Embed Size (px)
DESCRIPTION
Presentacion del proyecto, en este se presentan los gráficos en los que trata de demostrar la disminucion de la población paquetaria por el consumo a dosis elevada de la quinina y el cloranfenicol. Procedimiento seguido, resultados, conclusiones, sugerencias futuras.
Citation preview
““Efecto de dosis elevadas de quinina y Efecto de dosis elevadas de quinina y cloranfenicol en la disminución de la cloranfenicol en la disminución de la
población plaquetaria de población plaquetaria de Cavia Cavia porcellus”porcellus”
Docente:Docente:Alumnos Alumnos
::
Universidad Universidad Nacional “Pedro Nacional “Pedro
Ruiz Gallo”Ruiz Gallo”
PRODUCTOS BIOLÓGICOS
Blgo. Carlos Espinoza Valera Blgo. Carlos Espinoza Valera Rómulo Aycachi IngaRómulo Aycachi IngaAlex M. Chafloque MillonesAlex M. Chafloque Millones
Lambayeque – 2007
““Efecto de dosis elevadas de Efecto de dosis elevadas de Quinina y Cloranfenicol en la Quinina y Cloranfenicol en la disminución de la población disminución de la población
plaquetaria de plaquetaria de Cavia porcellus Cavia porcellus ((cobayos)”cobayos)”
Integrantes: Rómulo Aycachi IngaIntegrantes: Rómulo Aycachi Inga
Alex M. Chafloque Alex M. Chafloque MillonesMillones
ANTECEDENTESANTECEDENTES Cuellar y Rodríguez (2003) trombocitopenia Cuellar y Rodríguez (2003) trombocitopenia
inducida por medicamentos es un tipo de inducida por medicamentos es un tipo de hipersensibilidad de tipo II.hipersensibilidad de tipo II.
MedicamentosMedicamentos como Quinina y la mayoría de como Quinina y la mayoría de antibióticos son inductores frecuentes de antibióticos son inductores frecuentes de Trombocitopenia Inducida por Fármacos.Trombocitopenia Inducida por Fármacos.
La Sociedad Española de Farmacia La Sociedad Española de Farmacia Hospitalaria (2005) define a la Hospitalaria (2005) define a la Trombocitopenia como el conteo de plaquetas Trombocitopenia como el conteo de plaquetas con resultados de menos de 100, 000 pq/mL. con resultados de menos de 100, 000 pq/mL.
Un recuento de menos de 50,000 pq/mL Un recuento de menos de 50,000 pq/mL (trombocitopenia severa) se asocia a un (trombocitopenia severa) se asocia a un mayor riesgo de hemorragia un recuento de mayor riesgo de hemorragia un recuento de plaquetas menor de 10,000 pq/mL puede plaquetas menor de 10,000 pq/mL puede tener consecuencias serias de hemorragia. tener consecuencias serias de hemorragia.
Kelly y Domino 2004, informan que la PTI aparece Kelly y Domino 2004, informan que la PTI aparece después de una infección vírica en niños y que la PTI después de una infección vírica en niños y que la PTI aguda se da mayormente en niños de 2 - 9 años. aguda se da mayormente en niños de 2 - 9 años.
Informan además que si las plaquetas bajan de 10 Informan además que si las plaquetas bajan de 10 000/mL existe riesgo de sangrado espontáneo, por 000/mL existe riesgo de sangrado espontáneo, por encima de 20 000/ mL se asocia a hemorragias no encima de 20 000/ mL se asocia a hemorragias no relacionadas con traumatismos, pero si están por relacionadas con traumatismos, pero si están por debajo de esta cifra deben ser tratadas con debajo de esta cifra deben ser tratadas con plaquetas. plaquetas.
Baehr, Klemperer y Schifin 1936, describen a la PTT Baehr, Klemperer y Schifin 1936, describen a la PTT como un trastorno sanguíneo que provoca la como un trastorno sanguíneo que provoca la formación de coágulos en vasos sanguíneos formación de coágulos en vasos sanguíneos alrededor del cuerpo y que además está relacionado alrededor del cuerpo y que además está relacionado al Síndrome Urémico Hemolítico (SUH) por sus al Síndrome Urémico Hemolítico (SUH) por sus síntomas. síntomas.
Se afirma que es típico de mujeres jóvenes y puede Se afirma que es típico de mujeres jóvenes y puede ser por factores genéticos (falta del gen ser por factores genéticos (falta del gen ADAMTS13ADAMTS13 al nacer). al nacer).
En la Enciclopedia Médica MEDLINE PLUS 2007, En la Enciclopedia Médica MEDLINE PLUS 2007, se informa sobre la Púrpura de Henoch – se informa sobre la Púrpura de Henoch – Schoenlein o también conocida como púrpura Schoenlein o también conocida como púrpura anafilactoide o púrpura vascular; enfermedad anafilactoide o púrpura vascular; enfermedad que consiste en puntos color púrpura, dolor que consiste en puntos color púrpura, dolor articular, problemas gastrointestinales y articular, problemas gastrointestinales y glomerulonefritis. glomerulonefritis.
Es un tipo de vasculitis por hipersensibilidad y Es un tipo de vasculitis por hipersensibilidad y de respuesta inflamatoria de vasos sanguíneos de respuesta inflamatoria de vasos sanguíneos por respuesta anormal del sistema inmunitario. por respuesta anormal del sistema inmunitario.
Se desconoce el motivo de esta respuesta Se desconoce el motivo de esta respuesta anormal.anormal.
Entre los medicamentos implicados en una Entre los medicamentos implicados en una disminución del conteo plaquetario están: disminución del conteo plaquetario están: quimioterapéuticos, quimioterapéuticos, cloranfenicolcloranfenicol, colchicina, , colchicina, agentes bloqueadores H2, agentes bloqueadores H2, heparinaheparina, , hidralacina, indometacina, isoniacida, hidralacina, indometacina, isoniacida, quinidinaquinidina, estreptomicina, sulfonamida, , estreptomicina, sulfonamida, diuréticos tiazídicos y tolbutamina. diuréticos tiazídicos y tolbutamina.
Rojas et. al. 1996 reportaron que dosis de 168 Rojas et. al. 1996 reportaron que dosis de 168 mg/kg de sulfato de quinina por vía intraperitoneal mg/kg de sulfato de quinina por vía intraperitoneal son letales para ratones de ambos sexos. son letales para ratones de ambos sexos.
Gómez 2001, informa que la aparición de la PTT en Gómez 2001, informa que la aparición de la PTT en pacientes tratados con clopidrogel sucede a los 14 pacientes tratados con clopidrogel sucede a los 14 días de consumido el fármaco (11 casos días de consumido el fármaco (11 casos observados) y que en el caso de cloranfenicol, observados) y que en el caso de cloranfenicol, produce una disminución plaquetaria evidente a produce una disminución plaquetaria evidente a partir del quinto día de administración.partir del quinto día de administración.
En el VADEMECUN Farmacológico 2007, se informa En el VADEMECUN Farmacológico 2007, se informa que dosis de 130 mg/kg día de cloranfenicol, por que dosis de 130 mg/kg día de cloranfenicol, por plazos mayores a 30 días pueden llegar a producir plazos mayores a 30 días pueden llegar a producir riesgo de trombocitopenia grave. riesgo de trombocitopenia grave.
El máximo de inhibición de la agregación El máximo de inhibición de la agregación plaquetaria se consigue a los 3 - 7 días. En plaquetaria se consigue a los 3 - 7 días. En condiciones de equilibrio, la agregación plaquetaria condiciones de equilibrio, la agregación plaquetaria es inhibida en un 40-60%, de igual manera el es inhibida en un 40-60%, de igual manera el conteo plaquetario.conteo plaquetario.
Sanchez, 2007 reporta que el Cloramfenicol es Sanchez, 2007 reporta que el Cloramfenicol es un antibiótico de amplio espectro derivado del un antibiótico de amplio espectro derivado del Streptomyces venezuelaeStreptomyces venezuelae..
Afecta el sistema hematopoyético en dos Afecta el sistema hematopoyético en dos formas:formas:
Por una acción tóxica que se manifiesta como Por una acción tóxica que se manifiesta como anemia, trombocitopenia, reticulopenia y anemia, trombocitopenia, reticulopenia y leucopenia reversibles. (Se produce por leucopenia reversibles. (Se produce por depresión de la medula ósea en pacientes que depresión de la medula ósea en pacientes que reciben grandes dosis, por largo tiempo o con reciben grandes dosis, por largo tiempo o con disfunción hepática).disfunción hepática).
Por una respuesta idiosincrática que se Por una respuesta idiosincrática que se manifiesta en anemia aplásica y en muchos manifiesta en anemia aplásica y en muchos casos culmina en pancitopenia irreversible y casos culmina en pancitopenia irreversible y letal. (No está relacionada con la dosis y letal. (No está relacionada con la dosis y ocurre semanas a meses después de que el ocurre semanas a meses después de que el fármaco se ha suspendido). fármaco se ha suspendido).
Pascual, 2007, reporta que la Quinina es una Pascual, 2007, reporta que la Quinina es una alcaloide que se encuentra naturalmente en alcaloide que se encuentra naturalmente en la corteza de la Quina (la corteza de la Quina (Chinchona officinalisChinchona officinalis). ).
Los efectos secundarios producidos por este Los efectos secundarios producidos por este medicamento son: hipotensión, por sus medicamento son: hipotensión, por sus efectos sobre el músculo cardíaco y puede efectos sobre el músculo cardíaco y puede prolongar el intervalo QT. prolongar el intervalo QT.
Otros efectos secundarios principales son: Otros efectos secundarios principales son: Enrojecimiento de la cara, sudoración y Enrojecimiento de la cara, sudoración y prurito; Hipoglicemia e hiperinsulinemia; prurito; Hipoglicemia e hiperinsulinemia; Arritmias, paro sinusal; Hipersensibilidad Arritmias, paro sinusal; Hipersensibilidad (rash, fiebre, disnea, asma, hemólisis, (rash, fiebre, disnea, asma, hemólisis, hemoglobinuria) y trombocitopenia moderada hemoglobinuria) y trombocitopenia moderada y cinchonismo.y cinchonismo.
OBJETIVOSOBJETIVOS
Determinar el número basal de Determinar el número basal de plaquetas en el cobayo.plaquetas en el cobayo.
Determinar la dosis y el tiempo a Determinar la dosis y el tiempo a inocular.inocular.
Determinar la vía de inoculación Determinar la vía de inoculación adecuada.adecuada.
Determinar el número total de Determinar el número total de plaquetas post-inoculaciones.plaquetas post-inoculaciones.
PROBLEMAPROBLEMA
¿Producirán las dosis elevadas de ¿Producirán las dosis elevadas de Quinina, Heparina y Cloranfenicol Quinina, Heparina y Cloranfenicol una disminución de la población una disminución de la población plaquetaria de plaquetaria de Cavia porcellusCavia porcellus??
HIPOTESISHIPOTESIS
Las dosis elevadas de Quinina, Las dosis elevadas de Quinina, Heparina y Cloranfenicol Heparina y Cloranfenicol producen una disminución en producen una disminución en la población plaquetaria de la población plaquetaria de Cavia porcellusCavia porcellus..
MATERIALES MATERIALES Y Y
MÉTODOSMÉTODOS
Colocamos al cobayo Colocamos al cobayo en la tabla de en la tabla de diseccióndisección
Luego, desinfectamos Luego, desinfectamos una de las patitas una de las patitas del coboayo con del coboayo con Alcohol al 90%Alcohol al 90%
Mientras esperamos que Mientras esperamos que seque, preparamos la seque, preparamos la pipeta de Thoma, la pipeta de Thoma, la
cargamos con el cargamos con el diluyente hasta la diluyente hasta la
marca 0.5marca 0.5
Luego, hacemos un Luego, hacemos un apunción la patita apunción la patita desinfectada del desinfectada del
cobayo para sacar cobayo para sacar sangresangre
Luego, absorbemos Luego, absorbemos la sangre hasta la la sangre hasta la
marca 1 d e la pipeta marca 1 d e la pipeta de Thomade Thoma
Luego, Luego, completamos con completamos con el diluyente hasta el diluyente hasta
la marca 11la marca 11
Luego, agitamos por 20 Luego, agitamos por 20 a 30’’a mano y luego a 30’’a mano y luego se pone sobre el se pone sobre el agitador mecánico agitador mecánico durante otros 2 ó 3 durante otros 2 ó 3 minutos másminutos más
Luego, cargamos Luego, cargamos la cámara de la cámara de Neubauer por Neubauer por ambos ladosambos lados
Por último, colocamos la Por último, colocamos la cámara cargada dentro cámara cargada dentro de una placa Petri junto de una placa Petri junto a un algodón a un algodón humedecido y lo humedecido y lo dejamos reposar por 15 dejamos reposar por 15 a 20 min.a 20 min.
Observaciones Observaciones MicroscópicasMicroscópicas
Preparación de dosis a Preparación de dosis a inocularinocular
Cálculo de dosis a Cálculo de dosis a inocular de acuerdo al inocular de acuerdo al
peso peso
Se pesó a los cobayosSe pesó a los cobayos Hirsuto negro: 800 g (H)Hirsuto negro: 800 g (H) Rojo: 650 g (H)Rojo: 650 g (H)
Cloranfenicol: 150 mg/kg x día (21 Cloranfenicol: 150 mg/kg x día (21 días por vía oral)días por vía oral)
150 mg150 mg →→ 1 kg1 kg
X mgX mg →→ 0.8 kg0.8 kg
XX == (150 x 0.8) / 1(150 x 0.8) / 1
XX == 120 mg120 mg
Quinina: 50 mg/kg x día (12 días Quinina: 50 mg/kg x día (12 días por vía oral)por vía oral)
50 mg50 mg →→ 1 kg1 kg
X mgX mg →→ 0.65 kg0.65 kg
XX == (50 x 0.65) /1(50 x 0.65) /1
XX == 32.5 mg/mL32.5 mg/mL
Preparación de la dosis a Preparación de la dosis a inocularinocular
Para Para Cloranfenicol:Cloranfenicol:5 mL5 mL →→ 500 mg500 mg
1 mL1 mL →→ X mgX mg
XX == (1 x 500) / 5(1 x 500) / 5
XX == 100 mg/mL100 mg/mL
1 mL1 mL →→ 100 mg100 mg
X mLX mL →→ 120 mg120 mg
XX == (1 x 120) / 100(1 x 120) / 100
XX == 1.2 mL1.2 mL
Para Quinina:Para Quinina:
5 mL5 mL →→ 250 mg250 mg
1 mL1 mL →→ X mgX mg
XX == (1 x 250) / 5(1 x 250) / 5
XX == 50 mg/mL50 mg/mL
1 mL1 mL →→ 50 mg50 mg
X mLX mL →→ 32.5 mg32.5 mg
XX == (1 x 32.5) /50(1 x 32.5) /50
XX == 0.65 mL0.65 mL
RESULTADOSRESULTADOS
Se realizaron los conteos basales para los Se realizaron los conteos basales para los cobayos obteniéndose los sgtes. Resultados:cobayos obteniéndose los sgtes. Resultados:
CobayoNº de
RecuentoNº de
plaq./mL
Hirsuto negro (Cloranfenicol)
Basal 349,000
Rojo (Quinina) Basal 398,000
Recuento post-inoculaciones:Recuento post-inoculaciones:
Cobayo Negro Hirsuto (Cloranfenicol)
Nº de Recuento Día Nº de plaq./mL
1º Post-inoculación 4 69,000
2º Post-inoculación 8 209,000
3º Post-inoculación 12 182,000
4º Post-inoculación 16 150,000
5º Post-inoculación 20 132,000
Cobayo Rojo (Quinina)
Nº de Recuento Día Nº de plaq./mL1º Post-inoculación 3 387,0002º Post-inoculación 6 165,0003º Post-inoculación 9 128,0004º Post-inoculación 12 91,000
GRAFICO 01GRAFICO 01Respuesta Plaquetaria al Cloranfenicol Cobayo
Hirsuto Negro
349,000
69,000
209,000
182,000
150,000132,000
0
50,000
100,000
150,000
200,000
250,000
300,000
350,000
400,000
0 4 8 12 16 20Días
Nº
de
pla
q./m
L
GRAFICO 02GRAFICO 02Respuesta Plaquetaria a la Quinina
Cobayo Rojo
398,000387,000
165,000
128,000
91,000
0
50,000
100,000
150,000
200,000
250,000
300,000
350,000
400,000
450,000
0 3 6 9 12Días
Nº
de
pla
q./m
L
GRAFICO 03GRAFICO 03Efecto en la Población Plaquetaria
Quinina vs Cloranfenicol
349,000
69,000
209,000
182,000
150,000132,000
398,000387,000
165,000
128,000
91,000
0
50,000
100,000
150,000
200,000
250,000
300,000
350,000
400,000
450,000
Basal 1º Post-in. 2º Post-in. 3º Post-in. 4º Post-in. 5º Post-in.
Nº de Conteo Plaquetario
Nº
de
pla
q./m
L
Negro Hirsuto (Cloranfenicol) Rojo (Quinina)
GRAFICO 04GRAFICO 04
349,000
398,000
69,000
387,000
209,000
165,000182,000
128,000150,000
91,000
132,000
0
50,000
100,000
150,000
200,000
250,000
300,000
350,000
400,000
Nº p
laq.
/mL
Basal 1º Post-in. 2º Post-in. 3º Post-in. 4º Post-in. 5º Post-in.
Comparación Entre Conteos Plaquetarios Quinina vs Cloranfenicol
Negro Hirsuto (Cloranfenicol) Rojo (Quinina)
GRAFICO 05GRAFICO 05Comparación de Respuesta Plaquetaria
Vía Intraperitoneal vs Vía Oral
398,000 387,000
165,000128,000
91,000
506,000
97,000
0
100,000
200,000
300,000
400,000
500,000
600,000
0 3 6 9 12
Días
Nº d
e pl
aq./m
L
Cobayo Rojo Cobayo Azul
CONCLUSIONESCONCLUSIONES
Se llegó a determinar el número basal de Se llegó a determinar el número basal de plaquetas plaquetas Cobayo negro hirsuto (Cloranfenicol): 349, Cobayo negro hirsuto (Cloranfenicol): 349,
000 plaq./mL000 plaq./mL Cobayo azul (Quinina, vía intraperitoneal): Cobayo azul (Quinina, vía intraperitoneal):
506, 000 plaq./mL (murió) 506, 000 plaq./mL (murió) Cobayo rojo (Quinina, vía oral): 398, 000 Cobayo rojo (Quinina, vía oral): 398, 000
plaq./mL plaq./mL Se determinó que las dosis normales de Se determinó que las dosis normales de
administración de los medicamentos a utilizar administración de los medicamentos a utilizar siendo de 130 mg/kg por día para Cloranfenicol siendo de 130 mg/kg por día para Cloranfenicol y de 30 mg/kg por día para Quinina, en el y de 30 mg/kg por día para Quinina, en el primer caso se determinó que una dosis primer caso se determinó que una dosis elevada de 150 mg/kg/día y para el segundo elevada de 150 mg/kg/día y para el segundo una dosis de 50 mg/kg/día.una dosis de 50 mg/kg/día.
Se determinó que el tiempo máximo de Se determinó que el tiempo máximo de consumo para el Cloranfenicol a dosis consumo para el Cloranfenicol a dosis normales es de dos semanas y para la normales es de dos semanas y para la Quinina que es de siete días; por tal motivo, Quinina que es de siete días; por tal motivo, y para fines del experimento, determinamos y para fines del experimento, determinamos un tiempo prolongado de 21 días para un tiempo prolongado de 21 días para Cloranfenicol y diez días para Quinina.Cloranfenicol y diez días para Quinina.
Se determinó que después de cumplido el Se determinó que después de cumplido el tiempo de inoculaciones se tuvo una tiempo de inoculaciones se tuvo una disminución progresiva en la población disminución progresiva en la población plaquetaria de ambos cobayos siendo para el plaquetaria de ambos cobayos siendo para el Cloranfenicol una disminución total en 62.2 Cloranfenicol una disminución total en 62.2 % del valor normal-basal y para la quinina en % del valor normal-basal y para la quinina en un 77.2 %.un 77.2 %.
Por tanto concluimos que el consumo de dosis Por tanto concluimos que el consumo de dosis elevadas de Quinina y Cloranfenicol producen elevadas de Quinina y Cloranfenicol producen una disminución en la población plaquetaria de una disminución en la población plaquetaria de Cavia porcellusCavia porcellus. .
También concluimos que la Quinina, en dosis También concluimos que la Quinina, en dosis elevadas (50 mg/kg/día) y por un tiempo elevadas (50 mg/kg/día) y por un tiempo prolongado (12 d), es mucho más perjudicial prolongado (12 d), es mucho más perjudicial para la población plaquetaria, en cobayos, que para la población plaquetaria, en cobayos, que el consumo de dosis elevadas (150 mg/kg/día) el consumo de dosis elevadas (150 mg/kg/día) de Cloranfenicol, esta también por un tiempo de Cloranfenicol, esta también por un tiempo prolongado (21 d). prolongado (21 d).
La quinina, a pesar de haber sido consumida La quinina, a pesar de haber sido consumida por un tiempo menor al de cloranfenicol (12 d por un tiempo menor al de cloranfenicol (12 d vs 21 d) demostró efectos mucho más vs 21 d) demostró efectos mucho más marcados en la población plaquetaria de los marcados en la población plaquetaria de los cobayos y además demostró que puede ser cobayos y además demostró que puede ser letal a dosis elevadas e inoculadas vía letal a dosis elevadas e inoculadas vía intraperitoneal. intraperitoneal.
RECOMENDACIONERECOMENDACIONESS
Utilizar una población de animales de Utilizar una población de animales de experimentación mucho mayor a la que se experimentación mucho mayor a la que se usó en este proyecto. Una población más usó en este proyecto. Una población más grande nos permitirá obtener datos mucho grande nos permitirá obtener datos mucho más sólidos y de mayor amplitud estadística.más sólidos y de mayor amplitud estadística.
Utilizar diferentes dosis de inoculación, Utilizar diferentes dosis de inoculación, pudiéndose utilizar dosis crecientes, desde el pudiéndose utilizar dosis crecientes, desde el máximo permitido hasta diferentes valores máximo permitido hasta diferentes valores aumentados para poder comparar mejor los aumentados para poder comparar mejor los efectos.efectos.
Utilizar otros medicamentos de prueba para Utilizar otros medicamentos de prueba para posteriores trabajos de investigación, como posteriores trabajos de investigación, como por ejemplo: Heparina, Aspirina, Rifampicina, por ejemplo: Heparina, Aspirina, Rifampicina, Estreptomicina, Ibuprofeno.Estreptomicina, Ibuprofeno.
Desarrollar un método de experimentación que Desarrollar un método de experimentación que permita comparar los efectos del medicamento permita comparar los efectos del medicamento tanto en dosis por vía oral como por vía tanto en dosis por vía oral como por vía parenteral, ya que en el trabajo realizado se parenteral, ya que en el trabajo realizado se pudo observar una diferencia marcada en este pudo observar una diferencia marcada en este aspecto al usar Quinina.aspecto al usar Quinina.
Desarrollar un método de experimentación que Desarrollar un método de experimentación que permita diferenciar los efectos del permita diferenciar los efectos del medicamento tanto a dosis elevadas como por medicamento tanto a dosis elevadas como por tiempo prolongado, esto dos, por separado. tiempo prolongado, esto dos, por separado.
Realizar un mielograma (estudio medular) para Realizar un mielograma (estudio medular) para poder identificar posibles efectos (daños) que poder identificar posibles efectos (daños) que pudiera causar el medicamento sobre las series pudiera causar el medicamento sobre las series hematopoyéticas directamente en la médula hematopoyéticas directamente en la médula ósea, sobre todo en los megacariocitos.ósea, sobre todo en los megacariocitos.
