Upload
others
View
8
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
Predtransplantaciona imunološka testiranja bolesnika na programu transplantacije bubrega Doc.dr Svetlana Vojvodić
Zavod za transfuziju krvi Vojvodine
Odeljenje za tipizaciju tkiva
IMUNOLOŠKA PRIPREMA
BOLESNIKA cilj sticanje uvida u
imunološki rizik od postupka primene transplantacije
presudna su u izboru odgovarajuće terapijske strategije
vreme i broj testova koji se vrše moţe da varira u zavisnosti od specifiĉnosti transplantacionog programa, duţine ĉekanja na transplantaciju, broja i vrste imunizacijskih događaja kod svakog pojedinaĉnog pacijenta i drugih faktora
Tri grupe testiranja:
-određivenje imunogenetskih faktora (ABO, HLA,MICA/MICB sistema)
-detekcija i identifikacija anti-HLA antitela,anti-MICA/B antitela
-detekcija donor specifiĉnih antitela-CROSS MATCH
ODREĐIVANJE IMUNOGENETSKIH
FAKTORA - ABO sistem
Tri grupe gena
determinišu krvne
grupe ABO sistema:
ABO, Hh i Sese geni
Prisustvo izoaglutinina
anti-A i anti-B
PRIMENA TRANSPLANTACIJE I
KOD ABO INKOPATIBILIJE Plazmafereze - da fiziĉki uklone antitela
Imunoadsorpcija-otklanja samo anti A ili anti-B antitela
Imunoglobulin –koji putem vezivanja za antitela smanjuje destruktivnu aktivnost antitela
Splenektomija - slezina koncentriše B limfocite oko svojih krvnih sudova u borbi protiv infekcije, pa njeno uklanjanje, kod osoba sa visokim nivoom antitela spreĉava odbacivanje grafta
Anti-CD20 antitela (Rituksimab) – smanjuje nivo CD20 proteina, koji se nalazi na zidu većine B ćelija
ODREĐIVANJE IMUNOGENETSKIH
FAKTORA - HLA sistem
na 6. hromozomu u
regionu p21.3
prostor od 4
centimograma
0,1% humanog
genoma
redak crossing over
neravnoteţa vezivanja
alela:
A1B8,A2B5,A3B7,
A2B12,A33B14
METODE DETEKCIJE U HLA
SISTEMU Serološke
Ćelijske:
mešana limfocitna kultura, ćelijski posredovana limfoliza, izo-elektrofokusiranje
Molekulske:
-RFLP(Restriction Fragment Lenght Polymorphism)
-PCR (Polimerase Chain Reaction):
SSP,SSO,PCR-RFLP, SBT,RT-PCR,PCR in situ, cDNK
CROSS-REACTIONS
SPLIT-ovi
SUPERTIPOVI
DISEKVILIBRIJUM LINKAŢE
IZBOR DONORA
ţivi srodni i podudarni u ABO i HLA sistemu
roditelji ili braća sestre
manje od 17% bolesnika ima srodnog donora:
hipertenzija (visok krvni pritisak)
bolesti bubrega
bolesti zavisnosti
Dijabetes
Trudnoća
kardiovaskularne bolesti
HIV
ekstremna gojaznosti
lista ĉekanja na
kadaveriĉnu Tx
Priprema:
-I HLA klasa serološkim testovima
-II HLA molekuleskim, PCR niske rezolucije
-RETIPIZACIJA IZ 2. uzorka
-match -DR,-B,-A
ANTI-HLA ANTITELA
Senzibilizacija alogenim HLA antigenima putem:
- trudnoća,
- transfuzija krvi,
- prethodnim transplantacijama
Preformisana anti-HLA antitela su udruţena sa:
- akutnim odbacivanjem bubrega i ostalih organa(jetra,pluća),
- neefektivnim transfuzijama trombocita,
- hroniĉnim odbacivanjem organa i
- transfuzijom udruţenim oštećenjem pluća (TRALI)
KLINIĈKI ZNAĈAJ ANTI-HLA
ANTITELA
Funkcionalnost
grafta
Pacijenti bez
anti-HLA
antitela
Pacijenti sa anti-
HLA antitelima
5 godina 85% 65%
10 godina 76% 53%
15 godina 56% 25%
Lee P.C., et al. Transplant Proceedings 2009;41:121-123.
METODE DETEKCIJE ANTI-
HLA ANTITELA
ANTIGEN SPECIFIĈNE
ELISA
Luminex tehnologija
protoĉna citometrija putem primene perli
ANTIGEN NON-SPECIFIĈNE
CDC
AHG-CDC PRA (anti-human globulin enhanced cytotoxicity PRA determination)
ćelijska protoĉna citometrija
KREIRANJE ISTORIJE HLA
ALOSENZIBILIZACIJE Identifikacija pacijenata koji imaju ili
nemaju aloantitela na antigene HLA klase I
i klase II
Određivanje specifiĉnosti antitela kod
pacijenata sa detektovanim cirkulišućim
antitelima
Praćenje razvoja antitela kod pacijenata koji
nemaju antitela
Svaka 3 meseca (mart, jun, septembar,
decembar), pohranjivanje svih seruma
CROSS-MATCH
Detekcija donor-specifiĉnih anti-HLA antitela I ili II klase
Metode:
-CDC
-AHG-CDC
-ELISA
-Luminex tehnologija
-Protoĉna citometrija
STRATEGIJA PRIMENE CROSS
MATCH-a
Odabir tehnike
prema senzitivnosti
Odabir seruma
Vreme primene Tx
Ţivi srodni donori :
-prospektivni
-finalni (unutar 48h od Tx)
Kadaveriĉni donori:
-serum unutar 48h od Tx
-istorijski serum
PRIMENA PROTOKOLA
DESENZIBILIZACIJE KOD
POZITIVNOG CROSS-MATCH-a Visoke doze IV imunoglobulina (2g/kg TT)
Izmene plazme (pre i posle Tx)
Imunoadsorpcija proteinom A
Primena anti-CD20 antitela
Primena antitimocitnog globulina
Splenektomija
Blokada komponente C5 komplementa (Eculizumab) ili anti-C5 antitelom
Primena proteazomne inhibicije plazma ćelija putem bortezomib-a
Gloor, J. & Stegall, M. D. Nat. Rev. Nephrol. 2010;6: 297–306.