TUJUAN PRAKTIKUM Melakukan penetapan respon mikroba terhadap zat antimikroba dengan penetapan potensi antibiotika. TUJUAN PERCOBAAN Mengamati respon bakteri terhadap antibiotik yang ditentukan. ALAT DAN BAHAN ALAT BAHAN

Cawan petri Tabung reaksi Ose bundar Pinset Labu takar 25 ml dan 10 ml Rak tabung reaksi Pipet agar 20 ml Pipet ukur 1 ml Erlenmeyer Bunsen Paper disk Jangka sorong Inkubator 37o C Antibiotic Zone Reader pH meter

Media Nutrient Agar Akuadest steril Larutan dapar pH 8, 0 Suspensi Escherichia coli dengan transmitan 25 % Ampisilin standar dengan konsentrasi 1mg/ ml Sampel uji

PROSEDUR Diberi tanda menggunakan spidol pada tiga buah cawan petri yang akan digunakan sesuai dengan pola. Kemudian dibuat inokula 20 %, setelah tercampur homogen dituang ke dalam cawan petri sebanyak 20 ml dan diamkan memadat.

Disiapkan ampisilin trihidrat standar dengan melarutkan dalam aquadest steril hingga didapatkan konsentrasi 1000 mg/ ml kemudian dilakukan pengenceran dengan larutan dapar pH 8, 0 hingga diperoleh dosis M1 M5 ( perbandingan konsentrasi pada tingkat dosis berurutan 4 : 5 ). Diletakkan paperdisk yang sebelumnya telah dicelupkan pada larutan standar atau uji pada agar inokula. ( pada masing-masing cawan petri diletakkan 6 paper disk) (M 1 M6, Uji ), dilakukan duplo). Pre inkubasi pada suhu kamar 20 30 menit , kemudian diinkubasikan pada suhu 37o C selama 18 24 jam. Diamati dan diukur diameter hambatan yang terjadi. Kemudian dibuat perhitungan dengan regresi linear dan ditentukan besar respon mikroba terhadap sampel uji.