SDS-PAGE

Transfer

Contents

WEST-one Western Blot Detection (Spray Type)

Autoradiography(Films, Cassettes, Developer and Fixer)

Protein Transfer Kit for Semi-dry blotting

Transfer membranes

Power supply

Trans Blotters

Protocol of the western blotting

Multigels

Blocking

Detection

Antibody reaction

●　簡単プロトコール

品番 品名 包装 希望販売価格16034 WEST-oneR Western Blot Detection (Spray Type) 100 ML ￥14,000

品番 品名 包装 希望販売価格423536 セミドライブロッティング用タンパク質転写キット 25 test ￥32,000

1

WEST-one™ ウェスタンブロット検出システム

コスモバイオ セミドライブロッティング用タンパク質転写キット

スプレーするだけの簡単ウェスタンブロット検出試薬

迅速！・高効率！・高感度！・簡便！！

●　特　長

●　特　長 ●　構成内容

●　他社品との比較

　本製品は、スプレータイプの HRP 標識抗体用ウェスタンブロット検出システムです。基質溶液とエンハンサー溶液を混合する必要がなく、PVDF 膜にスプレーするだけで、コントラストの強いシグナルを検出することができます ( ニトロセルロース膜やナイロン膜でも使用可能 )。シグナルが強すぎる場合は、蒸留水で希釈してお使いください。

■ 膜にスプレーし、X 線フィルムに感光させるだ けの簡単　 操作■ メンブレン上の抗原量がわずか 1 ～ 2pg でも検出可能■ コントラストの高いシグナルが長時間持続■ 4℃で 1 年以上の長期保管が可能

■ 迅速：最短転写時間：15 V、30 分で転写が完了■ 高転写効率：転写バッファーと転写膜のセット化により、　 最適転写条件を実現■ 簡便：試薬調製不要、操作が簡単 !■ 高感度：低バックグラウンドで高感度検出が可能

・ 陽極液 ( 主成分：トリス ) ･･･ 500 mL ・ 陰極液 ( 主成分：トリス ) ･･･ 1,000 mL ・ 転写膜 (PVDF 膜 ) ･･･ 25 枚 ・ ろ紙 ( 定性用 )･･･ 100 枚

① 膜にスプレーするだけ !　 ② 1 分間インキュベーション ⑤ 膜を X 線フィルムに露光　③ 余分な検出試薬を除去④ 膜をラッピング　

使用方法：スプレーしたら 1 分待つだけ。特異的なバンドを X 線フィルムで検出、露出時間は 30 秒～ 5 分間 （発現量の少ないタンパク質検出の場合にはさらに長くすることをお勧めします）。

　本製品は、スラブ型ポリアクリルアミドゲル（マルチゲル ®II ミニ）電気泳動後のタンパク質のセミドライブロッティング法によるエレクトロブロッティング用キットです。

iNtRON Biotechnology, Inc.　　　メーカー略号：INB

コスモ・バイオ株式会社　　　メーカー略号：DCB

品番 品名 包装 希望販売価格ITM-P3031 WEST-lottTM PVDF Transfer membrane (0.45 μm, 結合容量：125μg/cm2) 1 ROLL (300X3,000mm) ￥36,000ITM-P3032 WEST-lottTM PVDF Transfer membrane (0.22 μm, 結合容量：200μg/cm2) 1 ROLL (300X3,000mm) ￥42,000

品番 品名 包装 希望販売価格IB95031 TRANSFER MEMBRANE 0.45 μm PVDF (7 x 8.5 cm) 1 PACK (10 枚 ) ￥13,000IB95030 TRANSFER MEMBRANE 0.2μm PVDF (7 x 9 cm) 1 PACK (10 枚 ) ￥15,000IB95020 TRANSFER MEMBRANE 0.2μm Nitrocellulose (7 x 8.5 cm) 1 PACK (10 枚 ) ￥9,500

品番 品名 包装 希望販売価格IB95010 Thin Blot Paper (7 x 10 cm) 1 PACK (10 枚 ) ￥4,000IB95011 Thick Blot Paper (10 x 10 cm) 1 PACK (10 枚 ) ￥5,000

品番 品名 包装 希望販売価格BBS50 ブロッティングペーパー (7.5 x 10 cm) 50 SHEET ￥6,000BBS1510-50 ブロッティングペーパー (15 x 10 cm) 50 SHEET ￥7,000

2

トランスファーメンブレン＆ブロッティングペーパーさまざまなサイズをご用意しています！

●　PVDF 膜 ( ロールタイプ）

●　PVDF・ニトロセルロース膜 ( シートタイプ）

転写ムラができた場合のトラブルシューティング

●　ブロッティングペーパー

　本製品は孔サイズ 0.45μm( 結合容量：125μg/cm2) または、0.22μm( 結合容量：200μg/cm2)のロールタイプの PVDF メンブレンです。ウエスタンブロッティングをはじめ、プロテインドットブロッティングやプロテインシーケンシングにご利用いただけます。本製品は、洗浄やストリッピング工程後も強固にタンパク質を保持し、とくに片面を化学処理したことでバックグラウンドを低減し、非常に明瞭なバンドやシグナルを得ることができます。

iNtRON Biotechnology, Inc.　　　メーカー略号：INB

IBI SCIENTIFIC　　　メーカー略号：SHE

The Gel Company　　メーカー略号：GLC

IBI SCIENTIFIC　　　メーカー略号：SHE

原因 対策ろ紙のバッファー量が少なかったため、ブロッティング中にろ紙が乾燥して気泡が発生した。 気泡の発生を防止するため、厚さ 0.5mm 以上のろ紙を使用して

ください。電極板とろ紙の間に気泡が発生した。転写膜が部分的に乾燥した。 精製水で平衡化中は転写膜を完全に水没させるようにしてくだ

さい。

F A Q ??

Q 2

A 2

セミドライエレクトロブロッターで核酸のトランスファーは可能ですか？

可能です。

Q 1

A 1

PVDF メンブレンにブロッティングしたまま抗体染色しないで保存することはできますか？

メンブレンを風乾後、転写面に触れないように注意しながらラップに包み、4℃で保存してください。保存したメンブレンを使用する場合は、100％メタノールに再度浸した後、水洗してメタノールを除き、ブロッティング液に浸してください。

Q 3

A 3

ウェスタンブロッティングで PVDF 膜をメタノール処理するのはなぜですか？

PVDF メンブレンは、疎水性が極めて強いので直接バッファーに浸しても濡らすことができません。予めメタノール処理するとバッファーで濡らすことが可能になります。このメタノール処理を確実に行わないとタンパク質が膜に結合しません。

参考文献：　Trnovsky et al. Biotechniques 13 (5)，800-804 (1992)

品番 品名 包装 希望販売価格8689358 コダック BioMax Light-1 フィルム , 13 x 18㎝ 50 SHEET ￥36,0008194540 コダック BioMax Light-1 フィルム , 18 x 24㎝ 50 SHEET ￥43,0001788207 コダック BioMax Light-1 フィルム , 20.3 x 25.4㎝ 50 SHEET ￥50,0008625170* コダック BioMax Light-1 フィルム , 35 x 43㎝ 50 SHEET ￥135,000

品番 品名 包装 希望販売価格8761520 コダック BioMax Light-2 フィルム , レディパック包装 , 20.3 x 25.4㎝ 50 SHEET ￥70,0001917012 コダック BioMax Light-2 フィルム , レディパック , 13 x 18㎝ 50 SHEET ￥59,000

品番 品名 包装 希望販売価格8209140 コダック BioMax Cassette, 20.3 x 25.4㎝ 1 PC ￥43,0008197600 コダック BioMax Cassette, 35 x 43㎝ 1 PC ￥60,000

品番 品名 包装 希望販売価格6610091 GBX 現像液 & 定着液 3.8L 用 1 SET ￥4,710

品番 160500 170000 172000品名 PS304 minipac II PS305 PS503包装 1 unit 1 unit 1 unit

希望販売価格 ¥101,000 ¥140,000 ¥140,000

製品画像

■：推奨 ●：使用可能 PS304 PS305 PS503最大電圧 (V) 300 300 500最大電流 (mA) 400 500 300最大電力 (W) 100 100 100一定電圧、一定電流 ■ ■ ■タ イ マ ー /GELSAVER機能 － ■ / ■ ■ / ■

DNA/RNAアガロース電気泳動 ■ ■ ■

RFLP, DNAフラグメント解析 ■ ■ ■

PCR スクリーニング ■ ■ ■SDS-PAGE ■ ■ ■セミドライブロッティング ● ■ ●ウエスタンブロッティング ■ ■ －

●　APELEX 社 パワーサプライ

3

化学発光検出用フィルム・カセット・現像液優れた S/N 比、広範なラインナップ

●　特　長

●　フィルム

●　フィルム

■ BioMax Light フィルムは化学発光に対して、最高感度と　 最高解像度が得られるように開発された化学発光専用の 製品■ 両面乳剤■ 化学発光イメージングで最高レベルの S/N 比 !■ あらゆるメーカーの化学発光キットで適切に使用可能

　化学発光専用　合紙なし、両面乳剤、クリアベース

　化学発光専用　レディパック包装（1 枚ずつ包装）、両面乳剤、クリアベース

Carestream Health, Inc. (Former Eastman Kodak Co.)　　　メーカー略号：IBI

* 8625170 は不定期に一定数が生産される特別サイズの製品です。在庫・納期につきましては都度お問合せください。

Carestream Health, Inc. (Former Eastman Kodak Co.)　　　メーカー略号：IBI

●　カセット

　カセット（増感紙は付いておりません）Carestream Health, Inc. (Former Eastman Kodak Co.)　　　メーカー略号：IBI

●　現像液　オートラジオグラフィーフィルム　手現像用、濃縮液

Carestream Health, Inc. (Former Eastman Kodak Co.)　　　メーカー略号：IBI

Apelex　　　メーカー略号：APX

パワーサプライ30 年の歴史、ISO9001 取得工場で生産、CE マーク付

* 6610091 は GBX 現像液 3.8L 用と GBX 定着液 3.8L 用を一本ずつ包装しています。単体での販売はございませんのでご了承下さい。

　PS305、PS503 にはタイマーにより泳動が終了した後も低電圧をかけ続ける「GELSAVER 機能」が付いています。泳動後のバンドの核酸を防ぐことができます。

メーカー略号 SHE APX APX品番 IB94500 430000 440000

品名 MaGELin Western Transfer System Mini Trans Blotter for up to 4 gels 10 x 10 cm

Trans Blotter for up to 2 gels 20 x 20cm

包装 1 unit 1 unit 1 unit希望販売価格 ￥84,000 ￥149,000 ￥190,000

寸法（WxHxD, cm) 15 ｘ 13.3 ｘ 16 13 x 15 x 15 23 x 25 x 10バッファー量 1200 ml 1300 ml 3000 ml

最大ゲルサイズ x 枚数 10X10 cm x 2 枚 10X10 cm x 4 枚 20X20 cm x 2 枚最大電圧 100 VDC － －最大電流 500 mA － －

メーカー略号 CBJ品番 IMR100

品名 コスモバイオセミドライブロッター

包装 1 unit希望販売価格 ￥50,000有効面積 (cm) 10 x 10

備考 陰極側材質：グラファイト　

メーカー略号 DCB品番 326790

品名 セミドライエレクトロブロッター DDB-2020

包装 1 set希望販売価格 ￥125000有効面積 (cm) 22 x 22

備考 外 寸 ： 2 6 . 6 ( W ) x 26.6(L) x 6.8(t) cm 　

メーカー略号 SHE品番 IB44000 IB45000品名 Semi-Dry Blotter 16 x 16 cm Semi-Dry Blotter 24 x 30 cm包装 1 unit 1 unit

希望販売価格 ￥113,000 ￥141,000有効面積 (cm) 16 x 16 24 x 30

備考 陰極側材質：グラファイト　

メーカー略号 APX品番 450000 460000品名 Semi Dry Blotter 10 x 10 cm Semi Dry Blotter 20 x 20 cm包装 1 unit 1 unit

希望販売価格 ￥142,000 ￥197,000有効面積 (cm) 10 x 10 20 x 20

備考 陰極側材質：プラチナコートチタニウム　

4

ブロッティング装置 ( タンク式 )

ブロッティング装置 ( セミドライ式 )

全世界に製品供給している約 30 年の歴史あるブランドより

10 x 10cm から 24 x 30cm まで、豊富なラインナップ

●　IBI SCIENTIFIC 社 / APELEX 社 　ブロッティング装置（タンク式）

●　コスモ・バイオ / IBI SCIENTIFIC 社 / APELEX 社　ブロッティング装置（セミドライ式）

5

Western blotting protocol

複数のゲルを転写する場合には…

1　ろ紙 2 枚を重ねて陽極液 20ml に浸します。同様にろ紙 2 枚と重ねて陰極液 20ml に浸します。　　転写膜 (PVDF) は、使用の際には必ずウェッティング操作を行ってください。2　ゲルプレートからガラス板を外し、スペーサーに沿ってゲルの両端に切り込みを入れます。　　ゲルを陰極液 20 ㎖を入れた容器中に入れ、10 分間振とうしながら、ゲルを平衡化します。3　ブロッター上に陽極液に浸したろ紙 2 枚をのせ、その上にウェッティング処理した転写膜を空気が入らないよう　　に乗せます。4　陰極液で平衡化したポリアクリルアミドゲルを転写膜上に乗せます。　　この時、ゲルと転写膜の間に気泡が入らないように注意してください。5　重ね合わせたポリアクリルアミドゲルの上に陰極液で浸したろ紙 2 枚を空気が入らないように乗せます。　　これで転写単位 * が完成しました。　　* 転写単位：陽極側ろ紙 2 枚・転写膜 1 枚・ポリアクリルアミドゲル 1 枚・陰極側ろ紙 2 枚を重ね合わせたもの

6　最後にブロッターの蓋を閉めます。7　陽極及び陰極のプラグを差し込み、通電を開始します。15V 定電圧で 30 分間、または 100mA 定電流で 45 分間　　通電します。　 （注 1） 15 V 定電圧の場合、初期電流値は 150mA 以上となります。ご使用になる安定電源の出力性能を予めご確認ください。

　　 （注 2） タンパク質の等電点、転写膜の種類、転写単位を重ねた場合などにより、上記条件に合わないことがあります。予め、転写条件を検討され

ることをお勧めします。

8　通電が終了したら電源を切ってプラグを抜き、ブロッターの蓋を開け、各転写単位から転写膜を取り出します。9　必要に応じて、CBB 染色またはアミドブラック 10B 染色を行い、タンパク質が転写されていることを確認してく　　ださい。酵素発色の他に、高感度な化学発光による検出もできます。

　陽極液を含んだろ紙 2 枚を重ねたものを 1 組として、陽極面上に並べます（最高 4 組まで並べることができます）。余分な陽極液はなるべく除き、気泡が入らないように注意してください。　その上に下図を参考にしてウェッティング処理した転写膜 1 枚、陰極液で平衡化したゲル 1 枚、陰極液に浸したろ紙 2 枚を重ねて転写単位を作製します。この時も気泡が入らないように注意してください。また、転写膜にゲルのウェルの位置をマーキングしておくと便利です。

　1 台のセミドライエレクトロブロッターで転写する転写単位がセミドライエレクトロブロッター上で並列に複数単位となる場合は下表を参考に安定電源をお選びください。

　同様に 100 mA 定電流の場合は以下の通りです。

1 枚のゲルの転写例 ( セミドライ式 )

ミニゲル 4 枚までの場合

陰極液に浸したろ紙2枚陰極液で平衡化したゲルウェッティング処理した転写膜陽極液に浸したろ紙 2枚

転写単位

陰極側（－）

陽極側（＋）

転写単位

転写単位数 ( 組 ) 1 2 3 4設定電圧値 (V) 15初期電流値 (mA) ～ 150 ～ 300 ～ 450 ～ 600

転写単位数 ( 組 ) 1 2 3 4設定電流値 (mA) 100 200 300 400初期電圧値 (V) ～ 10

6

貯蔵；2-10℃凍 結 厳 禁

包装：5枚希望販売価格：￥9,800

ゲルサイズ（ｍｍ）：　　85 (W) × 90 (L) × 0.9 (t)プレート外寸（ｍｍ）：　　100 (W) × 100 (L) × 3.1 (t)

タンパク質DNA用

ガラスプレート使用

グラジェントゲル

グラジェントゲル

均一ゲル

均一ゲル

ナローレンジゲル

品番 品名 ウェル数 ゲル濃度 分析範囲 *1 (SDS-PAGE)

分析範囲 *2 (DNA)

414855 マルチゲルR Ⅱミニ 　　2/15　　 （13W） 132 ～ 15% 30 ～ 500 KDa 200 ～ 2,000 bp

414862 　　　　　　　　　　　 2/15 （17W） 17414879 マルチゲルR Ⅱミニ 4/20 （13W） 13

4 ～ 20% 15 ～ 250 KDa 40 ～ 1,800 bp414886 4/20 （17W） 17441776 マルチゲルR Ⅱミニ 　 5/10 　　（13W） 13

5 ～ 10% 35 ～ 450 KDa －443114 5/10 　 （17W） 17417269 マルチゲルR Ⅱミニ 　 8/16 　　（13W） 13

8 ～ 16% 20 ～ 200 KDa 70 ～ 1,500 bp417276 8/16 　 （17W） 17414893 マルチゲルR Ⅱミニ 　 10/20 　 （13W） 13

10 ～ 20% 12 ～ 130 KDa 30 ～ 1,500 bp414909 10/20 　 （17W） 17415074 マルチゲルR Ⅱミニ 2D-10/20 1 ＊4 10 ～ 20% 12 ～ 130 KDa －432026 マルチゲルR Ⅱミニ 15/20 （13W） 13

15 ～ 20% 3 ～ 85 KDa ＊3 －443121 15/20 （17W） 17414916 マルチゲルR Ⅱミニ 15/25 （13W） 13

15 ～ 25% 3 ～ 85 KDa ＊3 20 ～ 1,000 bp414923 15/25 （17W） 17

品番 品名 ウェル数 ゲル濃度 分析範囲 *1 (SDS-PAGE)

分析範囲 *2

(DNA)443138 マルチゲルR Ⅱミニ 　　5　　 （13W） 13

5% 100 ～ 500 KDa －443145 　　　　　　　　　　　 5 （17W） 17414930 マルチゲルR Ⅱミニ 7.5 （13W） 13

7.5% 45 ～ 250 KDa 250 ～ 2,000 bp414947 7.5 （17W） 17414954 マルチゲルR Ⅱミニ 　 10 　 （13W） 13

10% 30 ～ 200 KDa 140 ～ 1,700 bp414961 10 　 （17W） 17414978 マルチゲルR Ⅱミニ 　 12.5 （13W） 13

12.5% 20 ～ 150 KDa 60 ～ 1,500 bp414985 12.5 （17W） 17443152 マルチゲルR Ⅱミニ 　 15 　 （13W） 13

15% 10 ～ 150 KDa －443169 15 　 （17W） 17

ナローレンジゲル

品番 品名 ウェル数 ゲル濃度 分析範囲 *1 (SDS-PAGE)

分析範囲 *2

(DNA)414992 マルチゲルR Ⅱミニ 　　6/9　　 （13W） 13

6 ～ 9% 45 ～ 250 KDa 250 ～ 2,000 bp415005 　　　　　　　　　　　 6/9 （17W） 17415012 マルチゲルR Ⅱミニ 9/11 （13W） 13

9 ～ 11% 30 ～ 200 KDa 140 ～ 1,700 bp415029 9/11 （17W） 17415036 マルチゲルR Ⅱミニ 　 11/14 　 （13W） 13

11 ～ 14% 20 ～ 150 KDa 60 ～ 1,500 bp415043 11/14 　 （17W） 17415050 マルチゲルR Ⅱミニ 　 14/16 （13W） 13

14 ～ 16% 15 ～ 100 KDa 40 ～ 1,200 bp415067 14/16 （17W） 17

プレキャストゲル マルチゲルR Ⅱミニ豊富な種類からお選びいただけます。ミッド・ラージサイズもあります！

●　使用目的

　分子量未知のタンパク質分子量の決定。急な濃度勾配で、広い分子量域にわたって高分離能で分離できます。

　目的の分子量範囲を広く確認できます。

　他社にない新しいタイプ、均一ゲルと同様の分子量範囲。但し、緩やかな濃度勾配を加えたタイプで、均一ゲルよりも高分離能でシャープなバンドが得られます。　｢グラジェントゲルでは、分析範囲が広すぎる。｣ という方にもお奨めです。

コスモ・バイオ株式会社　　　メーカー略号：DCB

コスモ・バイオ株式会社　　　メーカー略号：DCB

コスモ・バイオ株式会社　　　メーカー略号：DCB

*1 : 分析範囲の単位は、タンパク質の分子量（ダルトン）です。*2：分析範囲の単位は、塩基対数（ベースペア）です。*3：分子量 6.5 KDa 以下のペプチドについては、バンドの拡散や変形が起こることがありますので、結果の解釈にはご留意ください。*4：二次元電気泳動用ゲルのウェルサイズ（ｍｍ）は 74（W) × 14（L) です。

サンプルあります！

　● 希望販売価格 ･･･ 「希望販売価格」は参考であり、販売店様からの販売価格ではございません。 記載の希望販売価格は 2014 年 3月１日現在の希望販売価格です。 予告なしに改定される場合がありますので、ご注文の際にご確認下さい。消費税は含まれておりません。　● 使 用 範 囲 ･･･ 記載の商品は全て、「研究用試薬」です。 人や動物の医療用・臨床診断用・食品用等としては使用しないよう、十分ご注意ください。

(12002)

電気泳動マニュアル、配布中！