الجمهورية العربية السورية

جامعة دمشق

كلية الصيدلة

قسم العقاقير والنباتات الطبية

من المستخلص العطري للزيت للفطور المضاد التأثير دراسة

من الفصيلة Citrus× aurantiumالنارنج ثمار قشور

Rutaceaالسذابية

The Antifungal Effect of Essential Oil of

Citrus× aurantium peels

العقاقر جامعة دمشق لنل درجة الماجسجر ف -قسم العقاقرأطروحة قدمت إل

أسماء محمد سعد الحبشإعداد:

مشاركة إشراف

أ.د. محمد معروف د. رشا الخطب

الدراسالعام

1437-2016

مدة البحث:

24/3/2013: جارخ البدء

4/5/2015 :جارخ االنجهاء

تم العمل في:

جامعاة -الصادلة كلاة – العقااقر وكمااء العقااقر قسم - العلا الدراسات مخبر .1

.دمشق

. دمشق جامعة -الصدلة كلة – الدققة األحاء قسم -العلا الدراسات مخبر .2

.الدوائة الرقابة مدرة مخابر .3

الرسالة: مناقشةتاريخ

جامعة -الساعة الحادة عشرة صباحا عل مدرج جشرن ف كلة الصدلة 2/3/2016

دمشق

لجنة الحكم:أعضاء أمام

: عضوا مشرفا رشا الخطب.د م

: عضوا عصام الشماعأ.د

: عضوا عصام اغاأ. د

عل األطروحة.وقد جم إجراء الجصححات المطلوبة منها

Curriculum Vita (CV)السيرة الذاتية

المعلومات الشخصية:

االسم : أسماء محمد سعد الحبش

م 01/01/1811موالد: دمشق

:0844652131هاجف

:البرد االلكجرونasmaasweetlife@hotmail.com

الشهادات:

جامعااة -كلااة الصاادلة –بكااالوروف فاا الصاادلة والكماااء الصاادلة

2010 –دمشق

النشرات العلمية:

الجركااب الكماااائ لللااات العطااار لقشااور وماااار الناااارن وجااا ور المضااااد

للفطرات ف اللجاج، المجلة العربة للعلوم الصدالنة.

.بانجظار النشر 2015-03-15جم قبول النشرة بجارخ

تصريح

.أسماء محمد سعيد الحبشاالسم الكامل:

.01/01/1811دمشق -سورامكان وجارخ الوالدة:

من المستخلص العطري للزيت للفطور المضاد التأثير دراسة عنوان البحث:

من الفصيلة السذابية Citrus× aurantiumالنارنج ثمار قشور

Rutacea

أو آخر علم عمل من بالكامل اقجباسه جم األطروحة هذ من جلء أ جدو ال

عل شهادة أخري ف جامعة دمشق أو أة جامعة أخري أو أ للحصول أنجل

معهد جعلم داخل أو خارج القطر.

لم جم قبض أ مبلغ ماد أو مكاف ة عنة سواء بشكل مباشر أو غر مباشر

مقابل القام بعمل مف جوهر هذ األطروحة أو نجائجها.

أجعهد ب نن لم أقل إال الحققة ولم أخف شئا جحت طائلة المعاقبة والمحاسبة

القانونة وعله أوقع.

جوقع الباحث الجارخ

أسماء محمد سعد الحبش 2-3-2016

الشكر

.أجقدم بجلل الحمد والشكر هلل علوجل الذ وفقن إلجمام هذا البحث

أشكر األسجاذ الدكجور عبد الحكم نجوف عمد كلة الصدلة ونائبه األسجاذ

الدكجور مصطف العمور واألسجاذة الدكجورة جمانة الصالح.

الذ لشكر الجلل لألسجاذ الدكجور عصام الشماع رئف قسم العقاقرا

كان ل عونا ف بحو، وله من كل الشكر لجحكمه هذ البحث.

رشا الدكجورة األخت والصدقةنان وجلل العرفان إل أجقدم ببالغ االمج

الخطب الج وجهجن وأخذت بد وأشرفت عل كل مراحل البحث، فلها

من كامل االحجرام والجقدر.

روف عل مشاركجه ف هذا الشكر الجلل لألسجاذ الدكجور محمد مع

البحث، والذ لم بخل عل بالنصح واإلرشاد والجوجه والمساعدة، كما

أشكر عل الوقت والجهد الذ بذله لكون البحث ب فضل صورة.

آغا الذ شرفن ف حسن عصاممحمد الشكر الجلل لألسجاذ الدكجور

جقم بحو.

ف للعمل جسهالت من ل هقدم لما عبود حبب للدكجور الجلل الشكر

.الدوائة الرقابة مدرة مخابر

مساعدة من ل قدمه لما القاض عماد الدكجور لألسجاذ الجلل الشكر.

ف بذلجه الذ الجهد عل الراشد نور الغالة لصدقج الجلل الشكر

.لغوا البحث جدقق

الصدقة بالذكر وأخص العقاقر قسم ف واللمالء للعاملن الشكر كل

.اسن ونور حسون نسرن واللمالء الحسن، هناء الغالة

بالذكر وأخص الدققة األحاء قسم ف واللمالء للعاملن الشكر كل

.رقة طارق واللمل الوهاب عبد علاء واللملة الحبش مروة اللملة

ودعم مساعدة من ل قدمجه لما شكور روال الغالة للصدقة الشكر.

الموعد هان السد بالذكر وأخص العون د ل مد من لكل الشكر كل

.سرحان ناصف والسد

هداءاإل

......إل بلد الجرح

سورا

... إل الذن حملوا أقدف رسالة ف الحاة

إل الذن مهدوا لنا طرق العلم والمعرفة ...

جمع أساجذجنا األفاضل.......

...إل الذ علمن أن أعمل بجد ودأب ألجمكن من جحقق أمناج

إل الذ علمن أن أسع ألعش بهمة األبطال وبراءة األطفال وعقول

العظماء..........

أب الحبب

..إل الج اقجلعت من قلب جذور ال ف وغرست بدال عنها براعم األمل

إل من علمجن الصمود مهما جبدلت الظروف..

إل من كانث دعىاجها ل ف السر والعلن خر لاد.

أم الحببة

..إل شرك الحاة..وجوأم الروح

إل من كان سندا ل ف كل خطوة من خطوات حاج..

إل من خذ بد دائما بجفان وإخالص ودفعن ألكون ف القمة..

إل من علمن الطموح وأهدان النجاح..

.لوج الغال.

نبراف

..إل رفاق الدرب

إل من رافقون ف حاج منذ أن حملنا حقائب صغرة وسرنا الدرب

خطوة بخطوة..

إل من كانوا ل خر عون وخر سند...

إخوج وأخواج

هبة، عمر، محمد، أنف

....إل من غمرون بالعطف والحنان

إل من كانوا ل األب واألم واألخوة..

إل عائلج الوانة..

عائلة لوج

الحاة الحلوة والحلنة سرت. إل من معها سعدت، وبرفقجها ف دروب

إل من جلسنا معا عل مقاعد الدراسة..وشاءت الظروف أن نفجرق..

صدقج

والء

1

List of Contents قائمة المحتوات

9 ............................................................................................. عامة مقدمة 1

Primary and secondary metabolites ................... 11والثانوة األولة المستقلبات 2

Primary metabolites ........................................................................... 11 األولة المستقلبات 2.1

Secondary metabolites ...................................................................... 11 الثانوة المستقلبات 2.2

Essential oils ................................................................ 12 العطرة الزوت 3

11 .................................................................................................. العطرة الزوت عن لمحة 3.1

11 .........................................................................................العطرة للزوت الكماب التركب 3.2

Terpenes ............................................................................................ 11 التربنات 3.2.1

Aromatic compounds ................................................................ 11 العطرة المركبات 3.2.2

Citrus aurantium........................................................ 16 النارنج البحث نبات 4

13 ............................................................................................................... تارخة مقدمة 4.1

13 ............................................................................................................... النبات تصنؾ 4.2

15 ............................................................................................ الشابعة النارنج نبات استخدامات 4.3

15 ................................................................................................................ النارنج شجرة 4.4

15 .............................................................................................. المورفولوج الوصؾ 4.4.1

16 ...................................................................................................... المستعمل القسم 4.4.2

12 ........................................................................................................... الكماب التركب 4.5

Essential oil .................................................................................. 12 العطري الزت 4.5.1

Phenolic acids ........................................................................... 11 الفنولة الحموض 4.5.2

Flavonoid compounds ........................................................ 11 الفالفونوبدة المركبات 4.5.3

Alkaloids ............................................................................................. 11 القلودات 4.5.4

11 ............................................................................................................ الحدثة الدراسات 4.6

Antimicrobial effect ........................................................... 11 للمكروبات المضاد التؤثر 4.6.1

Antifungal effect ................................................................. 12 الفطرات المضاد التؤثر 4.6.2

Antioxidant effect.................................................................. 13 لألكسدة المضاد التؤثر 4.6.3

Cytotoxic effect ........................................................... 13 السرطانة للخالا السم التؤثر 4.6.4

Anxiolytic effect ......................................................................... 13 للقلق الحال التؤثر 4.6.5

Anti-inflammatory effect ....................................................... 13 لاللتهاب المضاد التؤثر 4.6.6

gout ................................................................................. 14 النقرس مرض على التؤثر 4.6.7

1

Antispasmodic effect ............................................................. 14 للتشنج المضاد التؤثر 4.6.8

Gastroprotection effect .......................................... 14 القرحات من المعدة حماة ف التؤثر 4.6.9

Hypocholesterolemic and Hypoglycemic الدم لسكر والخافض للكولسترول الخافض التؤثر 4.6.10effect 14

Anticonvulsant effect ........................................................... 14 لالختالج المضاد التؤثر 4.6.11

Fungi .................................................................................... 28 الفطرات 5

The nature of fungi .............................................................................. 15 الفطرات طبعة 5.1

Fungi as human pathogen ...................................... 15 لإلنسان ممرضة عوامل بوصفها الفطرات 5.2

16 ....................................................................................... الحققة الممرضة الفطرات 5.2.1

16 ................................................................................................ االنتهازة الفطرات 5.2.2

Candida albicans ........................................................................... 11 البض المبضات نوع 5.3

11 ................................................................................................. المستعمرات مظهر 5.3.1

11 .................................................................................................... السررة األهمة 5.3.2

11 ..............................................المبضات جنس معالجة ف المستخدمة للفطرات المضادة العوامل 5.3.3

12 .......................................................................................... للفطرات مضادة كعوامل النباتات 5.4

13 ......................................... الزجاج ف العطرة للزوت للفطرات المضادة الفاعلة لتقدر المتبعة الطرابق 5.5

Agar diffusion test ................................................................ 13 باآلؼار اختباراالنتشار 5.5.1

Broth/Agar dilution test .............................................. 13 باآلؼار أو بالمرق التمدد اختبار 5.5.2

Broth microdilution method ........................................ 13 بالمرق المكرون التمدد اختبار 5.5.3

Materials and Methods ................................................. 40 والطرابق المواد 6

12 .................................................................................... واستخالصها النارنج نبات عنات جمع 6.1

12 ........................................................................................................ العنات جمع 6.1.1

11 ................................................................................. وحفظه العطري الزت استخالص 6.1.2

11 ...................................................................................... الطار العطري الزت مكونات تحلل 6.2

12 .......................................................................................................... المناخة المعلومات 6.3

النارنج ثمار قشور من المستخلصة العطرة الزوت لعنات البض المبضات فطرات لنمو المثبط التؤثر اسةدر 6.4

12 .................................................................... للفلوكونازول و( -) والمسر)+( الممن اللمونن ولمعاري

13 .................................................................................................... الفطر عنة عزل 6.4.1

الزت لتمدد المناسب المحل واختار البض المبضات فطرات نمو على لوحدها المحالت تؤثر دراسة 6.4.2 14 ................................................................................................... المعاري واللمونن العطري

22 .............................................. للفلوكونازول البض المبضات فطرات لنمو المثبط التؤثر اسةدر 6.4.3

مزج باستخدام بالماء المنحلة ؼر العطرة الزوت لعنات البض المبضات فطرات لنمو المثبط التؤثر دراسة 6.4.4 21 ................................................................................................... 80 والتون المقطر الماء من

باستخدام( -) والمسر)+( الممن اللمونن لمعاري البض المبضات فطرات لنمو المثبط التؤثر دراسة 6.4.5 22 ............................................................................................ 80 والتون المقطر الماء من مزج

1

23 ......................................................................................................... :اإلحصابة الدراسة 6.5

Results .................................................................................. 57 النتابج 7

24 .................................................................................... واستخالصها النارنج نبات عنات جمع 7.1

25 ............................................................................................. :العطري الزت مكونات تحلل 7.2

31 ......................................................................................................... :المناخة المعلومات 7.3

ولمعاري النارنج ثمار قشور من المستخلص العطري للزت البض المبضات فطرات لنمو المثبط التؤثر دراسة 7.4

31 ...............................................................................:للفلوكونازول و( -) والمسر)+( الممن اللمونن

العطري الزت لتمدد المناسب المحل واختار البض المبضات نمو على لوحدها المحالت تؤثر دراسة 7.4.1 31 ............................................................................................................. المعاري واللمونن

31 .............................................. للفلوكونازول البض المبضات فطرات لنمو المثبط التؤثر دراسة 7.4.2

مزج باستخدام بالماء المنحلة ؼر العطرة الزوت لعنات البض المبضات فطرات لنمو المثبط التؤثر دراسة 7.4.3 31 ................................................................................................... 80 والتون المقطر الماء من

باستخدام( -) والمسر)+( الممن اللمونن لمعاري البض المبضات فطرات لنمو المثبط التؤثر دراسة 7.4.4 34 ............................................................................................ 80 والتون المقطر الماء من مزج

Discussion: ............................................................................ 71 المناقشة 8

41 ................................................................. :المناخ لتؽرات تبعا العطري الزت تركب تؽر دراسة 8.1

41 ................................................................................... :النارنج نبات عنات استخالص 8.1.1

41 .................................................................................... :العطري الزت مكونات تحلل 8.1.2

ولمعاري النارنج نبات قشور من المستخلص العطري للزت البض المبضات فطرات لنمو المثبط التؤثر دراسة 8.2

41 ...............................................................................:للفلوكونازول و( -) والمسر)+( الممن اللمونن

41 ..............................................:المعاري واللمونن العطري الزت لتمدد المناسب المحل اختار 8.2.1

41 ................................................................ للفلوكونازول الفطرات لنمو المثبط التؤثر دراسة 8.2.2

مزج باستخدام بالماء المنحلة ؼر العطرة الزوت لعنات البض المبضات فطرات لنمو المثبط التؤثر دراسة 8.2.3 42 ................................................................................................... 80 والتون المقطر الماء من

باستخدام( -) والمسر)+( الممن اللمونن لمعاري البض المبضات فطرات لنمو المثبط التؤثر دراسة 8.2.4 43 ............................................................................................ 80 والتون المقطر الماء من مزج

Conclusions ...................................................................... 78 االستنتاجات 9

Suggestions and Recommendations والتوصات المقترحات........................ 10 80

:العربة باللؽة البحث ملخص ................................................................................................ 11 81

االنكلزة باللؽة البحث ملخص ............................................................................................. 12 82

:References المراجع .................................................................................................... 13 83

1

Appendix لحقالم ........................................................................................................... 14 92

2

List of Figures قائمة األشكال

35 ................................................................................................ نالسوثر انعبيخ انظغخ )1) مانشك

37 ................................................................ .انطبرح انسىد ف انىجىدح انركجبد ثعغ طغ( 2) انشكم

;3 ................................................................................................................. انبرج جبد( 3) انشكم

42 ......................................................................... .19 انبػجخ انحؼبد نثبر انذاخهخ انجخ( 4) انشكم

45 ....................... .انبرج جبد ف انىجىدح انفالفىىئذخ وانركجبد انفىنخ انحىع ثعغ طغ( 5) انشكم

46 ........................................................................... .انبرج ثبر ف انىجىدح انمهىذاد طغ( 8) انشكم

53 ................................................ آغبر دكسزروز سبثىرو وسؾ عهى انجغ انجؼبد يسزعراد( 7) انشكم

56 ........................................................................... .49 عههب وآنخ نهفطربد انؼبدح انعىايم( 8) انشكم

63 .................................................. (.انجبحثخ انزمبؽ) ديشك يذخ ف جعه يكب ف انبرج جبد( 9) انشكم

64 ................................................ (.انجبحثخ انزمبؽ) Clevenger apparatus االسزخالص جهبز (32) انشكم

65 ........................................... (.انجبحثخ انزمبؽ) انطبر انعطري انسذ اسزخالص نراحم يهخض( 11) انشكم

67 ......................... (.انجبحثخ انزمبؽ) GC-MS انكزهخ يطبف ويزحري انغبزخ انكرويبرىغرافب جهبز( 12) انشكم

69 ......................................... (.انجبحثخ انزمبؽ) Candida albicans انجغ انجؼبد فطر عسنخ( 13) انشكم

(.انجبحثخ انزمبؽ) انخزهفخ انعطرخ وانسىد انسرع انىسؾ ي يسج عهى انحبوخ انجزري عهت رحؼر( 14) انشكم

....................................................................................................................................... 76

77 ......................................................... (انجبحثخ انزمبؽ) انجزري عهت إنى انفطري انعهك إػبفخ( 15) انشكم

:7 ........... .انؼج فزرح ي أشهر ثالثخ خالل انسزخهظخ انثالس انعبد ي نكم انعطري انسذ يردود( 16) انشكم

;7 .. .انؼج فزرح ي انثب انشهر ف انسزخهظخ انعطري انسذ نعخ GC-MS رحهم يخطؾ ي جسء( 17) انشكم

86 ........... (.انجبحثخ انزمبؽ) انعم ي سبعخ 72 ثعذ نهفهىكىبزول انفطربد نى انثجؾ األدى انزركس( 18) انشكم

انزجرثخ - األول كبى شهر ف انسزخهض انعطري نهسذ انفطربد نى انثجؾ األدى انزركس لخ( 19) انشكم

87 ......................................................................................................... (.انجبحثخ انزمبؽ) -األونى

88 ................. .انعبري االحراف يع انثالس انعطري انسذ عبد ي نكم IC50 و MIC لخ يزىسؾ( 20) انشكم

:8 ................... (انجبحثخ انزمبؽ) - انثبنثخ انزجرثخ -)+( نهى انفطربد نى انثجؾ األدى انزركس( 21) انشكم

;8 .................... (انجبحثخ انزمبؽ) - انثبنثخ انزجرثخ -( -) نهى انفطربد نى انثجؾ األدى انزركس( 22) انشكم

;8 ..................... انعبري االحراف يع وانسر ان انهى ي نكم IC50 و MIC لخ يزىسؾ( 23) انشكم

IC50 .................. 92 و MIC رراكس عهى ثبالعزبد انعبد نجع انفطربد نى انثجؾ انزأثر يمبرخ( 24) انشكم

4; .................................... .األول كبى شهر ف انسزخهظخ انعطري انسذ نعخ GC-MS يخطؾ( 25) انشكم

4; ............................................ .شجبؽ شهر ف انسزخهظخ انعطري انسذ نعخ GC-MS يخطؾ( 26) انشكم

انسزعراد ى رثجؾ وست األول كبى شهر خالل انسزخهظخ انعطري انسذ عخ رراكس ث انعاللخ: 27 انشكم

9; ...................................................................................................... .-األونى انزجرثخ - انفطرخ

ى رثجؾ وست األول كبى شهر خالل انسزخهظخ انعطري انسذ عخ رراكس ث انعاللخ( 28) انشكم

9; ...................................................................................... .-انثبخ انزجرثخ- انفطرخ انسزعراد

ى رثجؾ وست انثب كبى شهر خالل انسزخهظخ انعطري انسذ عخ رراكس ث انعاللخ( 29) انشكم

;; ...................................................................................... .-األونى انزجرثخ -انفطرخ انسزعراد

ى رثجؾ وست انثب كبى شهر خالل انسزخهظخ انعطري انسذ عخ رراكس ث انعاللخ( 30) انشكم

;; ...................................................................................... .-انثبخ انزجرثخ- انفطرخ انسزعراد

انسزعراد ى رثجؾ وست شجبؽ شهر خالل انسزخهظخ انعطري انسذ عخ رراكس ث انعاللخ( 31) انشكم

323 ..................................................................................................... .-األونى انزجرثخ- انفطرخ

3

انسزعراد ى رثجؾ وست شجبؽ شهر خالل انسزخهظخ انعطري انسذ عخ رراكس ث انعاللخ (54) انشكم

323 ...................................................................................................... -انثبخ انزجرثخ- انفطرخ

325 .............. .-األونى انزجرثخ- انفطرخ انسزعراد ى رثجؾ وست – انهى رراكس ث انعاللخ( 33) انشكم

325 .............. .-انثبخ انزجرثخ- انفطرخ انسزعراد ى رثجؾ وست – انهى رراكس ث انعاللخ( 34) انشكم

325 .............. .-انثبنثخ انزجرثخ- انفطرخ انسزعراد ى رثجؾ وست – انهى رراكس ث انعاللخ( 35) انشكم

327 ............. .-األونى انزجرثخ- انفطرخ انسزعراد ى رثجؾ ست و+ انهى رراكس ث انعاللخ( 36) انشكم

327 ............. .-انثبخ انزجرثخ- انفطرخ انسزعراد ى رثجؾ ست و+ انهى رراكس ث انعاللخ( 37) انشكم

327 ............. .-انثبنثخ انزجرثخ- انفطرخ انسزعراد ى رثجؾ ست و+ انهى رراكس ث انعاللخ( 38) انشكم

4

List of tablesقائمة الجداول

Citrus aurantium انبرج جبد رظف( : 1) انجذول89 ................................................................... 39

43 ................. .15 وانهريخ انفزخ واألوراق انبرج وأزهبر لشىر ي نكم انعطري انسذ ورركت سجخ (2) انجذول

44 .................................................................... انبرج جبد ف االجبنخ انفالفىىئذاد سجخ( 3) انجذول

انؼبفخ انحجىو. انجغ انجؼبد ى عهى وانزبىل DMSO رأثر نذراسخSDA أوسبؽ رحؼر( 4) انجذول

;DMSO. ...................................................................................... 6 و نهزبىل انهبئخ وانزراكس

انفهىكىبزول ورراكس انؼبفخ انحجىو نهفهىكىبزول، انذدح انحبنم ي رراكس سهسهخ رحؼر( 5) انجذول

73 .............................................................................................................................. .انبرجخ

،80 وانزى انمطر انبء ثبسزخذاو انعطرخ انسىد نعبد انذدح انحبنم ي عبرخ سهسهخ رحؼر( 6) انجذول

75 ........................................................................ .انبرجخ انعطرخ انسىد ورراكس انؼبفخ انحجىو

.انثالس انعبد ي نكم انمشىر وز إنى انعطري انسذ وحجى انثبر وز إنى انمشىر وز ي كم ست( 7) انجذول

....................................................................................................................................... 79

82 ............................. .انثب كبى شهر ف انسزخهظخ انعطري انسذ نعخ GC-MS رحهم زبئج( 8) انجذول

فزرح ي انثالثخ األشهر خالل انسزخهظخ نهعبد انبرج نمشىر انعطري انسذ نكىبد انئىخ انست( 9) انجذول

83 .............................................................................................................................. .انؼج

84 ......................................... .فهب انعبد جع رى انز انثالثخ األشهر خالل انبخخ انعهىيبد( 10) انجذول

88 .................... وانفهىكىبزول انعطرخ انسىد عبد ي نكم انعبري واالحراف MIC و IC50 لى:11 انجذول

:8 .............. وانفهىكىبزول وانسر ان انهى ي نكم انعبري واالحراف MIC و IC50 لى( 12) انجذول

5; ............................ .األول كبى شهر ف انسزخهظخ انعطري انسذ نعخ GC-MS رحهم زبئج( 13) انجذول

6; .................................... .شجبؽ شهر ف انسزخهظخ انعطري انسذ نعخ GC-MS رحهم زبئج( 14) انجذول

انجزري عهت ي كم ف انفطرخ انسزعراد نزثجؾ انئىخ وانسجخ انفطرخ انسزعراد عذد يزىسؾ: 15 انجذول

7; .................................................... انزذذ نحبنم يخزهفخ رراكس عهى انحبوخ انجزري وعهت انشبهذح

انز انعطري انسذ عخ ي يخزهفخ رراكس اسزخذاو عذ انفطرخ انسزعراد ى نزثجؾ انئىخ انست: 16 انجذول

8; ............................. .انسزمهز انزجرثز زبئج يزىسؾ انمى ثثم. األول كبى شهر ف اسزخالطهب رى

انعطري انسذ عخ ي يخزهفخ رراكس اسزخذاو عذ انفطرخ انسزعراد ى نزثجؾ انئىخ انست( 17) انجذول

:; ...................... .انسزمهز انزجرثز زبئج يزىسؾ انمى ثثم. انثب كبى شهر ف اسزخالطهب رى انز

انعطري انسذ عخ ي يخزهفخ رراكس اسزخذاو عذ انفطرخ انسزعراد ى نزثجؾ انئىخ انست( 18) انجذول

322 ...............................انسزمهز انزجرثز زبئج يزىسؾ انمى ثثم. شجبؽ شهر ف اسزخالطهب رى انز

ثثم ،( –) انهى ي يخزهفخ رراكس اسزخذاو عذ انفطرخ انسزعراد ى نزثجؾ انئىخ انست( 19) انجذول

324 ............................................................................. .انسزمهخ انثالس انزجبرة زبئج يزىسؾ انمى

ثثم ،)+( انهى ي يخزهفخ رراكس اسزخذاو عذ انفطرخ انسزعراد ى نزثجؾ انئىخ انست( 20) انجذول

326 ............................................................................. .انسزمهخ انثالس انزجبرة زبئج يزىسؾ انمى

5

List of abbreviations قائمة االختصارات

االسم باللؽة العربة االسم باللؽة االنكلزة االختصار

AIDS Acquired Immune Deficiency Syndrome

متالزمة عوز المناعة المكتسب

DMSO Dimethyl Sulfoxid ثناب متل السلفوكسد

GC-MS Gas Chromatography–Mass Spectrometry

المربوطالكروماتوؼرافا الؽازة مطاؾ الكتلةب

IC50 The half Inhibitory Concentration

نصؾلالتركز المثبط ل

MIC Minimum Inhibition Concentration

التركز األدنى المثبط

NSAIDs Non-Steroidal Anti-Inflammatory Drugs

مضادات االلتهاب ؼر الستروبدة

SDA Sabouraud Dextrose Agar سابورو دكستروز آؼار

6

مقدمة عامة 1

بشكل كبر ف opportunists fungiنتهازة بة بالفطرات االب س الم نتانات الفطرةتزادت اإل

immunocompromisedوخاصة عند المرضى موهن أو مثبط المناعة ،العقود الماضة

patients. من اآلثار العدد إال أنها تمتلكالمضادات الفطرة وعلى الرؼم من توافر مجموعة من

، والسمة الكبدة gastrointestinal disturbancesالجانبة مثل االضطرابات المعدة المعوة

hepatotoxicity، سمةو أكبر ةلعاف ذات وهذا ما دعو إلى البحث عن أدوة مضادة للفطرات

.1أقل

مصدرا لعدد كبر من األدوة المضادة للفطرات، مكن أن ت شكل المواد المستخلصة من النباتات

نت العدد من دورا كبرا ف هذا المجال حث ب Essential oils وتلعب الزوت العطرة

تواجد نبات النارنج .3 2الدراسات امتالكها خصابص مضادة للطفلات والفروسات والفطرات

بوفرة ف سورا، كما أثبتت العدد من الدراسات امتالك الزت العطري المستخلص من قشوره تؤثرا

مما دفعنا إلى اختار النبات السابق ف الدراسة. ،Antimicrobial effect 1 4 5 لمكروباتم ضادا ل

Candidaفطر المبضات البض لنمو ةالمثبط فاعلةالتحري هو الهدؾ من هذه الدراسة إن

albicans النارنج ثمارالمستخلص من قشور لزت العطري )أحد أهم الفطرات االنتهازة( ل

Citrus aurantium بطرقة التمدد باآلؼار حث تم التحري، الذي نمو ف سورا Agar

dilution test. لموننتؤثر الدراسة تتم كما Limonene (الذي دخل ف المركب األساس

تؽر مردود وتركب دراسة قمنا بكذلك و .فطر المبضات البضالمثبط لنمو (العطري تركب الزت

.تبعا لتؽرات المناخخالل ثالثة أشهر من فترة النضج وذلك لقشور ثمار النارنج الزت العطري

تتؤلؾ الدراسة من قسمن:

لنارنج والدراسات الحدثة نبات ابها، والدراسة النظرة: تتضمن لمحة عن الزوت العطرة وترك -1

وفطر المبضات البض المستخدم ف الدراسة. ،، ولمحة عامة عن الفطراتالمتعلقة به

ستخدمة ف البحث، والنتابج والمناقشة، وأخرا تتضمن المواد والطرابق المالدراسة العملة: -2

االستنتاجات والمقترحات والتوصات.

12

الدراسة النظرة

Theoretical Study

11

Primary and secondaryالمستقلبات األولة والثانوة 2metabolites

م لها الطاقة الالزمة للقام نها من الحاة والنمو والتكاثر، كما تقد ت نتج جمع النباتات مواد أساسة ت مك

أخرى تدعى بالعملات الحوة تدعى هذه المواد المستقلبات األولة، بنما ت نتج بعض النباتات مواد

.7 6 المستقلبات الثانوة

Primary metabolitesالمستقلبات األولة 2.1

.هوتكاثر هونمو النبات إنتاجها من قبل جمع النباتات وه أساسة لحاةمواد تم

تتضمن هذه المستقلبات:

.Carbohydratesالسكرات -

.Proteinsالبروتنات -

.Fatsالدسم -

.Nucleic Acids 6 7الحموض النووة -

Secondary metabolitesالمستقلبات الثانوة 2.2

نتج بالضرورة رة لنمو النبات وتكاثره، وال ت مواد تم إنتاجها من قبل بعض النباتات وه لست ضرو

ف جمع الظروؾ.

وعلى الرؼم من أن معظم هذه المستقلبات التزال مجهولة الوظفة، إال أن بعضها لعب دورا أساسا

الحشرات، و، اترضد الفطث كون لها وظفة دفاعة للنبات ف تكؾ النبات مع ببته، ح

نة جاذبة لعوامل التلقح )الحشرات(.الحوانات العاشبة، و أو قد تكون عطور أو مواد ملو

تتضمن هذه المستقلبات:

Alkaloids.القلودات -

.Phenolic compoundsالمركبات الفنولة -

.Terpenesالتربنات -

.7 6أؼلب المواد الفعالة المستخلصة من النباتات ضمن المستقلبات الثانوة تندرج الزوت العطرة و

11

Essential oilsة الزوت العطر 3

لمحة عن الزوت العطرة 3.1

فت ر ع كما ، 2الفروسات و اترالفطثراتها المضادة للجراثم وفت الزوت العطرة منذ القدم بتؤر ع

.8بتؤثراتها المضادة للمالرا والمضادة للسرطان

ز برابحتها العطرة القوة، تنتجها النباتات العطرة وه مركبات طبعة ذات تركب معقد تتم

، معظمها سابلة ف درجة حرارة الؽرفة وبعضها Secondary metabolites 9كمستقلبات ثانوة

.2 صلبة أو راتنجة

األزهار، ومن قبل جمع أجزاء النبات: )البراعم، الزوت العطرة من الممكن أن تم اصطناع

وتم تخزنها ف ،الخشب أو اللحاء(والجذور، والثمار، والبذور، واألؼصان، والسوق، واألوراق، و

الخالا و، Canals القنواتو، Cavitiesاألجواؾ و، Secretory cellsالخالا اإلفرازة

.Glandular trichomes 2 9 الشعرات الؽدةو، Epidermic cellsالبشروة

ف حماة النباتات )بوصفها مضادات جرثومة وفروسة وفطرة مهما تلعب الزوت العطرة دورا

الحوانات العاشبة تحم النبات من الحوانات العاشبة عن طرق إنقاص شهة كما ،ومبدات حشرة(

كما أنها قد تجذب بعض الحشرات لبعثرة ؼبار الطلع والبذور بنما تمنع الحشرات ؼر .لهذه النباتات

.9 المرؼوب بها من االقتراب

زها عن الزوت الثابتة، وهذا ما م ،تشترك الزوت العطرة بكونها مواد طارة بدرجة حرارة الجو

ب )فعالة ضوبا (، منحلة ف معظم المحالت لها قرنة انكسار ومعظمها حرؾ الضوء المستقط

زب وزنها الج . كما أناء وهذا ما سبب رابحتها العطرةالعضوة والدسمة، تنجرؾ ببخار الم

. 2منخفض

ا أبحاث مكثفة حول العالم لدراسة فاعلة الزوت العطرة والتربنات المكونة لها، وذلك تجري حال

مما عزز فابدتها ف كل من المجال الطب ،حوي المرتفعنظرا لسمتها المنخفضة نسبا وتوافرها ال

.8 والؽذاب )مكن استخدامها كمواد حافظة لألؼذة(

ب الكمائ للزوت العطرةالترك 3.2

60-20إن الزوت العطرة مركبات طبعة معقدة، حث من الممكن أن دخل ف تركبها حوال

وزن جزب منخفض بتراكز مختلفة تماما . وه تتمز بوجود مركبن أو ثالثة مركبات يمركب ذ

11

مكونات األخرى الموجودة بكمات %( بالمقارنة مع ال70-20ربسة تتواجد بتراكز عالة نسبا )

تحدد الخصابص البولوجة للزوت العطرة. ه الت وبشكل عام فإن هذه المركبات الربسة قللة.

تتضمن المركبات الت تدخل ف تركب الزوت العطرة مجموعتن مختلفتن من حث المنشؤ

بنما تضم المجموعة األخرى المركبات ، اتالمجموعة الربسة ه التربن .)االصطناع الحوي(

.9 العطرة

Terpenesالتربنات 3.2.1

لذلك تدعى أضا Isopreneمجموعة االزوبرن ه ة األساسة المكونة للتربناتالوحدإن

ذرات 5، ومجموعة االزوبرن ه أساس كربون مإلؾ من Isoprenoid 8االزوبرنوبدات

.)1(الشكل .((C5كربون

CH2CH3

CH2H

الصؽة العامة لالزوبرن )1ل )الشك

تختلؾ المركبات التربنة من حث عدد ذرات الكربون ووجود متبادالت. إال أن الزوت العطرة

فقط على التربنات األكثر تطارا والت كون وزنها الجزب منخفض وتشمل: تحوي

. % من الزوت العطرة90تشكل : Monoterpenes (C10)أحادات التربن -

مكن أن تكون سلسلة مثل ترانس بتا أوسمنتملك هذه المركبات صػ متنوعة،

trans-β-ocimene ،حلقة مثل اللمونن أوlimonene البتابنن وβ-pinene . وقد

اللنالل ( وخالتؼول تربن) Linaloolتحوي متبادالت مختلفة مثل اللنالول

linallyl acetate )(2)الشكل .)استر تربن.

نصؾ التربن : تملك أحادات و Sesquiterpenes (C15)أحادات ونصؾ التربن -

Farnesol.مثل الفارنزول الموجودة ف الزوت العطرة صػ ووظابؾ مشابهة ألحادات التربن

.(2)الشكل

قد تحتوي الزوت الطارة مركبات تربنة أخرى )لكن بنسب قللة( تشمل:

Hemiterpenes (C5)نصؾ التربنات -

Diterpenes (C20)ثنابات التربن -

Triterpenes (C30)ثالثات التربن -

11

. Tetraterpenes (C40)9التربنات الرباعة -

Aromatic compoundsالمركبات العطرة 3.2.2

: مثل ، وتتواجد بشكل أقل من التربنات.phenylpropaneتشتق من الفنل بروبان

(.2)الشكل .Cinnamaldehyde 9ألدهد القرفة و، Anetholeألنتول ا

12

أحادات التربن

CH3

CH3CH3

CH2

CH2

CH3

CH3CH3

CH2

CH3

CH3 بتا بنن ترانس بتا أوسمن لمونن ال

CH3

CH3

CH3

CH3

CH3

O

O

CH2

CH3

CH3CH3

OH

لنالولالخالت اللنالل

أحادات ونصؾ التربن

CH3

CH3CH3

OH

CH3 فارنزول

المركبات العطرة

H

O

CH3

OCH3

األنتول ألدهد القرفة

الموجودة ف الزوت الطارة. المركبات صػ بعض( 2) الشكل

13

Citrus aurantiumنبات البحث النارنج 4

مقدمة تارخة 4.1

، ولقد انتشرت أشجار النارنج بداة ف الهند وبالد 10إن منشؤ الحمضات بشكل عام جنوب شرق آسا

فارس، ثم تم إحضارها من شمال الهند إلى شرق إفرقا وبالد العرب وسورا، وانتقلت إلى أوروبا

نارنج بشكل ازدهرت زراعة الكما .11خالل القرن الثان عشر إما عن طرق العرب أو الصلبن

، حث استخدم األندلسون «اشبلإبرتقال »تى أطلق عله اسم سبانة حاإل اشبلإكبر ف مدنة

.أزهار هذه الشجرة ف صناعة العطور

الجامع لمفردات األدوة "وصؾ بعض العلماء نبات النارنج حث قال عنه ابن البطار ف كتابه

ووردها أبض طب الرابحة، والنارنج ،شدد الخضرة ،لن ،: شجرة ورقها أملسنارنج: )"واألؼذة

نفع من التهاب المعدة، وقلع الطبوع واآلثار السود من الثاب البض وزلها، وإذا نقعت فه الحجارة

.حللها(

وهو شجر ،حمر اللون: )نارنج : فارس معناه أ"تذكرة أول األلباب"كما قال عنه األنطاك ف كتابه

ورقه بالنسبة إلى اللمون وؼره فه مالسة طب الرابحة، زهره حصل ف الربع ومكن بقاء ثمرته

والؽثان ن المؽص والقءوأجوده المستدر األحمر المحبب القشر الخفؾ، قشره سك ،مدة العام

السوس، وأن رابحته تدفع الطاعون ومن خواصه أنه حفظ الثاب من .خموالنزالت الباردة والت

.88وفساد الهواء، وأنه سهل الوالدة(

تصنؾ النبات 4.2

بالخصابص النباتة عن شجرة البرتقال Bitter Orangeال تختلؾ شجرة النارنج

Sweet Orange النوع وهو: هما من نفس نفس الجنس ولهما كال نتم حثCitrus

aurantium L. من الفصلة السذابةRutaceaeوختلفان تصنفا على مستوى الصنؾ فقط ، ،

النارنج الحقق، بنما سمى .Citrus aurantium var. sinensisLحث سمى البرتقال الحلو

Citrus aurantium L. var. amara 11. (1جدول )ال.

( منها:Citrus aurantiumهناك العد من المرادفات للنارنج )

اإلشبلبرتقال ال، Green Orange، البرتقال األخضر Bitter orangeالبرتقال المر -

Seville Orangeالبرتقال الحامض ، Sour Orange 10 12.

14

Citrus aurantium 89: تصنؾ نبات النارنج ( 1)الجدول

Plantae النباتة المملكة

Tracheobionta النباتات الوعابة تحت المملكة

Spermatophyta النباتات البذرة ةفوق الشعب

Magnoliophyta النباتات الزهرة الشعبة

Magnoliopsida ثنابات الفلقة الصؾ

Rosidae الوردات تحت الصؾ

Sapindales الصابونات الرتبة

Rutaceae السذابة الفصلة

Citrus الحمضات الجنس

Citrus aurantium النارنج النوع

األصناؾ

.Citrus aurantium var. amara L الحقق

.Citrus aurantium var. bergamia L البرجموت

.Citrus aurantiumvar. Myrtifolia L صؽر الحجم

15

استخدامات نبات النارنج الشائعة 4.3

إن لفاكهة النارنج طعم حامض جدا ، ومع ذلك فه إحدى الفواكه الشابعة ف بعض البلدان )مثل

إران(، كما أنها تإكل مع الملح والفلفل الحار ف المكسك.

حث عتبر هذا االستخدام لقشور الثمار طعم ممز مرؼوب وه تستخدم ف صناعة المربات،

كما تستخدم القشور ف العدد من المشروبات الكحولة، حث تجفؾ وتم . كثر انتشارا األللقشور

، أما الزت العطري فقد شاع Orange Muscatإضافتها للبرة البلجكة الت تعرؾ باسم

10 ف الحلوات flavoring agent وكمادة منكهةومستحضرات التجمل استخدامه ف العطور

13.

دم نبات النارنج بشكل أساس لألؼراض الطبة ف الصن والابان وكورا، حث تستخدم الفاكهة ستخ

الكاملة ؼر الناضجة لمعالجة االضطرابات الهضمة ولتحفز إفراز الحمض المعدي وزادة الشهة.

األمراض وتستخدم خالصة الثمار ف الطب الشعب لمعالجة: )اضطرابات الجهاز المعدي المعوي،

هبوط وقرحة االثن عشري، ونزؾ شبكة العن، والضعؾ العام، وفقر الدم، و، الفطرة الجلدة

.10 معالجة البدانة فهو العالم فأما استخدامه الطب األكثر شوعا الرحم (.

شجرة النارنج 4.4

الوصؾ المورفولوج 4.4.1

10-3تراوح ارتفاع الشجرة من . ذات قمة مستدرة متكاثفة ،متوسطة الحجم ،شجرة دابمة الخضرة

.متر

ذات نهاة ،، بضوة بشكل عامنتفاخ بن نصل الورقة والعنقاتتمز بوجود ، األوراق بسطة

مستدقة، حوافها خففة التسنن، السطح العلوي للورقة أخضر داكن المع بنما كون السطح السفل

.14سم 10-7.5شاحب، تراوح طولها بن

ملم، بضاء أو بضاء مصفرة، شمعة، ذات رابحة عطرة 25إلى قطرهاالزهرة خنثى قد صل

بتالت سمكة 5منفردة أو مجتمعة بشكل عناقد، وتؤلؾ التوج من تتوضع األزهار إما ممزة.

سداة على األقل 20كما تحتوي األزهار على سبالت. 5الكؤس من ، بنما تؤلؾمستطلة ومقعرة

.16 15 14مجموعات( 5-4على شكل مجموعات ) ذات مآبر صفراء وخوط متصلة بقاعدة الزهرة

.(3الشكل )

16

نبات النارنج (3) الشكل

القشور سمكة ،سم 7.5ل الطرفن، تراوح قطرها حوالثمرة كروة الشكل أو مسطحة تقربا من ا

.14 وكون لونها برتقال عند النضج ،وخشنة

.(4الشكل ) :تتؤلؾ القشور من قسمن

تحتوي على ،: ه الطبقة السطحة الملونة للقشورflavedoأو فالفدو epicarpابكارب -

الؽدد الزتة واألصبؽة، ومن هذه الطبقة تم استخالص الزوت العطرة.

وه عبارة عن ،: ه الطبقة الوسطى البضاءalbedoأو ألبدو mesocarpمزوكارب -

نسج اسفنج القوام حتوي ف تركبه على نسبة عالة من السللوز والبكتن، وقد أثبتت الدراسات

. 18 17 لألكسدة ا مضاد ا الحدثة أن هذه الطبقة ؼنة بالفنوالت والفالفونوبدات ولذلك فإن لها تؤثر

%( وعلى الكثر من 90-85وحتوي على نسبة عالة من الماء )حوال ،حمض لب الثمرة ذو طعم

.19 14 الحزم الوعابة

المستعمل القسم 4.4.2

خالصة وخالصة القشور، واألوراق، واألزهار، ستعملة طبا من نبات النارنج هالنباتة الم األقسام

.14الثمار

12

.19 البنة الداخلة لثمار الحمضات الناضجة( 4) الشكل

التركب الكمائ 4.5

زت تشمل هذه المركبات ال إلى مجموعات كمابة مختلفة. النارنج على مركبات تنتم نبات حتوي

قلودة. المركبات والالمختلفة، الفالفونوبدةالمركبات والفنولة لحموضاالعطري و

Essential oil الزت العطري 4.5.1

األزهار على الزت العطري بنسب متفاوتة. حث تحوي ووي كل من قشور الثمار واألوراق تحت

% ف 0.5اوز نسبته ج، بنما ال تت20 15 11غ قشور( 100%( )مل/2.5-0.5القشور أعلى نسبة )

.(2)جدول ال . بقة األعضاء

قد ف ،limoneneفالمركب الربس ف القشور هو اللمونن ،ابأما فما تعلق بالتركب الكم

. هو المركب الربس ف األوراق و األزهار linalool%. بنما كون اللنالول 94تصل نسبته إلى

.(2)جدول ال . طري بن األوراق الفتة و الهرمةكما ختلؾ تركب الزت الع

، بنما دعى الزتNeroli oilدعى الزت العطري المستخلص من األزهار زت النرول

.petitgrain oils 15المستخلص من أوراق النارنج الفتة والهرمة العطري

11

وراق الفتة والررمةاألوالنارنج قشور وأزهار نسبة وتركب الزت العطري لكل من (2)الجدول 15.

اسم المركب

مل زت عطري( 100التركز % )مل/

األوراق الررمة األوراق الفتة القشور األزهار

- α-Pinene 1.35 ± 0.01 0.53 ±0.02 0.19 ± 0.00 بنن ألفا

Sabinene 2.01 ± 0.20 0.18 ± 0.01 0.37 ± 0.00 0.22 ± 0.03 سابنن

β-Pinene 19.08 ± 0.18 0.62 ± 0.04 3.58 ± 0.01 1.90 ± 0.31 بتا بنن

Myrcene 1.59 ± 0.01 2.00 ± 0.04 1.63 ± 0.06 2.74 ± 0.32 رسنم

Limonene 12.04 ± 0.16 94.67 ± 0.01 0.53 ± 0.01 0.77 ± 0.09 لمونن

ترانس بتا أوسمنtrans-β-Ocimene

6.06 ± 0.01 - 4.08 ± 0.05 3.11 ± 0.21

Linalool 29.14 ± 0.38 0.76 ± 0.04 58.21 ± 0.37 36.03 ± 0.60 لنالول

Nerol 0.83 ± 0.02 - 1.45 ± 0.02 2.89 ± 0.06 نرول

خالت اللناللLinalyl acetate

3.88 ± 0.40 0.18 ± 0.03 12.42 ± 0.13 23.00 ± 1.42

لخالت الجرانGeranyl acetate

2.59 ± 0.04 - 4.49 ± 0.11 8.70 ± 0.37

- α-Humulene - - 0.10 ± 0.00 ألفا هومولن

النسبة المئوة للزت العطري النبات( القسمغ من 100)مل/

0.12 ± 0.01 1.67 ± 0.07 0.27 ± 0.01 0.45 ± 0.02

Phenolic acids الفنولة الحموض 4.5.2

بروؼالول و، gallic acid كحمض الؽالمركبات فنولة بسطة ك على حتوي نبات النارنج

pyrogallol ،كحمض السرنجو syringic acid ،كحمض الكافبوcaffeic acid 21 . الشكل

ملػ ( (0.49 ± 44.41نسبة من الفنوالت أعلىعلى تحتوي وراق األحث بنت الدراسات أن (.5)

الت تتراوح نسبة قشور الثمارلها ت، (gallic acid ك/غ من الوزن الجاؾ )مكافا لحمض الؽال

gallic ك( ملػ/غ من الوزن الجاؾ )مكافا لحمض الؽال(0.88 ± 31.62الفنوالت الكلة فها

acid)22. ا ال تتجاوز نسبة الحموض الفنولة الموجودة ف أزهار النارنج ف الخالصة بنم

11

أما .21 ( gallic acid كملػ /غ من الوزن الجاؾ )مكافا لحمض الؽال (0.05 ± 4.8) المتانولة

.23مل عصر 100( ملػ /2.4 ± 56.9) فنوالت الكلةالد قدرت نسبة فقعصر النارنج ف

Flavonoid compounds المركبات الفالفونوئدة 4.5.3

، rutinروتن ) بنسب متفاوتة نبات النارنج على فالفونوبدات ثماروأزهار وأوراق تحتوي أضا

رباع متوكس -6،7،3،4-هدوركس-naringin 21 ،5، نارنجن quercetin كرستن

، Nobiletinنوبلتن ، Hydroxy-6,7,3',4'tetramethoxyflavone (HTF) 24-5 ن فالفو

حسب نوع نسب الفالفونوبدات كما تتفاوت أضا (. 5شكل )ال .(Hesperidin 20هسبردن

.(3الجدول ) . الخالصة

نبات النارنج ف االجمالةنسبة الفالفونوئدات (3) الجدول

القسم المستعمل من النبات

االجمالةنسبة الفالفونوئدات

.22 )مكافا للكرستن( ملػ/غ من الوزن الجاؾ( 0.07 ± 3.25) األوراق

األزهار)خالصة متانولة(

21(rutin)مكافا للروتن ( ملػ / غ من الوزن الجاؾ (0.05 ± 4.1

األزهار)خالصة إتانولة(

21( rutin)مكافا للروتن من الوزن الجاؾملػ/غ (0.05 ± 3.83)

األزهار )خالصة مائة(

21( rutin)مكافا للروتن من الوزن الجاؾ( ملػ/غ 0.01 ± 1.88)

قشور الثمار Quercetin 14مكافا للكرستن ملػ /غ من الوزن الجاؾ ( (0.01 ± 1.17

22

23مل( 100)ملػ / 0.8±7.7 الثمار

11

OH

OH

OH

COOH

OH

OH

OH

COOH

H3CO

OH

OCH3

COOH

OH

OH كحمض الكافئ كحمض السرنج كحمض الؽال البروؼالول

O

OH

H3CO

H3CO

OCH3

OCH3

O

O

OCH3

H3CO

H3CO

OCH3

OCH3

O

OCH3

HTF نوبلتن

O

OH

OH

OH

OH

O

OH

O

OH

OH

OH

OH

O

OGlu-6Rha

كرستن روتن

O

OH

Rha2-GluO

OH

O

O

OH

Rha2-GluO

OCH3

O

OH

هسبردن نارنجن

.نبات النارنجالموجودة ف الفالفونوئدةالمركبات و الفنولة الحموض( صػ بعض 5) الشكل

11

Alkaloids القلودات 4.5.4

وقلود p-Synephrineسنفرن بارا ه قلودو ،قلوداتالتحتوي الثمار بشكل أساس على

فه مشابهة ف تركبها ،رجةلهذه القلودات خواص أدرن .(6)الشكل . Tyramine 23الترامن

مضادات احتقان كولذلك تستخدم .noradrenalin ن ورأدرنالنوال adrenalin درنالنلأل الكماب

كما أصبح من الشابع استخدام خالصة ثمار النارنج كمتمم ؼذاب . nasal decongestantsأنفة

،رجةعلى مستقبالت ألفا وبتا األدرنخافض للوزن، حث تسبب انخفاضا ف الوزن بسبب التؤثر

زد والت تإدي إلى إنقاص حركة المعدة وبالتال إنقاص الشعور بالجوع، كما أن قلود السنفرن

.26 25 رجةعبر تحفز مستقبالت بتا األدرنمن استقالب الشحوم

سنفرن الحتوابها على قلود هناك الكثر من الجدل حول سالمة استخدام خالصة ثمار النارنج نظرا ال

، وبالتال ما ephedrine فدرنواإل phenylephrine فرنإالمشابه جدا ف تركبه للفنل

hypertension 27 ارتفاع الضؽطو tachycardia رافقه من تؤثرات جانبة مثل تسرع القلب

28.

NH CH3

OH

OH OH

NH2

tyramineترامن p-synephrineبارا سنفرن

.صػ القلودات الموجودة ف ثمار النارنج (8) الشكل

الحدثةالدراسات 4.6

لك تؤثرات تها على أعضاء مختلفة من نبات النارنج أنها تمإأثبتت الدراسات الحدثة الت تم إجرا

مختلفة منها:بولوجة

Antimicrobial effect مكروباتللالتأثر المضاد 4.6.1

أظهر الزت العطري المستخلص من أوراق وأزهار وقشور النارنج تؤثرا متفاوتا على سالالت

جرثومة مختلفة.

12

ابة ة البو حث أظهر الزت العطري المستخلص من األزهار تؤثرا مضادا لبكترا الملو

Helicobacter Pylori المسببة للقرحة المعدة gastric ulcer 1.2)بقطر تثبط تراوح بن-

أكبر نسبة تؤثر على الزابفة الزنجارة الزت العطري هذا أظهركما . 29سم( 1.6

Pseudomonas aerugenosa (1.9قطر تثبط ب ،)بنما لم كن له أي تؤثر على سم

، بعكس الزت العطري المستخلص Staphlococcus aureus 13المكورات العنقودة الذهبة

-3بن قطر التثبط )تراوح من األوراق الذي أظهر أكبر نسبة تؤثر على المكورات العنقودة الذهبة

.30سم( 4

فقد أظهر تؤثرا على جراثم مختلفة منها العصوة ،ور النارنجأما الزت العطري المستخلص من قش

رة الفالفة Bacillus subtilisالرققة 1.9، 1.8)بقطر تثبط Micrococcus flavusوالمك

، بنما أظهرت الخالصة المتانولة للقشور طؾ تؤثر واسع على عدد كبر من 1سم على التوال(

ة ة القولون ة و سم( 1.8قطر التثبط ) Escherichia coliالجراثم منها: اإلشرك هب ة الذ نقود الع

Staphylococcus aureus ( سم 1.9قطر التثبط) الزابفة الزنجارة وPseudomonas

aerugenosa 4 ( سم 2.1قطر التثبط).

ة كما ة القولون Escherichia coliأظهرت خالصة ثمار النارنج تؤثرا مضادا لجراثم اإلشرك

ة و سم( 1.2)بقطر تثبط هب ة الذ نقود .5سم( 2.7)بقطر تثبط Staphylococcus aureusالع

Antifungal effectالتأثر المضاد الفطرات 4.6.2

Candidaلنمو فطر المبضات البض مثبطا أظهر الزت العطري المستخلص من األزهار تؤثرا

albicans بنما سم( 2.5تؤثر النستاتن )قطر التثبط للنستاتن قارب سم( 2.2)قطر التثبط ،

مثل على أنواع أخرى من الفطراتعاري المستخدم مال تؤثرا فوق تؤثر زت األزهار أعطى

.Fusarium culmorum 13، و المؽزالوة Aspergillus parasiticusالرشاشة المتطفلة

المبضات البض فوق نمو فطرل مثبطا تؤثرا فقد أظهر العطري المستخلص من األوراق الزت أما

العنة، بنما كان قطر سم حسب الفصل الذي تم فه جن 5-3.5)تراوح قطر التثبط عاريمتؤثر ال

أظهر الزت العطري المستخلص من القشور طؾ تؤثر أخرا فقدو .30 (سم 3 للنستاتنالتثبط

ة Aspergillus nigerواسع ضد فطري الرشاشة السوداء رب Geotrichumوالمبضات الت

candidum 31.

13

Antioxidant effectالتأثر المضاد لألكسدة 4.6.3

خاصة قشور النارنج )وأوراق وأزهار وأظهرت الدراسات أن للزت العطري المستخلص من

حموض ات وال، كما أظهرت دراسة أخرى أن للفالفونوبد15األوراق الهرمة( تؤثرا مضادا لألكسدة

.22المستخلصة من القشور تؤثرا مضادا لألكسدة فوق تؤثر الزت العطري ةفنولال

Cytotoxic effectالتأثر السم للخالا السرطانة 4.6.4

ي لكل من الزت العطرخطوط خلوة سرطانة متعددة ف الزجاج دراسة السمة الخلوة على تتم

نوبدة المركبات الفالفوو ،الخالصة المتانولة لألزهاركذلك و ،المستخلص من األوراق والقشور

.المعزولة من قشور الثمار

البضاض طانة على الخطوط الخلوة السر ا سم ا المستخلص من األوراق تؤثرالعطري أظهر الزت

Human وابضاض السالبؾ النقوة Jurkat (Adult T cell leukemia)ة اللمفاوات التاب

promyelocytic leukemia (HL60) 32 بنما أظهر زت القشور تؤثرا ف إنقاص عوشة ،

، وكذلك أظهرت الخالصة colorectal carcinoma 20خالا سرطان القولون والمستقم

.21المتانولة لألزهار تؤثرا على سرطان القولون

الفالفونوبدات المعزولة من قشور ثمار النارنج تؤثرا مضادا لسرطان الربة ؼر صؽر أظهرت

.non-small-cell lung cancer 33الخالا

Anxiolytic effectالتأثر الحال للقلق 4.6.5

العطري من الزت العطري لألزهار والقشور تؤثرا حاال للقلق، حث أظهر الزت أظهر كل

Preoperativeالمستخلص من األزهار تؤثرا ف تخفؾ القلق الذي سبق العملات الجراحة

Anxiety بالمقارنة مع الؽفلplacebo 34أخرى إمكانة استخدام الزت ات، بنما اقترحت دراس

anxiety disordersالعطري المستخلص من القشور كعالج مساعد ف حاالت اضطرابات القلق

.depression 36أو ف حاالت االكتباب 35

Anti-inflammatory effectالتأثر المضاد لاللتراب 4.6.6

من الفالفونوبدات الت تم عزلها من قشور النارنج والخالصة المتانولة لألزهار تؤثرا أظهرت كل

.37 21مضادا لاللتهاب

14

goutالتأثر على مرض النقرس 4.6.7

االتانولة تؤثرا مثبطا لالكزانتن أوكسداز من خالصة قشور وأوراق النارنج أظهرت كل

xanthine oxidase inhibitors ، بطاء تطور إعلى منع أو ساعد تثبط األنزم السابق حث

.38مرض النقرس واالضطرابات المرافقة له

Antispasmodic effectالتأثر المضاد للتشنج 4.6.8

أظهرت الخالصة المابة ألزهار النارنج تؤثرا مضادا لتشنج عضلة الرحم عند الجرذان، وعتقد أن

.39ذلك عبر حصر تدفق الكالسوم ف الخالا

Gastroprotection effectالتأثر ف حماة المعدة من القرحات 4.6.9

د القرحات المحدثة أظهر الزت العطري المستخلص من قشور النارنج تؤثرا ف حماة المعدة ض

NSAIDs (non-steroidal anti-inflammatoryبمضادات االلتهاب ؼر الستروبدة

drugs) 40.

والنوهسبردن hesperidinالهسبردن فالفونوبدات اسة أخرى أن لكل منكما أظهرت در

neohesperidin المحدثة المعدة ثمار النارنج تؤثرا مضادا للقرحات قشور المستخلصة من

.indomethacin-induced peptic ulcers 41 باالندومتاسن

Hypocholesterolemic andلسكر الدم الخافض التأثر الخافض للكولسترول و 4.6.10

Hypoglycemic effect

و albedo( وخالصة القشور )لكل من طبقة albedoأظهرت قشور النارنج )الطبقة البضاء

flavedoوف دراسة أخرى أظهر .43 42 لسكر الدم ا ( تؤثرا خافضا للكولسترول وخافض

المستخلص من ثمار النارنج تؤثرا خافضا لسكر الدم، neohesperidinالنوهسبردن فالفونوبد

والؽلسردات الثالثة total cholesterolكما أظهر تؤثرا خافضا للكولسترول الكل

triglycerides 44.

Anticonvulsant effectالتأثر المضاد لالختالج 4.6.11

.45أظهر زت النرول المستخلص من األزهار تؤثرا مضادا لالختالج

15

Fungiالفطرات 5

The nature of fungiطبعة الفطرات 5.1

وجد معظمها كؤحاء رمة ، جموعة واسعة ومتنوعة من العضواتتشكل الفطرات م

saprophytes 46ف التربة وف المادة العضوة المتحللة.

من الجراثم الت تعتبر وتختلؾ عننواة ممزة، تمتلك eukaryote الن واة حققاتتمتاز بكونها

ات .prokaryote 46 47 الن واة بداب

، polysaccharides عددات السكاردتؤلؾ بشكل ربس من ا صلبا جدار الفطرات تمتلك

شكل خلو ا الحوانات جدار تمتلكال ف حن . والبروتنات السكرة ، chitinوالكتن الجدار ا ، و

تعتبر الفطرات ؼرة التؽذة . كما النباتات دعنالمكون الربس الخلوي السللوزي

heterotrophic 46.

Fungi as human pathogenالفطرات بوصفرا عوامل ممرضة لإلنسان 5.2

ة نوع منها 500 متلك حوالالفطرات، منألؾ نوع 100وجد حوال قدرة امراض46 48 ،

ا على إحداث عدوى لدى األشخاص بقدرتهانوع منها فقط 100 حوالمتاز و بنما ، الكؾء مناع

ة المناعة. مثبط موهن أو األشخاصباألنواع األخرى ترتبط امراض

وتنتقل إلى اإلنسانكؤحاء رمة ف الببة تعشفطرات كون سببها ظم اإلنتانات البشرة الفطرةمع

بشكل رم عندبعض الفطرات مكن أن تعشأو الجروح. الطرق التنفس أو الهضمعبر

.46 لمضؾإال عند حدوث خلل ف الحالة المناعة لتسبب عداوى الاإلنسان و

مكن تصنؾ العداوى الفطرة إلى ثالث مجموعات تبعا لتوضع العدوى:

ب هذه العداوى الطبقات تص: Superficial mycoses سطحةأمراض فطرة -1

بشكل جد للمعالجة. عادة للجلد والشعر واألظافر، وه سرعة التشخص وتستجب السطحة

تصب األدمة واألنسجة : Subcutaneous mycoses ةجلدتحت فطرة أمراض -2

تحت الجلد، وتحدث هذه العداوى عادة عند المرضى موهن أو مثبط المناعة.

تتمز هذه العداوى بؤنها عمقة : Systemic mycoses جرازةأمراض فطرة -3

.46الممكن أن تنتشر إلى أي عضو آخر التوضع وتتوضع ؼالبا ف الربة، ومن

16

تقسم الفطرات المسببة لهذه اإلنتانات إلى قسمن:

opportunistsوفطرات انتهازة ،true pathogenic fungiفطرات ممرضة حققة

fungi.

الفطرات الممرضة الحققة 5.2.1

dimorphicالفطرات ثنابة الشكل نتم معظمها إلى مجموعة ،تضم عددا قلال من الفطرات

مثل داء عدة أمراضمسببة وتتطور فها ،كؾء مناعا المضؾ ال أنسجةالت بإمكانها أن تؽزو

.histoplasmosisالنوسجات

فترة قصرة، تختف بعد أو ذات أعراض خففة العرضة عداوىهذه الفطرات ؼالبا ما تسبب

اإلصابة تطورتمكن أن لكن .طولة مقاومة العداوىوكتسب الشخص المصاب بعد التعاف من هذه

مناطق ف من الفطرات هذه األنواع تنتشر مرض مزمن عند عدد قلل من المرضى. السابقة إلى

.46محدودة جؽرافة

الفطرات االنترازة 5.2.2

.فقط المناعة مثبط نأنسجة المضفالت تستطع ؼزو وفوعة تضم الفطرات األقل

االنتهازة ف معظم الحاالت عند المرضى السابقن اترالحققة تسبب الفط اتروعلى عكس الفط

من العداوى ال كتسب المرض بعد التعاف .48 ةوفات مرتفع تترافق مع معدالت خطرة عداوى

على و بل من الممكن أن صاب بها مرة أخرى عندما تنخفض مناعته. ،مقاومة أو حماة ةأ السابقة

.46واسعة االنتشار ف العالم الفطرات الممرضة الحققة تكون هذه الفطراتعكس

لداء ةالمسبب Candidaجنس المبضات إلى نتم ت التع الخمابر انوأنتهازة الفطرات االهم أ من

المسببة لداء Aspergillusجنس الرشاشات إلى ، واألنواع الت تنتمCandidosisالمبضات

.Aspergillosis 46 48 الرشاشات

الرشاشات فطراتAspergillus

إحدى تسبب ، حثلدى اإلنسانعداوى مختلفة من الرشاشات ا نوع 20حوال سبب مكن أن

: العداوى حاالتمعظم التالة األنواع

فراء ة الص اش ش خناء ، A. flavusالر ة الد اش ش وداء ، A.fumigatusالر ة الس اش ش ، A. nigerالر

ة ة األرض اش ش A. terreusالر

ف الطبعة. بشكل واسع - بشكل رم -تتواجد هذه الفطرات

12

ؼبرات أضا تدعىالت مكن أن عدد كبر من األبواغ ترافق تكاثر هذه الفطرات مع إنتاج

conidia . ولذلك ،ؼبرة ف المتر المكعب 100 -1الؽبرات ف الجو من أن تراوح تركز مكن

الوصولعلى (مكم 3-2)ساعد حجمها الصؽر حث ،فه تستنشق بشكل روتن من قبل اإلنسان

إلى الجهاز التنفس السفل.

، بنما تسبب العدد من األشخاص الكؾء مناعا تم مواجهة الرشاشات من قبل جهازالمناعة لدى

.48 المناعة موهن أو مثبطاألمراض لدى

المبضات فطراتCandida :

لدى اإلنسان. عداوى فقط منها ا نوع 12 سببحث نوع، 200ضم جنس المبضات حوال

تتواجد هذه األنواع بشكل طبع على السطوح الظهارة للفم والقناة المعدة المعوة والمهبل والجلد،

مثبط أن تنمو وتسبب أمراض خطرة عند مكن، ولكن الكؾء مناعا وه عادة ؼر مإذة لإلنسان

.أو األشخاص الذن متلكون مجموعة من العوامل المإهبة لإلصابةمناعة ال

العوامل المإهبة لإلصابة بداء المبضات:تشمل

: immune-suppression تثبط المناعال -

المعالجة باألدوة المثبطة أولسرطان، ا اتمضادبلمعالجة أو ااإلدز، نجم عن اإلصابة ب

.الت تستخدم ف حاالت زرع األعضاء(كاألدوة للمناعة )

:catheterizationالقثطرة -

.واألنسجة واألوعة الدموة الموجودة على الجلد خالا الخمابر بنمباشر التماس التسمح ب

.ألطفال والمسننا -

.تسبب اختالل توازن الفلورا الطبعةحث استخدام صادات حوة واسعة الطؾ: -

.للقناة المعدة المعوةعمل جراح الخضوع ل -

. نسانعند اإل عداواى واسعة على االستجابة المناعة الطبعةوتؽلبها خالا المبضات سبب تكاثر

أوعمقة ،لجلد واألؼشة المخاطة للتجوؾ الفموي والمهبلسطحة تصب االعداوى كون هذهتقد

Candidaالمبضات البض نوععد .48مختلفة مثل الكلة والكبد والدماغتصب أعضاء

albicans 49المبضات جنسأحد أهم الفطرات االنتهازة ضمن.

11

Candida albicansالمبضات البض نوع 5.3

مظرر المستعمرات 5.3.1

Sabouraud dextrose مستعمرات المبضات البض على وسط سابورو دكستروز آؼارتظهر

agar (SDA) 50 (7) الشكل .قوام شمعو ،وسطح ناعم ،بلون أبض لماع.

مستعمرات المبضات البض على وسط سابورو دكستروز آؼار( 7) الشكل

11

األهمة السررة 5.3.2

% من 50-30تتواجد فطرات المبضات البض بشكل طبع ف الفم والقناة الهضمة لدى

.50ومعظم اإلصابات تكون ذاتة المنشؤ ،األشخاص

مخاطة إلى عداوى جهازة مهددة جلدة أو عداوىبن البض تتراوح العداوى الت تسببها المبضات

.52 51المناعة موهنواسعة االنتشار عند عادةتكون و ،أي عضو مكن أن تصبللحاة

المضادة للفطرات المستخدمة ف معالجة جنس المبضات عواملال 5.3.3

وظهور أنواع جددة من ف العداوى الفطرة لدى اإلنسان ارتفاعا كبرا شهدت العقود األخرة

ضى عوز ، وكان لهذه العداوى أهمة كبرة نتجة زادة حدوثها عند كل من مرالفطرات الممرضة

، acquired immunodeficiency syndrome (AIDS) المناعة المكتسب )االدز(

مثبط المناعة اآلخرن المرضىو ،، ومرضى السرطانالمرضى الذن أجري لهم زرع أعضاءو

immunocompromised 46 52.

سجل قد و بضعؾ حساستها لألدوة المضادة للفطرات. - بشكل عام -تمتاز الفطرات االنتهازة

ستخدام األدوة زادة او ،العداوى الفطرة لزادةنتجة هذه الفطرات لألدوةمقاومة ارتفاع مإخرا

.46 الحدثةدوة المزد من األالبحث عن ، مما دفع العلماء إلىالمضادة للفطرات

إال األدوة المضادة للفطرات المستخدمة ف المعالجة السررة توفر مجموعة منعلى الرؼم من و

.49جنس المبضاتالعداوى الموضعة أو الجهازة لمنها فقط ستخدم لمعالجة عددا قلال أن

وتشمل هذه المركبات الدوابة المجموعات التالة:

مجموعة اآلزولAzoles

فلوكونازول :مثلللفطرات ة وعة من مجموعات األدوة المضاداآلزول أكبر مجمتعتبر مركبات

Fluconazole اتراكونازول ،Itraconazole كتوكونازول ،Ketoconazole ، فوركونازول

Voriconazole بوساكونازول .Posaconazole

آلة عملرا:

رؼوسترول اإل اصطناعالمسإول عن ، lanosterol14-α-demethylaseتثبط أنزم

ergosterol (السترول األساس المكون لؽشاء الخلة الفطرة،) تخرب ؼشاء مما إدي إلى

.54 53 49 وموتها الخلة الفطرة

11

مجموعة االشنوكاندنEchinocandins

.Anidulafungin، أندوالفانؽن Micafungin، مكافانؽن Caspofunginكابسوفانؽن مثل:

آلة عملرا:

نزم أل هاتثبطل نتجةه عبارة عن ببتدات شحمة تثبط اصطناع الجدار الخلوي للخلة الفطرة

(1,3)-𝛽-D-glucan synthase عدد ) اصطناع الؽلوكان تثبط. إدي تثبط هذا األنزم إلى

تشكل جدار خلة فطرة ضعؾ وبالتال ،(أساس دخل ف تركب جدار الخلة الفطرةسكارد

.53 49ف الخلة وموتها osmotic lysisإدي بالنهاة إلى حدوث تحال تناضح مام البنة

مجموعة البولناتPolyenes

.Amphotericin B 49 53 54واألمفوترسن ب Nystatinمثل النستاتن

آلة عملرا:

ضمن ؼشاء الخلة مابة ثقوبمما إدي إلى تشكل ،رؼوسترول وتخربهإلمع ا هذه األدوة ترتبط

لمكونات الستوبالسمة وموت الخلة الفطرة لتسرب حدث بالتال و . نفوذة الؽشاءر تؽو ،الفطرة

49 53.

مضاهئات النوكلوزدNucleoside Analogues:

مثاال على Flucytosineالفلوستوزن عتبر، RNAوالرنا DNA اصطناع الدنا هذه األدوة تثبط

اصطناع الدنا ف وبالتال حدث تثبط، pyrimidine 49 وهو مضاها للبرمدن ،هذه األدوة

.53والرنا والبروتنات ف الخالا الفطرة

العوامل األخرى المضادة للفطرات

مثل التربنافن :Thiocarbamates والتوكاربامات Allylaminesاألللل أمنات -

terbinafine.

آلة عملرا:

صطناع ال الهام squalene-epoxidaseنزم أل هاتثبط نتجةتخرب ؼشاء الخلة

.53 49 رؼوسترولاإل

:Griseofulvinالؽرزوفولفن -

11

ب spindleمؽزل االنقسام ثبط تشكل ب ن cytoplasmicةالستوبالزم اتواأل

microtubule، انقسام الفطرثبط وبالتال.

العوامل المضادة للفطرات المستخدمة لمعالجة جنس المبضات وآلة عملها (8)وضح الشكل

49العوامل المضادة للفطرات وآلة عملرا ( 8) الشكل.

12

عطى العدد منها فقط عبر حث صعوبة تناولهاسمتها، و المتوفرة منلفطرات ا تعان مضادات

مما دعو للبحث عن معالجات بدلة ومركبات ، 55 49 وتطور مقاومة لها، انخفاض فاعلتها، والورد

.49 جددة مضادة للفطرات

النباتات كعوامل مضادة للفطرات 5.4

، المضادة للفطرات الجددة المنتجات الطبعة باهتمام كبر من بن المصادر المختلفة لألدوةتحظى

.55ألنها تقدم فرصا ؼر محدودة لعزل مركبات حدثة مضادة للفطرات

تؤثرا مضادا تمتلك من المركبات الت عزلت من نباتات مختلفة ا كبر ا عدد أنأثبتت الدراسات

.للفطرات ةمضادبوصفها األدوة المستخدمةللفطرات. قد فوق هذا التؤثر لبعض المركبات تؤثر

نذكر من هذه المركبات:

مشتقات الحموض الفنولةPhenolic acid derivatives 55 56 57 58:

.Olive Pomace 57عرجون )تفل( الزتون مثل المركبات الفنولة المستخلصة من زت

الفالفونوئداتFlavonoids 55 59 60:

.Retama raetam 60مثل الفالفونوبدات المستخلصة من نبات الرتم

الزوت العطرةessential oil 61 55 49والتربنوئدات:

نمو ل مثبطا را لعدد من الدراسات أن للزوت العطرة المستخلصة من نباتات مختلفة تؤثبنت ا

، وهذا التؤثر فوق ف كثر من الدراسات تؤثر الفلوكونازول.فطر المبضات البض

، Coriandrum sativum L. 62 63 نذكر منها الزت العطري المستخلص من نبات الكزبرة

Cuminumبذور الكمون و، Rosmarinus officinalis 64كلل الجبل إأزهار و

65cyminum، الخزامى وlavender oil، والنعنعPeppermint oil، نفلوالقر Eugenol

oil ، والزعترThyme oil 66.

، eugenolكما أظهرت أضا بعض المركبات المستخلصة من الزوت العطرة )مثل األوجنول

( carvacrolول ركارفاك، ال menthol، المنتول geraniol، الجرانوال linaloolاللنالول

.67ضات البض المقاومة للفلوكونازولفطرات المبنمو ل مثبطا تؤثرا

وتوافرها الحوي وآلة حدت قلة األبحاث والدراسات السررة المتعلقة بجرعة المركبات النباتة

تؤثرها من استخدامها ف المعالجة، مما دعو إلى ضرورة إجراء المزد من الدراسات ف هذا

.3المجال

13

الطرائق المتبعة لتقدر الفاعلة المضادة للفطرات للزوت العطرة ف الزجاج 5.5

Agar diffusion testاختباراالنتشار باآلؼار 5.5.1

المراد قاس فاعلته، ثم وضعه على شباع قرص ترشح بالزت العطري إعتمد هذا االختبار على

للزت العطري بقاس تقدر الفاعلة المضادة للفطرات . المراد اختباره الفطرعلى و سطح آؼار حا

قطر التثبط.

إلى نتابج ؼر ، إال أنها قد تإدي شابعة االستخدام بشكل كبرسهلة التطبق وومع أن هذه الطرقة

االنحالل بالماء. ةضعف االمراد اختبار فاعلته المادةكون تدققة خاصة عندما

Broth/Agar dilution testاختبار التمدد بالمرق أو باآلؼار 5.5.2

المضادة اقاس فاعلته المطلوب المادةف اختبار التمدد بالمرق توضع سلسلة تراكز مختلفة من

، أما ات المطلوب اختبارهاالفطر حتوي على عدد محدد مسبقا من نوعسابل مستنبتللفطرات ف

تراكز متدرجة من المادة المختبرة ضمن اآلؼار الذي تم صبه ختبار التمدد باآلؼار تضاؾال بالنسبة

، ثم توضع كمات متساوة من الفطر المطلوب اختباره على سطح مستنبتات اآلؼار.ف أطباق البتري

الطرقتن بحساب التركز األدنى المثبط لنمو الفطرات من ر الفاعلة المضادة للفطرات لكلوتقد

Minimum Inhibition Concentration (MIC)، عن أدنى تركز من المادة لذي عبروا

المختبرة منع النمو المرب للسالالت الفطرة.

ألنه تؽلب على ،"gold standard"وصؾ اختبار التمدد باآلؼار بؤنه اختبار معاري ذهب

للمواد المختبرة. MICكما أنه سمح بتحدد تركز ،مشاكل االتنشار باآلؼار

من استخدامه بشكل كبر ؼار والوقت الطول الذي ستؽرقهالتكلفة المرتفعة الختبار التمدد باآلحدت

ف اختبارات قاس الفاعلة المضادة للفطرات.

Broth microdilution methodاختبار التمدد المكرون بالمرق 5.5.3

للمواد MICتسمح بحساب تراكز كما واحد جراء العدد من التجارب ف آن تسمح هذه الطرقة بإ

بقى هناك مشكلة ظهور نتابج ؼر دققة لبعض الفطرات )خاصة تولكن . بوقت وتكلفة أقلالمختبرة

بر لألوكسجن أثناء التجربة.الالهوابة( نظرا لنقص المواد المؽذة ف الوسط والتعرض الك

14

. ولكنها طرق ؼر معارة ،العدد من الطرق األخرى المتبعةال بد من اإلشارة أضا إلى وجود

.جب أخذها بعن االعتبار عند االختبار طرقة مساوئ ومحاسن كل ، تمتلكبشكل عامو

تبقى اختبارات الفاعلة المضادة للفطرات للزوت العطرة صعبة التطبق نظرا لتطارها ف الحققة

والت تتطلب ف بعض األحان إضافة hydrophobicityبشكل كبر، وخواصها الكارهة للماء

.68السطح عامل فعال على

15

الدراسة العملة

Experemental study

16

Aim of study البحث هدؾ

المستخلص من قشور الطار الزت العطري لفطرات لكل مننمو ال المثبط تؤثرالدراسة -1

اللمونن )المركب األساس الذي دخل ف تركب الزت( بشكله الممن والنارنج ثمار

Candidaاستخدم فطر المبضات البض حث والمسر وذلك بالمقارنة مع الفلوكونازول )

albicans )كنموذج للفطرات.

فترة النضج تبعا النارنج خالل ثمارتركب الزت العطري لقشور و مردود دراسة تؽر -2

.لتؽرات المناخ

12

Materials and Methodsوالطرائق المواد 6

جمع عنات نبات النارنج واستخالصرا 6.1

جمعت ثالث عنات من ثمار النارنج من مدنة دمشق خالل فترة النضج. تم استخالص الزت

. مبوة° 20 -وتم حفظه ف درجة حرارة ،من قشور الثمار للعنات الثالث العطري

تم العمل كما ل:

جمع العنات 6.1.1

، كانون 2013جمعت ثالث عنات من ثمار النارنج خالل ثالثة أشهر من فترة النضج )كانون األول

(.2014، شباط 2014الثان

الشكل . منزل ف األحاء القدمة من مدنة دمشقتم جمع العنات السابقة من أشجار مزروعة داخل

حث تكون نسبة الزت العطري بحدودها ،)منطقة المدان(، وذلك ف الساعة السابعة صباحا (9)

.69العلا

جمعت العنات خالل التوارخ التالة:

28/12/2013العنة األولى: -

27/1/2014العنة الثانة: -

23/2/2014العنة الثالثة: -

وتم التؤكد من نوع النبات وتصنفه من قبل األستاذ الدكتور عماد القاض.

11

.ف مكان جمعه ف مدنة دمشق )التقاط الباحثة( النارنج نبات (9الشكل )

الزت العطري وحفظهاستخالص 6.1.2

باستخدام جهاز استخالص الزوت Hydrodistillationالماء ب تم االستخالص بطرقة التقطر

قسم العقاقر وكماء - الموجود ف مخبر الدراسات العلا Clevenger apparatusالعطرة

(.10)والموضح ف الشكل جامعة دمشق -كلة الصدلة –العقاقر

11

.)التقاط الباحثة( Clevenger apparatusجراز االستخالص (32) الشكل

:تم االستخالص وفقا للخطوات التالة

سلت الثمار بالماء المقطر -1 ففت باستخدام قطعة قماشة نظفة. ،ؼ وج

ل الوزن. -2 ج زنت الثمار، وس و

بحث تحتوي على أقل ،بؤداة حادة (Flavedo)أ زلت القشرة الخارجة ذات اللون البرتقال -3

.(Albedo)كمة ممكنة من القشرة الداخلة البضاء

ثم تم حساب نسبة وزن القشور للثمار. ،وزنت القشور الناتجة -4

11

عت القشور إلى قطع صؽرة لتحطم الجوب الزتة -5 ووضعت ف حوجلة جهاز ،ق ط

.االستخالص وأضؾ لها ضعؾ حجمها ماء مقطر

نتج و ،قمص التسخنساعات باستخدام 3مدة مبوة ل°90-80سخنت العنة لدرجة حرارة -6

قطر طبقة زتة علوة وطبقة مابة سفلة.تعند انتهاء عملة ال

تم االنتظار إلى أن برد الزت ونفصل تماما عن الطبقة المابة. -7

تم حساب حجم الزت الناتج والنسبة المبوة له. -8

ثم تم ترشحه. ،الزت العطري بإضافة سلفات الصودوم الالمابةجفؾ -9

رثما تم العمل عله الناتج وتم حفظ الزت العطري ،كررت العملة السابقة لجمع العنات -10

تسمح درجة ، حثمبوة° 20 -ف أنابب زجاجة عاتمة محكمة اإلؼالق ف درجة حرارة

وضح . 70دون أي تؽر الطار الحرارة السابقة بالمحافظة على تركب الزت العطري

خطوات العمل. (11)الشكل

)التقاط الباحثة(. الطار ملخص لمراحل استخالص الزت العطري( 11) الشكل

11

الطار تحلل مكونات الزت العطري 6.2

أجرت عملة تحلل مكونات الزت العطري للعنات الثالث السابقة ف مخابر مدرة الرقابة -

ة ومتحري مطاؾ الكتلة من نوع GC-MSالدوابة باستخدام جهاز الكروماتوؼرافا الؽاز

GCMS –QP2010 plus, SHIMADZU, Kyoto, Japan . (.12)الشكل

التالة:متلك الجهاز المواصفات

:العمودOPTIMA 5 (100% dimethylpolysiloxane USP G1, G2,

G38) ملم 0.25وقطره ،متر 25مكرومتر، طول العمود 0.25سماكة الفلم.

كلو باسكال 54الؽاز الحامل: الهلوم بضؽط(K.pa).

معدل الفصل(Split Ratio) :30:1

مبوة، نمط الحقن ° 250 :درجة حرارة الحاقن ،الحاقن: أتوماتكinjection mode:

.مكرولتر 1 :، حجم العنة المحقونةSplitفصل

:البرنامج الحراري

.درجات/ دققة 3ترفع بمعدل ،مبوة° 240 - 60درجة حرارة الفرن

دققة. 62الزمن الكل للبرنامج:

:التشظ قدرة ، مبوة° 200درجة حرارة مصدر األونات: مطاؾ الكتلة : e.v 70.

%، حث 5تم تحضر عنات الزت العطري للتحلل بتمدده بالهكسان النق للحصول على تركز -

مل 2وأكمل الحجم حتى ،مل 2مكرولتر من الزت العطري ضمن أنبوب سعة 100وضع

بالهكسان للحصول على التركز السابق.

اإللكترونة. Wileyخدام مكتبة تم التعرؾ على مكونات الزت العطري باست -

12

ة ومتحري مطاؾ الكتلة (12) الشكل .)التقاط الباحثة( GC-MSجراز الكروماتوؼرافا الؽاز

مناخةالمعلومات ال 6.3

ة األرصاد الجوة ف مدنة دمشق.تم طلب معلومات مناخة من مدر

خالل األشهر الثالثة الت تم لحرارة، معدل الرطوبة النسبة( تتضمن هذه المعلومات: )معدل درجة ا

.2014شباط ، 2014كانون الثان ، 2013كانون األول فها جمع عنات النبات واستخالصه وه:

من ةالمستخلص ةت العطرولزعنات ال المبضات البض فطراتنمو ل ثبطدراسة التأثر الم 6.4

و للفلوكونازول (-) والمسر )+( اللمونن الممنعاري مالنارنج ول ثمارقشور

تم عزل .جامعة دمشق -كلة الصدلة –قسم األحاء الدققة -ف مخبر الدراسات العلا تم العمل

وتمت دراسة التؤثر ،من عنة براز بشرة Candida albicansساللة نقة من المبضات البض

لكل من العنات التالة: البضات فطر المبض ثبط لنموالم

(2013عنة الزت العطري المستخلصة ف الشهر األول من النضج )كانون األول.

(2014عنة الزت العطري المستخلصة ف الشهر الثان من النضج )كانون الثان.

(2014عنة الزت العطري المستخلصة ف الشهر الثالث من النضج )شباط.

الممن )+(عاري ماللمونن ال.

13

Limonene) -(+)-(R ), USAALDRICH-SIGMA FLUKA, 62118(

(-عاري المسر )ماللمونن ال.

Limonene)-)-(-(S ), USAALDRICH-, SIGMAW504505(

الفلوكونازول Fluconazole )States, New York, United Pfizer(: الدواء الذي

وصى به لعالج المبضات البض.

واستخدم الماء المقطر لتمدد ،Agar dilution methodاستخدمت طرقة التمدد ف اآلؼار

الفلوكونازول نظرا لكونه قابل لالنحالل ف وسط ماب، بنما أجرت عدة تجارب الختار المحل

المناسب لتمدد اللمونن والزوت العطرة.

مزج من الماء المقطر والتون ف حضر سالسل تمددات من الزوت العطرة واللمونن بحلها تم ت

عاري متراوحت التراكز النهابة لكل من عنات الزوت العطرة واللمونن ال .%0.5كز بتر 80

40-1وتراوحت التراكز النهابة للفلوكونازول بن ،مكل/مل 40-1بن مستنبت الزرعف

.مكػ/مل

تم العمل وفقا للخطوات التالة:

عزل عنة الفطر 6.4.1

Sabouraud Dextrose وسط سابورو دكستروز آؼارتم زرع ثالث عنات براز بشرة على

Agar SDA (M063-500g, HIMIDIA,Mumbai, India) الذي تم تحضره مسبقا

. مكػ/مل( 50)بحث كون تركزه النهاب ف الوسط Gentamicin والمضاؾ له جنتاماسن

مستنبت تم التعرؾ على مستعمرات الفطرات الخمابرة الت نمت على ،ساعة 48وبعد حضن لمدة

اعتمادا وتم تنمط مستعمرات المبضات البض من قبل األستاذ الدكتور محمد معروؾ وذلك ،الزرع

SDA مستنبتتم عزل مستعمرات المبضات البض واستفرادها على نتاش.على اختبار األنبوب اإل

الساللة النقة لفطر المبضات البض )13)مثل الشكل ها حتى انتهاء الدراسة. جدد والمحافظة عل

Candida albicans.

14

.)التقاط الباحثة( Candida albicansعزلة فطر المبضات البض ( 13) الشكل

المحل المناسب المبضات البض واختار فطرات دراسة تأثر المحالت لوحدها على نمو 6.4.2

عاري ملتمدد الزت العطري واللمونن ال

عند إضافته بدون تمدد، فقد قمنا بالعدد SDAنظرا لعدم امتزاج الزت العطري واللمونن مع وسط

من التجارب الختار محل ساعد على امتزاج كل من الزت العطري واللمونن مع الوسط بحث

فطر المبضات البض.نمو ل ثبطر مالمتلك هذا المحل أي تؤث

:الت تم اختبارهاالمحالت اتمجموع شملت

المجوعة األولى:

) (Dimethyl Sulfoxid DMSO anhydrous, ≥99.9%ثناب متل السلفوكسد -1

(276855, SIGMA-ALDRICH , USA)

( (Methanol anhydrous, 99.8%المتانول -2

(322415, SIGMA-ALDRICH, USA)

المجموعة الثانة:

%.0.5مزج الماء المقطر مع ثناب متل السلفوكسد بتركز -1

15

%.0.5بتركز المتانولمزج الماء المقطر مع -2

%.0.5بتركز 80التون مزج الماء المقطر مع -3

Tween 80 (P1754, SIGMA-ALDRICH, USA)

تم استبعاد كل من قة مع اللمونن والزت العطري، ثم جمع المحالت الساب قابلة امتزاج تم اختبار

المتانولمزج الماء المقطر مع و %0.5ب متل السلفوكسد بتركز مزج الماء المقطر مع ثنا

ضمن مع الماء المقطر نن الزت العطري واللموتسمح بامتزاج نظرا لكونها ال %0.5بتركز

% بامتزاج الزت العطري0.5بتركز 80بنما سمح استخدام التون لمستعملة. التراكز ا

.SDAواللمونن مع الماء المقطر، ومن ثم توزعه بشكل متجانس ف مستنبت

بحث نحصل على أوساط تحتوي SDAالزرع مستنبتإلى المجموعة األولى محالت تمت إضافة

الزرع المستخدمة. مستنبتاتمن مستنبت% ف كل 10 -1تتراوح بن على تراكز من المحالت

.SDA مستنبتالتون ف % من 0.5 نهاب لنتج لدنا تركز 80مع التون بنما مزج الماء المقطر

تم العمل كما ل:

SDAتحضر وسط سابورو دكستروز آؼار -أوالا

ل: حث تم تحضر وسط سابورو دكستروز آؼار كما ،تم العمل ف جو عقم

أكمل الحجم حتى ا لتر بالماء حث ،بالماء المقطرضمن حوجلة وحلهغ من الوسط 65تم وزن

المقطر.

.مزج جدا ، ثم سخن حتى الؽلان وتمام االنحالل

تم تعقمه ف جهازالصاد الموصدAutoclave مبوة ° 121بار ودرجة حرارة 15بضؽط

دققة. 15لمدة

وذلك عندما ،لمنع نمو الجراثممن الوسط مكػ / مل 50 بتركز جنتاماسنالتمت إضافة

مبوة. °45-40أصبحت درجة حرارة الوسط بن

تحضر سلسلة تراكز من المحالت المستخدمة -ثانا

من محالل المجموعة األولى لكل محلول تمدد ف مستنبت الزرع تراكز نهابة 4تم تحضر

.%10، %5 ،%2.5 ،%1تعادل:

سم للعمل ف جمع المراحل. 6استخدمت علب بتري ذات قطر

16

وأكمل الحجم ،مل من محلول التمدد إلى علبة البتري األولى1ضافة إلممصات معقمة استخدمت

المحضر والمعقم مسبقا وذلك بعد إذابته على حمام SDA وسط مل من 9بإضافة مل 10حتى

ذلك نكون وب ،حول محورها لمتزج الوسط مع المحلول بشكل جد علبة البتري دورثم تم تماب،

.(4) لجدولاكما وضح حضرت باق التراكز بنفس الطرقة . %10قد حصلنا على تركز

والمتانول على نمو المبضات البض. الحجوم المضافة DMSOلدراسة تأثر SDAتحضر أوساط ( 4)الجدول .DMSOوالتراكز النرائة للمتانول و

رقم علبة البتري

حجم المواد المضافة )مل(تركز محلول التمدد ضمن علبة البتري

محلول التمددDMSO أو متانول

SDAوسط

1 1 9 10%

2 0.5 9.5 5%

3 0.25 9.75 2.5%

4 0.1 9.9 1%

للمجموعة الثانة بالنسبة

SDA مستنبتضمن 80التون بحث كون تركز إلى الماء المقطر 80التون أضؾ

جم بالماء وأكمل الح ابندروؾ أنبوبف 80التون مكل من 50لتحقق ذلك تم وضع .0.5%

. 80التون من % 5 على ويتعلى أنبوب ح وبذلك حصلنا ،جدا ومزج مل 1المقطر حتى

. SDAمن وسط مل10 إلىإلى علبة بتري وأكمل الحجم األنبوب السابقأضؾ محتوى

.80من التون % 0.5 حتوي على SDA مستنبتحصلنا بالنتجة على

درجة حرارة حاضنة فثم وضعت ف ال ،تى تمام التصلبح جدا وتركت علب البتري مزجت

تلوث قبل أي بعد قلبها على الوجه السفل للتؤكد من عدم حدوث ساعة 48لمدة مبوة °37

الزرع.

22

تحضر المعلق الفطري وإضافته للوسط السابق -ثالثاا

ساعة 48وذلك بعد مرور ،الذي تم عزله مسبقا البضات ذ مستعمرة من مزرعة لفطر المبضتم أخ

حتى ،ومزجت جدا ،مل مصل فزولوج 1وضعت المستعمرة ضمن على تلقح وسط الزرع.

على معلق للفطر. حصلنا

وتم ،مكرولتر من المعلق الفطري 10حث أخذ تم حساب كثافة المعلق من خالل تعداد خالا الفطر

، وفقا لطرقة عد كرات الدم Neubauer counting chamber روطة عدادة نوبااسه بوعد

103للحصول على معلق نهاب للفطر بتركز بالمصل الفزولوج ثم تم تمدد المعلق البضاء.

خلة/مل.

مكرولتر من المعلق األخر إلى كل من علب البتري السابقة، ثم مزج جدا بتدور 100تم إضافة

قلبت العلب ووضعت ،جؾ المعلقحتى نصؾ ساعة لمدة وبعد االنتظار .علبة البتري حول محورها

مبوة.° 37ف الحاضنة ف درجة حرارة

ي زت عطري أو أي دواء آخر أو أي محلول للتمدد. تم تم تحضر علبة بتري شاهدة ال تحتوي أ

.)شاهد إجاب( مل من وسط الزرع فقط10تحضرها بإضافة

حث تمت مقارنة عدد المستعمرات الفطرة الناتجة ساعة من العمل. 48تمت قراءة النتجة بعد

عن الشاهد اإلجاب وكل من محالل التمدد السابقة.

ضمن جمع المبضات البض فطراتنمو ل مثبطتم اختار المحل الذي لم كن له أي تؤثر

التراكز المستعملة إلكمال العمل.

ات المبضات البضفطرلنمو ةالمثبط دناكز الاالتر سجلت قم MIC الموافقة للمحالت

مرب أدى إلى عدم حدوث أي نمو فطري المحلتمثل هذه القمة أقل تركز من ، حثاألخرى

.الزرع مستنبتف

للفلوكونازول المبضات البض فطراتنمو ل ثبطدراسة التأثر الم 6.4.3

تمت الدراسة وفقا للخطوات التالة:

للفلوكونازول تراكزسلسلة تحضر -أوالا

: تراكزة بدمحالل ممدتم تحضر مجموعة من التمددات البدبة للفلوكونازول بحث نحصل على

مكػ/مل. 400 ،300 ،200، 100، 50 ، 25 ،10

تم العمل كما ل:

21

)States, New York, United Pfizer( محلول تسرب وردي للفلوكونازولاستخدم -

لتحضر سلسلة التمددات.ملػ/مل 2بتركز

أنابب، حضرت التمددات باستخدام أنابب 7تتؤلؾ سلسلة التمددات للفلوكونازول من -

مل. 1ابندروؾ سعة

مل 1وأكمل الحجم إلى ،مكل من محلول الفلوكونازول إلى األنبوب األول 200أضؾ -

ثم مزج جدا . ،بالماء المقطر

مكػ فلوكونازول /مل ماء مقطر. 400ك حصلنا على تركز بدب وبذل -

.(5)الجدول ف راكز بنفس الطرقة كما هو موضح حضرت باق الت -

لفلوكونازولوتراكز ا ، الحجوم المضافةمن المحالل الممددة للفلوكونازول تراكزتحضر سلسلة (5)الجدول الناتجة.

األنبوبرقم

الحجم المضاؾ )مكل(

لفلوكونازول )مكػ/مل(تركز ا

محلول فلوكونازول الماء المقطر ملػ/ مل2

400 800 200 1األنبوب

300 850 150 2األنبوب

200 900 100 3األنبوب

100 950 50 4األنبوب

50 975 25 5األنبوب

30 985 15 6األنبوب

10 995 5 7األنبوب

تحضر الوسط ومزجه مع سلسلة التراكز -ثاناا

تم تحضر وسط سابورو دكستروز آؼارSDA ( أوالا 6.4.2 الفقرةكما مر سابقا.)

وسطمل من 9ضافة إلممصات معقمة ، واستخدمت سم 6بتري ذات قطر علباستخدمت

SDA )تركز من تراكز مل من كل 1و )المحضر والمعقم مسبقا بعد إذابته على حمام ماب

تم تدورعلب البتري حول محورها لمتزج ثم مجموعة التمددات السابقة إلى كل علبة بتري.

الوسط مع المادة بشكل جد.

40 -1بالنتجة حصلنا ضمن علب البتري على تراكز نهابة للفلوكونازول تراوحت بن

مكػ/مل.

21

حاضنة ف درجة حرارة ف الثم وضعت ،حتى تمام التصلب جدا وتركت علب البتري مزجت

بعد قلبها على الوجه السفل للتؤكد من عدم حدوث تلوث قبل الزرع. ساعة 48لمدة °37

تحضر المعلق الفطري وإضافته للوسط السابق -ثالثاا

وتم زرع األوساط وحضنها وفقا لنفس ،لق الفطري الذي تم تحضره سابقا استخدم نفس المع

.(ثالثاا 6.4.2 الفقرةسابقا ) الموضحةالطرقة

أو أي دواء آخر أو أي محلول للتمدد. تم فلوكونازولتم تحضر علبة بتري شاهدة ال تحتوي

.)شاهد إجاب( مل من وسط الزرع فقط10تحضرها بإضافة

ثالث مرات. كل تجربة تأعد

من العمل السابق كما ل: ساعة 72وبعد ساعة 48تمت قراءة النتابج بعد

المبضات البض اتفطرالمثبط لنمو سجلت قمة التركز األدنى MIC حثللفلوكونازول ،

ف الوسط مرب تمثل هذه القمة أقل تركز من الفلوكونازول أدى إلى عدم حدوث أي نمو فطري

واالنحراؾ المعاري.سجلت التراكز ف كل تجربة ثم حسب المتوسط الحساب الزرع.

ؼر المنحلة لعنات الزوت العطرة المبضات البض فطراتنمو ل ثبطدراسة التأثر الم 6.4.4

80بالماء باستخدام مزج من الماء المقطر والتون

تمت الدراسة وفقا للخطوات التالة:

لكل عنة من عنات الزوت العطرة تراكز تحضر سلسلة -أوالا

بحث ،لكل عنة من عنات الزوت العطرة الثالثتم تحضر مجموعة من التمددات البدبة

400 ،300 ،200 ،100 ،50 ، 25، 10: تراكزللزوت العطرة ب ةدمحالل ممد نحصل على

مكل/مل.

ضمن لزت العطريعلى استحالب ا الذي ساعد 80مع التون الماء المقطرمزج من للتمدداستخدم

.% 0.5ع الزر مستنبتف 80وذلك بحث كون التركز النهاب للتون ،الوسط الماب

تم العمل وفقا للخطوات التالة:

أنابب. حضرت 7من من عنات الزوت العطرةعنة تتؤلؾ سلسلة التمددات لكل -

مل. 1التمددات باستخدام أنابب ابندروؾ سعة

21

وأكمل ،80مكل تون 50وعنة الزت العطري مكل من 400 األولإلى األنبوب أضؾ -

ثم مزج جدا . ،مل بالماء المقطر 1الحجم إلى

مل من 1ف زت عطريمكل 400وبذلك حصلنا على تركز بدب ضمن األنبوب ساوي -

. 80% تون 5المحل و

(.6)الجدول الموضحة ف ضرت بقة التمددات بنفس الطرقةح -

والتون ن المحالل الممددة لعنات الزوت العطرة باستخدام الماء المقطرتحضر سلسلة عارة م (6)الجدول

، الحجوم المضافة وتراكز الزوت العطرة الناتجة.80

رقم األنبوب

الحجم المضاؾ )مكل(

لزت العطريتركز ا العطريعنة الزت /مل(ل)مك

2:التون

الماء المقطر

122 222 22 122 3األنبوب

122 322 22 122 4األنبوب

122 422 22 122 5األنبوب

122 522 22 122 6األنبوب

22 622 22 22 7األنبوب

12 612 22 12 8األنبوب

12 612 22 12 9األنبوب

عنةبحث حصلنا لكل ،العطرة الثالثلكل عنة من عنات الزوت أجري العمل السابق -

.مكل/مل 400 -10 بنتراكزها تراوحت تمددات سلسلةعلى

تحضر الوسط ومزجه مع سلسلة التراكز -ثاناا

تم تحضر وسط سابورو دكستروز آؼارSDA (أوالا 6.4.2 الفقرة)كما مر سابقا.

وسطمل من 9ضافة إلممصات معقمة متاستخدو سم 6 بتري ذات قطر علباستخدمت SDA

مل من كل تركز من تراكز مجموعة 1و )المحضر والمعقم مسبقا بعد إذابته على حمام ماب(

تم تدورعلب البتري حول محورها لمتزج الوسط مع التمددات السابقة إلى كل علبة بتري.

المادة بشكل جد.

1تراوحت بن لعنات الزوت العطرةكز نهابة بالنتجة حصلنا ضمن علب البتري على ترا-

% ضمن كل علبة بتري. 0.5تركز ب 80استخدم التون مكل/مل، و 40

الحاضنة بدرجة حرارة ثم وضعت ف ،حتى تمام التصلب وتركت ، جدا علب البتري مزجت

بعد قلبها على الوجه السفل للتؤكد من عدم حدوث تلوث قبل الزرع. 48لمدة مبوة 37°

21

تحضر المعلق الفطري وإضافته للوسط السابق -ثالثاا

وتم زرع األوساط وحضنها وفقا لنفس . ي الذي تم تحضره سابقا استخدم نفس المعلق الفطر

.(ثالثاا 6.4.2 )الفقرةسابقا الموضحةالطرقة

أو أي دواء آخر أو أي محلول للتمدد. أي زت عطريتم تحضر علبة بتري شاهدة ال تحتوي

.)شاهد إجاب( مل من وسط الزرع فقط10تم تحضرها بإضافة

الزت العطري المستخلص كمة وذلك نظرا الستهالك كامل ،مرتن فقط ةالسابقت التجربة أعد

أخرى.وعدم إمكانة الحصول على كمة

ةالمراحل السابق (15)والشكل (14)وضح الشكل.

تحضر علب البتري الحاوة على مزج من الوسط الزرع والزوت العطرة المختلفة )التقاط ( 14) الشكل .الباحثة(

إضافة محتوى كل أنبوب ابندروؾ إلى علبة بتري. -3

إلى كل علبة بتري. SDAمل من وسط ;إضافة -4

22

لب البتري )التقاط الباحثة(عالمعلق الفطري إلى إضافة ( 15) الشكل

(+)عاري اللمونن الممن مل المبضات البض فطراتنمو ل ثبطدراسة التأثر الم 6.4.5

80باستخدام مزج من الماء المقطر والتون (-)والمسر

نمو المبضات البض، قمنا بدراسة تؤثر ل المثبطف محاولة لفهم تؤثر الزوت العطرة السابقة

اللمونن بنوعه الممن والمسر على نمو المبضات البض، نظرا ألن اللمونن هو المكون

.األساس الذي دخل ف تركب جمع عنات الزت العطري المستخلصة من قشور ثمارالنارنج

وحصلنا بالنتجة ضمن علب البتري على ،( 6.4.4 ةالفقرسابقا ) الموضحةأعدت نفس الطرقة

مكل/مل، وعلى 40 -1تراوحت بن عاري اللمونن بنوعه الممن والمسرملتراكز نهابة

% من التون ضمن كل علبة بتري. 0.5تركز

أي دواء آخر أو أي محلول للتمدد. تم أو لمونن لبة بتري شاهدة ال تحتوي تم تحضر ع

)شاهد إجاب(. مل من وسط الزرع فقط10تحضرها بإضافة

ت التجربة السابقة ثالث مراتأعد.

ساعة من العمل السابق، كما ل: 48تمت قراءة النتابج لكل من الزوت العطرة واللمونن بعد

المبضات البض اتفطرة التركز األدنى المثبط لنمو سجلت قمMIC تمثل ، حثلكل سلسلة

مرب هذه القمة أقل تركز من الزت العطري أو اللمونن أدى إلى عدم حدوث أي نمو فطري

23

. سجلت التراكز ف كل تجربة ثم حسب المتوسط الحساب واالنحراؾ الزرع مستنبتف

المعاري.

المبضات البض فطرات% من 50اب التركز المثبط لنمو أما بالنسبة لحس IC50 فقد تم عد

وذلك ،لكل سلسلة MICالمستعمرات الفطرة ضمن علب البتري الموافقة للتراكز األقل من قمة

. تم رسم خط بان للعالقة بن تراكز بالمقارنة مع عدد المستعمرات الفطرة للشاهد اإلجاب

،Excel 2013ستخدام برنامج االكسل با المادة المستخدمة ونسب تثبط نمو المستعمرات

% من نمو 50ثم تم حساب قمة التركز الذي سبب تثبط ،وحسبت معادلة الخط المستقم

ثم حسب المتوسط ،. سجلت التراكز ف كل تجربةبالتعوض بالمعادلة السابقةالمستعمرات

الحساب واالنحراؾ المعاري.

الدراسة اإلحصائة: 6.5

برنامج وذلك عن طرق Student’s t-test اختبار ستودنتباستخدام حصابةالدراسة اإل أجرت

Excel 2013 تم حساب قم، حث P value الثالث ةت العطروللمقارنة بن تركب عنات الز،

لفطرات لكل من العنات المدروسة واللمونن بنوعه نمو ال ثبطابها للمقارنة بن التؤثر المكما تم حس

P˂(0.05 0.05ذات أهمة عندما تكون أقل من Pواعتبرت قم تؤثر الفلوكونازول.نسبة إلى

value)

24

Results النتائج 7

جمع عنات نبات النارنج واستخالصرا 7.1

ف العنات الثالث، غ( 100/% )غ24.5 -22.6تراوحت نسبة وزن القشور إلى الثمار بن -

% 1.36-0.98تراوحت نسبة الزت العطري المستخلص من القشور بن بنما

.)7 (الجدول . غ(100)مل/

نسب كل من وزن القشور إلى وزن الثمار وحجم الزت العطري إلى وزن القشور لكل من العنات ( 7)الجدول .الثالث

العنة وتارخ جمعرا العنة األولى

28/12/2013 العنة الثانة

26/1/2014 العنة الثالثة

23/2/2014

غ 2063 غ 2797 غ 2046 وزن الثمار

غ 468 غ 672 غ 501.8 وزن القشور

حجم الزت العطري )مل(

مل 4.6 مل 9.3 مل 6.6

نسبة وزن القشور لوزن الثمار

24.5% 24% 22.6%

نسبة حجم الزت لوزن القشور

1.31% 1.36% 0.98%

النضج )كانون األول ( وعنة فترة المستخلصة ف الشهر األول منالعطري كان لعنة الزت -

،النضج )كانون الثان( مردود متقارب فترة المستخلصة ف الشهر الثان من العطري الزت

بشكل ملحوظ ، بنما انخفض المردود % على التوال1.36% و 1.31حث كان المردود

النضج )شباط( إلى قمة فترة المستخلصة ف الشهر الثالث من العطري بالنسبة لعنة الزت

.)16(% كما وضح الشكل 0.98

25

.المستخلصة خالل ثالثة أشرر من فترة النضج لكل من العنات الثالثالعطري مردود الزت ( 16) الشكل

الزت العطري:تحلل مكونات 7.2

تقاربا واضحا ف نسب GC-MSأوضح تحلل مكونات الزت العطري باستخدام جهاز -

مكونات الزت العطري لكل من العنات الثالث.

دخل ف تركب الزت العطري لقشور النارنج.مركب 15تم الكشؾ عن -

-%87.2، حث تراوحت نسبته بن جمع العنات عد اللمونن المكون األساس ف -

، كما تم الكشؾ عن البتا مرسن واللنالول واأللفا العطري % من مكونات الزت89.58

.عنة شهر كانون الثانبنن ف كافة العنات بنسب متفاوتة، بنما لم ظهر البتا بنن ف

خالت النرل ف العنة بنما لم ظهر ،عنة شهر كانون األولوظهر خالت اللنالل ف

( و 25كما توضح األشكال ) . (9)و (8)والجداول (17)هو موضح ف الشكل كما ،السابقة

لباق GC-MSجهاز ( الموجودة ف الملحق نتابج تحلل 14( و )13( والجداول )26)

العنات.

بن تركب عنات الزت حصابةإداللة ذيرق احصابة عدم وجود فبنت الدراسة اإل -

. P Value ˃ 0.05 العطري الثالث

0.00%

0.20%

0.40%

0.60%

0.80%

1.00%

1.20%

1.40%

3عنة 2عنة 1عنة

1.31% 1.36%

0.98%

ملص

خلست

لم اي

طرلع

ات

ز ال

بةس

ن/

100

غ

عنات الزت العطري

المردود

26

.النضجفترة لعنة الزت العطري المستخلصة ف الشرر الثان من GC-MSجزء من مخطط تحلل ( 17) الشكل

32

.شرر كانون الثانلعنة الزت العطري المستخلصة ف GC-MSنتائج تحلل (8)الجدول

Peak Ret. Time Start Tm End Tm m/z Area Area % Height Height % A / H Name

1 6.497 6.442 6.558 TIC 5606811 1.03 2282974 3.95 2.45 α.-pinen

2 7.736 7.683 7.792 TIC 1248146 0.23 474677 0.82 2.62 Sabinene

3 8.266 8.183 8.35 TIC 23118194 4.24 7773055 13.46 2.97 .-Myrcene

4 8.77 8.717 8.833 TIC 2085488 0.38 705287 1.22 2.95 Octanal

5 10.029 9.708 10.133 TIC 481238544 88.37 38473364 66.61 12.5 Limonene

6 10.461 10.392 10.542 TIC 2197750 0.4 767247 1.33 2.86 trans-.-ocimene

7 11.466 11.35 11.55 TIC 5183205 0.95 1168379 2.02 4.43 Cis-linalool oxide

8 12.139 12.067 12.217 TIC 1462368 0.27 468792 0.81 3.11 trans-linalool oxide

9 12.7 12.608 12.783 TIC 7486610 1.37 2367191 4.1 3.16 LinalooI

10 17.006 16.917 17.1 TIC 3055022 0.56 830069 1.44 3.68 α-Terpineol

11 17.528 17.45 17.608 TIC 1668312 0.31 486708 0.84 3.42 Decanal

12 19.508 19.433 19.592 TIC 1289849 0.24 361873 0.63 3.56 Neryl acetate

13 25.373 25.292 25.45 TIC 1710212 0.31 472166 0.82 3.62 Geranyl acetate

14 30.763 30.683 30.85 TIC 2052859 0.38 547287 0.95 3.75 BHT

15 34.106 34 34.35 TIC 5217273 0.96 576746 1 9.04 Diethyl phthalate

31

النسب المئوة لمكونات الزت العطري لقشور النارنج للعنات المستخلصة خالل األشرر الثالثة من فترة ( 9)الجدول

.النضج

% شباطعنة الثان% كانونعنة األول% كانونعنة المكون

Limonene 87.2 88.37 89.58

.-Myrcene 4.42 4.24 4.18

Linalool 1.79 1.37 1.44

Cis-linalool oxide

1.23 0.95 0.64

alpha.-pinene 1.04 1.03 0.97

Octanal 0.65 0.38 0.43

alpha-terpineol 0.62 0.56 0.49

Decanal 0.47 0.31 0.3

BHT 0.46 0.38 0.36

geranyl acetate 0.41 0.31 0.3

Trans-beta ocimene

0.4 0.4 0.41

Linalyl acetate 0.38 - -

Trans-linalool oxide

0.36 0.27 0.64

Beta-pinene 0.3 - 0.23

Sabinene 0.27 0.23 0.23

Neryl acetate - 0.24 0.24

31

المعلومات المناخة: 7.3

الت تم طلبها من مدرة األرصاد ،لمعلومات المناخةل بلػ معدل الرطوبة النسبة وفقا -

، %70( كانون األولخالل الشهر األول من فترة النضج ) ،فرع المزة المركزي -الجوة

، وخالل الشهر الثالث %63 (كانون الثانبنما بلػ خالل الشهر الثان من فترة النضج )

.%53 )شباط(

، °7.9األول كانون شهرفقد بلػ ف ل األشهر الثالثة، بالنسبة لمعدل الحرارة الجافة خال -

°11.2 شباطشهر ، وف °7.7الثان كانون شهروف

تقاربت ، بنما النسبة على مدى األشهر الثالثة تناقص معدل الرطوبةنستنتج مما سبق -

تزادت بشكل ملحوظ و الحرارة الجافة بالنسبة لشهر كانون األول وكانون الثان، تمعدال

(.10) كما وضح الجدول . خالل شهر شباط

.المعلومات المناخة خالل األشرر الثالثة الت تم جمع العنات فرا (10) الجدول

التارخ اسم المحطة معدل الرطوبة النسبة

% معدل الحرارة الجافة

)درجة مئوة(

المزة المركزي

7.9 70 2013كانون األول

7.7 63 2014 كانون الثان

11.2 53 2014شباط

للزت العطري المستخلص من قشور المبضات البض فطراتنمو ل ثبطدراسة التأثر الم 7.4

و للفلوكونازول: (-) والمسر )+( عاري اللمونن الممنمالنارنج ول ثمار

المناسب لتمدد دراسة تأثر المحالت لوحدها على نمو المبضات البض واختار المحل 7.4.1

عاريمالزت العطري واللمونن ال

كان . على مجموعتن من المحالت لتمدد كل من الزت العطري واللمونن عدة أجرت تجارب

وسط اختار محل ساعد على امتزاج كل من الزت العطري واللمونن مع الهدؾ من هذه التجارب

SDA فطر المبضات البض.نمو ل مثبط متلك هذا المحل أي تؤثر دون أن

المجوعة األولى: - أ

بشكل جد مع Methanolالمتانول و DMSOثناب متل السلفوكسد امتزج كل من -

فما بعد. SDA مستنبتوساعد على توزعها ف ،اللمونن والزوت العطرة

31

لنمو مثبطا تؤثرا Methanolالمتانول و DMSOثناب متل السلفوكسد من كل أعطى -

DMSO سلفوكسدالمتل لثناب المبضات البض، حث بلػ التركز األدنى اتفطر

( SDAمستنبت مل 100ف DMSOمل %5 )MIC 5المثبط لنمو الفطرات

.(SDAمستنبت مل 100مل متانول ف 10% )10 وللمتانول

ى نمو فطري % بالحصول عل2.5% والمتانول بتركز 1بتركز DMSOسمح استخدام -

وبالتال ال إثر المتانول و ،Controlلشاهد اإلجاب ف علبة ا للنمو الفطريمشابه

DMSO .هذه ولكن عند استخدامهما بالتراكز السابقة على نمو فطر المبضات البض

بل ، ف حل الزوت العطرةستخدامها العملا ؼر كافة تراكز منخفضة تعتبرالتراكز

جب استخدام تراكز أكبر.

:ثانةالمجوعة ال - ب

% على امتزاج الزت العطري واللمونن 0.5والمتانول بتركز DMSOلم ساعد كل من -

مع الماء المقطر، ولذلك تم استبعاد مزج المحلن السابقن من التجارب الالحقة.

باستحالب الزت العطري مع الماء المقطر، % 0.5بتركز 80سمح استخدام التون -

.SDA مستنبتوتوزعه بشكل متجانس ف

مثبط أي تؤثر %0.5بتركز 80لم كن لمزج المحل المكون من الماء المقطر والتون -

ن هذا التركز عحث كان عدد المستعمرات الفطرة الناتجة ،المبضات البض فطراتنمو ل

.لفطرة ف علبة الشاهد اإلجابلعدد المستعمرات ا ا مشابه

الزوت تمددلكمحلول %0.5بتركز 80الماء المقطر مع التون تم اختار مزجوبالتال

.العطرة واللمونن

تؤثر المحالت السابقة على عدد المستعمرات النامة. الموجود ف الملحق (15) ظهر الجدول

31

للفلوكونازول المبضات البض فطراتنمو ل ثبطاسة التأثر المدر 7.4.2

± MIC =0 المبضات البض فطراتفلوكونازول األدنى المثبط لنمو بلػ متوسط تركزال -

.ساعة من العمل 72ساعة وبعد 48مكػ/مل بعد 40

ا أن ،IC50لم تسمح الطرقة المستخدمة بتحدد - إلى أدى الفلوكونازول حث لوحظ عان

ولم تكن المستعمرات الناتجة قابلة ،ولس إنقاص عددها المستعمرات الفطرة إنقاص حجم

(.18)ساعة من العمل كما هو موضح ف الشكل 72للعد حتى بعد

.ساعة من العمل )التقاط الباحثة( 72التركز األدنى المثبط لنمو الفطرات للفلوكونازول بعد ( 18) الشكل

ؼر المنحلة لعنات الزوت العطرة المبضات البض فطراتنمو ل ثبطدراسة التأثر الم 7.4.3

80بالماء باستخدام مزج من الماء المقطر والتون

بشكل طفؾ بن عنات األشهر الثالثة الت تم خاللها IC50بنما تفاوتت قم MICتقاربت قم

استخالص الزت العطري.

MIC البض نتائج دراسة التركز األدنى المثبط لنمو المبضات - أ

MIC =40كانون األول شهر ى المثبط لنمو الفطرات لعنة التركز األدنمتوسط بلػ -

مكل/مل، وبلػ MIC =35 كانون الثانالتركز لعنة الشهر متوسط مكل/مل، بنما كان

7.07و 7.07و SD 0 وذلك بانحراؾ معاري ،مكل/مل MIC =25 شباطشهر لعنة

على التوال.

البض عند المقارنة بن التراكز الدنا المثبطة لنمو المبضات حصابةاإلالدراسة بنت -

MIC عنات الزوت العطرة المستخلصة خالل ثالثة أشهر من فترة النضج عدم وجود ف

32

عند P value كانت قم، حث العنات الثالث تؤثر بن ةحصابإذات داللة رق وافأي

. 0.05أكبر من بن جمع العنات المقارنة

البض المثبطة لنمو المبضاتالتراكز الدنا أن الفوارق بن حصابة بنت الدراسة اإلكما -

MIC لست ذات داللة الفلوكونازولمع السابقة الزوت العطرة نة من عناتع كلل

أكبر بن جمع العنات والفلوكونازول عند المقارنة P value كانت قمحث ة، حصابإ

.0.05من

حدى التجاربإنتابج (19)وضح الشكل

التجربة -ات للزت العطري المستخلص ف شرر كانون األول رالتركز األدنى المثبط لنمو الفطقمة (19) الشكل .)التقاط الباحثة( -األولى

البض المبضات ات% من مستعمرات فطر50 نتائج دراسة التركز األدنى المثبط لنمو - ب

50IC

شهرلعنة فطرات المبضات البضمستعمرات % من 50نمو التركز المثبط لمتوسط بلػ -

= IC50الثان كانون شهر/مل ، بنما كان التركز لعنة مكل IC50 =14.46األول كانون

0.21وذلك بانحراؾ معاري ،مكل/مل IC50 =8.62 شباطشهر عنة مكل/مل، ول 9.64

على التوال. 0.62و 0.38و

من المستعمرات %50حصابة عند المقارنة بن التراكز الدنا المثبطة لنمو بنت الدراسة اإل -

IC50 بن عنات الزوت العطرة المستخلصة خالل ثالثة أشهر من فترة النضج وجود

شهر كانون الثان شهر كانون األول وكل من عنت عنةبن داللة احصابة يذفارق

شهربن عنت حصابةإ داللة يذفارق أي كن هناكلم بنما ،P Value˂0.05وشباط

33

ألول أقل اكانون شهر نة أي أن تؤثر ع .P Value˃0.05 وعنة شهر شباطالثان كانون

.وشباطالثان كانون شهر من تؤثر كل من عنت

المستخدمة تسمح الطرقة لم كن باإلمكان مقارنة النتابج السابقة مع الفلوكونازول، حث لم -

كما ذكرنا سابقا . ن المستعمرات الناتجة قابلة للعدولم تك ،فلوكونازوللل IC50 بتحدد

(18)و (17)و (16)وتوضح الجداول . تؤثر العنات الثالث (11والجدول ) (20)وضح الشكل

الرقمة لعدد النتابج الموجودة ف المالحق (32) –( 31) –( 30) -( 29) -(28) -( 27)واألشكال

،المستعمرات ومعادلة الخط البان للعالقة بن تراكز الزت العطري ونسبة تثبط النمو الفطري

.IC50حث استخدمت المعادلة لحساب

واالنحراؾ المعاري لكل من عنات الزوت العطرة والفلوكونازول MICو IC50:قم 11 الجدول

األول عنة كانون المدروسةالمادة عنة كانون

الثان الفلوكونازول عنة شباط

IC50متوسط تركز )مكل/مل(

لم تم تحدده 8.62 9.64 14.46

- 0.62 0.38 0.21 االنحراؾ المعاري

MICمتوسط تركز )مكل/مل(

40 35 25 40

0 7.07 7.07 0 االنحراؾ المعاري

.يلكل من عنات الزت العطري الثالث مع االنحراؾ المعار IC50و MICمتوسط قمة ( 20) الشكل

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

عنة شباط عنة كانون الثان عنة كانون األول

كل م

يطر

لع ات

ز ال

ن م

مةخد

ستلم

از

اكتر

ال/

مل

عنات الزوت العطرة

MIC

IC50

34

(+)عاري اللمونن الممن مل المبضات البض فطراتنمو ل ثبطدراسة التأثر الم 7.4.4

80باستخدام مزج من الماء المقطر والتون (-)والمسر

MIC البض نتائج دراسة التركز األدنى المثبط لنمو المبضات - أ

المبضات البض اتفطر لنمو األدنى المثبط (-)بلػ متوسط تركز اللمونن المسر -

MIC=13.33 كما ثبط اللمونن الممن النمو 5.77مكل/مل وبلػ االنحراؾ المعاري ،

االنحراؾ المعاري، وبالتال لس هناك أي فرق نفس قمة بو بنفس تركز اللمونن المسر

.MICكز اتراالعتماد على بالتؤثر بن اللمونن الممن والمسر عند المقارنة ب

البض حصابة عند المقارنة بن التراكز الدنا المثبطة لنمو المبضاتبنت الدراسة اإل -

MIC داللة يذوجود فارق والفلوكونازول (-)والمسر )+( من اللمونن الممن كل لدى

أي أن التؤثر المثبط لنمو فطر ،P˂0.05 والفلوكونازول بنوعه اللموننبن ةحصابإ

.من تؤثر الفلوكونازول أكبرالمبضات البض بالنسبة للمونن هو

من كل لدى MIC البض بن التراكز الدنا المثبطة لنمو المبضات إحصابا عند المقارنة -

لعنة الزت Pكانت قمة ،اللمونن الممن والمسر وعنات الزوت العطرة الثالث

هذا عن و، حصابةإداللة اذ ا أي أن هناك فارق 0.05 أصؽر من لشهر كانون األولالعطري

للمونن الممن والمسر أكبر من تؤثر المثبط لنمو فطر المبضات البض لكل من اأن التؤثر

لشهر لعنة الزت العطري Pبنما كانت قمة .لشهر كانون األولعنة الزت العطري

ذاتق فوار أنه ال وجد أي، 0.05 أكبر من لشهر شباطالزت العطري لعنة و كانون الثان

.للشهرن السابقناللمونن بنوعه وعنات الزوت العطرة تؤثر بن حصابةإداللة

البض المبضات ات% من مستعمرات فطر50 نتائج دراسة التركز األدنى المثبط لنمو - ب

50IC

IC50 4.49 =% من المستعمرات الفطرة 50المثبط لنمو لمونن المسر التركز بلػ -

مكل/مل IC50 2.51 = بلػ للمونن الممنبنما . 0.28مكل/مل وبلػ االنحراؾ المعاري

.0.13وبلػ االنحراؾ المعاري

ة بن تؤثر اللمونن الممن والمسر حصابإداللة يذرق احصابة وجود فبنت الدراسة اإل -

P˂0.05، من أكبروبالتال فإن التؤثر المثبط للمونن الممن على نمو المبضات البض

. IC50تراكز باالعتماد علىوذلك عند المقارنة التؤثر المثبط للمونن المسر

من اللمونن الممن كل لدى IC50بن تراكز عند المقارنةحصابة راسة اإلبنت الد -

حصابة بن كل من إوجود فوارق ذات داللة والمسر وعنات الزوت العطرة الثالث

35

من أجل Pعنات الزوت العطرة الثالث، حث كانت قمة والمسر والممن اللمونن

.0.05جمع العنات أصؽر من

بنما توضح الجداول هذا التؤثر، (23)و (22)و (21)األشكال ( كما توضح 12وضح الجدول )

النتابج المالحق الموجودة ف (38( و )37(، )36) (،35) (،34)، (33( واألشكال )20( و )19)

ونسبة تثبط النمو اللموننكز لخط البان للعالقة بن ترومعادلة ا ،الرقمة لعدد المستعمرات

.IC50الفطري حث استخدمت المعادلة لحساب

لكل من اللمونن الممن والمسر والفلوكونازول واالنحراؾ المعاري MICو IC50قم (12) الجدول

الفلوكونازول اللمونن الممن اللمونن المسر المادة المدروسة

IC50متوسط تركز )مكل/مل(

لم تم تحدده 2.51 4.49

- 0.13 0.28 االنحراؾ المعاري

MICمتوسط تركز )مكل/مل(

13.33 13.33 40

0 5.77 5.77 االنحراؾ المعاري

)التقاط الباحثة( - لتجربة الثالثةا - التركز األدنى المثبط لنمو الفطرات للمونن )+(( 21) الشكل

36

الباحثة(لتقاط ا) - ةالثلتجربة الثا - (-للمونن ) اترالفطالتركز األدنى المثبط لنمو ( 22) الشكل

يلكل من اللمونن الممن والمسر مع االنحراؾ المعار IC50و MICمتوسط قمة ( 23) الشكل

0

2

4

6

8

10

12

14

16

18

20

-لمونن +لمونن

كل م

دمخست

لم از

ركلتا

/ مل

اسم العاري

MIC

IC50

42

وهذا ،لنمو فطر المبضات البض تمتلك تؤثرا مثبطا جمعها عنات الزت العطرينستنتج مما سبق أن

، كما أن هذا التؤثر MICعند المقارنة بن تراكز التؤثر ال ختلؾ حسب الشهر الذي تم فه جن النبات

كان التؤثر المثبط لنمو ، فقدIC50تراكز باالعتماد على أما عند المقارنة لتؤثر الفلوكونازول. مساوي

ن هذا التؤثر فوق تؤثر عنة متساوا وكاط وشهر شبا كانون الثانشهر البض لعنت فطر المبضات

.األول كانون شهر

ؤثر الفلوكونازول وفوق تؤثر كما متلك اللمونن بنوعه تؤثرا مثبطا لنمو فطر المبضات البض فوق ت

وذلك عند وشهر شباط شهر كانون الثان ، ولكنه مساوي لتؤثر كل من عنتشهر كانون األولعنة

فقد كان التؤثر ، IC50تراكز باالعتماد علىأما عند المقارنة .MICتراكز باالعتماد على المقارنة

من تؤثر اللمونن المسر، كما كان تؤثر أكبرالمثبط للمونن الممن على نمو المبضات البض

.(24الشكل )كما وضح .اللمونن بنوعه أكبر من تؤثر عنات الزوت العطرة الثالث

IC50و MICمقارنة التأثر المثبط لنمو الفطرات لجمع العنات باالعتماد على تراكز ( 24) الشكل

0

5

10

15

20

25

30

35

40

45

-اللمونن +اللمونن الفلوكونازول عنة شباط عنة كانون الثان عنة كانون األول

كل م

زرك

لتا

/كػ

مل،

م/

مل

اسم المادة المختبرة

MIC

IC50

41

:Discussionالمناقشة 8

أشهر إن الهدؾ من هذا البحث هو دراسة تؽر مردود و تركب الزت العطري لثمار النارنج خالل

فطر المبضات نمو ل ثبطدراسة التؤثر المإلى باإلضافة النضج الثالثة وذلك تبعا لتؽرات المناخ

اللمونن )المركب األساس الذي دخل ف تركب و كل من عنات الزت العطري الثالثالبض ل

وذلك بالمقارنة مع الفلوكونازول. الزت(

لتؽرات المناخ: دراسة تؽر تركب الزت العطري تبعاا 8.1

استخالص عنات نبات النارنج: 8.1.1

0.98بن ة من فترة النضجتراوح مردود الزت العطري لقشور ثمار النارنج خالل األشهر الثالث-

1.36%.

تفاوتا كبرا ف مردود الزت العطري المستخلص من قشور وجدنا ،بالعودة إلى الدراسات العالمة

ة من العالم.مختلف مناطق المجراة فاألبحاث بن ثمار النارنج

الزت العطري ف مع مردود ا كان مردود الزت العطري ف بعض الدراسات العالمة متوافق

-0.8بن ،ف تونس .Boussaada et al الدراسة الت أجراها دراستنا، حث تراوح المردود ف

.15 % 1.67 ف الونان .Sarrou et alف دراسة المردود كما كان ،1.3%71

الزت العطري ف أقل بكثر من مردود لقشور النارنج ف دراسات أخرى كان مردود الزت العطري

، وتراوح 72 %0.3ف المؽرب ESSADIK et al. استنا، حث كان المردود ف دراسةدر

.73 %0.46-0.12بن ،ونسف ت et al.Bourgouالمردود ف الدراسة الت أجراها

دراستنا، الزت العطري ف العطري ف بعض الدراسات أكبر بكثر من مردودوكان مردود الزت

وبلػ ف دراسة ،20 %2.5 -2.1ف سورا .Odehet alدراسة ف حث بلػ المردود

Sharma et al. 74 %2 ف الهند.

إلى و ،جن النبات البلد الذي تم فهف والتربة المناخ اختالؾ إلىف تفاوت المردود السبب عودقد

عن درجات الحرارة دراستهاختالؾ درجات الحرارة والرطوبة ف السنة الت أجرى بها الباحث

المستعمل من النبات وطرقة استخالصه، القسموكذلك .دراستنابها توالرطوبة ف السنة الت أجر

إلى ،ف تونس et al.Bourgouفقد عود سبب الحصول على مردود منخفض جدا ف دراسة

مع مالحظة أن الطبقة ، (Albedo) والبضاء (Flavedo) البرتقالة القشور طبقةاستخدام الباحث

41

دراسةبنما استعمل الباحث ف .73 البضاء ال تحتوي على زت عطري مما سبب انخفاض المردود

Sharma et al. 74الطازجة مما أدى إلى ارتفاع المردود ترنج المجففة ولسالناف الهند قشور .

على مردود أ )شهر كانون الثان( الصها ف الشهر الثان من فترة النضجأعطت العنة الت تم استخ

هو )شهر شباط( من فترة النضج عنة الشهر الثالثبنما كان مردود ،%(1.36للزت العطري )

المناخة بن األشهر الثالثة، الحظنا انخفاض درجة ولدى العودة للتؽرات %(.0.98األقل )

( %63وزادة الرطوبة النسبة ) °(7.7معدل الحرارة الجافة سجل ) الثانشهر كانون الحرارة ف

ارتفاع درجة الحرارة الحظنا ،. من جهة أخرىشهر كانون األول وشهر شباطمع مقارنة بالوذلك

. شهر شباط( ف %53النسبة ) وانخفاض الرطوبة°( 11.2معدل الحرارة الجافة سجل )

حث تساعد الحرارة المنخفضة والرطوبة المرتفعة . تبخر الزت العطريالختالؾ نسبة عزى ذلك

الحرارة و درجة بنما تزداد نسبة تبخر الزت العطري بارتفاع ،على منع تبخر الزت العطري

انخفاض الرطوبة.

ف استونا على نباتات من الفصلة Olle et al كانت هذه النتابج متوافقة مع دراسة أجراها

.75 الحرارة حث أكد أن نسبة الزت العطري ف النبات تزداد مع انخفاض درجة ،ظلةالم

تحلل مكونات الزت العطري: 8.1.2

أظهر تحلل العنات باستخدامGC-MS أن المكون األساس للزت العطري لقشور النارنج هو

، له البتامرسن العطري % من مكونات الزت89.58 -87.2 حث تراوحت نسبته بن ،اللمونن

.%4.42-4.18بنسبة تراوحت بن

اللنالول، أوكسد اللنالول، منها: كما احتوى الزت العطري على مركبات مختلفة بنسب متفاوتة(

.ألفا بنن، سابنن(

.Soković et alفف دراسة قامت بها . جاءت هذه النتجة متوافقة مع العدد من الدراسات العالمة

وف دراسة قام . 1% 90كان المكون األساس لزت قشور النارنج هو اللمونن بنسبة ،ف صربا

كان اللمونن هو المكون الربس لزت قشور النارنج بنسبة ،ف المؽرب .ESSADIK et alبها

.72% 2.52له اللنالول بنسبة ،% 90.90

البتا مرسن نسبة و ،%98.66ف البرازل .Costa et alبنما كانت نسبة اللمونن ف دراسة

0.53% 35.

41

-0.3واأللفا بنن ) ،%(92.2-87ف تونس ) Boussaada et al شكل اللمونن ف دراسة

راوحت نسبة اللمونن كما ت . 71 %(1.3-0.6%(، واللنالول )1.7-1.4%(، والبتامرسن )0.4

.20 %(97.5 -96ف سورا ) .Odeh et alالت قام بها ف الدراسة

نالحظ أن المكون األساس ف نتابج جمع الدراسات السابقة هو اللمونن مع اختالفات ف نسبته قد

جراء البحث.إتعود إلى تؤثر العوامل الببة والتربة ف مكان

نالحظ أن ،نسب اللمونن ف دراستنا خالل األشهر الثالثةالذي وضح ( 9)الجدول بالعودة إلى

المكونات باق تناقصوكون ذلك على حساب ،اتاللمونن زداد بشكل طفؾ مع زادة نضج النب

.الت تنخفض بشكل واضح عند زادة اللمونن

أن اللمونن زداد على الت بنت Boussaada et al 71 دراسةجاءت هذه النتجة متوافقة مع

ران أكد تزاد إف .Rowshan et alف دراسة أخرى أجراها حساب تخرب اللنالول ومشتقاته.

نسبة اللمونن ف قشور ثمار النارنج مع زادة نضج النبات لصل إلى أعلى مستوى عند اكتمال

أن اللمونن صل إلى أعلى ،ف تونس et al.Bourgouكما بنت دراسة . 76 نضج النبات

.73مستواته ف المرحلة األخرة من فترة النضج

للزت العطري المستخلص من قشور المبضات البض فطراتنمو ل ثبطدراسة التأثر الم 8.2

و للفلوكونازول: (-) والمسر )+( عاري اللمونن الممنمنبات النارنج ول

:عاريمالاختار المحل المناسب لتمدد الزت العطري واللمونن 8.2.1

أظهرت النتابج عدم إمكانة استخدام كل من ثناب متل السلفوكسدDMSO والمتانول كمحل

لنمو فطر المبضات البض، حث بلػ التركز األدنى المثبط لنمو مثبطا نظرا المتالكهما تؤثرا

عندما كون بنما لم كن له أي تؤثر ،MIC = 5%لثناب متل السلفوكسد البض المبضات

البض وبلػ التركز األدنى المثبط لنمو المبضات، % أو أقل1تركزه النهاب ف الوسط الزرع

بنما لم كن له أي تؤثر عندما كون تركزه النهاب ف الوسط الزرع ،MIC = 10%للمتانول

على شكل مزج مع الماء قة استخدام المحالت الساب كما أوضحت النتابج عدم إمكانة . % أو أقل2.5

تساعد على امتزاج الزت العطري واللمونن مع الماء المقطر ضمن التراكز النظرا لكونها المقطر

المستخدمة.

الت أجرت ف الوالات المتحدة Randhawa et alجاءت هذه النتجة بالتوافق مع دراسة

% من 10حث أكد أن تركز لتحري تؤثر ثناب متل السلفوكسد المثبط لنمو الفطرات، األمركة

41

% أي 1.25بنما لم كن للتركز ،ثناب متل السلفوكسد سبب تثبطا كامال لنمو المبضات البض

.77تؤثر

Artemisiaعلى نبات الشح الحول ف الكامرون Desiree et al دراسة أخرى أجراها ف

annua ، ضات البض زداد فطر المبلنمو المثبط الزت العطري لنبات الشح الحول تؤثرأكد أن

، Agar diffusion باآلؼار%، وذلك عند استخدام طرقة االنتشار 10بتركز DMSOبإضافة

بتركز DMSO ملم، وبلػ مع استخدام DMSO 30قطر التثبط للزت العطري بدون بلػحث

.78ملم %36 10

على 0.5 مستنبت الزرعإلى الماء بحث كون تركزه النهاب ف 80ساعدت إضافة التون %

بشكل متجانس دون SDAوسط استحالب الزت العطري بشكل جد مع الماء ومن ثم امتزاجه مع

.أن كون له أي تؤثر مثبط لنمو فطر المبضات البض

حث بن أن إضافة ،ف الابان .Inouye et alجاءت هذه النتجة متوافقة مع الدراسة الت أجراها

الزوت العطرة )منها اللمونن واللنالول وألدهد مكونات من إلى العدد% 0.5بتركز 80التون

د باآلؼار )وهوذلك عندما استخدمت طرقة التمد MICأي تؤثر على تركز االقرفة( لم كن له

.79نفس الطرقة المتبعة ف بحثنا(

باستخدام طرقة التمدد المكرون بالمرق ف الابان Matsuzaki et alف دراسة أجراها

Broth microdilution method ، أوضح أن التركز األدنى المثبط لنمو الفطراتMIC

نبات اكلل وذلك بالنسبة للعدد من الزوت العطرة المستخلصة من 80نخفض عند إضافة التون

تؤثر أنمما ؤكد ،لزت الكافور MICضافته أي تؤثر ف تركز إللم كن بنما ،الجبل والخزامى

وحسب الطرقة المتبعة لتقدر حسب الزت العطري المستخدمختلؾ MICعلى تركز 80التون

MIC 80.

لفطرات للفلوكونازولنمو ال ثبطدراسة التأثر الم 8.2.2

فطر المبضات البضبلػ متوسط تركزالفلوكونازول األدنى المثبط لنموMIC =40 ±0 .مكػ/مل

الفلوكونازول األدنى الذي بن أن تركز ، ELLIS et alجاءت هذه النتجة بالتوافق مع مرجع

.81مكػ/مل 64-0.03بن المثبط لنمو فطر المبضات البض تراوح

42

ؼر المنحلة لعنات الزوت العطرة المبضات البض فطراتنمو ل ثبطدراسة التأثر الم 8.2.3

80باستخدام مزج من الماء المقطر والتون بالماء

ثمار النارنج لألشهر الثالثة تؤثرا مثبطا لنمو فطر أظهرت جمع عنات الزت العطري لقشور

تؤثر الفلوكونازول، ولم كن هناك دون وجود فوارق ذات داللة احصابة معالمبضات البض

، وذلك عند المقارنة باالعتماد على بن تؤثر العنات حسب شهر الجن ق ذات داللة احصابةاروف

.MICتراكز

المبضات البض للزت اتفطرنمو ل ثبطالدراسات العالمة التؤثر الممن ظهرت نتابج العدد أ

وأعطى الزت السابق تؤثرا مثبطا لنمو فطر ،العطري المستخلص من أزهار وأوراق النارنج

،13 30(Nystatin)النستاتن المستخدم المعاريالمبضات البض قارب تؤثر مضاد الفطرات

.ثمار النارنج طري المستخلص من قشوربنما لم تم التطرق إلى تؤثر الزت الع

،على الزت العطري المستخلص من قشور النارنجف الهند et al. Vermaف دراسة أجراها

Aspergillus nigerأظهر الزت العطري طؾ تؤثر واسع ضد فطري الرشاشة السوداء

ة رب المبضات فطرات تؤثره على، بنما لم درس Geotrichum candidumوالمبضات الت

ف تركا على مجموعة زوت عطرة .KIRBAŞLAR et alوف دراسة أجراها . 31البض

مثبطا لنموأظهر الزت العطري لقشور النارنج تؤثرا ،Citrusمستخلصة من جنس الحمضات

عاريمال مضاد الفطرات المبضات البض بقطر تثبط أقل من قطر التثبط الناتج عن اتفطر

وذلك عند استخدام طرقة االنتشار باألقراص ،(Ketoconazoleكونازول والكت)المستخدم

Paper disk diffusion 82.

عند المقارنة باالعتماد على تراكزIC50 بن عنات الزوت العطرة المستخلصة خالل ثالثة أشهر

شهر كانون الثان أقل من تؤثر كل من عنت كان تؤثر عنة شهر كانون األولمن فترة النضج

وشباط.

شهر ف عنة بشكل طفؾ Limonene نالحظ تناقص نسبة اللمونن (9)بالعودة إلى الجدول

خالت النرل مركب ونالحظ عدم تواجد كانون الثان وشباطاألول بالمقارنة مع عنت كانون

Neryl acetate خالت اللنالل مركب تواجد ، بنما األولكانون شهر عنة فLinalyl

acetate باإلضافة إلى اختالؾ طفؾ ف نسب باق المركبات الثانوة العنة السابقةفقط ف ،

الداخلة ف تركب الزت العطري.

43

ف تونس على الزت العطري المستخلص من أوراق النارنج، .Ellouze et alف دراسة قام بها

ؽرات أكد أن االختالؾ ف نسب المركبات الثانوة الداخلة ف تركب الزت العطري نتجة الت

.30العطري لهذا الزت Antimicrobial effectالمضادة للمكروبات المناخة إثر على الفاعلة

اللمونن الممن )+( لمعاري المبضات البض فطراتنمو ل ثبطدراسة التأثر الم 8.2.4

80( باستخدام مزج من الماء المقطر والتون -والمسر )

أظهرت النتابج أن لكل من اللمونن الممن والمسر تؤثرا مثبطا لنمو فطرالمبضات البض بشكل

.من تؤثر الفلوكونازولأكبر وكان هذا التؤثر (،MIC= 13.33 ± 5.77 µl/ml) متشابه

وجدنا أن التؤثر المثبط للمونن الممن على نمو ،وبمقارنة التراكز المثبطة لنصؾ المستعمرات

من التؤثر المثبط للمونن المسر كبر( أIC50= 2.51 ± 0.13 µl/mlالمبضات البض )

(IC50= 4.49 ± 0.28 µl/ml).

البض حث بلػ التركز األدنى المثبط لنمو المبضات ،جاءت هذه النتجة متوافقة مع دراسات عالمة

.MIC= 8 µg/ ml 83ف تركا .ORHAN et alف دراسة أجراها )+( للمونن الممن

ا ران أن لكل من اللمونن الممن والمسر تؤثرإف دراسة أجراها ف .Omran et alكما أوضح

وهذا ال توافق مع نتجة كان أكبر. لمونن المسرالتؤثر ، ولكنلنمو المبضات البض ا مثبط

حث قام ،دراستنا، ربما عود السبب ف ذلك إلى اختالؾ الطرقة الت اتبعها الباحث عن طرقة بحثنا

Agar wellلفطرات بطرقة االنتشار ف آبار اآلؼار نمو ال المثبطالباحث بدراسة التؤثر

diffusion وبطرقة االنتشار باألقراصPaper disk diffusion، ه التمدد ف فطرقتنا أما

أضا إلى اختالؾ مصدر فطرالمبضات البض السبب ، وقد عود Agar dilutionاآلؼار

.84 بنما تم عزله من البراز ف دراستنا ،ف الدراسة السابقة من المهبل المستخدم، حث تم عزله

الزت العطري ةعنكان التؤثر المثبط لنمو الفطرات للمونن بنوعه الممن والمسر فوق تؤثر

نت الزت العطري ، بنما كان التؤثر مشابه لتؤثر كل من عكانون األول شهرالمستخلصة ف

، أما عند MICوذلك عند المقارنة باالعتماد على تراكز شباطالثان و كانون شهرالمستخلصة ف

فقد وجد أن تؤثر اللمونن بنوعه المثبط لنمو المبضات IC50المقارنة باالعتماد على تراكز

أن المواد األخرى الداخلة على مما دل البض أكبر من تؤثر جمع عنات الزوت العطرة الثالث.

ف تركب الزت العطري قللت من فاعلة اللمونن المثبطة لنمو فطر المبضات البض.

فطر نمو ل المثبطالتؤثر ف الوالات المتحدة األمركة على .Rao et al ف دراسة أجراها

carvacrolو الكارفاكرول oregano oil العطري زت األورؽانوكل من ل البض المبضات

44

األورؽانو زت من فاعلة لة أكبرعا، كان الكارفاكرول ذو ف(العطري )المكون الربس للزت

ي )تثبط(وجود تؤثر Rao حث أكد ،العطري بن الكارفاكرول antagonist effect تضاد

85والمواد األخرى الداخلة ف تركب الزت.

لفطرات لكل من نمو ال المثبطف صربا على التؤثر .SOKOVIĆ et alأضا ف دراسة أجراها

ة الحمراء عرو الزت العطري المستخلص من قشور ثمار النارنج واللمونن وذلك على فطرات الش

Trichophyton rubrumالمثبطة للفطر أكبر من فاعلة الزت العطري ، وجد أن فاعلة اللمونن

μl/ml 8 ( MICلزت العطري )، بنما كانت لμl/ml ( MIC =5)للمونن MIC ةحث كانت قم

86

لكل من الزت العطري لقشور ثمار النارنج واللمونن فطر المبضات البضإن آلة التؤثر المثبطة ل

رست ال تزال ؼر معروفة بشكل دقق، ولكن لبعض لفطر المبضات البض ةآلة التؤثر المثبطد

، وبنت هذه الدراسات أن الزوت العطرة تعتمد فاعلتها عدة ف أبحاث عالمة الزوت العطرة

الؽشاء الستوبالسم للخلة الفطرة. التؤثر علىلى المضادة للفطرات بشكل ربس ع

ف البرازل على الزت العطري المستخلص من أوراق .Freires et alفف دراسة أجراها

)المركب األساس الذي دخل ف تركبه هو اللنالول .Coriandrum sativum Lالكزبرة

linalool)، المضاد لفطر المبضات البض تعتمد بشكل ربس أن آلة تؤثر هذا الزت العطري أكد

تإدي تؽر نفوذة الؽشاء وفتؼشاء الخلة الفطرة، ergosterol رؼوسترولإعلى االرتباط مع

.63 الخلة الفطرةموت إلى بالتال

نبات ف الصن على الزت العطري المستخلص من بذور .Chen et alوف دراسة أخرى أجراها

بث carvoneدخل ف تركبه بشكل أساس الكارفون والذي ) Anethum Graveolens الش

ة الفطرة خللل الستوبالسم ؽشاءالأكد أن هذا الزت العطري ستهدؾ بشكل أساس (واللمونن

. 87لفطر المبضات البض

تنبع أهمة دراستنا من كونها سلطت الضوء بشكل أكبر على مكونات الزت العطري لقشور ثمار

الزت العطري وتركبه حسب شهر جن العنة مردودالذي نمو ف سورا واختالؾ النارنج

،هذا الزت العطريل البضتؤثر المثبط لنمو فطر المبضات ال والتؽرات المناخة، كما درست

والذي تمت دراسته بطرقة التمدد باآلؼارالت سمحت لنا بحساب أدنى تركز من الزت العطري

بحساب أدنى تركز من أضا هذه الطرقة لنا كما سمحت، MICالذي سبب تثبطا كامال لنمو الفطر

45

سمحت هذه الدراسة بتفسر تؤثر ، وIC50 ثبط لنمو نصؾ المستعمرات الفطرةالزت العطري الم

الزت العطري لقشور النارنج المثبط للمبضات البض والذي عود بشكل أساس لوجود اللمونن

.فطر المبضات البضرا مثبطا لالذي ثبت امتالكه تؤث

Conclusionsالستنتاجات ا 9

على المجموع من أشجار تنمو ف مدنة دمشق حتوي الزت العطري لقشور ثمار النارنج .1

%.1.36-0.98بن نسبة من الزت العطري تتراوح

الجافة وارتفاع الرطوبة النسبة، ت العطري مع انخفاض درجة الحرارةزداد مردود الز .2

بنما تإدي الحرارة المرتفعة والرطوبة المنخفضة إلى تناقص المردود.

د نسبته مع ازداد نضج النباتوتزدا ،عتبر اللمونن المكون األساس لزت قشور النارنج .3

.على حساب تناقص باق المكونات

وإن الوقت المثال . األول وحتى شهر شباطمن شهر كانون ابتداءا بدأ نضج ثمار النارنج .4

مردود أكبر من الزت فإذا كان الهدؾ ؛نبات ختلؾ حسب الهدؾ المرجو منهلجن ال

)وهو شهر لرطوبة األكثر لولحرارة لمتوسط األدنى ال يالنبات ف الشهر ذ جنىفالعطري

جنى فنسبة أكبر من اللمونن من الجن ، أما عندما كون الهدؾكانون الثان ف دراستنا(

حث كون اللمونن قد وصل إلى ،)شهر شباط(النبات ف الشهر األخر من فترة النضج

مستواته العلا.

% عند 2.5من % والمتانول بتركز أعلى 1بتركز أعلى من DMSOال مكن استخدام .5

لنمو هذا ا مثبط ا ما متلكان تؤثرفطر المبضات البض نظرا لكونهنمو ل ثبطدراسة التؤثر الم

التؤثر حسب نوع الفطر وحساسته، كما ال مكن وختلؾ هذا ،التراكز السابقةبالفطر

استخدامهما بتراكز أقل من ذلك على شكل مزج مع الماء المقطر ألنها ال تساعد على امتزاج

الزت العطري مع الماء ضمن التراكز المنخفضة.

% على استحالب 0.5بحث كون تركزه النهاب ف الوسط 80التون ساعدت إضافة .6

الزت العطري وتوزعه بشكل متجانس ضمن وسط سابورو دكستروز آؼار دون أن كون له

ضمن التركزالمستخدم. البض فطر المبضات لنمو مثبط أي تؤثر

46

ه ف أي شهر من أشهر متلك الزت العطري المستخلص من قشور ثمار النارنج الذي تم جن .7

الفلوكونازول، ولكنه أقل من تؤثر شابه تؤثرالنضج تؤثرا مثبطا لنمو فطر المبضات البض

.اللمونن

متلك اللمونن الممن والمسر لتفسر تؤثر الزت العطري ووجد أنه تؤثر تمت دراسة .8

وجد عند دراسة من تؤثر الفلوكونازول، و أكبرتؤثرا مثبطا لنمو فطر المبضات البض

IC50 المسر. تؤثر اللمونن من أكبرتؤثر اللمونن الممن أن

تساهم المكونات األخرى الداخلة ف تركب الزت العطري بانخفاض تؤثر اللمونن المثبط .9

.المبضات البض فطر لنمو

52

المقترحات والتوصات 10Suggestions and Recommendations

دراسة التركب الكماب والمردود والتؤثر المثبط لنمو فطر المبضات البض للزوت .1

ومقارنتها مع ،الذي نمو ف سوراالعطرة المستخلصة من أزهار وأوراق نبات النارنج

الزت العطري لقشور الثمار.تؤثر

دراسة و ،ناطق الساحلة والجبلةمثل المجن ثمار النارنج من مناطق أخرى ف سورا .2

للزت العطري التركب الكماب والمرود والتؤثر المثبط لنمو فطر المبضات البض

.ط ذلك بالعوامل المناخة والتربةثمار النارنج ورب المستخلص من قشور

دراسة تؤثر الزت العطري المستخلص من قشور ثمار النارنج المثبط لنمو فطرات .3

وؼرها. Aspergillus مثل الرشاشاتأخرى

دراسة التؤثر المثبط لنمو فطر المبضات البض للخالصات المختلفة للقشرة البضاء .4

.(Albedo)للنارنج

مع الزت العطري لقشور ثمار النارنجمشاركة المكونات األخرى الداخلة ف تركب .5

واحد، بل عن مشاركة مركباتبعضها، فقد الكون التؤثر ناتجا بالضرورة عن مركب

.عدة

51

ملخص البحث باللؽة العربة: 11

جمعت ثالث عنات من ثمار النارنج من مدنة دمشق خالل فترة نضج النبات وتم استخالص الزت

أجرت عملة تحلل مكونات الزت العطري للعنات .ي من قشور الثمار للعنات الثالثالعطر

ة ومتحري مطاؾ الكتلة . تم تحدد GC-MSالثالث السابقة باستخدام جهاز الكروماتوؼرافا الؽاز

%(.89.58 - 87.2وكان اللمونن هو المكون األساس ) ا ،مركب 15حوال

لفطرات وذلك على فطر المبضات البض باستخدام طرقة التمدد ف نمو ال ثبطالتؤثرالم تمت دراسة

كذلك و ،لكل من عنات الزوت العطرة المستخلصة خالل األشهر الثالثة Agar dilutionاآلؼار

عاري المضاد للفطرات موذلك بالمقارنة مع ال، بنوعه الممن والمسرالمعاري اللمونن

)الفلوكونازول(.

فطرات المبضات نمو ل مثبطا ت الثالثة تؤثرا قوا الزت العطري لقشور ثمار النارنج للعناأظهر

، بنما كان تؤثر اللمونن بنوعه أكبر من تؤثر Fluconazole تؤثر الفلوكونازول شابهالبض

الفلوكونازول.

51

ملخص البحث باللؽة االنكلزة 12

Three samples of the Citrus aurantium L. fruits were collected from

Damascus during ripening stage and their peel oils were extracted.

The three samples of essential oils were analyzed by GC-MS. About

15 compounds were identified. Limonene was the main component

( 87.2 -89.58%).

Antifungal effect was determined on Candida albicans by Agar dilution

method for three samples of essential oils and the standard Limonene

(R-S), compared with the standard antifungal (Fluconazole). The Citrus

aurantium peel oils for three samples showed strong antifungal effect

against Candida albicans, similar to the effect of fluconazole, and the

two types of Limonene showed antifungal effect, more than the effect of

Fluconazole.

51

:Referencesالمراجع 13

1. Soković M, Glamoĉlija J, Marin P, Brkić D, Van Griensven L. Antibacterial Effects of the Essential Oils of Commonly Consumed Medicinal Herbs Using an In Vitro Model. Molecules. 2010;15:7532–7546.

2. Bassolé IHN, Juliani HR. Essential oils in combination and their antimicrobial properties. Molecules. 2012;17(4):3989–4006.

3. Hyldgaard M, Mygind T, Meyer RL, Debabov D. Essential oils in food preservation : mode of action , synergies , and interactions with food matrix components. Front. Microbiol. 2012;3:1–24.

4. Tumane P M, Meshram V G, Wasnik D D. Comparative study of antibacterial activity of peel extracts of citrus aurantium L. (bitter orange) and citrus medical (lemon) against clinical isolates from wound infection. Int J Pharm Bio Sci. 2014;5(1):382–387.

5. Meléndez P a, Capriles V a. Antibacterial properties of tropical plants from Puerto Rico. Phytomedicine. 2006;13(4):272–276.

6. Dewick PM. Secondary metabolism: the building blocks and construction mechanisms. In: Medicinal Natural Products. 3rd ed.; 2009:7–38.

7. Hussain MS, Fareed S, Ansari S, Rahman MA, Ahmad IZ, Mohd S. Current approaches toward production of secondary plant metabolites. J Pharm Bioallied Sci. 2012;4(1):10–20.

8. Crozier A, Clifford MN. Terpenes. In: Plant Secondary Metabolites Occurrence , Structure and Role in the Human Diet.; 2006:47–94.

9. Bakkali F, Averbeck S, Averbeck D, Idaomar M. Biological effects of essential oils--a review. Food Chem. Toxicol. 2008;46(2):446–75.

10. Tracy T, Kingston R. Citrus aurantium. In: Herbal Products: Toxicology and Clinical Pharmacology. 2nd ed. Humana Press Inc.; 2007:233–244.

11. Evans WC, Evans D, Trease GE. Volatile oils and resins. In: Trease and Evans Pharmacognosy. 15th ed. W.B. Saunders; 2002:253–285.

51

12. Suryawanshi JAS. An overview of Citrus aurantium used in treatment of various diseases. African J. Plant Sci. 2011;5(7):390–395.

13. Haj Ammar A, Bouajila J, Lebrihi A, Mathieu F, Romdhane M, Zagrouba F. Chemical composition and in vitro Antimicrobial and Antioxidant Activities of citrus aurantium L. Flowers Essential Oil (Neroli Oil). Pakistan J. Biol. Sci. 2012;15(21):1034–1040.

14. Gruenwald J, Brendler T, Jaenicke C. Bitter Orange. In: PDR for Herbal Medicines.; 2000:338–339.

15. Sarrou E, Chatzopoulou P, Dimassi-Theriou K, Therios I. Volatile constituents and antioxidant activity of peel, flowers and leaf oils of Citrus aurantium L. growing in Greece. Molecules. 2013;18(9):10639–47.

16. Gaur R, Azizi M, Gan J, et al. Herbal Drugs and Herbal Drug Preparations:Bitter-Orange Flower Volume III. In: British Pharmacopoeia.; 2009:6787–6790.

17. Ramful D, Bahorun T, Bourdon E, Tarnus E, Aruoma OI. Bioactive phenolics and antioxidant propensity of flavedo extracts of Mauritian citrus fruits: potential prophylactic ingredients for functional foods application. Toxicology. 2010;278(1):75–87.

18. Zapata AD, Gaviria CA, Cavalitto SF, Hours RA, Rojano BA. Enzymatic maceration of albedo layer from sour orange ( Citrus aurantium L .) with protopectinase-se and measurement of antioxidant activity of the obtained products. LWT - Food Sci. Technol. 2012;45(2):289–294.

19. Iglesias DJ, Cercós M, Colmenero-flores JM, et al. Physiology of citrus fruiting Review. Braz. J. Plant Physiol. 2007;19(4):333–362.

20. Odeh F, Rahmo A, Alnori S, Chaty E. THE CYTOTOXIC EFFECT OF ESSENTIAL OILS CITRUS AURANTIUM PEELS. J. Microbiol. Biotechnol. Food Sci. 2012;1(6):1476–1487.

21. Karimi E, Hendra R, Oskoueian A, Z. H, E. Jaafar, Oskoueian E. Phenolic Compounds Characterization and Biological Activities of Citrus aurantium Bloom. Molecules. 2012;17:1203–1218.

22. Lagha-Benamrouche S, Madani K. Phenolic contents and antioxidant activity of orange varieties (Citrus sinensis L. and Citrus

52

aurantium L.) cultivated in Algeria: Peels and leaves. Ind. Crops Prod. 2013;50:723–730.

23. Ersus S, Cam M. Determination of organic acids, total phenolic content, and antioxidant capacity of sour Citrus aurantium fruits. Chem. Nat. Compd. 2007;43(5):607–609.

24. Lu Q, Yang L, Zhao H-Y, Jiang J-G, Xu X-L. Protective effect of compounds from the flowers of Citrus aurantium L. var. amara Engl against carbon tetrachloride-induced hepatocyte injury. Food Chem. Toxicol. 2013;62:432–435.

25. Onakpoya I, Davies L, Ernst E. Efficacy of herbal supplements containing Citrus aurantium and synephrine alkaloids for the management of overweight and obesity: a systematic review. Focus Altern. Complement. Ther. 2011;16(4):254–260.

26. Bahmani M, Eftekhari Z, Saki K, Fazeli-Moghadam E, Jelodari M, Rafieian-Kopaei M. Obesity Phytotherapy: Review of Native Herbs Used in Traditional Medicine for Obesity. J. Evid. Based. Complementary Altern. Med. 2015:1–7.

27. Stohs SJ, Preuss HG, Shara M. A review of the human clinical studies involving Citrus aurantium (bitter orange) extract and its primary protoalkaloid p-synephrine. Int. J. Med. Sci. 2012;9(7):527–38.

28. Stohs SJ. Problems with Citrus aurantium Information in “A Review on Botanical Species and Chemical Compounds with Appetite Suppressing Properties for Body Weight Control.” Plant Food Hum Nutr. 2013;68:329–331.

29. Bergonzelli GE, Donnicola D, Porta N, Corthe IE, Remy LM. Essential Oils as Components of a Diet-Based Approach to Management of Helicobacter Infection. Am. Soc. Microbiol. 2003;47(10):3240–3246.

30. Ellouze I, Abderrabba M, Sabaou N, Mathieu F, Lebrihi A, Bouajila J. Season’s variation impact on Citrus aurantium leaves essential oil: chemical composition and biological activities. J. Food Sci. 2012;77(9):173–80.

31. Verma RK, Chaurasia L, Kumar M. Antifungal activity of essential oils against selected building fungi. Indian J. Nat. Prod. Resour. 2011;2(4):448–451.

53

32. Majnooni M, Mansouri K, Gholivand M, Afnanzade N, Piriyaei M. Chemical composition, cytotoxicity and antioxidant activities of the essential oil from the leaves of Citrus aurantium L. African J. Biotechnol. 2011;11(2):498–503.

33. Park K Il, Park HS, Nagappan A, et al. Induction of the cell cycle arrest and apoptosis by flavonoids isolated from Korean Citrus aurantium L. in non-small-cell lung cancer cells. Food Chem. 2012;135(4):2728–2735.

34. Akhlaghi M, Shabanian G, Rafieian-Kopaei M, Parvin N, Saadat M, Akhlaghi M. Citrus aurantium blossom and preoperative anxiety. Rev. Bras. Anestesiol. 2011;61(6):702–712.

35. Costa C a R a, Cury TC, Cassettari BO, Takahira RK, Flório JC, Costa M. Citrus aurantium L. essential oil exhibits anxiolytic-like activity mediated by 5-HT(1A)-receptors and reduces cholesterol after repeated oral treatment. BMC Complement. Altern. Med. 2013;13.

36. Xing H, Zhang K, Zhang R, Shi H, Bi K, Chen X. Antidepressant-like effect of the water extract of the fixed combination of Gardenia jasminoides, Citrus aurantium and Magnolia officinalis in a rat model of chronic unpredictable mild stress. Phytomedicine. 2015;22(13):1178–85.

37. Kang SR, Park K Il, Park HS, et al. Anti-inflammatory effect of flavonoids isolated from Korea Citrus aurantium L. on lipopolysaccharide-induced mouse macrophage RAW 264.7 cells by blocking of nuclear factor-kappa B (NF-κB) and mitogen-activated protein kinase (MAPK) signalling pathways. Food Chem. 2011;129(4):1721–1728.

38. Muthiah P. In vitro Xanthine Oxidase inhibitory activity of leaves, fruits and peel extracts of Citrus aurantium, Citrus limetta and Citrus lemon. Int. J. Phytopharm. 2012;2(3):77–80.

39. Ahangarpour A, Oroojan AA, Amirzargar A, Ghanavati M. Antispasmodic effects of Citrus aurantium flowers aqueous extract on uterus of non-pregnant rats. Iran. J. Reprod. Med. 2011;9(4):289–294.

40. Moraes TM, Kushima H, Moleiro FC, et al. Effects of limonene and essential oil from Citrus aurantium on gastric mucosa: role of prostaglandins and gastric mucus secretion. Chem. Biol. Interact. 2009;180(3):499–505.

54

41. Hamdan DI, Mahmoud MF, Wink M, El-Shazly AM. Effect of hesperidin and neohesperidin from bittersweet orange (Citrus aurantium var. bigaradia) peel on indomethacin-induced peptic ulcers in rats. Environ. Toxicol. Pharmacol. 2014;37(3):907–15.

42. Osfor M, Hegazy A, Abd El-moaty M, Elmadbouly M, Afify A, Elbahnasawy AS. Hypo-Cholesterolemic and Hypoglycemic Effects of Orange Albedo Powder (Citrus Aurantium L.) on Male Albino Rats. Int. J. Nutr. Food Sci. 2013;2(2):70–76.

43. Sharma M, Fernandes J, Ahirwar D, Jain R. HYPOGLYCEMIC AND HYPOLIPIDIMIC ACTIVITY OF ALCOHOLIC EXTRACT OF CITRUS AURANTIUM IN NORMAL AND ALLOXAN-INDUCED DIABETIC RATS . pharmacologyonline. 2008;3:161–171.

44. Jia S, Hu Y, Zhang W, et al. Hypoglycemic and hypolipidemic effects of neohesperidin derived from Citrus aurantium L. in diabetic KK-A(y) mice. Food Funct. 2015;6(3):878–86.

45. Azanchi T, Pouriaee H, Shafaroodi H, Asgarpanah J. The anticonvulsant effect of Citrus aurantium flowers. Res. Pharm. Sci. 2012;7(5).

46. Richardson MD, Warnock DW. Introduction. In: Fungal Infection Diagnosis and Management. 4th ed.; 2012:1–11.

47. Hanson JR. Fungi and the Development of Microbiological Chemistry. In: The Chemistry of Fungi.; 2008:1–15.

48. Kavanagh K, Sullivan D, Coleman D, Moran G. Fungal Diseases of Humans. In: Fungi Biology and Applications.; 2005:171–190.

49. Spampinato C, Leonardi D. Review Article: Candida Infections , Causes , Targets , and Resistance Mechanisms : Traditional and Alternative Antifungal Agents. Biomed Res. Int. 2013:1–13.

50. Campbell CK, Johnson EM. Identification of Yeasts. In: IDENTIFICATION OF PATHOGENIC FUNGI. second ed.; 2013:263–304.

51. Campbell CK, Johnson EM. Identification of Fungi in Sections, Smears and Body Fluids. In: IDENTIFICATION OF PATHOGENIC FUNGI. second ed.; 2013:305–321.

55

52. Wingard JR, Anaissie EJ. Impact of Invasive Fungal Infection on Patients Undergoing Solid Organ Transplantation. In: Fungal Infections in the Immunocompromised Patient.; 2005:45–74.

53. Richardson MD, Warnock DW. Chapter3: Antifungal drugs. In: Fungal Infection Diagnosis and Management. 4th ed.; 2012:32–89.

54. Kavanagh K, Abu-Elteen KH, Hamad M. Antifungal Agents for Use in Human Therapy. In: Fungi Biology and Applications.; 2005:191–217.

55. Rai M, Razzaghi-abyaneh M. Antifungal Activities of Plants and Other Natural Products. In: Antifungal Metabolites from Plants.; 2013:157–302.

56. Hussin NM, Muse R, Ahmad S, et al. Antifungal activity of extracts and phenolic compounds from Barringtonia racemosa L . ( Lecythidaceae ). African J. Biotechnol. 2009;8(12):2835–2842.

57. Winkelhausen E, Pospiech R, Laufenberg G. Antifungal activity of phenolic compounds extracted from dried olive pomace. Bull. Chem. Technol. Maced. 2005;24(1):41–46.

58. Barro N, ZERBO P, KONATÉ K, OUÉDRAOGO M, PATRICK VD. ANTIOXIDANT AND ANTIFUNGAL PROFILES OF PHENOL ACID RICH-FRACTIONS FROM SIDA URENS L. AGAINST MYCELIA GROWTH INHIBITION OF SOME ASPERGILLUS AND FUSARIUM SPECIES. Int J Pharm Pharm Sci. 2014;6(1):174–178.

59. Orhan DD, Ozçelik B, Ozgen S, Ergun F. Antibacterial, antifungal, and antiviral activities of some flavonoids. Microbiol. Res. 2010;165(6):496–504.

60. Edziri H, Mastouri M, Mahjoub MA, Mighri Z, Mahjoub A, Verschaeve L. Antibacterial, antifungal and cytotoxic activities of two flavonoids from Retama raetam flowers. Molecules. 2012;17(6):7284–93.

61. THORMAR H. Chemistry and Bioactivity of Essential Oils. In: Lipids and Essential Oils as Antimicrobial Agents.; 2011:204–223.

62. Bersan SMF, Galvão LCC, Goes VFF, et al. Action of essential oils from Brazilian native and exotic medicinal species on oral biofilms. BMC Complement. Altern. Med. 2014;14(451):1–12.

56

63. Freires IDA, Mendonc R, Alencar SM De, et al. Coriandrum sativum L . ( Coriander ) Essential Oil : Antifungal Activity and Mode of Action on Candida spp ., and Molecular Targets Affected in Human Whole-Genome Expression. PLoS One. 2014;9(6).

64. Gauch L, Silveira-gomes F, Esteves RA, et al. Effects of Rosmarinus offi cinalis essential oil on germ tube formation by Candida albicans isolated from denture wearers. Rev Soc Bras Med Trop. 2014;47(3):389–391.

65. Kamble VA. In vitro Anti-Fungal Activity of Cuminum cyminum ( Cumin Seed ) Essential Oil against Clinical Isolates of Candida Species. Am. J. Phytomedicine Clin. Ther. 2015;3:264–275.

66. Thosar N, Basak S, Bahadure RN, Rajurkar M. Antimicrobial efficacy of five essential oils against oral pathogens: An in vitro study. Eur. J. Dent. 2013;7(1):71–77.

67. Marcos-arias C, Eraso E, Madariaga L, Quindós G. In vitro activities of natural products against oral Candida isolates from denture wearers. BMC Complement. Altern. Med. 2011;11(1):119.

68. Jing L, Lei Z, Li L, et al. Antifungal Activity of Citrus Essential Oils. J. Agric. Food Chem. 2014:1–76.

69. Alpaslan Kaya D, Arslan M, Rusu L. EFFECTS OF HARVESTING HOUR ON ESSENTIAL OIL CONTENT AND COMPOSITION OF THYMUS VULGARIS. Farmacia. 2013;61(6):1194–1203.

70. Njoroge SM, Ukeda H, Sawamura M. Changes of the volatile profile and artifact formation in Daidai (Citrus aurantium) cold-pressed peel oil on storage. J. Agric. Food Chem. 2003;51(14):4029–35.

71. Boussaada O, Chemli R. Seasonal Variation of Essential Oil Composition of Citrus Aurantium L. var. amara. J. Essent. Oil Bear. Plants. 2007;10(2):109–120.

72. Essadik FZ, Haida S, Kribii A, Kribii AR, Ounine K. Antioxidant activity of Citrus aurantium L. var. amara Peel from western of Morocco, identification of volatile compounds of its essential oil by GC-MS and a preliminary study of their antibacterial activity. Int. J. Innov. Sci. Res. 2015;16(2):425–432.

62

73. Bourgou S, Rahali FZ, Ourghemmi I, Saïdani Tounsi M. Changes of peel essential oil composition of four Tunisian citrus during fruit maturation. ScientificWorldJournal. 2012.

74. Sharma D, Vashist H. Hydrodistillation and Comparative Report of Percentage Yield on Leaves and Fruit Peels from Different Citrus Plants of Rutaceae Family. J. Plant Sci. 2015;10(2):75–78.

75. Olle M, Bender I. The content of oils in umbelliferous crops and its formation. Agron. Res. 2010;8(Iii):687–696.

76. Rowshan V, Najafian S. Changes of Peel Essential Oil Composition of Citrus aurantium L. During Fruit Maturation in Iran. J. Essent. Oil Bear. Plants. 2015;18(4):1006–1012.

77. Randhawa M. Dimethyl Sulfoxide (DMSO) Inhibits the Germination of Candida albicans and the Arthrospores of Trichophyton mentagrophytes. Jpn. J. Med. Mycol. 2008;49:125–128.

78. Désirée C, René F, Jonas K. Antibacterial and Antifungal Activity of the Essential Oil Extracted by Hydro-Distillation from Artemisia annua Grown in West-Cameroon. Br. J. Pharmacol. Toxicol. 2013;4(3):89–94.

79. Inouye S, Tsuruoka T, Uchida K, Yamaguchi H. Effect of Sealing and Tween 80 on the Antifungal Susceptibility Testing of Essential Oils. Microbiol.Immunol. 2001;45(3):201–208.

80. Matsuzaki Y, Kakinoki Y, Nakamura M, Nishihara T, Tsujisawa T. Lamiaceae Peppermint Oil with Surfactant Showing Equal Antifungal Activity against Candida albicans to Rosemary Chemotype CINEOL. SciRes. 2014;(4):58–65.

81. ELLIS D, DAVIS S, ALEXIOU H, HANDKE R, BARTLEY R. Candida albicans (Robin) Berkhout. In: Descriptions of medical fungi. 2nd ed. AUSTRALIA: Mycology Unit; 2007:22.

82. KIRBAŞLAR FG, TAVMAN A, DÜLGER B, TÜRKER G. ANTIMICROBIAL ACTIVITY OF TURKISH CITRUS PEEL OILS. Pak. J. Bot. 2009;41(6):3207–3212.

83. Orhan İE, Özçelİk B, Kartal M, Kan Y. Antimicrobial and antiviral eff ects of essential oils from selected Umbelliferae and Labiatae plants and individual essential oil components. Turk J Biol. 2012;36:239–246.

61

84. Omran S, Moodi M, Mohammad S, Amiri B, Mosavi S, Ghazi S. The Effects of Limonene and Orange Peel Extracts on Some Spoilage Fungi. Int. J. Mol. Clin. Microbiol. 2011;1:82–86.

85. Rao A, Zhang Y, Muend S, Rao R. Mechanism of Antifungal Activity of Terpenoid Phenols Resembles Calcium Stress and Inhibition of the TOR Pathway ᰔ. Am. Soc. Microbiol. 2010;54(12):5062–5069.

86. SOKOVIC M, GLAMOĈLIJA J, ĆIRIĆ A, Brkić D. ANTIFUNGAL ACTIVITY OF THE ESSENTIAL OILS AND COMPONENTS IN VITRO AND IN VIVO ON EXPERIMENTALLY INDUCED DERMATOMYCOSES AT RATS. Dig. J. Nanomater. Biostructures. 2012;7(3):959–966.

87. Chen Y, Zeng H, Tian J, Ban X, Ma B, Wang Y. Antifungal mechanism of essential oil from Anethum graveolens seeds against Candida albicans. J. Med. Microbiol. 2013:1175–1183.

356-354صفحة ، 2005هحالتي، الىائلي أ، حزف النىى، هىسىعة الغذاء دواء، . 88

: 1997سراعتها ورعايتها وإنتاجها، الطبعة األولى، -بات، الوىالحبزاهين ع ، خليف م، تقسين النإ. 89

87-47صفحة

61

Appendixالملحق 14

.األول كانون شررنة الزت العطري المستخلصة ف لع GC-MSخطط م( 25) الشكل

شباط.شرر نة الزت العطري المستخلصة ف لع GC-MSمخطط ( 26) الشكل

61

.األولكانون شرر نة الزت العطري المستخلصة ف لع GC-MSنتائج تحلل (13)الجدول

Peak Ret. Time

Start Tm

End Tm

m/z Area Area

% Height

Height %

A / H Name

1 6.508 6.45 6.567 TIC 5924184 1.04 2441164 4 2.42 alpha.-pinene

2 7.749 7.7 7.808 TIC 1559473 0.27 603778 0.99 2.58 Sabinene

3 7.938 7.892 7.992 TIC 1722429 0.3 643259 1.05 2.67 l-.beta.-Pinene

4 8.277 8.2 8.35 TIC 25267220 4.42 8229983 13.49 3.07 beta.-Myrcene

5 8.784 8.725 8.85 TIC 3731928 0.65 1235638 2.02 3.02 Octanal

6 10.048 9.725 10.142 TIC 4.98E+08 87.2 37946374 62.19 13.12 LIMONENE

7 10.476 10.408 10.55 TIC 2292482 0.4 803992 1.32 2.85

TRANS-.BETA.-OCIMENE

8 11.484 11.367 11.567 TIC 7027946 1.23 1576163 2.58 4.45 LINALOOL OXIDE CIS

9 12.155 12.083 12.233 TIC 2073800 0.36 648738 1.06 3.19

TRANS-LINALOOL OXIDE

10 12.72 12.633 12.8 TIC 10251796 1.79 3135794 5.14 3.26 LINALOOL L

11 17.027 16.95 17.108 TIC 3553123 0.62 988836 1.62 3.59 alpha.-Terpineol

12 17.549 17.475 17.625 TIC 2710346 0.47 797051 1.31 3.4 DECANAL

13 19.527 19.458 19.608 TIC 2178338 0.38 628596 1.03 3.46 Linalyl acetate

14 25.395 25.325 25.475 TIC 2339349 0.41 653761 1.07 3.57 Geranyl acetate

15 30.791 30.717 30.875 TIC 2649323 0.46 687701 1.13 3.85 BHT

61

شباط.لعنة الزت العطري المستخلصة ف شرر GC-MSنتائج تحلل ( 14)الجدول

Peak Ret. Time

Start Tm

End Tm

m/z Area Area

% Height

Height %

A / H Name

1 6.503 6.442 6.567 TIC 5105797 0.97 2096196 3.77 2.43 alpha.-pinene

2 7.744 7.692 7.8 TIC 1198498 0.23 453446 0.82 2.64 Sabinene

3 7.933 7.8 7.992 TIC 1182048 0.23 440385 0.79 2.68 l-.beta.-Pinene

4 8.274 8.192 8.358 TIC 21961523 4.18 7337534 13.19 2.99 beta.-Myrcene

5 8.778 8.717 8.842 TIC 2270103 0.43 767797 1.38 2.95 Octanal

6 10.038 9.717 10.133 TIC 470333359 89.58 37973639 68.26 12.4 LIMONENE

7 10.471 10.4 10.55 TIC 2173586 0.41 759225 1.36 2.86

TRANS-.BETA.-OCIMENE

8 11.475 11.367 11.55 TIC 3354270 0.64 774533 1.39 4.33

LINALOOL OXIDE CIS

9 12.711 12.617 12.792 TIC 7547783 1.44 2327537 4.18 3.24

L-LINALOOL

10 17.017 16.933 17.1 TIC 2580787 0.49 699743 1.26 3.68 alpha.-Terpineol

11 17.539 17.467 17.617 TIC 1587001 0.3 475781 0.86 3.33 DECANAL

12 19.518 19.442 19.6 TIC 1273477 0.24 361263 0.65 3.52 NERYL ACETATE

13 25.381 25.3 25.45 TIC 1600686 0.3 438370 0.79 3.65 Geranyl acetate

14 30.773 30.692 30.858 TIC 1906176 0.36 486465 0.87 3.91 BHT

15 42.552 42.483 42.65 TIC 1063685 0.2 241650 0.43 4.4 Nootkatane

62

متوسط عدد المستعمرات الفطرة والنسبة المئوة لتثبط المستعمرات الفطرة ف كل من علب البتري : 15 الجدول ى تراكز مختلفة لمحالل التمددالشاهدة وعلب البتري الحاوة عل

المحل

المستخدم التركز

متوسط عدد

المستعمرات

الناتجة

االنحراؾ

المعاري

متوسط النسبة

المئوة لتثبط

المستعمرات

%

االنحراؾ

المعاري

عدد

المستعمرات

الفطرة ف

علب البتري

الشاهدة

االنحراؾ

المعاري

DM

SO

10% 0 0 100 0

325

6

5% 0 0 100 0

2.5% 196 8 39 4

1% 318 6 0.64 0

ولانتم

10% 0 0 100 0

5% 46 5 46 5

2.5% 320 8 0 0

1% 318 11 1 1

ن و

لتا

80

0.5% 321 2 1 1

63

متوسط نتائج األول. ثمثل القم كانون شرر ي الت تم استخالصرا ف النسب المئوة لتثبط نمو المستعمرات الفطرة عند استخدام تراكز مختلفة من عنة الزت العطر :16 الجدول التجربتن المستقلتن.

نة الزت العطري عشرر المستخلصة ف

األول كانون

تركز الزت ضمن أطباق البتري )مكل/مل( معادلة الخط البان

MIC مكل/مل

IC50

5تركز 10تركز 20تركز 30تركز 40تركز الشاهد االجاب مكل/ملتركز 2.5

1تجربة

عدد المستعمرات

الفطرة465 0 15 97 255 451 466

Y= 0.0352X - 0.009 40 14.46 النسب المئوة

لتثبط نموالمستعمرات

0% 100% 96.77% 79.14% 45.16% 3.01% 0%

2تجربة

عدد المستعمرات

الفطرة345 0 10 82 193 300 350

Y= 0.0336X+0.0243 40 14.16 النسب المئوة

نمو لتثبط المستعمرات

0% 100% 97.10% 76.23% 44.05% 13.04% 0%

14.31 40.00 المتوسط الحساب

0.21 0 االنحراؾ المعاري

64

ب تثبط نمو األول ونسكانون شررخلصة خالل العالقة بن تراكز عنة الزت العطري المست: 27 الشكل .-لتجربة األولىا - المستعمرات الفطرة

ب تثبط نمو األول ونسكانون شررة الزت العطري المستخلصة خالل العالقة بن تراكز عن( 28) الشكل.-لتجربة الثانةا-المستعمرات الفطرة

y = 0.0352x - 0.009

-20%

0%

20%

40%

60%

80%

100%

120%

0 5 10 15 20 25 30 35

ةطر

لف ات

راعم

ستلم

اطبتثة

سبن

%

مل/مكل 1تركز الزت العطري عنة رقم

y = 0.0336x + 0.0243

0%

20%

40%

60%

80%

100%

120%

0 5 10 15 20 25 30 35

ة ر

طلف ات

راعم

ستلم

اطبتثة

سبن

%

مل/مكل 1تركز الزت العطري عنة رقم

65

. ثمثل القم متوسط كانون الثانشرر ت العطري الت تم استخالصرا ف النسب المئوة لتثبط نمو المستعمرات الفطرة عند استخدام تراكز مختلفة من عنة الز (17)الجدول نتائج التجربتن المستقلتن.

نة الزت العطري عكانون شرر المستخلصة ف

الثان

كل/مل(تركز الزت ضمن أطباق البتري )م معادلة الخط البان

MIC مكل/مل

IC50 2.5تركز 5تركز 10تركز 20تركز 30تركز 40تركز الشاهد االجاب مكل/مل

1تجربة

عدد المستعمرات الفطرة

465 0 3 50 159 354 411

Y= 0.0468X+ 0.0364 40 9.91 النسب المئوةلتثبط نمو المستعمرات

0% 100% 99.35% 89.25% 69.03% 23.87% 11.61%

2تجربة

عدد المستعمرات الفطرة

345 0 0 11 103 255 323

Y=0.0513X+0.0195 30 9.37 النسب المئوةلتثبط

نموالمستعمرات0% 100% 100% 96.81% 70.14% 28.70% 6.38%

9.64 35.00 لمتوسط الحسابا

0.38 7.07 االنحراؾ المعاري

66

ب تثبط نمو الثان ونسكانون شررة الزت العطري المستخلصة خالل عالقة بن تراكز عن( ال29) الشكل .-لتجربة األولىا -المستعمرات الفطرة

ب تثبط نمو الثان ونسكانون شررة الزت العطري المستخلصة خالل العالقة بن تراكز عن( 30) الشكل .-لتجربة الثانةا-المستعمرات الفطرة

y = 0.0468x + 0.0364

0%

20%

40%

60%

80%

100%

120%

0 5 10 15 20 25

ة ر

طلف ات

راعم

ستلم

اطبتثة

سبن

%

مل/مكل 2تركز الزت العطري عنة رقم

y = 0.0513x + 0.0195

0%

20%

40%

60%

80%

100%

120%

0 5 10 15 20 25

ة ر

طلف ات

راعم

ستلم

اطبتثة

سبن

%

مل/مكل 2تركز الزت العطري عنة رقم

122

. ثمثل القم متوسط نتائج شباطشرر تم استخالصرا ف النسب المئوة لتثبط نمو المستعمرات الفطرة عند استخدام تراكز مختلفة من عنة الزت العطري الت (18)الجدول التجربتن المستقلتن.

نة الزت العطري ع شباط شررالمستخلصة ف

تركز الزت ضمن أطباق البتري )مكل/مل( الخط البانمعادلة

MIC مكل/مل

IC50 2.5تركز 5تركز 10تركز 20تركز 30تركز 40تركز الشاهد االجاب مكل/مل

1تجربة

عدد المستعمرات

الفطرة465 0 0 19 123 288 411

Y=0.05X+0.0474 30 9.05 النسب المئوة

لتثبط نموالمستعمرات

0% 100% 100% 95.91% 73.55% 30.06% 11.61%

2تجربة

عدد المستعمرات

الفطرة345 0 0 0 46 222 312

Y=0.0532X+0.0648 20 8.18 النسب المئوة

لتثبط نمو المستعمرات

0% 100% 100% 100% 86.67% 35.65% 9.56%

8.62 25.00 لمتوسط الحسابا

0.62 7.07 االنحراؾ المعاري

121

ب تثبط نمو المستعمرات ونس شباطشرر العالقة بن تراكز عنة الزت العطري المستخلصة خالل( 31) الشكل .-لتجربة األولىا- الفطرة

ب تثبط نمو المستعمرات ونسشباط شررة الزت العطري المستخلصة خالل العالقة بن تراكز عن (54) الشكل

-لتجربة الثانةا-الفطرة

y = 0.05x + 0.0474

0%

20%

40%

60%

80%

100%

120%

0 5 10 15 20 25

ة ر

طلف ات

راعم

ستلم

اطبتثة

سبن

%

مل/مكل 3تركز الزت العطري عنة رقم

y = 0.0532x + 0.0648

0%

20%

40%

60%

80%

100%

120%

0 5 10 15 20 25

ة ر

طلف ات

راعم

ستلم

اطبتثة

سبن

%

مل/مكل 3تركز الزت العطري عنة رقم

121

ثمثل القم متوسط نتائج التجارب الثالث المستقلة. (، –)النسب المئوة لتثبط نمو المستعمرات الفطرة عند استخدام تراكز مختلفة من اللمونن (19) الجدول

(-)اللمونن

ضمن علب البتري )مكل/مل( (-)تركز اللمونن

علب البتري مكل/مل IC50 مكل/مل MIC معادلة الخط البان الشاهدة

1تركز 2.5تركز 5تركز 10تركز 20تركز

1تجربة

عدد المستعمرات الفطرة

304 0 0 123 216 285

Y = 0.1028X + 0.0092 10 4.77 نسب المئوة اللتثبط

نموالمستعمرات0% 100% 100% 59.54% 28.95% 6.25%

2تجربة

عدد المستعمرات الفطرة

570 0 23 200 353 493

Y = 0.0951X + 0.0731 20 4.49 ئوة النسب الملتثبط

نموالمستعمرات0% 100% 95.96% 64.91% 38.10% 13.51%

3تجربة

عدد المستعمرات الفطرة

465 0 0 122 300 401

Y=0.1011X + 0.0732 10 4.22 ئوة النسب الملتثبط نمو المستعمرات

0% 100% 100% 73.76% 36.18% 13.76%

4.49 13.33 المتوسط الحساب

0.28 5.77 االنحراؾ المعاري

121

.-األولىلتجربة ا-ب تثبط نمو المستعمرات الفطرة ونس –العالقة بن تراكز اللمونن ( 33) الشكل

.-لتجربة الثانةا-ونسب تثبط نمو المستعمرات الفطرة –العالقة بن تراكز اللمونن ( 34) الشكل

.-لتجربة الثالثةا-ب تثبط نمو المستعمرات الفطرة ونس –العالقة بن تراكز اللمونن ( 35) الشكل

y = 0.1028x + 0.0092

0%

20%

40%

60%

80%

100%

120%

0 2 4 6 8 10 12

ة ر

طلف ات

راعم

ستلم

اطبتثة

سبن

%

مل/مكل( -)تركز اللمونن

y = 0.0951x + 0.0731

0%

20%

40%

60%

80%

100%

120%

0 2 4 6 8 10 12

ة ر

طلف ات

راعم

ستلم

اطبتثة

سبن

%

مل/مكل( -)تركز اللمونن

y = 0.1011x + 0.0732

0%

20%

40%

60%

80%

100%

120%

0 2 4 6 8 10 12

ةطر

لف ات

راعم

ستلم

اطبتثة

سبن

%

مل/مكل( -)تركز اللمونن

121

ثمثل القم متوسط نتائج التجارب الثالث المستقلة. (،+)النسب المئوة لتثبط نمو المستعمرات الفطرة عند استخدام تراكز مختلفة من اللمونن (20)الجدول

(+)اللمونن

ضمن علب البتري )مكل/مل( (+)تركز اللمونن

علب البتري مكل/مل IC50 مكل/مل MIC الخط البانمعادلة الشاهدة

1تركز 2.5تركز 5تركز 10تركز 20تركز

1تجربة

عدد المستعمرات الفطرة

570 0 4 28 156 524

Y= 0.2055X + 0.0029 20 2.42 النسب المئوة لتثبط

نمو المستعمرات0% 100% 99.30% 95.10% 72.63% 8.10%

2تجربة

عدد المستعمرات الفطرة

465 0 0 46 208 379

Y= 0.1856X+0.0055 10 2.66 النسب المئوة لتثبط

نمو المستعمرات0% 100% 100% 90.11% 55.26% 14.62%

3تجربة

عدد المستعمرات الفطرة

345 0 0 10 142 286

Y= 0.1988X+0.0102 10 2.46 النسب المئوة لتثبط

نمو المستعمرات0% 100% 100% 97.10% 58.84% 17.10%

2.51 13.33 المتوسط الحساب

0.13 5.77 االنحراؾ المعاري

122

.-لتجربة األولىا-ب تثبط نمو المستعمرات الفطرة العالقة بن تراكز اللمونن + و نس( 36) الشكل

.-لتجربة الثانةا-ب تثبط نمو المستعمرات الفطرة العالقة بن تراكز اللمونن + و نس( 37) الشكل

.-لتجربة الثالثةا-ب تثبط نمو المستعمرات الفطرة العالقة بن تراكز اللمونن + و نس( 38) الشكل

y = 0.2055x + 0.0029

0%

20%

40%

60%

80%

100%

120%

0 2 4 6

ة ر

طلف ات

راعم

ستلم

اطبتثة

سبن

%

مل/مكل)+( تركز اللمونن

y = 0.1856x + 0.0055

0%

20%

40%

60%

80%

100%

0 1 2 3 4 5 6

ة ر

طلف ات

راعم

ستلم

اطبتثة

سبن

%

مل/مكل)+( تركز اللمونن

y = 0.1988x + 0.0102

0%

20%

40%

60%

80%

100%

120%

0 1 2 3 4 5 6

ة ر

طلف ات

راعم

ستلم

اطبتثة

سبن

%

مل/مكل)+( تركز اللمونن