Pusat Studi Tuberkulosis & HIV Universitas Andalas
Andani Eka Putra
Modalitas Pemeriksaan
Mikrobiologi Untuk
Diagnosis Tuberkulosis
Pulmonary UP-DATE 2014,
Padang, 7-9 Juni 2014
Pusat Studi Tuberkulosis & HIV Universitas Andalas
Kedaruratan global (1993)
Infeksi 1/3 populasi
8.6 juta kasus baru
Masalah baru
o TB – HIV (13%)
o MDR-TB (5.23%)
M. tuberculosis
Pusat Studi Tuberkulosis & HIV Universitas Andalas
Masalah dalam TB
MDR-TB / XDR / NTM
Pengobatanlama
Diagnosis
HIV/penyakit denganpenurunan daya tahan
TB latenVaksin
Pusat Studi Tuberkulosis & HIV Universitas Andalas
Struktur Seluler
dan Molekular
M. tuberculosisSebagai Dasar
Pengembangan
Diagnosis
Pusat Studi Tuberkulosis & HIV Universitas Andalas
Struktur Seluler
dan Molekular
M. tuberculosisSebagai Dasar
Pengembangan
Diagnosis
Pusat Studi Tuberkulosis & HIV Universitas Andalas
Diagnosis
Tuberculosis
DNA
BakteriRespon
imun tubuh
Antigen/fraksi
Pusat Studi Tuberkulosis & HIV Universitas Andalas
Identifikasi Bakteri
Mikroskopis
Ziehl Neelsen
Cold Method
Auramin
Rhodamin
MODS
o 10.000 bakteri/ml
o Sensitivitas rendah
o Spesifisitas tinggi
o Tidak bisa bedakan
NTM
o Fasilitas dan SDM
Pusat Studi Tuberkulosis & HIV Universitas Andalas
LJ, Kodoh, Ogawa,
Middlebrook
Gold Standart
Waktu lama (4-8 minggu
Fasilitas khusus
Bactec MGIT/MB-BacT --
- Cepat (7-10 hr)
- Kontaminasi/pos palsu
Kultur
Pusat Studi Tuberkulosis & HIV Universitas Andalas
Fasilitas dan SDM
Sensitivitas 80-95%
Spesifisitas 85-100%
Metoda
o PCR - Elektroforesis
o Reverse hibridisasi/
GeneXpert
o Real time PCR
o LAMP
o LFD dengan Probe
Amplifikasi asam nukleat
Pusat Studi Tuberkulosis & HIV Universitas Andalas
Isolasi DNA
Amplifikasi gen target
dengan PCR
Deteksi dengan
elektroforesis
PCR - Elektroforesis
Pusat Studi Tuberkulosis & HIV Universitas Andalas
Produk PCR
Menggunakan pengenal
DNA (Probe)
Deteksi & Resistensi
Cepat
Mahal
Reverse hibridisasi
GenoType MTBDR – Hain, Lifescience
Pusat Studi Tuberkulosis & HIV Universitas Andalas
Deteksi TB dan Rif Resist
Prosedur mudah
Mesin dan Cartridge
Sens & Spesif >>
Hasil Cepat
Mahal
GeneXpert/Rif
Pusat Studi Tuberkulosis & HIV Universitas Andalas
Cepat
Murah
Fasilitas sederhana
Kurang sensitif
Sensitivitas >>, jika +
probe
LAMP-TB
Pusat Studi Tuberkulosis & HIV Universitas Andalas
Capture antigen
Sens/Spesif >>
Tergantung jenis antigen
target
Metoda
o Elisa
o Rapid Test/
imunokromatografi
o Imunohistokimia
Deteksi Antigen/fraksi bakteriDaftar Antigen
• esat-6
• Cfp10
• mpt 51
• mpt 63
• mpt64
• mtc28
• 19 kDa
• 20kDa
• 30 kDa
• 38 kDa
Pusat Studi Tuberkulosis & HIV Universitas Andalas
Humoral, << sensitif
Seluler, in vitro, berbasis sel
Seluler, in vivo – Mantoux test
Respon imun
Metoda
o Elisa
o IGRA/Elispot
o Skin test
Pusat Studi Tuberkulosis & HIV Universitas Andalas
Komersial : Quantiferon
TB Gold Assay
Prinsip
Induksi sel T dengan antigen
TB akan memberikan respon
sekresi interferon yang lebih
tinggi pada populasi terinfeksi
Aplikasi
TB laten, TB Anak
Interferon Gamma releasing Assay (IGRA)
Pusat Studi Tuberkulosis & HIV Universitas Andalas
Data EBM
Sens & Spesif
Kemudahan
pengerjaan
Biaya
Waktu
Fasilitas
Dasar pemilihan modalitas Diagnosis TB
Biaya
Waktu
Fasilitas
Pusat Studi Tuberkulosis & HIV Universitas Andalas
MODS mikroplate
Nitrat Reduktase
Amplifikasi DNA
Produksi rekombinan
protein untuk diagnostik
LAMP – TB
Produksi Monoklonal ab
Peptida sintetik
Realtime PCR – Taqman
Riset Diagnosis TB
Pusat Studi Tuberkulosis & HIV Universitas Andalas
Mari bergabung dalam riset TB dan HIV menuju
kemandirian bangsa akan alat diagnostik