Upload
others
View
4
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
ENTEROBACTERIACEAE
CAMPYLOBACTER
HELICOBACTER
ÚLOHY - Enterobaktérie
SKUPINA 1 SKUPINA 2 SKUPINA 3 SKUPINA 4
Selektívne a diagnostické pôdy používané na kultiváciu enterobaktérií
Raussov fenomén Burriho tušová metóda
Určovanie biochemických vlastností enterobaktérií(Hajnova pôda, ENTEROTEST)
Dôkaz produkcie ureázyTvorba indolu
Campylobacterjejuni – všeobecná charakteristika
Campylobacterjejuni – ochorenia, laboratórna diagnostika a liečba
H. pylorivšeobecná charakteristika
H. pyloriochorenia, laboratórna diagnostika a liečba
MIKROSKOPIA
GRAM
BURRI
Escherichia coli - fakultatívne anaeróbna - gramnegatívna palička, pohyblivá
v hrubom čreve teplokrvných živočíchov. Je jedným z najdôležitejších zástupcov črevnej mikroflóry
Salmonella)- fakultatívne anaeróbna - gramnegatívna palička, pohybliváČlenenie rodu - revidované, donedávna boli jednotlivé sérotypypovažované za samostatné druhy. Genetická analýza - rod obsahuje jediný známy druh, Salmonellaenterica, ktorý sa člení na viacero poddruhov.
E. coli Proteus
Klebsiella (BURRI)
Salmonella Shigella
KULTIVÁCIA
Krvný agar
Endo agar
DC (dezoxycholátcitrátový) agar
Opuzdrené kmene tvoria hlienovité kolónie
- nepohyblivá
plazivý rast, Raussov fenomén : – koncentrický rast od jedinej kolónie
deoxycholát-citrátovom agare
Pohyblivosť P. mirabilis je možné identifikovať aj na základe Raussovho fenoménu. Vyšetrovaný kmeň sa naočkuje do stredu platne s kultivačnou pôdou (krvný agar). Počas kultivácie dochádza k postupnému plazivému narastaniu baktériovej populácie od stredu k okrajom petriho misky. Tento jav sa označuje ako Raussov fenomén.
ENDO AGAR Selektivita Endo agaru je vytvorená kombináciou siričitanu a bázického fuchsínu, ktoré potláčajú
rast gram-pozitívnych mikroorganizmov. Koliformné baktérie skvasujúce laktózu tvoria ružovo-červené až silno červené vypuklé kolónie,
v niektorých prípadoch so zlatým kovovým leskom. Rovnako sa sfarbuje médium okolo kolónií. Mikroorganizmy, ktoré laktózu nefermentujú sú bezfarebné, dobre pozorovateľné oproti
ružovému pozadiu pôdy.
DEZOXYCHOLÁT - CITRÁTOVÝ AGAR
(DEOXYCHOLATE CITRATE AGAR) Je to tuhá, selektívna pôda,
izolácia patogénnych črevných enterobaktérií
rozlišovanie Salmonell a Shigell.
Selektivita je dosiahnutá pridaním dezoxycholanu sodného a citronanov, ktorý inhibujegrampozitívne baktérie
Enterobaktérie sú diferencované skvasovaním laktózy v pôde.
Tvorba kyseliny je indikovaná neutrálnou červeňou, vznikom červeno sfarbených kolónií.
Niektoré kmene Salmonell a Proteusov (H2S pozitívne) tvoria na tejto pôde šedé až čierne stredy.
Rast E. coli je na tejto pôde čiastočne potlačený, ale niektoré vitálnejšie kmene môžu rásť ako sýtoružové až červené kolónie.
Testovanie biochemickej aktivity
HAJNOVA pôda
ENTEROTESTY
Hajnova pôda – šikmo naliata, tuhá červená pôda na stanovenie biochemických vlastností enterobaktérií.
ZLOŽENIE:
glukóza, sacharóza, laktóza, železité soli
+ farebný indikátor pH (fenolová červeň)
Zožltnutie pôdy znamená pozitívne skvasovanie.
Pôda obsahuje soli Fe, baktérie tvoriace sírovodík spôsobia sčernanie dolnej časti pôdy.
Baktérie, ktoré tvoria plyn, spôsobia trhliny, bubliny v pôde.
Pôdu očkujeme kľučkou, naočkujeme vždy iba jednu izolovanú kolóniu.
7. Sérotypizácia enterobaktérií
Na podložnom sklíčku – suspenzia s FR
1) Suspenzia + kvapka polyvalentných sér
s + poly 1,2,3 = aggl+ S+ poly 4,5,6 = aggl –
2) Suspenzia + kvapka monovalentných sér
s + mono 1 = aggl.+ s + mono 2 = aggl – s + mono 3 = aggl.–
Výsledok – testovaný kmeň je typ 1
Widalova reakcia – diagnostika brušného týfusu
kultiváciacia (priama diagnostika):
- krvi (7.-10. deň),
- stolice (od 2. týždňa),
- kostnej drene, moču (od 3. týždňa)
a
- zisťovanie aglutinínov v sére - Widalova reakcia (nepriama diagnostika)
- - protilátky proti O a H antigénom S. typhi
- štvornásobný vzostup titra protilátok
- akútne ochorenie alebo na vyhľadávanie nosičov
Znalosti klinického obrazu a patogenézy - Ochorenie začína ingesciou baktérií.Inkubačný čas je 1-2 týždne.
Pri väčšom inokule sa môže vyskytnúť akútna gastroenteritída.
Baktérie prenikajú cez mukózu tenkého čreva ( invázia) endocystózou do submukózy.
Množia sa v submukózze a sú vychytávané do lymfatických uzlín, kde sa množia v makrofágoch,
dostávajú sa do krvi (perzistujúca bakterémia) a
orgánov RES a ostatných orgánov (hemorhagie, kožná rozeola, orgánové komplikácie)
0
20
40
60
80
100
1 2 3 4 5 6 7 8
moč
stolica
sérum
krv
Campylobacter- paličkovité , G-, pohyblivé, 11 druhov ,7 poddruhov
- Vyžaduje mikroerofilné prostredie, teplotu 42*C
Campylobacter jejuni :
- gastroenteritída, u pacientov so zníženouimunitou –
- Infikuje sliznicu jejuna, ilea a colon, ktorá je edematózna, krvavá, tvorba krýpt, abscesov.Infiltrácia do lamina propria.
- enterotoxín, cytoptický toxín, endotoxín
- Hydina
Campylobacter coli - gastroenteritis,
Campylobacter fetus – septikémia, artritída, tromboflebitída, meningitida
Lab dg :
- kultivácia na selektívnych pôdach, mikroskopia, biochemická identifikácia
- Terapia: ERY
https://pdfs.semanticscholar.org/95c9/b9105222c5149f36764cba96cbb545d0b660.pdf
Helicobacter Špirálovité paličky, G-, v súvislosti s B gastritídou,
žalúdočným a duodenálnym vredom., príp. Ca –
Patogenéza
– produkcia ureázy – vytvára oblak amoniaku, ktorý chráni baktériu před účinkom žal. kyseliny,
- pohyblivosť, - tvorba mucinázy – prienik baktérie do mukóznych vrstiev
– adherencia – prichytenie baktérie na intracelulárne spoje
– zápal s infiltráciou mononukleárov v lamina propria
- uniká prítomným protilátkam IgA – svojoulokalizáciou v mukóze.
Neexistuje zvierací rezervoár – prenosinterhumánny
Terapia: ATB . Bizmutové soli, nitroimidazol a amoxicilin alebo TTC https://sk.wikipedia.org/wiki/Helicobacter_pylori#/media/S%C3%BAbor:H_pylori_virulence_facto
rs_en.png
H. pylori – laboratórna diagnostika
Zdroje:
Kompaníková Jana, Elena Nováková, Martina Neuschlová: Mikrobiológia nielen pre medikov - 2. upravené a doplnené vydanie. Multimediálna podpora výučby klinických a zdravotníckych disciplín :: Portál Jesseniovej lekárskej fakulty Univerzity Komenského [online] , [cit. 27. 10. 2020]. Dostupný z WWW: https://portal.jfmed.uniba.sk//clanky.php?aid=398. ISSN 1337-7396.
Murray, P. R., Rosenthal, K. S., & Pfaller, M. A. (2013). Medical microbiology. Philadelphia: Elsevier/Saunders.
https://www.alphamedical.sk/casopis-invitro/helicobacter-pylori