UJI POTENSI ENZIMATIK ISOLAT BAKTERI DARI UDARA DI …repository.ump.ac.id/4682/1/DWI ASTUTI COVER.pdf · bakteri meliputi pewarnaan gram dan uji biokimia (uji indol, uji methyl red,

1

UJI POTENSI ENZIMATIK ISOLAT BAKTERI DARI UDARA

DI SEKITAR KAMPUS UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH

PURWOKERTO

SKRIPSI

SKRIPSI

Disusun untuk Memenuhi Sebagian Syarat

Mencapai Derajat Sarjana S-1

OLEH

Dwi Astuti

0901070034

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI

FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

2014

Uji Potensi Enzimatik..., Dwi Astuti, FKIP UMP, 2014

2

ii


3

iii


4

iv


5

PERSEMBAHAN

Karya ini saya persembahkan untuk;

Ayah dan Ibunda tercinta yang selalu memberi kasih sayang serta motivasi

dan do’a yang tiada hentinya.

Suamiku tercinta yang selalu memberi do’a, semangat dan dukungan yang

sangat besar untuk Aku menyelesaikan skripsi ini.

Mas dan Mbaku tersayang yang selalu berdo’a dan mendukungku .

v


6

MOTO

Hadapi hidup dengan penuh senyuman meski dalam kesedihan

“ Tidak peduli tentang apa, bila sudah mulai mengerjakan dan belum berhasil,

maka jangan menyerah “ (William Shakespeare)

Kebahagiaan tidak datang dari luar, tapi tumbuh di dalam hati Anda, yang

membibit dari kesyukuran dan berkembang karena ketegasan untuk memilih

kebaikan sebagai jalan hidup (Mario Teguh)

vi


7

UJI POTENSI ENZIMATIK ISOLAT BAKTERI DARI UDARA DI

SEKITAR KAMPUS UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH

PURWOKERTO

Dwi Astuti

0901070034

ABSTRAK

Penelitiaan yang berjudul Uji Potensi Enzimatik Isolat Bakteri dari Udara di

Sekitar Kampus Universitas Muhammadiyah Purwokerto telah dilakukan di

Laboratorium Mikrobiologi dan Lingkungan sekitar Kampus Universitas

Muhammadiyah Purwokerto. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui jenis

bakteri yang ada di udara sekitar kampus Universitas Muhammadiyah Purwokerto

serta isolat yang dapat menghasilkan enzim amilase, protease, dan lipase. Metode

yang digunakan adalah metode survei, sedangkan isolasi bakteri menggunakan

metode piranti benturan padat dan streak kuadran. Pengamatan makroskopis

bakteri dilakukan langsung dengan melihat bentuk, elevasi, pigmentasi, tepi,

permukaan, dan halus-kasarnya permukaan koloni. Pengamatan mikroskopis

bakteri meliputi pewarnaan gram dan uji biokimia (uji indol, uji methyl red, uji

fermentasi karbohidrat, uji katalase, uji voges proskaeur). Identifikasi bakteri

menggunakan buku identifikasi bakteri dari Holt, dkk. (1994) dalam Bergey’s of

determinative Bacteriology 9th

. Bakteri yang berhasil diisolasi dari udara sebanyak

10 isolat, yaitu Klebsiella, Phenylobacterium, Serratia, Citrobacter, Azomonas,

Alcaligenes, Budvicia, Brucella, Neserria, Echerichia .Bakteri yang mempunyai

potensi enzimatik protease adalah Klebsiella, Serratia, dan Citrobacter. Bakteri

yang mempunyai potensi enzimatik amilase adalah Klebsiella, Brucella, Neiserria

,dan Echerichia. Bakteri yang mempunyai potensi enzimatik lipase adalah

Serratia, Citrobacter, dan Alcaligenes. Hasil dianalisis secara deskriptif analitatif

Kata kunci : identifikasi, isolasi, isolat bakteri, piranti benturan padat, potensi

enzimatik, udara.

vii


8

UCAPAN TERIMAKASIH

Segala puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT. Karena atas

berkah, rahmat, karunia dan ridho-Nya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang

berjudul “Uji Potensi Enzimatik Isolat Bakteri dari Udara di Sekitar Kampus

Universitas Muhammadiyah Purwokerto”. Dikesempatan kali ini penulis

mengucapkan terima kasih yang setulus-tulusnya kepada Bapak Drs. Heri

Maryanto M.Si. dan Bapak Teguh Julianto M.Si. yang telah berkenan

membimbing dan mengarahkan penulis dalam menyelesaikan skrpsi dengan baik

dan benar.

Penulis menyadari sepenuhnya akan segala keterbatasan pengetahuan dan

kemampuan yang penulis miliki, sehingga diperlukan kritik dan saran yang

membangun dan bermanfaat. Penulis telah berusaha semaksimal mungkin agar

dapat mencapai tujuan yang diharapkan sesuai dengan kemampuan yang penulis

miliki.

Selain itu penulis juga mengucapkan terimakasih kepada:

1. Drs. Ahmad, M.Pd selaku Dekan Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan

Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

2. Drs. Arief Husin, M.Si selaku Ketua Program Studi Pendidikan Biologi

Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah

Purwokerto atas fasilitasi kelancaran skripsi.

3. Segenap Dosen Program Studi Pendidikan Biologi Universitas

Muhammadiyah Purwokerto.

viii


9

4. Staf karyawan Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan.

5. Staf laboran yang telah memberi bantuan selama penelitian.

6. Bapak dan Ibu yang senantiasa selalu memberikan Do’a dan semangat,

beribu-ribu terima kasih untuk semuanya yang tak akan cukup jika

diungkapkan dengan kata-kata dan yang tak akan mungkin terbalaskan sampai

kapanpun.

7. Suami tercinta yang selalu mendo’akan, memberi semangat dan dukungan

serta segala bantuan yang telah diberikan.

8. Keluarga besarku yang telah memberikan dukungan dan do’a.

9. Agun Gunawan rekan kerja di Laboratorium Mikrobiologi, terimakasih atas

bantuan dan kerjasamanya selama penulis melaksankan penelitian dan

penulisan skripsi ini.

10. Teman-teman seperjuangan di Prodi Pendidikan Biologi 2009 atas

kerjasamanya selama ini.

11. Kepada semua pihak yang tidak bisa penulis sebutkan satu persatu yang telah

membantu dalam penyusunan skripsi ini.

Semoga amal dan kebaikan amal dan kebaikan yang telah diberikan Bapak

dan Ibu dosen serta teman-teman semua kepada penulis mendapat balasan yang

setimpal dari Allah SWT. Semoga dapat bermanfaat bagi pembaca.

Purwokerto, .......................

Penulis

ix


10

DAFTAR ISI

Halaman

UCAPAN TERIMA KASIH ......................................................................... vii

DAFTAR ISI ................................................................................................... ix

DAFTAR TABEL .......................................................................................... xii

DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... xiii

DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. xiv

BAB I PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang Masalah .......................................................................... 1

1.2 Rumusan Masalah ................................................................................... 3

1.3 Tujuan Penelitan...................................................................................... 4

1.4 Manfaat Penelitian .................................................................................. 4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Isolasi Bakteri dari Suatu Campuran....................................................... 5

2.2 Identifikasi Bakteri ................................................................................ 6

2.3 Bakteri ..................................................................................................... 6

2.3.1 Ukuran Bakteri ........................................................................... 7

2.3.2 Bentuk Bakteri ............................................................................. 7

2.3.3 Struktur Sel Bakteri ..................................................................... 8

2.3.4 Pengaruh Faktor Lingkungan pada Pertumbuhan Bakteri .......... 10

2.4 Mikrobiologi Udara ................................................................................ 14

2.4.1. Udara dalam Ruangan................................................................... 14

x


11

2.4.2. Udara di Luar (Atmosfer) ............................................................ 14

2.5. Enzim ........................................................................................................ 15

2.5.1. Enzim Protease ............................................................................. 16

2.5.2. Enzim Amilase.............................................................................. 16

2.5.3. Enzim Lipase ................................................................................ 16

BAB III METODE PENELITIAN

3.1. Lokasi dan Waktu Penelitian .................................................................... 18

3.2. Alat dan Bahan yang digunakan ............................................................... 18

3.2.1. Alat ......................................................................................................... 18

3.2.2. Bahan ............................................................................................ 18

3.3. Metode Penelitian...................................................................................... 19

3.4. Prosedur Penelitian.................................................................................... 19

3.4.1. Pengambilan Sampel .................................................................... 19

3.4.2. Pembuatan Media ......................................................................... 19

3.4.3. Isolasi Bakteri ............................................................................... 22

3.4.4. Pengamatan Karakteristik Bakteri ................................................ 24

3.5. Identifikasi Bakteri .................................................................................... 27

3.6. Pengujian Potensi Enzim .......................................................................... 28

3.6.1. Pengujian Penghasil Protease ....................................................... 28

3.6.2. Pengujian Penghasil Amilase ....................................................... 28

3.6.3. Pengujian Penghasil Lipase .......................................................... 28

xi


12

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1. Hasil .......................................................................................................... 29

4.1.1. Hasil Isolasi Bakteri ...................................................................... 29

4.1.2. Hasil Pengamatan Makroskopis Isolat Bakteri ............................. 29

4.1.3. Hasil Pengamatan Karakteristik Mikroskopis ............................. 30

4.1.4. Hasil Uji Biokimia ........................................................................ 31

4.1.5. Hasil Identifikasi ........................................................................... 35

4.1.6. Hasil Uji Potensi Bakteri .............................................................. 51

4.2. Pembahasan ............................................................................................... 54

4.2.1. Jenis Bakteri.................................................................................. 54

4.2.2. Hasil Pewarnaan Gram ................................................................. 59

4.2.3. Hasil Uji Biokimia ................................... 60

4.2.4. Hasil Uji Potensi ........................................................................... 64

BAB V KESIMPULAN

5.1. Simpulan ................................................................................................... 71

5.2. Saran .......................................................................................................... 71

DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................... 72

xii


13

DAFTAR TABEL

Nomor Judul Tabel Halaman

Tabel 4.1. Kode isolat bakteri yang berhasil diisolasi dari udara yang ada di sekitar

kampus Universitas Muhammadiyah Purwokerto .................................... 29

Tabel 4.2. Hasil pengamatan karakteristik mikroskopis ............................................. 30

Tabal 4.3. Hasil uji biokimia ....................................................................................... 31

Tabel 4.4. Hasil pengamatan karakteristik makroskopis, mikroskopis, dan uji

biokimia genus Klebsiella ......................................................................... 36

Tabel 4.5. Hasil pengamatan makroskopis, mikroskopis, dan uji biokimia pada

genus Phenylobacterium ........................................................................... 38


genus Serratia ........................................................................................... 39


genus Citrobacter...................................................................................... 41

Tabel 4.8. Hasil Pengamatan makroskopi, mikroskopi, dan uji biokimia pada genus

Azomonas .................................................................................................. 42

Tabel 4.9. Hasil pengmatan makroskopis, mikroskopis, dan uji biokimia pada

genus Alcaligenes ...................................................................................... 44


genus Budvicia .......................................................................................... 45


genus Brucella .......................................................................................... 47


genus Neisseria ......................................................................................... 48


genus Echerichia ....................................................................................... 50

Tabel 4.14. Hasil pengamatan potensi bakteri ............................................................ 51

Tabel 4.15. Tabel isolat bakteri yang telah diidentifikasi ........................................... 54

Tabel 4.16. Luas daya degradasi yang terbentuk pada uji enzimatik protease ........... 64

Tabel 4.17. Luas daya degradasi yang terbentuk pada uji enzimatik amilase ............ 66

Tabel 4.18. Luas daya degradasi yang terbentuk pada uji enzimatik lipase ............... 69

xiv


14

DAFTAR GAMBAR

Nomor Judul Gambar Halaman

Gambar 4.1. Hasil pengamatan karakteristik makroskopisbakteri................... 30

Gambar 4.2. Hasil uji fermentasi karbohidrat .................................................. 32

Gambar 4.3. Hasil uji indole ............................................................................ 33

Gambar 4.4. Hasil uji katalase ......................................................................... 33

Gambar 4.5. Hasil uji voges proskauer ............................................................ 34

Gambar 4.6. Hasil uji methyl red ..................................................................... 35

Gambar 4.7. Hasil pengamatan makroskopis isolat bakteri UD-1 ................... 37



Gambar 4.10. Hasil pengamatan makroskopis isolat bakteri UD-4 ................. 41





Gambar 4.15. Hasil pengamatan makroskopis isolat bakteri UD-9 dan UD-11 49

Gambar 4.16. Hasil pengamatan makroskopis isolat bakteri UD-10 ............... 50

Gambar 4.17. Hasil pengamatan uji enzim protease ........................................ 52

Gambar 4.18. Hasil pengamatan uji enzim amilase ......................................... 53

Gambar 4.19. Hasil pengamatan uji enzim lipase ............................................ 54

Gambar 4.20. Reaksi penguraian trytophan oleh enzim trytophanase ............. 61

Gambar 4.21. Persamaan reaksi penguraian H2O2 oleh enzim katalase .......... 62

Gambar 4.22. Persamaan reaksi fermentasi karbohidrat .................................. 62

Gambar 4.23. Persamaan reaksi perubahan warna pada medium uji Voges

Proskaue.................................................................................... 63

Gambr 4.24. Persamaan reaksi hidrolisis glukosa ........................................... 63

xiv


15

DAFTAR LAMPIRAN

Nomor Judul Lampiran Halaman

Lampiran 1. Kode isolat untuk masing-masing bakteri ................................... 77

Lampiran 2. Hasil identifikasi isolat-isolat bakteri .......................................... 78

Lampiran 3. Pengamatan mikroskopis bakteri ................................................. 80

Lampiran 4. Uji potensi enzimatik ................................................................... 85

xv


Documents

UJI POTENSI ENZIMATIK ISOLAT BAKTERI DARI UDARA DI …repository.ump.ac.id/4682/1/DWI ASTUTI COVER.pdf · bakteri meliputi pewarnaan gram dan uji biokimia (uji indol, uji methyl red,