Upload
vohanh
View
226
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK LABU SIAM (Sechium edule
(Jacq.) Sw.) TERHADAP KADAR KOLESTEROL TOTAL TIKUS
PUTIH (Rattus norvegicus) YANG DIBERI PAKAN
HIPERKOLESTEROLEMIK
SKRIPSI
Untuk Memenuhi Persyaratan
Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran
RIZKA DEWI PARAMITHA
G0007144
FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS SEBELAS MARET
SURAKARTA
2010
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
ii
DAFTAR ISI
PRAKATA .......................................................................................................... i
DAFTAR ISI ....................................................................................................... ii
DAFTAR TABEL .............................................................................................. iv
DAFTAR GRAFIK ............................................................................................ v
DAFTAR LAMPIRAN....................................................................................... vi
BAB I PENDAHULUAN .................................................................................. 1
A. Latar Belakang Masalah ................................................................... 1
B. Perumusan Masalah........................................................................... 3
C. Tujuan Penelitian .............................................................................. 3
D. Manfaat Penelitian ............................................................................ 4
BAB II LANDASAN TEORI............................................................................. 5
A. Tinjauan Pustaka .............................................................................. 5
1. Kolesterol ................................................................................... 5
2. Labu Siam ..................................................................................11
3. Peran Ekstrak Labu Siam dalam Menurunkan Kolesterol Total
Darah ......................................................................................... 13
B. Kerangka Berpikir ........................................................................... 20
C. Hipotesis .......................................................................................... 21
BAB III METODE PENELITIAN ................................................................... 22
A. Jenis Penelitian ................................................................................ 22
B. Lokasi Penelitian ............................................................................. 22
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
ii
C. Subjek dan Besar Sampel Penelitian ............................................... 22
D. Teknik Sampling ............................................................................. 23
E. Identifikasi Variabel Penelitian ....................................................... 23
F. Definisi Operasional Variabel.......................................................... 24
G. Rancangan Penelitian ...................................................................... 30
H. Alat Yang Digunakan....................................................................... 31
I. Bahan Penelitian .............................................................................. 31
J. Jalannya Penelitian........................................................................... 32
K. Teknik Analisis Data ....................................................................... 34
BAB IV HASIL PENELITIAN ........................................................................ 36
BAB V PEMBAHASAN................................................................................... 42
BAB VI SIMPULAN DAN SARAN................................................................ 47
A. Simpulan........................................................................................... 47
B. Saran ................................................................................................. 47
DAFTAR PUSTAKA........................................................................................ 48
LAMPIRAN
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
ii
DAFTAR TABEL
Tabel 4.1 Data Hasil Pengukuran Kadar Kolesterol Total Tikus Putih Sebelum
Diberi Perlakuan ………………………………………...……….... 36
Tabel 4.2 Data Hasil Pengukuran Kadar Kolesterol Total Tikus Putih Setelah
Diberi Perlakuan ………………………………………...……….... 37
Tabel 4.3 Data Hasil Pengukuran Kadar Kolesterol Total Tikus Putih Sebelum
dan Setelah Diberi Perlakuan………………………………………. 38
Tabel 4.4 Data Hasil Pengukuran Selisih Kadar Kolesterol Total Tikus Putih..39
Tabel 4.5 Hasil Uji Normalitas Saphiro-Wilk terhadap Rerata Selisih Kadar
Kolesterol Total……………………………………………………. 40
Tabel 4.6 Nilai Signifikansi Rerata Selisih Kadar Kolesterol Total Antar
Kelompok pada Uji Mann-Whitney …………………………….…. 41
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
ii
DAFTAR GRAFIK
Grafik 4.1 Histogram Rerata Kadar Kolesterol Total Tikus Putih Sebelum dan
Setelah Diberi Perlakuan (mg/dl)……….……………………….....38
Grafik 4.2 Histogram Rerata Selisih Kadar Kolesterol Total Tikus Putih
(mg/dl)………………………………………………………………39
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
ii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1 Komposisi Pakan Pelet AD-2
Lampiran 2 Data Kadar Kolesterol Total Keempat Kelompok Perlakuan Pre
Test dan Post Test
Lampiran 3 Data Statistik Uji Deskriptif, Normalitas, dan Varians Selisih Kadar
Kolesterol Total Tiap Kelompok Sebelum dan Setelah Diberi
Perlakuan
Lampiran 4 Hasil Uji Kruskal-Wallis untuk Selisih Kadar Kolesterol Total Tiap
Kelompok Sebelum dan Setelah Diberi Perlakuan
Lampiran 5 Hasil Uji Mann-Whitney untuk Selisih Kadar Kolesterol Total Tiap
Kelompok Sebelum dan Setelah Diberi Perlakuan
Lampiran 6 Ethical Clearance
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
ABSTRAK Rizka Dewi Paramitha, G0007144, 2010, Pengaruh Pemberian Ekstrak Labu Siam (Sechium edule (Jacq.) Sw.) terhadap Kadar Kolesterol Total Tikus Putih (Rattus norvegicus) yang Diberi Pakan Hiperkolesterolemik. Fakultas Kedokteran, Universitas Sebelas Maret, Surakarta. Latar Belakang: Penyakit kardiovaskuler, khususnya Penyakit Jantung Koroner (PJK) dan stroke adalah penyakit yang sangat mematikan. Salah satu upaya mencegah terjadinya PJK adalah dengan menurunkan kadar kolesterol total dalam darah. Tujuan : Untuk mengetahui pengaruh pemberian ekstrak Labu Siam (Sechium edule (Jacq.) Sw.) terhadap kadar kolesterol total tikus putih (Rattus norvegicus) yang diberi pakan hiperkolesterolemik Metode : Desain penelitian ini adalah pre and post test with control group, dilakukan di Laboratorium Biokimia Universitas Sebelas Maret Surakarta. Objek penelitian adalah tikus putih jantan strain Wistar sebanyak 28 ekor.. Tikus diberi pakan hiperkolesterolemik dan Propiltiourasil sebanyak dua kali sehari selama 7 hari dan diperiksa kadar kolesterol total pretest. Selama 21 hari berikutnya, diberi perlakuan pada kelompok I sebagai kontrol, kelompok II diberi ekstrak Labu Siam dosis 80 mg/200gr BB, kelompok III dengan dosis 160 mg/200gr BB, dan kelompok IV dengan dosis 240 mg/200gr BB, masing-masing perlakuan dua kali sehari. Pembuatan ekstrak Labu Siam menggunakan metode perkolasi. Semua tikus diperiksa kadar kolesterol total postest setelah dipuasakan 12 jam sebelumnya. Data kadar kolesterol total darah tikus dianalisis menggunakan uji Kruskal-Wallis dan Mann-Whitney dengan bantuan program SPSS for Windows versi 16. Hasil : Tidak terdapat perbedaan yang signifikan pada kadar kolesterol total tikus putih dalam 4 kelompok coba (p=0,006). Simpulan : Pemberian ekstrak Labu Siam (Sechium edule (Jacq.) Sw.) tidak dapat mencegah kenaikan kadar kolesterol total tikus putih (Rattus norvegicus) yang diberi pakan hiperkolesterolemik. Kata kunci : Ekstrak Labu Siam, kolesterol total, tikus putih.
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
ABSTRACT Rizka Dewi Paramitha, G0007144, 2010, The Effect of Chayote Extract (Sechium edule (Jacq.) Sw.) on Total Cholesterol Level of White Rat (Rattus norvegicus). Medical Faculty, Sebelas Maret University, Surakarta. Background : Cardiovascular disease, especially coroner heart disease and stroke, is the most common death cause. Decreasing the level of total blood cholesterol is one of ways to prevent coroner heart disease. Objective:. To find the effect of Chayote Extract (Sechium edule (Jacq.) Sw.) on total cholesterol level of white rat (Rattus norvegicus) induced by hypercholesterolemic food. Methods: The design of this research is a pre and post test with control group, was done in Biochemistry Laboratorium of Sebelas Maret University, Surakarta, Indonesia. The research subjects are 28 white Wistar strain male rats. Rats were feed with hypercholesterolemic food and Propiltiourasil twice a day for 7 days and the cholesterol level were checked as pretest. For the next 21 days, induced to group I as control, group II induced by 80 mg/200gr BB of Chayote Extract, group III induced by 160 mg/200gr BB of Chayote Extract and group IV induced by 240 mg/200gr BB of Chayote Extract, twice a day for every inducing. The Chayote extraction used a percolation method. Then, the cholesterol level was checked as a posttest after the rats had a fasting for 12 hours before. The data of total blood cholesterol level of rats was analyzed with Kruskal-Wallis test and Mann-Whitney test with SPSS for Windows 16 version program. Result: The test shows there is not a significant total cholesterol level difference between 4 groups of rats (p= 0,006). Conclusion: The treatment of Chayote Extract (Sechium edule (Jacq.) Sw.) cannot prevent the increase of total cholesterol level of white rat (Rattus norvegicus) induced by hypercholesterolemic food.
Keywords : Chayote Extract, total cholesterol, white rats.
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang Masalah
Penyakit kardiovaskuler, khususnya Penyakit Jantung Koroner (PJK) dan
stroke adalah penyakit yang sangat mematikan. Suatu survey yang dilakukan
Departemen Kesehatan RI tahun 1992 menyebutkan bahwa penyakit kardiovaskuler
menjadi penyebab kematian nomor satu di Indonesia (Rifqi, 2004). Tiap 34 detik
diperkirakan satu orang meninggal dunia karena penyakit ini (Siswono, 2005). Data
terakhir menyebutkan, hingga tahun 2010 penyakit kardiovaskuler merupakan
penyakit peringkat teratas penyebab kematian.
Proses dasar yang menyebabkan PJK adalah infiltrasi lemak pada arteri
koronaria yang dikenal sebagai aterosklerosis (Sargowo, 1998). Aterosklerosis adalah
penyakit arteri besar dan sedang di mana lesi lemak timbul pada permukaan dalam
dinding arteri. Penyebab utama aterosklerosis adalah konsentrasi kolesterol yang
tinggi dalam plasma darah atau hiperkolesterolemia. Sejauh ini tindakan preventif
utama untuk menurunkan hiperkolesterolemia adalah konsumsi diet rendah lemak.
Selain itu dapat juga menggunakan obat penurun kolesterol yang terjadi melalui
berbagai mekanisme (Guyton and Hall, 2007). Diperkirakan bahwa terapi obat
kombinasi dapat memberikan hasil terapi yang lebih bermakna dibandingkan dengan
pemberian obat tunggal. Namun terapi kombinasi dapat meningkatkan efek samping,
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
intoleransi pasien, mempengaruhi compliance pasien, serta interaksi obat (Arif,
2008).
Selain dengan obat-obatan, juga terdapat terapi herbal untuk mengatasi
hiperkolesterol. Terapi herbal adalah penggunaan tanaman obat atas kemampuannya
untuk menyembuhkan penyakit (Parto, 2010). World Health Organization (WHO)
merekomendasikan penggunaan herbal karena dinilai lebih aman daripada
penggunaan obat modern karena herbal memiliki efek samping yang relatif lebih
sedikit dari pada obat modern (Kumalasari, 2006).
Beberapa tanaman yang berkhasiat menurunkan kolesterol adalah teh
(Camelia sinensis) dan Labu Siam (Sechium edule (Jacq.) Sw.). Salah satu tanaman
penurun kolesterol yang murah dan mudah didapat adalah Labu Siam. Labu Siam
diketahui memiliki efek diuretik, antioksidan, antimikroba, dan antihipertensi
(Astawan, 2007a). Berdasarkan penelitian sebelumnya, perasan Labu Siam dapat
dimanfaatkan sebagai penurun glukosa darah (Khikmawati, 2009). Khasiat lain
adalah ekstra Labu Siam dapat menurunkan kadar kolesterol total dan trigliserida
darah yang disebutkan Marlina dalam Agustini et al. (2006a). Labu Siam
mengandung saponin yang bermanfaat untuk menghambat dan mencegah penyerapan
kolesterol di dalam tubuh, dan alkaloid yang mampu memperlancar peredaran darah
sehingga mencegah penyakit stroke (Maryam, 2009). Selain itu, terdapat niasin yang
berfungsi menurunkan produksi kolesterol LDL (Low Density Lipoprotein) dan
trigliserida (Astawan, 2007b). Berdasarkan fakta-fakta tersebut maka dilakukan
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
penelitian tentang pengaruh pemberian ekstrak Labu Siam (Sechium edule (Jacq.)
Sw.) terhadap kadar kolesterol total tikus putih (Rattus norvegicus) yang diberi pakan
hiperkolesterolemik.
B. Perumusan Masalah
1. Apakah pemberian ekstrak Labu Siam (Sechium edule (Jacq.) Sw.) dapat
mencegah kenaikan kadar kolesterol total tikus putih (Rattus norvegicus) yang
diberi pakan hiperkolesterolemik?
2. Adakah perbedaan pengaruh pemberian beberapa dosis ekstrak Labu Siam
(Sechium edule (Jacq.) Sw.) terhadap kadar kolesterol total tikus putih (Rattus
norvegicus) yang diberi pakan hiperkolesterolemik?
C. Tujuan Penelitian
1. Untuk mengetahui pengaruh pemberian ekstrak Labu Siam (Sechium edule
(Jacq.) Sw.) terhadap pencegahan kenaikan kadar kolesterol total tikus putih
(Rattus norvegicus) yang diberi pakan hiperkolesterolemik.
2. Untuk mengetahui perbedaan pengaruh pemberian beberapa dosis ekstrak Labu
Siam (Sechium edule (Jacq.) Sw.) terhadap kadar kolesterol total tikus putih
(Rattus norvegicus) yang diberi pakan hiperkolesterolemik.
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
D. Manfaat Penelitian
1. Manfaat teoretis:
Penelitian ini diharapkan dapat memberikan bukti-bukti empiris atau
informasi tentang manfaat ekstrak Labu Siam (Sechium edule (Jacq.) Sw.)
terhadap pencegahan kenaikan kadar kolesterol total darah tikus putih (Rattus
norvegicus) yang diberi pakan hiperkolesterolemik.
2. Manfaat praktis
Penelitian ini dapat dijadikan dasar untuk mengolah Labu Siam menjadi
suatu bentuk yang mudah diambil manfaatnya guna mencegah kenaikan kadar
kolesterol darah yang menjadi faktor risiko penyakit kardiovaskuler.
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
BAB II
LANDASAN TEORI
A. Tinjauan Pustaka
1. Kolesterol
a. Definisi dan Fungsi
Kolesterol merupakan lipid amfipatik yang menjadi komponen
struktural esensial yang membentuk membran sel dan lapisan luar
lipoprotein plasma (Mayes, 2009). Kolesterol diklasifikasikan menjadi
kolesterol endogen yang sintesisnya berasal dari tubuh sendiri dan
kolesterol eksogen yang didapat dari makanan.
1) Kolesterol endogen
Prekursor untuk sintesis kolesterol adalah asetil Ko-A sitosol.
Asetil Ko-A dihasilkan dari prekursor utamanya, glukosa dan asam
lemak, terutama di mitokondria, serta dibentuk juga dari katabolisme
asam amino (Marks et al., 2000). Semua jaringan yang mempunyai sel
berinti mampu mensintesis kolesterol khususnya hati, korteks adrenal,
kulit, usus, testis, aorta, fraksi mikrosom dan sitosol sel. Sintesa
kolesterol terjadi di sitoplasma sedangkan enzimnya terdapat dalam
retikulum endoplasma. Biosintesis kolesterol dapat dibagi menjadi
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
lima tahap, yaitu: a) Asetil Ko-A membentuk HMG Ko-A dan
mevalonat, b) Mevalonat membentuk unit isopenoid yang aktif, c) Enam
unit isoprenoid membentuk skualen, d) Skualen dikonversi menjadi
lanosterol, e) Lanosterol dikonversi menjadi kolesterol (Mayes, 2009).
2) Kolesterol eksogen
Jenis-jenis makanan yang banyak mengandung kolesterol antara
lain daging (sapi maupun unggas), susu dan produk olahannya.
Sebagian kolesterol yang terkandung dalam produk hewani ini terdapat
dalam bentuk ester kolesterol sehingga lipase yang diaktifkan garam
empedu mengkatalisis reaksi hidrolisis ester kolesterol, ester vitamin
yang larut dalam lemak, fosfolipid dan trigliserida (Ganong, 2002).
Kolesterol siap diserap dari usus halus jika terdapat empedu dan getah
pankreas. Kolesterol diubah melalui proses esterifikasi menjadi
kolesterol bebas dan asam lemak dengan katalisator kolesterol esterase
(Gropper, et al., 2005). Saat lipid masuk usus halus, kandung empedu
berkontraksi dan mensekresi empedu yang diproduksi oleh hati.
Empedu mengemulsi partikel lemak sampai enzim pencerna lemak dari
pankreas mengubahnya menjadi partikel yang lebih kecil untuk diserap
(Sizer and Whitney, 2006). Partikel hasil digesti lipid yang bercampur
dengan garam empedu membentuk agregat polimolekuler yang disebut
misel (Gropper, et al., 2005). Pembentukan misel selanjutnya
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
melarutkan lipid dan memungkinkan mekanisme transportnya ke
enterosit. Misel bergerak ke konsentrasi yang lebih rendah ke brush
border sel-sel mukosa. Hampir semua kolesterol yang diserap
tergabung dalam kilomikron yang masuk ke sirkulasi melalui aliran
limfatik (Ganong, 2002).
Hepar merupakan tempat metabolisme utama kolesterol.
Kolesterol di hepar berasal dari sintesis di hepar sendiri dan dari
plasma. Kolesterol plasma berasal dari diet maupun dari jaringan
perifer. Sebagian kolesterol akan disimpan dalam bentuk kolesterol
ester dan sebagian lagi akan dikatabolisme menjadi asam empedu,
disekresi ke dalam empedu sebagai kolesterol bebas atau disekresi ke
dalam bentuk lipoprotein (Grundy, 1978).
Sebagian kolesterol hepar akan dibawa ke jaringan perifer
untuk memenuhi kebutuhan jaringan-jaringan tersebut. Kolesterol
memerlukan lipoprotein untuk transpor dalam plasma, karena sifatnya
yang tidak larut air (Mayes, 2009).
Ada 4 kelompok besar lipoprotein yang penting (Mayes, 2009),
yaitu:
a) Kilomikron
Kilomikron berasal dari penyerapan triasilgliserol di dalam
usus. Kilomikron hanya ditemukan di dalam chylus yang dibentuk
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
oleh cairan limfatik. Kilomikron bertanggung jawab dalam
transportasi lipid dari makanan ke saluran darah (Mayes, 2009).
b) Very Low Density Lipoprotein (VLDL)
Very Low Density Lipoprotein (VLDL) disintesis dan
disekresikan oleh hepar. Very Low Density Lipoprotein (VLDL)
merupakan alat pengangkut triasilgliserol dari hepar ke jaringan di
luar hepar (ekstrahepatik) (Mayes, 2009).
c) Low Density Lipoprotein (LDL)
Low Density Lipoprotein merupakan derivat dari VLDL.
Perubahan VLDL menjadi LDL terjadi dengan adanya enzim-
enzim tertentu. (Mayes,2009).
d) High Density Lipoprotein (HDL)
High Density Lipoprotein disintesis dalam hepar dan usus dari
zat bakal yang mengandung fosfolipid, kolesterol bebas dan
apoprotein HDL yaitu apoprotein A, apoprotein C dan apoprotein
E (Mayes, 2009). Fungsi utama HDL dalam sirkulasi yaitu sebagai
reservoir apoprotein C dan E yang diperlukan untuk metabolisme
kilomikron dan VLDL (Mayes, 2009). Fungsi lain adalah sebagai
scavenger kelebihan kolesterol bebas dan fosfolipid, serta sebagai
media transpor kolesterol bebas dari jaringan perifer ke hepar
untuk dikatabolisasi dan diekskresi (Miller, 1987).
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
b. Metabolisme kolesterol
Kolesterol diangkut oleh lipoprotein plasma dan proporsi terbesar
kolesterol terdapat dalam LDL. Kolesterol akan diangkut ke dalam
plasma oleh VLDL yang terbentuk di hati (Montgomery, et al., 1993).
Very Low Density Lipoprotein (VLDL) akan mengalami hidrolisis oleh
lipoprotein lipase segera setelah keluar dari hepar dan masuk ke dalam
sirkulasi, sehingga akan kehilangan sebagian trigliserida dan terbentuklah
Intermediate Density Lipoprotein (IDL/VLDL remnant). Intermediate
Density Lipoprotein (IDL) akan mengalami hidrolisis lagi dan
terbentuklah LDL. Low Density Lipoprotein (LDL) kemudian akan
diambil oleh reseptor LDL dalam hepar dan jaringan ekstrahepatik.
Pengambilan LDL dari sirkulasi terutama melalui reseptor LDL di
permukaan sel. Hampir semua jaringan tubuh mampu mensintesis
reseptor LDL dan hepar merupakan organ dengan tingkat aktivitas
reseptor paling tinggi. Kolesterol bebas dikeluarkan dari jaringan oleh
HDL dan kemudian diangkut ke hati (Murray, et al., 2003). HDL yang
telah diambil oleh hepar akan diekskresikan dalam bentuk asam empedu
dan kolesterol, yang melengkapi proses transpor balik kolesterol (Brewer,
2004). Transformasi kolesterol menjadi asam empedu hanya terjadi
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
dalam hepar. Asam empedu tersebut akan masuk ke duodenum dan
digunakan dalam pencernaan makanan. Sebagian besar asam empedu
(98%-99%) akan direabsorbsi melalui ileum dan selanjutnya akan
mengikuti sirkulasi enterohepatik atau digunakan lagi dalam pencernaan
makanan. Asam empedu yang tidak direabsorbsi akan dibuang bersama-
sama feses (Mayes, 2009). Ekskresi kolesterol dalam feses melalui
bentuk: 1) Sterol netral yang dipengaruhi oleh enzim-enzim bakteri usus
2) Garam empedu (Montgomery, et al., 1993).
c. Peranan kolesterol terhadap kejadian aterosklerosis
Aterosklerosis merupakan penyakit terbentuknya plak di dinding arteri
besar sehingga mempersempit lumen pembuluh darah tersebut, aliran
darah menjadi terganggu serta menurunkan elastisitas pembuluh darah
tersebut. Aterosklerosis terbentuk oleh akumulasi lipoprotein di dalam
intima pembuluh darah arteri, adhesi monosit di dalam endotelium arteri,
dan migrasi monosit ke intima arteri yang merupakan respons terhadap
rangsang kemotaktik. Pada tahap berikutnya, sel otot halus bermigrasi
dari tunika media arteri ke intima, kemudian terjadi proliferasi dan
akumulasi kolesterol (Marks, et al., 2000). Jika aterosklerosis terjadi di
dalam arteri ke otak (arteri karotid) maka dapat terjadi stroke, sedangkan
jika terjadi di dalam arteri yang menuju ke jantung (arteri koroner) dapat
terjadi PJK (Oentoro, 2007).
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
2. Labu Siam
a. Taksonomi
Kingdom : Plantae (Tumbuhan)
Subkingdom : Tracheobionta (Tumbuhan berpembuluh)
Super Divisi : Spermatophyta (Menghasilkan biji)
Divisi : Magnoliophyta (Tumbuhan berbunga)
Kelas : Magnoliopsida (berkeping dua / dikotil)
Sub Kelas : Dilleniidae
Ordo : Violales
Famili : Cucurbitaceae (suku labu-labuan)
Genus : Sechium
Spesies : Sechium edule (Jacq.) Sw.
(Plantamor, 2008).
b. Morfologi
Habitus Labu Siam berupa perdu dan merambat. Batangnya
lunak, beralur, banyak cabang, terdapat pembelit berbentuk spiral,
kasap, dan berwarna hijau. Daunnya tunggal, bentuk jantung, tepi
bertoreh, ujung meruncing, pangkalnya runcing, kasap, panjang 4-
25 cm, lebar 3-20 cm, tangkai panjang, pertulangan menjari, dan
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
berwarna hijau. Bunga merupakan bunga majemuk, berada di
ketiak daun, kelopak bertaju lima, mahkota beralur, benang sari
lima, kepala sari berwarna jingga, putik satu, dan berwarna kuning.
Buah berbentuk buni bulat, menggantung, permukaan berlekuk, dan
berwarna hijau keputih-putihan. Biji berbentuk pipih, berkeping
dua, dan berwarna putih. Akar berupa akar tunggang, dan berwarna
putih kecoklatan (Backer and Van Den Brink, 1968).
c. Komponen
Seratus gram Labu Siam mengandung zat-zat antara lain:
Energi 17 kkal, protein 0,82 gr, lemak 0,13 gr, karbohidrat 3,9 gr,
serat 1,7 gr, gula 1,85 gr, kalsium 17 mg, besi 0,34 mg, magnesium
12 mg, fosfor 18 mg, kalium 125 mg, atrium 2 mg, seng 0,74 mg,
tembaga 0,12 mg, mangan 0,19 mg, selenium 0,2 mg, vitamin C 7,7
mg, tiamin 0,03 mg, riboflavin 0,03 mg, niasin 0,47 mg, vitamin B6
0,08 mg, folat 93 mkg, vitamin E 0,12 mkg, vitamin K 4,6 mkg
(Astawan, 2007), serta mengandung saponin 1,65%, alkaloida
1,57%, dan flavonoid 0,95% (Pramono, 2005). Labu Siam
mempunyai kegunaan sebagai penurun tekanan darah, mempunyai
efek diuretik, dapat menyembuhkan gangguan sariawan, panas
dalam, demam pada anak-anak serta baik digunakan oleh penderita
asam urat dan diabetes mellitus. Labu Siam juga memiliki efek
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
antioksidan, antimikrobial, diuretik, antihipertensi, dan
hipokolesterol. Selain itu Labu Siam mempunyai efek hipoglikemik
(Khikmawati, 2009).
3. Peran Ekstrak Labu Siam dalam Menurunkan Kolesterol Total Darah
Ekstrak Labu Siam mengandung beberapa bahan aktif yang dapat
menurunkan kadar kolesterol total darah, antara lain:
a. Saponin
Saponin adalah glikosida yang setelah dihidrolisis akan
menghasilkan gula (glikon) dan sapogenin (aglikon). Senyawa sapogenin
mempunyai bagian bukan gula yang larut dalam lemak dan bagian gula
yang larut dalam air. Sebagian besar saponin mudah bergabung dengan
kolesterol yang menyebabkan rendahnya aktifitas saponin, rasa pahit dan
memiliki sifat yang berbusa. Saponin membentuk molekul kompleks
dengan berbagai senyawa 3β-hidroksisteroid. Reseptor yang berupa 3β-
hidroksisteroid termasuk kolesterol membran merupakan tempat aktivitas
hemolitik saponin. Saponin mampu berikatan dengan berbagai senyawa
3β-hidroksisteroid dan membentuk molekul kompleks yang sulit untuk
dipisahkan (Widodo, 2010).
Terbentuknya molekul kompleks saponin-kolesterol menyebabkan
terganggunya organisasi dalam sel karena pelepasan ikatan normal antara
kolesterol dan fosfolipida dalam membran. Saponin dapat membentuk
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
senyawa kompleks dengan kolesterol yang kokoh ikatannya. Hal ini
dapat dibuktikan dengan terjadinya penurunan kolesterol dalam jaringan
dan dalam darah, maupun penurunan absorpsi kolesterol dan peningkatan
ekskresi kolesterol dalam feses. Saponin juga dapat terikat dengan
garam-garam empedu yang diperlukan untuk proses absorpsi kolesterol
atau karena permukaan golongannya menjadi aktif, dapat juga
menyebabkan garam-garam empedu menjadi terhimpit yang akhirnya
menjadi polisakarida dalam otot. Pengaruh saponin terhadap rendahnya
kolesterol darah akan menghalangi penyerapan kolesterol kembali setelah
dikeluarkan dari empedu sehingga meningkatkan asam empedu dan sterol
netral pada feses (Widodo, 2010).
b. Niasin
Niasin merupakan derivat asam monokarboksilat dari pirimidin.
Bentuk aktif dari niasin adalah Nikotinamida Adenin Dinukleotida
(NAD+) dan Nikotinamida Adenin Dinukleotida Phosphat (NADP+)
yang merupakan komponen penting dalam lintasan metabolik yang
melibatkan karbohidrat, lipid serta asam amino. Niasin menurunkan
kadar kolesterol plasma melalui inhibisi aliran asam lemak bebas dari
jaringan adiposa yang mengurangi pembentukan lipoprotein yang
membawa kolesterol, yaitu VLDL, IDL, LDL, yang pada akhirnya dapat
menurunkan kadar kolesterol total dalam darah (Tika, 2002).
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
c. Alkaloid
Alkaloid secara umum mengandung paling sedikit satu buah atom
nitrogen yang bersifat basa dan merupakan bagian dari cincin
heterosiklik. Kebanyakan alkaloid berbentuk padatan kristal. Alkaloid
dapat juga berbentuk amorf atau cairan (Putra, 2007). Kandungan
alkaloid memiliki efek menghambat aktivitas enzim lipase, sehingga
dapat menghambat pemecahan lemak menjadi molekul-molekul lemak
yang lebih kecil. Hal ini mengakibatkan terjadinya pengurangan jumlah
lemak yang dapat diabsorpsi (Agustina, 2009).
d. Vitamin A
Secara garis besar, senyawa vitamin A dibagi menjadi dua, yaitu
preformed vitamin A (vitamin A, retinoid, retinol, dan derivatnya) dan
provitamin A (karotenoid/karoten dan senyawa sejenis) yang merupakan
prekursor vitamin A (Dewoto, 2007). Dalam Labu Siam itu sendiri,
vitamin A yang terkandung didapat dalam bentuk karoten (Mélo, et al.,
2006)
Vitamin A berperan dalam melindungi endotelium dan juga
merupakan antioksidan yang dapat melindungi peroksidasi lemak.
Vitamin A dapat melindungi kejadian agregasi platelet, mempengaruhi
transpor oksigen dan penggunaannya, meningkatkan HDL dan
meningkatkan kemampuan asam nikotinat dalam menurunkan lipid
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
darah. Vitamin A dapat berperan dalam pencegahan primer terhadap
kelainan metabolisme yang merupakan penyebab hiperlipoproteinemia,
dan dapat pula berperan dalam pencegahan sekunder utuk mengurangi
lipid darah yang dapat menyebabkan risiko aterogenesis (Herman,
1991).
e. Vitamin C
Vitamin C atau asam askorbat mula-mula dikenal sebagai asam
heksuronat dengan rumus C6H8O6. Vitamin C bekerja sebagai suatu
koenzim dan pada keadaan tertentu merupakan reduktor dan antioksidan
(Dewoto, 2007).
Dalam metabolisme kolesterol, vitamin C berperan meningkatkan
laju ekskresi kolesterol dalam bentuk asam empedu, meningkatkan
kadar HDL, dan berfungsi sebagai pencahar sehingga meningkatkan
pembuangan kotoran. Pada gilirannya, hal ini akan menurunkan
penyerapan kembali asam empedu dan pengubahannya menjadi
kolesterol (Sotyaningtyas, 2007).
Vitamin C dapat menurunkan kolesterol dan trigliserida pada
sejumlah orang yang biasanya memiliki kadar kolesterol dan trigliserida
tinggi. Namun, sayangnya hal itu tidak berlaku pada orang dengan kadar
kolesterol dan trigliserida normal. Jadi, rupanya vitamin C berperan
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
menjaga keseimbangan (homeostasis) di dalam tubuh (Sotyaningtyas,
2007).
f. Flavonoid, Polifenol, dan Proantosianidin
Senyawa flavonoid adalah suatu kelompok senyawa fenol yang
terbesar yang ditemukan di alam, serta berpotensi sebagai antioksidan
dan mempunyai bioaktivitas sebagai obat (Rohyami, 2008).
Kemampuan flavonoid sebagai antioksidan tergantung pada struktur
molekulnya. Posisi rantai hidroksil pada flavonoid penting untuk
perannya sebagai antioksidan dan untuk mengatasi aktivitas radikal
bebas (Buhler and Cristobal, 2000). Berdasarkan penelitian, flavonoid
dapat menangkap radikal bebas dan dapat mencegah proses peroksidasi
lipid di mikrosom dan liposom (Peng and Kuo, 2003).
Fenol adalah senyawa dengan suatu gugus OH yang terikat pada
cincin aromatik. Senyawa fenolik dalam tumbuhan dapat berupa fenol
sederhana, antraquinon, asam fenolat, kumarin, lignin, tanin, dan
proantosianidin (Rohyami, 2008; Pratimasari, 2009). Senyawa polifenol
dan proantosianidin memiliki aktivitas antioksidan yang berfungsi dalam
menangkal radikal bebas serta mencegah proses oksidasi LDL (Mélo, et
al., 2006). Polifenol memiliki andil dalam menurunkan sekresi
lipoprotein yang terdapat di hepar dan usus. Polifenol yang terdapat
mengurangi proses esterifikasi kolesterol sehingga terjadi penurunan
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
kadar ester kolesterol, dimana ester kolesterol merupakan komponen
pembentuk utama kilomikron dan VLDL. Efek lain dari polifenol adalah
menghambat sintesis Apo B-48 dan Apo B-100 yang disintesis di dalam
enterosit dan hepar. Kadar Apo B-48 dan Apo B-100 yang menurun
menyebabkan pembentukkan kilomikron, VLDL, IDL, dan LDL
terganggu sehingga kadar trigliserida darah juga menurun (Vidal, et al.,
2007).
Proantosianidin menghambat absorbsi kolesterol melalui
penghambatan pembentukan misel. Proantosianidin menurunkan
aktivitas enzim HMG-KoA reduktase sehingga proses produksi VLDL
di hati turun dan aliran VLDL yang keluar dari hati berkurang.
Akibatnya, produksi kolesterol total, LDL, trigliserida plasma menurun
(Yoko, et al., 2005).
g. Serat Larut (Pektin) dan Serat Tidak Larut
Serat adalah bagian dari tanaman yang tidak dapat diserap oleh
tubuh. Serat makanan, terutama yang terdiri dari selulosa, hemiselulosa,
dan lignin sebagian besar tidak dapat dihancurkan oleh enzim-enzim dan
bakteri di dalam traktus digestivus. Di samping menyerap air, serat
makanan juga menyerap asam empedu sehingga proses pencernaan
lemak akan terhambat. Serat makanan dapat berikatan dengan garam
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
asam lemak di dalam usus halus, dan kemudian dilepaskan untuk kerja
bakteri di dalam kolon (Kusharto, 2006).
Pektin merupakan serat makanan yang dapat larut, yang diketahui
dapat mencegah hiperkolesterol, kanker usus besar, dan diabetes. Efek
pektin yang terpenting adalah penurunan absorbsi asam-asam empedu
(Agustini, et al., 2006). Pektin menstimulasi ekskresi lipid melalui
pembuangan kolesterol dan koprostanol, peningkatan oksidasi
kolesterol melalui efek induksi pada enzim 7α-hidroksilase dan
mengurangi absorbsi lemak di dalam usus (Aprikian, et al., 2003).
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
B. Kerangka berpikir
Menurunkan kadar
kolesterol total darah
Meningkatkan ekskresi kolesterol
Labu Siam
Saponin
Senyawa saponin berikatan dengan garam
empedu
Senyawa saponin berikatan kuat dengan
senyawa 3b-hidroksisteroid
Menurunkan absorbsi kolesterol
Niasin
Alkaloid
Menurunkan aliran asam lemak dari jaringan adiposa
Menghambat aktivitas enzim lipase
Vitamin C Menurunkan absorbsi kembali asam empedu
Menaikkan kadar HDL
Vitamin A Meningkatkan
kemampuan niasin dalam menurunkan lipid darah
Mencegah peroksidasi lipid di mikrosom
Flavonoid
Proantosianidin Menurunkan aktivitas
enzim HMG-KoA reduktase
Berikatan dengan asam empedu
Menurunkan absorbsi kolesterol
Polifenol
Serat
Menurunkan sintesis Apo B-48 dan Apo B-100
Menurunkan VLDL,LDL, dan
kilomikron
Berikatan dengan asam lemak di dalam usus
Menyerap asam empedu
Pektin
Faktor lain yang dapat menghambat penurunan kadar kolesterol : stress, penyakit hati, makanan, hormon, genetik, jenis kelamin, varietas Labu Siam
Faktor lain yang dapat memicu penurunan kadar kolesterol : psikologis, makanan, genetik, jenis kelamin, varietas Labu Siam
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
Keterangan Gambar:
: kandungan zat di dalam tubuh
: menimbulkan efek
Beberapa kandungan zat di dalam Labu Siam bekerja di dalam tubuh dengan
mekanisme tertentu. Misalnya pada saponin dan serat, kedua zat tersebut bekerja
dengan cara menurunkan absorbsi kolesterol dan meningkatan ekskresi kolesterol.
Sedangkan niasin menurunkan aliran asam lemak dari jaringan adiposa. Dari
keseluruhan mekanisme tersebut menyebabkan penurunan kadar kolesterol total
darah.
C. Hipotesis
1. Pemberian ekstrak Labu Siam (Sechium edule (Jacq.) Sw.) dapat mencegah
kenaikan kadar kolesterol total tikus putih (Rattus norvegicus) yang diberi
pakan hiperkolesterolemik.
2. Ada perbedaan pengaruh pemberian beberapa dosis ekstrak Labu Siam
(Sechium edule (Jacq.) Sw.) terhadap kadar kolesterol total tikus putih (Rattus
norvegicus) yang diberi pakan hiperkolesterolemik.
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
BAB III
METODE PENELITIAN
A. Jenis Penelitian
Penelitian ini bersifat experimental laboratorium dengan menggunakan
rancangan penelitian pre and post test control group design.
B. Lokasi Penelitian
Penelitian dilakukan di Laboratorium Biokimia Fakultas Kedokteran
Universitas Sebelas Maret Surakarta.
C. Subjek dan Besar Penelitian
1. Tikus putih dengan kriteria galur Wistar, jantan, berumur kira-kira 3 bulan
dengan berat badan kira-kira 200 gram. Tikus putih diperoleh dari
Laboratorium Penelitian dan Pengujian Terpadu (LPPT) Universitas
Gadjah Mada Yogyakarta.
2. Besarnya sampel ditentukan dengan menggunakan Rumus Federer, dengan
perhitungan sebagai berikut:
Rumus Federer : (n-1) (t-1) > 15
n : besar sampel
t : jumlah kelompok
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
Jadi besarnya sampel yang diperlukan, menurut rumus Federer:
(n-1) (t-1) > 15 ; t = 4
(n-1) (4-1) > 15
3n-3 > 18
n > 6
Jumlah sampel harus lebih besar dari 6 ekor tikus tiap kelompok.
Dalam penelitian ini, setiap kelompok terdiri dari 7 ekor tikus, sehingga
besarnya sampel menjadi 28 ekor tikus.
D. Teknik Sampling
Pengambilan sampel sebanyak 28 ekor tikus jantan dilakukan secara
purposive random sampling, dengan kriteria tikus jantan, galur Wistar, sehat
dan mempunyai aktivitas normal, tidak kawin, berumur 3 bulan dengan berat
badan kira-kira 200 gram. Dua puluh delapan ekor tikus putih tersebut dibagi
menjadi 4 kelompok dengan cara random sampling, tiap-tiap kelompok terdiri
atas 7 ekor tikus putih. Kelompok I sebagai kelompok kontrol sedangan
kelompok II, III dan IV sebagai kelompok perlakuan.
E. Identifikasi Variabel Penelitian
1. Variabel bebas : Ekstrak Labu Siam.
2. Variabel terikat : Kadar kolesterol total darah tikus putih
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
3. Variabel luar
a. Dapat dikendalikan : Makanan, minuman, genetik tikus
putih, jenis kelamin tikus putih,
varietas Labu Siam.
b. Tidak dapat dikendalikan : Kondisi psikologis (stress), hormon,
penyakit hati.
F. Definisi Operasional Variabel
1. Variabel Bebas
Ekstrak Labu Siam
Ekstrak Labu Siam adalah hasil ekstraksi buah labu yang menggunakan
beberapa metode pada prosesnya. Dalam penelitian ini, digunakan metode
perkolasi. Metode perkolasi adalah penyarian zat aktif yang dilakukan
dengan cara serbuk simplisia, yaitu bahan baku alamiah setelah
dikeringkan, yang dimaserasi selama 3 jam, kemudian simplisia
dipindahkan ke dalam bejana silinder yang bagian bawahnya diberi sekat
berpori, cairan penyari dialirkan dari atas ke bawah melalui simplisia
tersebut, cairan penyari akan melarutkan zat aktif dalam sel-sel simplisia
yang dilalui sampai keadaan jenuh (Utami, 2009). Ekstrak kasar hasil
perkolasi yang berbentuk semisolid diencerkan dalam air dengan dosis
yang berbeda-beda. Pada penelitian ini digunakan 3 dosis ekstrak yaitu 80
mg/200gr BB (dosis terapi), 160 mg/200gr BB (2 kali dosis terapi), dan
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
240 mg/200gr BB (3 kali dosis terapi) untuk diuji pengaruhnya pada kadar
kolesterol total. Ekstrak Labu Siam diperoleh dari Laboratorium Penelitian
dan Pengujian Terpadu (LPPT) Universitas Gadjah Mada Yogyakarta
sehingga dapat dikendalikan.
Skala data: ordinal.
2. Variabel Terikat
Kadar Kolesterol Total Darah
Yang dimaksud dengan kadar kolesterol total darah adalah kadar
kolesterol total darah hewan uji yang diukur dengan alat spectofotometry,
setelah subjek dipuasakan selama 12 jam dengan satuan mg/dl. Pengukuran
kadar kolesterol total dapat dilakukan dengan mengambil darah tikus putih
melalui sinus orbitalis dengan pipet mikro hematokrit, lalu darah
ditampung dalam tabung sentrifuge. Setelah itu, diperiksa kadar kolesterol
totalnya di laboratorium klinik.
Skala data: rasio.
3. Variabel Luar
a. Dapat Dikendalikan
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
1) Makanan
Makanan merupakan nutrisi yang diperlukan makhluk hidup
untuk mempertahankan metabolisme hidupnya. Makanan dapat
mempengaruhi kadar kolesterol total tikus. Cara pengendaliannya
adalah pengaturan pakan tikus. Selama masa adaptasi 7 hari dan
perlakuan selama 21 hari setelah masa adaptasi, semua kelompok tikus
diberikan makanan standar yaitu pelet standar AD-2.
2) Genetik Tikus Putih
Faktor genetik adalah riwayat keturunan sifat fenotipe dan genotipe
suatu organisme (Aji, 2005). Faktor genetik mempunyai peran dalam
menentukan kadar kolesterol dan tidak dapat dikendalikan secara
mutlak. Hal ini diatasi dengan pemilihan subjek penelitian yang
berasal dari galur yang sama (galur Wistar) dan menggunakan sistem
randomisasi sehingga diharapkan distribusi dari faktor genetik ini
merata pada tiap kelompok penelitian.
3) Jenis Kelamin Tikus Putih
Jenis kelamin merupakan perbedaan sistem reproduksi pada
makhluk hidup. Penelitian ini menggunakan tikus putih (Rattus
norvegicus) jantan supaya sampel bersifat homogen serta menghindari
adanya pengaruh hormon esterogen. Hormon esterogen pada tikus
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
betina dapat berpengaruh terhadap penurunan kadar kolesterol total
darah (Shin, et al., 2005).
4) Varietas Labu Siam
Varietas merupakan keanekaragaman hayati pada organisme.
Varietas dapat mempengaruhi kadar kandungan zat aktif dari Labu
Siam. Varietas Labu Siam dapat dikendalikan dengan cara
menggunakan Labu Siam yang diambil dari tempat yang sama, yaitu
LPPT Universitas Gadjah Mada Yogyakarta.
b. Tidak Dapat Dikendalikan
1) Kondisi psikologis
Kondisi psikologis merupakan status mental yang dimiliki
makhluk hidup. Kondisi psikologi tikus dapat dipengaruhi oleh
perlakuan yang berulang kali. Keadaan stress memacu produksi
hormon epinefrin, norepinefrin, kortikotropin dan glukokortikoid
yang akan mengaktifkan hormon peka lipase trigliserid yang
memecah trigliserid dan meningkatkan asam lemak bebas (Guyton
and Hall, 2007). Pengaruh ini dapat dikurangi dengan adanya waktu
adaptasi sebelum percobaan dan pemisahan subjek penelitian dalam
kandang yang terpisah.
2) Hormon
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
Hormon merupakan zat kimiawi dalam darah yang bekerja pada
target organ tertentu. Sistem hormon berpengaruh pada pengaturan
kadar kolesterol darah. Hormon yang berpengaruh terhadap
metabolisme kolesterol salah satunya adalah hormon tiroid. Hormon
sensitif lipase akan diaktifkan oleh hormon tiroid sehingga proses
katabolisme lipid dalam tubuh tikus tinggi (Mayes, 2009). Induksi
hiperkolesterol dengan pakan hiperkolesterolemik dipermudah
dengan menurunkan aktivitas hormon tiroid tikus putih dengan
menggunakan propiltiourasil. Propiltiourasil (PTU) adalah zat kimia
yang dapat menekan aktivitas kelenjar tiroid (Marina, 1994).
Hotimah dalam Hardiningsih dan Nurhidayat (2006) menyebutkan
bahwa pemberian propiltiourasil (PTU) ke dalam ransum tikus dapat
meningkatkan konsentrasi kolesterol serum tikus. PTU diberikan
dengan dosis 0,5 mg/kg BB (Hardiningsih dan Nurhidayat, 2006),
setara dengan 0,1 mg/200gr BB. Pengendalian hormon tiroid
dilakukan dengan pemberian PTU, namun tidak sepenuhnya karena
tidak dilakukan pengukuran kadarnya, apakah status eutiroid sudah
tercapai atau belum.
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
3) Penyakit hati
Penyakit hati adalah gangguan pada sistem metabolisme pada
hepar yang dapat menimbulkan kelainan pada kadar kolesterol
karena hepar merupakan tempat metabolisme kolesterol. Penyakit
hati pada tikus merupakan variabel yang tidak sepenuhnya dapat
dikendalikan karena sulitnya pendeteksian dini dan membutuhkan
pemeriksaan yang membutuhkan biaya besar. Namun, untuk
mengurangi pengaruh faktor penyakit hati dapat dipilih tikus yang
sehat dan aktif.
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
28 ekor tikus putih sesuai dengan kriteria penelitian
Dipuasakan 12 jam
Post test kadar kolesterol darah
Post test kadar kolesterol darah
Post test kadar kolesterol darah
Uji Statistik
Dipuasakan 12 jam Dipuasakan 12 jam Dipuasakan 12 jam
Dipuasakan 12 jam Dipuasakan 12 jam Dipuasakan 12 jam
G. Rancangan Penelitian
Rancangan penelitian pre and post test control group design.
Dikelompokkan menjadi empat kelompok dengan cara purposive random sampling
Kel. I Kel. II Kel. III Kel. IV 7 ekor tikus 7 ekor tikus 7 ekor tikus 7 ekor tikus diadaptasikan 7 hari diadaptasikan 7 hari diadaptasikan 7 hari diadaptasikan 7 hari Induksi Induksi Induksi Induksi
hiperkolesterolemik+PTU hiperkolesterolemik+PTU hiperkolesterolemik+PTU hiperkolesterolemik+PTU 7 hari 7 hari 7 hari 7 hari
Dipuasakan 12 jam
Pre test Pre test Pre test Pre test
kadar kolesterol darah kadar kolesterol darah kadar kolesterol darah kadar kolesterol darah
Kel.I Kel.II Kel.III Kel.IV Hiperkolesterolemik Hiperkolesterolemik Hiperkolesterolemik Hiperkolesterolemi +PTU dan diberi ekstrak dan diberi ekstrak dan diberi ekstrak
Labu Siam Labu Siam Labu Siam Diberi perlakuan 80mg/200gBB+PTU 160mg/200gBB+PTU 240mg/200gBB+PTU selama 21 hari Diberi perlakuan Diberi perlakuan Diberi perlakuan selama 21 hari selama 21 hari selama 21 hari
Post test kadar kolesterol darah
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
H. Alat yang Digunakan
1. Kandang hewan percobaan beserta kelengkapan pemberian pakan dan
minum
2. Gelas ukur
3. Pipet tetes
4. Pipet volume
5. Cawan petri
6. Timbangan
7. Tabung centrifuge
8. Centrifuge
9. Pipa kapiler
10. Spuit needle feeding
11. Rak tabung reaksi
I. Bahan Penelitian
1. Makanan dan minuman hewan uji (pelet dan air putih)
2.Pakan hiperkolesterolemik (serbuk kolesterol, kuning telur itik, minyak
babi, minyak goreng)
3. Ekstrak Labu Siam
4. Propiltiourasil (PTU) 0,1 mg
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
J. Jalannya Penelitian
1. Tikus putih sebanyak 28 ekor, dikelompokkan dalam empat kelompok
secara purposive random sampling, masing-masing kelompok terdiri dari 7
ekor tikus lalu dimasukkan ke dalam kandang, diadaptasikan dengan
lingkungan Laboratorium Biokimia Fakultas Kedokteran UNS selama tujuh
hari, diberi makan pelet dan air matang.
2. Setelah diadaptasikan selama seminggu, pada hari ke-8 semua tikus
diinduksi pakan hiperkolesterolemik berupa campuran homogen yang
mengandung 5 ml kuning telur itik, 10 ml minyak babi, 1 ml minyak kelapa,
dan 0,1 gram serbuk kolesterol untuk menaikkan kolesterolnya sampai hari
ke-14.
3. Pada hari ke-14 semua subyek diambil darah untuk pemeriksaan kadar
kolesterol total darah pre test. Semua tikus dipuasakan selama 12 jam
sebelum diambil darahnya. Pengambilan darah dilakukan dengan cara
menusukkan pipa kapiler di daerah saccus medianus orbitalis kemudian
darah akan mengalir di dalam pipa kapiler dan dimasukkan ke dalam tabung
centrifuge. Darah dipusingkan selama 10-15 menit dengan kecepatan 3000
rpm sehingga didapatkan serum darah untuk diperiksa kadar kolesterol total
pre test. Perbedaan rerata kadar kolesterol total pre test dianalisis
menggunakan uji ANOVA.
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
4. Pada hari ke-15, keempat kelompok diberikan perlakuan sebagai berikut:
Kelompok I : diinduksi pakan hiperkolesterolemik 2,5 ml dan
minuman berupa air matang yang dicampur PTU 0,1
mg dalam 0,5 cc air secara oral dengan menggunakan
sonde lambung sebanyak dua kali sehari (pukul 07.00
dan 15.00) sampai hari ke-35.
Kelompok II : diinduksi pakan hiperkolesterolemik 2,5 ml dan
minuman berupa air matang yang dicampur PTU 0,1
mg dalam 0,5 cc air secara oral dengan menggunakan
sonde lambung sebanyak dua kali sehari serta
ditambah ekstrak Labu Siam 80 mg/200gr BB juga
dengan menggunakan sonde lambung, dua kali sehari
(pukul 07.00 dan 15.00) sampai hari ke-35.
Kelompok III : diinduksi pakan hiperkolesterolemik 2,5 ml dan
minuman berupa air matang yang dicampur PTU 0,1
mg dalam 0,5 cc secara oral dengan menggunakan
sonde lambung sebanyak dua kali sehari serta
ditambah ekstrak Labu Siam 160 mg/200gr BB juga
dengan menggunakan sonde lambung, dua kali sehari
(pukul 07.00 dan 15.00) sampai hari ke-35.
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
Kelompok IV : diinduksi pakan hiperkolesterolemik 2,5 ml dan
minuman berupa air matang yang dicampur PTU 0,1
mg secara oral dengan menggunakan sonde lambung
sebanyak dua kali sehari serta ditambah ekstrak Labu
Siam 240 mg/200gr BB juga dengan menggunakan
sonde lambung, dua kali sehari (pukul 07.00 dan
15.00) sampai hari ke-35.
5. Setelah perlakuan, semua subyek penelitian yang telah dipuasakan 12 jam
sebelumnya, diambil darahnya untuk pemeriksaan kadar kolesterol total
darah post test. Pengambilan darah dilakukan dengan cara menusukkan
pipa kapiler di daerah saccus medianus orbitalis kemudian darah akan
mengalir di dalam pipa kapiler dan dimasukkan ke dalam tabung
centrifuge. Setelah itu, diperiksa kadar kolesterol totalnya dengan
menggunakan alat spectophotometer.
6. Membandingkan kadar kolesterol total tiap kelompok dan mengolah data
hasil pemeriksaan kadar kolesterol total tikus putih.
K. Teknik Analisis Data
Perbedaan rerata keempat kelompok dianalisis dengan ANOVA test
menggunakan software SPSS for Windows versi 16. Data yang diolah
menggunakan ANOVA test harus memenuhi syarat yaitu memiliki sebaran
yang normal dan kesamaan varian, yang dapat diperiksa dengan uji normalitas
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
dan uji homogenitas varian. Jika terdapat perbedaan yang bermakna
dilanjutkan dengan uji komparatif Post Hoc dengan derajat kemaknaan a =
0,05.
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
BAB IV
HASIL PENELITIAN
A. Hasil Penelitian
Penelitian ini menggunakan sampel tikus putih (Rattus norvegicus) yang
dibagi secara acak menjadi 4 kelompok perlakuan, masing-masing kelompok
terdiri dari 7 ekor sampel tikus. Semua sampel diadaptasikan selama tujuh hari
dan untuk mencapai kondisi hiperkolesterolemia, pada hari ke-8 semua tikus
diinduksi pakan hiperkolesterolemik sampai hari ke-14. Pada hari ke-14 semua
sampel diperiksa kadar kolesterol total pre test dengan hasil sebagai berikut:
Tabel 4.1. Data hasil pengukuran kadar kolesterol total tikus putih sebelum diberi perlakuan
Kelompok N Rerata kadar kolesterol total ± SB (mg/dl)
Kelompok I 7 107,89 ± 45,54
Kelompok II 7 83,10 ± 10,74
Kelompok III 7 87,81 ± 12,10
Kelompok IV 7 80,39 ± 16,36
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
Perlakuan yang diberikan adalah pada kelompok I sebagai kontrol, kelompok
II diberi pakan hiperkolesterolemik dan ekstrak labu siam dosis 80 mg/200gr BB,
kelompok III diberi pakan hiperkolesterolemik dan ekstrak labu siam dosis 160
mg/200gr BB, serta kelompok IV diberi pakan hiperkolesterolemik dan ekstrak
labu siam dosis 240 mg/200gr BB. Pada hari ke-36, semua sampel diperiksa kadar
kolesterol total post test. Hasilnya sebagai berikut:
Tabel 4.2. Data hasil pengukuran kadar kolesterol total tikus putih setelah diberi perlakuan
Kelompok N Rerata kadar kolesterol total postest ± SB
(mg/dl)
Kelompok I 7 107,89 ± 45,54
Kelompok II 7 83,10 ± 10,74
Kelompok III 7 87,81 ± 12,10
Kelompok IV 7 80,39 ± 16,36
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
Bila hasil postest dan pretest kita analisis, maka hasilnya adalah sebagai
berikut:
Tabel 4.3. Data Hasil Pengukuran Kadar Kolesterol Total Tikus Putih Sebelum dan
Setelah Diberi Perlakuan
Grafik 4.1. Histogram Rerata Kadar Kolesterol Total Tikus Putih Sebelum dan Setelah Diberi Perlakuan (mg/dl)
Pada kelompok I dan III terdapat penurunan rerata kadar kolesterol total.
Sedangkan kelompok II dan IV mengalami kenaikan rerata kadar kolesterol total.
Kelompok N Rerata kadar kolesterol total sebelum perlakuan + SB (mg/dl)
Rerata kadar kolesterol total setelah perlakuan ± SB (mg/dl)
Kelompok I 7 107,89 ± 45,54 88,59 ± 27,51
Kelompok II 7 83,10 ± 10,74 91,49 ± 33,23
Kelompok III 7 87,81 ± 12,10 71,67 ± 13,58
Kelompok IV 7 80,39 ± 16,36 114,77 ± 75,80
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
Dari data rerata kadar kolesterol total sebelum dan setelah perlakuan, dapat diperoleh
data selisih kadar kolesterol total, yaitu sebagai berikut:
Tabel 4.4. Data Hasil Pengukuran Selisih Kadar Kolesterol Total Tikus Putih
Grafik 4.2. Histogram Rerata Selisih Kadar Kolesterol Total Tikus Putih (mg/dl)
Dari hasil uji normalitas Saphiro-Wilk terhadap rerata selisih kadar kolesterol
total pada kelompok I sampai dengan kelompok IV, didapatkan hasil sebagai berikut :
Kelompok N Rerata kadar
kolesterol total sebelum perlakuan
+ SB (mg/dl)
Rerata kadar kolesterol total
setelah perlakuan ± SB (mg/dl)
Rerata selisih kadar kolesterol
total + SB (mg/dl)
Kelompok I 7 107,89 ± 45,54 88,59 ± 27,51 -19,30 + 19,74
Kelompok II 7 83,10 ± 10,74 91,49 ± 33,23 8,39 + 31,09
Kelompok III 7 87,81 ± 12,10 71,67 ± 13,58 -16,14 + 16,28
Kelompok IV 7 80,39 ± 16,36 114,77 ± 75,80 47,13 + 52,47
-40
-20
0
20
40
60
Kontrol Ekstrak 80mg/200gBB
Ekstrak 160mg/200gBB
Ekstrak 240mg/200gBB
Series 1
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
Tabel 4.5. Hasil Uji Normalitas Saphiro-Wilk terhadap rerata selisih kadar kolesterol total
Dari hasil di atas dapat diketahui bahwa data kelompok I, II, dan III tidak
memenuhi syarat untuk dapat dianalisis secara parametrik. Untuk itu, dalam langkah
selanjutnya akan digunakan uji non parametrik, yaitu Kruskal-Wallis (lampiran 4)
untuk menganalisis bahwa di antara kelompok-kelompok tersebut paling sedikit
terdapat satu kelompok yang berbeda kadar kolesterol dimana hasil p=0,006 (p<0,05)
sehingga dapat disimpulkan bahwa terdapat perbedaan rerata selisih kadar kolesterol
total sebelum dan setelah perlakuan yang bermakna. Selanjutnya digunakan uji
Mann-Whitney untuk mengetahui antarkelompok manakah yang memiliki perbedaan
rerata selisih kadar kolesterol total sebelum dan setelah perlakuan yang signifikan.
Dari hasil uji Mann-Whitney (lampiran 5), didapatkan hasil sebagai berikut:
Kelompok Nilai P Keterangan
distribusi data
Kelompok I 0.025 Tidak normal
Kelompok II 0.002 Tidak normal
Kelompok III 0.021 Tidak normal
Kelompok IV 0.653 Normal
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
Tabel 4.6. Nilai Signifikansi Rerata Selisih Kadar Kolesterol Total Antarkelompok pada Uji Mann-Whitney
Dari tabel di atas, dapat dilihat bahwa terdapat perbedaan rerata selisih
kolesterol total yang signifikan (p<0,05) pada kelompok I dengan kelompok II,
kelompok I dengan kelompok IV, kelompok II dengan kelompok III, dan kelompok
III dengan kelompok IV.
Kelompok Kelompok Nilai p Keterangan
I II 0.013 signifikan
III 0.565 tidak signifikan
IV 0.013 signifikan
II I 0.013 signifikan
III 0.035 signifikan
IV 0.142 tidak signifikan
III I 0.565 tidak signifikan
II 0.035 signifikan
IV 0.013 signifikan
IV I 0.013 signifikan
II 0.142 tidak signifikan
III 0.013 signifikan
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
BAB V
PEMBAHASAN
Dari tabel Tabel 4.4 yang berisi data hasil pengukuran selisih kadar
kolesterol total tikus putih, dapat dilihat bahwa terdapat penurunan kadar kolesterol
total pada kelompok I (kontrol) yaitu sebesar -19,30 mg/dl. Hal yang sama juga
terlihat pada kelompok III (kelompok perlakuan dengan dosis ekstrak 160 mg/200gr
BB). Pada kelompok III terjadi penurunan kadar kolesterol total sebesar 16,14 mg/dl.
Sementara pada kelompok II dan IV terjadi peningkatan kadar kolesterol total. Pada
kelompok I, tidak seharusnya mengalami penurunan kadar kolesterol total yang
berarti karena kelompok kontrol hanya diinduksi pakan hiperkolesterolemik tanpa
diberi ekstrak Labu Siam sehingga diharapkan kelompok kontrol mengalami
peningkatan kadar kolesterol total. Akan tetapi pada penelitian ini ternyata terjadi
penurunan. Hal ini mungkin disebabkan oleh pakan hiperkolesterolemik yang tidak
adekuat untuk membuat kondisi hiperkolesterolemia. Penurunan kadar kolesterol
total pada kelompok III memiliki kemungkinan bahwa dosis pada kelompok III yaitu
160 mg/200gr BB adalah dosis paling optimal dibanding dosis 80 mg/200gr BB dan
dosis 240 mg/200gr BB.
Sedangkan peningkatan kadar kolesterol total pada kelompok II dan IV dapat
disebabkan oleh faktor pemberian dosis yang tidak tepat. Selain itu, ekstrak
sebaiknya diberikan satu jam setelah pemberian pakan (Agustini, et al., 2006b).
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
Tetapi pada penelitian, ekstrak diberikan 15 menit setelah pemberian pakan
dimana hal ini dapat mengurangi fungsi penyerapan ekstrak secara optimal di dalam
tubuh. Selain itu, wadah penyimpanan juga mempengaruhi kualitas ekstrak. Pada
penelitian, ekstrak disimpan dalam tabung plastik bening yang ditutupi dengan plastik
dan karet. Hal-hal tersebut memungkinkan terjadinya kerusakan kandungan zat aktif
yang terdapat dalam ekstrak sehingga memiliki efek toksik.
Selanjutnya dari tabel 4.6 di atas dapat dilihat bahwa terdapat perbedaan
yang signifikan pada kelompok kontrol dengan kelompok II (dosis 80 mg/200gr BB),
kelompok kontrol dengan kelompok IV (dosis 240 mg/200gr BB), kelompok II
(dosis 80 mg/200gr BB) dengan kelompok III (dosis 160 mg/200gr BB), dan
kelompok III (dosis 160 mg/200gr BB) dengan kelompok IV (dosis 240 mg/200gr
BB). Namun karena kelompok kontrol telah mengalami penurunan kadar kolesterol
total yang seharusnya tidak terjadi maka perbedaan yang signifikan pada kelompok-
kelompok tersebut menjadi tidak bermakna. Selain itu, dapat diketahui bahwa tidak
setiap pemberian dan kenaikan dosis ekstrak Labu Siam diikuti dengan penurunan
kadar kolesterol total. Hasil tersebut tidak sesuai dengan hipotesis awal bahwa
pemberian ekstrak Labu Siam dapat menurunkan kadar kolesterol total tikus putih
yang diberi pakan hiperkolesterolemik. Marlina dalam Agustini et al. (2006a) juga
menyebutkan bahwa Labu Siam dapat menurunkan kadar kolesterol total dan
trigliserida darah. Hasil penelitian tersebut berbeda dengan hasil penelitian ini di
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
mana ekstrak Labu Siam tidak dapat menurunkan kadar kolesterol total. Ada
beberapa faktor yang dapat mempengaruhi hal tersebut, antara lain:
A. Pakan Hiperkolesterolemik
Seperti yang sudah disebutkan sebelumnya bahwa pakan
hiperkolesterolemik dan lama pemberian juga berpengaruh dalam peningkatan
kadar hiperkolesterolemia sehingga perlu diteliti, apakah sudah sesuai untuk
mencapai kondisi hiperkolesterolemia bagi tikus putih.
B. Teknik Pemberian Ekstrak
Langkah-langkah pemberian ekstrak juga perlu diperhatikan, seperti
interval waktunya, antara ekstrak dengan pemberian oral lainnya. Ekstrak
sebaiknya diberikan satu jam setelah pemberian pakan (Agustini, et al.,
2006b).
C. Kualitas Ekstrak
Kualitas kandungan ekstrak Labu Siam yang seharusnya diperhatikan
pada saat pemberian ekstrak agar diketahui apakah masih dapat digunakan.
Sebaiknya ekstrak diberikan dalam keadaan segar agar dapat berfungsi secara
optimal. Pada penelitian ini dilakukan pengenceran ekstrak Labu Siam setiap
dua hari. Selanjutnya, wadah penyimpanan juga mempengaruhi kualitas
ekstrak. Ekstrak sebaiknya disimpan dalam botol gelap steril yang kedap
udara (Chevallier, 1996).
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
D. Kondisi Psikologis dan Lingkungan
Perlakuan sonde lambung dan pengambilan darah yang berulang
sangat rentan menyebabkan gangguan kondisi psikologis seperti stres. Selain
itu, kondisi kandang dan lingkungan tikus putih kurang ideal, baik dari segi
sanitasi, kelembapan dan suhunya. Kondisi ini juga dapat mempengaruhi
metabolisme tubuh dari tikus putih.
E. Penimbangan Berat Badan Tikus Putih
Berat badan seharusnya ditimbang secara berkala agar dapat dilakukan
penyesuaian dosis ekstrak Labu Siam (Hartanto, 2008). Pada penelitian ini
tidak dilakukan penimbangan berat badan tikus putih.
F. Efek Farmakologi
Zat aktif pada tanaman obat umunya dalam bentuk metabolit sekunder,
sedangkan satu tanaman bisa menghasilkan beberapa metabolit sekunder,
sehingga memungkinkan tanaman tersebut memiliki lebih dari satu efek
farmakologi. Efek tersebut adakalanya saling mendukung, tetapi ada juga
yang seakan-akan saling berlawanan atau kontradiksi (Katno et al., 2003).
Kemungkinan hanya salah satu zat aktif yang mendominasi metabolisme
tubuh dapat terjadi dikarenakan dosis ektrak yang tidak tepat.
G. Standar Deviasi
Standar Deviasi juga turut berperan dalam pengaruh pemberian
ekstrak Labu Siam terhadap kadar kolesterol total. Simpangan data yang
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
terlalu besar menyebabkan margin of error turut menjadi besar sehingga
semakin tidak presisi.
H. Jumlah Sampel
Pada penelitian ini jumlah sampel terlalu sedikit sehingga dapat
mengurangi kekuatan dari penelitian ini.
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id
commit to user
BAB VI
SIMPULAN DAN SARAN
A. Simpulan
1. Pemberian ekstrak labu siam (Sechium edule (Jacq.) Sw.) tidak dapat
mencegah kenaikan kadar kolesterol total tikus putih (Rattus norvegicus) yang
diberi pakan hiperkolesterolemik.
2. Tidak ada perbedaan pengaruh pemberian beberapa dosis ekstrak labu siam
(Sechium edule (Jacq.) Sw.) yang signifikan terhadap kadar kolesterol total
tikus putih (Rattus norvegicus) yang diberi pakan hiperkolesterolemik.
B. Saran
Pada penelitian lanjutan, perlu diperhatikan:
1. Kualitas kandungan ekstrak labu siam agar dapat memberikan efek secara
optimal baik dari waktu maupun cara penyimpanan.
2. Kandungan pakan dan lama pemberian pakan hiperkolesterolemik agar
tercapai kondisi hiperkolesterolemia.
3. Penimbangan berat badan secara berkala sehingga penyesuaian dosis ekstrak
dapat dilakukan.
4. Standar Deviasi dan jumlah sampel yang sesuai.
5. Teknik, metode dan fasilitas penunjang yang lebih baik.