PRÁCTICAS DE LABORATORIO · 2 q.f.b. dinora bernal iribe indice no practicas pagina 1 determinaciÓn de grupos sanguÍneos y rh (abo) 3 2 separacion del suero y plasma de la sangre

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Q.F.B. Dinora Bernal Iribe

DIRECCIÓN GENERAL DE EDUCACIÓN

TECNOLÓGICA INDUSTRIAL

REALIZA ANALISIS INMUNOLOGICOS

CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO Industrial de servicios 33 “Leona Vicario”

SAN LUIS R.C., SONORA MÈXICO

PRÁCTICAS

DE LABORATORIO

TÉCNICO LABORATORISTA

CLÍNICO

SEMESTRE IV

2


INDICE

No PRACTICAS PAGINA

1 DETERMINACIÓN DE GRUPOS SANGUÍNEOS Y RH (ABO) 3

2 SEPARACION DEL SUERO Y PLASMA DE LA SANGRE 5

3 PRUEBA DE EMBARAZO (GCH) 6

4 PROTEINA C- REACTIVA (PCR) 7

5 ROSA DE BENGALA 9

6 REACCIONES FEBRILES 11

7 FACTOR REUMATOIDE 13

8 DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO DE SIFILIS 15

9 ANTIDOPING 16

10 PRUEBAS CRUZADAS 17

11 HIV 19

COMPETENCIAS: GENERICAS: 5 Desarrolla innovaciones y propone soluciones a problemas a partir de métodos establecidos. 1. Sigue instrucciones y procedimientos de manera reflexiva, comprendiendo

como cada uno de sus pasos contribuye al alcance de un objetivo.

2. Sintetiza evidencias obtenidas mediante la experimentación para producir conclusiones y formular nuevas preguntas.

6. Utiliza las tecnologías de la información y comunicación para procesar e interpretar información.

DISCIPLINARES: Utiliza el lenguaje y la comunicación como una herramienta para interpretar

y representar la realidad que estructura nuestras percepciones diarias. Aplica normas de seguridad en el manejo de sustancias, instrumentos y

equipo en la realización de actividades experimentales. PROFESIONALES: Realiza inmunoensayos

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PRACTICA No________

DETERMINACIÓN DE GRUPOS SANGUÍNEOS Y RH (ABO)

INTRODUCCIÓN: Cuando comenzaron a intentarse las transfusiones de sangre frecuentemente se obtenían resultados fatales los que dependían esencialmente de la información incompleta sobre el fenómeno que puede ocurrir cuando se mezcla sangre de dos individuos de diferente especie o grupo sanguíneo. A este fenómeno se le denomina aglutinación que es cuando los glóbulos rojos del donador reúnen cúmulos cuando entran en contacto con el plasma del receptor sufriendo destrucción, en un principio se creyó que dicho problema era de naturaleza patológica y fue en el año de 1901 cuando LANSTEINER descubrió que era de origen inmunológico, estableciéndose que existen 4 grupos principales de sangre que son: A, B, AB, O. Estos grupos son proteínas que se encuentran en la membrana de los glóbulos rojos y se llaman aglutinógenos (hace las veces de antígeno) y los anticuerpos del suero se llaman aglutininas. También reconoció la relación que existe en una muestra de sangre entre los anticuerpos del suero y los antígenos de los glóbulos rojos. GRUPOS O A B AB

GLÓBULOS ROJOS

AGLUTINÓGENOS (ANTÍGENOS)

PLASMA

AGLUTININAS

(ANTICUERPOS)

Por lo tanto una persona del grupo “A” contiene el aglutinógeno A en los glóbulos rojos y tiene la aglutinina anti-B en el plasma. Y una persona del grupo “B” contiene el antígeno B en los glóbulos rojos y tiene la aglutinina anti-a en el plasma. El grupo “AB” no tiene ninguna aglutinina pero tiene los dos aglutinógenos. En cambio el grupo “O” no tiene aglutinógenos y tiene ambos anticuerpos (“O” significa cero). FACTOR R H Este factor fue descubierto por Lansteiner y Wiener en 1940, ya que previas investigaciones descubrieron una aglutinina anormal en el suero de una mujer que padeció un aborto, y se pensó que esta aglutinina era la causa de la reacción que la madre sufrió al recibir una transfusión de su esposo tipo O Rh positivo.

Las complicaciones hemolíticas hasta entonces inexplicables en las transfusiones de sangre, así como la causa de la enfermedad hemolítica del recién nacido (eritroblastosis fetal) resultaron ser debidas a una incompatibilidad en el sistema

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Rh expresada por la formación de anticuerpos anti-Rh en el suero de personas cuyos eritrocitos carecen de antígeno Rh.

METODO: PRUEBA DE AGLUTINACIÓN EN PLACA

FUNDAMENTO: Se basa en la ausencia o presencia de los aglutinógenos A ó B

MATERIAL:

Lancetas Torundas impregnadas

de alcohol

Antisueros

Anti-A, Anti B, Anti-D

Portaobjetos

ó placas especiales

Aplicador

de madera

MATERIAL BIOLOGICO: sangre capilar

TÉCNICA:

1.- Colocar en el portaobjeto o placa especial 3 gotas de sangre por examinar,

inmediatamente aplicar los antisueros uno para cada gota perfectamente

localizados, se mezclan con un palillo de madera distinto para cada mezcla

2.- Inclinar suavemente el portaobjetos en movimientos circulares y de balanceo,

haciendo que la mezcla vaya hacia la periferia para observar más fácil la

aglutinación.

3.- Observar si existe aglutinación macroscópica, normalmente los resultados son

muy claros, si son dudosos pueden comprobarse examinando la mezcla en el

microscopio con objetivo seco débil.

4.- Las lecturas deben hacerse antes de que se seque la muestra, el tiempo

máximo habitual es de 3 minutos.

“NOTA” Si tiene sangre coagulada remover el coágulo quedando en el fondo suero

y paquete de eritrocitos, poner 2 gotas en un tubo de ensaye + 2 gotas de anti-D

mezclar e incubar a 37º C durante media hora.

INTERPRETACIÓN:

REPORTE:

NOMBRE DEL ESTUDIANTE:

NOMBRE DEL PACIENTE:

RESULTADO:

REVISADO Q.F.B. Dinora Bernal Iribe FECHA:

Anti-A Anti-B

Anti-D

Anti-Rh

O Rh+

Los eritrocitos del grupo “O” no son

aglutinados por ningún antisuero.

Para el

factor Rh

si aglutina

es Rh

positivo y

si no

aglutina

es Rh

negativo

A Rh +

Los eritrocitos del grupo “A” son aglutinados

por el suero anti-A, pero no por el anti-B.

B Rh +

Los eritrocitos del grupo “B” son aglutinados

por el suero anti-B, pero no por el anti-A

AB

Rh+

Los eritrocitos del grupo AB son aglutinados

por ambos antisueros.

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PRACTICA No________

SEPARACION DEL SUERO Y PLASMA DE LA SANGRE

FUNDAMENTO:

El suero se obtiene cuando se coloca una muestra de sangre en un tubo de vidrio

vacio, se deja coagular, se centrifuga y la parte líquida que se separa del coágulo

se llama SUERO.

El plasma se obtiene cuando se coloca una muestra de sangre en un tubo de

vidrio que contenga un anticoagulante (E.D.T.A, heparina), se centrifuga y la parte

líquida que se separa de los elementos celulares se llama PLASMA.

MATERIAL:

4 tubos de ensaye

pequeños

1 tubo con

anticoagulante

Torunda de

algodón

2 pipetas Pasteur con

bombillas

Jeringa de 5 ml torniquete Gradilla 1 aplicador de madera

Centrifuga Baño maría Área blanca Bata blanca

MATERIAL BIOLOGICO: Sangre venosa

TÉCNICA:

PARA OBTENER SUERO:

a) Hacer limpieza donde se va a efectuar la punción venosa. b) Utilizando la jeringa con el bisel hacia arriba realizar la punción venosa y

obtener los 5 mm. de sangre. c) Verter la mitad de la sangre obtenida inmediatamente en un tubo limpio y

vacio, dejando resbalar la sangre por las paredes del mismo. d) Dejar reposar el tubo que contiene la sangre durante unos 20 min. En baño

maría a 37º C con el fin de que se forme el coágulo y se separe del suero. e) Remover el coágulo con un aplicador de madera (para no hemolizar los

glóbulos rojos) y proceder a centrifugar el tubo durante 5 min. (con contrapeso).

f) Con la pipeta Pasteur separar el suero de la sangre coagulada y pasarlo a otro tubo vacio, y anotar el color y aspecto del suero.

PARA OBTENER PLASMA:

a) Una parte de la sangre tomada anteriormente se vacía a un tubo limpio que contenga anticoagulante y se le pone tapón.

b) Se agita el tubo unos minutos con el fin de que se mezcle bien la sangre con el anticoagulante.

c) Proceder a centrifugar durante 5 min (con contrapeso). d) Parar la centrifuga, sacar el tubo y con la pipeta Pasteur separar el plasma de

la sangre no coagulada. e) Pasar el plasma a otro tubo limpio y seco, observar y anotar su color y

aspecto REPORTE:


REVISADO: Q.F.B. Dinora Bernal Iribe FECHA:

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PRACTICA No_______

PRUEBA DE EMBARAZO (GCH)

SIGNIFICADO CLÍNICO: La gonadotropina coriónica humana (GCH) es secretada normalmente por la

placenta. En el embarazo la secreción aumenta tiempo después la GCh se excreta

por la orina y se alcanzan niveles relativamente altos, lo que permite la utilización

de técnicas rápidas y simples para la determinación del embarazo.

MATERIAL:

Un cartucho de prueba compuesto de colorante unido a anticuerpos policlonales

específicos para GCh, anticuerpos inmovilizados contra GCH, anticuerpos

monoclonales IgG.

MATERIAL BIOLOGICO: orina o suero TÉCNICA La prueba es un inmuno ensayo cualitativo en orina y suero utiliza una combinación de anticuerpos que detectan selectivamente niveles bajos de GCh en la muestra (orina o suero). La prueba se lleva a cabo mediante la adición de muestra en la zona de prueba seguido de la formación de líneas coloridas en las zonas de muestra y de control. La muestra migra por acción capilar a lo largo de la membrana y reacciona con el anticuerpo –GCh- colorido conjugado específico y forma una línea colorida en la zona de muestra en la porción de la membrana. Como procedimiento de control, siempre aparecerá una línea colorida en la zona

de control sin importar la presencia de la GCh en la muestra.

INTERPRETACIÓN: La ausencia de esta línea colorida sugiere un resultado negativo.

REPORTE:


NOMBRE DE LA PACIENTE:

RESULTADO:


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PRACTICA No_______

PROTEINA C- REACTIVA (PCR)

INTRODUCCIÓN

En 1930 Tillet y Francis reportaron una reacción que podía ser demostrada en el

suero de pacientes que padecían neumonía, el extracto neumocócico era un

carbohidrato denominado C. (de ahí se deriva su nombre) Y a la proteína humana

capaz de precipitarlo se denomino proteína C- reactiva.

La proteína C-reactiva es un examen general para verificar si hay una inflamación

en todo el cuerpo. No es un examen específico; es decir, puede revelar que usted

tiene una inflamación en alguna parte del cuerpo, pero no puede señalar la

localización exacta.

FUNDAMENTO:

En el laboratorio, la muestra de sangre se mezcla con un líquido llamado

antisuero, el cual contiene sustancias que buscan la proteína específica.

El médico puede ordenar este examen para:

Verificar exacerbaciones de enfermedades inflamatorias como: artritis

reumatoide, lupus o vasculitis.

Determinar si un antiinflamatorio está funcionando para tratar una

enfermedad o afección.

Sin embargo, un nivel de PCR bajo no siempre significa que no se presente una

inflamación. Los niveles de PCR pueden no estar elevados en personas con

artritis reumatoide y lupus, pero la razón de esto no se conoce.

Un examen positivo significa que la persona tiene inflamación en el cuerpo, lo cual

puede deberse a una variedad de afecciones diferentes, incluyendo: Cáncer,

Enfermedad del tejido conectivo, Ataque cardíaco, Infección, Enfermedad

intestinal inflamatoria, Lupus, Neumonía neumocócica, Artritis reumatoide, Fiebre

reumática, Tuberculosis.

MATERIAL:

Laminilla 3 Tubos de ensaye Palillo de madera Pipeta Pasteur c/bombilla

Jeringa 3ml. Torundas c/alcohol torniquete gradilla Área blanca

http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/000431.htm









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TÉCNICA:

1. Esperar que los reactivos alcancen la temperatura ambiente

2. Obtener suero de la manera ya conocida

3. Preparar una dilución 1:20 del suero problema, (diluyendo: 1 ml. del suero

con 1.9 ml. de la solución de trabajo)

4. Colocar una gota del suero diluido en la primera área marcada de la

laminilla y enseguida depositar una gota de los sueros control positivo y

negativo respectivamente en la segunda y tercer área de la misma

5. Mezclar el reactivo PCR látex hasta tener una suspensión homogénea y

añadir una gota a cada uno de los sueros.

6. Mezclar con un aplicador diferente para cada uno

7. Mover en ángulo de 45º la lamina por dos minutos

8. Observar inmediatamente la aglutinación, utilizando una fuente de luz

directa.

VALORES NORMALES EN UN EXAMEN

Varía según el laboratorio en el cual se realice. El examen que el especialista

puede realizar es el Examen de Alta Sensibilidad PCR, para poder diagnosticar el

riesgo de una cardiopatía en el paciente.

Bajo riesgo: bajo 1.0 mg. /L.

Riesgo promedio: niveles entre 1.0 mg. /L. y 3.0 mg. /L.

Alto riesgo: niveles sobre 3.0 mg. /L.

REPORTE:

NOMBRE DEL ESTUDIANTE


RESULTADO:


http://es.wikipedia.org/wiki/Cardiopat%C3%ADa

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PRACTICA No_______

ROSA DE BENGALA

INTRODUCCIÓN: Antígeno Brucelar Amortiguado para el diagnóstico de Brucelosis. Que es una

enfermedad infecciosa causada por el contacto con animales portadores de la

bacteria llamada Brucella la cual puede infectar al ganado vacuno, las cabras, los

camellos, los perros y los cerdos. La bacteria se puede diseminar a los humanos si

se entra en contacto con carne infectada o la placenta de animales infectados o si

bebe leche o come queso sin pasteurizar.

FUNDAMENTO:

Prueba de aglutinación rápida en placa para la detección temprana de aglutininas

específicas de Brucella (Brucella melitensis, abortus y suis).

MATERIAL Y REACTIVOS:

Laminilla 3 Tubos de ensaye Palillo de madera Pipeta Pasteur/ bombilla

Jeringa 3ml. Torundas c/alcohol torniquete gradilla Área blanca

Antígeno Rosa de Bengala Control Positivo y Negativo de Brucella

PROCEDIMIENTO:

1. Obtener el suero de la forma ya conocida

2. Llevar a temperatura ambiente el reactivo y controles.

3. adicione una gota de la muestra del paciente en un círculo de la placa.

4. Mezcle suavemente el Antígeno Rosa de Bengala hasta que se encuentre

totalmente homogéneo, después coloque una gota en la placa de prueba, en

el mismo círculo donde se coloco la muestra del paciente, mezcle ambas con

un aplicador. (Usar un aplicador diferente para cada muestra). Repita este

paso para cada muestra de paciente y controles.

5. Agitar la placa con movimientos rotatorios por 4minutos.

6. Con la ayuda de una fuente de luz directa lea el resultado. Importante:

Después de este tiempo la lectura ya no es válida.

INTERPRETACION:

La lectura debe llevarse a cabo exactamente a los 4 minutos tomados a partir de que se comenzó a mezclar. Este es un tiempo límite óptimo en el que se da un espacio para la observación de ciertas aglutininas que se revelan lentamente y que de otra manera se pueden omitir, además de que se pueden presentar reacciones no específicas.

No Aglutinación “Suero Negativo”

Cualquier cantidad de Aglutinación Presencia de anticuerpos específicos.

“Suero Positivo”

REPORTE: Nombre del estudiante:

Nombre paciente: Resultado:

Revisado: Q.F.B. Dinora Bernal Iribe Fecha:

10


PRACTICA No_____

REACCIONES FEBRILES

INTRODUCCIÓN

Antígenos Febriles es un término referido a un grupo de suspensiones

bacterianas, representativo de un número de bacterias patógenas para la especie

humana y responsables de la aparición de infecciones (brucelosis, salmonelosis y

ciertas rickettsiosis) que cursan con un cuadro febril en el huésped infectado. La

mejor forma para establecer la etiología de una enfermedad infecciosa es el

aislamiento e identificación del agente causal de la misma. Sin embargo, estos

medios de diagnóstico no son siempre de fácil aplicación y es ahí donde radica la

importancia del uso de las suspensiones bacterianas en la detección de los

anticuerpos presentes en el suero del paciente (método indirecto de diagnóstico).

En el diagnóstico clínico, los resultados obtenidos con el uso de los Antígenos

Febriles deben ser considerados siempre en relación a los hallazgos clínicos y

otras pruebas de laboratorio.

Método: Reacción de Widal, Reacción de Weil Félix, Reacción de Hudlesson

Reacción de Widal Reacción de Weil Félix Reacción de Hudlesson

Antígeno tífico “o”

Tífico “H”

Paratífico “A”

Paratífico “B”

tifoidea, salmonelosis

(Alimentos contaminados)

Antígeno Proteus 0X19

Rickettsiosis (garrapata)

Brucella abortus

Brucelosis

FUNDAMENTO:

Se basa en encontrar los anticuerpos aglutinantes producidos por la inoculación

de microorganismos lo cual trae como consecuencia reacciones febriles

intestinales en el individuo.

MATERIAL:

Torundas

c/alcohol

3 Tubos de

ensaye

2 Palillos de

madera

Pipeta Pasteur

c/bombilla

Placa Masini torniquete Jeringa 3ml. gradilla Área blanca

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PRUEBA CUALITATIVA:

Técnica: Reacción de mezcla simple

1. Con una pipeta serológica se coloca en cada una de las secciones o

concavidades (placa de vidrio con 6 concavidades) una gota del suero del

paciente.

2. Cada gota del suero se le agrega una gota de cada uno de los antígenos

febriles (un antígeno distinto para cada gota de suero)

3. Cada palillo de madera se corta en 3 o 6 piezas (o las que se puedan y así

ahorrar) para mezclar bien, ya que cada mezcla debe de hacerse con palillo

diferente.

4. Hacer oscilar cuidadosamente la placa durante 4 min. Y observar la

aglutinación macroscópica.

INTERPRETACIÓN:

Positiva: Si existiera aglutinación y se hace la prueba cuantitativa en placa de la

que haya presentado la aglutinación

Negativa: No hay aglutinación

gota de suero más gota de suero más gota de suero más

Tífico “o” Tífico“H” Paratífico “A”

gota de suero más gota de suero más gota de suero más

Paratífico “B” Proteus 0X19 Brucella abortus

REPORTE:



RESULTADO:


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PRACTICA No_______

FACTOR REUMATOIDE MÉTODO: Prueba Cualitativa en placa utilizando partículas de Látex. Fundamento: Consiste en utilizar partículas de Látex de poliestireno de tamaño uniforme cubiertas de gama globulinas humana que floculan en contacto con el suero de los pacientes con artritis reumatoide y ocasionalmente con otras enfermedades. MATERIAL:

Jeringa de 3 ml.

2 tubos de ensaye

Torundas Placa Pasteur/bombilla

TÉCNICA: La prueba es cualitativa 1. El suero problema se separa por centrifugación de sangre venosa coagulada. 2. Depositar una gota de suero del paciente en una de las secciones de la placa 3. Colocar una gota de suero control positivo y una gota de suero control negativo en secciones separadas de la misma placa de vidrio donde se coloca el suero problema 4. Añadir a cada suero una gota de reactivo globulina – látex y mezclar bien con un aplicador distinto para cada suero 5. Hacer oscilar la placa manualmente dándole movimiento de rotación durante un minuto. Observar si se presenta aglutinación macroscópica en el suero problema y control positivo INTERPRETACIÓN: Negativa: Cuando hay una suspensión uniforme sin aglutinación visible (como en el control negativo) Positivo débil: Aglutinación visible con formación de pequeños agregados o aglutinación parcial Positiva: Aglutinación visible con formación de agregados grandes y fondo claro, aglutinación total (como en control positivo) REPORTE:



RESULTADO:


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PRACTICA No ______

DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO DE SIFILIS

INTRODUCCIÓN

La sífilis es una enfermedad de transmisión sexual (ETS) provocada por la

bacteria Treponema pallidum. A menudo se le ha llamado “la gran imitadora”

porque muchos de sus signos y síntomas no pueden ser diferenciados de los de

otras enfermedades. Las úlceras genitales (chancros) producidos por la sífilis

hacen que sea más fácil trasmitir y contraer la infección por VIH por vía sexual. Se

calcula que el riesgo de contraer la infección por VIH es de 2 a 5 veces más alto

cuando está presente la sífilis.

La sífilis se puede diagnosticar mediante el examen del material de un chancro

(úlcera infecciosa) en un microscopio especial llamado microscopio de campo

oscuro. Si las bacterias de la sífilis están presentes en el chancro, se notarán al

microscopio.

El examen de sangre es otra manera de determinar si una persona tiene sífilis.

Poco tiempo después de que una persona se infecta, el organismo produce

anticuerpos que pueden ser detectados mediante un examen de sangre seguro,

preciso y económico. El nivel de anticuerpos en la sangre será bajo durante meses

o incluso años después de que la enfermedad se ha curado. Dado que una sífilis

no tratada en una mujer embarazada puede infectar y posiblemente provocar la

muerte de su bebé, toda mujer embarazada debería hacerse un examen de

sangre para la detección de la sífilis.

MÉTODO: Prueba cualitativa en placa VDRL (venereal disease reagina laboratory)

FUNDAMENTO: Se basa en detectar un aun anticuerpo llamada “reagina” en

suero de pacientes con sífilis al hacerlo reaccionar con su antígeno especifico

cardiolipina, colesterol, lecitina)

MATERIAL BIOLÓGICO: Sangre venosa

MATERIAL:

2 tubos de

ensaye

Palillos de

madera

Placa para

VDRL

Gradilla los

antígenos

TÉCNICA:

1.- Se prepara el suero problema mediante la técnica ya conocida

2.- Se incuba el suero a 64o centígrados por 3 minutos

3.- Ya inactivado el suero problema se agrega una gota el la placa

4.- Posteriormente se añade una gota del antígeno (cardiolipina)

5.- Se agita por rotación durante 4 min.

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La aglutinación se puede observar microscópicamente por reflejo en luz o al

microscopio de 40 a 100 aumentos

Interpretación:

Partículas repartidas uniformemente o aglomeración muy ligera es

considerada NEGATIVA

Partículas agrupadas en pequeños grumos es POSITIVA DEBIL

Partículas agrupadas en grumos medianos y grandes es POSITIVA

Positiva positiva débil Negativa

REPORTE:



RESULTADO:


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PRACTICA No_______

ANTIDOPING

Drug-Test de Instant-View, nos permite detectar el consumo de 5 drogas de abuso, a través de una muestra de saliva humana. Dicha muestra es obtenida directamente a través de la almohadilla de recolección integrada al inmunoensayo de prueba.

Luego de haberse recolectado la muestra, tan solo es necesario esperar 5 minutos para obtener resultados específicos para cada una de las drogas detectables ya sean estos: positivo o negativo.

Puntos de Corte

Anfetaminas (AMP) 50 mg/ml

Benzodiazepinas (BZD) 20 mg/ml

Cocaína (COC) 20 mg/ml

Marihuana (THC) 40 mg/ml

Opiáceos (OPI) 12 mg/ml

Nota: la técnica o tipo de droga a determinar puede variar dependiendo la marca de la prueba

REPORTE: NOMBRE DEL PACIENTE:

RESULTADOS:


REVISADO: Q.F.B. Dinora Bernal Iribe FECHA:

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PRACTICA No________

PRUEBAS CRUZADAS

INTRODUCCIÓN

Una de las aplicaciones más importantes en la determinación de grupos

sanguíneos es la que se refiere a la preparación para transfusiones.

Esto significa que la sangre del receptor y la del donador deben estudiarse con

mucho cuidado antes de cada transfusión, tantas veces transfusiones se

practiquen, aunque se trate del mismo donador y receptor. Se recomienda que las

pruebas cruzadas deban efectuarse mediante tres métodos cuando menos:

Prueba en tubo con solución salina

Prueba de Coombs Indirecta

Prueba con proteína concentrada

MATERIAL BIOLÓGICO: Sangre del donador, sangre del receptor

MATERIAL DE TRABAJO:

área blanca 8 tubos de ensaye 4 pipetas Pasteur

1 bombilla

2 jeringas de 5 ml. o vacutainer

torniquete galón con cloro

2 pipetas de 1 ml. y una de 10 ml.

1 gradilla

De acuerdo con su importancia relativa, las pruebas cruzadas se dividen en: PRUEBA MAYOR Y PRUEBA MENOR TÉCNICA:

(Todos los pasos se realizan en donador y receptor simultáneamente)

1. Extraer 5 ml. de sangre venosa del donador y receptor

2. Depositar la mitad de sangre en un tubo de ensaye con anticoagulante (tubo

“con”) y la otra mitad en tubo sin anticoagulante (tubo “sin”)

3. Centrifugar ambos tubos y eliminar el plasma del tubo “con” y obtener el

paquete de glóbulos rojos

4. Del tubo “sin” obtener el suero

5. Lavar el paquete de glóbulos 3 veces con solución salina isotónica

6. Preparar 2.5 ml. de la suspensión de glóbulos rojos al 4.5% del donador y

receptor (0.11 ml de suspensión y 2.4 ml. de s. salina)

7. Los tubos del receptor se colocan en el extremo izquierdo de la gradilla y

los del donador en el extremo derecho

8. Marcar 2 tubos de la siguiente manera:

Prueba mayor (+)

SR/ED

-Dos gotas de suero del receptor

-Dos gotas de suspensión de

eritrocitos del donador

Prueba menor ( - )

SD/ER

-Dos gotas de suero del donador

-Dos gotas de suspensión de

eritrocitos del receptor

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9. Centrifugar por un minuto, mezclar e incubar a 37º C por 30 min.

10. Volver a centrifugar por un minuto

INTERPRETACIÓN:

Aglutinación o hemólisis (+) Compatibilidad incompatibilidad

Prueba Mayor (-) Prueba Menor (-) 100 % 0 %

Prueba Mayor (-) Prueba Menor (+) 75 % 25 %

Prueba Mayor (+) Prueba Menor (-) 25 % 75 %

Prueba Mayor (+) Prueba Menor (+) 0 % 100 %

La sangre ideal para transfusiones no presenta aglutinación en ninguna de las dos

pruebas, en caso de extrema urgencia se puede usar sangre que sea 75%

compatible con la del receptor, pero en ningún caso cuando muestra mayor

incompatibilidad.

“OJO” Se deben realizar pruebas testigo y nunca deberán presentar aglutinación

REPORTE:


NOMBRE DEL RECEPTOR:

NOMBRE DEL DONADOR:

RESULTADO:


sr er ed sd

+ _

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PRACTICA No________

VIH

El VIH es el virus que debilita el sistema inmunitario y produce el síndrome de

inmunodeficiencia adquirida (SIDA).

Existen dos pruebas que se utilizan para diagnosticar la infección causada por el

VIH: una detecta la presencia de anticuerpos específicos frente al VIH, que el

organismo produce como respuesta al virus, y la otra identifica la presencia del

virus propiamente dicho.

La prueba es un inmunoensayo rápido para la detección cualitativa de anticuerpos

anti VIH tanto en sangre entera como en suero o plasma humano.

TECNICA:

Agregar una gota de suero o plasma en la concavidad que tiene la prueba, la cual

viaja por capilaridad, si se utiliza sangre completa adicionar una gota de solución

salina

RESULTADO:

POSIT IVO NEGATIVO NULO NULO

C = CONTROL T = TEST (PRUEBA)

REPORTE: NOMBRE DEL PACIENTE:

RESULTADOS:



C C C C

T T T T

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