Immunoassay System HCV Ab PLUS 34330 · Pobrinite se da ostaci fibrina i ćelijske materije budu uklonjeni pre analize. Poštujte preporuke proizvođača epruveta za skupljanje krvi

ACCESS®

Immunoassay System

HCV Ab PLUS 34330 2 x 50

Za kvalitativno otkrivanje anti-HCV antitela u ljudskom serumu i plazmi pomoću Access imunotest sistema.

ACCESS®

Immunoassay System

HCV Ab PLUS CALIBRATORS 34335

Kalibratori Access HCV Ab PLUS CALIBRATORS su namenjeni za kalibraciju Access HCV Ab PLUS testova uz pomoć Access imunotest sistema.

ACCESS®

Immunoassay System

HCV Ab PLUS QC 34339

Za praćenje performansi sistema Access HCV Ab PLUS testa.

B74233D - [SR] - 2017/01

B74233D Access HCV Ab PLUS 2/20

Sadržaj

Access® HCV Ab PLUS 3

1 Namena ......................................................................................................................... 4

2 Kratak pregled i objašnjenje testa .............................................................................. 4

3 Principi postupka ......................................................................................................... 4

4 Informacije o proizvodu .............................................................................................. 5 4.1 Opis ..................................................................................................................................................... 5 4.2 Uslovi za skladištenje i rukovanje ....................................................................................................... 5

5 Upozorenja i mere predostrožnosti ............................................................................ 5 5.1 Zdravstvene i bezbednosne mere ....................................................................................................... 5 5.2 Mere predostrožnosti koje se odnose na postupak ............................................................................ 6

6 Uzorci ............................................................................................................................ 6

7 Postupak ....................................................................................................................... 6 7.1 Potreban materijal ............................................................................................................................... 6 7.2 Postupak analize ................................................................................................................................. 7 7.3 Kalibracija ............................................................................................................................................ 7 7.4 Kontrola kvaliteta ................................................................................................................................. 7 7.5 Izračunavanje/tumačenje rezultata ..................................................................................................... 7

8 Ograničenja testa ......................................................................................................... 8

9 Karakteristike performansi ......................................................................................... 9 9.1 Merenje preciznosti ............................................................................................................................. 9 9.2 Dijagnostičke karakteristike ................................................................................................................. 9 9.3 Analitička specifičnost ....................................................................................................................... 10

Access® HCV Ab PLUS CALIBRATORS 11

1 Namena ....................................................................................................................... 12

2 Kratak pregled i objašnjenje testa ............................................................................ 12

3 Informacije o proizvodu ............................................................................................ 12 3.1 Opis ................................................................................................................................................... 12 3.2 Uslovi za skladištenje i rukovanje ..................................................................................................... 12

4 Upozorenja i mere predostrožnosti .......................................................................... 12

5 Postupak ..................................................................................................................... 13

6 Ograničenje testa ....................................................................................................... 13

Access® HCV Ab PLUS QC 15

1 Namena ....................................................................................................................... 16

2 Kratak pregled i objašnjenje testa ............................................................................ 16

3 Informacije o proizvodu ............................................................................................ 16 3.1 Opis ................................................................................................................................................... 16 3.2 Uslovi za skladištenje i rukovanje ..................................................................................................... 16

4 Upozorenja i mere predostrožnosti .......................................................................... 16

5 Postupak ..................................................................................................................... 17

6 Ograničenja testa ....................................................................................................... 17

7 Očekivane vrednosti .................................................................................................. 17

Bibliografija ................................................................................................................................................ 18

Access HCV Ab PLUS B74233D 3/20

ACCESS®

Immunoassay System

HCV Ab PLUS 34330 2 x 50

Za kvalitativno otkrivanje anti-HCV antitela u ljudskom serumu i plazmi pomoću Access imunotest sistema.

B74233D - [SR] - 2017/01


1 Namena

Test Access HCV Ab PLUS je hemiluminiscentni imunotest koji koristi paramagnetne čestice kao čvrstu fazu, a predviđen je za kvalitativnu detekciju antitela na virus hepatitisa C u ljudskom serumu i plazmi pomoću Access imunotest sistema. Access HCV Ab PLUS se koristi kao pomoć u dijagnostikovanju HCV infekcije i kao ispitivanje na uzorku za davaoce krvi i plazme. Ovaj test nije namenjen za testiranje ili prethodno ispitivanje grupe uzoraka.

2 Kratak pregled i objašnjenje testa

Virus hepatitisa C (HCV) smatra se glavnim uzročnikom ne-A i ne-B hepatitisa (NANBH) dobijenog posle transfuzije, kao i onog koji se prenosi netransfuzionim parenteralnim putevima (pacijenti koji boluju od toksikomanije, pacijenti na dijalizi, pacijenti nakon transplantacije)

(1,2,3,4,5,6,7). Kod pedeset do šezdeset

posto pacijenata zaraženih hepatitisom C verovatno će se razviti hronični hepatitis i rizik od nastanka ciroze ili hepatocelularnog karcinoma

(8,9).

Praksa obaveznog prethodnog ispitivanja svakog dobrovoljnog davanja krvi (za anti-HCV antitela) znatno je smanjila rizik od prenošenja zaražene krvi

(10,11).

Access HCV Ab PLUS test je namenjen za otkrivanje anti-HCV antitela u ljudskom serumu ili plazmi, te stoga doprinosi sprečavanju parenteralne kontaminacije. Takođe se može koristiti za dijagnostikovanje HCV infekcije. U oba slučaja rezultate treba tumačiti u vezi sa kliničkim podacima i drugim serološkim markerima.

3 Principi postupka

Test Access HCV Ab PLUS je indirektni imunoenzimski test. Uzorak (serum, plazma ili kontrolni) dodaje se u reakcionu kivetu sa paramagnetnim česticama obloženim peptidom koji oponaša imunodominantne epitope kapsidne oblasti i rekombinantnim proteinima (NS3 i NS4). Tokom inkubacije i IgG i IgM koji se nalaze u uzorku vezuju se za čvrstu fazu. Posle inkubacije čvrsta faza se skuplja pomoću magnetnog polja a nevezani materijali se uklanjaju nizom ispiranja. Tokom drugog koraka u kivetu se dodaje konjugat (antihumano IgG kozje antitelo, obeleženo alkalnom fosfatazom). Nakon inkubacije niz dodatnih ispiranja uklanja višak konjugata. Dodaje se hemiluminiscentni supstrat Lumi-Phos 530 i svetlost dobijena u enzimskoj reakciji se meri luminometrom. Emitovana jačina signala je proporcionalna količini enzimskog konjugata a time i titru anti-HCV antitela prisutnih u ispitivanom uzorku. Prisustvo ili odsustvo anti-HCV antitela utvrđuje se upoređivanjem granične vrednosti utvrđene kalibracijom testa sa signalom prisutnim u uzorku.


4 Informacije o proizvodu

4.1 Opis

Pakovanja reagensa Access HCV Ab PLUS

Identifikacija na nalepnici

Opis Prezentacija/

priprema 34330

R1a Paramagnetic particles

Paramagnetne čestice: obložene rekombinantnim proteinima (NS3/NS4) i peptidom (kapsidom) suspendovane u TRIS puferu, sa natrijum azidom (< 0,1%)

2 x 50 testova

spremni za upotrebu

R1b Sample diluent

Rastvarač uzorka: sa natrijum azidom (< 0,1%)

R1c Conjugate diluent

Rastvarač konjugata: sa surfakantom, natrijum azidom (< 0,1%)

R1d Conjugate

Konjugat: konjugat kozje antihumane IgG alkalne fosfataze u TRIS puferu, sa surfakantom, natrijum azidom (< 0,1%) i ProClin 300 (< 0,1%)

4.2 Uslovi za skladištenje i rukovanje

Čuvajte u uspravnom položaju u frižideru na temperaturi od 2 do 10°C.

Držite u frižideru na temperaturi od 2 do 10°C najmanje dva sata pre upotrebe na instrumentu.

Stabilno do datuma označenog na pakovanju kada se čuva na temperaturi od 2 do 10°C (pod uslovom da pakovanje reagensa nije otvoreno).

Promešajte nova, neprobušena pakovanja tako što ćete ih lagano okretati dok čestice ne budu u rastvoru i više ne prijanjaju za lepljivi sloj ili strane pakovanja. Nemojte okretati pakovanja koja su probušena.

Stabilnost na 2 do 10°C 28 dana nakon inicijalne upotrebe.

Znaci moguće neispravnosti reagensa su oštećen elastomerni sloj na pakovanju ili kontrolne vrednosti izvan dozvoljenog opsega.

Ako je pakovanje reagensa oštećeno (tj. elastomerni sloj), bacite ga.

5 Upozorenja i mere predostrožnosti

Za in vitro dijagnostičku upotrebu. Samo za zdravstvene radnike.

5.1 Zdravstvene i bezbednosne mere

Ovim kompletom za testiranje treba da rukuje samo kvalifikovano osoblje obučeno za laboratorijske postupke i upoznato sa mogućim opasnostima. Nosite odgovarajuću zaštitnu odeću, rukavice, masku za oči/lice i rukujte na odgovarajući način u skladu sa dobrim laboratorijskim praksama.

Ovaj komplet za testiranje sadrži komponente ljudske krvi. Nijedan poznati metod testiranja ne može da pruži potpunu garanciju o odsustvu infektivnih agenasa. Stoga se svim ljudskim derivatima, reagensima i ljudskim uzorcima treba rukovati kao da mogu preneti zaraznu bolest, u skladu sa preporučenim opštim merama predostrožnosti za patogene koji se prenose krvlju koje definiše OSHA, smernicama iz aktuelne CDC/NHI bezbednosti u mikrobiološkim i biomedicinskim laboratorijama i/ili lokalnim, regionalnim, nacionalnim propisima.

Prosute biološke materije: prosutim materijalima ljudskog porekla treba rukovati kao potencijalno zaraznim. Prosute materije koje ne sadrže kiselinu treba odmah dekontaminirati, uključujući i oblast na koju su prosute, materijale i sve kontaminirane površine ili opremu, a uz pomoć odgovarajućeg hemijskog sredstva za dezinfekciju koje je efikasno za potencijalne biološke rizike predmetnih uzoraka (uglavnom rastvor kućnog izbeljivača od 1:10, 70-80% etanola ili izopropanola, jodofora, kao što je 0,5% Wescodyne™ Plus, itd) i posušiti. Prosute materije koje sadrže kiselinu treba na odgovarajući način upiti (obrisati) ili neutralisati, oblasti isprati vodom i posušiti; za materijale koji se koriste za upijanje prosutih materija mogu biti potrebne mere za odlaganje opasnog otpada. Oblast zatim treba dekontaminirati pomoću jednog od hemijskih sredstava za dezinfekciju.

Odložite sve uzorke i materijal koji se koriste za vršenje testa kao da sadrže zarazni agens.


Laboratorijskim, hemijskim ili biološki opasnim otpadnim materijama mora se rukovati i moraju se odbaciti u skladu sa svim lokalnim, regionalnim i nacionalnim propisima.

Za preporuke u smislu opasnosti i mera predostrožnosti u vezi sa svim hemijskim komponentama u ovom kompletu za testiranje pogledajte slikovne simbole na nalepnicama i informacije navedene u poglavlju 5.2. Bezbednosni list (SDS) je dostupan na www.bio-rad.com.

5.2 Mere predostrožnosti koje se odnose na postupak

Upozorenje:

H317: Može izazvati alergijske reakcije na koži. P280: Nosite odgovarajuće rukavice/zaštitnu odeću/masku za oči/lice. P333+P313: Ako dođe do iritacije kože ili se pojavi osip: Obratite se lekaru za savet ili na pregled. P302+P352: Ako dospe na kožu: Isperite sa dosta sapuna i vode. P501: Odložite sadržaj/posudu u skladu sa lokalnim/regionalnim/nacionalnim/međunarodnim propisima.

Ovaj proizvod sadrži ljudske i životinjske komponente. Rukujte oprezno.

6 Uzorci

1. Serum ili plazma (heparin, EDTA ili citrat) su preporučeni uzorci. 2. Obratiti pažnju na sledeće preporuke koje se odnose na rukovanje, analiziranje i čuvanje uzoraka

krvi:(12)

Sakupljajte sve uzorke krvi u skladu sa rutinskim mjerama predostrožnosti za venepunkciju. Ostavite uzorke da potpuno koagulišu pre centrifugiranja.

Pobrinite se da ostaci fibrina i ćelijske materije budu uklonjeni pre analize.

Poštujte preporuke proizvođača epruveta za skupljanje krvi za centrifugiranje.

Držite epruvete dobro zapušene sve vreme.

Čuvajte uzorke na sobnoj temperaturi (15 do 23°C) najduže 8 sati.

Ako se test ne uradi u roku od 8 sati, uzorke stavite u frižider na temperaturu od +2 do 10°C.

Ako se test ne uradi u roku od 48 sati, ili ako uzorke treba transportovati, zamrznite ih na temperaturi od -20°C ili nižoj.

(12).

Odmrznite uzorke samo jedanput ‒ brzo odmrzavanje zagrevanjem na 40°C u koritu u trajanju od

nekoliko minuta.

Nakon odmrzavanja uzorak se mora detaljno izmešati, ponovo centrifugirati na 3000 g u trajanju od 10 minuta i prebaciti u posudu kako bi se uklonile sve suspendovane čestice fibrina ili agregati podložni pogrešnim rezultatima.

3. Svaka laboratorija treba da oceni prihvatljivost svojih epruveta za prikupljanje krvi i proizvoda za separaciju seruma. Varijacije ovih proizvoda zavise od proizvođača, a ponekad i od serije.

7 Postupak

7.1 Potreban materijal

7.1.1 Obezbeđeni materijali

Pakovanja reagensa R1 Access HCV Ab PLUS

7.1.2 Potreban materijal, ali ne i obezbeđen

1. Access HCV Ab PLUS CALIBRATORS Obezbeđeni u vidu jednog HCV-Ab negativnog seruma i jednog anti-HCV Ab pozitivnog seruma. Kat. br. 34335

2. Materijali za kontrolu kvaliteta: • Access HCV Ab PLUS QC

Kat. br. 34339

• Ostali komercijalni kontrolni serumi

3. Access Substrate Kat. br. 81906

http://www.bio-rad.com/


4. Access 2: Pufer za ispiranje: pufer za ispiranje II, kat. br. A16792

5. UniCel® DxI

®:

Pufer za ispiranje: UniCel DxI pufer za ispiranje II, kat. br. 16793

6. Sistemi: Access, Access 2, UniCel DxI (UniCel DxI 600, UniCel DxI 800, UniCel DxC 880i, UniCel DxC 860i, UniCel DxC 680i, UniCel DxC 660i).

7.2 Postupak analize

1. Pogledajte odgovarajuća uputstvu za rad na aparatu i/ili sistem pomoći radi detaljnog opisa instalacije, pokretanja, principa rada, performansi sistema, uputstva za rad, postupaka kalibracije, ograničenja u radu i predostrožnosti, rizika, održavanja i rešavanja problema koji se mogu javiti u toku rada.

2. Sadržaj novog (neprobušenog) pakovanja reagensa promešajte tako što ćete ga nekoliko puta nežno okrenuti pre nego što ga stavite u instrument. Nemojte okretati otvorena (probušena) pakovanja.

3. Za svako utvrđivanje koristi se dvadeset i pet (25) µl uzorka (pored sopstvene zapremine). 4. Za dobijanje prvog rezultata potrebno je oko 55 minuta. 5. Sistem je unapred podešen da rezultate merenja uzorka izrazi kao odnos signal/granična vrednost

(S/CO).

7.3 Kalibracija

Aktivna kalibraciona kriva je neophodna za sve testove. Podaci o kalibraciji za određivanje granične vrednosti važe 28 dana. Zato je za Access HCV Ab PLUS test potrebna kalibracija svakih 28 dana pomoću C0 i C1 iz kompleta kalibratora Access HCV Ab PLUS CALIBRATORS. U odgovarajućem uputstvu za rad na aparatu nalaze se informacije o teoriji kalibracije, konfiguraciji kalibratora, unosu zahteva za kalibraciju i pregledu rezultata kalibracije.

7.4 Kontrola kvaliteta

Materijal za kontrolu kvaliteta simulira karakteristike uzoraka pacijenata i od presudne je važnosti za praćenje izvođenja imunohemijskih testova na analizatoru. Preporučuje se kontrola kvaliteta najmanje na svakih 24 sata

(13) i prilikom pokretanja sistema pre obrade uzoraka pacijenata. Uključiti komplete Access

HCV Ab PLUS QC ili koristiti dostupni komercijalni kontrolni materijal koji pokriva minimalno dva nivoa koncentracija analita. Odluku o tome da li će vršiti češće ili dodatne kontrole donosi sam korisnik na osnovu dobre laboratorijske prakse ili zahteva za akreditaciju laboratorije i važećih zakonskih propisa. Pratite uputstva proizvođača o čuvanju i rekonstituciji kontrolnog materijala. Svaka laboratorija treba da ustanovi srednje vrednosti i prihvatljivi opseg kako bi se obezbedilo odgovarajuće izvođenje kontrole kvaliteta. Rezultati kontrole kvaliteta koji izlaze iz prihvatljivog opsega mogu ukazati na netačnost dobijenih rezultata testova. Pregledajte sve rezultate testova dobijene od trenutka kada je urađena poslednja prihvatljiva kontrola kvaliteta ovog analita. Ocena Access HCV Ab PLUS testa je vršena na sobnoj temperaturi u rasponu od 18-32°C. Da bi se dobili optimalni rezultati, kalibraciju testa i testiranje uzorka pacijenta treba sprovesti u sličnim temperaturnim uslovima. Ako temperatura u laboratoriji varira za više od ± 5°C od temperaturne kalibracije, pregledajte rezultate kontrole kvaliteta i ako je potrebno, ponovo izvršite kalibraciju. Pogledajte odgovarajuće priručnike za sistem i/ili sistem pomoći radi potpunih informacija o proveri rezultata kontrole kvaliteta seruma. Svi proizvedeni i komercijalni reagensi su predmet opsežnog sistema kontrole kvaliteta počevši od prijema sirovina pa sve do krajnje komercijalizacije proizvoda. Svaka serija se podvrgava kontroli kvaliteta i pušta se na tržište ako je u skladu sa kriterijumima prihvatljivosti.

7.5 Izračunavanje/tumačenje rezultata

Softver sistema automatski izračunava rezultate testova pacijenata na osnovu granične vrednosti određene aktivnom kalibracijom. Rezultati (signal/granična vrednost = S/CO) se objavljuju kao „reaktivni” ili „nereaktivni” u zavisnosti od toga u kakvom su odnosu s graničnom vrednošću (signal veći od granične vrednosti ili signal jednak njoj ili manji od nje). Međutim, rezultate koji su 10% manji od granične vrednosti treba protumačiti s rezervom i treba testirati ponovo u duplikatu. Ovu preporučenu sivu zonu (od 0,9 do manje od 1,0) korisnik treba da memoriše u softveru sistema (konsultujte uputstvo za upotrebu odgovarajućeg sistema i/ili sistem pomoći radi kompletnih uputstava o sivoj zoni za kvalitativni test). Na ovaj način se automatski označavaju uzorci koji se nalaze u sivoj zoni, čime je omogućena njihova brza identifikacija. Rezultati pacijenta mogu se pregledati u prozoru Sample Results. U odgovarajućem uputstvu za upotrebu i/ili sistemu pomoći se nalaze potpune informacije o pregledu rezultata.


Prva analiza rezultata:

Bilo koji uzorak čiji je odnos (S/CO) manji od 0,9 smatra se nereaktivnim sa Access HCV Ab PLUS testom.

Uzorci čiji je odnos (S/CO) između 0,9 i 1 nalaze se u sivoj zoni i treba ih ponovo analizirati u duplikatu pre konačnog tumačenja.

Uzorci čiji je odnos (S/CO) jednak ili veći od 1 inicijalno se smatraju reaktivnima prema Access HCV Ab PLUS testu i takve uzorke treba ponovo analizirati u duplikatu pre konačnog tumačenja.

Druga analiza rezultata: Sve uzorke koji su prvobitno bili reaktivni ili u sivoj zoni treba ponovo analizirati u duplikatu pomoću Access HCV Ab PLUS testa:

ako su rezultati duplikata < 1,0 S/CO, uzorak se mora smatrati nereaktivnim (negativnim) na osnovu Access HCV Ab PLUS testa;

ako je jedan od 2 rezultata > 1,0 S/CO, prvobitni rezultati su ponovo dobijeni i uzorak se proglašava „reaktivnim” na osnovu Access HCV Ab PLUS testa.

Međutim, u skladu s lokalnim propisima, neophodno je analizirati svaki „reaktivni” uzorak i to pomoću dodatnih testova da bi se nedvosmisleno utvrdilo da je rezultat pozitivan. Tabela 1 Tumačenje rezultata Access HCV Ab PLUS testa

Rezultat Odnos: signal/granična vrednost

Tumačenje Dodatni testovi

Prva analiza rezultata

S/CO < 0,9 nereaktivno HCV Ab nije

pronađen nema

S/CO ≥ 1,0 reaktivno „prvobitno reaktivno”

Ponovo analizirati u duplikatu

0,9 ≤ S/CO < 1,0 siva zona „prvobitno reaktivno”

Ponovo analizirati u duplikatu

Druga analiza

rezultata

Ponovo analizirati u duplikatu:

ako su 2 rezultata < 1,0 nereaktivno

HCV Ab nije pronađen

nema

Ponovo analizirati u duplikatu:

ako je jedan od 2 rezultata ≥ 1,0

reaktivno HCV Ab pronađen „ponovo reaktivno”

dodatni test

8 Ograničenja testa

1. Access HCV Ab PLUS test strogo je ograničen na utvrđivanje prisustva anti-HCV antitela u ljudskom serumu ili plazmi (heparin, EDTA ili citrat). Karakteristike performansi pomoću drugih vrsta uzoraka nisu utvrđene ili su ograničene.

2. Rezultate dobijene testom Access HCV Ab PLUS treba tumačiti u svetlu celokupne kliničke slike pacijenta uključujući: istoriju bolesti, rezultate dodatnih testiranja i druge odgovarajuće informacije.

3. Opseg izmerenog rezultata, iznad granične vrednosti, ne ukazuje na ukupnu količinu prisutnih antitela i/ili antigena.

4. S obzirom na raznovrsnost imunoloških reakcija pacijenata zaraženih virusom hepatitisa C (naročito tokom serokonverzije), mogu se primetiti izvesne razlike u detekciji između testova zavisno od vrste korišćenih antigenskih proteina. Negativni rezultat ispitivanja uzorka ne isključuje mogućnost izlaganja ili infekcije virusom hepatitisa C.

5. Da bi se proglasila infekcija, reaktivni rezultat dobijen Access HCV Ag PLUS testom treba da bude potvrđen odgovarajućom metodom.

6. Sve ELISA tehnike su podložne dobijanju netačnih pozitivnih reakcija. Preporučuje se da se potvrdi specifičnost reakcije za svaki uzorak za koji se utvrdi da je ponovo pozitivan uz pomoć odgovarajućeg metoda za dokazivanje prisustva anti-HCV antitela.

7. Imuno ugrožene osobe i stanja, kao što su ozbiljna infekcija i terapija imunosupresivnim lekovima, za posledicu mogu imati supresiju nivoa antitela ispod granice koja se može otkriti testom. Rezultate dobijene kod takvih uzoraka treba oprezno tumačiti.


9 Karakteristike performansi

9.1 Merenje preciznosti

Preciznost Access HCV Ab PLUS testa je utvrđena analizom negativnih i pozitivnih uzoraka. Mogućnost ponavljanja unutar testa ocenjena je ispitivanjem 4 uzorka 30 puta u jednom nizu, mogućnost ponavljanja između testova ocenjena je ispitivanjem 4 uzorka u tri primerka, 2 puta dnevno tokom 5 dana. Rezultati su prikazani u sledećim tabelama:

9.1.1 Mogućnost ponavljanja

N = 30 Neg 1 Neg 2 Poz 1 Poz 2

Srednja vrednost (RLU)

251824 1378166 10966900 12615243

SD 10202 43987 320857 309281

CV % 4,05 3,19 2,93 2,45

CV niži od 5%

9.1.2 Prelazna preciznost

N = 30 Neg 1 Neg 2 Poz 1 Poz 2

Srednja vrednost odnosa

(uzorak/granična vrednost)

0,07 1,34 3,18 4,42

SD 0,01 0,09 0,21 0,39

CV % 9,9 6,89 6,64 8,78

CV niži od 10%

9.2 Dijagnostičke karakteristike

9.2.1 Dijagnostička specifičnost

Specifičnost testa je ocenjena:

kao 99,83% (95% CI: 99,7-99,9) na populaciji od 5995 uzoraka neizabranih dobrovoljnih davalaca krvi.

na populaciji od 472 hospitalizovana pacijenta, za 469 utvrđeno je da su negativni a za 3, koja su bila neodređena sa Chiron Riba HCV 3.0, utvrđeno je da su nisko pozitivni pomoću Access HCV Ab PLUS testa.

9.2.2 Dijagnostička osetljivost

Potvrđeni HCV Ab pozitivni uzorci Osetljivost testa Access HCV Ab PLUS ocenjena je na osnovu ispitivanja 511 dobro dokumentovanih pozitivnih uzoraka u koje spadaju:

101 PCR pozitivni serum sakupljen prilikom praćenja pacijenata koji hronično boluju od HCV-a, 145 pozitivnih uzoraka od pacijenata zaraženih HCV-om, 77 HCV RNA PCR pozitivnih plazmi koje potiču iz BBI, 122 genotipska HCV pozitivna uzorka.

SFTS 97 panel koji se sastoji 36 pozitivnih uzoraka: 26 genotipskih i HCV RNA PCR pozitivnih uzoraka; 10 pozitivnih (PCR negativnih) uzoraka sa najmanje 2 HCV Ab reaktivnosti.

Takođe je obuhvaćeno 30 pozitivnih uzoraka pronađenih u budućim studijama specifičnosti. Svi ovi uzorci su reprezentativni za različite profile serotipova (izolovana reaktivnost, 2 ili 3 reaktivnosti) i najrasprostranjenijeg HCV genotipa 1 do 4 plus nekoliko manje čestih 4c/d i 5 genotipova.

Za sve ove uzorke utvrđeno je da su pozitivni uz pomoć Access HCV Ab PLUS testa i nikakva očigledna razlika nije zabeležena u detekciji različitih testiranih HCV genotipova.


Uzorci iz komercijalnih panela serokonverzije Osetljivost testa Access HCV Ab PLUS ocenjena je na osnovu ispitivanja 74 panela serokonverzije.

Među 29 komercijalnih testiranih panela, Access HCV Ab PLUS je detektovao povećanje anti-HCV Ab antitela kad i izvršeni dodatni RIBA 3.0 test ili s vrlo malim zaostatkom (nekoliko dana).

Među 45 testiranih panela koje su izvršili stručnjaci, Access HCV Ab PLUS test se pokazao pozitivnim u isto vreme (tj. pozitivan s istim uzorkom) kao i osetljiviji testovi korišćeni za upoređivanje.

Samo 2 serokonverzije detektovane su nekoliko dana kasnije i invertno 2 serokonverzije su bile prethodno pozitivne uz pomoć Access HCV Ab PLUS testa.

Sveži uzorci

Testirano je još 25 HCV svežih pozitivnih uzoraka (u roku od 1 dana od sakupljanja krvi) i za njih je utvrđeno da su pozitivni.

9.3 Analitička specifičnost

9.3.1. Studija unakrsne reaktivnosti

Analiza 108 uzoraka od pacijenata koji pokazuju različite patologije nevezane za virus hepatitisa C (hepatitis A ili B, herpes, EBV, reumatoidni faktor...) nije pokazala značajnu nespecifičnu unakrsnu reaktivnost.

9.3.2. Studija interferencija

Uzorci koji sadrže do 200 mg/l bilirubina, do 90 g/l albumina, lipemski uzorci koji sadrže ekvivalent od 36 g/l trioleina (triglicerida) i hemolizovani uzorci koji sadrže do 5 g/l hemoglobina ne utiču na rezultate.


ACCESS®

Immunoassay System

HCV Ab PLUS CALIBRATORS 34335

Kalibratori Access HCV Ab PLUS CALIBRATORS su namenjeni za kalibraciju Access HCV Ab PLUS testova uz pomoć Access imunotest sistema.

B74233D - [SR] - 2017/01


1 Namena

Kalibratori Access HCV Ab PLUS CALIBRATORS su namenjeni za kalibraciju Access HCV Ab PLUS testova za kvalitativnu detekciju antitela na HCV u ljudskom serumu i plazmi uz pomoć Access imunotest sistema.


Kalibratori Access HCV Ab PLUS CALIBRATORS koriste se za utvrđivanje kalibracije (određivanje granične vrednosti) za Access HCV Ab PLUS test. Upoređivanjem intenziteta svetlosti koju proizvodi uzorak sa graničnim vrednostima moguće je odrediti prisustvo ili odsustvo anti-HCV antitela.


3.1 Opis

Kalibratori Access HCV Ab PLUS CALIBRATORS


Opis Prezentacija/

priprema 34335

C0 Negative Calibrator

Negativni kalibrator: negativni (nereaktivni) ljudski serum na anti-HCV antitela, sa < 0,1% natrijum azida.

1 x 1 ml spreman za

upotrebu

C1 Positive Calibrator

Pozitivni kalibrator: pozitivni (reaktivni) ljudski serum na anti-HCV antitela, inaktivisan sa < 0,1% natrijum azida.

1 x 1 ml spreman za

upotrebu

Calibration card Kalibraciona kartica: 1



Sadržaj promešajte nežnim okretanjem pre upotrebe. Izbegavajte stvaranje mehurića.

Sadržaj otvorenih bočica biće stabilan do roka upotrebe navedenog na etiketi kada se čuva na temperaturi od 2 do 10°C.

Znaci moguće neispravnosti su kontrolne vrednosti izvan zadatog opsega.




Ovim kompletom za testiranje treba da rukuje samo kvalifikovano osoblje obučeno za laboratorijske postupke i upoznato sa njihovim mogućim opasnostima. Nosite odgovarajuću zaštitnu odeću, rukavice, masku za oči/lice i rukujte na odgovarajući način u skladu sa dobrim laboratorijskim praksama.

Materijal ljudskog porekla koji se koristi u pripremi reagensa je testiran i utvrđeno je da je nereaktivan na hepatitis B površinski antigen (HBs Ag), antitela na ljudski virus imunodeficijencije (HIV-1 i HIV-2) i antitela na virus hepatitisa C (HCV), osim pozitivnog kalibratora C1 koji je pozitivan na anti-HCV antitela.

Ovaj komplet za testiranje sadrži komponente ljudske krvi. Nijedan poznati metod testiranja ne može da pruži potpunu garanciju o odsustvu infektivnih agenasa. Stoga se svim ljudskim derivatima, reagensima i ljudskim uzorcima treba rukovati kao da mogu preneti zaraznu bolest, u skladu sa preporučenim opštim merama predostrožnosti za patogene koji se prenose krvlju koje definiše OSHA, smernicama iz aktuelne CDC/NHI bezbednosti u mikrobiološkim i biomedicinskim laboratorijama i/ili lokalnim, regionalnim, nacionalnim propisima.

Prosute biološke materije: prosutim materijalima ljudskog porekla treba rukovati kao potencijalno zaraznim. Prosute materije koje ne sadrže kiselinu treba odmah dekontaminirati, uključujući i oblast na koju su prosute, materijale i sve kontaminirane površine ili opremu a uz pomoć odgovarajućeg hemijskog sredstva za dezinfekciju koje je efikasno za potencijalne biološke rizike predmetnih uzoraka (uglavnom rastvor kućnog izbeljivača od 1:10, 70-80% etanola ili izopropanola, jodofora, kao što je 0,5% Wescodyne™ Plus, itd) i posušiti.


Prosute materije koje sadrže kiselinu treba na odgovarajući način upiti (obrisati) ili neutralisati, oblasti isprati vodom i posušiti; za materijale koji se koriste za upijanje prosutih materija mogu biti potrebne mere za odlaganje opasnog otpada. Oblast zatim treba dekontaminirati pomoću jednog od hemijskih sredstava za dezinfekciju.

Odložite sve uzorke i materijal koji se koriste za vršenje testa kao da sadrže zarazni agens. Laboratorijskim, hemijskim ili biološki opasnim otpadnim materijama mora se rukovati i moraju se odbaciti u skladu sa svim lokalnim, regionalnim i nacionalnim propisima. Bezbednosni list (SDS) je dostupan na www.bio-rad.com.

5 Postupak

U odgovarajućem uputstvu za rad na aparatu nalaze se informacije o teoriji kalibracije, konfiguraciji kalibratora, unosu zahteva za kalibraciju i pregledu rezultata kalibracije. Kalibracija Kalibratori Access HCV Ab PLUS CALIBRATORS predviđeni su kao negativni (C0) i pozitivni (C1) kalibratori. Za Access HCV Ab PLUS test potrebna je kalibraciona kriva (određivanje granične vrednosti) svakih 28 dana kako bi se dobila aktivna kalibracija za samo jednu seriju reagenasa koja je identifikovana svojim bar kodom. Po isteku 28 dana ili ako se ubaci druga serija reagenasa u sistem, kriva se automatski poništava. Za svaku kalibraciju potrebno je najmanje 75 µl od svakog kalibratora (utvrđivanje u tri primerka) pored sopstvene zapremine posude za uzorak i sistema. Jedna kap iznosi približno 40 µL.

6 Ograničenje testa

U slučaju utvrđene mikrobiološke kontaminacije ili pojačane zamućenosti reagensa, bočicu bacite.



ACCESS®

Immunoassay System

HCV Ab PLUS QC 34339

Za praćenje performansi sistema HCV Ab PLUS testa.

B74233D - [SR] - 2017/01


1 Namena


Materijali za kontrolu kvaliteta simuliraju karakteristike uzoraka pacijenata i od presudne su važnosti za praćenje performansi sistema Access HCV Ab PLUS testa. Osim toga, oni predstavljaju sastavni deo dobre laboratorijske prakse

(13,14,15,16,19,20). Prilikom vršenja testova Access reagensima za anti-HCV

antitela uključite materijale za kontrolu kvaliteta da biste potvrdili ispravnost testova. Ako analizator funkcioniše kako treba, vrednosti dobijene testiranjem treba da budu u prihvatljivom opsegu.


3.1 Opis

Access HCV Ab PLUS QC


Opis Prezentacija/

priprema 34339

QC1 Negative QC

Negativna kontrola kvaliteta: ljudski serum sa < 0,1% natrijum azida. Negativan (nereaktivan) na anti-HCV antitela.

3 x 2,5 ml spremni za upotrebu

QC2 Positive QC

Pozitivna kontrola kvaliteta, anti-HCV: ljudski serum sa < 0,1% natrijum azida. Pozitivan (reaktivan) na anti-HCV antitela, inaktivisan.

3 x 2,5 ml spremni za upotrebu

QC card Kalibraciona kartica: 1



Sadržaj promešajte nežnim okretanjem pre upotrebe. Izbegavajte stvaranje mehurića.

Kontrole kvaliteta QC su stabilne do datuma označenog na pakovanju kada se čuvaju na temperaturiod 2 do 10°C.

Bočica je stabilna na 2 do 10°C 30 dana nakon inicijalne upotrebe.

Znaci moguće neispravnosti su vrednosti kontrole kvaliteta izvan zadatog opsega.

Pogledajte u kartici kontrole kvaliteta srednju vrednost i standardnu devijaciju (SD).




Ovim kompletom za testiranje treba da rukuje samo kvalifikovano osoblje obučeno za laboratorijskepostupke i upoznato sa njihovim mogućim opasnostima. Nosite odgovarajuću zaštitnu odeću,rukavice, masku za oči/lice i rukujte na odgovarajući način u skladu sa dobrim laboratorijskimpraksama.

Materijal ljudskog porekla koji se koristi u pripremi reagensa je testiran i utvrđeno je da jenereaktivan na hepatitis B površinski antigen (HBs Ag), na antitela na ljudski virus imunodeficijencije(HIV-1 i HIV-2) i na antitela na virus hepatitisa C (HCV), osim pozitivne kontrole kvaliteta QC2 koja jepozitivna na anti-HCV antitela.

Ovaj komplet za testiranje sadrži komponente ljudske krvi. Nijedan poznati metod testiranja ne možeda pruži potpunu garanciju o odsustvu infektivnih agenasa. Stoga se svim ljudskim derivatima,reagensima i ljudskim uzorcima treba rukovati kao da mogu preneti zaraznu bolest, u skladu sapreporučenim opštim merama predostrožnosti za patogene koji se prenose krvlju koje definišeOSHA, smernicama iz aktuelne CDC/NHI bezbednosti u mikrobiološkim i biomedicinskimlaboratorijama i/ili lokalnim, regionalnim, nacionalnim propisima.

Prosute biološke materije: prosutim materijalima ljudskog porekla treba rukovati kao potencijalnozaraznim. Prosute materije koje ne sadrže kiselinu treba odmah dekontaminirati, uključujući i oblastna koju su prosute, materijale i sve kontaminirane površine ili opremu a uz pomoć odgovarajućeghemijskog sredstva za dezinfekciju koje je efikasno za potencijalne biološke rizike predmetnih

Access HCV Ab PLUS QC predviđen je za praćenje performansi sistema Access HCV Ab PLUS testa.


uzoraka (uglavnom rastvor kućnog izbeljivača od 1:10, 70-80% etanola ili izopropanola, jodofora, kao što je 0,5% Wescodyne™ Plus, itd) i posušiti. Prosute materije koje sadrže kiselinu treba na odgovarajući način upiti (obrisati) ili neutralisati, oblasti isprati vodom i posušiti; za materijale koji se koriste za upijanje prosutih materija mogu biti potrebne mere za odlaganje opasnog otpada. Oblast zatim treba dekontaminirati pomoću jednog od hemijskih sredstava za dezinfekciju.

Odložite sve uzorke i materijal koji se koriste za vršenje testa kao da sadrže zarazni agens. Laboratorijskim, hemijskim ili biološki opasnim otpadnim materijama mora se rukovati i moraju se odbaciti u skladu sa svim lokalnim, regionalnim i nacionalnim propisima. Bezbednosni list (SDS) je dostupan na www.bio-rad.com.

5 Postupak

Access HCV Ab PLUS QC treba tretirati na isti način kao i uzorke uzete od pacijenta i izvršiti ga u skladu sa uputstvima dobijenim uz instrument i/ili korišćenu metodu. Da biste uradili Access HCV Ab PLUS QC, za svaki od 2 nivoa kontrole kvaliteta potrebno je najmanje 25 μl uzorka (jednostruko određivanje), pored zapremine same posude za uzorak i sistema. Jedna kap iznosi približno 40 µL. Preporučuje se kontrola kvaliteta najmanje na svakih 24 sata

(13,16) i prilikom pokretanja sistema pre

obrade uzoraka pacijenata. Odluku o tome da li će vršiti češće ili dodatne kontrole donosi sam korisnik na osnovu dobre laboratorijske prakse ili zahteva za akreditaciju laboratorije i važećih zakonskih propisa. U odgovarajućem uputstvu za rad na aparatu i/ili sistemu pomoći nalaze se informacije o teoriji kontrole kvaliteta, konfiguraciji kontrola, unosu zahteva za kontrolu kvaliteta uzoraka i pregledu rezultata kontrole kvaliteta.

6 Ograničenja testa

1. Upotreba kontrole kvaliteta Access HCV Ab PLUS QC utvrđena je samo za testove HCV Ab PLUS. 2. Rezultati kontrole kvaliteta koji izlaze iz prihvatljivog opsega mogu ukazati na netačnost dobijenih

rezultata testova. Pregledajte sve rezultate testova dobijene od trenutka kada je urađena poslednja prihvatljiva kontrola kvaliteta ovog analita.

3. U slučaju utvrđene mikrobiološke kontaminacije ili pojačane zamućenosti reagensa, bočicu bacite.

7 Očekivane vrednosti

Očekivane srednje vrednosti (×) i SD (σ) za Access HCV Ab PLUS QC nalaze se na kartici s vrednostima kontrole kvaliteta koja se nalazi u kompletu za početnu konfiguraciju sistema kontrole kvaliteta. Svaka laboratorija treba da odredi sopstvene kriterijume prihvatljivosti odabirom pravila kontrole kvaliteta koja će biti primenjena na rezultate kontrole. Pojedinačni rezultati kontrole treba da budu u granicama početnih prihvatljivih vrednosti. Međutim, svaka laboratorija treba da ažurira srednje i SD vrednosti pošto prikupi dovoljno podataka

(13,17,21).

S obzirom da specifični nivoi reaktivnosti mogu varirati zavisno od proizvođača testa, postupka, broja serija i laboratorije, svaka laboratorija treba da odredi specifičan nivo reaktivnosti i utvrdi sopstveni opseg prihvatljivih vrednosti

(13,17,18,19). U prihvatljivi opseg mogu da spadaju sve vrednosti u okviru ± 2 SD

srednje vrednosti 20 tačaka podataka od 20 utvrđivanja u periodu od 30 dana(21)

.


Bibliografija 1. Choo QL., Kuo G., Weiner AJ, et al. Isolation of a cDNA clone derived from a blood-borne non-A,

non-B viral hepatitis genome Science, 1989, 244: 359-362.

2. Choo QL., Richman KH., Han JH., et al. Genetic organization and diversity of the hepatitis C virus Proc. Natl. Acad. Sci USA, 1991, 88: 2451-2455.

3. Kuo G., Choo QL., Alter HJ., et al. An assay for circulating antibodies to a major etiologic virus of human non-A non-B hepatitis. Science 1989, 244: 362-364.

4. Tibbs C.J. Methods of transmission of hepatitis C Journal of of viral Hepatitis, 1995, 2: 113-119.

5. Purcell R. The Hepatitis C virus: overview Hepatology, 1997, 26, 3, suppl 1: 11-14.

6. Seeff L.B. Natural History of Hepatitis C Hepatology, 1997, 26, 3, suppl 1: 21-28.

7. Yoshikura H., Hijkata N., Nakajima N. and Shimizy Y.K. Replication of Hepatitis C virus Journal of of viral Hepatitis, 1996, 3:3-10.

8. Hoofnaggle J.H., Hepatitis C virus: the clinical spectrum of disease Hepatology, 1997, 26, 3, suppl 1: 15-20.

9. Alter HJ., Purcell RH., Shih JW., et al. Detection of antibodies to hepatitis C virus in prospectively followed transfusion recipients with acute and chronic non-A non-B hepatitis N. Engl. J. Med., 1989, 321: 1994-1500.

10. Japanese Red Cross Non-A, Non-B Hepatitis Research Group. Effect of screening for hepatitis C virus antibody and hepatitis B virus core antibody on incidence of post-transfusion hepatitis. Lancet 1991, 338: 1040-1041.

11. Donahue JF., Munoz A., Ness PM., Et al. The declining risk of post-transfusion hepatitis C virus infection. N. Engl. J. Med. 1992, 327: 369-373.

12. Approved Standard - Procedures for the Collection of Diagnostic Blood Specimens by Venipuncture - H3-A3.1991. National Committee for Clinical Laboratory Standards, 3rd edition.

13. Approved Guideline - Procedures for the Handling and Processing of Blood Specimens, H18-A. 1990. National Committee for Clinical Laboratory Standards.

14. Buttner, H. 1963. Fehler bei der Ausfuhrung und Beurteilung von Laboratoriumsuntersuchungen, Dtsch. Med. Wschr. 88:1050.

15. Benson, E.S., Freier, E.F. 1963.Quality Control. Postgraduate Medicine, 34: A-58.

16. Levy, S., Jennings, E.R. 1950. The Use of Control Charts in the Clinical Laboratory, Am. J. Clin. Path., 20: 1059.

17. Youden, W.J. 1951. Statistical Methods for Chemists, John Wiley & Sons, Inc., PLUS York.

18. Cembrowski, G.S., Carey, R.N. 1989. Laboratory Quality Managment: QC & QA, ASCP Press, 1989.

19. Westgard, J.O., Koch, D.D., Oryall, J.J., Quam, E.F., Feldbruegge, et al. 1990. Selection of Medically Useful QC Procedures for Individual Tests done in a Multitest Analytical System, Clin. Chem, 36: 230.

20. Garrett, P.E., 1994. Quality is quantitative: so how do we QC qualitative tests? Journal of Clinical Immunoassay, 17: 231

21. Internal Quality Control: Principles and Definitions. 1987. Tentative NCCLS Guideline. National Committee for Clinical Laboratory Standards, C24-T.



BIO-RAD GARANTUJE DA OVI PROIZVODI FUNKCIONIŠU NA NAČIN KOJI JE OPISAN NA ETIKETAMA I U DOSTAVLJENOJ LITERATURI. BIO-RAD NE DAJE BILO KAKVU PODRAZUMEVANU GARANCIJU O MOGUĆNOSTIMA PRODAJE ILI POGODNOSTI ZA BILO KOJE DRUGE NAMENE. BIO-RAD NI U KOM SLUČAJU NEĆE BITI ODGOVORAN ZA BILO KAKVU POSLEDIČNU ŠTETU KOJA JE IZVAN OKVIRA PRETHODNO JASNO PREDOČENE GARANCIJE. Access, UniCel I DxI su zaštitni znaci kompanije Beckman Coulter, Inc. ProClin je zaštitni znak kompanije Rohm and Haas Company ili kompanija u njenom vlasništvu ili filijala. Bio-Rad 3, Boulevard Raymond Poincaré 92430 Marnes-la-Coquette, Francuska Tel: +33 (0) 1 47 95 60 00 2017/01 Faks: +33 (0) 1 47 41 91 33 B74233D www.bio-rad.com Verzija D

http://www.bio-rad.com/

Documents

Immunoassay System HCV Ab PLUS 34330 · Pobrinite se da ostaci fibrina i ćelijske materije budu uklonjeni pre analize. Poštujte preporuke proizvođača epruveta za skupljanje krvi