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Prctica 1: Uso de un microscopio compuesto y un
estereoscopio.
Introduccin: El microscopio ha sido y sigue siendo el
instrumento ms importante en el
desarrollo de la biologa como ciencia. Los microscopios pticos
magnifican la imagen y aumentan
la capacidad para ver detalles que de otro modo no se podran
percibir. El microscopio compuestoconsiste en dos sistemas de
lentes: el lente ocular y lente objetivo, estos montados en los
extremos opuestos de un tubo cerrado.
Los lentes objetivos estn compuestos de varios elementos pticos
que crean una imagen real y
aumentada del objeto examinado. Cuando se mira a travs del lente
ocular se ve una imagen
virtual aumentada de la imagen real.
Algunos descubrimientos interesantes sobre la microscopia a lo
largo de la historia son:
1674 Leeuwenhoek inform su descubrimiento de los protozoos.
Nueve aos mstarde observ bacterias por primera vez.
1838 Schleiden and Schwann propusieron la teora celular,
afirmando que la clulanucleada es la unidad estructural y funcional
de las plantas y animales.
1879 Flemming describi con gran claridad el comportamiento de
los cromosomasdurante la mitosis de las clulas animales.
1881 Retzius describi muchos tejidos animales con una precisin
que todava no ha sidosuperada por ningn especialista de microscopia
ptica. En las dos dcadas
siguientes, tanto l como Cajal y otros histlogos disearon mtodos
de tincin y
establecieron las bases de la anatoma microscpica.
1882 Koch utiliz colorantes de anilina para teir microorganismos
e identific lasbacterias que causan la tuberculosis y el clera. En
las dos dcadas siguientes otros
bacterilogos como Klebs y Pasteur identificaron los agentes
causantes de otras
muchas enfermedades examinando al microscopio preparaciones
teidas.
Para poder manejar este instrumento eficientemente y mantenerlo
en buena condicin, depende
del conocimiento que usted tenga de l.
Fig. 1 Alumna utilizando un microscopio compuesto. Fig. 2
Alumnos utilizando un estereoscopio binocular.
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Objetivos de la prctica:
Conocer el uso y funcionamiento del microscopio compuesto y el
estereoscopio. Aprender a manejar las partes mecnicas de los
aparatos y as poder enfocar con precisin
los materiales de origen biolgico de inters en el transcurso de
las prcticas de
laboratorio.
Aprender a preparar placas temporales con material fresco.
Practicar tcnicas sencillas que permitan apreciar el tamao y la
forma de una variedad de
clulas y microorganismos.
Lista de materiales:
- Estereoscopio - Microscopio ptico compuesto
- Lmpara de iluminacin - Porta y cubre-objetos
- Frascos con agua destilada - Goteros
- Flores e insectos (aportados por el alumno) - Regla
plstica
- Suspensin de levaduras - Granos de sal
- Granos de azcar - Hoja de afeitar (Gillette)
Procedimientos:1. Reconocimiento de las partes del microscopio y
estereoscopio: Identifique las siguientes
partes y rotule las ilustraciones del microscopio y
estereoscopio. Estos son los
instrumentos pticos a usar cada semana en el desarrollo de las
prcticas de laboratorio
de este curso. Las partes a identificar y entender su funcin
son:
Parte o pieza: Su funcin o utilidad:
Base
Brazo
Tubo ocular
Plataforma
Revolver
Condensador
Diafragma
Lentes oculares
Lentes objetivos
Tornillo macro
mtrico
Tornillo micro
mtrico
Fuente de luz
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Fig.3 Esquema de un microscopio compuesto.
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2. Indicaciones para usar un microscopio compuesto: Observe a
travs del instrumento (lente ocular), y ajuste la fuente de luz de
manera que se
obtenga la mayor cantidad de luz.
Coloque el lente objetivo de 4X en posicin de observacin dando
vuelta al revolver. Parahacer esto gire el tornillo macro mtrico
una o dos vueltas hacia arriba.
Obtenga una placa o porta-objetos preparada (o preprese una) y
centrarlo sobre elorificio de la plataforma.
Mirando al instrumento lateralmente, gire con cuidado el
tornillo macro mtrico hasta queel lente objetivo se halle
aproximadamente a unos 4 6 mm por encima del porta-objetos.
Fig. 4 y 5 Alumnos ajustando de forma correcta (observando
lateralmente el instrumento)
Para enfocar, vuelva a observar por el lente ocular y gire el
tornillo para desplazar laplataforma siempre hacia abajo, hasta que
el objeto aparezca claramente. No enfoque
nunca moviendo la plataforma hacia arriba.
Al usar el lente objetivo de 40X, se debe proceder con especial
cuidado. Mirando a travsdel microscopio es imposible apreciar a que
distancia se halla el lente objetivo de la porta-
objetos, y si se enfoca hacia arriba ste puede romperse.
Para cambiar el lente objetivo de 4X por el de 40X, debe usar el
siguiente procedimiento:
Enfoque con el lente objetivo de 4X en posicin de observacin.
(Vase Fig. 5) Coloque el objeto a examinar exactamente en el centro
del campo visual. Utilice el diafragma y condensador para adecuar
la luz. Gire el revlver hasta que el lente objetivo de 40X quede en
posicin de observacin. Ahora gire el tornillo micromtrico en
sentido contrario a las agujas del reloj (para
desplazar la plataforma hacia abajo, o en direccin hacia abajo)
hasta conseguir una
imagen clara de la muestra que intenta observar.
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Recuerde que la regulacin de la luz es muy importante. Es malo
usar demasiada luz y tambin
muy poca. Cuando tiene el objeto bien enfocado, experimente con
el diafragma hasta encontrar
la apertura que suministra una cantidad de luz ptima para hacer
sus observaciones.
Fig. 5 Fotografa de un microscopio compuesto.
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Cuando utiliza un microscopio monocular es importante aprender a
mirar a travs del microscopio
con ambos ojos abiertos, lo cual requiere prctica, pero a fin de
cuentas, es mucho ms cmodo
que tener un ojo abierto y el otro cerrado durante varios
minutos de trabajo.
Fig. 6 Alumno observando a travs del microscopio con ambos
ojos
3. Haciendo preparaciones temporales:Ahora est listo para
comenzar a hacer observaciones con el microscopio, pero primero
se
necesita saber cmo hacer una preparacin temporal. Las siguientes
instrucciones detallan el
procedimiento correcto:
Porta objetos
Cubre objetos
Muestra
Fig. 7 Montaje de una placa temporal.
Limpiar y secar completamente un porta-objetos y un
cubre-objetos. Colocar en el centro del porta-objetos el material
biolgico u objeto que va a observar. Aadir una gota de agua (u otra
solucin cuando sea el caso) sobre el material colocado en
la placa y aplanar o aplastar esto con el cubre-objetos.
Dibuje cada muestra observada con el microscopio con el mayor
realismo posible.
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Algunos consejos en preparar muestras y usar el microscopio:
No use demasiada agua en preparar su muestra. A veces durante la
observacin deprotozoarios y otros organismos vivos, ser necesario
aadir ms agua a causa de la
evaporacin.
Siempre hay que colocar un cubre-objeto sobre muestras con agua
u otro lquido. Debe debajar lentamente el cubre-objeto sobre la
muestra con cierto ngulo de inclinacin. Puede
usar una aguja o pinzas para ayudar. Este procedimiento evita la
formacin de burbujas de
aire entre la porta y cubre-objeto.
4. Preparacin y observacin de una letra impresa: Tome o recorte
de una hoja de papel peridico una letra mayscula y coloque sta
sobre
un porta-objetos. Luego coloque el cubre-objetos sobre la
letra.
Ahora, enfoque sobre la letra con el microscopio usando el
objetivo de 10X. Habiendoobservado atentamente conteste:
Cul es la orientacin de la imagen de la letra vista a travs del
microscopio? En qu
sentido es diferente a su ubicacin en la placa a simple
vista?
Ahora mueva lentamente el tornillo de la plataforma en distintas
direcciones. Habiendoobservado atentamente conteste:
Cundo usted mueve la plataforma con la placa, de la izquierda a
la derecha, en qu
direccin se mueve la letra vista a travs del microscopio?
Luego mueva la placa, utilizando siempre el tornillo de la
plataforma, hacia adelante yhacia atrs. Anote en qu direccin se
mueve la letra cuando est observando a travs de
los lentes del microscopio.
5. Estimacin de las dimensiones del campo visual: Coloque una
regla de plstico sobre la plataforma del microscopio y enfoque
hasta lograr
ver las lneas que indican los centmetros, utilizando los lentes
objetivos de 4X, l0X y 40X.
Estime el dimetro del campo visual con cada uno de los lentes
objetivos anotando suestimacin en mm.
Fig. 8 Regla plstica vista a travs de un microscopio.
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Fig. 9 Montaje de una regla plstica utilizada para obtener el
campo visual de un microscopio.
Examine con el microscopio otros materiales que tenga curiosidad
de observar. Estime las dimensiones de este (os) material (es)
observado (os), tomado como ejemplo
los resultados del procedimiento anterior donde calcul las
dimensiones del campo visual.
6. Preparacin una placa temporal con una muestra de suspensin de
levadura: Agregue una gota de la suspensin de levaduras en un
porta-objetos limpio y coloque el
cubre-objetos encima.
Ahora observe la levadura con los diferentes lentes objetivos
del microscopio (4X, 10X y40X). Haga una estimacin del nmero de
clulas por mm2 del campo visual con
cualquiera de los lentes objetivos.
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7. El Estereoscopio: El estereoscpico (tambin llamado
microscopio o lupa de diseccin) esun aparato con dos lentes
oculares (binocular) y un lente objetivo que proveen una visin
estereoscpica, sea, tridimensional. Puede usarse para observar
objetos con luz reflejada o con
luz transmitida.
Fig.10 fotografa de un estereoscopio.
Coloque una tira de papel impreso, de aproximadamente 10 cm de
longitud y 1 cm deancho sobre la plataforma del instrumento.
Girando el tornillo, haga descender el cuerpo del estereoscopio
altope. Ahora observandoa travs de los lentes oculares, suba el
cuerpo del instrumento hasta que obtenga una
imagen ntida.
A continuacin ajuste la iluminacin y la distancia de separacin
entre los lentes oculares. Mueva la tira de papel impreso hacia
adelante y hacia atrs. En qu direccin se mueve la
imagen vista a travs del estereoscopio?
Observe el filo de una hoja para afeitarse, los granos de azcar
y sal, y las partes de unaflor.
Haga dibujos de cada una de las muestras observadas. Rotule la
ilustracin a continuacin con las partes ms importantes del
estereoscopio.
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Fig. 11 Esquema de un estereoscopio.
8. Recomendaciones importantes: No golpear o arrastrar el
aparato obre la mesa de trabajo. Use siempre ambas manos cuando
traslade su microscopio o estereoscopio de un lugar a
otro.
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Fig. 12 Alumno sosteniendo de forma correcta el microscopio.
Inspeccionar siempre el microscopio antes de usarlo, cualquier
irregularidad reprtela asu instructor del laboratorio.
No desmontar ninguna pieza del microscopio. Usar siempre solo
los microscopios disponibles en su mesa de trabajo y guardarlo en
su
sitio.
Al terminar su prctica de laboratorio, deje desconectado el
instrumento, limpio, seco ycubierto.
Fig. 13 Alumno guardando en un lugar seguro el microscopio.
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9. Preguntas de investigacin: Quin invent el microscopio? Cul es
la utilidad o funcionamiento de cada tipo de microscopio? En qu
objetivo usted obtiene el campo visual de menor rea? De mayor
rea?
