36
UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz Soto Cruz Rivera Paula Ameyali Vela Veliz Mayra Irais López Guerra Domingo Lara Sánchez Elías Reyes Karol Leyda

UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

UNIVERSIDAD VERACRUZANAFAC. DE BIOANALISIS XALAPAEE. MICOLOGIA

Examen directo y Medios de cultivo Presentan:

Rosas Ordoñez GabrielaDulce Dilian Ortiz SotoCruz Rivera Paula Ameyali Vela Veliz Mayra IraisLópez Guerra DomingoLara Sánchez Elías Reyes Karol Leyda

Page 2: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Recordar que….

Los hongos crecen en dos formas:

Levaduras

• Células únicas de forma esférica (3-15 µm).

• producto de gemación.

• pseudohifas

Mohos

• Colonias filamentosas multicelulares.

• Túbulos cilíndricos• Micelos• Algunos divididos

por septos.

Brook G, Butel j, Morse S. 2005.

Page 3: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Especímenes clínicos

Secreción de heridas Biopsias Orina

Cutánea (pelo, piel,

uñas)

Exudados mucosas MO

Sangre Secreción de VRB

Page 4: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz
Page 5: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz
Page 6: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Dx Micológico

Tom

a d

e

mu

est

ra

Adecuada y abundante

Recu

rsos

del

Lab

.

Reactivos.Medios de cultivo.Equipos .

Pers

on

al

Con experiencia en toma y manejo

Page 7: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Examen Directo KOH•Hidróxido de potasio…....20 gr•Glicerol.......20 ml•Agua destilada.....60 ml

KOH-dimetil sulfoxido•Hidróxido de potasio................10

gr•Dimetilsulfóxido..40 ml•Agua destilada.............50 ml

Sol. Salina •Cloruro de sodio…. 0.85 gr•Agua destilada. 100 ml

Page 8: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

•Limitaciones

Sitio anatómico Cantidad de muestra

# de microorganism

os

Tipo de paciente

Calidad del personal del

Lab. Artefactos

Page 9: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz
Page 10: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz
Page 11: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz
Page 12: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Cultivo de la Muestra (envases)

Page 13: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Cultivo de la Muestra (Agar) Saburaud Micosel, micobiótico

• 2% glucosa.• pH 6.9• Medios estándar. • No ideal para

esporulación. • Puede contener

cloranfenicol o gentamicina.

• Harina de soja• Dextrosa• Ciclohexamida y

cloranfenicol

Page 14: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Papa-Dextrosa BHI con/sin Antibiótico

• Base de pulpa de papa.• Glucosa/dextrosa

Como estimulante de pigmento: • Zanahoria y bilis

• Hongos filamentosos y levaduras.

• Sangre de carnero.

Antibiótico: • Cloranfenicol,

Gentamicina, Cicloheximida.

Conservar a 2-8 °C en una bolsa

Colonias de Penicillium expansum (A) y Botrytis cinerea (B), creciendo en medio Agar Papa Dextrosa.

Page 15: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Temperatura • 25-30 °C• 37 °C

Tiempo • Levaduras 24-48 hr.• Hongos filamentosos • No patógenos 2-4 días• Patógenos 6-15 días

Page 16: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Identificación de hongos

Color Tasa de crecimiento

Page 17: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

• Algodonosa• Aterciopelada• Granular o polvorienta• glabrosa

Textura

Page 18: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

(colinas y valles) • Rugosa• Umbonada• Verrucosa• Aplanada

Topografía

Page 19: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Examen del Cultivo

Cardaje Azul de algodón de lactofenol

• Fenol, concentrado..20 ml• Acido láctico............20 ml• Glicerol....................40 ml• Azul de algodón.....0.50 gr• Agua destilada.........20 ml

Fragmentos hifales • Metamina

Argentica de Gomori

• Tiñe de negro la pared celular

• Ac. Peryodico de Schiff

• Tiñe de negro la pared celular

Page 20: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

• Cinta Adhesiva• Microcultivo

Page 21: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Trichophyton rubrum

Page 22: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Trichophyton tonsurans

Page 23: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Trichophyton mentagrophytes

Page 24: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Microsporum canis

Page 25: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Epidermophyton floccosum

Page 26: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Pitiriasis Versicolor

Page 27: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Coccidioides immitis

Fase micelial 25-30 °C

Fase tisular 37 °C

Page 28: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Aspergillus spp.

•Morfología colonial

Page 29: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

•Medios de cultivo

Agar• Saburaud • Papa-

Dextrosa

Extracto de Malta• Glucosa 20

g/L • Extracto de

malta• Peptona 1 • Agar 15 • pH = 5,4

(selectivo)

Czapek-Dox • Medio para el

cultivo de hongos y bacterias capaces de utilizar el nitrato de sodio como única fuente de nitrógeno.

Aspergillus terreus on Czapek dox agar showing typical suede-like cinnamon-buff to sand brown colonies while reverse is yellow to deep dirty brown.

Page 30: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz
Page 31: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

•Identificación de Estructuras

Page 32: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz
Page 33: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz
Page 34: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz
Page 35: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz

Bibliografía • Murray P, Rosenthal K, Pfaüer M. (2006). Microbiología Medica. 5 edic. Edit. El

sevier. Madrid. España. Pp 734-736. • Brook G, Butel j, Morse S. (2005). microbiología Medica de Jawetz, Mednick y

Adelberg. 25 edic. Edit. Manual moderno. Cali. Colombia. P. 621.• Pumarola A, Rodríguez A, García J, Piedrola G. (nd). Microbiología y parasitología

Medica. 2 edic. edit. Salvat. Barcelona. España. P 752. • González G. (nd). Métodos básicos en el laboratorio de micología. Identificación de

hongos. Consultado el 17 de marzo del 2012. disponible en: http://goo.gl/cfa7v• Magaña M, Magaña M. dermatología. (2003). Editorial panamericana. México DF. Pp.

22 [versión web]• Silva D. (nd). Pitiriasis versicolor. Consultado el 17 de marzo del 2012. disponible en:

http://www.pediatraldia.cl/pitiriasis_versicolor.htm • SA. (nd). Agares. Consultado el 17 de marzo del 2012. disponible en: http://

danival.org/fungi/fungi_medios.html• BD. (2007). Mycosel Agar. Consultado el 17 de marzo del 2012. disponible en: http://

goo.gl/TJbzY• Biocen. Agar Czapek-Dox . Consultado el 17 de marzo del 2012. disponible en: http://

www.biocen.cu/producto/indicemc/lmcp1.htm• HWG. (2002-2011). Agar Czapek-Dox . Consultado el 17 de marzo del 2012.

disponible en: http://www.mold.ph/aspergillus-terreus.htm

Page 36: UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz