Upload
others
View
0
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
Purīna un pirimidīna auksotrofiskāsbadošanās molekulārie mehānismi
maizes raugā (YEAUX)
proj. Nr. 1.1.1.2/VIAA/1/16/067
Kas ir purīni un pirimidīni?
(Wikipedia)
Kāpēc maizes raugs?
Genomā ap 6000 gēnu (1996), Ir vienkārši kultivējams, Labi raksturota oglekļa vielmaiņa, Satur tos pašus elementus, ko dzīvnieku šūnas Vairāki matemātiskie modeļi GRAS (generally regarded as safe) organisms Var izmantot lai ražotu insulīnu, benzīnu, morfiju…..
Vislabāk izpētītais eikariotiskais organisms, izmantojams kā eikariotu modeļorganisms.
Maizes raugs Saccharomyces cerevsiae:
wikimedia
Auksotrofija – kas tas ir?
(Petelenz-Kurdziel et al., 2013)
CEN.PK ura3-52 trp1-289 leu2-3_112 his3 Δ1BY4741 his3Δ1 leu2Δ0 met15Δ0 ura3Δ0W303 leu2-3,112 trp1-1 can1-100 ura3-1 ade2-1 his3-11,15
Kāpēc purīnu auksotrofija?
5
Daudzi protozoji – eikariotu šūnu parazīti ir purīnu auksotrofi.
Maizes raugu var izmantot, lai modelētuiespējamos evolūcijas scenārijuskā purīnu auksotrofija var kļūt par organisma izdzīvošanas priekšrocību.
Kāpēc purīnu auksotrofija?
6
Dažas pretvēža zāles ir purīna analogi
S. cerevisiae var izmantot kā vienkāršu modeli,lai novērtētu zāļu blakusefektus vai lai meklētu jaunus zāļu mērķus
Fludarabine phosphate
Thioguanine
Mercaptopurine
Purine
0,0
0,5
1,0
1,5
2,0
2,5
3,0
3,5
4,0
0 1 2 3 4 5time [h]
Cel
l co
un
t [f
old
ch
ange
] Full SD media
SD media w/o adenine
SD media w/o uracil
Data in
collab
oratio
n w
ithU
niversity o
f TartuAuksotrofās badināšanas izraisītie efekti
Augšanas apstāšanās
(Ozolina, 2017)
(Kokina et al., 2014)
Izturība pret nelabvēlīgiem vides apstākļiem
Auksotrofās badināšanas izraisītie efekti
(Kokina, 2014)
Izmaiņas kultūras optiskajās īpašībās
Auksotrofās badināšanas izraisītie efekti
Dabiskās badošanās izraisa šūnas ciklaarestu G1/G0, bet sintētiskās (leu, ura) – nē (Brauer e al., 2008)
Izmaiņas kultūras šūnas ciklā
Data in
collab
oratio
n w
ith Tartu
Un
iversity
Purīnu badošanās gadījumā šūnasapstādina ciklu G1/S
Auksotrofās badināšanas izraisītie efekti
URA1-5
ade8,2
gua1ade12
ura3
ura7,8
Purīnu un pirimidīnu sintēze maizes raugā
Līdzšinējie modeļu celmi:
CEN.PK ura3-52 trp1-289 leu2-3_112 his3 Δ1 ade8Δ0BY4741 his3Δ1 leu2Δ0 met15Δ0 ura3Δ0 ade8Δ0W303 leu2-3,112 trp1-1 can1-100 ura3-1 ade2-1 his3-11,15
YEAUX projekta plānotās aktivitātes
1. Jaunu purīna un pirimidīna auksotrofo rauga celmuizveide.
2. Jauno celmu fizioloģisko parametru raksturošana.3. Histonu modifikāciju (metilēšanas un acetilēšanas)
novērtējums purīna vai pirimidīna auksotrofās badošanāsapstākļos.
4. Ģenētisko elementu identificēšana, kas atbildīgi par stresa izturību purīnu auksotrofās badošanās laikā.
5. Auksotrofo celmu pielāgotības un konkurences pārbaudes.6. Auksotrofās badošanās matemātiskā modeļa izveide.
Projekta 1. ceturksnī pēc plāna nav paredzēti ne jūdžakmeņi, ne sasniedzamie iznākuma rādītāji, tomēr....
YEAUX projekta plānotās aktivitātes
Paveiktais projektā pirmajā ceturksnīUzsākts darbs aktivitātē nr. 1 :Ir izveidoti nepieciešamie in silico konstrukti, ir pasūtināti nepieciešamie reaģenti, vienreizlietojamie materiāli, sagatavoti darbamnepieciešamie raugu celmi. Veikta priekšizpēte raugu konkurences eksperimentiem (aktivitāte nr. 5).
Uzsākta sabiedrības informēšanas kampaņa:a) sociālajā tīklā twitter ziņas, kas attiecas uz pēcdoktorantūras projektu tiek iezīmētas ar
tēmturiem #YEAUX un #PostDocLatvia. b) uzstājos ar lekciju par raugu fizioloģijas pētījumiem Valsts bioloģijas olimpiādes laikā
(26.01.2018). Lekcijas nosaukums “Maizes raugs draugs vai drauds”.
Ir iesniegta un apstiprināta publikācija: Ozolina Z, Kokina A, Liepins J, 2017. Adenine starvation is signalled through environmental stress response system in budding yeast Saccharomyces cerevisiae. Environ Exp Biol 15: 283–288 . Raksts ir tieši saistīts ar pēcdoktorantūras projektu.
Novērojumi projekta izpildes gaitā
Ir lietas, ko pēcdoktorants var un ko nevar ietekmēt. PostDoc elektronisko sistēmu nevar ietekmēt.
Novērojumi projekta izpildes gaitā
Izdevumus pamatojošie dokumenti
Novērojumi projekta izpildes gaitā
Novērojumi projekta izpildes gaitā