Iniciamos el Laboratorio Virtual con imágenes

obtenidas por los alumnos de la E.E.M. N° 20

AÑO 2007CURSOS: 3° DECIMA (Cs. Naturales)

2° SEPTIMA (Cs. Sociales)

Crustáceo: Daphnia (pulga de agua)

Crustáceo: Copépodo Cyclops

Larva de mosquito

Capturando una Daphnia.

Protozoo Ciliado

Protozoo Ciliado

Visto en detalle.

Protozoo Ciliado

Saccharomyces cerevisiae

Levadura del pan y la cerveza.

Células CHO de ovario de hámster chino

Células CHO

Células de ovario de hámster chino (en detalle).

Células Wish

Laboratorio de Genética

Transformación de la bacteria E.coli con un plásmido (ADN circular) pGLO que contiene el gen GFP (proteína verde fluorescente) que proviene de la medusa de

las profundidades Aequorea victoria.

PRIMER PASO

Colectar una colonia de bacterias E.coli y dispersarlas en un tubo que contenga solución de transformación (Cloruro de calcio 50 mM). El plásmido pGLO contiene el gen GFP de la proteína verde fluorescente, el gen bla de resistencia al antibiótico Ampicilina y el gen araC que se activa cuando esta presente el hidrato de carbono Arabinosa.

El gen GFP se activa si se activa también el gen araC en presencia de Arabinosa.

SEGUNDO PASO

Agregado del plásmido pGLO que contiene el gen de la proteína verde fluorescente y reposo en hielo durante 30 minutos.

TERCER PASO

Choque térmico: En presencia de una solución facilitadora (cloruro de calcio 50 mM) la membrana adquiere la permeabilidad suficiente para la entrada del plásmido. 50 segundos a 42° C, luego se vuelve a colocar el tubo en hielo durante dos minutos.

CUARTO PASO

Sembrar en una placa de Petri conteniendo Agar, el antibiótico Ampicilina y el hidrato de carbono Arabinosa para favorecer su crecimiento.

RESULTADO FINAL

En presencia de luz ultravioleta se observa una placa (a la izquierda de la foto) con colonias de E.coli normales y otras (a la derecha de la imagen) transformadas con el plásmido pGLO.