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INTERPRETACIÓN DE LA CITOMETRÍA HEMÁTICA

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UTILIDAD DE LA CITOMETRIA HEMATICA

Coadyuvante indispensable en el diagnóstico y control de la evolución de las enfermedades infecciosas, de las enfermedades crónicas en general, de las emergencias médicas, quirúrgicas y traumatológicas, y en el seguimiento de la quimioterapia y radioterapia.

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La interpretación correcta de toda la información que ofrece una Citometría hemática permite orientar el diagnóstico, confirmar con pruebas adicionales junto con el cuadro clínico del paciente y además ahorrar al medico y al paciente, tiempo dinero y esfuerzo.

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Toma de muestra

Preparación de frotis Lectura BH

Tinción

Observación Interpretación de

resultados

Y porqué hacer frotis?

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http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0186-23912016000400246#t1 https://images.app.goo.gl/ueGQuXVzd

hN2gozX6

Acta pediátrica de Méxicoversión On-line ISSN 2395-8235versión impresa ISSN 0186-2391Acta pediatr. Méx vol.37 no.4 México jul./ago. 2016

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Revista de la Sociedad Boliviana de Pediatríaversión On-line ISSN 1024-0675Rev. bol. ped. v.50 n.2 La Paz 2011

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Hemoglobina

Representa la cantidad de hemoglobina por unidad de volumen.

Las cifras varían de acuerdo a la edad, género, altura del sitio de residencia, etc.

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Se mide en gramos por decilitro( g/dL)14.0 g/dL

En unidades internacionales son de g/L140 g/L

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Este parámetro debe ser el único empleado para

definir si hay o no anemia.

Sólo si las cifras de hemoglobina son inferiores a los

valores normales puede asegurarse que existe

anemia.

Hemoglobina

Fundamentos de Hematología. Ruiz Argüelles Ruiz Delgado 5ª. Ed. Editorial Medica Panamericana. Pag. 16

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VALORES DE REFERENCIA NIÑOS

Fuente: Instituto de Hematopatología

RANGO DE EDAD Valor convencional (g/dL)

Valor SI (g/L)

0 – 2 meses 14 - 20 140 - 200

2 – 6 meses 10 – 15 100 - 150

6 - 12 meses 10 – 14 100 – 140

1 – 5 años 11 – 15 110 - 150

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HB

VCM NCMH N

Revisión del frotis

Reticulocitos

Resultado Analizador de Hematología

NORMALES O EN AUMENTO

MORFOLOGIA DE ERITROCITOS NORMAL

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ES POSIBLE QUE EN UNA HEMORRAGIA AGUDA SE OBSERVE ESTE TIPO DE COMPORTAMIENTO

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Representa la proporción de eritrocitos en el total de la sangre.

Se mide en % .

Esta variable no debe usarse como criterio para establecer el diagnóstico de anemia.

El cálculo manual es más exacto que el del citómetro.

No debe calcularse con base a la hemoglobina, ni viceversa.

HEMATÓCRITO (Hct)

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25 %25 %

HEMATOCRITO= VGM*ERI/10

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0.25 L/L 0.25 L/L

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NUMERO DE GLOBULOS ROJOS

Se puede reportar en millones

por microlitro (millones/uL) y

en unidades internacionales

Valores de referencia en adultos

son: 4 a 6 millones /µL.

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RANGO DE EDAD Valor convencional X10⁶/uL

Valor SI X1012/L

0 – 2 meses 4.8 – 6.8 4.8 – 6.8

2 – 6 meses 3.5 – 4.8 3.5 – 4.8

1 – 5 años 3.2 – 5.2 3.2 – 5.2

VALORES DE REFERENCIA NIÑOS

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Volumen Globular Medio

(VGM)

• Es de gran valor en el esclarecimiento de la causa de una anemia.

• Se refiere al volumen de los eritrocitos.

• Los valores del VGM permiten saber si una anemia es:

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Volumen Globular Medio

(VGM)

•Macrocítica (VGM mayor a los limites normales)

•Microcítica (VGM menor a los limites normales)

•Normocitica (VGM tamaño normal de las células)

Se mide en fentolitros (fl).

Los valores de referencia: 80 a 100 fL

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CLASIFICACIÓN MORFOLÓGICA

Microcito Normocito Macrocito

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Valores < VGM = “anemias microcíticas”

(deficiencia de hierro, talasemia,

esferocitosis hereditaria)

Valores > VGM = “anemias macrocíticas”

(eritropoyesis acelerada, megaloblástica, mielodisplasia,

anemia aplásica)

Volumen Globular Medio

(VGM)

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VGM(fL)

Enfermedad Frecuencia

Menor de 80 Deficiencia de hierro

85%

Menor de 70 Talasemia 2%

Entre 70 y 80 Esferocitosis hereditaria

1%

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BIOMETRIA

HEMATICA: RESULTADOS:

UNIDADES:VALORES

NORMALES

FEMENINO

ADULTA

Hemoglobina: 8.3 g/dl 12 - 14

Hematocrito: 28.1 % 36 – 44

V. G. M. : 72.0 fL 80 - 100

M.C.H.: 20.2 pg 26 – 32

C. M. H. G. : 26.9 g/dl 32 - 36

Eritrocitos:3.0 Millon. X µL 3.4 – 5.1

RDW: 18.0 % 11 A-13

INDICE DE MENTZER 24.0 VGM/ERI PUNTO DE CORTE 13

RETICULOCITOS23,000 25,000 A 100,000

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INDICE FORMULA ANEMIA FERROPENICA

TALASEMIA MENOR

MENTZER VCM/ERI MAYOR DE 13 MENOR DE 13

SIRVE SOLAMENTE PARA ORIENTAR EL DIAGNOSTICO, SE TENDRAN QUE HACER LAS PRUEBAS COMPLEMENTARIAS

INDICE DE MENTZER

SIRVE SOLAMENTE PARA DIFERENCIAR ENTRE ANEMIA FERROPENICA Y TALASEMIA MENOR

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CINETICA DE HIERROESTUDIOS

ADICIONALES

HIERRO SERICO SATURACION DE TRANSFERRINA

FERRITINA

CAPACIDAD DE FIJACION DE HIERRO A LA TRANSFERRINA

TRANSFERRINA

DEFICIENCIA DE HIERRO

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PÉRDIDA SANGUINEAPREVALENCIA

DEFICIENTE ABSORCION

AUMENTO EN LOS REQUERIMIENTOS

DISMINUCION EN EL APORTE

DEFICIENCIA DE HIERRO

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BIOMETRIA

HEMATICA: RESULTADOS:

UNIDADES:VALORES

NORMALES

NIÑOS 1 – 5 AÑOS

Hemoglobina: 12.4 g/dl 11 - 15

Hematocrito: 38.6 % 34 - 44

V. G. M. : 64.1 fL 70 - 88

M.C.H.: 20.2 pg 26 – 32

C. M. H. G. : 32.0 g/dl 32 - 36

Eritrocitos:6.06 Millon. X µL 3.2 – 5.2

RDW: 13.0 % 11 A-13

INDICE DE MENTZER 10.5 VGM/ERI PUNTO DE CORTE 13

RETICULOCITOS138,500 25,000 A 100,000

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2 GOTAS DE SANGRE Y DOS GOTAS DE AZUL DE CRESILO BRILLANTE

Reticulocitos BUSQUEDA DE ERITROCITOS CON

PRECIPITADOS DE Hb H

FORMA DE RED

RNA RIBOSOMAL

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INCUBAR 15 MINUTOSA 37 GRADOS CENTIGRADOS

2 GOTAS DE SANGRE Y DOS GOTAS DE AZUL DE CRESILO BRILLANTE

HEMOGLOBINA PRECIPITADA

INCUBAR UNA HORAA 37 GRADOS CENTIGRADOS

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ALFA TALASEMIA

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HB NORMAL VCM CMH

Revisión del frotis

Reticulocitos

Resultado Analizador de Hematología

AUMENTADOS

CODOCITOS

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ERITROCITOS AUMENTADOS

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CINETICA DE HIERRO NORMAL

ESTUDIOS ADICIONALES

HIERRO SERICO SATURACION DE TRANSFERRINA FERRITINACAPACIDAD DE FIJACION DE HIERRO A LA TRANSFERRINA TRANSFERRINA

ELECTROFORESIS DE HEMOGLOBINA

TALASEMIA MENOR

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VGM(fL)

Enfermedad Frecuencia

Mayor de 100 Megaloblástica 1%

VGM(fL)

Fisiológico Frecuencia

Mayor de 100 Recién nacidos 98%

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Macrocytic Anemia (Meg.):

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Hemoglobina corpuscular media(HCM)

• Representa la cantidad promedio de hemoglobina en peso contenida en cada eritrocito.

• Se mide en picogramos (pg)

• Los valores de referencia: 26 a 32 pg en hombres y mujeres

• Anemias hipocrómicas, normocromicas.

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• Eritrocitos normocrómicos tienen la cantidad de hemoglobina adecuada para su volumen.

• Una porción clara central que ocupa la tercera parte del diámetro celular.

Hemoglobina corpuscular media(HCM)

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Eritrocitos hipocrómicos, existe menos hemoglobina de laesperada para el volumen de la célula, la porción claracentral ocupa un diámetro mayor.

Hemoglobina corpuscular media(HCM)

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CLASIFICACIÓN MORFOLÓGICA

Hipocrómico Normocrómico Hipercrómico

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CLASIFICACIÓN MORFOLÓGICA

Microcito Normocito Macrocito

Hipocrómico Normocrómico Hipercrómico

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MACROCITICA

HIPOCROMICA

MACROCITICA

NORMOCROMICA

MACROCITICA

HIPERCROMICA

NORMOCITICA

HIPOCROMICA

NORMOCITICA

NORMOCROMICA

NORMOCITICA

HIPERCROMICA

MICROCITICA

HIPOCROMICA

MICROCITICA

NORMOCROMICA

MICROCITICA

HIPERCROMICA

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MACROCITICAHIPOCROMICARetis de estrés (anemias hemoliticas)Estomatocitos,ovaestomatocits

MACROCITICANORMOCROMICAVit,B12, acido folico

MACROCITICAHIPERCROMICA

NORMOCITICAHIPOCROMICADef.hierro inciales, anemias sideroblasticas y talasemias

NORMOCITICANORMOCROMICAAnemias hemoliticas

NORMOCITICAHIPERCROMICAEsferocitos ligeramente deshidratados,acantocitos

MICROCITICAHIPOCROMICAdef,. hierro, poiquilicitostalasemias

MICROCITICANORMOCROMICALeptocitos de las talasemiasDef. de hierro, codocitosesquizocitos

MICROCITICAHIPERCROMICAMicrocitos , esquizocitos o celulas fragmentadas

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• Cantidad de hemoglobina que tiene un eritrocito en relación con su volumen.

• En el frotis los eritrocitos normocrómicos tienen una porción clara central que ocupa la tercera parte del diámetro celular.

Concentración Media de Hemoglobina Globular (CMHG)

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• Eritrocitos hipocrómicos, existe menos hemoglobina de la esperadapara el volumen de la célula, la porción clara central ocupa undiámetro mayor.

• La hipercromía donde se encuentra más hemoglobina de laesperada para su volumen.

• Los valores de referencia: 32 a 36 g/dL.

Concentración Media de Hemoglobina Globular (CMHG)

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BIOMETRIA

HEMATICA: RESULTADOS:

UNIDADES:VALORES

NORMALES

NIÑOS 1 – 5

AÑOS

Hemoglobina: 9.0 g/dl 11 - 15

Hematocrito: 24 % 34 - 44

V. G. M. : 65 fL 70 - 88

M.C.H.: 28 pg 26 – 32

C. M. H. G. : 38 g/dl 32 - 36Eritrocitos:

2.6 Millon. X µL 3.2 – 5.2

RDW:16 % 11 A-13

LEUCOCITOS8.0 X10⁹/L 5 - 15

Plaquetas560 X10⁹/L 150 - 400

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• QUE SIGNIFICA QUE EN TODOS TUS RESULTADOS SE OBSERVE UN AUMENTO DE LA CMHC?

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Amplitud calculada de la distribución de los eritrocitos (ADE), Coeficiente de variación del VGM (CV-VGM)

o Red cell distribution width (RDW).

Histograma de frecuencia, informa sobre valores promedio de VGM.

Estimación cuantitativa de la Anisocitosis.

11-15% para una adulto.

Medida en % como un coeficiente de variación

o en fL como una desviación estándar.

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Amplitud calculada de la distribución de los eritrocitos (ADE)

Anemias ferropénicas que cursan con VGM y HCM bajos

el ADE o RDW está caracteristicamente aumentado (15 a 18%).

En las talasemias , que cursan también con VGM y HCM disminuidos el ADE y el RDW es normal (12 a 13%).

5/11/2020 57

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Reticulocitos• Se refiere a la proporción porcentual

de células rojas inmaduras , recientemente desprovistas del núcleo, que han sido emitidas a la sangre periférica prematuramente por la médula ósea.

• Se denominan reticulocitos porque al teñir los glóbulos rojos con tinciones supravitales, los restos de ácidos nucleicos se disponen en el citoplasma a manera de una red.

5/11/2020 58

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Reticulocitos

QFB-EHDL FELIPE MANCERA PATIÑO

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RETICULOCITOS

Indicador de la magnitud de la eritropoyesis eficaz.

Aumentada la eritropoyesis es dato de : Anemias hemolíticas,después de hemorragias, o en las deficiencias de hierro, vitaminaB12 o ácido fólico durante el tratamiento.

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5/11/2020 61

RETICULOCITOS

EN EL TRATAMIENTO DE ANEMIAS CARENCIALES LA UTILIDAD ES:

QUE EL EL PACIENTE SE ESTA TOMANDO EL TRATAMIENTO QUE ES LA DOSIS ADECUADA QUE EL DIAGNOSTICO ES CORRECTO

deficiencia de hierro, vitamina B12 o ácido fólico.

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5/11/2020 62

RETICULOCITOS

UTILIDAD CLINICA:

. Monitoreo de tratamientos inmunosupresores. Monitoreo terapéutico de:. tratamientos con Eritropoyetina. Corrección de anemias nutricionales. Tratamiento de Mielodisplasias. Definición de necesidad de transfusión en neonatos

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5/11/2020 63

Porcentaje de reticulocitos x numero de eritrocitos x 10,000/uL.

Normales: 25,000 a 100,000 /ul en adultos.

Cantidades absolutas de reticulocitos

reticulocitos

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INDICE DE PRODUCCION DE RETICULOCITOS

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FORMULA RESULTADO

1. CONTAR 10 CAMPOS DE 100 CELULAS ANOTAR LOS RETICULOCITOS

DIVIDIR ENTRE 10

EJ: 980 ERITROCITOS 20 2.0 %

2.- CUENTA CORREGIDA DE RETICULOCITOS

CCR= RET% (HTO PAC/HTO NORMAL)

EJ: RET% (HTO PAC 20/HTO NORMAL 40) 1.0 %

3.- RETICULOCITOS ABSOLUTOS CCR(ERI)(10,000)

EJ: CCR 1.0%(2.0)(10,000) VR 25,000 A 100,000 20,000

4.- INDICE DE PRODUCCION DE RETICULOCITOS

CCR/TIEMPO DE MADURACION

CCR 1.0/ 2.5 0.4

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PROCEDIMIENTO

Hematocrito del

paciente

Tiempo de maduración

en sangre periférica

39 a 44 1.0

34 a 38 1.5

24 a 33 2.0

15 a 23 2.5

Menor de 15 3.0

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RESULTADOS VALORES NORMALES

INDICE DE

PRODUCCION DE

RETICULOCITOS0.4

Un IPR mayor a 2 indica respuesta

adecuada de la medula ósea

Un IPR menor a 2 indica respuesta

inadecuada de la medula ósea

INDICE DE PRODUCCION DE RETICULOCITOS

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ANEMIAS MICROCITICAS HOMOGÉNEAS (VCM < 80 fl y ADE < = 15)

Talasemia menores ( -talasemia)

Enfermedad crónica

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MICROCITICAS HETEROGÉNEAS(VCM < 80 fl y ADE >15)

Deficiencia de hierroHemoglobina STalasemiasCIDPrótesis valvulares

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NORMOCITICA HOMOGÉNEA (VCM 80 A 99 fl ADE <15)

HepatopatiasNefropatiasEnfermedades infecciosasEnfermedades inflamatoriasEsferocitosis hereditariaHemoglobinopatias AS y ACLeucemias agudasEstados posthemorragicos, postransfusionales o

posquimioterapia

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NORMOCITICA HETEROGÉNEA

Primeras etapas de deficiencia de hierro, acido folico o vitamina B12

Anemia perniciosaHemoglobinopatias SS SCSíndromes asociados a mielofibrosisAnemias sideroblasticas

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MACROCITICA HOMOGÉNEA

Recién NacidosEndocrinopatías (tiroides)Hepatopatías (cirrosis alcohólica)Anemias aplásicasEstados preleucémicosSíndrome dismielopoyetico

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MACROCITICA HETEROGÉNEA

Deficiencia de acido fólicoDeficiencia de Vitamina B12Anemias hemolíticas autoinmunesLupus eritematoso

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DESCANSO (SANTORINI)

QUEDATE EN MI CASA!!!

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PRINCIPIOS BÁSICOS

Impedancia electrónica Dispersión óptica

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• m

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PRINCIPIO DE LA IMPEDANCIOMETRIA

-+

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PRINCIPIO DE LA IMPEDANCIOMETRIA

-+

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PRINCIPIO DE LA IMPEDANCIOMETRIA

-+

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5/11/2020 86

HISTOGRAMA

1 VARIABLE

Y: Frecuencia

(cantidad)

X: Variabilidad de la

población

(tamaño)

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5/11/2020 87

2 METODOLOGÍAS:

CITOMETRÍA HEMÁTICA

MÉTODO ÓPTICOIMPEDANCIA

ELÉCTRICA

•Eritrocitos

•Plaquetas

•Leucocitos (diferencial de 3partes)

•Leucocitos (diferencial de 5 partes)

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1.- Histograma de los eritrocitos de un individuo sano.

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2.- Histograma de los eritrocitos de un individuo con anemia por deficiencia de hierro. Nótese como la Hb está baja, el VGM disminuido y el CV-VGM aumentado. La curva del VGM está

desplazado a la izquierda (microcitosis).

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3.- Histograma de los eritrocitos de un individuo con talasemia beta. Nótese cómo la Hb está normal, el VGM disminuido y el CV-VGM, a diferencia de la deficiencia de hierro, es normal. La

curva del VGM está desplazada a la izquierda (microcitosis).

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4.- Histograma de los eritrocitos de un individuo con anemia por deficiencia de hierro a quien se han administrado sales de hierro. Nótese como la Hb se

encuentra disminuida, el VGM normal y el CV-VGM muy alto. La curva del VGM es bimodal y corresponde a dos poblaciones eritrocíticas: una

microcítica desplazada a la izquierda, y otra macrocítica desplazada a la derecha; esta última corresponde a la población eritrocitaria "nueva" que se

ha producido en respuesta a la administración de hierro.

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5.- Histograma de los eritrocitos de un individuo con anemia macrocítica por deficiencia de vitamina B12.

Nótese cómo la Hb está baja, el VGM muy alto y el CV-VGM también muy aumentado; la curva del VMG está

desplazada a la derecha (macrocitosis).

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• Policromatofilia, Eliptocitos, Esferocitos, Acantocitos, Hematíes fragmentados, Dacriocitos, Macroovalocitos, Punteado Basófilo, Anillos de Cabot, Cuerpos de Howell-Jolly, Parásitos hemáticos, etc.

Los analizadores no pueden observar:

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• Crioaglutininas:• Calentar la muestra a 37

grados y volver a analizar

Interferencias

• Se sugiere realizaranticuerpos anti Mycoplasma pneumoneae

• Investigar una leucemialinfoide tipo B

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• Presencia de eritrocitos nucleados

Interferencias

• CORRECCION DELA CUENTA DE LEUCOCITOS

• CUENTA TOTAL X 100

• 100 + ERITROCITOS NUCLEADOS

• CORRECCION DELA CUENTA DE LEUCOCITOS

• 20,000 X 100

• 100 + 40=14,285

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Scikle scan

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Scikle scan

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Scikle scan

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Scikle scan

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5/11/2020 109

Número de glóbulos blancos: (WBC)

Se reporta la cantidad/L ó x109/L

Adulto: 5,000 a 10000/L (5-10 x 109/L)

Las cuentas obtenidas por citometría deben correlacionar con el extendido de sangre periférica.

SERIE BLANCA:

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Cuenta diferencial de leucocitos:

Basófilos: 0-1% (0-90/L)

Eosinófilos: 0-4% (0-300/L)

Monocitos: 1-10% (100-800/L)

Linfocitos: 20-45% (1,500-3,000/L)

Neutrófilos: 45-75% (3,000-7,000/L)

Neutrófilos en banda: 0-4% (0-400/L)

Neutrófilos segmentados: 45-70% (1,300-6,700/L)

FÓRMULA

BLANCA

Segmentados

Eosinófilos

Banda

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5/11/2020 111

Alteraciones de los eosinófilos

• Eosinofilia:

• Infecciones por metazoarios cuando estos invaden los tejidos, en enfermedades alérgicas.

• Asociadas a algunas neoplasias malignas

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5/11/2020 112

Alteraciones de los basófilos

• El aumento de basófilos es poco frecuente.

• Secretan sustancias que promueven la respuesta inflamatoria.

• Se observa generalmente como parte de procesos proliferativos malignos.

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5/11/2020 113

Alteraciones de los monocitos• Se encuentra monocitosis: en infecciones por micobacterias,

hongos , protozoarios y virus, en lesiones con necrosis tisular extensa y en la fase de recuperación de las infecciones por piógenos.

• Como parte de las células malignas proliferativas.

• En la endocarditis bacteriana se observan macrófagos en la circulación.

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5/11/2020 114

Alteraciones de los linfocitos• Linfocitosis a base de linfocitos grandes (T activados

(“irritativos” o" atípicos” ).

• Típicas del síndrome de mononucleosis infecciosa (linfadenopatía, fiebre, faringitis).

• Producida por virus de Epstein Barr, citomegalovirus o toxoplasma.

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5/11/2020 115

CAUSAS DE LEUCOCITOSIS

(MÁS DE 12 X 109//L GLÓBULOS BLANCOS)

Infecciones, dolor, parto, ejercicio vigoroso, Hemorragia aguda, Hemólisis aguda, Padecimientos mielo o linfoproliferativos, Leucemias crónicas, policitemia vera, Leucemia agudas, etc.

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• Neutrófilos bilobulados

• con granulación azurófila

• con cuerpos de Dohle

• con seudópodos

• Con vacuolización incluso de los monocitos.

• Fagocitosis bacteriana

En casos de sepsis ó infecciones severas se pueden observar en la morfología de los

neutrófilos:

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5/11/2020 118

Plaquetas:

Su tamaño varía entre 1 a 4μm y no poseen núcleo. Constituyen la primera línea de taponamiento o cierre de la

herida, cuando ocurre una lesión. Son células provenientes de otras células grandes llamadas

megacariocitos. Producen entre 2,000 a 4,000 plaquetas.

PARÁMETROS DE LA SERIE TROMBÓTICA.Recuento total de plaquetas (PLT):

Las cifras de referencia se halla entre 150 y 400 x109/L

SERIE PLAQUETARIA

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5/11/2020 119

• Número de plaquetas.

• Histograma de distribución de los volúmenes plaquetarios.

• Morfología plaquetaria.

SERIE PLAQUETARIA

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5/11/2020 120

• Causas de trombocitopenia:

• Púrpura auto inmune.

• Leucemia aguda.

• Anemia Aplásica.

• Mieloptísis.

• Hiperesplenismo.

• Púrpura trombocitopénica.

SERIE PLAQUETARIA

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5/11/2020 121

• Transfusiones sanguíneas.

• Lupus Eritematoso generalizado.

• Radiaciones ionizantes.

• Medicamentos citotóxicos.

SERIE PLAQUETARIA

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5/11/2020 122

Causas de trombocitósis.

• Padecimientos malignos.

• Síndromes mieloproliferativos.

• Estado posesplenectomía.

• Padecimientos autoinmunes.

• Anemia por deficiencia de Hierro.

• Infecciones agudas.

• Pancreatitis crónica.

• Cirrosis hepática.

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Bibliografía

• Fundamentos de Hematología. Ruiz Argüelles Ruiz Delgado 5ª. Edición Ed. Medica Panamericana.

• Hemograma Manual de Interpretación. Renato Failace. Flavo Fernandes 6ª. Edición Ed. Medica Panamericana.

• Hematología Fundamentos y aplicaciones Clínicas BernadetteF. Rodak 4ª. Edición Ed. Medica Panamericana.

• Hematología Clínica J. Sans-Sabrafen 5ª. Edición Elsevier

• Hematología Práctica Dacie y Lewis 10ª. Edición Elsevier

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