8/18/2019 Metodo de Concentracion Fenol de Azucar Final

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Practica numero 3

Método de concentración fenolado de azúcar(sheater)

INTROD!!ION

La práctica se realizara con la muestra fecal con la solución fenólico de azúcar también es

conocido técnica de Sheater utilizaremos dos sustancias muy importantes fenol y azúcar 

que ayudaran a flotar los parásitos.

Para separar e sedimento del sobrenadante. Una de las maneras de diagnosticar las

parasitosis de localización gastrointestinal y glándulas

aneas! es mediante la aplicación de técnicas técnica de concentración fecal "sheater#! que

permiten concentrar coccidios !isoporas en el menor $olumen de materia fecal! determinar 

su presencia e identificarlos correctamente. La recuperación de estas formas parasitarias

plantea un problema de dif%cil solución a todo microscopista.

&sta técnica se basa en la propiedad que tienen las soluciones de densidad mayor! para

hacer flotar ob'etos menos densos! como los coccidios isosporas de parásitos! los cuales

son colectados en la superficie del l%quido y obser$ados al microscopio.

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OBJETIVO

separar o concentrar coccidios! isosporas con el uso de la solución

fenolado de azúcar.

eliminar la mayor cantidad de restos $egetales que estén presentes en

la muestra que pueden interferir en la $isualización microscópica y poder con facilidad obser$ar coccidios!isosporas de la muestra.

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MATERIALES 

(ubos de ensaye cónicos de )* ml

+asa

Laminilla

,a'a lengua

Lamina porta ob'eto Laminilla

&mbudo

-icroscopio

entrifuga

 

SUSTANCIAS:

  Solución de fenol azúcar 

  -uestra biológica/ heces fecales frescas agua destilada

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PROCEDIMIENTO

  ).0isol$er ) gr de materia fecal en ) ml de agua destilada

1.  Se filtra la muestra disuelta a tra$és de la gasa doble colocada en elembudo! recogiendo el filtrado en el tubo cónico.

2.  entrifugar el filtrado a )*33 rpm por 1 minutos

4.separar en dos tubos la muestra sobrenadante y la muestra sedimento

*.botar el sobrenadante! te quedar%as con el sedimento en el tubo donde deencuentra el sedimento agregar 5ml de solución fenol de azúcar. 6gitar 

5.en el segundo tubo que te quedaste con el sobrenadante agregar *ml desolución fenol de azúcar. 6gitar 

7.  entrifugar el los dos tubos )*33 rpm por )minuto

8.agregar solución fenol de azúcar hasta 8ml al sedimento

9. agregar solución fenol de azúcar hasta 7ml al concentrado

)3.de'ar en reposar a las dos muestras durante un tiempo

)).esterelizar asa de siembre en el fuego

)1.con la asa de siembra coger la muestra pero solo de la parte encima deambos tubos

)2.  colocar muestra en porta ob'etos de ambos tubos para ser lecturados.

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:,:,S&;<6=:>&S

 on ob'eti$o 43

E n la muestra de sobrenadante.?S& obser$a restos de alimentos! almidón !$egetales

En poca cantidad.

  En la muestra de Sedimento .- se observa también resto de

alimentos, almidón ,vegetal pero en mayor cantidad Comparando estas dos muestras que se trabajo de diferentes

concentraciones sedi mento y sobrenadante lo recomendable seria

con sobrenadante ya que no hay interferencia como resto de algúnalimento.

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onclusiones

-ediante esta técnica por concentración de fenol de azúcar se obtiene la

mayor concentración de coccidios!isisporas de parásitos &sta técnica ayuda también a separar de los restos de alimentos que no

tiene importancia para nuestro estudio. on la utilización de este método ayuda a subir los coccidios!isospora

con gran facilidad ya que el fenol y azúcar son menos densos ayudan.

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R"!OM"ND#!ION"$ (raba'ar con bastante cuidado en el momentos de coger la muestra con

asa de siembra no introducir hasta dentro solo es la parte de encima . &n el momento de agregar la solución fenol azúcar agregar por la

paredes del tubo tiene que se la cantidad indicada Para ser lecturado no se debe utilizar ninguna solución que ayude a

obser$ar es de frente la solución con la muestra que se obser$a . Se debe saber también con cual de los contenidos de los tubos se esta

obser$ando si es el sedimento o el sobrenadante. Se debe utilizar la gasa doble ya que ayuda a que no pasan tanto resto

de alimenticios

AE!"

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  En esta imagen se observa

disolviendo la muestra en agua destilada

  En esta imagen de observa cuando se #ltra la

muestra en la gasa se ve cuanto de resto queda

En esta imagen se

observa puestas

las muestras en la

centrifuga listos para centrifugar

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 En esta imagen se observa los dos tubo uno con la muestra el otro

con sobrenadante

&n esta imagen se $e agregando solución fenol de azúcar alsedimento y al sobrenadante.

&n esta imagen se $e agregando solución fenol de azúcar al

sobrenadante. 

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En esta imagen se observa estereli$ando el asa de siembra

  %E observa cogiendo la

muestra con el asa de siembra

En esta imagen se observa poniendo la

muestra sobre porta objetos

En esta imagen el estudiante observa

muestras como el sedimento y sobrenadante.