VALIDASI METODE PENGUJIAN PADA AASOLEH RENI ZULIQA
Devinisi Validasi MetodeProses penentuan suatu syarat syarat
analitik dan penegasan bahwa metode yang sedang dipertimbangkan
untuk digunakan memiliki kemampuan unjuk kerja yang konsisten dgn
aplikasi yang dibutuhkan.
Kapan suatu metode perlu divalidasi ? Ketika mengembangkan
metode pengujian yang
baru. Ketika merevisi metode yang sudah establish dgn
menambahkan perbaikan atau perluasan untuk masalah yang baru.
Ketika Quality control mengindikasikan bahwa metode yang sudah
establish mengalami perubahan seiring waktu. Ketika metode sudah
establish digunakan di laboratorium yang berbeda atau analis yang
berbeda atau instrumentasi yang berbeda. Ketika ingin menunjukkan
kesetaraan antara dua metode yang berbeda, seperti : metode baru
dengan
Parameter validasi metode yang biasa ditentukan :Parameter
Metode baru Metode standar Metode Modifikasi
AkurasiPresisi (repeatability) Presisi (reproducibility) LoD
LoQ
? ?
? ?
? ?
LinearitySpecificity Robustness
?
?x x
?X X (?)
Langkah yang dilakukan sebelum validasi metode adalah verifikasi
alat untuk mengetahui kinerja alat Linearitas Sensitifitas Limit
deteksi (IDL)
Desain penentuan parameter daerah kerja dan linearitasApa yang
dianalisis? Blanko, standar dgn berbagai konsentrasi Diperlukan
paling tidak 6 konsentrasi ditambah blanko Bagaimana
menganalisisnya??? Idealnya, konsentrasi yang berbeda harus
dipreparasi secara independent, dan tidak berasal dari pengenceran
larutan induk yang sama Apa yang dilakukan dengan data yang
diperoleh?? Tentukan secara visual untuk mengidentifikasi perkiraan
rentang linier dan batas atas serta batas bawah darah kerja
Desain penentuan parameter presisi metodeApa yang
dianalisis?
Standar, Bahan acuan (RM atau CRM)
atau blanko yang dispike pd berbagai konsentrasi yg berada pd
daerah kerjaBagaimana menganalisisnya? Dgn analis, peralatan, dan
laboratorium yang sama, jangka waktu pelaksanaan pendek Dgn analis
dan peralatan yang berbeda, dan laboratorium sama, jangka waktu
pelaksanaan lebih lama Dgn analis, peralatan, dan laboratorium yang
berbeda, jangka waktu pelaksanaan lama
Desain penentuan parameter presisi metodeApa yang dilakukan dgn
data yang diperoleh? Tentukan standar deviasi (s) Tentukan
koefisien variasi (CV) Bandingkan dgn nilai CV Horwitz, CV Horwitz
= 21-0,5 log C
oKonsentrasi 1 % C = 0,01 oKonsentrasi 1 ppm C = 10-6
Persyaratan repeatability metode : CV < 0,67 x CV
Horwitz Persyaratan reproducibility metode : CV < CV
Horwitz
Desain penentuan parameter akurasi metodeApa yang dianalisis?
Blanko reagen dan RM/CRM menggunakan metode yang sedang divalidasi,
atau Blanko reagen dan RM/CRM/sampel yang sedang divalidasi dan
metode lainnya(sebaiknya metode primer) Apa yang dilakukan dgn data
yang diperoleh? Kurangkan nilai rata rata analit dalam
RM/CRM/Sampel dgn nilai rata rata blanko reagen. Bandingkan dgn
nilai CRM yang tercantum dalam sertifikatnya
Desain penentuan parameter LoD dan LoQ metodeApa yang
dianalisis? 10 blanko sampel yang independent 10 blanko sampel
independent yang di-spike dgn konsentrasi terkecil analit yang
dapat diukur Bagaimana menganalisisnya? Blanko sampel/blanko sampel
yang di-spike, dipreparasi seperti halnya preparasi sampel Lakukan
pengukuran masing masing 1 kali
Desain penentuan parameter LoD dan LoQ Apa yang dilakukan dgn
data yang diperoleh?
Tentukan standar deviasi (s) Tentukan LoD sesuai dgn rumusan
LoD = nilai rata rata blanko + 3s LOD = 0 + 3s Tentukan LoQ
sesuai dgn rumusan LoQ = nilai rata rata blanko + 5s LoQ = nilai
rata rata blanko + 6s LoQ = nilai rata rata blanko + 10s
Contoh Validasi Metode Pengujian pada AAS Validasi Metode
pengujian Pb dalam matriks ikan
Reference Method : AOAC 18th ed., 2005 Sampel yang digunakan :
CRM : SRM 1566b (Oyster Tissue) certified value for Pb = 0,308
0,009 mg/kg
Metode AnalisaDitimbang sample sebanyak 0,35 gr Dimasukkan ke
dlm vessel teflon Ditambahkan 5 ml HNO3 pa 65% Ditambahkan 1 ml
H2O2 pa 30% Dibiarkan sehari Dilakukan proses destruksi Didestruksi
tahap 1
Didestruksi tahap 1 Didinginkan dan dibilas dengan sedikit
aquabides Ditambahkan 1 ml HNO3 pa 65% Ditambahkan 2 ml H2O2 pa 30%
Didestruksi tahap 2 Didinginkan dan dibilas dengan sedikit
aquabides Kemudian larutan didalam vessel dikisatkan diatas
waterbath yg dijaga suhuny agar tidak sampai mendidih
Larutan mengisat Setelah mengisat Sampel dilarutkan dgn larutan
HNO3 0,1 M sampai beratnya 50 g Catatan : perlakuan diatas
digunakan juga untuk blanko Sampel dan blanko sampel siap diukur
dgn menggunakan matriks modifier Ni-PO4
GF-AAS
Data pendukung Kadar wet basis =
Kadar dry basis =
Recovery =
