PROFESOR : DELGADO PAREDES GUILLERMO

ALUMNO: CHUGNA ZULUETA JOSE

CULTIVO DE MERISTEMOS Y LA

OBTENCIÓN DE PLANTAS LIBRES DE

VIRUS

•Las enfermedades producidas por virus son mas difícil de erradicar

•Los virus no pueden ser controlados con la aplicación de productos químicos

¿Por qué?

Metabolismo depende Del Hospedero

• Utilización de la Termoterapia en la inactivación y/oerradicación de virus

Años 50

ápices y callos de raíces

no tienen virus virus en baja concentración

CULTIVO DE MERISTEMOS

DESARROLLO HISTÓRICO :

• kotte & Robbins (1922), crecimiento de raíces en solución mineralcon azucares.

• White (1943), observo en tomate la disminución del virus del TMVen hospederos inoculados.

• Limasset & Cournet (1949), extrapolando el experimento deWhite, observaron lo mismo.

• Morel & Martin (1952), “ aislar el meristemo de una plantainfectada y poder obtener una planta sana”.

MERISTEMOS

Sub-zona a1

Sub-zona a2

Domo apical

Cúpula

Aislamiento de meristemos

Meristemos apicales

son

aislados

yemas terminales yemas axilares

esaséptico

se debe

desinfectar

Técnicas de asilamiento

EQUIPOS Y MATERIALES

• Estereoscopio 10-40x desinfectado con etanol 95°

• Bisturí N° 11

• Hipodérmica N° 25

• Navaja de afeitasMangos artesanales

Esterilizados con etanol 70°y flameados en mechero

Procedimiento

yema terminal o axilar desinfecta con etanol 95° x 15 s hipoclorito de calcio o,5% x 1-3 min

3-5 enjuagues con agua destilada

aislamiento

llevar a cultivo Bisturí N° 11

remoción de hojas exteriores

hipodérmica N° 25

remoción de hojas interiores

navaja

aislar el meristemo

Estereoscopio

Medio de cultivo

• Al inicio se utilizaba el medio de White

• Ahora mayormente se utiliza el MS en ocasionesenriquecido con sustancias orgánicas

• A pesar de las diferentes formulaciones ensayadas,hay especies de plantas que no crecen.

CONDICIONES AMBIENTALES DE INCUBACIÓN

Temperatura

En general 25°C

plantas plantas

clima frio-templado clima tropical

18-22°C 28°C

Luzfotoperiodo 16/8 Hrs

en general 1-2 W.m-2

Factores que influyen en el cultivo de meristemos

I. Tipos de virus

II. Tamaño de explante :

Eje:

Clavel

Cítricos : 0,1-0,15 mm

meristemo tamaño : prendimiento erradicación

tamaño : prendimiento erradicación

meristemo 0,2 mm no desarrollan

meristemo 0,75 mm desarrollan pero con virus

14,8 % prendimiento

100 % erradicación

III. Tipo de yema: algunas observaciones sugieren que yemas apicales son mas efectivas que las axilares.

IV. pH: 5,8 1

V. estaciones

VI . Consistencia del medio de cultivo

Termoterapia y cultivo de tejidos

Kobus (1890) reportar el control de una enfermedad viral con la T°primero

tallos de caña de azúcar agua caliente x 50-52°C/30 minen

en

Kunkel (1936)

durazneroA)agua caliente 50°C/10min

B)calor eco 35-38°C/2-4semanas

sano el amarillamiento mejores resultados

Termoterapia cultivo de meristemos erradicación

APLICACIÓN TERMOTERAPIA

inactivación

………………………………………..………………………………………

Fundamento de la termoterapia

Sensibilidad diferencial de la multiplicación viral y el metabolismo celular

produce

inactivación y/o erradicación viral

Postulados de la termoterapia

a. Calor seco es mas efectivo

b. Calor seco varia según el tipo de especie de plata y el tipo de virus

c. Temperatura de potenciabilidad para infectar y multiplicar no estacorrelacionado con su punto de inactivación térmica

d. Virus isotérmicos son mas fácil de controlar

e. En la mayoría de los cosas solo produce inactivación

Quimioterapia y cultivo de tejidos

Fundamento:

La aplicación de productos químicos en las plantas altera elmetabolismo celular, bloqueando así la síntesis de los virus.

Fundamento del cultivo de meristemos

Disminución progresiva del virus hacia el meristemo apical Escasa

nulaconcentración

HIPÓTESIS

auxinas no tejido vascular alta velocidad de multiplicación

supera a la del virusbloquea al virus

no hay enzimas claves mayor que la del virus

biosíntesis acelerada

No diseminación del virus

Desorganización celular