Upload
wawan-bw
View
226
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
1/27
Assalamualaikum wr.
wb
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
2/27
Antibacterial Activity of Marine Source Extracts AgainstMultidrug Resistance Organisms1. Nagi A. A!"a# $e%artment of Medical Microbiology& 'aculty of Medicine and
"ealt( Sciences& Sana)a *niversity& +.O. ,ox 1-/0& Sana)a& emen.2. Nurmas 3. Mas(an& $e%artment of Microbiology and +arasitology& 'aculty of
Medicine and "ealt( Sciences& *niversity +utra Malaysia-. Mariana N. S(amsudin& -$e%artment Marine Science and A4uaculture& 3nstitute
of ,ioscience& *niversity +utra Malaysia&
5. "absa( Mo(amad& $e%artment of 6(emical Sciences& 'aculty of Science and7ec(nology& *niversity 7erengganu& Malaysia
8. 6(arles S. 9aira%%an and 2:amberi Sekawi& aboratory of Natural +roducts&$e%artment of 6(emistry& 3nstitute for 7ro%ical ,iology and 6onservation&*niversity Saba(& Malaysia
;elom%ok 0
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
3/27
atar ,elakang
Resistensiantimikroba
Meningkatnya volume
strain
multiresistant
+enemuanantibiotik
yang sulit.
Aktivitas antibakteri
sumberrum%ut laut alam.
(Mainous and Pomeroy, 2001).
Anti mikroba
+e%tida @AM+
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
4/27
Anti mikroba+e%tida @AM+
Antimikroba %e%tida @AM+ meru%akankelom%ok baru antibiotik alami yangmemiliki molekul %e%tida terisolasi
dari organisme sebagai sala( satu%enyelesaian masala( MultidrugResistan @M$R
Aktif ter(ada% s%ektrum luasmikroorganisme termasukbakteri& #amur& %rotoBoa dan%arasit
metaBoan @iu et al& 2
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
5/27
7u#uan+enelitian
Membuktikan bahwa bahan alam
rumput laut Graciliria changii daneuchema denticulatum sertateripang memiliki agen antibakteriyang berpotensi
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
6/27
,a(an
Diperoleh di Pantai Morib, elangor,Malaysia
Gracilaria changii
!umbuh dan dibudidayakan di Pantaiabah.
Eucheuma denticulatum
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
7/27
,akteri
Methi"illin resistant taphylo"o""us aureus,trepto"o""us pyogenes, #s"heri"hia "oli,$lebsiella pneumoniae, dan Pseudomonas
aeruginosa diperoleh dari beberapa rumahsakit di Malaysia.
emua isolat disediakan dalambentuk stok murni. %solatdipertahankan pada suhu &20 '
dalam kaldu uria *ertanimengandung 1+ gliserol
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
8/27
#kstraksi genomik dan #kstraksiorganik
-enomik ekstraksi dilakukan dengan
menggunakan Master D/ dan /dengan $it Pemurnian. ampeldi"ampur dalam pelarut, diaduk
selama 3am dan disimpan pada ' sampai digunakan lebih lan3ut.
ME7O$E
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
9/27
Skrining molekul +olymerase 6(ain Reaction @+6RC menggunakan
primer premium
+ereaksi4 2+ 5 bu6er *! (*iosynte"h %n"), 1, mM
Mgl2, 200 pM d!P, 20 pmole primer re7erse dan8orward primer, 19 ta: polimerase.
+rogram +6R4
Denaturasi awal pada suhu ; ' selama + menit,dilakukan
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
10/27
ME7O$E$3'*S3
akram kertas di3enuhkan dengan #kstrak metanolG. changii dan #. denti"ulatum sebagai sampel, metanol>0 (kontrol negati8) dan 7ankomisin (kontrol positi8)
ampurkan media agar dan bakteri pada "awan petridan biarkan memadat.
!empatkan "akram kertas pada permukaan agar laludiinkubasi pada suhu
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
11/27
ME7O$E M36 danM,6
isolat ditumbu(kan sam%ai konsentrasi setara dengan &8standar Mac'arland %ada su(u -/ D 6 dan diencerkan dalamMueller "inton ,rot( ditamba( dengan 2 Na6l (inggakonsentrasi 8 mg m!1 untuk c(angii F. dan 5 mg m!1untuk denticulatum E..
Sus%ensi bakteri MRSA dan Non!MRSAditamba(kan ke dalam cawan %etri masing!masing.
6awan %etri diinkubasi %ada -/ D 6 selama 25 #am dalaminkubator. ;emudian #umla( koloni bakteri yangdikembangkan %ada masing!masing cawan agar di(itung.
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
12/27
Keterangan: Gracilaria changii on Streptococcus pyogenes(S1), S. aureus (!+), S. aureus (STR) and S. aureus (!").
(/)@ilter paper dis" eAtra"t
(*) >0 methanol (egati7e "ontrol)
(
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
13/27
$eterangan4
()*ilter paper disc impregnated with eAtra"t
(*) >0 methanol (egati7e "ontrol)
(+)Gentamycin(#)$ancomycin
(&) 'enicillin positi%e control
()mpicillin
() -mipenem
"AS3
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
14/27
testing o8 E. denticulatum ith S. aureus (STR&), S.aureus (STR), S. aureus (20) and S. aureus (/).
Keterangan:
()*ilter paper disc impregnated with eAtra"t(*)(*) >0 methanol ($ontrol negati8)
(#)%ancomycin
(+)Peni"illin.
"AS3
$ontrol positi8
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
15/27
Dis" us"eptibility !esting o8 E. denticulatum on S. pyogens, E. coli, $. cholera,'. aeruginosa and K. pneumonia.
() *ilter paper disc impregnated with eAtra"t
(*) >0 methanol
(+) gentamycin
(&) penicillin
(=) tetracycline
() mpicillin
() -mipenem
"AS3
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
16/27
M% and M* test 8or M/ isolate with G. changii e0tract.
The reducing o colonial growth o8 STR& isolates indi2erent "on"entrations o8 G. changii methanol e0tract.
M*4 +0 mg m&1
M%4 2+ mg m&1
"AS3
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
17/27
M% and M* test 8or on&3RS isolate ith G.changii e0tract. The reducing o colonial growth o8
(non&3RS) isolates in di2erent "on"entrationso8 Gracilaria changii methanol eAtra"t.
M*4 +0 mg m&1
M%4 12.+ mg m&1
"AS3
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
18/27
M% and M* test 8or 3RS isolate ith E.denticulatum e0tract. The reducing o colonial
growth o8 !+ (3RS) isolates in di2erent"on"entrations o8 E. denticulatum methanol eAtra"t.
M*4 0 mg m&1
M%4 20 mg m&1
"AS3
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
19/27
M% and M* test 8or on&M/ isolate with E.
denticulatum e0tract. The reducing o "olonialgrowth o8 (non&3RS) isolates in di6erent"on"entrations o8 E. denticulatum methanol eAtra"t.
M*4 1=.+ mg m&1
M%4 .=+ mg m&1
"AS3
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
20/27
M* dan M% tes dilakukan dengan hati&hati karena mudah terpengaruh oleh
si8at bakteri yang digunakan, ukuraninokulum dan komposisi mediumbudaya, waktu inkubasi dan kondisiinkubasi, seperti suhu, pB dan aerasi.
Dalam studi ini, pemba"aan M% danM* yang didasarkan pada 3umlah koloni
yang tumbuh pada agar&agar Mueiller&Binton adalah konstan untuk keduarumput laut setelah diulang dua kali.
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
21/27
#kstrak metanol G. 4hangii mengurangi 3umlah pertumbuhan koloni untuk isolat
M/ pada konsentrasi 2+ mgCm,sedangkan di non&M/ isolat, penurunanpertumbuhan kolonial dapat diamati padakonsentrasi ekstrak 12,+ mgCm. !ingkat
konsentrasi ini dianggap sebagai M%.
Pengaruh bakterisida dari ekstrak G. changiiditun3ukkan oleh tidak ada pertumbuhankoloni yang diamati ketika konsentrasiekstrak +0 mgCm untuk semua isolat S.aureus. !ingkat konsentrasi ini dianggapsebagai tingkat M*.
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
22/27
Basil penelitian mengungkapkan bahwaekstrak metanol E. denticulatum dapat
menghambat atau mengurangi pertumbuhanS. aureus lebih baik daripada ekstrak metanolG. changii.
!ingkat M% ekstrak E. denticulatum yangditun3ukkan dengan berkurangnya 3umlahkoloni M/ pada konsentrasi 20 mgCm,
sedangkan untuk non&M/ sebesar ,=+mgCm. Pengaruh M* ekstrak berada di 0mgCm untuk M/ dan 1=,+ mgCmuntuk non&M/ isolat.
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
23/27
#kstrak dapat digunakan sebagai alternati8 dalampengobatan M/ dan non&in8eksi M/
pengganti penisilin karena ekstrak inimenghambat baik M/ dan non&M/ dengan?ona penghambatan > mm dan 1mm lebihdari ?ona hambatan di sekitar disk penisilin.
*allantine et al. (1;=) serta ei"helt dan*orowit?ka (1;) mengungkapkan akti7itasantimikroba dari rumput laut lebih tinggi terhadap
bakteri gram positi8 3ika dibandingkan denganakti7itas terhadap gram negati8 bakteri sehinggapenelitian hanya di8okuskan pada baktei grampositi8.
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
24/27
Metode ekstraksi yang digunakan adalahekstraksi metanol dan Phosphate *u6er aline
(P*). !u3uannya adalah untuk menemukanekstraksi paling "o"ok dan e8ekti8menghasilkan ?at akti8 antibakteri.
/kti7itas antibakteri hanya ditemukanmenggunakan pelarut metanol, dimana ter3adipenghambatan pertumbuhan gram positi8patogen, . aureus dan . pyogenes.
%dentitas senyawa akti8 dalam ekstrak tidakdapat dikonrmasi dalam laporan saat ini.
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
25/27
Potensi antimikroba berhasil dikembangkan dengandiran"angnya sepasang primer untukmemperkuat gen antimikroba pengkode permeabilitas
membran yang dibuktikan dari amplikasi gen padaukuran yang diharapkan dari 222 bp.
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
26/27
;esim%ulan
Basil yang diperoleh menun3ukkan
bahwa Gracilaria changii dan Euchema
denticulatum dapat men3adi sumber
produk alami dengan memodikasi
antibiotik yang 3uga digunakan sebagai
multidrug bakteri resisten.
8/19/2019 Ppt Kapsel Kel 8
27/27
7ER3MA ;AS3"