Ppt Kapsel Kel 8

Embed Size (px)

Citation preview

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    1/27

    Assalamualaikum wr.

    wb

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    2/27

    Antibacterial Activity of Marine Source Extracts AgainstMultidrug Resistance Organisms1. Nagi A. A!"a# $e%artment of Medical Microbiology& 'aculty of Medicine and

    "ealt( Sciences& Sana)a *niversity& +.O. ,ox 1-/0& Sana)a& emen.2. Nurmas 3. Mas(an& $e%artment of Microbiology and +arasitology& 'aculty of

    Medicine and "ealt( Sciences& *niversity +utra Malaysia-. Mariana N. S(amsudin& -$e%artment Marine Science and A4uaculture& 3nstitute

    of ,ioscience& *niversity +utra Malaysia&

    5. "absa( Mo(amad& $e%artment of 6(emical Sciences& 'aculty of Science and7ec(nology& *niversity 7erengganu& Malaysia

    8. 6(arles S. 9aira%%an and 2:amberi Sekawi& aboratory of Natural +roducts&$e%artment of 6(emistry& 3nstitute for 7ro%ical ,iology and 6onservation&*niversity Saba(& Malaysia

    ;elom%ok 0

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    3/27

    atar ,elakang

    Resistensiantimikroba

    Meningkatnya volume

    strain

    multiresistant

    +enemuanantibiotik

    yang sulit.

    Aktivitas antibakteri

    sumberrum%ut laut alam.

    (Mainous and Pomeroy, 2001).

    Anti mikroba

    +e%tida @AM+ 

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    4/27

    Anti mikroba+e%tida @AM+ 

    Antimikroba %e%tida @AM+ meru%akankelom%ok baru antibiotik alami yangmemiliki molekul %e%tida terisolasi

    dari organisme sebagai sala( satu%enyelesaian masala( MultidrugResistan @M$R

    Aktif ter(ada% s%ektrum luasmikroorganisme termasukbakteri& #amur& %rotoBoa dan%arasit

    metaBoan @iu et al& 2

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    5/27

    7u#uan+enelitian

    Membuktikan bahwa bahan alam

    rumput laut Graciliria changii daneuchema denticulatum sertateripang memiliki agen antibakteriyang berpotensi

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    6/27

    ,a(an

    Diperoleh di Pantai Morib, elangor,Malaysia

    Gracilaria changii

     !umbuh dan dibudidayakan di Pantaiabah.

    Eucheuma denticulatum

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    7/27

    ,akteri

    Methi"illin resistant taphylo"o""us aureus,trepto"o""us pyogenes, #s"heri"hia "oli,$lebsiella pneumoniae, dan Pseudomonas

    aeruginosa diperoleh dari beberapa rumahsakit di Malaysia.

    emua isolat disediakan dalambentuk stok murni. %solatdipertahankan pada suhu &20 '

    dalam kaldu uria *ertanimengandung 1+ gliserol

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    8/27

      #kstraksi genomik dan #kstraksiorganik

    -enomik ekstraksi dilakukan dengan

    menggunakan Master D/ dan /dengan $it Pemurnian. ampeldi"ampur dalam pelarut, diaduk

    selama 3am dan disimpan pada ' sampai digunakan lebih lan3ut.

    ME7O$E

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    9/27

     

    Skrining molekul +olymerase 6(ain Reaction @+6RC menggunakan

    primer premium

    +ereaksi4 2+ 5 bu6er *! (*iosynte"h %n"), 1, mM

    Mgl2, 200 pM d!P, 20 pmole primer re7erse dan8orward primer, 19 ta: polimerase.

    +rogram +6R4

    Denaturasi awal pada suhu ; ' selama + menit,dilakukan

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    10/27

    ME7O$E$3'*S3

    akram kertas di3enuhkan dengan #kstrak metanolG. changii dan #. denti"ulatum sebagai sampel, metanol>0 (kontrol negati8) dan 7ankomisin (kontrol positi8)

    ampurkan media agar dan bakteri pada "awan petridan biarkan memadat.

     !empatkan "akram kertas pada permukaan agar laludiinkubasi pada suhu

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    11/27

    ME7O$E M36 danM,6

    isolat ditumbu(kan sam%ai konsentrasi setara dengan &8standar Mac'arland %ada su(u -/ D 6 dan diencerkan dalamMueller "inton ,rot( ditamba( dengan 2 Na6l (inggakonsentrasi 8 mg m!1 untuk c(angii F. dan 5 mg m!1untuk denticulatum E..

    Sus%ensi bakteri MRSA dan Non!MRSAditamba(kan ke dalam cawan %etri masing!masing.

    6awan %etri diinkubasi %ada -/ D 6 selama 25 #am dalaminkubator. ;emudian #umla( koloni bakteri yangdikembangkan %ada masing!masing cawan agar di(itung.

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    12/27

    Keterangan: Gracilaria changii on Streptococcus pyogenes(S1), S. aureus (!+), S. aureus (STR) and S. aureus (!").

    (/)@ilter paper dis" eAtra"t

    (*) >0 methanol (egati7e "ontrol)

    (

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    13/27

    $eterangan4

    ()*ilter paper disc impregnated with eAtra"t

    (*) >0 methanol (egati7e "ontrol)

    (+)Gentamycin(#)$ancomycin

    (&) 'enicillin positi%e control

    ()mpicillin

    () -mipenem

    "AS3

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    14/27

    testing o8 E. denticulatum ith S. aureus (STR&), S.aureus (STR), S. aureus (20) and S. aureus (/).

    Keterangan:

    ()*ilter paper disc impregnated with eAtra"t(*)(*) >0 methanol ($ontrol negati8)

    (#)%ancomycin

    (+)Peni"illin.

    "AS3

    $ontrol positi8 

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    15/27

    Dis" us"eptibility !esting o8 E. denticulatum on S. pyogens, E. coli, $. cholera,'. aeruginosa and K. pneumonia.

    () *ilter paper disc impregnated with eAtra"t

    (*) >0 methanol

    (+) gentamycin

    (&) penicillin

    (=) tetracycline

    () mpicillin

    () -mipenem

    "AS3

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    16/27

    M% and M* test 8or M/ isolate with G. changii e0tract.

    The reducing o colonial growth o8 STR& isolates indi2erent "on"entrations o8 G. changii methanol e0tract.

    M*4 +0 mg m&1

    M%4 2+ mg m&1

    "AS3

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    17/27

    M% and M* test 8or on&3RS isolate ith G.changii e0tract. The reducing o colonial growth o8

    (non&3RS) isolates in di2erent "on"entrationso8 Gracilaria changii methanol eAtra"t.

    M*4 +0 mg m&1

    M%4 12.+ mg m&1

    "AS3

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    18/27

    M% and M* test 8or 3RS isolate ith E.denticulatum e0tract. The reducing o colonial

    growth o8 !+ (3RS) isolates in di2erent"on"entrations o8 E. denticulatum methanol eAtra"t.

    M*4 0 mg m&1

    M%4 20 mg m&1

    "AS3

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    19/27

    M% and M* test 8or on&M/ isolate with E.

    denticulatum e0tract. The reducing o "olonialgrowth o8 (non&3RS) isolates in di6erent"on"entrations o8 E. denticulatum methanol eAtra"t.

    M*4 1=.+ mg m&1

    M%4 .=+ mg m&1

    "AS3

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    20/27

      M* dan M% tes dilakukan dengan hati&hati karena mudah terpengaruh oleh

    si8at bakteri yang digunakan, ukuraninokulum dan komposisi mediumbudaya, waktu inkubasi dan kondisiinkubasi, seperti suhu, pB dan aerasi.

      Dalam studi ini, pemba"aan M% danM* yang didasarkan pada 3umlah koloni

    yang tumbuh pada agar&agar Mueiller&Binton adalah konstan untuk keduarumput laut setelah diulang dua kali.

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    21/27

      #kstrak metanol G. 4hangii mengurangi 3umlah pertumbuhan koloni untuk isolat

    M/ pada konsentrasi 2+ mgCm,sedangkan di non&M/ isolat, penurunanpertumbuhan kolonial dapat diamati padakonsentrasi ekstrak 12,+ mgCm. !ingkat

    konsentrasi ini dianggap sebagai M%.

      Pengaruh bakterisida dari ekstrak G. changiiditun3ukkan oleh tidak ada pertumbuhankoloni yang diamati ketika konsentrasiekstrak +0 mgCm untuk semua isolat S.aureus. !ingkat konsentrasi ini dianggapsebagai tingkat M*.

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    22/27

      Basil penelitian mengungkapkan bahwaekstrak metanol E. denticulatum dapat

    menghambat atau mengurangi pertumbuhanS. aureus lebih baik daripada ekstrak metanolG. changii.

       !ingkat M% ekstrak E. denticulatum yangditun3ukkan dengan berkurangnya 3umlahkoloni M/ pada konsentrasi 20 mgCm,

    sedangkan untuk non&M/ sebesar ,=+mgCm. Pengaruh M* ekstrak berada di 0mgCm untuk M/ dan 1=,+ mgCmuntuk non&M/ isolat.

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    23/27

      #kstrak dapat digunakan sebagai alternati8 dalampengobatan M/ dan non&in8eksi M/

    pengganti penisilin karena ekstrak inimenghambat baik M/ dan non&M/ dengan?ona penghambatan > mm dan 1mm lebihdari ?ona hambatan di sekitar disk penisilin.

      *allantine et al. (1;=) serta ei"helt dan*orowit?ka (1;) mengungkapkan akti7itasantimikroba dari rumput laut lebih tinggi terhadap

    bakteri gram positi8 3ika dibandingkan denganakti7itas terhadap gram negati8 bakteri sehinggapenelitian hanya di8okuskan pada baktei grampositi8.

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    24/27

      Metode ekstraksi yang digunakan adalahekstraksi metanol dan Phosphate *u6er aline

    (P*). !u3uannya adalah untuk menemukanekstraksi paling "o"ok dan e8ekti8menghasilkan ?at akti8 antibakteri.

      /kti7itas antibakteri hanya ditemukanmenggunakan pelarut metanol, dimana ter3adipenghambatan pertumbuhan gram positi8patogen, . aureus dan . pyogenes.

      %dentitas senyawa akti8 dalam ekstrak tidakdapat dikonrmasi dalam laporan saat ini.

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    25/27

      Potensi antimikroba berhasil dikembangkan dengandiran"angnya sepasang primer untukmemperkuat gen antimikroba pengkode permeabilitas

    membran yang dibuktikan dari amplikasi gen padaukuran yang diharapkan dari 222 bp.

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    26/27

     ;esim%ulan 

      Basil yang diperoleh menun3ukkan

    bahwa Gracilaria changii dan Euchema

    denticulatum dapat men3adi sumber

    produk alami dengan memodikasi

    antibiotik yang 3uga digunakan sebagai

    multidrug bakteri resisten.

  • 8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8

    27/27

    7ER3MA ;AS3"