Laporan Praktikum Hematologi

Pembuatan Sediaan Apus Darah Tepi

       I.            BAHAN PEMERIKSAAN

Bahan pemeriksaan yang dipakai adalah darah vena.

II.            TUJUAN

1. Untuk mengetahui dan mempelajari teknik pembuatan sediaan apusan darah tepi.2. Untuk mengetahui gambaran sel darah (eritrosit, leukosit, trombosit).

III.            PRINSIP

Darah diteteskan di objek glass, dipaparkan (spreading) kemudian di keringkan dengan bagian ekor di atas, dicat lalu dilihat di bawah mikroskop.

IV.            REAGEN/BAHAN

1. Sampel darah vena.2. Na2EDTA.

V.            ALAT

1. Objek glass.2. Deck glass.3. Pipet tetes.4. Mikroskop.

VI.            DASAR TEORI

Sediaan apus darah tepi merupakan slide untuk mikroskop yang pada salah satu sisinya dilapisi dengan lapisan tipis darah vena yang diwarnai dengan pewarnaan (wright/giemsa) dan diperiksa di bawah mikroskop. Sediaan apus yang baik adalah yang ketebalannya cukup dan bergradasi dari kepala (awal) sampai ke ekor (akhir). Zona morfologi sebaiknya paling dari kurang 5 cm. Ciri sediaan apus yang baik meliputi:

Sediaan tidak melebar sampai tepi kaca objek, panjang ½ – 2/3 panjang kaca. Mempunyai bagian yang cukup tipis untuk diperiksa, pada bagian itu eritrosit tersebar

merata berdekatan dan tidak saling menumpuk. Pinggir sediaan rata, tidak berlubang dan tidak bergaris-garis. Penyebaran leukosit yang baik tidak berkumpul pada pinggir atau ujung sedimen.

Kegunaan dari pemeriksaan apusan darh tepi yaitu untuk mengevaluasi morfologi dari sel darah tepi (trombosit, eritrosit, leukosit), memperkirakan jumlah leukosit dan trombosit, identifikasi parasit. Persyaratan pembuatan apusan darah yaitu objek glass harus bersih, kering, bebas lemak. Segera dibuat setelah darah yang diteteskan, karena jika tidak persebaran sel tidak merata. Leukosit akan terkumpul pada bagian tertentu, clumping

trombosit. Teknik yang digunakan menggunakan teknik dorong (push slide) yang pertama kali diperkenalkan oleh maxwell wintrobe dan menjadi standar untuk apus darah tepi.

1. PROSEDUR 1. Menyiapkan semua alat dan bahan.2. Mengambil tetesan darah dengan pipet dan meneteskannya pada objek glass.3. Meletakkan deck glass di depan tetesan darah dengan sudut 35˚-45˚.4. Menarik deck glass ke belakang sampai menempel dengan darah, kemudian

menariknya ke depan.5. Mengeringkan selama 10 menit dengan ekor di bagian atas.6. Memberi nama/label.

7. Melihat di mikroskop

1. HASIL PENGAMATAN

Morfologi apusan:

1. Kepala : tebal2. Badan  : lebih tipis dari bagian kepala3. Kaki    : tipis

Zona:

I.          : Masih terdapat tumpukan eritrosit, tebal, berdesakan, tidak beraturan.

II.          : Lebih tipis,  eritrosit masih bertumpuk, tidak rata.

III.          : Tebal, eritrosit bergerombol, roulex.

IV.          : Sama seperti zona II, tipis.

V.          : Sel darah tidak tertumpuk, penyebaran satu-satu, rata, bentuk utuh.

VI.          : Sangat tipis, lebih longgar dan jarang.

IX.            PEMBAHASAN

Sediaan apus darah tepi dapat digunakan untuk berbagai macam pemeriksaan, misalnya untuk mengevaluasi morfologi sel darah, memperkirakan jumlah sel darah dan juga pemeriksaan identifikasi parasit. Untuk membuat sediaan hapus darah tepi dibutuhkan teknik dan kemampuan. Karena kita harus hati-hati dalam membuatnya. Pada praktikum kali ini, tidak dilakukan pengecatan. Pembacaan yang baik adalah pembacaan pada zona ke V. Karena pada zona tersebut eritrosit terletak satu-satu, tidak bertumpuk-tumpuk. Pembacaan dimulai dari perbesaran10x, dilanjutkan dengan perbesaran 40x. Hasilnya pada zona ke V ditemukan eritrosit yang tersebar merata (satu-satu), tidak bertumpuk-tumpuk dan bentuknya utuh. Terdapat juga leukosit dengan ukuran yang lebih besar dari eritrosit. Dalam praktikum ini, kesalahan sering terjadi pada pembuatan apusan darah. Diantaranya adalah darah yang diteteskan terlalu banyak, saat melakukan spreading ragu-ragu sehingga terbentuk sediaan yang bergaris-garis, kurang bersih saat membersihkan objek glass (lemaknya masih ada) sehingga terdapat lubang-lubang dan ekor seperti bendera robek. Hal ini disebabkan oleh kurangnya latihan dan teknik yang dimiliki oleh praktikan.

X.            KESIMPULAN

Didapatkan sediaan apus darah tepi yang baik.

Pada zona ke V terlihat eritrosit yang tersebar satu-satu, leukosit dan trombosit.

This entry was posted on March 13, 2014, in hematologi, Pelatihan IT and tagged hematologi, Sediaan Apus Darah Tepi. Leave a comment

Laporan Praktikum Mikrotek_PEMBUATAN PREPARAT APUSAN DARAH

PEMBUATAN PREPARAT APUSAN DARAH

I.       TANGGAL PRAKTIKUM

Senin, 02 Mei 2011

II.    TUJUAN

1.   Mahasiswa mampu membuat preparat awetan darah dengan metode apus dan pewarnaan

metode Romanowski

2.   Mahasiswa mampu menganalisis hasil pembuatan preparat apus darah

3.   Mahasiswa mengetahui berbagai macam bentuk sel darah pada manusia.

III. LANDASAN TEORI

Sel darah pada umumnya dikenal ada tiga tipe yaitu: eritrosit, lekosit dan trombosit.

Eritrosit manusia dalam keadaan normal berbentuk cakram bulat bikonkaf dengan diameter

7,2 µm tanpa inti, lebih dari separoh komposisi eritrosit terdiri dari air (60%) dan sisanya

berbentuk substansi koloidal padat. Sel ni bersifat elastis dan lunak. Lekosit (sel darah putih)

terdapat pada bagian pinggir sel darah, lekosit ini dibagi menjadi dua yaitu granulosit dan

agranulosit.

Granulosit terbagi menjadi tiga yaitu Netrofil (terbanyak) berbentuk bulat dengan

diameter 10-12 µm, Eosinofil yang strukturnya lebih besar daripada netrofil (10-15 µm) dan

Basofil (paling sedikit) dengan ukuran hampir sama dengan netrofil tetapi basofil sangat sulit

ditemukan. Agranulosit dibagi menjadi dua yaitu Limfosit yang mempunyai ukuran yang

bevariasi, inti bulat sitoplasma mengelilingi inti seperti cincin dan berperan penting dalam

imunitas tubuh, dan Monosit (sel lekosit terbesar), intinya berbentuk oval kadang terlipat-

lipat dapat bergerak dengan membentuk pseudopodia. Tipe ketiga yaitu Trombosit (disebut

juga keping darah), berbentuk sebagai keping-keping sitoplasma lengkap dengan membran

yang mengelilinginya, Trombosit terdapat khusus pada sel darah mammalia.

Untuk melihat struktur sel-sel darah dengan mikroskop cahaya pada umumnya dibuat

sediaan apus darah. Sediaan apus darah ini tidak hanya digunakan untuk mrmpelajari sel

darah tapi juga digunakan untuk menghitung perbandingan jumlah masing-masing sel darah.

Pembuatan preparat apus darah ini menggunakan suatu metode yang disebut metode oles

(metode smear) yangmerupakan suatu sediaan dengan jalan mengoles atau membuat selaput

(film) dan substansi yang berupa cairan atau bukan cairan di atas gelas benda yang bersih dan

bebas lemak untuk kemudian difiksasi, diwarnai dan ditutup dengan gelas penutup (Handari,

2003).

Beberapa langkah yang harus diperhatikan dalam pembuatan preparat dengan metode

smear sebagai berikut:

1.       Ketebalan film

2.      Film difiksasi agar melekat erat pada gelas benda sehingga yakin bahwa sel-sel di dalamnya

strukturnya tetap normal

3.       Memberi warna (pewarnaan)

4.       Menutup dengan gelas penutup

Film darah (sediaan oles) ini dapat diwarnai dengan berbagai macam metode termasuk

larutan-larutan yang sederhana antara lain: pewarnaan Giemsa, pewarnaan acid fast,

pewarnaan garam, pewarnaan wright, dan lain-lain.

Pewarnaan Giemsa disebut juga pewarnaan Romanowski. Metode pewarnaan ini banyak

digunakan untuk mempelajari morfologi sel-sel darah, sel-sel lien, sel-sel sumsum dan juga

untuk mengidentifikasi parasit-parasit darah misal Tripanosoma, Plasmodia danlain-lain dari

golongan protozoa.

Hasil pewarnaan dengan Giemsa pada darah manusia akan memperlihatkan eritrosit

berwarna merah muda, nukleolus lekosit berwarna ungu kebiru-biruan, sitoplasma lekosit

berwarna sangat ungu muda, granula dari lekosit eosinofil berwarna ungu tua, granula dari

lekosit netrofil dan lekosit basofil berwarna ungu

IV. CARA KERJA

Menyiapkan ujung jari kiri bagian tengah atau manis dengan dikipas-kipaskan kea rah kaki

kemudian mengurutnya kearah ujung jari. Menyeterilkan ujung jari dan jarum franke dengan

alcohol 70%. Menyiapkan 2 kaca benda yang bersih dan bebas lemak . Menusuk ujung jari

dengan jarum franked dan keluarkan darah, kemudian mengoles ujung jari pada salah sisi

gelas benda A bagian kanan yang bebas lemak, kemudian meletakkan gelas benda kedua (B)

pada sisi pendek dengan sudut 45 derajat, hingga menyentuh tetesan darah pada gelas benda

pertama sehingga timbul kapilaritas. Setelah terjadi kapilaritas, gelas benda kedua diapus ke

arah menjauhi sisi kanan gelas benda pertama dengan kekuatan dan kecepatan yang sama rata

sehingga didapat film darah yang tipis dan rata.

Kemudian apusan darah dikering anginkan, setelah menjadi kering difiksasi dengan

metanol selama 5 menit dan dikering anginkan. Dengan menggunakan pipet tetes, seluruh

permukaan sediaan oles ditetesi dengan larutan Giemsa selama 30-40 menit. Kemudian

mencuci dengan air mengalir, mengkeringanginkan kemudian mengamati di bawah

mikroskop dan kemudian memberi label. Berikut secara ringkas rincian waktu yang

diperlukan untuk membuat apus darah.

No Tahapan Alat Bahan Waktu

1 Mengurut ujung jari manis tangan kiri

- - 1 menit

2 Mensterilkan ujung jari dan jarum franke

Jarum frankel -Alkohol 70%-Kapas

1 menit

3 Mengambil dan menampung sampel darah

-Gelas benda-Jarum Franke

-Alkohol 70%-Kapas

3 menit

4 Membuat apusan darah

- 2 Gelas benda -Tetes darah 5 menit

5 Mengeringanginkan apusan

darah

-rak pewarna datar

-Kipas angin

- 10 menit

6 Memfiksasi permukaan film

darah dan mengeringangik

an

-pipet Metanol,kapas 5 menit

7 Mewarnai film darah dan mencuci

-Pipet-Beker gelas

-Giemsa 3%-aquades dingin

40 menit

8 Labelling -Alat tulis, label, - 2 menit9 Mengamati dan

menganalisis-mikroskop-alat tulis

-Preparat apusan darah

10 menit

Total Waktu yang diperlukan 72 menit

V.    HASIL PENGAMATAN

Nama

Preparat Hasil

Apus Darah

Homo

SMEAR

GIEMSA

02-05-2011

VI. PEMBAHASAN

Pada praktikum pembuatan apusan darah ini, kelompok kami memakai 2 probandus.

Pembuatan preparat apus darah ini dilakukan dengan metode apus/ smear/ oles. Pada

praktikum ini darah probandus yang digunakan adalah darah manusia . Berdasarkan foto dari

hasil pengamatan preparat apus darah Homo dengan pewarnaan Giemsa diketahui bahwa

preparat secara fisik cukup baik, bersih, rapi dan berwarna ungu. Dapat terlihat adanya

eritrosit dan leukosit.

Eritrosit ditunjukkan dengan warna kekuning-kuningan/ agak transparan. Eritrosit

berbentuk bulat dan tak berinti. Sedangkan leukosit ditunjukkan dengan sel yang memiliki

inti yang berwarna ungu. Warna biru pada leukosit disebabkan karena pewarnaan yang

diberikan pada saat pembuatan preparat. Inti leukosit akan menyerap warna yang bersifat

basa.

Pada preparat tampak terlihat leukosit yang ditemukan adalah neutrofil dan limfosit.

Hal ini berkaitan dengan jumlah/ presentase neutrofil memang paling banyak dalam darah,

yaitu mencapai 55-70% dari jumlah leukosit yang ada. Sedangkan pada gambar preparat yang

keempat dapat ditemui adanya limfosit. Berkaitan dengan fungsinya sebagai antibodi, maka

kita dapat memprediksi bahwa probandus yang keempat sedang mengalami gangguan fisik

(sakit). Sel leukosit terlihat mencolok pada preparat karena intinya yang berwarna biru.

Sehingga kita dapat membedakannya dengan eritrosit. Inti leukosit bersifat basa, sehingga

jika direaksikan dengan pewarna basa maka sel tersebut akan menyerap warnanya.

Eritrosit memiliki kadar yang paling banyak dalam darah jika dibandingkan dengan

leukosit dan trombosit. Jumlah eritrosit antara individu yang satu dengan individu yang lain

itu berbeda-beda. Ini dapat disebabakan oleh beberapa faktor, salah satunya adalah ketinggian

tempat. Individu yang hidup di daerah dataran tinggi akan memiliki jumlah eritrosit lebih

banyak dibandingkan individu yang hidup di dataran rendah. Ini terkait dengan kebutuhan

fisiologinya. Pada individu yang hidup di dataran tinggi membutuhkan asupan oksigen yang

cukup, sedang kandungan oksigen di dataran tinggi lebih sedikit sehingga membutuhkan

banyak Hb untuk mengikat oksigen. Begitu juga sebaliknya.

Pada preparat yang kami peroleh tidak semuanya menampakkan hasil yang bagus

(bisa dilihat dalam gambar). Hal ini dapat disebabkan oleh beberapa hal seperti:

1. Kesalahan prosedur yang dilakukan oleh praktikan pada saat membuat apusan,

sehingga sel-selnya ada yang rusak karena tertekan

2. Kekurang terampilan praktikan dalam menggunakan mikroskop, sehingga

pencahayaan atau pemfokusannya kurang

3. Kekurang terampilan praktikan dalam mengambil foto preparat

4. Lensa mikroskop yang kotor.

Oleh karena itu, dalam praktikum pembuatan apusan darah yang selanjutnya kami sarankan

agar:

1.      Praktikan benar-benar telah menguasai prosedur kerja pembuatan preparat apus darah

2.      Praktikan perlu dibekali dengan kemampuan pengoperasian mikroskop terlebih dahulu

3.      Praktikan sebaiknya juga dibekali dengan ketrampilan pengambilan foto preparat

4. Alat-alat yang akan digunakan untuk praktikum diusahakan dalam keadaan layak

pakai. Oleh karena itu perlu adanya pengecekan alat sebelumm praktikum yang

dilakukan oleh kelompok piket dengan di dampingi oleh asisten atau laboran.

VII.KESIMPULAN

Berdasarkan hasil pembahasan dan analisis, dapat ditarik kesimpulan sebagai berikut:

1.      Preaparat awetan darah dapat dibuat dengan metode apus dan metode pewarnaan

Romanowski

2.      Pewarnaan apus dengan zat pewarna giemsa mewarnai sel darah putih dengan kontras dan

dapat membedakan bagian nukleus dengan bagian sel yang lain

3.      Bentuk sel darah merah tampak oval dan sel darah putih ukurannya tampak lebih besar dan

terdapat nucleus

VIII.SARAN

1.      Untuk membuat preparat darah harus dilakukan secara hati-hati dan terampil

2.      Untuk dapat melihat nucleus sel darah putih dapat menggunakan zat pewarna giemsa,

lakukan prosedur praktikum dengan benar

3.      Untuk menghasilkan preparat yang baik dan jelas, sebaiknya pada waktu melakukan

pengapusan diusahakan setipis mungkin

IX.DAFTAR PUSTAKA

Rudyatmi,Eli. 2011. Bahan Ajar Mikroteknik. Semarang: Jurusan Biologi FMIPA UNNES.Subowo. 1992. Histologi umum. Jakarta: PT.Bumi Aksara.

Marianti, Aditya.2010. Petunjuk Praktikum fisiologi Hewan. Semarang : Biologi FMIPA UNNES.

Beranda http://mahendrabio.blogspot.co.id/p/laporan-praktikum-mikrotekpembuatan.html

Darah adalah sejenis jaringan ikat yang sel-selnya (elemen pembentuk) tertahan dan

dibawa dalam matriks cairan (plasma). Darah lebih berat dibandingkan air dan lebih kental.

Cairan ini memiliki rasa dan bau yang khas, serta pH 7,4 (7,35-7,45). Warna darah bervariasi

dari merah terang sampai merah tua kebiruan, bergantung pada kadar oksigen yang dibawa

sel darah merah (Sloane, 2003).

Volume darah total sekitar 5 liter pada laki-laki dewasa berukuran rata-rata dan

kurang sedikit pada perempuan dewasa. Volume ini bervariasi sesuai ukuran tubuh dan

berbanding terbalik dengan jumlah jaringan adiposa dalam tubuh. Volume ini juga bervariasi

sesuai perubahan cairan darah dan konsentrasi elektrolitnya (Sloane, 2003).

Lebih dari separuh bagian dari darah merupakan cairan (plasma), yang sebagian besar

mengandung garam-garam terlarut dan protein. Protein utama dalam plasma adalah albumin.

Protein lainnya adalah antibodi (imunoglobulin) dan protein pembekuan. Plasma juga

mengandung hormon-hormon, elektrolit, lemak, gula, mineral dan vitamin. Selain

menyalurkan sel-sel darah, plasma juga:

1.      Merupakan cadangan air untuk tubuh

2.      Mencegah mengkerutnya dan tersumbatnya pembuluh darah

3.      Membantu mempertahankan tekanan darah dan sirkulasi ke seluruh tubuh.

Bahkan yang lebih penting, antibodi dalam plasma melindungi tubuh melawan bahan-

bahan asing (misalnya virus, bakteri, jamur dan sel-sel kanker), ketika protein pembekuan

mengendalikan perdarahan. Selain menyalurkan hormon dan mengatur efeknya, plasma juga

mendinginkan dan menghangatkan tubuh sesuai dengan kebutuhan (Sherwood,2002).

Pada dasarnya darah memiliki tiga fungsi utama yaitu membantu pengangkutan zat-

zat  makanan, perlindungan atau proteksi dari benda asing, dan mengatur regulasi kandungan

air jaringan, pengaturan suhu tubuh, dan pengaturan pH. Terdapat tiga macam unsur seluler

darah, yaitu eritrosit, leukosit, dan trombosit.

1.    Sel darah merah (eritrosit).

 Menurut Sloane (2003), eritrosit merupakan diskus bikonkaf, bentuknya bulat dengan

lekukan pada sentralnya dan berdiameter 7,65 µm. Eritrosit terbungkus dalam membran sel

dengan permeabilitas tinggi. Membran ini elastis dan fleksibel, sehingga memungkinkan

eritrosit menembus kapiler (pembuluh darah terkecil). Setiap eritrosit mengandung sekitar

300 juta molekul hemoglobin, sejenis pigmen pernapasan yang mengikat oksigen. Volume

hemoglobin mencapai sepertiga volume sel.

Eritrosit merupakan sel yang paling banyak dibandingkan dengan 2 sel lainnya, dalam

keadaan normal mencapai hampir separuh dari volume darah. Sel darah merah mengandung

hemoglobin, yang memungkinkan sel darah merah membawa oksigen dari paru-paru dan

mengantarkannya ke seluruh jaringan tubuh. Oksigen dipakai untuk membentuk energi bagi

sel-sel, dengan bahan limbah berupa karbon dioksida, yang akan diangkut oleh sel darah

merah dari jaringan dan kembali ke paru-paru.

2.    Sel darah putih (leukosit)

Jumlahnya lebih sedikit, dengan perbandingan sekitar 1 sel darah putih untuk setiap

660 sel darah merah. Terdapat 5 jenis utama dari sel darah putih yang bekerja sama untuk

membangun mekanisme utama tubuh dalam melawan infeksi, termasuk menghasilkan

antibodi. Dibedakan berdasarkan ukuran, bentuk nukleus, dan ada tidaknya granula

sitoplasma. Sel yang memiliki granula sitoplasma disebut granulosit sedangkan sel tanpa

granula disebut agranulosit.

a.    Granulosit

1)    Neutrofil

Juga disebut granulosit karena berisi enzim yang mengandung granul-granul,

jumlahnya paling banyak. Neutrofil membantu melindungi tubuh melawan infeksi bakteri

dan jamur dan mencerna benda asing sisa-sisa peradangan. Ada 2 jenis neutrofil, yaitu

neutrofil berbentuk pita (imatur, belum matang) dan neutrofil bersegmen (matur, matang).

Menurut Sloane (2003), neutrofil memiliki granula kecil berwarna merah muda dalam

sitoplasmanya. Nukleusnya memiliki tiga sampai lima lobus yang terhubungkan dengan

benang kromatin tipis. Diameternya mencapai 9 µm samapai 12 µm.

2)    Eosinofil

Eosinofil memiliki granula sitoplasma yang kasar dan besar, dengan pewarnaan

oranye kemerahan. Sel ini memiliki nukleus berlobus dua, dan berdiameter 12 µm sampai 15

µm. Berfungsi sebagai fagositik lemah. Jumlahnya akan meningkat saat terjadi alergi atau

penyakit parasit, tetapi akan berkurang selama stress berkepanjangan. Selain itu eosinofil

juga membunuh parasit, merusak sel-sel kanker dan berperan dalam respon alergi.

3)    Basofil

Basofil memiliki sejumlah granula sitoplasma besar yang bentuknya tidak beraturan

dan akan berwarna keunguan sampai hitam serta memperlihatkan nukleus berbentuk S.

diameternya sekitar 12 µm sampai 15 µm. Basofil juga berperan dalam respon alergi. Sel ini

mengandung histamin.

b.    Agranulosit

1)    Limfosit

Limfosit merupakan sel utama pada sistem getah bening yang berbentuk sferis,

berukuran yang relatif lebih kecil daripada makrofag dan neutrofil. Selain itu, limfosit

bergaris tengah 6-8 µm, 20-30% dari leukosit darah, memiliki inti yang relatif besar, bulat

sedikit cekung pada satu sisi. Sitoplasmanya sedikit dan kandungan basofilik dan

azurofiliknya sedikit. Limfosit-limfosit dapat digolongkan berdasarkan asal, struktur halus,

surface markers yang berkaitan dengan sifat imunologisnya, siklus hidup dan fungsi (Efendi,

2003).

Limfosit dibagi ke dalam 2 kelompok utama (Farieh, 2008):

1.      Limfosit B berasal dari sel stem di dalam sumsum tulang dan tumbuh menjadi sel plasma,

yang menghasilkan antibodi

2.      Limfosit T terbentuk jika sel stem dari sumsum tulang pindah ke kelenjar thymus, dimana

mereka mengalami pembelahan dan pematangan.

Di dalam kelenjar thymus, limfosit T belajar membedakan mana benda asing dan

mana bukan benda asing. Limfosit T dewasa meninggalkan kelenjar thymus dan masuk ke

dalam pembuluh getah bening dan berfungsi sebagai bagian dari sistem pengawasan

kekebalan.

2)    Monosit

Monosit merupakan sel leukosit yang besar 3-8% dari jumlah leukosit normal,

diameter 9-10 um tapi pada sediaan darah kering diameter mencapai 20 µm atau lebih. Inti

biasanya eksentris, adanya lekukan yang dalam berbentuk tapal kuda. Sitoplasma relatif

banyak dengan pulasan wrigh berupa bim abu-abu pada sajian kering. Granula azurofil,

merupakan lisosom primer, lebih banyak tapi lebih kecil. Ditemui retikulim endoplasma

sedikit. Juga ribosom, pliribosom sedikit, banyak mitokondria. Apa ratus Golgi berkembang

dengan baik, ditemukan mikrofilamen dan mikrotubulus pada daerah identasi inti. Monosit

terdapat dalam darah, jaringan ikat dan rongga tubuh. Monosit tergolong fagositik

mononuclear (system retikuloendotel) dan mempunyai tempat-tempat reseptor pada

permukaan membrannya. Untuk imunoglobulin dan komplemen (Efendi, 2003).

         65%

Neutrofil berhubungan dengan pertahanan tubuh terhadap infeksi bakteri serta proses

peradangan kecil lainnya, serta biasanya juga yang memberikan tanggapan pertama terhadap

infeksi bakteri; aktivitas dan matinya neutrofil dalam jumlah yang banyak menyebabkan

adanya nanah.

         4%

Eosinofil terutama berhubungan dengan infeksi parasit, dengan demikian meningkatnya

eosinofil menandakan banyaknya parasit.

         <1%

Basofil terutama bertanggung jawab untuk memberi reaksi alergi dan antigen dengan jalan

mengeluarkan histamin kimia yang menyebabkan peradangan.

         25%

Limfosit lebih umum dalam sistem limfa. Darah mempunyai tiga jenis limfosit:

·      

  Sel B: Sel B membuat antibodi yang mengikat patogen lalu menghancurkannya. (Sel B tidak

hanya membuat antibodi yang dapat mengikat patogen, tapi setelah adanya serangan,

beberapa sel B akan mempertahankan kemampuannya dalam menghasilkan antibodi sebagai

layanan sistem 'memori'.

  Sel T: CD4+ (pembantu) Sel T mengkoordinir tanggapan ketahanan (yang bertahan dalam

infeksi HIV) sarta penting untuk menahan bakteri intraseluler. CD8+ (sitotoksik) dapat

membunuh sel yang terinfeksi virus.

  Sel natural killer: Sel pembunuh alami (natural killer, NK) dapat membunuh sel tubuh yang

tidak menunjukkan sinyal bahwa dia tidak boleh dibunuh karena telah terinfeksi virus atau

telah menjadi kanker.

         6%

Monosit membagi fungsi "pembersih vakum" (fagositosis) dari neutrofil, tetapi lebih jauh dia

hidup dengan tugas tambahan: memberikan potongan patogen kepada sel T sehingga patogen

tersebut dapat dihafal dan dibunuh, atau dapat membuat tanggapan antibodi untuk menjaga.

Monosit dikenal juga sebagai makrofag setelah dia meninggalkan aliran darah serta

masuk ke dalam jaringan.

3.    Platelet (trombosit).

Merupakan paritikel yang menyerupai sel, dengan ukuran lebih kecil daripada sel

darah merah atau sel darah putih. Sebagai bagian dari mekanisme perlindungan darah untuk

menghentikan perdarahan, trombosit berkumpul dapa daerah yang mengalami perdarahan dan

mengalami pengaktivan. Setelah mengalami pengaktivan, trombosit akan melekat satu sama

lain dan menggumpal untuk membentuk sumbatan yang membantu menutup pembuluh darah

dan menghentikan perdarahan. Pada saat yang sama, trombosit melepaskan bahan yang

membantu mempermudah pembekuan (Junquiera,1997)).

Sediaan apus darah adalah suatu sarana yang digunakan untuk menilai berbagai

unsure sel darah tepi, seperti eritrosit, leukosit, dan trombosit. Selain itu dapat pula digunakan

untuk mengidentifikasi adanya parasit seperti malaria, mikrofilaria, dan lain-lain. Sediaan

apus yang dibuat dan dipulas dengan baik merupakan syarat mutlak untuk mendapatkan hasil

pemeriksaan yang terbaik merupaka syarat mutlak untuk mendapatkan hasil pemeriksaan

yang baik.

Bahan pemeriksaan yang terbaik adalah darah segar yang berasal dari kapiler atau

vena dengan atau tanpa EDTA. Sediaan yang disimpan tanpa difiksasi terlebih dulu tidak

dapat dipulas sebaik sediaan segar. Kebanyakan cara memulas sediaan darah menggunakan

prinsip Romanowski, seperti Wright, Giemsa, May-Grunwald-Biemsa atau Wright-Giemsa

(Murtiati dkk, 2010).

Praktikum mengenai sediaan apus darah kali ini bertujuan untuk mengamati dan

menilai berbagai unsure sel darah pada manusia seperti sel darah merah (eritrosit), sel darah

putih (leukosit), dan keping darah (trombosit). Berdasarkan Murtiati, dkk (2010), sediaan

apus darah juga dapat digunakan untuk mengidentifikasi adanya parasit seperti malaria,

microfilaria, dan lain-lain. Namun pada praktikum kali ini hanya dilakukan pengamatan

untuk mengetahui deskripsi bentuk dari berbagai sel darah dan menilai persentase sel darah

yang teramati.

Sediaan apus darah dilakukan dengan menggunakan bahan darah segar yang berasal

dari kapiler atau vena OP. OP pada praktikum ini adalah nurhayati. Pertama praktikan

mengambil darah dari ujung jari telunjuk tangan kiri menggunakan blood lancet atau slat

suntik kemudian mencampurkannya dengan EDTA supaya tidak cepat membeku. Setelah itu

praktikan menaruhnya ke kaca objek. Kemudian menyentuhkan kaca penutup ke tetesan

darah hingga darah melebar. Selanjutnya membentuk sudut 30-400 dengan kaca penutup, lalu

digerakkan ke kiri membentuk apusan darah yang tidak terlalu tipis ataupun terlalu tebal

karena jika terlalu tebal maka saat pengamatan di bawah mikroskop akan terlihat tidak jelas

karena sel darah bertumpuk.

Setelah mendapat sediaan yang bagus (tidak tebal dan tipis), maka membiarkannya

hingga kering, setelah itu meneteskan metanol ke atas sediaan hingga bagian yang terlapisi

darah tertutup semuanya dan membiarkannya selama 5 menit. Fungsi metanol adalah untuk

memfiksasi darah sehingga darah tidak hilang saat diamati. Selanjutnya sediaan diteteskan

dengan giemsa yang telah diencerkan dengan air dan membiarkannya selama 20 menit dan

membilasnya dengan air dan mengeringkannya. Fungsi giemsa adalah untuk mewarnai darah

sehingga mudah dibedakan dan dapat terlihat jelas saat diamati. Waktu perendaman ini

sebaiknya jangan terlalu lama karena darah bisa tidak terlihat akibat pewarnaan yang terlalu

pekat.

Selanjutnya setelah sediaan apus darah telah selesai, maka dilakukan pengamatan

dengan menggunakan mikroskop untuk memeriksa sediaan apus darah. Sebelum pengamatan

sediaan apus darah diteteskan minyak emersi terlebih dahulu, tujuan pemberian minyak

emersi ini yaitu untuk mencegah kerusakan pada mikroskop. Dengan perbesaran lemah

(100x), praktikan hanya melihat bulat-bulat kecil yang sangat banyak dan belum terlihat jelas

perbedaan antara leukosit, eritrosit dan trombosit.

Setelah menggunakan pembesaran 400x, praktikan menemukan ukuran eritrosit yang

kecil , berbentuk bulat bikonkaf tidak berinti, dan berwarna ungu bening. Warna ungu ini

akibat pewarnaan dengan giemsa, sehingga warna darah yang semula merah, setelah diamati

di mikroskop berubah menjadi ungu. Hal ini sesuai dengan literatur yaitu eritrosit berbentuk

cakram bikonkaf atau cakram pipih, sel tidak berinti dan tidak punya organel seperti sel-sel

lain. Eritrosit berukuran sekitar 7,5µm dan bagian pusat lebih tipis dan lebih terang dari

bagian tepinya. Selain itu, eritrosit mengandung hemoglobin yang berfungsi untuk

mentransport O2 (Dikaamelia, 2008).

Pembentukan eritrosit atau eritropoiesis terjadi di sumsum merah yang terletak pada

tulang belakang, sternum (tulang dada), tulang rusuk, tengkorak, tulang belikat, tulang

panggul serta tulang-tulang anggota badan (kaki dan tangan). Eritrosit berumur pendek.

Tidak adanya inti pada eritrosit menyebabkan eritrosit tidak mampu mensintesis protein

untuk tumbuh, atau untuk memperbanyak diri (Dikaamelia, 2008). Namun dengan tidak

adanya inti pada eritrosit dan dengan bentuk yang berupa bikonkaf maka eritrosit memiliki

kemampuan yang optimal dalam mengikat oksigen sehingga kebutuhan akan oksigen menjadi

terpenuhi. Itu sebabnya apabila seseorang menderita penyakit sel sabit, yaitu penyakit yang

disebabkan karena struktur eritrositnya berbentuk seperti bulan sabit, memiliki kemampuan

mengikat oksigen yang lebih sedikit sehingga membuat penderita menjadi anemia dan lemah.

Pada pengamatan di praktikum ini tidak ditemukan eritrosit yang berbentuk selain

bikonkaf, itu artinya OP tidak menderita kelainan struktur eritrosit. Kelainan pada struktur

eritrosit dapat disebabkan karena faktor genetika ataupun lingkungan.

Kemudian didapatkan beberapa jenis leukosit, namun praktikan tidak mampu

mengidentifikasinya apakah termasuk basofil, eosinofil, batang, neutrofil, limfosit ataupun

monosit. Hal tersebut karena keterbatasan pembesaran pada mikroskop yang digunakan

sehingga tidak dapat terlihat dengan jelas bentuk dari inti sel leukosit tersebut. Penggolongan

leukisit menjadi 5 macam merupakan penggolongan berdasarkan ukuran sel, bentuk nukleus,

da ada tidaknya granula sitoplasma sehingga perlu pengamatan yang lebih teliti dan

perbesaran mikroskop yang baik serta dapat pula dibantu dengan menggunakan minyak

emersi.

Berdasarkan referensi, sel neutrofil memiliki granula kecil berwarna merah muda

dalam sitoplasmanya. Nukleusnya memiliki tiga sampai lima lobus yang terhubungkan

dengan benang kromatin tipis. Diameternya mencapai 9 µm samapai 12 µm. Sel eosinofil

memiliki granula sitoplasma yang kasar dan besar, dengan pewarnaan oranye kemerahan. Sel

ini memiliki nukleus berlobus dua, dan berdiameter 12 µm sampai 15 µm. Berfungsi sebagai

fagositik lemah. Sedangkan basofil memiliki sejumlah granula sitoplasma besar yang

bentuknya tidak beraturan dan akan berwarna keunguan sampai hitam serta memperlihatkan

nukleus berbentuk S. diameternya sekitar 12 µm sampai 15 µm (Sloane, 2003).

Untuk kelompok leukosit yang merupakan agranulosit yaitu lomfosit dan monosit,

diperoleh data berdasarkan refernsi bahwa limfosit bergaris tengah 6-8 µm, 20-30% dari

leukosit darah, memiliki inti yang relatif besar, bulat sedikit cekung pada satu sisi.

Sitoplasmanya sedikit dan kandungan basofilik dan azurofiliknya sedikit (Efendi, 2003).

Sedangkan monosit merupakan sel leukosit yang besar 3-8% dari jumlah leukosit normal,

diameter 9-10 um tapi pada sediaan darah kering diameter mencapai 20 µm atau lebih. Inti

biasanya eksentris, adanya lekukan yang dalam berbentuk tapal kuda (Efendi, 2003).

Menurut referensi yang kami peroleh, jenis sel darah putih yang paling banyak adalah

netrofil dengan presentase sebesar 50-70 %, sedangkan yang paling sedikit adalah basofil,

yaitu 0,1-0,4 %.

Monosit berfungsi untuk membunuh bakteri, fungsi monosit ini sama dengan neutrofil, hanya

jumlahnya saja yang berbeda. Jumlah monosit yang tinggi menunujukkan disel sedang terjadi

infeksi. Berdasarkan pengamatan, jumlah monsit sedikit, sehingga neutrofilpun kurang aktif

dalam merespon perusakan jaringan. Dengan kata lain, jumlah neutrofil dalam darah yang

seharusnya mempunyai kadar/jumlah yang tinggi dalam darah menjadi menurun jumlahnya.

Limfosit berfungsi sebagai elemen kunci dalam respon kekebalan tubuh. Kadar limfosit yang

banyak diduga karena sedikitnya jumlah neutofil dalam darah. Sehingga untuk

mempertahankan kekebalan tubuh, maka limfositlah yang bekerja secara aktif.

            Neutrofil berhubungan dengan pertahanan tubuh terhadap infeksi bakteri serta proses

peradangan kecil lainnya, serta biasanya juga yang memberikan tanggapan pertama terhadap

infeksi bakteri; aktivitas dan matinya neutrofil dalam jumlah yang banyak menyebabkan

adanya nanah. Eosinofil terutama berhubungan dengan infeksi parasit, dengan demikian

meningkatnya eosinofil menandakan banyaknya parasit. Basofil terutama bertanggung jawab

untuk memberi reaksi alergi antigen dengan jalan mengeluarkan histamin kimia yang

menyebabkan peradangan.

Limfosit lebih umum dalam sistem limfa. Darah mempunyai tiga jenis limfosit yaitu

Sel B membuat antibodi yang mengikat patogen lalu menghancurkannya. (Sel B tidak hanya

membuat antibodi yang dapat mengikat patogen, tapi setelah adanya serangan, beberapa sel B

akan mempertahankan kemampuannya dalam menghasilkan antibodi sebagai layanan sistem

'memori'). Sel T mengkoordinir tanggapan ketahanan (yang bertahan dalam infeksi ) serta

penting untuk menahan bakteri intraseluler. Sel natural killer merupakan sel pembunuh alami

(natural killer, NK) yang dapat membunuh sel tubuh yang tidak menunjukkan sinyal bahwa

dia tidak boleh dibunuh karena telah terinfeksi atau telah menjadi kanker.

           

Sedangkan trombosit yang teramati yaitu trombosit berukuran sangat kecil terlihat

seperti titik atau bercak yang berada di luar sel dan berwarna ungu. Hal ini sesuai dengan

teori yang menyebutkan bahwa trombosit adalah sel darah tak berinti, berbentuk cakram

dengan diameter 1 - 4 mikrometer dan volume 7 – 8 fl.. Nilai normal trombosit bervariasi

sesuai metode yang dipakai. Jumlah trombosit normal menurut Deacie adalah 150 – 400 x

109 / L. Bila dipakai metode Rees Ecker nilai normal trombosit 140 – 340 x 109/ L, dengan

menggunakan Coulter Counter harga normal 150 – 350 x 109/L.

         

  Dari ketiga macam sel darah yang teramati diperoleh persentasenya yaitu eritrosit

sebanyak 70% dari lapang pandang yang diamati, leukosit sebanyak 10% dan trombosit

sebanyak 20%. Berdasarkan referensi juga disebutkan bahwa persentase sel darah merah

(eritrosit) pada tubuh merupakan yang paling besar. Sedangkan leukosit memiliki jumlah

yang lebih sedikit daripada sel eritrosit. Dalam Sloane (2003), disebutkan bahwa jumlah

eritrosit pada laki-laki sehat mencapai 4,2 hingga 5,5 juta sel per mm3 dan sekitar 3,2 hingga

5,2 juta per mm3 pada wanita sehat, sedangkan jumlah normal leukosit adalah 7000 sampai

9000 per mm3 dan trombosit berjumlah 250.000 sampai 400.000 per mm3. Hal tersebut

sesuai dengan hasil pengamatan yaitu jumlah eritrosit > trombosit > leukosit. Meskipun

berjumlah paling sedikit dari ketiga sel darah yang ada, fungsi leukosit pada tubuh sangat

penting, dimana dalam keadaan sakit atau terserang benda asing maka jumlah leukosit dapat

meningkat.

Praktikum anatomi fisiologi manusia kali ini adalah pembuatan apus darah

manusia  menggunakan metode apus/ smear/ oles. Darah yang digunakan adalah darah

manusia . Berdasarkan foto dari hasil pengamatan preparat apus darah manusia dengan

pewarnaan Giemsa diketahui bahwa preparat secara fisik cukup baik, bersih, dan terwarna.

Dapat terlihat adanya eritrosit dalam jumlah banyak dan leukosit.

Eritrosit yang diamati berwarna agak bening transparan. Eritrosit berbentuk bulat,

dengan bentuk seperti cekungan (cakram) pada sisi dalam (tengah) dan tak berinti. Leukosit

ditunjukkan dengan sel yang memiliki inti berwarna ungu. Warna ungu disebabkan oleh inti

leukosit yang basa sehingga mudah menyerap zat warna giemsa. Leukosit yang paling

banyak dijumpai ialah neutrofil dan monosit berkisar antara 10-15%, serta sedikit eosinofil

dengan presentase kurang dari 5%.  Presentase neutrofil memang paling banyak dalam darah,

yaitu mencapai 50-70% dari jumlah leukosit yang ada. Ditemukanya leukosit dalam preparat

apus darah menunjukkan bahwa pendonor sdang mengalami sakit berkaitan dengan fungsi

leukosit sebagai bentuk pertahanan tubuh manusia.

Preparat tampak rapat namun sel-selnya dapat teramati dengan baik karena tidak

bertumpuk, sehingga dapat dikatakan ketipisan apusan sudah cukup baik.

http://cahyaaulia.blogspot.co.id/2013/12/laporan-anfisman-sediaan-apus-darah_8.html