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Österreichische Agentur für Gesundheit und Ernährungssicherheit GmbH www.ages.at
Helga Reisenzein, Johann Schaffer Institute for Sustainable Plant Production, AGES Spargelfeldstr. 191, A-1220 Vienna, Austria Feuerbrand Roundtable AGES, Wien, 26.01.2016
Überwachung der Sensitivität von Erw inia amylovora gegen das Antibiotikum
Streptomycinsulfat als Begleitmaßnahme zur Antibiotika-Anwendung im österreichischen
Obstbau
www.ages.at 2 Reisenzein, 2016
• Überwachung der Resistenzentwicklung von E. amylovora in
Österreich seit 2006
• Allgemeine Einführung
- Streptomycin-Wirkungsmechanismus
- Resistenzentstehung und -mechanismen
- Risikofaktoren für eine Resistenzentwicklung und –ausbreitung
- Internationale Trends
Überblick
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Streptomycin - Wirkungsmechanismus
www.ages.at 4 Reisenzein, 2016
E. amylovora ist als resistenzgefährdet einzustufen !
1. Anwendungsbedingungen des AB - Anwendungshäufigkeiten - Dosierung
2. Resistenzpotentials des Schaderregers - Epidemiologie des Schaderregers - Generationszeit, Wachstumsraten - Isolierung der pathogenen Population (z.B. Glashaus) - Mutationsfrequenz
Risikofaktoren:
Resistenzentwicklung im Freiland
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Überleben von resistenten Stämmen auch ohne Selektionsdruck zeitlich begrenzt
möglich!
• Fitness der resistenten Bakterienstämme im Freiland
- Anfangs herabgesetzte Fitness von SM-resistenten Stämmen
- Bei bestehendem Selektionsdruck Etablierung der resistenten Stämmen möglich
Resistenzausbreitung im Freiland
Risikofaktoren
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0102030405060708090
100
1994 1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001
Frequency (%)
Diagramm nach Manulis, S. et al., Plant Disease, 2003, Vol. 87
Häufigkeit von streptomycin-resistenten E. amylovora - Stämmen in Israel
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• seit 2006 von der AGES in Kooperation mit APSD Vorarlberg durchgeführt • seit 2008 erweitertes Monitoring in Kooperation mit den allen APSD der Länder
• Ergebnisse im Resistenzbericht Österreich - AURES veröffentlicht
Überwachung der Resistenzentwicklung von E. amylovora in Österreich
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• Probenziehung - Probenziehungsplan auf Basis des geplanten SM-Einsatzes
• Keimisolierung und Identifizierung - Verdachtsproben (Anreicherung, Isolierung, Identifizierung durch PCR)
• Überprüfung der Empfindlichkeit gegenüber SM
- High level resistance screen nach CLSI-Standards (Kirby-Bauer Test)
- Bestimmung der MIC: high range E-test Streifen (0,064 – 1024µg/ml SM)
- Testisolate: 100µl Bakteriensuspension mit def. Keimdichte auf King´s B Platten und 48 Std. Inkubation
Methodik
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2009 2010 2012 2013
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Vbg. 0,0 0 5,7 1 1 1 0 8,3 3 1 0 0 0,0 0
Tirol 2,7 0 1,0 0 0 0,0 0 0 0 0 0,0 0
Stmk. 22,1 6 4 0 0 345,9 11 4 4 0 81,9 10 5 3 0 137,7 3 0 0 0
Bgld. 8,0 30 0 0 0 8,6 24 0 0 0 0 0 0 0 0 0,0 0
NÖ 3,2 0 12,0 0 0 28,8 0 0 0 0 33,5 0
Gesamt 36,0 36 4 0 0 373,2 36 5 5 0 119,0 13 6 3 0 171,2 3 0 0 0
2013 2012 2010 2009
Überblick über die mit SM-behandelten Kernobstflächen und die Probenzahlen &
Untersuchungsergebnisse
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Keine epidemiologischen cut off Werte für E. amylovora !
E-Test
Kontrolle Isolat
Verteilung der minimalen Hemmkonzentrationen (MIC) von verschiedenen E. amylovora -Isolaten
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MHK [µg/L]
Wildtyp-Isolate 2014
Wildtyp-Isolate 2013
Wildtyp-Isolate 2012
Wildtyp-Isolate 2011
Wildtyp-Isolate 2010
Wildtyp-Isolate 2009
Wildtyp-Isolate 2008
Wildtyp-Isolate 2007
Wildtyp-Isolate 1993-2006
Sensitivitätsbereich von E. amyovora Wildtyp-Isolaten
Verteilung der minimalen Hemmkonzentrationen (MIC) von verschiedenen E. amylovora -Isolaten
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MHK [µg/L]
Isolate aus Anlagen mit Streptomycin-Behandlung (2012)
Isolate aus Anlagen mit Streptomycin-Behandlung (2010)
Isolate aus Anlagen mit Streptomycin-Behandlung (2008)
Sensitivitätsbereich von E. amyovora Isolaten aus Streptomycin-behandelten Kernobstflächen
Verteilung der minimalen Hemmkonzentrationen (MIC) von verschiedenen E. amylovora -Isolaten
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1. Die aus Streptomycin-behandelten Kernobstanlagen getesteten E. amylovora Isolate keine Resistenzbildung gegenüber Streptomycin 2. E. amylovora Isolaten aus unbehandelten Kernobstanlagen bzw.
von Einzelwirtspflanzen (Wildtyp Isolate) keine Veränderung des Sensitivitätsbereiches
Zusammenfassende Beurteilung des Resistenzmonitorings
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http://www.ages.at/fileadmin/AGES2015/Themen/Arzneimittel_Medizinprodukte_Dateien/AURES/AURES_2014.pdf
Jährlicher AURES - Bericht