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Tinción de contraste para Microscopia Electrónica. Universidad Nacional Autónoma de México Facultad de Estudios Superiores Cuautitlán Laboratorio de Morfofisiología 2602
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TINCIONES EN HISTOLOGÍA:
TINCIÓN DE HIDRÓXIDO DE PLOMO
ALCALINO.Domínguez Villa Francisco X.Gama Brambila Rodrigo A.Núñez Luna Isboset G.
Grupo 2602Equipo 10.
Universidad Nacional Autónoma de México.Facultad de Estudios Superiores Cuautitlán
Laboratorio de Morfofisiología
GENERALIDADES Y FUNDAMENTO
Provee de un alto
contraste al tejido.
[Tinción negativa]
Contrarresta los
problemas de
contraste en la
utilización de resinas
epóxicas.
Es una solución que
en presencia del
dióxido de carbono ,
forma carbonato de
plomo, generando
sales indeseables.
Ventajas Desventajas
TÉCNICA DE PREPARACIÓN.
Solución:
Preparar una solución al 1 % de hidróxido de plomo.
Mantener agitación por 2 minutos.
Filtrar la solución y colocarla en un tubo de ensaye.
En cada tubo se coloca una pequeña capa de aceite
mineral para protegerlo del aire.
Si la solución se torna turbia, adicionar 2 a 3 gotas
de hidróxido de sodio al 40%.
METODOLOGÍA
Luego se pone un cubreobjetosobre el pozo y se coloca la tapa de la caja de petri.
Se deja actuar el colorante por 5 min.
La rejilla se lava en agua destilada (20 inmersiones) empleando un vaso adicional por rejilla a lavar.
La rejilla se pone sobre papel filtro y se deja secar.
Los pozos de la caja de tinción se limpian retirando el exceso de líquido con una pipeta Pasteur.
Se lleva a cabo en una caja de petri grande que contiene una capa de 1.5cm de cera de dentista.
En el centro se corta una zona de cera de 5cm de diámetro que se llena con pastillas de NaOH para absorber el CO2.
En el resto de la superficie se preparan pozos separados 2 ó 3 cm, el fondo de cada pozo se tapa con un poco de papel para lente. La rejilla unida al corte que se quiere teñir y se mantiene abajo mientras se llena el borde hasta el fondo con colorante de plomo..
APLICACIÓN
El hidróxido de plomo
reacciona con el osmio
reducido en los tejidos
comportándose como
un colorante general.
En los tejidos fijados
con tetraóxido de
osmio, el plomo tiñe
las membranas
celulares, al
combinarse con el
óxido de plomo.
Tiñe además los
carbohidratos,
producto quizás de la
quelación del plomo
por los abudantes
grupos hidroxilo.
EJEMPLO DE TINCIÓN CON HIDRÓXIDO DE PLOMO.
Fig. 1. Tumor mamario de ratón
REFERENCIAS.
FELDMAN, G.D. (1962) A method of staining thin sections with lead hydroxide for precipitate-free sections. Disponible en línea: http://jcb.rupress.org/content/15/3/592.full.pdf[Consulta: 7/IV/2010]
MONTUENGA, B.L. (2009). Técnicas en Histología y Biología Celular.
Disponible en línea:
http://books.google.com.mx/books?id=EwbAJcs0ZGoC&pg=PA80&dq=tinciones+histologicas&cd=4#v=onepage&q=hidr%C3%B3xido%20de%20plomo&f=false
[Consulta 08/IV/2020]
MATTHEW, J.L.; et al. (1977). Métodos de laboratorio. Volumen II. Segunda Edición. Interamericana S.A. de C.V. México, D.F. pp 1165-6.