366 Bericht : Spezielle analytische Methoden Bd. 209 Salzs~ure wird 1 ml 1~ ige ThionalidlSsung in 950/0 Athanol zugegeben und 5--7 rain in 10 ml Chloroform -b Isoamy]ol (2:1) extrahiert. Die Extinktion dieser Schicht wird naeh 10--15 rain gemessen. Das Lambert-Beersche Gesetz wird fiir 4--100 #g Pd/ml bei 375 nm befo]gt. Absorptionsmaximum des Produktes ist bei 375 nm mit s = 12100. Die Empfindlichkeit ist 0,2 #g Pd/ml. PtlV, l~hnI, IrnI, l~ulV, OslV im Verh~ltnis 1000:1 reagieren im gegebenen Medium nicht oder geben nieht extra- hierende Produkte und stSren nicht. Co, Ni (t000:l) werden nur bei pI-I 6--8 gefi~llt. MoO~- gibt ein gelbes extrahierendes Produkt und muB ~hnlich wie Fe hI, Bi, Zn, Pb und SnlV mit Weins~ure maskiert werden. Der Fehler iiberschreitet nicht _~5~ in Gegenwart der erwiihnten Elemente im Verh~ltnis 100:1. 1 ~. anal. Chim. 18, 1479--1482 (1964) [l~ussisch]. (Mit eng]. Zus.fass.) Lomo- nosov-Universit~t, Moskau (UdSSg). L. Solacer IV. Spezielle analytisehe Methoden 4. Analyse yon biologisehem Material Die Verwendung von Vitamin B12 als analytisches Hilfsmittel, als biochemischer Tracer und als diagnostisches Agens ist Gegenstand einer Arbeit yon C. ROSE~BLU~ 1. Von verschiedenen markierten Verbindungen sind nur dig mit Kobalt-Isotopen markierten in physiologischen Dosierungen yon ~utzen. Wegen der hohen spezifischen Aktivit~ten yon 1--200 #c/~g 1assert sich ~qachweisgrenzen von mit I~adiokobalt markiertem Vitamin B12 bis zum Picogrammbereich realisieren. Klinische Anwendungen, wie diagnostische Tests auf perniciSse Anemic beim Menschen, sind gewissermal3en analytische Vorg~nge, die Messungen des Vitamin Bl~-Transports erfordern. Von deutlicherem analytischem Charakter ist die Anwen- dung der Isotopenverdiinnungsmethode auf pharmazeutische Pr~iparate, Nahrungs- konzentrate, Ab]all- und Ggrungsprodukte und kristalline Cobalamine. -- Die um- gekehrte Isotopenverdfinnungsmethode ist zur Erleicllterung yon Stabilit~ts- und Abbauuntersuchungen ebenfalls sehr niitzlich. Auf diese Weise kann die quantitative Gewinnung unvers Cyanocobalamins aus Getreide und aus biologische Konzentrate entha]tenden Pr~paraten durchgefiihrt werden. Umgekehrt konnte die Umwandiung "con Cyanocobalamin zu Hydroxocobalamin in der Leber yon mit markiertem Vitamin geffitterten Hunden nachgewiesen werden. Eine umfangreiche Untersuchung fiber Agentien zur Stabilisierung yon Vitamin B12 in ascorbinss haltigen L6sungen wurde mit Hilfe des umgekehrten Isotopenverdiinnungsverfah- tens durchgeffihrt. Die Empfindlichkeit der Isotopenverdiinnungsmethode wurde in Richtung auf physiologische Mengen stark ausgedehnt durch Anwendung der ,,S~ttigungsanalyse", einer Erweiterung der Messung der Bindungskraft, die auf ,,intrinsic factor"-Konzentrate und auf tierische Gewebe einschliel~lich Serum oder Plasma angewendet wurde. 1 Talanta (London) 11, 255--270 (1964). Merck Sharp & Dohme t~es. Labs., Div. Merck & Co., Inc., ]~ahway, N. J. (USA). W. CzYsz Die Mikrobestimmung der primitren Aminogruppen in Aminos~turen und Polypeptiden fiihren B. G. BELE~'KIJ und V. A. ORESTOVA 1 durch Kombination der Van Slykeschen Methode mit der Gas-Chromatographic durch. DiG analysierte Aminosaure wird mit Natriumnitrit und Eisessig innerhalb 5 min zersetzt und das gebildete Gas im I-Ieliumstrom in die chromatographische Ko]onne yon 5 mm Innen- durchmesser bei Zimmertemperatur geffihrt. Die Kolonne ist mit Molekularsieb 5

Die Verwendung von Vitamin B12 als analytisches Hilfsmittel, als biochemischer Tracer und als diagnostisches Agens

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Page 1: Die Verwendung von Vitamin B12 als analytisches Hilfsmittel, als biochemischer Tracer und als diagnostisches Agens

366 Bericht : Spezielle analytische Methoden Bd. 209

Salzs~ure wird 1 ml 1~ ige ThionalidlSsung in 950/0 Athanol zugegeben und 5--7 rain in 10 ml Chloroform -b Isoamy]ol (2:1) extrahiert. Die Extinktion dieser Schicht wird naeh 10--15 rain gemessen. Das Lambert-Beersche Gesetz wird fiir 4--100 #g Pd/ml bei 375 nm befo]gt. Absorptionsmaximum des Produktes ist bei 375 nm mit s = 12100. Die Empfindlichkeit ist 0,2 #g Pd/ml. PtlV, l~hnI, IrnI, l~ulV, OslV im Verh~ltnis 1000:1 reagieren im gegebenen Medium nicht oder geben nieht extra- hierende Produkte und stSren nicht. Co, Ni (t000:l) werden nur bei pI-I 6--8 gefi~llt. MoO~- gibt ein gelbes extrahierendes Produkt und muB ~hnlich wie Fe hI, Bi, Zn, Pb und SnlV mit Weins~ure maskiert werden. Der Fehler iiberschreitet nicht _~5~ in Gegenwart der erwiihnten Elemente im Verh~ltnis 100:1.

1 ~. anal. Chim. 18, 1479--1482 (1964) [l~ussisch]. (Mit eng]. Zus.fass.) Lomo- nosov-Universit~t, Moskau (UdSSg). L. Solacer

IV. Spezielle analytisehe Methoden

4. A n a l y s e y o n b i o l o g i s e h e m M a t e r i a l

Die Verwendung von Vitamin B12 als analytisches Hilfsmittel, als biochemischer Tracer und als diagnostisches Agens ist Gegenstand einer Arbeit yon C. ROSE~BLU~ 1. Von verschiedenen markierten Verbindungen sind nur dig mit Kobalt-Isotopen markierten in physiologischen Dosierungen yon ~utzen. Wegen der hohen spezifischen Aktivit~ten yon 1--200 #c/~g 1assert sich ~qachweisgrenzen von mit I~adiokobalt markiertem Vitamin B12 bis zum Picogrammbereich realisieren. Klinische Anwendungen, wie diagnostische Tests auf perniciSse Anemic beim Menschen, sind gewissermal3en analytische Vorg~nge, die Messungen des Vitamin Bl~-Transports erfordern. Von deutlicherem analytischem Charakter ist die Anwen- dung der Isotopenverdiinnungsmethode auf pharmazeutische Pr~iparate, Nahrungs- konzentrate, Ab]all- und Ggrungsprodukte und kristalline Cobalamine. -- Die um- gekehrte Isotopenverdfinnungsmethode ist zur Erleicllterung yon Stabilit~ts- und Abbauuntersuchungen ebenfalls sehr niitzlich. Auf diese Weise kann die quantitative Gewinnung unvers Cyanocobalamins aus Getreide und aus biologische Konzentrate entha]tenden Pr~paraten durchgefiihrt werden. Umgekehrt konnte die Umwandiung "con Cyanocobalamin zu Hydroxocobalamin in der Leber yon mit markiertem Vitamin geffitterten Hunden nachgewiesen werden. Eine umfangreiche Untersuchung fiber Agentien zur Stabilisierung yon Vitamin B12 in ascorbinss haltigen L6sungen wurde mit Hilfe des umgekehrten Isotopenverdiinnungsverfah- tens durchgeffihrt. Die Empfindlichkeit der Isotopenverdiinnungsmethode wurde in Richtung auf physiologische Mengen stark ausgedehnt durch Anwendung der ,,S~ttigungsanalyse", einer Erweiterung der Messung der Bindungskraft, die auf ,,intrinsic factor"-Konzentrate und auf tierische Gewebe einschliel~lich Serum oder Plasma angewendet wurde.

1 Talanta (London) 11, 255--270 (1964). Merck Sharp & Dohme t~es. Labs., Div. Merck & Co., Inc., ]~ahway, N. J. (USA). W. CzYsz

Die Mikrobestimmung der primitren Aminogruppen in Aminos~turen und Polypeptiden fiihren B. G. BELE~'KIJ und V. A. ORESTOVA 1 durch Kombination der Van Slykeschen Methode mit der Gas-Chromatographic durch. DiG analysierte Aminosaure wird mit Natriumnitrit und Eisessig innerhalb 5 min zersetzt und das gebildete Gas im I-Ieliumstrom in die chromatographische Ko]onne yon 5 mm Innen- durchmesser bei Zimmertemperatur geffihrt. Die Kolonne ist mit Molekularsieb 5