Har vi gode og billige analysemetoder?(til fusarium – toksiner i korn og majs-ensilage)

Ministeriet for Fødevarer, Landbrug og FiskeriDanmarks JordbrugsForskning

Plantekongres 2005 – Niels Henrik SpliidHar vi gode og billige analysemetoder?

Niels Henrik Spliid,Danmarks JordbrugsForskning

Inger Grunnet,DLG´s Laboratorium

Ministeriet for Fødevarer, Landbrug og FiskeriDanmarks JordbrugsForskning

Analyse af et eller flere toksiner?

Overskrides grænseværdien?

Hurtig analyse ved indvejning

Forskning - forskelle mellem sorter,dyrkningsformer,betydning af klimatiske forhold etc.

Plantekongres 2005 – Niels Henrik SpliidHar vi gode og billige analysemetoder?

Hvad skal analysemetoden bruges til?

                                                 

Zearalenon

Moniliformin

Deoxynivalenol (DON)

Fumonisiner Enniatiner

Ministeriet for Fødevarer, Landbrug og FiskeriDanmarks JordbrugsForskning

Ministeriet for Fødevarer, Landbrug og FiskeriDanmarks JordbrugsForskning

Plantekongres 2005 – Niels Henrik SpliidHar vi gode og billige analysemetoder?

Kommende EU – grænseværdier:

Korn til konsum:

DON: 1250 mikrogram pr. kg.

NIV: Dækkes af DON

Zearalenon: 100 mikrogram pr. kg.

T-2 og HT-2: Afventer bedre analysemetoder.

Fumonisiner: 2000 mikrogram pr. kg. (majs).

                                                                                                  

Ministeriet for Fødevarer, Landbrug og FiskeriDanmarks JordbrugsForskning

Plantekongres 2005 – Niels Henrik SpliidHar vi gode og billige analysemetoder?

ELISA – bakke med 96 brønde

EEE E

PS SP

ES

P

ELISA – princippet: Omdannelse af substrat til farvet produkt

Toksin-antistof

Toksin Enzymbundet toksin

Substrat

ProduktMinisteriet for Fødevarer, Landbrug og FiskeriDanmarks JordbrugsForskning

Ministeriet for Fødevarer, Landbrug og FiskeriDanmarks JordbrugsForskning

Hurtig og billig

Specifik – krydsreaktion fra analoge forbindelser

Kun få udviklede ELISA-kits for fusarium-toksiner

Mindre præcis – OK til afgørelse af overskridelser

Plantekongres 2005 – Niels Henrik SpliidHar vi gode og billige analysemetoder?

Fordele og ulemper ved ELISA:

Ministeriet for Fødevarer, Landbrug og FiskeriDanmarks JordbrugsForskning

Plantekongres 2005 – Niels Henrik SpliidHar vi gode og billige analysemetoder?

LC-MSMS-analysemetode:

(Frysetørring)FormalingAfvejningEkstraktionCentrifugeringOprensningInddampningGenopløsningFiltreringChromatografisk separation (LC)Dobbbelt massespektrometrisk identifikation(MSMS)

Hvedeprøvetilsat toksiner:

Hvedeprøve:

Zearalenon: 250 µg pr. kg.

DON: 250 µg pr. kg.

Nivalenol:250 µg pr. kg.

Nivalenol:27 µg pr. kg.

DON: 22 µg pr. kg.

Zearalenon:

27 µg pr. kg.

Ministeriet for Fødevarer, Landbrug og FiskeriDanmarks JordbrugsForskning

Specifik og følsom metode

Flere toksiner i én analysegang

Velegnet til forskningsopgaver

Dyrere og mere tidskrævende

Plantekongres 2005 – Niels Henrik SpliidHar vi gode og billige analysemetoder?

Fordele og ulemper ved LC-MSMS:

Deoxynivalenol (DON) - Korrelation mellem ELISA- og LC-MSMS-metode

1

10

100

1000

10000

100000

1 10 100 1000 10000 100000

Mikrogram pr. kg. - ELISA-metode

Mik

rog

ram

pr.

kg

. -

LC

-M

SM

S-m

eto

de

4. kvadrant

2. kvadrant

3. kvadrant

1. kvadrant

Ministeriet for Fødevarer, Landbrug og FiskeriDanmarks JordbrugsForskning

Plantekongres 2005 – Niels Henrik SpliidHar vi gode og billige analysemetoder?

Zearalenon - Korrelation mellem ELISA- og LC-MSMS-metode

1

10

100

1000

10000

1 10 100 1000 10000

Mikrogram pr kg - ELISA-metode

Mik

rog

ram

pr.

kg

. - L

C-M

SM

S-

me

tod

e

4. kvadrant

2. kvadrant

3. kvadrant

1. kvadrant

Ministeriet for Fødevarer, Landbrug og FiskeriDanmarks JordbrugsForskning

Plantekongres 2005 – Niels Henrik SpliidHar vi gode og billige analysemetoder?

Ministeriet for Fødevarer, Landbrug og FiskeriDanmarks JordbrugsForskning

Plantekongres 2005 – Niels Henrik SpliidHar vi gode og billige analysemetoder?

Er der nye hurtigmetoder på vej?

Dupont: Billedbehandling kombineret med neurale netværk vil i fremtiden kunne sige om et parti korn er angrebet af fusarium - og hvilken art, måske også fusarium toksiner?

Ikke færdigudviklet de nærmeste år

Foss Electric: Nær Infrarød Transmission (NIT) kan måske I fremtiden bestemme indholdet af f. eks. DON i korn.

Ikke færdigudviklet de nærmeste år

Ministeriet for Fødevarer, Landbrug og FiskeriDanmarks JordbrugsForskning

Der findes gode og billige analysemetoder til fusarium-toksiner i korn og majs-ensilage.

Ikke i dag analysemetoder, der hurtigt kan afgøre, om kornet ved indvejning indeholdertoksiner over eller under grænseværdien.

Kommende undersøgelser kan vise omandre toksiner er relevante.

Plantekongres 2005 – Niels Henrik SpliidHar vi gode og billige analysemetoder?

Konklusion: