theprofileofobesepatients whoare metabolicallyhealthyIntJObes(Lond)201135(7)971-981

[10]LeeSKKimSHChoGYetalObesityphenotypeandincidenthypertensionaprospectivecommunity-basedcohortstudyJHypertens201331(1)145-151

[11]KramerCKZinmanBRetnakaranRAremetabolical-lyhealthyoverweightandobesitybenignconditions Asystematicreviewandmeta-analysisAnnInternMed2013159(11)758-769

[12]AungKLorenzoCHinojosaMAetalRiskofdevelo-pingdiabetesandcardiovasculardiseaseinmetabolicallyunhealthy normal-weight and metabolically healthyobeseindividualsJClinEndocrinolMetab201499(2)462-468

[13]AlbertiK GZimmetPShawJThemetabolicsyn-drome-anew worldwidedefinitionLancet2005366(9491)1059-1062

[14]ChenSZhouSWUBetalAssociationbetweenmeta-bolicallyunhealthyoverweightobesityandchronickid-neydiseasetheroleofinflammationDiabetesMetab201440(6)423-430

[15]WangCLiangKZhangXetalMetabolicabnormali-tiesbutnotobesitycontributetothemildlyreducedeGFRin middle-agedandelderly ChineseInt UrolNephrol201446(9)1793-1799

[16]ZhangNChenYGuoXetalTheprevalenceandpre-dictorsofmetabolicallyhealthyobesityinobeseruralpopulationofChinaacross-sectionalstudyPsycholHealthMed201722(3)303-309

[17]ZhangMTongWChenJetalMetabolicallyhealthy

obesityanditsassociatesinMongolianChineseadultsMetabSyndrRelatDisord201412(3)185-190

[18]VanVliet-ostaptchoukJVNuotioMLSlagterSNetalTheprevalenceofmetabolicsyndromeandmeta-bolicallyhealthyobesityinEuropeacollaborativeanal-ysisoftenlargecohortstudiesBMCEndocrDisord2014149

[19]Rey-lopezJPDeRezendeLFPastor-valeroMetalTheprevalenceofmetabolicallyhealthyobesityasys-tematicreviewandcriticalevaluationofthedefinitionsusedObesRev201415(10)781-790

[20]BellJAKivimakiMHamerMMetabolicallyhealthyobesityandriskofincidenttype2diabetesameta-anal-ysisofprospectivecohortstudiesObes Rev201415(6)504-515

[21]HwangLCBaiC HSunC AetalPrevalenceofmetabolicallyhealthyobesityanditsimpactsoninci-dencesofhypertensiondiabetesandthemetabolicsyn-dromeinTaiwanAsiaPacJClinNutr201221(2)227-233

[22]HinnouhoGMCzernichowSDugravotAetalMeta-bolicallyhealthyobesityandriskofmortalitydoesthedefinitionofmetabolichealthmatter DiabetesCare201336(8)2294-2300

[23]HeianzaYKatoKKodamaSetalStabilityandchan-gesinmetabolicallyhealthyoverweightorobesityandriskoffuturediabetesNiigatawellnessstudyObesity(SilverSpring)201422(11)2420-2425

(本文编辑禤霏霏)

广西医科大学学报 2018June35(6)

基金项目国家科技支撑计划课题(No2012BAI09BOD)中国医学科学院地中海贫血防治研究重点实验室

(No2017PT32012)广西科学研究与技术开发计

划项目(桂科合No0992032-11)广西重点实验室

建设项目(No17-259-25)广西地中海贫血防治临

床医学研究中心建设(桂科NoAD17129061)

通信作者E-mailcping62hotmailcom收稿日期2018-04-09

广东湛江地区血红蛋白H病基因突变研究

黄雅莉13陈 萍1梁成鸿2丘玉铃1包 杰3刘 飏4吴兆勇5莫笑欢3黄志敏3

(1广西医科大学第一附属医院地方病科 中国医学科学院地中海贫血防治研究重点实验室南宁 530021

2广东湛江市妇幼保健院湛江 5240013广东医科大学附属医院湛江 5240014广东湛江市霞山妇

幼保健院湛江 5240015广东湛江市第二人民医院湛江 524001)

摘要 目的对广东省湛江地区血红蛋白 H病(HbH病)进行基因分析了解其基因突变类型及临床特征方法采用

血常规血红蛋白分析Gap-PCR及荧光PCR熔解曲线法

DNA测序等方法对 HbH病进行基因分析结果83例 HbH病患者中检出73例缺失型 HbH病(880)包括--SEA-α3751例--SEA-α4222例检出10例非缺失型 HbH 病

(12)包括--SEAαCSα7例--SEAαQSα1例--SEAαPolyAα2例非缺失型HbH病血常规结果显示红细胞计数(RBC)血红蛋白(Hb)及平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)的平均

水平比缺失型 HbH病低非缺失型 HbH病的 HbH平均

middot997middotHuixiaLinetalMetabolicallyhealthyobesityincreaseriskforhypertensionT2DMandthemetabolicsyndromeAcommunity-basedcohortstudy

水平比缺失型 HbH病的高差异均有统计学意义(Plt005)结论湛江地区 HbH病基因类型以缺失型为主其中--SEA-α37最多见--SEA-α42次之非缺失型 HbH病比缺失型 HbH病的贫血严重非缺失型 HbH病比缺失型 HbH病的 HbH含量高首次在广东地区发现--SEAαPolyAαHbH病临床上有中度贫血关键词 α地中海贫血HbH病基因型PolyA中图分类号R556 文献标志码A 文章编号1005-930X(2018)06-0799-05DOI1016190jcnki45-1211r201806014

TheresearchongenotypesofhemoglobinHdiseaseinZhanjiangareaHuangYali13ChenPing1LiangChenghong2QiuYuling1BaoJie3LiuYang4WuZhaoyong5MoXiao-huan3HuangZhimin3(1EndemicDiseasesDepartmentTheFirstAffiliatedHospitalofGuangxiMedicalUniversityKeyLaboratoryofThalassemia MedicineChineseAcademyofMedicalSciencesNanning530021China2ZhanjiangMaternalandChildHealthCareCentreZhanjiang524001China3TheAffilia-tedHospitalofGuangdongMedicalUniversityZhanjiang524001China4MaternalandChildHealthHospitalofXiashanDistrictZhanjiang524001China5ZhanjiangPeoplersquosSecondHospitalGuangdong

Zhanjiang524001China)

Abstract ObjectiveToanalyzethegenotypesandclinicalfeaturesofhemoglobinH(HbH)diseaseinZhanjiangGuangdongMethodsThegenotypeswereanalyzedbybloodroutineanalysishemoglobin(Hb)e-lectrophoresisgap-PCRfluorescencequantitativePCRandDNAsequencingThedatawereprocessedbySPSS220statisticalsoftwareResultsAmong83caseswithHbHdisease73casesweredetectedasde-letionalHbHdiseaseaccountedfor880Theirgenotypesincluded--SEA-α37(51cases)and--SEA-α42(22cases)While10casesweredetectedasnon-deletionalHbHdiseaseaccountedfor12Thenon-deletionalgenotypeswereasfollows7caseswith--SEAαCSα1casewith--SEAαQSα2caseswith--SEAαPolyAαThere-sultsofbloodanalysisshowedthatRBCHbandMCHClevelinnon-deletionalHbHdiseasewerelowerthanthoseindeletionalHbHdisease(Plt005)TheresultsofHbanalysisshowedthatHbHlevelinpa-tientswithnon-deletionalHbHdiseasewashigherthanthatindeletionalHbHdiseasepatients(Plt005)ConclusionTherewerevariousgenotypesofHbHdiseaseinZhanjiangareaThecommongenotypesweredeletionalHbHdiseaseinwhichthegenotypesof--SEA-α37weremostcommonNon-deletionalHbHdis-easewasmuchmoreanemiathandeletionalHbHTheHbHlevelinnon-deletionalHbHdiseasewashigherthanthoseindeletionalHbHdisease--SEAαPolyAαgenotypewasfirstreportedinGuangdongprov-incewhichhadintermediateanemiaKeywords αthalassemiaHbHdiseasegenotypepolyadenylation(PolyA)

α地中海贫血是一种单基因遗传病是由于

16号染色体(16p133)上α珠蛋白基因簇突变导致

α珠蛋白链合成减少或完全不能合成引起的溶血性

贫血缺失型α地中海贫血分为α地中海贫血-1和

α地中海贫血-2α地中海贫血-1是1条染色体上

2个α珠蛋白基因缺陷完全不能合成α珠蛋白链常见 类 型--SEA--THAI--MEDα地 中 海 贫 血-2 是

1条染色体上1个α珠蛋白基因缺陷α珠蛋白链生

成减少常见类型-α37-α42α地中海贫血按临床

表现分为静止型轻型血红蛋白 H病(HbH病)

HbBartrsquos胎儿水肿综合征

HbH病是3个α珠蛋白基因缺失或非缺失突

变引起α珠蛋白肽链生成障碍性贫血其分子遗传

异质性强基因型主要分为缺失型(---α)及非缺失

型(--αTα)临床表现有轻到中度贫血感染妊娠

或使用氧化剂药物等因素会导致贫血加重该病在

我国广东广西云南等地较多见本研究旨在了解

湛江地区 HbH病的基因型血液学情况及临床特

点为预防及治疗HbH病提供参考依据

1 对象与方法

11 研究对象

收集2017年1月至2018年1月在广东医科大

学附属医院湛江市妇幼保健院湛江市第二人民医

院及湛江市霞山妇幼保健院门诊及住院诊治的患

者选取确诊的83例 HbH病患者为研究对象其

middot008middot 广西医科大学学报 2018June35(6)

中男40例女43例年龄3个月至82岁中位年龄

27岁均为汉族均来源于湛江地区83例 HbH病患者中缺失型 HbH病73例非缺失型 HbH病10例

12 血常规分析

采用全自动血液细胞分析仪(迈瑞BC5300深圳)进行红细胞参数分析

13 血红蛋白(Hb)分析

采用全自动毛细管电泳仪(capillarys-2Sebia法国)进行Hb分析及定量

14 DNA提取

使用Lab-Aid820核酸提取仪及DNA提取试

剂(厦门致善生物科技有限公司)提取DNA根据试

剂盒说明书操作

15 α珠蛋白基因分析

151 缺失型α地中海贫血基因分析 使用单管

四重Gap-PCR检测方法检测-α37-α42--SEA--Thai

α地中海贫血基因检测试剂盒由深圳益生堂生物企

业有限公司提供PCR反应体系和扩增条件按试

剂盒说明操作反应在ABIPCR扩增仪(美国Ge-neAmpPCR System 9700)进 行PCR 产 物 经

12琼脂糖凝胶电泳在凝胶成像分析系统(英国

UVIFireReader)上观察拍照

152 非缺失型α地中海贫血基因分析 应用荧

光PCR熔解曲线法检测 HbCSHbQS和 HbWS基因突变(α-地中海贫血基因检测试剂盒(荧光PCR熔解曲线法)厦门致善生物科技有限公司)按试剂

盒说明操作

16 α珠蛋白基因测序

设计引物引物A1F5rsquo-CTCCAGCCGGTTC-CAGCTATT-3rsquo和 引 物 A1R5rsquo-CCAGCTG-CAGAGAGGTTCTAGCC-3rsquo扩增α1珠蛋白片段引物A2F5rsquo-ACTCTTCTGGTCCCCACAGAC-3rsquo和引物 A2R5rsquo-AGACAGGTAAACACCTCCAT-TGTT-3rsquo扩增α2珠蛋白片段PCR反应条件预变性955min941min601min722min共35个循环最后7210min10保存

PCR产物经12琼脂糖凝胶电泳在凝胶成像分

析系统(英国 UVIFireReader)上观察拍照将

PCR产物送至华大基因公司测序用Chromas软

件分析测序结果与正常α珠蛋白基因序列对比分

析

17 统计学方法

采用SPSS220统计软件对数据进行统计分

析计量资料用均数plusmn标准差(1051514xplusmns)表示两独立样

本组间比较采用t检验以Plt005为差异有统计

学意义

2 结 果

21 血常规检测结果

83 例 Hb H 病 患 者 红 细 胞 计 数(RBC)为(16~73)times1012LHb为350~1300gL红细

胞比容(Hct)为111~397平均红细胞体积

(MCV)377~779fL平均红细胞血红蛋白量

(MCH)为134~262pg平均红细胞血红蛋白浓

度(MCHC)为2690~3460gL红细胞分布宽度

(RDW)为143~352

73例缺失型 HbH病RBC为(490plusmn098)times1012LHb为(9190plusmn1587)gLHct为(2920plusmn531)MCV 为 (6260plusmn755)fLMCH 为

(1861plusmn210)pgMCHC为(30310plusmn1366)gL

RDW 为(2370plusmn349)10例非缺失型 HbH病RBC为(373plusmn148)times1012LHb为(7115plusmn1973)gLHct为 (2110plusmn832)MCV 为

(6246plusmn1148)fLMCH 为(1838plusmn209)pg

MCHC为(28840plusmn177)gLRDW 为(2194plusmn238)非缺失型HbH病的RBCHb及MCHC平均水平比缺失型 HbH病低差异有统计学意义

(Plt005)22 Hb分析检测结果

83例HbH病HbH05~232其中缺

失型HbH 病 HbH (793plusmn494)非缺失型

HbH病 HbH(1328plusmn704)非缺失型HbH病的HbH平均水平较缺失型 HbH病高差异有

统计学意义(Plt005)23 α珠蛋白基因分析结果

83例 HbH 病检出73例缺失型 HbH 病

(880)包括--SEA-α3751例(615)--SEA-α42

22例(265)检 出10例 非 缺 失 型 Hb H 病

(120)包括--SEAαCSα7例(84)--SEAαQSα1例(12)及--SEAαPolyAα2例(24)

α2珠蛋白基因PolyA基因突变测序结果显

示PolyA位点 AATAAArarrAATGAA伴随附近

位点6个碱基突变见图1正常α2珠蛋白基因3rsquo非编码区Poly(A)信号AATAAA见图2

middot108middot黄雅莉等广东湛江地区血红蛋白H病基因突变研究

图1 α2珠蛋白基因3rsquo非编码区Poly(A)信号突变(AATAAArarrAATGAA)伴附近6个碱基突变(依次为TgtCAgtCGgtACgtAGgtATgtC)

图2 正常α2珠蛋白基因3rsquo非编码区Poly(A)信号AATAAA

3 讨 论

HbH病是由3个α珠蛋白基因缺失或突变导

致α链合成不足造成αβ珠蛋白链比例失衡过量

的β链形成四聚体β4(HbH包涵体)沉积在红细胞

膜上导致红细胞变形能力差红细胞渗透脆性增

加红 细 胞 寿 命 减 短 及 其 携 氧 功 能 障 碍根 据

WHO报道东南亚每年70万新生儿中有15万例

患 HbH 病中国南方地区 HbH 病患病率为

01~02[1]

HbH病各地区和各民族报道的基因型不同Farashi等[2]报 道伊 朗 HbH 病 的 基 因 型 主 要

为--MED-α37--205α-5ntαChui等[3]报道美国加利

福尼亚州中国香港和加拿大的安大略省 HbH病

的基因型主要为--SEA-α37--SEA-α42--FIL-α37泰国 HbH 病以--SEAαCSα为主Chao等[4]报道台湾90例 HbH 病以--SEA-α37为 主--SEAαCSα次

之--SEA检出率达95有4例--FIL以缺失型 HbH病为主占711非缺失型HbH病占289段山等[5]报道中国南方两广地区78例HbH病

中--SEA-α37为372--SEA-α42为256--SEA

αCSα为243余新园等[6]报道广西200例 HbH病 中--SEA-α37 (335)--SEA-α42 (18)--SEA

αCSα(435)--SEA检出率达99HbCS检出率达

435我国 HbH病以缺失型 HbH病最多见广西地区及泰国以--SEAαCSα较多见周冰燚等[7]

报道广东省育龄人群241例 HbH 病中有131例--SEA-α3756 例--SEA-α4244 例--SEAαWSα12例--SEAαCSα5例--SEAαQSα陈育华等[8]报道的湛

江地区293例α地中海贫血中有19例 HbH病其中11例--SEA-α427例--SEA-α371例--SEA-α37

复合βCD17βN未报道非缺失型HbH病

本研究83例 HbH病检出73例缺失型 HbH病(880)包括--SEA-α3751例--SEA-α4222例检出10例非缺失型 HbH 病(120)包括--SEA

αCSα7例--SEAαQSα1例--SEAαPolyAα2例本研究

HbH 病基因型以--SEA-α37为主非缺失型 HbH病以--SEAαCSα多见与段山等[5]报道广东地区的

结果相同而周冰燚等[7]的研究中非缺失型 HbH病以--SEAαWSα为主

middot208middot 广西医科大学学报 2018June35(6)

与上述报道的广东地区HbH病基因突变类型

不同的是本研究发现2例罕见基因型--SEAαPolyAα病例 1 的 血 液 学 检 测 显 示 Hb86gLMCV648fLMCH182pgHb分析 HbH232病例2的血常规检测显示 Hb82gLMCV666fLMCH185pgHb分析 HbH199临床上

有中度贫血基因分析显示PolyA突变为α2珠蛋

白基因3rsquo非编码区Poly(A)信号突变为AATAAArarrAATGAA伴随PolyA附近的6个碱基的突变与Zhang等[9]报道的结果相一致

α2珠蛋白基因Poly(A)信号突变阻碍了 mR-NA3rsquo端的加Poly(A)尾部结构导致生成的 mR-NA难以运出细胞核且结构不稳定在体内容易被

分解[10]引起α2珠蛋白链合成减少形成α地中海

贫血PolyA突变AATAAArarrAATGAA在中东

地区[13]较多见我国香港曾出现2例 HbH 病为--SEAαPolyAα[11]但未报道相关的血液学检测结

果2016年颜善活等[12]在一个广西地区的家系中

发现2例--SEAαPolyAα有中度贫血血红蛋白分析

HbH98~183Hb H 含 量 增 高Zhang等[9]报道的广西3例 HbH 病--SEAαPolyAα有中度

贫血Hb分析 HbH169~183这些病例

的贫血程度及HbH水平与本研究相似其它类型

的α2珠蛋白基因Poly(A)信号突变还有AATAAAgtAATAAG(HbA2c94AgtG)[13]AATAAAgt AATA--(HbA2c93_94delAA)[14]AAT-AAAgtAATAAC(HbA2c94AgtC)[14]HbA2

c74_89delCCTTCCTGGTCTTTGA[15]这

些突变复合α地中海贫血-1导致的HbH病的临床

表现为中至重度贫血Hb分析HbH含量增高

综上所述本研究中湛江地区 HbH病基因突

变类 型 以 缺 失 型 Hb H 病 为 主--SEA-α37 最 多

见--SEA-α42次之非缺失型 HbH 病以--SEAαCSα多见非缺失型HbH病比缺失型HbH病的贫血

严重Hb分析提示非缺失型 HbH 病比缺失型

HbH病的 HbH 含量高此外本研究首次在广

东地区发现α2珠蛋白基因3rsquo非编码区Poly(A)信号突变(AATAAAgtAATGAA)复合α地中海贫

血-1导致的HbH病这些资料为地中海贫血的临

床诊疗遗传咨询和干预等提供了指导和依据

参考文献

[1] 周玉球肖奇志黄丽娟等HbH 病患儿临床表现与

基因型相关性的研究[J]中华儿科杂志2004(9)57-

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大学学报201128(3)365-368[7] 周冰燚赵文忠李铭臻等广东地区16336例地中海

贫血初筛阳 性 样 本 基 因 型 分 析[J]中 国 医 药 导 报

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[9] ZHANGQFANXXU MetalHbHdiseasecausedbymultiplemutationsinthepolyadenylationsignalsiteand--SEAαα[J]Hemoglobin201741(3)189

[10]韦桂姬α珠蛋白生成障碍性贫血分子流行病学研究现

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genotypinghaemoglobinHdiseaseintheChinese[J]JournalofClinicalPathology200760(8)931-934

[12]颜善活劳可干符可鹏等一种罕见α-地贫基因突变

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[13]ADEKILEADAZABAFAL-SHARIDASIetalClinicaland molecularcharacteristicsofnon-transfu-sion-dependentthalassemiainKuwait[J]Hemoglobin

201539(5)320-326[14]DESHPANDEPKAMALANATHANNSAMPA-

THEetalCharacterizationofclinicalandlaboratoryprofilesofthedeletionalα2-globingenepolyadenylationsignalsequence(AATAAAgtAATA--)inanIndian

population[J]Hemoglobin201539(6)415-418[15]CORNELISLHDOUGLASRHα-thalassaemia[J]

OrphanetJournalofRareDiseases2010(1)13

(本文编辑冯 雁)

middot308middot黄雅莉等广东湛江地区血红蛋白H病基因突变研究

水平比缺失型 HbH病的高差异均有统计学意义(Plt005)结论湛江地区 HbH病基因类型以缺失型为主其中--SEA-α37最多见--SEA-α42次之非缺失型 HbH病比缺失型 HbH病的贫血严重非缺失型 HbH病比缺失型 HbH病的 HbH含量高首次在广东地区发现--SEAαPolyAαHbH病临床上有中度贫血关键词 α地中海贫血HbH病基因型PolyA中图分类号R556 文献标志码A 文章编号1005-930X(2018)06-0799-05DOI1016190jcnki45-1211r201806014

TheresearchongenotypesofhemoglobinHdiseaseinZhanjiangareaHuangYali13ChenPing1LiangChenghong2QiuYuling1BaoJie3LiuYang4WuZhaoyong5MoXiao-huan3HuangZhimin3(1EndemicDiseasesDepartmentTheFirstAffiliatedHospitalofGuangxiMedicalUniversityKeyLaboratoryofThalassemia MedicineChineseAcademyofMedicalSciencesNanning530021China2ZhanjiangMaternalandChildHealthCareCentreZhanjiang524001China3TheAffilia-tedHospitalofGuangdongMedicalUniversityZhanjiang524001China4MaternalandChildHealthHospitalofXiashanDistrictZhanjiang524001China5ZhanjiangPeoplersquosSecondHospitalGuangdong

Zhanjiang524001China)

Abstract ObjectiveToanalyzethegenotypesandclinicalfeaturesofhemoglobinH(HbH)diseaseinZhanjiangGuangdongMethodsThegenotypeswereanalyzedbybloodroutineanalysishemoglobin(Hb)e-lectrophoresisgap-PCRfluorescencequantitativePCRandDNAsequencingThedatawereprocessedbySPSS220statisticalsoftwareResultsAmong83caseswithHbHdisease73casesweredetectedasde-letionalHbHdiseaseaccountedfor880Theirgenotypesincluded--SEA-α37(51cases)and--SEA-α42(22cases)While10casesweredetectedasnon-deletionalHbHdiseaseaccountedfor12Thenon-deletionalgenotypeswereasfollows7caseswith--SEAαCSα1casewith--SEAαQSα2caseswith--SEAαPolyAαThere-sultsofbloodanalysisshowedthatRBCHbandMCHClevelinnon-deletionalHbHdiseasewerelowerthanthoseindeletionalHbHdisease(Plt005)TheresultsofHbanalysisshowedthatHbHlevelinpa-tientswithnon-deletionalHbHdiseasewashigherthanthatindeletionalHbHdiseasepatients(Plt005)ConclusionTherewerevariousgenotypesofHbHdiseaseinZhanjiangareaThecommongenotypesweredeletionalHbHdiseaseinwhichthegenotypesof--SEA-α37weremostcommonNon-deletionalHbHdis-easewasmuchmoreanemiathandeletionalHbHTheHbHlevelinnon-deletionalHbHdiseasewashigherthanthoseindeletionalHbHdisease--SEAαPolyAαgenotypewasfirstreportedinGuangdongprov-incewhichhadintermediateanemiaKeywords αthalassemiaHbHdiseasegenotypepolyadenylation(PolyA)

α地中海贫血是一种单基因遗传病是由于

16号染色体(16p133)上α珠蛋白基因簇突变导致

α珠蛋白链合成减少或完全不能合成引起的溶血性

贫血缺失型α地中海贫血分为α地中海贫血-1和

α地中海贫血-2α地中海贫血-1是1条染色体上

2个α珠蛋白基因缺陷完全不能合成α珠蛋白链常见 类 型--SEA--THAI--MEDα地 中 海 贫 血-2 是

1条染色体上1个α珠蛋白基因缺陷α珠蛋白链生

成减少常见类型-α37-α42α地中海贫血按临床

表现分为静止型轻型血红蛋白 H病(HbH病)

HbBartrsquos胎儿水肿综合征

HbH病是3个α珠蛋白基因缺失或非缺失突

变引起α珠蛋白肽链生成障碍性贫血其分子遗传

异质性强基因型主要分为缺失型(---α)及非缺失

型(--αTα)临床表现有轻到中度贫血感染妊娠

或使用氧化剂药物等因素会导致贫血加重该病在

我国广东广西云南等地较多见本研究旨在了解

湛江地区 HbH病的基因型血液学情况及临床特

点为预防及治疗HbH病提供参考依据

1 对象与方法

11 研究对象

收集2017年1月至2018年1月在广东医科大

学附属医院湛江市妇幼保健院湛江市第二人民医

院及湛江市霞山妇幼保健院门诊及住院诊治的患

者选取确诊的83例 HbH病患者为研究对象其

middot008middot 广西医科大学学报 2018June35(6)

中男40例女43例年龄3个月至82岁中位年龄

27岁均为汉族均来源于湛江地区83例 HbH病患者中缺失型 HbH病73例非缺失型 HbH病10例

12 血常规分析

采用全自动血液细胞分析仪(迈瑞BC5300深圳)进行红细胞参数分析

13 血红蛋白(Hb)分析

采用全自动毛细管电泳仪(capillarys-2Sebia法国)进行Hb分析及定量

14 DNA提取

使用Lab-Aid820核酸提取仪及DNA提取试

剂(厦门致善生物科技有限公司)提取DNA根据试

剂盒说明书操作

15 α珠蛋白基因分析

151 缺失型α地中海贫血基因分析 使用单管

四重Gap-PCR检测方法检测-α37-α42--SEA--Thai

α地中海贫血基因检测试剂盒由深圳益生堂生物企

业有限公司提供PCR反应体系和扩增条件按试

剂盒说明操作反应在ABIPCR扩增仪(美国Ge-neAmpPCR System 9700)进 行PCR 产 物 经

12琼脂糖凝胶电泳在凝胶成像分析系统(英国

UVIFireReader)上观察拍照

152 非缺失型α地中海贫血基因分析 应用荧

光PCR熔解曲线法检测 HbCSHbQS和 HbWS基因突变(α-地中海贫血基因检测试剂盒(荧光PCR熔解曲线法)厦门致善生物科技有限公司)按试剂

盒说明操作

16 α珠蛋白基因测序

设计引物引物A1F5rsquo-CTCCAGCCGGTTC-CAGCTATT-3rsquo和 引 物 A1R5rsquo-CCAGCTG-CAGAGAGGTTCTAGCC-3rsquo扩增α1珠蛋白片段引物A2F5rsquo-ACTCTTCTGGTCCCCACAGAC-3rsquo和引物 A2R5rsquo-AGACAGGTAAACACCTCCAT-TGTT-3rsquo扩增α2珠蛋白片段PCR反应条件预变性955min941min601min722min共35个循环最后7210min10保存

PCR产物经12琼脂糖凝胶电泳在凝胶成像分

析系统(英国 UVIFireReader)上观察拍照将

PCR产物送至华大基因公司测序用Chromas软

件分析测序结果与正常α珠蛋白基因序列对比分

析

17 统计学方法

采用SPSS220统计软件对数据进行统计分

析计量资料用均数plusmn标准差(1051514xplusmns)表示两独立样

本组间比较采用t检验以Plt005为差异有统计

学意义

2 结 果

21 血常规检测结果

83 例 Hb H 病 患 者 红 细 胞 计 数(RBC)为(16~73)times1012LHb为350~1300gL红细

胞比容(Hct)为111~397平均红细胞体积

(MCV)377~779fL平均红细胞血红蛋白量

(MCH)为134~262pg平均红细胞血红蛋白浓

度(MCHC)为2690~3460gL红细胞分布宽度

(RDW)为143~352

73例缺失型 HbH病RBC为(490plusmn098)times1012LHb为(9190plusmn1587)gLHct为(2920plusmn531)MCV 为 (6260plusmn755)fLMCH 为

(1861plusmn210)pgMCHC为(30310plusmn1366)gL

RDW 为(2370plusmn349)10例非缺失型 HbH病RBC为(373plusmn148)times1012LHb为(7115plusmn1973)gLHct为 (2110plusmn832)MCV 为

(6246plusmn1148)fLMCH 为(1838plusmn209)pg

MCHC为(28840plusmn177)gLRDW 为(2194plusmn238)非缺失型HbH病的RBCHb及MCHC平均水平比缺失型 HbH病低差异有统计学意义

(Plt005)22 Hb分析检测结果

83例HbH病HbH05~232其中缺

失型HbH 病 HbH (793plusmn494)非缺失型

HbH病 HbH(1328plusmn704)非缺失型HbH病的HbH平均水平较缺失型 HbH病高差异有

统计学意义(Plt005)23 α珠蛋白基因分析结果

83例 HbH 病检出73例缺失型 HbH 病

(880)包括--SEA-α3751例(615)--SEA-α42

22例(265)检 出10例 非 缺 失 型 Hb H 病

(120)包括--SEAαCSα7例(84)--SEAαQSα1例(12)及--SEAαPolyAα2例(24)

α2珠蛋白基因PolyA基因突变测序结果显

示PolyA位点 AATAAArarrAATGAA伴随附近

位点6个碱基突变见图1正常α2珠蛋白基因3rsquo非编码区Poly(A)信号AATAAA见图2

middot108middot黄雅莉等广东湛江地区血红蛋白H病基因突变研究

图1 α2珠蛋白基因3rsquo非编码区Poly(A)信号突变(AATAAArarrAATGAA)伴附近6个碱基突变(依次为TgtCAgtCGgtACgtAGgtATgtC)

图2 正常α2珠蛋白基因3rsquo非编码区Poly(A)信号AATAAA

3 讨 论

HbH病是由3个α珠蛋白基因缺失或突变导

致α链合成不足造成αβ珠蛋白链比例失衡过量

的β链形成四聚体β4(HbH包涵体)沉积在红细胞

膜上导致红细胞变形能力差红细胞渗透脆性增

加红 细 胞 寿 命 减 短 及 其 携 氧 功 能 障 碍根 据

WHO报道东南亚每年70万新生儿中有15万例

患 HbH 病中国南方地区 HbH 病患病率为

01~02[1]

HbH病各地区和各民族报道的基因型不同Farashi等[2]报 道伊 朗 HbH 病 的 基 因 型 主 要

为--MED-α37--205α-5ntαChui等[3]报道美国加利

福尼亚州中国香港和加拿大的安大略省 HbH病

的基因型主要为--SEA-α37--SEA-α42--FIL-α37泰国 HbH 病以--SEAαCSα为主Chao等[4]报道台湾90例 HbH 病以--SEA-α37为 主--SEAαCSα次

之--SEA检出率达95有4例--FIL以缺失型 HbH病为主占711非缺失型HbH病占289段山等[5]报道中国南方两广地区78例HbH病

中--SEA-α37为372--SEA-α42为256--SEA

αCSα为243余新园等[6]报道广西200例 HbH病 中--SEA-α37 (335)--SEA-α42 (18)--SEA

αCSα(435)--SEA检出率达99HbCS检出率达

435我国 HbH病以缺失型 HbH病最多见广西地区及泰国以--SEAαCSα较多见周冰燚等[7]

报道广东省育龄人群241例 HbH 病中有131例--SEA-α3756 例--SEA-α4244 例--SEAαWSα12例--SEAαCSα5例--SEAαQSα陈育华等[8]报道的湛

江地区293例α地中海贫血中有19例 HbH病其中11例--SEA-α427例--SEA-α371例--SEA-α37

复合βCD17βN未报道非缺失型HbH病

本研究83例 HbH病检出73例缺失型 HbH病(880)包括--SEA-α3751例--SEA-α4222例检出10例非缺失型 HbH 病(120)包括--SEA

αCSα7例--SEAαQSα1例--SEAαPolyAα2例本研究

HbH 病基因型以--SEA-α37为主非缺失型 HbH病以--SEAαCSα多见与段山等[5]报道广东地区的

结果相同而周冰燚等[7]的研究中非缺失型 HbH病以--SEAαWSα为主

middot208middot 广西医科大学学报 2018June35(6)

与上述报道的广东地区HbH病基因突变类型

不同的是本研究发现2例罕见基因型--SEAαPolyAα病例 1 的 血 液 学 检 测 显 示 Hb86gLMCV648fLMCH182pgHb分析 HbH232病例2的血常规检测显示 Hb82gLMCV666fLMCH185pgHb分析 HbH199临床上

有中度贫血基因分析显示PolyA突变为α2珠蛋

白基因3rsquo非编码区Poly(A)信号突变为AATAAArarrAATGAA伴随PolyA附近的6个碱基的突变与Zhang等[9]报道的结果相一致

α2珠蛋白基因Poly(A)信号突变阻碍了 mR-NA3rsquo端的加Poly(A)尾部结构导致生成的 mR-NA难以运出细胞核且结构不稳定在体内容易被

分解[10]引起α2珠蛋白链合成减少形成α地中海

贫血PolyA突变AATAAArarrAATGAA在中东

地区[13]较多见我国香港曾出现2例 HbH 病为--SEAαPolyAα[11]但未报道相关的血液学检测结

果2016年颜善活等[12]在一个广西地区的家系中

发现2例--SEAαPolyAα有中度贫血血红蛋白分析

HbH98~183Hb H 含 量 增 高Zhang等[9]报道的广西3例 HbH 病--SEAαPolyAα有中度

贫血Hb分析 HbH169~183这些病例

的贫血程度及HbH水平与本研究相似其它类型

的α2珠蛋白基因Poly(A)信号突变还有AATAAAgtAATAAG(HbA2c94AgtG)[13]AATAAAgt AATA--(HbA2c93_94delAA)[14]AAT-AAAgtAATAAC(HbA2c94AgtC)[14]HbA2

c74_89delCCTTCCTGGTCTTTGA[15]这

些突变复合α地中海贫血-1导致的HbH病的临床

表现为中至重度贫血Hb分析HbH含量增高

综上所述本研究中湛江地区 HbH病基因突

变类 型 以 缺 失 型 Hb H 病 为 主--SEA-α37 最 多

见--SEA-α42次之非缺失型 HbH 病以--SEAαCSα多见非缺失型HbH病比缺失型HbH病的贫血

严重Hb分析提示非缺失型 HbH 病比缺失型

HbH病的 HbH 含量高此外本研究首次在广

东地区发现α2珠蛋白基因3rsquo非编码区Poly(A)信号突变(AATAAAgtAATGAA)复合α地中海贫

血-1导致的HbH病这些资料为地中海贫血的临

床诊疗遗传咨询和干预等提供了指导和依据

参考文献

[1] 周玉球肖奇志黄丽娟等HbH 病患儿临床表现与

基因型相关性的研究[J]中华儿科杂志2004(9)57-

60[2] FARASHISBAYATNVAKILISetalPointmuta-

tionswhichshouldnotbeoverlookedinHbHdisease[J]ExpertReviewofHematology20169(1)107-113

[3] CHUIDHFUCHAROENSCHANVHemoglobinHdiseaseNotnecessarilyabenigndisorder[J]Blood

2003101(3)791-800[4] CHAOYHWUKHWUHPetalClinicalfeatures

andmolecularanalysisofHbHdiseaseinTaiwan[J]BioMedResearchInternational2014(2014)271070

[5] 段 山李洪义陈 争等中国南方α地中海贫血基

因突变型研究[J]中国实验血液学杂志2003(1)54-60

[6] 余新圆陈 萍陈文强等广西地区200例儿童α地

中海贫血血红蛋白h病基因突变的研究[J]广西医科

大学学报201128(3)365-368[7] 周冰燚赵文忠李铭臻等广东地区16336例地中海

贫血初筛阳 性 样 本 基 因 型 分 析[J]中 国 医 药 导 报

201613(32)73-77[8] 陈育华周碧云梁斯锶等1071例地中海贫血基因

筛查结果分析[J]中国当代医药201724(12)159-163

[9] ZHANGQFANXXU MetalHbHdiseasecausedbymultiplemutationsinthepolyadenylationsignalsiteand--SEAαα[J]Hemoglobin201741(3)189

[10]韦桂姬α珠蛋白生成障碍性贫血分子流行病学研究现

状[J]现代医药卫生201228(15)2338-2341[11]CHANAYSOCMAESAlaboratorystrategyfor

genotypinghaemoglobinHdiseaseintheChinese[J]JournalofClinicalPathology200760(8)931-934

[12]颜善活劳可干符可鹏等一种罕见α-地贫基因突变

HbH病(--SEAα92AgtGα)的家系分析与基因诊断[J]南方医科大学学报201636(9)1295-1298

[13]ADEKILEADAZABAFAL-SHARIDASIetalClinicaland molecularcharacteristicsofnon-transfu-sion-dependentthalassemiainKuwait[J]Hemoglobin

201539(5)320-326[14]DESHPANDEPKAMALANATHANNSAMPA-

THEetalCharacterizationofclinicalandlaboratoryprofilesofthedeletionalα2-globingenepolyadenylationsignalsequence(AATAAAgtAATA--)inanIndian

population[J]Hemoglobin201539(6)415-418[15]CORNELISLHDOUGLASRHα-thalassaemia[J]

OrphanetJournalofRareDiseases2010(1)13

(本文编辑冯 雁)

middot308middot黄雅莉等广东湛江地区血红蛋白H病基因突变研究

中男40例女43例年龄3个月至82岁中位年龄

27岁均为汉族均来源于湛江地区83例 HbH病患者中缺失型 HbH病73例非缺失型 HbH病10例

12 血常规分析

采用全自动血液细胞分析仪(迈瑞BC5300深圳)进行红细胞参数分析

13 血红蛋白(Hb)分析

采用全自动毛细管电泳仪(capillarys-2Sebia法国)进行Hb分析及定量

14 DNA提取

使用Lab-Aid820核酸提取仪及DNA提取试

剂(厦门致善生物科技有限公司)提取DNA根据试

剂盒说明书操作

15 α珠蛋白基因分析

151 缺失型α地中海贫血基因分析 使用单管

四重Gap-PCR检测方法检测-α37-α42--SEA--Thai

α地中海贫血基因检测试剂盒由深圳益生堂生物企

业有限公司提供PCR反应体系和扩增条件按试

剂盒说明操作反应在ABIPCR扩增仪(美国Ge-neAmpPCR System 9700)进 行PCR 产 物 经

12琼脂糖凝胶电泳在凝胶成像分析系统(英国

UVIFireReader)上观察拍照

152 非缺失型α地中海贫血基因分析 应用荧

光PCR熔解曲线法检测 HbCSHbQS和 HbWS基因突变(α-地中海贫血基因检测试剂盒(荧光PCR熔解曲线法)厦门致善生物科技有限公司)按试剂

盒说明操作

16 α珠蛋白基因测序

设计引物引物A1F5rsquo-CTCCAGCCGGTTC-CAGCTATT-3rsquo和 引 物 A1R5rsquo-CCAGCTG-CAGAGAGGTTCTAGCC-3rsquo扩增α1珠蛋白片段引物A2F5rsquo-ACTCTTCTGGTCCCCACAGAC-3rsquo和引物 A2R5rsquo-AGACAGGTAAACACCTCCAT-TGTT-3rsquo扩增α2珠蛋白片段PCR反应条件预变性955min941min601min722min共35个循环最后7210min10保存

PCR产物经12琼脂糖凝胶电泳在凝胶成像分

析系统(英国 UVIFireReader)上观察拍照将

PCR产物送至华大基因公司测序用Chromas软

件分析测序结果与正常α珠蛋白基因序列对比分

析

17 统计学方法

采用SPSS220统计软件对数据进行统计分

析计量资料用均数plusmn标准差(1051514xplusmns)表示两独立样

本组间比较采用t检验以Plt005为差异有统计

学意义

2 结 果

21 血常规检测结果

83 例 Hb H 病 患 者 红 细 胞 计 数(RBC)为(16~73)times1012LHb为350~1300gL红细

胞比容(Hct)为111~397平均红细胞体积

(MCV)377~779fL平均红细胞血红蛋白量

(MCH)为134~262pg平均红细胞血红蛋白浓

度(MCHC)为2690~3460gL红细胞分布宽度

(RDW)为143~352

73例缺失型 HbH病RBC为(490plusmn098)times1012LHb为(9190plusmn1587)gLHct为(2920plusmn531)MCV 为 (6260plusmn755)fLMCH 为

(1861plusmn210)pgMCHC为(30310plusmn1366)gL

RDW 为(2370plusmn349)10例非缺失型 HbH病RBC为(373plusmn148)times1012LHb为(7115plusmn1973)gLHct为 (2110plusmn832)MCV 为

(6246plusmn1148)fLMCH 为(1838plusmn209)pg

MCHC为(28840plusmn177)gLRDW 为(2194plusmn238)非缺失型HbH病的RBCHb及MCHC平均水平比缺失型 HbH病低差异有统计学意义

(Plt005)22 Hb分析检测结果

83例HbH病HbH05~232其中缺

失型HbH 病 HbH (793plusmn494)非缺失型

HbH病 HbH(1328plusmn704)非缺失型HbH病的HbH平均水平较缺失型 HbH病高差异有

统计学意义(Plt005)23 α珠蛋白基因分析结果

83例 HbH 病检出73例缺失型 HbH 病

(880)包括--SEA-α3751例(615)--SEA-α42

22例(265)检 出10例 非 缺 失 型 Hb H 病

(120)包括--SEAαCSα7例(84)--SEAαQSα1例(12)及--SEAαPolyAα2例(24)

α2珠蛋白基因PolyA基因突变测序结果显

示PolyA位点 AATAAArarrAATGAA伴随附近

位点6个碱基突变见图1正常α2珠蛋白基因3rsquo非编码区Poly(A)信号AATAAA见图2

middot108middot黄雅莉等广东湛江地区血红蛋白H病基因突变研究

图1 α2珠蛋白基因3rsquo非编码区Poly(A)信号突变(AATAAArarrAATGAA)伴附近6个碱基突变(依次为TgtCAgtCGgtACgtAGgtATgtC)

图2 正常α2珠蛋白基因3rsquo非编码区Poly(A)信号AATAAA

3 讨 论

HbH病是由3个α珠蛋白基因缺失或突变导

致α链合成不足造成αβ珠蛋白链比例失衡过量

的β链形成四聚体β4(HbH包涵体)沉积在红细胞

膜上导致红细胞变形能力差红细胞渗透脆性增

加红 细 胞 寿 命 减 短 及 其 携 氧 功 能 障 碍根 据

WHO报道东南亚每年70万新生儿中有15万例

患 HbH 病中国南方地区 HbH 病患病率为

01~02[1]

HbH病各地区和各民族报道的基因型不同Farashi等[2]报 道伊 朗 HbH 病 的 基 因 型 主 要

为--MED-α37--205α-5ntαChui等[3]报道美国加利

福尼亚州中国香港和加拿大的安大略省 HbH病

的基因型主要为--SEA-α37--SEA-α42--FIL-α37泰国 HbH 病以--SEAαCSα为主Chao等[4]报道台湾90例 HbH 病以--SEA-α37为 主--SEAαCSα次

之--SEA检出率达95有4例--FIL以缺失型 HbH病为主占711非缺失型HbH病占289段山等[5]报道中国南方两广地区78例HbH病

中--SEA-α37为372--SEA-α42为256--SEA

αCSα为243余新园等[6]报道广西200例 HbH病 中--SEA-α37 (335)--SEA-α42 (18)--SEA

αCSα(435)--SEA检出率达99HbCS检出率达

435我国 HbH病以缺失型 HbH病最多见广西地区及泰国以--SEAαCSα较多见周冰燚等[7]

报道广东省育龄人群241例 HbH 病中有131例--SEA-α3756 例--SEA-α4244 例--SEAαWSα12例--SEAαCSα5例--SEAαQSα陈育华等[8]报道的湛

江地区293例α地中海贫血中有19例 HbH病其中11例--SEA-α427例--SEA-α371例--SEA-α37

复合βCD17βN未报道非缺失型HbH病

本研究83例 HbH病检出73例缺失型 HbH病(880)包括--SEA-α3751例--SEA-α4222例检出10例非缺失型 HbH 病(120)包括--SEA

αCSα7例--SEAαQSα1例--SEAαPolyAα2例本研究

HbH 病基因型以--SEA-α37为主非缺失型 HbH病以--SEAαCSα多见与段山等[5]报道广东地区的

结果相同而周冰燚等[7]的研究中非缺失型 HbH病以--SEAαWSα为主

middot208middot 广西医科大学学报 2018June35(6)

与上述报道的广东地区HbH病基因突变类型

不同的是本研究发现2例罕见基因型--SEAαPolyAα病例 1 的 血 液 学 检 测 显 示 Hb86gLMCV648fLMCH182pgHb分析 HbH232病例2的血常规检测显示 Hb82gLMCV666fLMCH185pgHb分析 HbH199临床上

有中度贫血基因分析显示PolyA突变为α2珠蛋

白基因3rsquo非编码区Poly(A)信号突变为AATAAArarrAATGAA伴随PolyA附近的6个碱基的突变与Zhang等[9]报道的结果相一致

α2珠蛋白基因Poly(A)信号突变阻碍了 mR-NA3rsquo端的加Poly(A)尾部结构导致生成的 mR-NA难以运出细胞核且结构不稳定在体内容易被

分解[10]引起α2珠蛋白链合成减少形成α地中海

贫血PolyA突变AATAAArarrAATGAA在中东

地区[13]较多见我国香港曾出现2例 HbH 病为--SEAαPolyAα[11]但未报道相关的血液学检测结

果2016年颜善活等[12]在一个广西地区的家系中

发现2例--SEAαPolyAα有中度贫血血红蛋白分析

HbH98~183Hb H 含 量 增 高Zhang等[9]报道的广西3例 HbH 病--SEAαPolyAα有中度

贫血Hb分析 HbH169~183这些病例

的贫血程度及HbH水平与本研究相似其它类型

的α2珠蛋白基因Poly(A)信号突变还有AATAAAgtAATAAG(HbA2c94AgtG)[13]AATAAAgt AATA--(HbA2c93_94delAA)[14]AAT-AAAgtAATAAC(HbA2c94AgtC)[14]HbA2

c74_89delCCTTCCTGGTCTTTGA[15]这

些突变复合α地中海贫血-1导致的HbH病的临床

表现为中至重度贫血Hb分析HbH含量增高

综上所述本研究中湛江地区 HbH病基因突

变类 型 以 缺 失 型 Hb H 病 为 主--SEA-α37 最 多

见--SEA-α42次之非缺失型 HbH 病以--SEAαCSα多见非缺失型HbH病比缺失型HbH病的贫血

严重Hb分析提示非缺失型 HbH 病比缺失型

HbH病的 HbH 含量高此外本研究首次在广

东地区发现α2珠蛋白基因3rsquo非编码区Poly(A)信号突变(AATAAAgtAATGAA)复合α地中海贫

血-1导致的HbH病这些资料为地中海贫血的临

床诊疗遗传咨询和干预等提供了指导和依据

参考文献

[1] 周玉球肖奇志黄丽娟等HbH 病患儿临床表现与

基因型相关性的研究[J]中华儿科杂志2004(9)57-

60[2] FARASHISBAYATNVAKILISetalPointmuta-

tionswhichshouldnotbeoverlookedinHbHdisease[J]ExpertReviewofHematology20169(1)107-113

[3] CHUIDHFUCHAROENSCHANVHemoglobinHdiseaseNotnecessarilyabenigndisorder[J]Blood

2003101(3)791-800[4] CHAOYHWUKHWUHPetalClinicalfeatures

andmolecularanalysisofHbHdiseaseinTaiwan[J]BioMedResearchInternational2014(2014)271070

[5] 段 山李洪义陈 争等中国南方α地中海贫血基

因突变型研究[J]中国实验血液学杂志2003(1)54-60

[6] 余新圆陈 萍陈文强等广西地区200例儿童α地

中海贫血血红蛋白h病基因突变的研究[J]广西医科

大学学报201128(3)365-368[7] 周冰燚赵文忠李铭臻等广东地区16336例地中海

贫血初筛阳 性 样 本 基 因 型 分 析[J]中 国 医 药 导 报

201613(32)73-77[8] 陈育华周碧云梁斯锶等1071例地中海贫血基因

筛查结果分析[J]中国当代医药201724(12)159-163

[9] ZHANGQFANXXU MetalHbHdiseasecausedbymultiplemutationsinthepolyadenylationsignalsiteand--SEAαα[J]Hemoglobin201741(3)189

[10]韦桂姬α珠蛋白生成障碍性贫血分子流行病学研究现

状[J]现代医药卫生201228(15)2338-2341[11]CHANAYSOCMAESAlaboratorystrategyfor

genotypinghaemoglobinHdiseaseintheChinese[J]JournalofClinicalPathology200760(8)931-934

[12]颜善活劳可干符可鹏等一种罕见α-地贫基因突变

HbH病(--SEAα92AgtGα)的家系分析与基因诊断[J]南方医科大学学报201636(9)1295-1298

[13]ADEKILEADAZABAFAL-SHARIDASIetalClinicaland molecularcharacteristicsofnon-transfu-sion-dependentthalassemiainKuwait[J]Hemoglobin

201539(5)320-326[14]DESHPANDEPKAMALANATHANNSAMPA-

THEetalCharacterizationofclinicalandlaboratoryprofilesofthedeletionalα2-globingenepolyadenylationsignalsequence(AATAAAgtAATA--)inanIndian

population[J]Hemoglobin201539(6)415-418[15]CORNELISLHDOUGLASRHα-thalassaemia[J]

OrphanetJournalofRareDiseases2010(1)13

(本文编辑冯 雁)

middot308middot黄雅莉等广东湛江地区血红蛋白H病基因突变研究

图1 α2珠蛋白基因3rsquo非编码区Poly(A)信号突变(AATAAArarrAATGAA)伴附近6个碱基突变(依次为TgtCAgtCGgtACgtAGgtATgtC)

图2 正常α2珠蛋白基因3rsquo非编码区Poly(A)信号AATAAA

3 讨 论

HbH病是由3个α珠蛋白基因缺失或突变导

致α链合成不足造成αβ珠蛋白链比例失衡过量

的β链形成四聚体β4(HbH包涵体)沉积在红细胞

膜上导致红细胞变形能力差红细胞渗透脆性增

加红 细 胞 寿 命 减 短 及 其 携 氧 功 能 障 碍根 据

WHO报道东南亚每年70万新生儿中有15万例

患 HbH 病中国南方地区 HbH 病患病率为

01~02[1]

HbH病各地区和各民族报道的基因型不同Farashi等[2]报 道伊 朗 HbH 病 的 基 因 型 主 要

为--MED-α37--205α-5ntαChui等[3]报道美国加利

福尼亚州中国香港和加拿大的安大略省 HbH病

的基因型主要为--SEA-α37--SEA-α42--FIL-α37泰国 HbH 病以--SEAαCSα为主Chao等[4]报道台湾90例 HbH 病以--SEA-α37为 主--SEAαCSα次

之--SEA检出率达95有4例--FIL以缺失型 HbH病为主占711非缺失型HbH病占289段山等[5]报道中国南方两广地区78例HbH病

中--SEA-α37为372--SEA-α42为256--SEA

αCSα为243余新园等[6]报道广西200例 HbH病 中--SEA-α37 (335)--SEA-α42 (18)--SEA

αCSα(435)--SEA检出率达99HbCS检出率达

435我国 HbH病以缺失型 HbH病最多见广西地区及泰国以--SEAαCSα较多见周冰燚等[7]

报道广东省育龄人群241例 HbH 病中有131例--SEA-α3756 例--SEA-α4244 例--SEAαWSα12例--SEAαCSα5例--SEAαQSα陈育华等[8]报道的湛

江地区293例α地中海贫血中有19例 HbH病其中11例--SEA-α427例--SEA-α371例--SEA-α37

复合βCD17βN未报道非缺失型HbH病

本研究83例 HbH病检出73例缺失型 HbH病(880)包括--SEA-α3751例--SEA-α4222例检出10例非缺失型 HbH 病(120)包括--SEA

αCSα7例--SEAαQSα1例--SEAαPolyAα2例本研究

HbH 病基因型以--SEA-α37为主非缺失型 HbH病以--SEAαCSα多见与段山等[5]报道广东地区的

结果相同而周冰燚等[7]的研究中非缺失型 HbH病以--SEAαWSα为主

middot208middot 广西医科大学学报 2018June35(6)

与上述报道的广东地区HbH病基因突变类型

不同的是本研究发现2例罕见基因型--SEAαPolyAα病例 1 的 血 液 学 检 测 显 示 Hb86gLMCV648fLMCH182pgHb分析 HbH232病例2的血常规检测显示 Hb82gLMCV666fLMCH185pgHb分析 HbH199临床上

有中度贫血基因分析显示PolyA突变为α2珠蛋

白基因3rsquo非编码区Poly(A)信号突变为AATAAArarrAATGAA伴随PolyA附近的6个碱基的突变与Zhang等[9]报道的结果相一致

α2珠蛋白基因Poly(A)信号突变阻碍了 mR-NA3rsquo端的加Poly(A)尾部结构导致生成的 mR-NA难以运出细胞核且结构不稳定在体内容易被

分解[10]引起α2珠蛋白链合成减少形成α地中海

贫血PolyA突变AATAAArarrAATGAA在中东

地区[13]较多见我国香港曾出现2例 HbH 病为--SEAαPolyAα[11]但未报道相关的血液学检测结

果2016年颜善活等[12]在一个广西地区的家系中

发现2例--SEAαPolyAα有中度贫血血红蛋白分析

HbH98~183Hb H 含 量 增 高Zhang等[9]报道的广西3例 HbH 病--SEAαPolyAα有中度

贫血Hb分析 HbH169~183这些病例

的贫血程度及HbH水平与本研究相似其它类型

的α2珠蛋白基因Poly(A)信号突变还有AATAAAgtAATAAG(HbA2c94AgtG)[13]AATAAAgt AATA--(HbA2c93_94delAA)[14]AAT-AAAgtAATAAC(HbA2c94AgtC)[14]HbA2

c74_89delCCTTCCTGGTCTTTGA[15]这

些突变复合α地中海贫血-1导致的HbH病的临床

表现为中至重度贫血Hb分析HbH含量增高

综上所述本研究中湛江地区 HbH病基因突

变类 型 以 缺 失 型 Hb H 病 为 主--SEA-α37 最 多

见--SEA-α42次之非缺失型 HbH 病以--SEAαCSα多见非缺失型HbH病比缺失型HbH病的贫血

严重Hb分析提示非缺失型 HbH 病比缺失型

HbH病的 HbH 含量高此外本研究首次在广

东地区发现α2珠蛋白基因3rsquo非编码区Poly(A)信号突变(AATAAAgtAATGAA)复合α地中海贫

血-1导致的HbH病这些资料为地中海贫血的临

床诊疗遗传咨询和干预等提供了指导和依据

参考文献

[1] 周玉球肖奇志黄丽娟等HbH 病患儿临床表现与

基因型相关性的研究[J]中华儿科杂志2004(9)57-

60[2] FARASHISBAYATNVAKILISetalPointmuta-

tionswhichshouldnotbeoverlookedinHbHdisease[J]ExpertReviewofHematology20169(1)107-113

[3] CHUIDHFUCHAROENSCHANVHemoglobinHdiseaseNotnecessarilyabenigndisorder[J]Blood

2003101(3)791-800[4] CHAOYHWUKHWUHPetalClinicalfeatures

andmolecularanalysisofHbHdiseaseinTaiwan[J]BioMedResearchInternational2014(2014)271070

[5] 段 山李洪义陈 争等中国南方α地中海贫血基

因突变型研究[J]中国实验血液学杂志2003(1)54-60

[6] 余新圆陈 萍陈文强等广西地区200例儿童α地

中海贫血血红蛋白h病基因突变的研究[J]广西医科

大学学报201128(3)365-368[7] 周冰燚赵文忠李铭臻等广东地区16336例地中海

贫血初筛阳 性 样 本 基 因 型 分 析[J]中 国 医 药 导 报

201613(32)73-77[8] 陈育华周碧云梁斯锶等1071例地中海贫血基因

筛查结果分析[J]中国当代医药201724(12)159-163

[9] ZHANGQFANXXU MetalHbHdiseasecausedbymultiplemutationsinthepolyadenylationsignalsiteand--SEAαα[J]Hemoglobin201741(3)189

[10]韦桂姬α珠蛋白生成障碍性贫血分子流行病学研究现

状[J]现代医药卫生201228(15)2338-2341[11]CHANAYSOCMAESAlaboratorystrategyfor

genotypinghaemoglobinHdiseaseintheChinese[J]JournalofClinicalPathology200760(8)931-934

[12]颜善活劳可干符可鹏等一种罕见α-地贫基因突变

HbH病(--SEAα92AgtGα)的家系分析与基因诊断[J]南方医科大学学报201636(9)1295-1298

[13]ADEKILEADAZABAFAL-SHARIDASIetalClinicaland molecularcharacteristicsofnon-transfu-sion-dependentthalassemiainKuwait[J]Hemoglobin

201539(5)320-326[14]DESHPANDEPKAMALANATHANNSAMPA-

THEetalCharacterizationofclinicalandlaboratoryprofilesofthedeletionalα2-globingenepolyadenylationsignalsequence(AATAAAgtAATA--)inanIndian

population[J]Hemoglobin201539(6)415-418[15]CORNELISLHDOUGLASRHα-thalassaemia[J]

OrphanetJournalofRareDiseases2010(1)13

(本文编辑冯 雁)

middot308middot黄雅莉等广东湛江地区血红蛋白H病基因突变研究

与上述报道的广东地区HbH病基因突变类型

不同的是本研究发现2例罕见基因型--SEAαPolyAα病例 1 的 血 液 学 检 测 显 示 Hb86gLMCV648fLMCH182pgHb分析 HbH232病例2的血常规检测显示 Hb82gLMCV666fLMCH185pgHb分析 HbH199临床上

有中度贫血基因分析显示PolyA突变为α2珠蛋

白基因3rsquo非编码区Poly(A)信号突变为AATAAArarrAATGAA伴随PolyA附近的6个碱基的突变与Zhang等[9]报道的结果相一致

α2珠蛋白基因Poly(A)信号突变阻碍了 mR-NA3rsquo端的加Poly(A)尾部结构导致生成的 mR-NA难以运出细胞核且结构不稳定在体内容易被

分解[10]引起α2珠蛋白链合成减少形成α地中海

贫血PolyA突变AATAAArarrAATGAA在中东

地区[13]较多见我国香港曾出现2例 HbH 病为--SEAαPolyAα[11]但未报道相关的血液学检测结

果2016年颜善活等[12]在一个广西地区的家系中

发现2例--SEAαPolyAα有中度贫血血红蛋白分析

HbH98~183Hb H 含 量 增 高Zhang等[9]报道的广西3例 HbH 病--SEAαPolyAα有中度

贫血Hb分析 HbH169~183这些病例

的贫血程度及HbH水平与本研究相似其它类型

的α2珠蛋白基因Poly(A)信号突变还有AATAAAgtAATAAG(HbA2c94AgtG)[13]AATAAAgt AATA--(HbA2c93_94delAA)[14]AAT-AAAgtAATAAC(HbA2c94AgtC)[14]HbA2

c74_89delCCTTCCTGGTCTTTGA[15]这

些突变复合α地中海贫血-1导致的HbH病的临床

表现为中至重度贫血Hb分析HbH含量增高

综上所述本研究中湛江地区 HbH病基因突

变类 型 以 缺 失 型 Hb H 病 为 主--SEA-α37 最 多

见--SEA-α42次之非缺失型 HbH 病以--SEAαCSα多见非缺失型HbH病比缺失型HbH病的贫血

严重Hb分析提示非缺失型 HbH 病比缺失型

HbH病的 HbH 含量高此外本研究首次在广

东地区发现α2珠蛋白基因3rsquo非编码区Poly(A)信号突变(AATAAAgtAATGAA)复合α地中海贫

血-1导致的HbH病这些资料为地中海贫血的临

床诊疗遗传咨询和干预等提供了指导和依据

参考文献

[1] 周玉球肖奇志黄丽娟等HbH 病患儿临床表现与

基因型相关性的研究[J]中华儿科杂志2004(9)57-

60[2] FARASHISBAYATNVAKILISetalPointmuta-

tionswhichshouldnotbeoverlookedinHbHdisease[J]ExpertReviewofHematology20169(1)107-113

[3] CHUIDHFUCHAROENSCHANVHemoglobinHdiseaseNotnecessarilyabenigndisorder[J]Blood

2003101(3)791-800[4] CHAOYHWUKHWUHPetalClinicalfeatures

andmolecularanalysisofHbHdiseaseinTaiwan[J]BioMedResearchInternational2014(2014)271070

[5] 段 山李洪义陈 争等中国南方α地中海贫血基

因突变型研究[J]中国实验血液学杂志2003(1)54-60

[6] 余新圆陈 萍陈文强等广西地区200例儿童α地

中海贫血血红蛋白h病基因突变的研究[J]广西医科

大学学报201128(3)365-368[7] 周冰燚赵文忠李铭臻等广东地区16336例地中海

贫血初筛阳 性 样 本 基 因 型 分 析[J]中 国 医 药 导 报

201613(32)73-77[8] 陈育华周碧云梁斯锶等1071例地中海贫血基因

筛查结果分析[J]中国当代医药201724(12)159-163

[9] ZHANGQFANXXU MetalHbHdiseasecausedbymultiplemutationsinthepolyadenylationsignalsiteand--SEAαα[J]Hemoglobin201741(3)189

[10]韦桂姬α珠蛋白生成障碍性贫血分子流行病学研究现

状[J]现代医药卫生201228(15)2338-2341[11]CHANAYSOCMAESAlaboratorystrategyfor

genotypinghaemoglobinHdiseaseintheChinese[J]JournalofClinicalPathology200760(8)931-934

[12]颜善活劳可干符可鹏等一种罕见α-地贫基因突变

HbH病(--SEAα92AgtGα)的家系分析与基因诊断[J]南方医科大学学报201636(9)1295-1298

[13]ADEKILEADAZABAFAL-SHARIDASIetalClinicaland molecularcharacteristicsofnon-transfu-sion-dependentthalassemiainKuwait[J]Hemoglobin

201539(5)320-326[14]DESHPANDEPKAMALANATHANNSAMPA-

THEetalCharacterizationofclinicalandlaboratoryprofilesofthedeletionalα2-globingenepolyadenylationsignalsequence(AATAAAgtAATA--)inanIndian

population[J]Hemoglobin201539(6)415-418[15]CORNELISLHDOUGLASRHα-thalassaemia[J]

OrphanetJournalofRareDiseases2010(1)13

(本文编辑冯 雁)

middot308middot黄雅莉等广东湛江地区血红蛋白H病基因突变研究