculosis.Kami menggunakan M. tuberculosis pertumbuhan dari sampel BAL dan lambungaspirasi sebagai pengganti untuk sputum. Banyak, tapi tidak semua, monyetdengan TB aktif memiliki budaya positif dari salah satu dari situs-situs tersebut, semuakontrol tidak diobati dalam penelitian ini adalah positif untuk studi 2-moPeriode (Gbr. S3). Semua monyet diobati dengan INH / RIF / MTZ dikonversidari positif ke negatif budaya, dibandingkan dengan hanya30% di INH / RIF grup setelah 8 minggu pengobatan (Gbr. S3). Dimonyet kontrol yang tidak diobati, ada penurunan yang signifikan dalamGambar. 2. Terapi obat yang efektif mencegah reaktivasi infeksi laten dan mengurangi angka bakteri dan penyebaran infeksi pada penyakit aktif. Brutopatologi, beban bakteri (cfu score), dan tingkat keterlibatan dan diseminasi (% sampel positif) yang diukur dari monyet masing-masing (diwakili olehsatu titik pada grafik masing-masing) di nekropsi. (A) monyet laten yang dinekropsi sebagai kontrol, dan

monyet entah diobati dengan obat (INH / RIF harian atau MTZdua kali sehari selama 2 mo, atau INH setiap hari selama 6 bulan) atau tidak diobati, dan kemudian diberikan anti-TNF antibodi (adalimumab) selama 5 minggu, kemudian dinekropsi. Sekitar80% dari monyet laten diaktifkan kembali, sedangkan INH / RIF atau MTZ selama 2 bulan atau INH selama 6 mo dicegah reaktivasi dalam menanggapi anti-TNF pengobatan antibodi. (B)Monyet TB aktif entah tidak diobati, diobati dengan INH / RIF, INH / RIF / MTZ, INH / RIF / PZA / ETH selama 2 mo, atau INH / RIF / PZA / ETH untuk 2 mo diikuti oleh INH / RIF untuk4 mo (hanya satu monyet dan tidak digunakan dalam analisis statistik). Baris dalam kelompok masing-masing mewakili median. Setiap lingkaran mewakili individu hewan. Bukalingkaran mencerminkan hewan kontrol sejarah, sedangkan lingkaran tertutup mencerminkan hewan yang terinfeksi pada saat yang sama dengan penelitian pengobatan. Statistik: Kruskal-Wallis denganPerbandingan beberapa Dunn dilakukan ketika Kruskal-Wallis P <0,05; * P <0,05; ** P <0,01; *** P <0,001. Semua kelompok lainnya tidak signifikan dalamanalisis. E, ETH, H, INH, M, MTZ, R, RIF, Z, PZA.

berat badan lebih dari 2 mo sebelum nekropsi (Gbr. S4). Sebaliknya, parabobot pada semua kelompok perlakuan tidak berubah selama 2-momasa pengobatan. Data ini mendukung bahwa ada peningkatandalam parameter mikrobiologis dan klinis setelah kursus singkatpengobatan.IFN-γ Tanggapan dalam Airways Selama Pengobatan Tidak MemprediksiKhasiat Terapi. Kami sebelumnya menetapkan bahwa IFN-γ tanggapandari sel-sel T yang diperoleh oleh UUPA secara signifikan lebih tinggipada monyet dengan TB aktif dibandingkan dengan TB laten baik di awalinfeksi dan di nekropsi (19). Dengan demikian, kami melacak IFN-γ tanggapandalam sel BAL selama pengobatan untuk menentukan apakah perubahandalam parameter ini bisa memprediksi keberhasilan pengobatan. Mengingatmonyet-monyet ke-variabilitas, kami menilai apakah adaperbedaan IFN-γ produksi sebelum dan sesudah perlakuan (sebelumanti-TNF terapi) dalam kedua laten dan pengobatan TB aktifkelompok, tapi kami mengamati tidak ada perbedaan yang signifikan (Gbr. S5).Dengan demikian, hanya mengikuti mikobakteri khusus IFN-γ produksitidak mungkin menjadi pengganti berguna untuk pengobatan yang berhasil,bahkan ketika saluran udara sampel.Pengobatan Obat Induced Perubahan Struktur granuloma. Kami sebelumnyaditandai spektrum histopatologis granulomajenis terlihat pada monyet aktif dan laten terinfeksi (18, 19).Seperti halnya manusia, monyet dengan TB aktif memiliki granuloma caseousdan nonnecrotizing granuloma (granuloma selular yang solidterdiri dari makrofag epithelioid dengan limfosit jarang),kadang-kadang mineral granuloma, serta pneumonia TB(25). Granuloma dari monyet aktif diobati dalam

penelitian adalah terutama caseous (Gambar 3A), dengan nonnecrotizing atausupuratif (neutrophilic) granuloma atau pneumonia TB jugahadir. Sebaliknya, monyet setelah 2 mo pengobatan telahproporsi yang jauh lebih kecil dari granuloma caseous, dengan lebihinternal fibrosis ("penyembuhan") granuloma (Gambar 3B), interstisialfibrosis tanpa struktur granuloma banyak tersisa (Gambar 3C),dan fibrocalcific (mineralisasi dengan fibrosis perifer) (Gambar 3D)granuloma. Dalam beberapa kasus, sebuah kontinum dapat diamati padagranuloma menjalani fibrosis pusat dan kemudian berkembangmenjadi granuloma sepenuhnya fibrosis atau fibrocalcific. The fibrosisProses ini sering disertai dengan agregat limfositik,yang dapat bermigrasi sekitar dan / atau ke lesi penyembuhan dalam menanggapiuntuk dirilis antigen mikobakteri.Semua histologis bagian (granuloma khusus membedah sebagaiserta random beberapa contoh dari masing-masing lobus paru-paru) dari masing-masinghewan dengan penyakit aktif (tidak diobati dan diperlakukan) yang dihitungsehubungan dengan jenis granuloma dan patologi. Proporsigranuloma jenis di paru-paru diwakili dalam sebuah diagram lingkaran untuk setiaphewan, serta jumlah granuloma diamati padasemua bagian paru-paru (Gbr. 4). Kontrol aktif didominasi olehcaseous, supuratif, atau nonnecrotizing granuloma; efektifterapi obat mengakibatkan pengurangan jenis lesi, dengansubstansial peningkatan lesi "penyembuhan", terutama mereka yang menunjukkaninterstisial fibrosis dan fibrocalcification (Gbr. 4).Kami menilai mana jenis lesi dikaitkan dengan bakteripertumbuhan kontrol dan setelah pengobatan. Cocoklesi di mana kedua angka bakteri (cfu / g) dan histologi adalahtersedia menunjukkan bahwa pertumbuhan bakteri secara signifikan lebih tinggidalam granuloma caseous atau daerah pneumonia TB dibandingkan denganfibrocalcific granuloma atau fibrosis interstisial (Gambar 5). "Penyembuhan"granuloma adalah mereka yang muncul caseous dengan jelasevolusi internal fibrosis (yaitu, perantara antara caseousdan granuloma benar-benar fibrosis). "Penyembuhan" granulomamemiliki beban bakteri menengah (signifikan lebih rendah daripadacaseous granuloma), yang menunjukkan keadaan transisi selamaPengobatan (Gbr. 5). Dalam INH/RIF- dan INH / RIF / MTZ-diperlakukanhewan, basil yang paling sisanya ditemukan pada granuloma caseousdan kadang-kadang dalam "penyembuhan" granuloma (Gbr. 5).