VALIDASI METODE Julia Kantasubrata

5/25/2018 VALIDASI METODE Julia Kantasubrata

1/7

JK/PPKimiaJK/PPKimia--LIPI/2005LIPI/2005

VALIDASI METODEVALIDASI METODE

Oleh:Oleh:

Julia KantasubrataJulia Kantasubrata

Pusat Penelitian KimiaPusat Penelitian Kimia -- LIPILIPI


SNI 19SNI 19 -- 1702517025 --200020005.4.5 Validasi Metode5.4.5 Validasi Metode

5.4.5.1 Validasi adalah konfirmasi melalui pengujian dan5.4.5.1 Validasi adalah konfirmasi melalui pengujian danpengadaan bukti yang objektif bahwa persyaratanpengadaan bukti yang objektif bahwa persyaratantertentu untuk suatu maksud khusus dipenuhitertentu untuk suatu maksud khusus dipenuhi

5.4.5.2 Laboratorium harus memvalidasi:5.4.5.2 Laboratorium harus memvalidasi:

a.a. metode tidak bakumetode tidak baku

b. metode yang didesain/dikembangkanb. metode yang didesain/dikembangkan lablabc. metode baku yang digunakan diluar lingkupc. metode baku yang digunakan diluar lingkup

yang dimaksudyang dimaksud

d. metode baku yang dimodifikasid. metode baku yang dimodifikasi

e. metode baku untuk menegaskan dane. metode baku untuk menegaskan danmengkonfirmasi bahwa metode itu sesuai untukmengkonfirmasi bahwa metode itu sesuai untukpenggunaan yang dimaksudkan.penggunaan yang dimaksudkan.


SNI 19SNI 19 -- 1702517025 --2000 (lanjutan)2000 (lanjutan)5.4.5.2 Laboratorium harus merekam hasil yang5.4.5.2 Laboratorium harus merekam hasil yang

diperoleh, prosedur yang digunakan untuk validasidiperoleh, prosedur yang digunakan untuk validasidan pernyataan bahwa metode tersebut tepat untukdan pernyataan bahwa metode tersebut tepat untukpenggunaan yang dimaksud.penggunaan yang dimaksud.

Catatan: Teknik yang digunakan untuk menentukanCatatan: Teknik yang digunakan untuk menentukanunjuk kerja suatu metode hendaknya merupakanunjuk kerja suatu metode hendaknya merupakansalah satu, atau kombinasi dari halsalah satu, atau kombinasi dari hal--hal berikut:hal berikut:

-- Kalibrasi menggunakan bahan acuanKalibrasi menggunakan bahan acuan

-- Pembandingan hasil yang diperoleh dengan metode lainPembandingan hasil yang diperoleh dengan metode lain

-- Uji banding antar laboratoriumUji banding antar laboratorium

-- Assesmen yang sistematis pada faktorAssesmen yang sistematis pada faktor--faktor yangfaktor yang

mempengaruhi hasilmempengaruhi hasil

-- Assesmen pada ketidakpastian hasil berdasarkan pemahamanAssesmen pada ketidakpastian hasil berdasarkan pemahaman

ilmiah dan prinsip teoritis metode dan pengalaman praktisilmiah dan prinsip teoritis metode dan pengalaman praktis


Kapan Suatu Metode perlu di Validasi ?Kapan Suatu Metode perlu di Validasi ?

Apabila metode tersebut baru dikembangkan untukApabila metode tersebut baru dikembangkan untuksuatu permasalahan yang khusussuatu permasalahan yang khusus

Apabila metode yang selama ini sudah rutin, direvisiApabila metode yang selama ini sudah rutin, direvisiuntuk suatu pengembangan atau diperluas untukuntuk suatu pengembangan atau diperluas untukmemecahkan suatu permasalahan analisa yang barumemecahkan suatu permasalahan analisa yang baru

Apabila hasil QC menunjukkan bahwa metode yangApabila hasil QC menunjukkan bahwa metode yangsudah rutin tersebut berubah terhadap waktu (QCsudah rutin tersebut berubah terhadap waktu (QCcharts)charts)

Apabila metode rutin digunakan di laboratorium yangApabila metode rutin digunakan di laboratorium yangberbeda, atau dilakukan oleh analis yang berbedaberbeda, atau dilakukan oleh analis yang berbedaatau dilakukan dengan peralatan yang berbedaatau dilakukan dengan peralatan yang berbeda


QC chartsQC charts Disebut pula sebagai Shewart chartsDisebut pula sebagai Shewart charts

Terdapat 3 garis penting dalam grafik iniTerdapat 3 garis penting dalam grafik ini

garis pusat sebagai nilai benar dari QC samplegaris pusat sebagai nilai benar dari QC sample

garis batas peringatan (garis batas peringatan (warning limitwarning limit) pada nilai) pada nilai

garis batas tindak lanjut (garis batas tindak lanjut (action limitaction limit) pada nilai) pada nilai

+ 2 x

n

+ 3 x

n

Cara membuatnya:1. Pilih jenis contoh kontrol yang sesuai dan lakukan analisis

terhadap contoh tersebut sekurang-kurangnya tujuh kali.2. Hitung harga rata-rata dan simpangan baku3. Tarik garis nilai rata-rata/nilai benar4. Tarik garis batas peringatan dan batas tindak lanjut


Parameter Unjuk Kerja MetodeParameter Unjuk Kerja Metode

1. Repeatability dan Reproducibility1. Repeatability dan Reproducibility

2. Akurasi (ketepatan, accuracy)2. Akurasi (ketepatan, accuracy)

3. Perolehan kembali (recovery)3. Perolehan kembali (recovery)

4. Limit deteksi dan Limit kuantitasi4. Limit deteksi dan Limit kuantitasi

5. Ketidakpastian (uncertainty)5. Ketidakpastian (uncertainty)

6. Daerah linier pengukuran dan daerah kerja6. Daerah linier pengukuran dan daerah kerja

7. Konfirmasi identitas, selektifitas, spesifisitas7. Konfirmasi identitas, selektifitas, spesifisitas


2/7


1. Repeatability dan Reproducibility1. Repeatability dan Reproducibility((Bagaimana Cara MenentukannyaBagaimana Cara Menentukannya))

Analisis Pengu-

langan

Parameter yang

dihitung dari data

Catatan

Standaratau bahan acuan

atau blanko contoh[yangkedalamnya ditambah analitdengan berbagai C berbeda]

Analis, peralatan, laborato-rium sama. Skala waktuanalisa pendek

1 0 S impa nga n bak u(s) pada setiapkonsentrasi

Repeatability suntuk setiap kon-sentrasi

Analis dan peralatan berbeda,

laboratorium sama.. Skalawaktu analisa panjang

1 0 S impa nga n bak u

(s) pada setiapkonsentrasi

Intra-laboratory

Reproducibility suntuk setiap kons.

Analis, peralatan, laborato-

rium berbeda.. Skala waktuanalisa panjang

1 0 S impa nga n bak u

(s) pada setiapkonsentrasi

Inter-laboratory

Reproducibility suntuk setiap kons

Perlu studi kolabo-rasi


Blanko..Blanko..

Blanko pereaksiBlanko pereaksi adalah:adalah:

Pereaksi yang digunakan selama proses analisisPereaksi yang digunakan selama proses analisis(termasuk pelarut yang digunakan untuk ekstraksi dan(termasuk pelarut yang digunakan untuk ekstraksi danpelarutan), dianalisis secara terpisah dengan maksudpelarutan), dianalisis secara terpisah dengan maksuduntuk melihat apakah pereaksi ini ikut serta memberikanuntuk melihat apakah pereaksi ini ikut serta memberikanisyarat pada pengukuran atau tidakisyarat pada pengukuran atau tidak

Blanko contohBlanko contoh adalah matriks tanpa analit. Blankoadalah matriks tanpa analit. Blankocontoh sukar diperoleh, akan tetapi bahan ini diperlukancontoh sukar diperoleh, akan tetapi bahan ini diperlukanuntuk memberikan estimasi yang cukup realistik yanguntuk memberikan estimasi yang cukup realistik yangsering dijumpai dalam analisis dari contoh yang diujisering dijumpai dalam analisis dari contoh yang diuji


2. Akurasi2. Akurasi

Menurut ISO, akurasi didefinisikan sebagaiMenurut ISO, akurasi didefinisikan sebagaikesesuaian antara hasil analisis dengan nilaikesesuaian antara hasil analisis dengan nilaibenar analit (atau nilai acuan analit yangbenar analit (atau nilai acuan analit yangdapat diterima).dapat diterima).

Akurasi dapat ditentukan melalui berbagaiAkurasi dapat ditentukan melalui berbagaicara:cara:

Pemakaian CRMPemakaian CRM

Perbandingan dengan metode lainPerbandingan dengan metode lain

Standar AdisiStandar Adisi


Bagaimana Cara MenentukanBagaimana Cara MenentukanAkurasi ?Akurasi ?

Analisis Pengu-

langan

Perhitungan

Blanko pelarut dan bahan

acuan mengunakankandidat metode yang

akan divalidasi

10 Rata-rata analit dlm bahan acuan diku-

rangi rata-rata blanko

Bandingkan dengan nilai analit sebenar-nya dlm bahan acuan

Selisihnya memberikan nilai penyimpang-an dari metode

Blanko pelarut dan bahanacuan/uji menggunakan

kandidat metode danmetode lain (yang berdiri

sendiri/tidak tergantung

dari kandidat metode)

10 Rata-rata analit dlm bahan acuan/uji diku-rangi rata-rata blanko

Bandingkan dengan hasil pengukuran

serupa menggunakan metode lain.

Selisihnya memberikan nilai penyimpang-an metode relatif terhadap metoda lain

tersebut diatas


Cara Menghitung AkurasiCara Menghitung Akurasi

Standar Massa 50 g ditimbang denganStandar Massa 50 g ditimbang denganneraca dan dari pembacaan diperolehneraca dan dari pembacaan diperolehhasil 49,24 ghasil 49,24 g

/50/50 -- 49,24/49,24/Akurasi (%) = x 100Akurasi (%) = x 100

5050

== ++ 1,52%1,52%


3. Perolehan Kembali (Recovery)3. Perolehan Kembali (Recovery)

Recovery (%) = (CRecovery (%) = (C11--CC22)/C)/C33 xx 100100dimana:dimana:

CC11 = konsentrasi dari analit dalam campuran= konsentrasi dari analit dalam campurancontoh + sejumlah tertentu analitcontoh + sejumlah tertentu analit

CC22 = konsentrasi dari analit dalam contoh= konsentrasi dari analit dalam contoh

CC33 = konsentrasi dari analit yang ditambahkan= konsentrasi dari analit yang ditambahkan

kedalam contohkedalam contoh


3/7


4. Limit Deteksi & Limit4. Limit Deteksi & LimitKuantisasiKuantisasi

Limit deteksi adalah konsentrasi terendah dari analitLimit deteksi adalah konsentrasi terendah dari analitdalam contoh yang dapat terdeteksi, tetapi tidakdalam contoh yang dapat terdeteksi, tetapi tidakperlu terkuantisasi, dibawah kondisi pengujian yangperlu terkuantisasi, dibawah kondisi pengujian yangdisepakatidisepakati

Limit kuantisasi atau biasa disebut juga limitLimit kuantisasi atau biasa disebut juga limitpelaporan (limit of reporting) adalah konsentrasipelaporan (limit of reporting) adalah konsentrasiterendah dari analit yang dapat ditentukan denganterendah dari analit yang dapat ditentukan dengantingkat presisi dan akurasi yang dapat diterima,tingkat presisi dan akurasi yang dapat diterima,dibawah kondisi pengujian yang disepakatidibawah kondisi pengujian yang disepakati


Bagaimana Cara Menentukan Limit DeteksiBagaimana Cara Menentukan Limit Deteksi& Limit Kuantisasi& Limit Kuantisasi

Lakukan analisis terhadapLakukan analisis terhadap blanko contohblanko contoh (tidak(tidakmengandung analit) sebanyak sekurangmengandung analit) sebanyak sekurang--kurangnya 7kurangnya 7kalikali

LoD = nilai rataLoD = nilai rata--rata blanko contoh + 3rata blanko contoh + 3 ss

LoQ = nilai rataLoQ = nilai rata--rata blanko contoh + 10rata blanko contoh + 10 ss

ss = standar deviasi (simpangan baku) dari blanko= standar deviasi (simpangan baku) dari blankocontohcontoh

Cara ini baru dapat diaplikasikan apabila pengukuranCara ini baru dapat diaplikasikan apabila pengukuranblanko contoh memberikan nilaiblanko contoh memberikan nilai ssyang tidak samayang tidak sama

dengan noldengan nol

Mendapatkan blanko contoh bukan suatu hal yangMendapatkan blanko contoh bukan suatu hal yangmudahmudah


5. Ketidakpastian (Uncertainty)5. Ketidakpastian (Uncertainty)

Ketidakpastian Adalah Suatu Parameter YangKetidakpastian Adalah Suatu Parameter Yang

Menetapkan Rentang Nilai Yang DidalamnyaMenetapkan Rentang Nilai Yang Didalamnya

Diperkirakan Nilai Benar Yang Diukur Berada.Diperkirakan Nilai Benar Yang Diukur Berada.

Menghitung Rentang Tersebut Disebut SebagaiMenghitung Rentang Tersebut Disebut Sebagai

Pengukuran Ketidakpastian.Pengukuran Ketidakpastian.


Melalui Metode HPLC diperoleh kadarMelalui Metode HPLC diperoleh kadarBenzoat dalam Produk Juice Jeruk adalahBenzoat dalam Produk Juice Jeruk adalah

11, 5511, 55 ++ 0,5 ppm0,5 ppm


Kaitan Antara Ketidakpastian Dan KesalahanKaitan Antara Ketidakpastian Dan Kesalahan

Ketidakpastian Memadukan Semua KesalahanKetidakpastian Memadukan Semua Kesalahan

Yang Diketahui Menjadi Suatu Rentang TunggalYang Diketahui Menjadi Suatu Rentang Tunggal


Ketidakpastian

Kesalahan dlmmenimbang

+Kesalahan dlmmemipet larutan

+ ..

Kalibrasi.neraca

+Pembacaan

skalaKalibrasi.Vol pipet

+ Pembacaanmeniskus

+FaktorMuai

Larutan

=

Ketidak-pastian(KP) asal

Kalibrasi

KP

asalPresisi

KP asal

Kalibrasi

KP

asalPresisi

KP

asalEfek

Temp


4/7


SumberSumber--sumber Ketidakpastiansumber Ketidakpastian

SamplingSampling

Preparasi ContohPreparasi Contoh

Kalibrasi PeralatanKalibrasi Peralatan

InstrumenInstrumen

Kesalahan randomKesalahan random

Kesalahan sistematikKesalahan sistematik

PersonilPersonil


Sumber Informasi Untuk PengukuranSumber Informasi Untuk Pengukuran

KetidakpastianKetidakpastian

Spesifikasi PabrikSpesifikasi Pabrik

Data PustakaData Pustaka

Data Validasi Metode atau data dari LogData Validasi Metode atau data dari Log

BookBook


Mengestimasi KetidakpastianMengestimasi Ketidakpastian

Membuat sistem Model PengujianMembuat sistem Model Pengujian

Menuliskan Formula (rumus)Menuliskan Formula (rumus)

Membuat grafik tulang ikanMembuat grafik tulang ikan

Menghitung ketidakpastian bakuMenghitung ketidakpastian baku

Menghitung ketidakpastian gabunganMenghitung ketidakpastian gabungan

Menghitung ketidakpastian diperluasMenghitung ketidakpastian diperluas


Model Sistim PengujianModel Sistim PengujianDibuat larutan Standar Asam BenzoatDibuat larutan Standar Asam Benzoat

100,02 mg AB, P = 99,5% , dlm 250 mL

1 mLstd induk dilarutkan sp 100 mL

CAB yg diinjeksikan = 0,0039807 mg/mL

Contoh Juice Jeruk dicentrifuge, dilewatkan SPE, diaddkan

hingga volume tertentu

1 mL juice setelah lewat kolomSPE, diaddkan hingga 3 mL,

Injeksikan 20 L larutan standar kedalam kolom (Astd)

Injeksikan 20 L larutan contoh kedalam kolom (Aspl)

Hitung konsentrasi Asam benzoat dalam contoh juice (Cspl)


Rumus (Formula)

Aspl

AstdCspl = Cstd

Dimana:

Cspl =konsentrasi asam benzoat dalam contoh juice

Cstd = konsentrasi asam benzoat dalam standar

Aspl = luas puncak yang diperoleh dari larutan contoh

Astd = luas puncak yang diperoleh dari larutan standar

Vakhir ekstrak = volume contoh yang siap diinjeksikan (3 mL)

Vcontoh yg diambil = volume juice jeruk yang dianalisis (1 mL)

Vakhir ekstrak

Vcontoh yg diambil


MembuatMembuat cause and effectcause and effectdiagramdiagram

Identifikasi sumberIdentifikasi sumber--sumber ketidakpastian dan buatsumber ketidakpastian dan buat

daftar dari semua faktor yang dapat memberikandaftar dari semua faktor yang dapat memberikan

kontribusi kesalahan terhadap hasil akhir (dibuatkontribusi kesalahan terhadap hasil akhir (dibuat

dalam bentukdalam bentuk cause and effectcause and effectdiagram)diagram)

Cause and effect diagramCause and effect diagramdisebut juga sebagaidisebut juga sebagai

grafik tulang ikangrafik tulang ikan


5/7


Dalam menggambarkan grafik tulang ikan :Dalam menggambarkan grafik tulang ikan :

Gambarkan mulaGambarkan mula--mula tulang punggungmula tulang punggung--nyanya

Letaknya parameter yang dicari dalam pengujian sebagaiLetaknya parameter yang dicari dalam pengujian sebagai

kepala ikankepala ikan

Gambarkan apa yang ada dalam rumus sebagai tulangGambarkan apa yang ada dalam rumus sebagai tulang--

tulang utamatulang utama

Tulang utama terdiri dari rumus ++Tulang utama terdiri dari rumus ++

Yang dimaksud dengan ++ disini adalah apa yang tidakYang dimaksud dengan ++ disini adalah apa yang tidak

ada dalam rumus, tetapi memberi kontribusi padaada dalam rumus, tetapi memberi kontribusi pada

ketidakpastian (misal homogenitas contoh, presisiketidakpastian (misal homogenitas contoh, presisi

metode, recovery, liniaritas, efek temperatur dll)metode, recovery, liniaritas, efek temperatur dll)


Cause and Effect Diagram

Cspl

Cstd

Vekstrak

Vcontoh

Presisi

Astd

Kons AB dlm juice (mg/L)P

mV

AsplHomgn

Linearitas

Recovery

f



Mengelompokkan faktorMengelompokkan faktor--faktor tersebut kedalamfaktor tersebut kedalam

katagori komponen ketidakpastiankatagori komponen ketidakpastian

Tipe ATipe A

Tipe BTipe B

Tipe ATipe A

Berdasarkan pekerjaan eksperimental danBerdasarkan pekerjaan eksperimental dan

dihitung dari rangkaian pengamatan berulang.dihitung dari rangkaian pengamatan berulang.

Tipe BTipe B

Berdasarkan informasi yang dapat dipercaya.Berdasarkan informasi yang dapat dipercaya.


Komponen KP asa l Tipe Sumber data

Kal i bras i Neraca B Ser tif ikat kal ibrasi

Presisi Neraca A Percobaan kecil

Ka li br asi o ven B Sert ifi kat k al ib ra si

Presisi Metode A Pengulangan mi-

nimal 6 penentuan

Homogenitas A Hasil Analisis 10

sample yg diambil

random

PENENTUAN TIPE A ATAU TIPE B


Mengestimasi Ketidakpastian

Mengestimasi masing-masing komponen ketidakpastian

sehingga ekivalen dengan sebuah simpangan

baku (s). Komponen ini disebut sebagai

ketidakpastian baku ()

=s

nTipe A :

s = simpangan baku

n = jumlah pengamatan


Bagaimana Menghitung ketidakpastianBagaimana Menghitung ketidakpastian

baku Tipe B ?baku Tipe B ?Apabila Informasi datanya disertai dengan keterangan:Apabila Informasi datanya disertai dengan keterangan:

Tingkat Kepercayaan 95%Tingkat Kepercayaan 95%

(x) = s / 2 atau s / 1,96(x) = s / 2 atau s / 1,96 Tingkat Kepercayaan 99%Tingkat Kepercayaan 99%

(x) =(x) = ss/ 3 atau s/ 3,090/ 3 atau s/ 3,090

Apabila Informasi datanya tidak disertai dengan keteranganApabila Informasi datanya tidak disertai dengan keteranganapapun, maka dianggapapapun, maka dianggap distribusi rectangular:distribusi rectangular:

(x) =(x) = ss// 33

Untuk distribusi triangularUntuk distribusi triangular

(x) =(x) = ss// 66


6/7


Menghitung Ketidakpastian GabunganMenghitung Ketidakpastian Gabungan

Menggabungkan komponenMenggabungkan komponen--komponen ketidakpastian bakukomponen ketidakpastian baku

(()) untuk menghasilkan ketidakpastian hasil pengujianuntuk menghasilkan ketidakpastian hasil pengujian

secara keseluruhan (ketidakpastian gabungan).secara keseluruhan (ketidakpastian gabungan).

Apabila komponenApabila komponen--komponen ketidakpastian tersebutkomponen ketidakpastian tersebutmempunyai satuan yang samamempunyai satuan yang sama

DikuadratkanDikuadratkan

DijumlahkanDijumlahkan

Ketidakpastian gabungan adalah akar pangkat dua dariKetidakpastian gabungan adalah akar pangkat dua darijumlahjumlah

GG == 22aa ++ 22bb + ..+ ..


Perhitungan Ketidakpastian Gabungan (Perhitungan Ketidakpastian Gabungan (GG))

Apabila komponenApabila komponen--komponen ketidakpastiankomponen ketidakpastian

tersebut tidak mempunyai satuan yang samatersebut tidak mempunyai satuan yang sama

maka:maka: Komponen tsb diubah terlebih dahulu hinggaKomponen tsb diubah terlebih dahulu hingga

mempunyai satuan yang samamempunyai satuan yang sama

DikuadratkanDikuadratkan

DijumlahkanDijumlahkan

Ketidakpastian gabungan adalah akar pangkat duaKetidakpastian gabungan adalah akar pangkat duadari jumlahdari jumlah

GG/G = (/G = (aa/a)/a)22 + (+ (bb/b)/b)22 + .+ .


Aturan Yang BerlakuAturan Yang Berlaku

1. Untuk penjumlahan atau pengurangan, misal1. Untuk penjumlahan atau pengurangan, misal

y = a + by = a + b (dalam hal ini satuan harus sama)(dalam hal ini satuan harus sama)

22yy== 22aa ++ 22bb atauatau yy == 22aa ++ 22bb2. Untuk perkalian dan pembagian, misal C=W/V2. Untuk perkalian dan pembagian, misal C=W/V

CC/C =/C = ((ww/W)/W)22 + (+ (vv/V)/V)22

3. Untuk rumus q = Bx dimana B adalah3. Untuk rumus q = Bx dimana B adalah

konstantakonstanta qq= B= B xx

4. Untuk rumus q = x4. Untuk rumus q = xnn qq/q = n/q = n xx/x/x



7. Hitung ketidakpastian diperluas7. Hitung ketidakpastian diperluas UU ((expanded uncertaintyexpanded uncertainty))

8. Laporkan hasil uji lengkap dengan nilai ketidakpastian8. Laporkan hasil uji lengkap dengan nilai ketidakpastian

diperluas.diperluas.


Ketidakpastian Diperluas (U)Ketidakpastian Diperluas (U)

Untuk mendapatkan probabilitas yang memadaiUntuk mendapatkan probabilitas yang memadai

bahwa nilai hasil uji berada dalam rentang yangbahwa nilai hasil uji berada dalam rentang yang

diberikan oleh ketidakpastian, makadiberikan oleh ketidakpastian, maka

ketidakpastian baku gabungan (ketidakpastian baku gabungan (GG) dikalikan) dikalikandengan sebuah faktor pencakupan (k).dengan sebuah faktor pencakupan (k).

Faktor 2 memberikan ketidakpastian diperluasFaktor 2 memberikan ketidakpastian diperluas

dengan tingkat kepercayaan sekitar 95%dengan tingkat kepercayaan sekitar 95%

U = k.U = k. GG


6. Working and Linier Range6. Working and Linier Range

Analisis Pengu-

langan

Parameter yang

dihitung dari data

Catatan

1.Blanko & bahan acuanatau blanko contoh yang

kedalamnya di tambahkan

analit dengan berbagaikonsentrasi [C] berbeda

Diperlukan disini

sedikitnya 6 konsentrasi +

blanko

1 P lo t re sp on pen gu -kuran (sumbu y) ter-

hadap konsentrasi

yg diukur (sumbu x)

Amati secara visualdan identifikasi

daerah pengukuran

yang linier, batasatas bawah dari

daerah kerja

Lanjutkan pengerja-

an butir 2

Idealnya konsen-trasi yang berbeda

disiapkan secara

mandiri, dan tidakberasal dari sejum-lah larutan pada la-rutan induk

Dari pengerjaan iniakan didapat konfi-

rmasi visual apa-kah daerah kerja

itu linier atau tidak


7/7


Working and Linier Range (lanjutan)Working and Linier Range (lanjutan)

Analisis Pengu-

langan

Parameter yang

dihitung dari data

Catatan

2.Bahan acuan atau blan-ko contoh yang keda-

lamnya ditambahkan

analit pada sekurang-

kurangnya 6 konsen-

trasi berbeda pada

daerah kerja yang linier

3 Plot respon pengukur-an (sumbu y) terhadap

konsentrasi (sumbu x)

Secara visual amati

outlier yang tidak ter-

gambarkan pada re-

gresi

Hitung koefesien re-

gresi. Hitung dan plot

residual value (perbe-

daan antara nilai y yg

sebenarnya dengan ni-

lai y yang diprediksi

oleh garis lurus untuk

setiap harga x

Tahap ini diperlu-kan untuk menguji

daerah kerja yang

linier dan pada da-

erah mana dapat

digunakan kalibrasi

titik tunggal


Working and Linier Range (lanjutan)Working and Linier Range (lanjutan)

Distribusi yang random dari garis lurusDistribusi yang random dari garis lurusmerupakan konfirmasi linearitasmerupakan konfirmasi linearitas

Trend yang sistematik menunjukkan nonTrend yang sistematik menunjukkan non--linearitaslinearitas


7. Konfirmasi Identitas &7. Konfirmasi Identitas &Selektifitas/spesifisitasSelektifitas/spesifisitas

Harus selalu diyakinkan bahwa isyarat yang dihasilkanHarus selalu diyakinkan bahwa isyarat yang dihasilkan

pada proses pengukuran hanya berasal dari analitpada proses pengukuran hanya berasal dari analit

dan bukan berasal dari senyawa lain atau bukandan bukan berasal dari senyawa lain atau bukan

merupakan campuran isyarat dari analit + senyawamerupakan campuran isyarat dari analit + senyawa

lain yang kebetulan mempunyai sifat fisika/kimialain yang kebetulan mempunyai sifat fisika/kimia

serupa dengan analit yang akan ditetapkan.serupa dengan analit yang akan ditetapkan.

Hal ini yang disebut dengan Konfirmasi IdentitasHal ini yang disebut dengan Konfirmasi Identitas


Selektifitas atau Spesifisitas

Kemampuan untukKemampuan untuk hanyahanya mendeteksi analit yang akan diukur.mendeteksi analit yang akan diukur.

Kemampuan untuk menentukan secara akurat dan spesifik analit yangKemampuan untuk menentukan secara akurat dan spesifik analit yangakan diukur dengan adanya komponen lain dari matriks dibawahakan diukur dengan adanya komponen lain dari matriks dibawahkondisi pengujiankondisi pengujian

Suatu metode yang selektif dan spesifik akan dapat melakukanSuatu metode yang selektif dan spesifik akan dapat melakukanpengukuran dengan bena, dengan adanya unsur pengganggu yangpengukuran dengan bena, dengan adanya unsur pengganggu yangberasal dari:berasal dari: KetidakmurnianKetidakmurnian

Spesies senyawa kimia yang serupaSpesies senyawa kimia yang serupa

KomponenKomponen--komponen dari matriks samplekomponen dari matriks sample

Selektifitas/Spesifisitas dapat ditingkatkan dengan jalanSelektifitas/Spesifisitas dapat ditingkatkan dengan jalan Sample cleanupSample cleanup

PemisahanPemisahan

Daya/kemampuan dari sistem deteksiDaya/kemampuan dari sistem deteksi


Mengulang Kromatografi menggunakan kolomMengulang Kromatografi menggunakan kolomdengan polaritas berbeda (menggunakandengan polaritas berbeda (menggunakan

standar)standar)

Faktor Kapasitas Komponen (k)Jenis Kolom Diuron Monuron Neburon

Kolom I 4,3 1,0 25,6

Kolom II dengan

polaritas berbeda

dari Kolom I

1,5 1,1 0,3


Chromatographic Cross Check Pada KolomChromatographic Cross Check Pada KolomSama, Eluen Berbeda (dari larutan contoh)Sama, Eluen Berbeda (dari larutan contoh)

Faktor Kapasitas Komponen (k)

Fasa Gerak Terdapat Puncak Pada Menit ke

Metanol : Air

35 : 654,3 - 25,6

Diuron ?? Neburon??

Dioksan:Heksan

1 : 991,5

Ya, Diuron

- 0,3Ya, Neburon

Documents

VALIDASI METODE Julia Kantasubrata