Transcript
Page 1: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

UNIVERSIDAD VERACRUZANAFAC. DE BIOANALISIS XALAPAEE. MICOLOGIA

Examen directo y Medios de cultivo Presentan:

Rosas Ordoñez GabrielaDulce Dilian Ortiz SotoCruz Rivera Paula Ameyali Vela Veliz Mayra IraisLópez Guerra DomingoLara Sánchez Elías Reyes Karol Leyda

Page 2: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Recordar que….

Los hongos crecen en dos formas:

Levaduras

• Células únicas de forma esférica (3-15 µm).

• producto de gemación.

• pseudohifas

Mohos

• Colonias filamentosas multicelulares.

• Túbulos cilíndricos• Micelos• Algunos divididos

por septos.

Brook G, Butel j, Morse S. 2005.

Page 3: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Especímenes clínicos

Secreción de heridas Biopsias Orina

Cutánea (pelo, piel,

uñas)

Exudados mucosas MO

Sangre Secreción de VRB

Page 4: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz
Page 5: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz
Page 6: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Dx Micológico

Tom

a d

e

mu

est

ra

Adecuada y abundante

Recu

rsos

del

Lab

.

Reactivos.Medios de cultivo.Equipos .

Pers

on

al

Con experiencia en toma y manejo

Page 7: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Examen Directo KOH•Hidróxido de potasio…....20 gr•Glicerol.......20 ml•Agua destilada.....60 ml

KOH-dimetil sulfoxido•Hidróxido de potasio................10

gr•Dimetilsulfóxido..40 ml•Agua destilada.............50 ml

Sol. Salina •Cloruro de sodio…. 0.85 gr•Agua destilada. 100 ml

Page 8: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

•Limitaciones

Sitio anatómico Cantidad de muestra

# de microorganism

os

Tipo de paciente

Calidad del personal del

Lab. Artefactos

Page 9: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz
Page 10: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz
Page 11: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz
Page 12: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Cultivo de la Muestra (envases)

Page 13: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Cultivo de la Muestra (Agar) Saburaud Micosel, micobiótico

• 2% glucosa.• pH 6.9• Medios estándar. • No ideal para

esporulación. • Puede contener

cloranfenicol o gentamicina.

• Harina de soja• Dextrosa• Ciclohexamida y

cloranfenicol

Page 14: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Papa-Dextrosa BHI con/sin Antibiótico

• Base de pulpa de papa.• Glucosa/dextrosa

Como estimulante de pigmento: • Zanahoria y bilis

• Hongos filamentosos y levaduras.

• Sangre de carnero.

Antibiótico: • Cloranfenicol,

Gentamicina, Cicloheximida.

Conservar a 2-8 °C en una bolsa

Colonias de Penicillium expansum (A) y Botrytis cinerea (B), creciendo en medio Agar Papa Dextrosa.

Page 15: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Temperatura • 25-30 °C• 37 °C

Tiempo • Levaduras 24-48 hr.• Hongos filamentosos • No patógenos 2-4 días• Patógenos 6-15 días

Page 16: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Identificación de hongos

Color Tasa de crecimiento

Page 17: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

• Algodonosa• Aterciopelada• Granular o polvorienta• glabrosa

Textura

Page 18: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

(colinas y valles) • Rugosa• Umbonada• Verrucosa• Aplanada

Topografía

Page 19: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Examen del Cultivo

Cardaje Azul de algodón de lactofenol

• Fenol, concentrado..20 ml• Acido láctico............20 ml• Glicerol....................40 ml• Azul de algodón.....0.50 gr• Agua destilada.........20 ml

Fragmentos hifales • Metamina

Argentica de Gomori

• Tiñe de negro la pared celular

• Ac. Peryodico de Schiff

• Tiñe de negro la pared celular

Page 20: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

• Cinta Adhesiva• Microcultivo

Page 21: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Trichophyton rubrum

Page 22: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Trichophyton tonsurans

Page 23: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Trichophyton mentagrophytes

Page 24: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Microsporum canis

Page 25: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Epidermophyton floccosum

Page 26: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Pitiriasis Versicolor

Page 27: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Coccidioides immitis

Fase micelial 25-30 °C

Fase tisular 37 °C

Page 28: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Aspergillus spp.

•Morfología colonial

Page 29: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

•Medios de cultivo

Agar• Saburaud • Papa-

Dextrosa

Extracto de Malta• Glucosa 20

g/L • Extracto de

malta• Peptona 1 • Agar 15 • pH = 5,4

(selectivo)

Czapek-Dox • Medio para el

cultivo de hongos y bacterias capaces de utilizar el nitrato de sodio como única fuente de nitrógeno.

Aspergillus terreus on Czapek dox agar showing typical suede-like cinnamon-buff to sand brown colonies while reverse is yellow to deep dirty brown.

Page 30: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz
Page 31: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

•Identificación de Estructuras

Page 32: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz
Page 33: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz
Page 34: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz
Page 35: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Bibliografía • Murray P, Rosenthal K, Pfaüer M. (2006). Microbiología Medica. 5 edic. Edit. El

sevier. Madrid. España. Pp 734-736. • Brook G, Butel j, Morse S. (2005). microbiología Medica de Jawetz, Mednick y

Adelberg. 25 edic. Edit. Manual moderno. Cali. Colombia. P. 621.• Pumarola A, Rodríguez A, García J, Piedrola G. (nd). Microbiología y parasitología

Medica. 2 edic. edit. Salvat. Barcelona. España. P 752. • González G. (nd). Métodos básicos en el laboratorio de micología. Identificación de

hongos. Consultado el 17 de marzo del 2012. disponible en: http://goo.gl/cfa7v• Magaña M, Magaña M. dermatología. (2003). Editorial panamericana. México DF. Pp.

22 [versión web]• Silva D. (nd). Pitiriasis versicolor. Consultado el 17 de marzo del 2012. disponible en:

http://www.pediatraldia.cl/pitiriasis_versicolor.htm • SA. (nd). Agares. Consultado el 17 de marzo del 2012. disponible en: http://

danival.org/fungi/fungi_medios.html• BD. (2007). Mycosel Agar. Consultado el 17 de marzo del 2012. disponible en: http://

goo.gl/TJbzY• Biocen. Agar Czapek-Dox . Consultado el 17 de marzo del 2012. disponible en: http://

www.biocen.cu/producto/indicemc/lmcp1.htm• HWG. (2002-2011). Agar Czapek-Dox . Consultado el 17 de marzo del 2012.

disponible en: http://www.mold.ph/aspergillus-terreus.htm

Page 36: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz