Upload
nina-novia
View
246
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
1/47
PERBEDAAN EKSPRESI RESEPTOR ESTROGEN PADA TROFOBLAS PLASENTA
NORMAL DAN TROFOBLAS MOLA
HIDATIDOSA DENGAN PEMAPARAN 17
ESTRADIOL
AGUNG SUPRIYANTO
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
2/47
PENYAKIT
TROFOBLAS
KEGAGALAN DIFERENSIASI
PLASENTA
DEGENERASI
HIDROFIK
MOLA HIDATIDOSA
15% TTG
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
3/47
MOLA HIDATIDOSATTG
ESTROGEN ?
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
4/47
Apakah pemberian 17 estradiol
berbagai dosis berpengaruh terhadapekspresi reseptor estrogen pada
kultur jaringan plasenta normal
dengan kultur jaringan mola hidatidosa
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
5/47
TUJUAN PENELITIAN
Perbedaan
ekspresireseptor
estrogen pada kulturtrophoblas
normal dengan
17 estradiolberbagai dosisdengan yang
tidak
Perbedaan
ekspresireseptor
estrogen padakultur
trophoblasmola dengan
17 estradiolberbagai dosisdengan yang
tidak
Perbedaan
ekspresireseptor
estrogen antara kultur
trofoblasplasenta
normal dengankultur trofoblas
mola
hidatidosa
Perbedaan
ekspresireseptor
estrogen antara kultur
trofoblasnormal dengan
kultur molayang mendapat
17 estradiol
berbagai dosis
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
6/47
KLINISMengetahui perbandingan
ekspresi reseptor estrogen pada trofoblas plasenta normaldan trofoblas mola hidatidosa.
ILMU PENGETAHUAN
Pengetahuan tentangperbandingan ekspresi reseptor
estrogen pada trofoblasplasenta normal dan mola
hidatidosa
Dasar penelitian lanjutan untukmengetahui tranformasi trofoblas
menjadi ganas untuk menelitipatogenesa tumor trofoblas
gestasional
MANFAAT PENELITIAN
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
7/47
FERTILISASI
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
8/47
Gambar Sel Trofoblas
(Ferreti C, 2007)
Diagram Diferensiasi Sel Trofoblas
(Ferreti C, 2007)
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
9/47
SEL TROFOBLAST GANAS
PERUBAHAN
PADA GEN
PERUBAHAN PADA
KROMOSOM
Mutasi:1. Penggantian
2. Insersi
3. Delesi
4. Duplikasi
1. Perubahan pada jumlahkromosom baik hilang
atau bertambah.
2. delesi luas dari segmen
kromosom.
3. inversi dari segmen
kromosom4. translokasi antara 2
kromosom, membentuk
sekuen baru.
5. amplifikasi dari segmen
kromosom
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
10/47
Gambar Tahapan Perubahan Seluler Pada Sel Kanker
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
11/47
ESTROGEN
17-estradiol (E2)
Estron (E1)
Estriol (E3)
Dibentuk di sel Teka dan Granulosa
folikel ovarium
Biosintesis: androgen dan
aromatisasi androstenedionRESEPTOR
RE- RE-
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
12/47
1. A/B RegionThe Regulatory Domain
1. C Region
The DNA Binding Domain
1. D Region
The Hinge
4. E Region
Hormone Binding Domain
5. F Region
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
13/47
AKTIVASI RESEPTOR
ESTEROGENJALUR KLASIKJALUR
ALTERNATIF
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
14/47
Mekanisme karsinogenesis
TTG
Belum diketahui pasti
Ketidakseimbangan
Onkogen
dan
Tumor Supresor GenGambar Mekanisme Stimulasi
Onkogen Pertumbuhan Tumor
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
15/47
FERTI LISASI
NORMAL ABNORMAL
Trofoblas NormalGangguan diferensasi o.k- Sitogenetik- Kelainan ekspresi gen
- Nutrisi
SEL TROFOBLAS MOLA
DNA ploidyEkspresi fosfolipid EstrogenDefisiensi vitamin AOnkogenTumor supresor genHormonal
Growth factor
Estrogen
Up regulasi Mutasi Gen Proliferasi Sel Penurunanreseptor estrogen apoptosis
TUMOR TROFOBLAS GESTATIONAL
DNA Damage
O2-H2O2OHOO-
ROS
KERANGKA TEORI
G O S
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
16/47
Sel trofoblas mola Mutasi Gen Sel Trofoblas Ganas
17 estradiol
Up regulasi Ketidakseimbangan Peningkatan GrowthReseptor Estrogen Protoonkogen factor
Gen apoptosis Inhibisi apoptosis
Tumor supressor GenDNA repair genes
KERANGKA KONSEP
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
17/47
Penelitian eksperimental
menggunakan Randomized GroupControl Design
DESAINPENELITIAN
Lab Kultur Sel/Jaringan, Lab Sentral Biomedikdan Lab Faal
Pelaksanaan: Agustus 2011
TEMPAT DANWAKTU
PENELITIAN
Kriteria eksklusi
Kriteria Inklusi
SAMPEL DANPOPULASI
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
18/47
HIPOTESIS PENELITIAN
Terdapat perbedaan ekspresi reseptor
estrogen pada trofoblas plasenta normal
dan trofoblas mola hidatidosa
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
19/47
Penderitapenyakitsistemik
Tanda-TandaInfeksi
Kehamilan
Postterm
KonsumsiObat
JangkaPanjang
Tidak AdaResikoInfeksi
Ibu sehat Hb10gr/dl
Persalinan SC
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
20/47
BESARSAMPEL
Dihitung memakai rumus
( k 1 ) ( r1 ) 15
VARIABELPENELITIAN
Variabel bebas : estrogen(17estradiol)
Variabel tergantung :
Ekspresi reseptorestrogen pada kulturjaringan placenta normal
dan jaringan molahidatidosa
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
21/47
KULTUR
Imunohistokimia
Pengamatan dan analisa
data
Media free
hormon
Media
free
hormon
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
22/47
Sampel placenta berasal dari bayi yang baru lahirdengan operasi sesar sesuai kriteria eksklusi dan
inklusi
Sampel jaringan mola berasal dari hasil suctioncurettage pada kasus mola hidatidosa
Dosis estrogen : jumlah 17 estradiol yang
diinjeksikan (5nm,10nm,20nm,40nm)
Ekspresi reseptor : jumlah sel yangmengekspresikan reseptor estrogen dihitung per100 sel dengan mikroskop cahaya pembesaran 400 x.
DEFINISI OPERASIONAL
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
23/47
TEHNIK ANALISA DATA
Analisa data uji anova uji Turkeydan Uji regresi
Bermakna bilap
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
24/47
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
25/47
Ekspresi reseptor estrogen pada kultur
trophoblast normal
kontrol 17 etradiol 5 g/ml
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
26/47
Ekspresi reseptor estrogen
pada kultur trophoblast normal
17 etradiol 10 g/ml 17 etradiol 20 g/ml
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
27/47
Ekspresi reseptor estrogen
pada kultur trophoblast normal
17 etradiol 40 g/ml
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
28/47
Ekspresi reseptor estrogen pada kultur
trophoblast mola
kontrol 17 etradiol 5 g/ml
Ek i
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
29/47
Ekspresi reseptor estrogen
pada kultur trophoblast mola
17 estradiol 10 g/ml 17 estradiol 20 g/ml
Ek i t
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
30/47
Ekspresi reseptor estrogen
pada kultur trophoblast mola
17 estradiol 40 g/ml
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
31/47
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
32/47
Tests of Normality
Kelompok
Kolmogorov-Smirnova
Shapiro-Wilk
Statistic df Sig. Statistic df Sig.
Trophoblastmola
kontrol .179 5 .200 .939 5 .656
17 beta estradiol 5 ug/ml .231 5 .200 .866 5 .250
17 beta estradiol 10 ug/ml .187 5 .200 .962 5 .819
17 beta estradiol 20 ug/ml .244 5 .200 .948 5 .720
17 beta estradiol 40 ug/ml .175 5 .200 .961 5 .816
Trophoblastnormal
kontrol .181 5 .200 .969 5 .871
17 beta estradiol 5 ug/ml .255 5 .200 .914 5 .492
17 beta estradiol 10 ug/ml .228 5 .200 .932 5 .607
17 beta estradiol 20 ug/ml .254 5 .200 .877 5 .295
17 beta estradiol 40 ug/ml .239 5 .200 .909 5 .460
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
33/47
Test of Homogeneity of Variances
Levene Statistic df1 df2 Sig.
Trophoblast mola .719 4 20 .589Trophoblast normal .701 4 20 .600
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
34/47
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 3035.440 4 758.860 8.892 .000
Within Groups 1706.800 20 85.340
Total 4742.240 24
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
35/47
61,6 8,325
47,2 7,53047,812,814
377,106
299,274
212,739
0
10
20
30
40
50
60
70
80
Kontrol 17 beta estradiol 5
g/mL17 beta estradiol 10
g/mL17 beta estradiol 20
g/mL17 beta estradiol 40
g/mL17 beta estradiol 80
g/mL
mean
reseptorestrogen
padakultu
rtrophoblastmola
Trophoblast Mola
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
36/47
Sum of Squares Df Mean Square F Sig.
Between Groups 174.960 4 43.740 1.618 .209
Within Groups 540.800 20 27.040
Total 715.760 24
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
37/47
20.85.89
18.43.51
14.84.38
22.66.58
20.25.07
0
5
10
15
20
25
30
Kontrol 17 beta estradiol 5 g/mL 17 beta estradiol 10 g/mL 17 beta estradiol 20 g/mL 17 beta estradiol 40 g/mLmeanreseptorest
rogen
padakulturtropho
blastnormal
Trophoblast Normal
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
38/47
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
39/47
visualisasi dari
krimogen
DAB biotin pada
antibodi sekunderberikatan denganstrep avidin horserads peroxidase(sahrp) yang akan
memvisualisasikanwarna coklat
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
40/47
Kultur trofoblas normal Kultur trofoblas mola
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
41/47
Sel trofoblas mola Mutasi Gen Sel Trofoblas Ganas
17 estradiol
Up regulasi Ketidakseimbangan Peningkatan GrowthReseptor Estrogen Protoonkogen factor
Gen apoptosis Inhibisi apoptosisTumor supressor GenDNA repair genes
16-20%pasiendengankehamilanmola yangmengalami
transformasimenjadi TTG
Waktu ?
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
42/47
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
43/47
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
44/47
KESIMPULAN
Tidak ada perbedaan signifikan ekspresireseptor estrogen pada kulturtrophoblast normal dengan kelompok
perlakuan pemberian 17 beta estradiolberbagai dosis ditunjukkan dengan nilaiSig (p) = 0,209 > = 0,05.
Pemberian 17 beta estradiol dengan
berbagai dosis mampu menurunkanreseptor estrogen pada kulturtrophoblast mola secara signifikandengan nilai Sig (p) = 0,000 < = 0,05.
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
45/47
KESIMPULAN
Terdapat perbedaan yang signifikan ekspresireseptor estrogen pada kultur trophoblast normaldengan kultur trofoblas mola hidatidosa.
Terdapat perbedaan signifikan ekspresi reseptorestrogen pada kultur trophoblast normal denganekspresi reseptor estrogen pada kultur molahidatidosa yang mendapat 17 beta estradiol berbagai
dosis
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
46/47
SARAN
Penelitian lebih lanjut pada beberapa jenis kulturdari jaringan mola baik yang bertransformasimenjadi TTG
Durasi yang tepat untuk mengetahui waktu yangdibutuhkan pada jalur genomik pada reseptorestrogen
7/29/2019 perbedaan ekspresi reseptor estrogen beta
47/47