1

中藥標準化研究

古源翎 博士

天然藥物研發處財團法人醫藥工業技術發展中心Aug 14, 2011

2

民國九十八年(2009)國民醫療保健支出

37,288Health care appliance醫療保健用品

19,087Chinese Medicine中藥

45,971Western Medicine西藥

102,346 Expenditure of medical article醫藥用品支出

WesternMedicine

西藥45%

ChineseMedicine

中藥19%

Health careappliance

醫療保健用品36%

西藥 Western Medicine

中藥 Chinese Medicine

醫療保健用品 Health careappliance

單位：百萬新台幣

3

中藥是否需要定標準

標準要包括哪些項目

4

現代化及科學化程度仍不足 (功效、療效、安全性不明)

可控制性仍不足 (品質未確保)

標準化程度仍不足 (品質未確保)

劑型仍較落伍 (接受度差)

產品同質性程度過高 (競爭性大，利潤低)

技術及智財保護性不足 (成果無法確保)

中藥相關產品現有缺失及問題

5

標準要包括哪些項目

藥材名稱藥材基原藥材(飲片)規格炮製方法傳統成方製劑(丹膏丸散)複方濃縮製劑(科學中藥)單味濃縮製劑(科學中藥)指標成分含量異常物質限量(農藥、重金屬)……

6

7

科學化的標準

中藥科學化與新藥研發

8

9

臨床前研發臨床前研發 臨床Ⅰ期臨床Ⅰ期 臨床Ⅱ期臨床Ⅱ期 臨床Ⅲ期臨床Ⅲ期 上市監督上市監督

價值 1X 2X 3-5X 8-10X >12X

新藥上市許可(NDA)

藥物臨床試驗許可(IND)

植物新藥開發價值鏈

10

許多藥物來自天然物

動物、植物、真菌、微生物、礦物

神農嚐百草 ，醫術，藥食同源，宗教儀式，巫術

單複方萃取物、部份純化、單離成分

化學合成藥物

煉丹術、偶然發現

修改天然物化學結構、構效合理設計

11

大規模篩選尋找新藥

天然萃取物活性導向分離，組合化學大量產出

老藥新用、化合物資料庫、電腦輔助設計

組織培養、生物技術

基因工程，生產或剔除特定化合物

生物多樣性、基因改造

物種保育、環境保護

12

生物體本身是一個複雜的化學工廠

結構特異性

立體選擇性

內生性化合物 (生理機能)營養素代謝物抗生物質

13

天然物化學成分之研究

可得到特殊結構

具生物活性

基原相近的物種含相近的化學成分

以萃取物進行分離

結構導向的分離

活性導向的分離

Active Fraction (Partial Purified)

14

15

16

研發時程短研發費用低品質一致功效、療效明確安全無虞產品具區隔及特異性具技術及智財權保護

利基性產品的研發

17

1. 以現代科學及醫學為研究基礎

2. 證明品質穩定，療效或功效明確，安全無虞

3. 符合日益明確、嚴格的法規要求

中草藥研發趨勢

18

新藥開發

藥材研究

19

中藥濃縮製劑每一處方中應選擇來自不同原料藥之二種以上指標成分予以定量

89.7.24自民國九十年元月一日起，申請葛根湯、小青龍湯、加味消遙散、桂枝湯、甘露飲、麻杏甘石湯、補中益氣湯、六味地黃丸、黃連解毒湯、獨活寄生湯等十方濃縮製劑…

91.12.22自民國九十二年二月一日起，除本署八十九年七月二十四日衛中會藥字第八九０四０二五六號所公告「葛根湯」等十方濃縮製劑外，知柏地黃丸、龍膽瀉肝湯、辛夷清肺湯、血府逐瘀湯、杞菊地黃丸、消風散、清心蓮子飲、四逆散、定喘湯、柴葛解肌湯等十方濃縮製劑…

95.8.23自民國96年1月1日起，藥廠申請「炙甘草湯、八味地黃丸、川芎茶調散、逍遙散、藿香正氣散、香砂六君子湯、荊防敗毒散、疏經活血湯、止嗽散、濟生腎氣丸、防風通聖散、二陳湯、六君子湯」等13方濃縮製劑…

中藥濃縮製劑相關法規

20

I. 國內外法規– Guidance for Industry Botanical Drug Product

(FDA 2004.06）– 中藥新藥臨床試驗基準 (CCMP 2008.02.05）– 植物藥新藥臨床試驗基準 (BPA 2009.03.31）– 植物藥新藥查驗登記審查基準(草案) (TFDA 2010.12 )

II. 植物來源新藥研發– Veregen® (FDA)– LipoCol Forte壽美降脂一號 (CCMP)– PG2血寶(TFDA)

新藥相關法規

21

植物藥新藥臨床試驗基準

22

○○△1.9.6. 酸不溶性灰分 （Acid insoluble ash）

○○△1.9.5. 總灰分 （Total ash）

○○△若可行 （if available）1.9.4. 生物活性試驗2 （Biological

assay）

○○△每種藥材至少一個合理的指標成分 （each raw material at least one reasonable active/marker ingredient）

1.9.3. 有效/指標成分定量分析2 （Assay for active/marker ingredients）

○○△1.9.2. 有效/指標成分鑑定（Chemical identification for active/marker ingredients）

○○△光譜分析指紋圖譜（spectroscopic fingerprint）或色層分析指紋圖譜（chromatographic fingerprint）

1.9.1. 光譜或層析圖檢查（Spectroscopic or chromatographic examination）

○○△

與成品同批之成績書及批次分析數據（CoA of the lot used for the production of the finished product and the Batch Analyses Data）

1.9. 檢驗成績書（Certificate of analysis）

註：○ 表示須檢附該項目之資料。△ 表示視個案而定。

表示毋須檢附該項目之資料

中藥新藥臨床試驗（IND）化學製造與管制（CMC）技術性資料查檢表藥材（Raw material）

Phase I II III

23

黃連解毒湯 黃連 小蘗鹼berberine>4.2%

黃芩 黃芩苷baicalin>8%

黃柏 小蘗鹼berberine>1.2%

山梔子 梔子苷geniposide>2%

O

HOH2CH

H

O

O OMe

O

OH

OH

OH

HO

Geniposide

Berberine

+N

O

OOMe

OMe Baicalin

O

OOHHO

OO

OH

OH

COOH

OH

1.9.3 每種藥材至少一個合理的指標成分例1：

指標成分依據：中華中藥典(台灣傳統藥典)

毛茛科-黃連芸香科-黃柏 (黃蘗)小蘗科-十大功勞

24

龍膽瀉肝湯 龍膽

當歸 阿魏酸ferulic acid >0.03%

柴胡 柴胡皂苷a+柴胡皂苷c+柴胡皂苷d (Saikosaponins) >0.8%

黃芩 黃芩苷 baicalin >8%

澤瀉 澤瀉醇B乙酸乙酯alisol B monoacetate >0.03%

木通

甘草 甘草酸glycyrrhizic acid 2-6%

生地黃 梓醇Catapol

車前子

山梔子 梔子苷geniposide >2%

COOHMeO

HO

Ferulic acid

O

HOH2CH

H

O

O OMe

O

OH

OH

OH

HO

Geniposide

Baicalin

O

OOHHO

OO

OH

OH

COOH

OH

O

Alisol B monoacetate

HO

O

OAc

Saikosaponin A : R=β-OHSaikosaponin D : R=α-OH

O

Me

OH

OO

OHOH

OH

O

R

O

OHOH

HO

Saikosaponin C

O

OH

OH

O

OHOH

OH O

OH

O

OH

HOO

O

O

OH

Me

OHOH

1.9.3 每種藥材至少一個合理的指標成分例2：

25

1.9.3 每種藥材至少一個合理的指標成分

例3： 華陽複方 !!

26

http://www.biopharm.org.tw/news/11092005/經濟部生物技術與醫藥工業發展推動小組

美國Sun Farm Corporation (SFC) 成立於1990年創辦人兼執行長孫士銧博士

華陽複方 (SV)，係以黃豆、綠豆、小扁豆、蘑菇、香菜、青葱、洋黃豆、綠豆、小扁豆、蘑菇、香菜、青葱、洋葱、大蒜、韭菜、生薑、橄欖、黑芝麻、山楂、紅棗、人參、當歸、葱、大蒜、韭菜、生薑、橄欖、黑芝麻、山楂、紅棗、人參、當歸、甘草、遠志、蒲公英甘草、遠志、蒲公英等19種天然植物所組成。

獲美國FDA核准進行人體臨床第三期試驗，成為全球第一例依美國FDA植物新藥規範(Guidance for Industry, Botanical Drug Products)進入人體臨床第三期試驗之公司，該項技術並已獲美國、加拿大等21國七項專利。其他有關前列腺癌、AIDS、疱疹病毒、EB病毒等疾病治療研發，亦同步進行中。

1.9.3 每種藥材至少一個合理的指標成分

例3： 華陽複方

27

2. 「1.9.3. 有效/指標成分定量分析」及「1.9.4. 生物活性試驗」得檢附原因擇一執行；複方製劑若選擇「生物活性試驗」作為檢驗項目者，僅需檢附半製品/藥品查檢表之2.6.5.項「生物活性試驗」檢驗成績。複方藥材之「指標成分定量分析」應取主要療效藥材及毒性藥材成分至少兩個為指標，最好該指標成分為已知化合物，並備有標準品。

中藥新藥臨床試驗（IND）化學製造與管制（CMC）技術性資料查檢表藥材（Raw material）

28

1.9.3. 有效/指標成分定量分析 及1.9.4. 生物活性試驗 得檢附原因 擇一執行擇一執行

例3：華陽複方(SV)

華陽複方，係為以黃豆、蘑菇、綠豆、青葱、大蒜、韭菜、洋葱、小扁豆、紅棗、山楂、橄欖、人參、當歸、甘草、蒲公英、遠志根、生薑、黑芝麻、香菜等19種天然植物，運用其inositol hexaphosphate減緩／阻斷癌細胞增殖；genistein（大豆異黃酮）阻斷癌細胞氧氣及營養來源；daidzein, coumestrol阻斷攝護腺癌生長；lentinan（香菇多醣）增進免疫系統活動；提高Il-1, TNF, LAK, 細胞毒殺性T淋巴球（cytotoxic T lymphocytes）生產能力等技術進行腫瘤治療之研究。

http://www.biopharm.org.tw/news/11092005/經濟部生物技術與醫藥工業發展推動小組

29

Veregen® 2006.10

The first botanical drug (ointment) approved for prescription use in the USDrug substance: sinecatechins, 15%Partially purified water extract of green tea leaves from Camellia sinensis (L.) O KuntzeMixture of catechins and other green tea componentsCatechins constitute 85-95% (w/w)Known catechin: EGCg (Epigallocatechin galate, >55%), EC, EGC, ECg, GCg, GC, Cg, CGallic acid, caffeine, and theobromine ~2.5%Undefined botanical constituents derived from green tea leaves

http://www.veregenrx.com/veregenrx/pdver_web_default.html

30http://www.veregenrx.com/veregenrx/pdver_web_default.html

31http://www.veregenrx.com/veregenrx/pdver_web_default.html

32

化學分析

化學鑑別

基原鑑定

中草藥分析檢測研究

33

藥材基原鑑定

34

35

Flora of Taiwan 2nd Ed http://tai2.ntu.edu.tw/udth/bin/fot1.exe/browse?BID=4&page=733

36

藥材基原鑑定

外觀特徵、顏色、氣味

化學分析TLC, HPLC, LC-MS/MS

組織切片、顯微鏡檢

分子標記DNA ITS序列

37

絡石藤

基原：夾竹桃科植物 絡石Trachelospermum jasminoides (Lindl.) Lern.部位：乾燥帶葉藤莖

單一藥材：多批次化學分析/基原鑑別

38

絡石藤 HPLC層析圖

單一藥材：多批次化學分析/基原鑑別

39

絡石藤 HPLC 3D層析圖

單一藥材：多批次化學分析/基原鑑別

40

絡石藤 雷達圖

單一藥材：多批次化學分析/基原鑑別

41

化橘紅(2種基原：化州柚，柚)

基原：芸香科Rutaceae植物化州柚Citrus grandis (L.) Osbeck var. tomentosa Hort.

部位：乾燥外層果皮

單一藥材：具2種以上基原/多批次

42min0 20 40 60 80 100

mAU

0

20

40

60

80

DAD1 C, Sig=254,4 Ref=500,8 (LINDA\08072105.D)

3.2

11 3

.975

4.4

43 5

.732

10.

755

13.

470

17.

527

19.

511

29.

564

31.

036

34.

346

35.

338

39.

699

44.

116

59.

428

78.

223

min0 20 40 60 80

mAU

0

20

40

60

80

DAD1 C, Sig=254,4 Ref=500,8 (LINDA\08062004.D)

3.2

42 4

.025

5.7

56

9.4

10 1

0.59

8 17.

297

20.

305

25.

041

29.

141

30.

504

33.

754

34.

696

39.

035

53.2

29 5

4.83

7 5

5.47

8

58.

429

61.

445

77.

071

77.

762

單一藥材：具2種以上基原/化學鑑別

43

三葉木通(木通科Lardizabalaceae)Akebia trifoliata (Thunb.) Koidz.乾燥藤莖

五葉木通(木通科Lardizabalaceae)Akebia quinata (Thunb.) Decne.乾燥藤莖

單一藥材：具2種以上基原/化學鑑別

44

垂序商陸(商陸科Lardizabalaceae)Phytolacca americana L.乾燥根

商陸(商陸科Lardizabalaceae)Phytolacca acinosa Roxb.乾燥根

單一藥材：具2種以上基原/化學鑑別

45

藥材名相近，易混淆誤用：化學鑑別

山茱萸(山茱萸科Cornaceae)Cornus officinalis Sieb. et Zucc.乾燥成熟果肉

吳茱萸(芸香科Rutaceae)Evodia rutaecarpa (Juss.) Benth.乾燥近成熟果實

46

THE LANCETVolume 341, Issue 8842, 13 February 1993, Pages 387-391Rapidly progressive interstitial renal fibrosis in young women: Rapidly progressive interstitial renal fibrosis in young women: association with slimming regimen including Chinese herbsassociation with slimming regimen including Chinese herbsProf J-L. Vanherweghem MDa, , C. Tielemans MDa, D. Abramowicz MDa, M. Depierreux MDb, Prof R. Vanhaelen-Fastre PhDc, M. Vanhaelen PhDc, M. Dratwa MDd, C. Richard MDe, D. Vandervelde MDf, D. Verbeelen MDgand M. Jadoul MDh

在比利時首都布魯塞爾附近有許多位婦女因服用了含防己的減肥藥而造成腎衰竭的病例，其特徵是腎間質細胞廣泛性纖維化、腎小管萎縮，而且很快就腎衰竭，他把這種現象稱為中草藥腎病（Chinese Herbs Nephropathy，簡稱CHN）。1994年Vanhaelen證實比利時以粉防己（防己科）名義進口的市場品，其實主要是含馬兜鈴酸的廣防己（馬兜鈴科）。

47

植物性狀 − 可區分

藥材外觀 − 相似

理化鑑別 − 可區分

結 論

粉防己與廣防己

48

案例：湖南連翹藥粉中指標成分含量測定

藥材：Hypericum ascyron L.指標成分：Hypericin

O

O

OHOH

OHOH

H3CH3C

OH OH

SIGMA:~95% (HPLC) 1 mg219 USD

Freely soluble in pyridine and other organic bases yielding cherry-red solnswith fluorescence.Soluble in alkaline aq solutions.Almost insoluble in most other organic solvents.

49

湖南連翹又名紅旱蓮金絲桃科 GuttiferaeHypericum ascyron L.

墨旱蓮菊科 Compositae鱧腸 Eclipta prostrata L.

連翹木犀科 Oleaceae連翹 Forsythia suspense (Thunb.) Vahl

化學分析/化學鑑別

50

紅旱蓮、湖南連翹(金絲桃科)湖南連翹Hypericum ascyron L.乾燥地上部

連翹(木犀科)連翹Forsythia suspense (Thunb.) Vahl乾燥果實

化學分析/化學鑑別

51

複方成分研究

52

min0 10 20 30 40 50 60 70 80

Norm.

0

50

100

150

200

DAD1 C, Sig=254,4 Ref=off (LINDA\08081405.D)

3.3

27

4.5

47 5

.431

8.5

61

10.

793

21.

299

22.

190

24.

103

25.

449

26.

413

27.

216

27.

728

29.

012

29.

767

30.

424

31.

084 31.

964

38.

542

39.

204

40.

962

41.

804

48.

353

52.

564

54.

126

56.

401

57.

987

59.

859

min0 10 20 30 40 50 60 70 80

Norm.

0

10

20

30

40

50

DAD1 C, Sig=254,4 Ref=off (LINDA\08081407.D)

3.3

05

4.6

44

8.5

84

22.

175

25.

869

26.

396

27.

715

29.

402

30.

012

31.

509

31.

941

52.

996

72.

447

73.

747

min0 10 20 30 40 50 60 70 80

Norm.

0

20

40

60

80

DAD1 C, Sig=254,4 Ref=off (LINDA\08081409.D)

10.

788

21.

261

24.

069

25.

396

27.

163

28.

945 2

9.70

3 3

0.34

7 3

0.98

6

38.

332

38.

945

40.

726

47.

976 5

2.49

8

54.

074

56.

436

57.

962

59.

557

A＋B

A

B

53

台灣中草藥網 http://www.tcmp.com.tw/

54

抗胃潰瘍中草藥PDC-339止咳中草藥PDC-748抗憂鬱中草藥PDC-1421

藥技中心新藥研發成果

55

TCA MAOIAtypical

SSRI (Selective Serotonin Reuptake Inhibitors)SNaRI (Serotonin and Noradrenergic Reuptake

Inhibitors)NaSSA (Noradrenergic and specific Serotoninergic

Antidepressants)NaRI (Noradrenaline Reuptake Inhibitors)

Antidepressants

56

57

58

59

子非魚 安知魚之樂

60

http://www.tcmp.com.twDatabase

61

Database

62

謝謝

天然藥物研發處財團法人醫藥工業技術發展中心http://www.pitdc.org.tw