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El splicing de El splicing de oskar oskar mRNA esta acoplado con mRNA esta acoplado con su localización su localización citoplasmática citoplasmática

El splicing de oskar mRNA esta acoplado con su localización citoplasmática

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El splicing de oskar mRNA esta acoplado con su localización citoplasmática. Y14 y Mago se colocalizan con oskar m RNA en el polo posterior del oocito de D. melanogaster . - PowerPoint PPT Presentation

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Page 1: El splicing de  oskar  mRNA esta acoplado con  su localización citoplasmática

El splicing de El splicing de oskar oskar mRNA esta acoplado con mRNA esta acoplado con

su localización su localización citoplasmáticacitoplasmática

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Y14 y Mago se Y14 y Mago se colocalizan con colocalizan con oskaroskar

mmRNA en el polo RNA en el polo posterior del oocito de posterior del oocito de D. melanogasterD. melanogaster..

La correcta La correcta localización del localización del transcrito de transcrito de oskaroskar es es esencial para el esencial para el desarrollo del desarrollo del abdomen (y para la abdomen (y para la línea germinal).línea germinal).

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Heterodímero Y14 y Mago forman parte del EJC.

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Splicing del primer intrón de Splicing del primer intrón de oskar oskar mmRNA RNA es esencial para su correcta es esencial para su correcta localización.localización.

¿Contradicción con la suficiencia de la ¿Contradicción con la suficiencia de la región 3’ UTR para la correcta región 3’ UTR para la correcta localización? Puede que los anteriores localización? Puede que los anteriores trabajos estuviesen afectados por trabajos estuviesen afectados por transcritos de transcritos de oskar oskar endógenos.endógenos.

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Efectos de diferentes Efectos de diferentes oskar oskar mmRNA con RNA con intrones delecionados (en intrones delecionados (en oskoskA87A87/Df(3R)p/Df(3R)pXT103XT103))

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Efectos de diferentes Efectos de diferentes oskar oskar mRNA con mRNA con intrones delecionados (en intrones delecionados (en

oskA87/Df(3R)pXT103)oskA87/Df(3R)pXT103) oskΔi(1,2,3)transporte correcto, pero difuso a partir del estadío 8 aunque hay la misma cantidad de transcrito. 2/3 de los huevos no eclosionan. Poca traducción.

Transcritos transgénicos con i1 [oskWT, oskΔi2 ,

oskΔi3 y oskΔi(2,3)] correctamente localizados. Suficiente para que Y14 se asocie con el transcrito.

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Transcritos transgénicos sin i1 [oskΔi1 oskΔi(1,2) oskΔi(1,3) ] no se localiza en el polo posterior no se localiza en el polo posterior en los estadios 9 y 10 aunque el splicing de en los estadios 9 y 10 aunque el splicing de i2i2 y y i3i3 sea correcto. sea correcto.

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ConclusiónConclusión

i1i1 tiene una función diferente de tiene una función diferente de i2i2 y y i3 i3 en la localización del transcrito. Hay en la localización del transcrito. Hay 2 posibilidades:2 posibilidades:

i1 i1 contiene información específica de contiene información específica de secuencia.secuencia.

El splicing en la posición El splicing en la posición i1i1 es es esencial para la localización de esencial para la localización de oskar oskar mRNA.mRNA.

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Utilizando el transgénico osk(i3 in i1) se vio que se localizaba correctamente con Y14. Así pues el reclutamiento de Y14 es independiente de la secuencia del intrón.

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Revisión de los trabajos con Revisión de los trabajos con RNA híbrido RNA híbrido lacZ-osk3’UTRlacZ-osk3’UTR

Puede que Puede que oskaroskar RNA endógeno RNA endógeno afecte a los resultados. La afecte a los resultados. La localización de localización de lacZ-osk3’UTR lacZ-osk3’UTR en osken oskA87A87/Df(3R)p/Df(3R)pXT103 XT103 no es no es posible porque la oogenesis posible porque la oogenesis se detiene en sus primeros se detiene en sus primeros estadios. Se utilizaron: estadios. Se utilizaron:

oskWToskWT localizacion correcta localizacion correcta oskoskΔΔi(1,2,3)i(1,2,3) deslocalizado deslocalizado oskosk8484 localización correcta localización correcta

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ConclusionesConclusiones

LacZ-osk3’UTR necesita una fuente endógena de oskar mRNA para su localización en el polo posterior del oocito.

La localización es independiente de la proteína Oskar.

La localización de lacZ-osk3’UTR en el polo posterior se debe probablemente a que se une a los complejos mRNP.

La región 3’UTR es esencial, ya que los trancritos`sin 3’UTR no se localizan.

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Solo la deposición del EJC en la primera unión exón-exón es esencial,

aunque EJC se une a todas.

Se requiere una señal de EJC y una posición concreta.

Papel estructural del heterodímero Y14-Mago nashi, y de eIF4AIII y Barentsz.

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EJCEJC

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ConclusionesConclusiones

Que el splicing, y Y14 y Mago nashi Que el splicing, y Y14 y Mago nashi sean esenciales para su localización, sean esenciales para su localización, demuestra que el splicing y la demuestra que el splicing y la localización están acopladas por la localización están acopladas por la deposición dependiente del splicing deposición dependiente del splicing del EJC.del EJC.

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Propuesta de función del Propuesta de función del EJCEJC

Especificar la estructura del mRNP según sea su localización citoplásmica.

En humanos la señalización con EJC permite reconocer codones de parada prematuros provocando la activación de NMD (degradación de mRNA).

En Drosophila factores de NMD y EJC están conservados, pero la terminación prematura no depende de EJC ni de la posición del intrón. Sugiere un complejo conservado con diferentes funciones.

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No quiere decir que el EJC no este implicado en la localización citoplásmica de mRNA en vertebrados, ya que se ha detectado Barentsz en neuronas del hipocampo.

Se podrá utilizar para determinar si el transporte de otros mRNAs es mediante EJC y para determinar la importancia de la conservación del EJC.