DETERMINAZIONE DEL PROCESSO DI DECONTAMINAZIONE

DI SUPERFICI TRAMITE APPLICAZIONE CON DISINFETTANTE

AD ALTO LIVELLO ADANTIUM PLUS IN MACCHINA

HYGIENIO

REPORT FINALE

Relazione : REPORT N° 5/2014

Committente :

FIS & DM S.r.l.Strada di Tavernolo, 2 05100 Terni (TR) Italy

Numero totali di pagine: 17

U.S. LABS s.r.l.

Capitale Sociale € 80.000,00 i.v.REA di Terni 91349R.I. P.IVA e C.F. 01365580552

Sede Legale ed OperativaStrada di Recentino,7 05100 Terni

Tel. e Fax +39 (0)744 455173e-mail: info@uslabs.itweb site: www.uslabs.it

DICHIARAZIONE DI CONFORMITA'

In relazione allo studio condotto, si dichiara che il seguente report descrive in modo fedele e veritiero le procedure adottate e i risultati ottenuti.Gli strumenti e le procedure adottate sono certificate in accordo con:

A) ACCREDIA- UNI EN ISO/ IEC 17025:2005 “ Requisiti generali per la competenza dei Laboratori di prova e taratura”.(Allegato III ).

B) IQNet / DQS- Certificazione ISO 9001:2008 ( Allegato IV ).

C) ISTITUTO SUPERIORE DI SANITA'-Approvazione del sistema di garanzia della qualità della produzione e/o della sterilizzazione ( Allegato V ).

D) UNI EN ISO 4833-1:2013 : Metodo orizzontale per la conta dei microrganismi - Parte 1: Conta delle colonie a 30 °C con la tecnica dell'inseminazione in profondità .

E) ISO/TS 19036:2006/Amd 1:2009 Measurement uncertainty for low counts.

F) UNI EN ISO 15883-1 e 2:2009- Apparecchi di lavaggio e disinfezione

Lo studio è stato coordinato dal gruppo di lavoro:

U. Sciamannini, Ph.D Data: 29/10/2014

( Study Director)

A. Sciamannini, A.D. Data: 29/10/2014

( General Administrator)

In collaborazione con:

Dott.ssa S. Saveri Senior Chemist FIS&DM Srl

Dott.ssa L. Alzalamira Biologa Jacaroni Centro Diagnostico

Dott.ssa L.Molinari Biologa Jacaroni Centro Diagnostico

Indice generale1. DATI DEL COMMITTENTE...........................................................................................................42. LABORATORIO DI PROVA...........................................................................................................43. DATI RELATIVI ALLA PROVA.....................................................................................................44. DOCUMENTI DI RIFERIMENTO..................................................................................................5

4.1 Normativa internazionale...........................................................................................................55. SCOPO.............................................................................................................................................56 DATI DELLA PROVA......................................................................................................................5

6.1 Descrizione del dispositivo HYGIENIO....................................................................................56.2 Descrizione del disinfettante ADANTIUM PLUS....................................................................56.3 Piano di campionamento............................................................................................................6

7. MATERIALI E METODI UTILIZZATI...........................................................................................67.1 Terreni di coltura e strumenti determinazione batterica.............................................................6

8. PROCEDURE OPERATIVE CONTA MICROBIOLOGICA..........................................................78.1 Modalità di esecuzione delle prove di analisi biologica............................................................78.2 Modalità di esecuzione delle prove............................................................................................88.3 Modalità di conteggio delle colonie...........................................................................................8

9. RISULTATI......................................................................................................................................910. CONCLUSIONI.............................................................................................................................911. ALLEGATI....................................................................................................................................10

1. DATI DEL COMMITTENTE FIS & DM S.r.l.Strada di Tavernolo, 2 05100 Terni (TR) Italy

2. LABORATORIO DI PROVA JACARONI Centro Diagnostico s.r.l.Via I Maggio, 6005100 Terni (TR) ItalyOperatore: Dott.ssa Marchetti

3. DATI RELATIVI ALLA PROVA

Oggetto dello studio è la determinazione dell'efficacia di disinfezione del disinfettante ADANTIUM PLUS mediante l'utilizzo del sanificatore HYGIENIO.I laboratori responsabili dell'esecuzione delle prove sono certificato ACCREDIA (Accreditamento numero: 0820 Rev.2 Scadenza: 2016-05-05- Allegato III).

Le prove sono state condotte il 14 Ottobre 2014 presso la sede produttiva della FIS & DM Srl.

È stata eseguita una prova di contaminazione batterica su una superficie piana di acciaio inox.

4. DOCUMENTI DI RIFERIMENTO

4.1 Normativa internazionale

Per il protocollo descritto nella presente relazione si è fatto riferimento alla normativa internazionale di seguito specificata.• Farmacopea Europea – edizione corrente• UNI EN ISO 4833:2004 - Metodo orizzontale per la conta di microrganismi - Tecnica

della conta delle colonie a 30 °C• UNI EN 15883-1:2009 - Apparecchi di lavaggio e disinfezione - Parte 1: Requisiti

generali, termini, definizioni e prove

5. SCOPOLa validazione consiste nel valutare l'efficacia del processo di lavaggio/decontaminazione ottenuto nell'uso sinergico del disinfettante “ADANTIUM PLUS” vaporizzati mediante l'utilizzo del dispositivo disinfettante HYGIENIO allo scopo di individuare e stimare la presenza/assenza di microrganismi vitali in definite condizioni di coltura.

6 DATI DELLA PROVA

6.1 Descrizione del dispositivo HYGIENIO

Hygienio è un sistema innovativo per l’applicazione a caldo del disinfettante, permette di disinfettare ad alto livello superfici e materiali di ogni tipo, rapidamente e con riutilizzo immediato degli spazi e delle attrezzature.Grazie al sistema HYGIENIO è possibile ottenere una miscela bifase (disinfettante liquido + vapore) che, a contatto con una generica superficie, condensa, permettendo un trattamento disinfettante continuo ed omogeneo. I getti di vapore, carichi di particelle disinfettanti, invadono, incollandosi ad essi, pavimenti, pareti, arredi ed oggetti di qualunque forma e materiale senza soluzione di continuità, ovvero, senza tralasciare microspazi, dove, batteri, micosi e muffe continuerebbero normalmente a proliferare.

6.2 Descrizione del disinfettante ADANTIUM PLUS

Adantium® Plus è un moderno preparato di sintesi, concentrato, per la contemporanea detersione e disinfezione ad azione sterilizzante mirata alla decontaminazione totale di Dispositivi Chirurgici termoresistenti in ambito ospedaliero, ai sensi della attuale legge sulla sicurezza. Adantium® Plus contiene il Diphedac un nuovo sale di sintesi che, da solo o risospeso, è in grado di contrastare efficacemente l’attività nucleasica delle RNasi presenti nel plasma, preservando dalla degradazione gli RNA sintetici aggiunti. Adantium® Plus, inoltre, protegge dalla degradazione gli RNA cellulari ad opera di RNasi A. L’aggiunta dell’idrossido di sodio conferisce una leggera alcalinità alla soluzione, aumentandone l’efficacia.

In conclusione, sulla base di evidenze sperimentali ottenute e in considerazione dell’alta resistenza all’inattivazione fisico-chimica delle RNasi, Adantium® Plus esercita un efficace ruolo inibitorio di queste nucleasi che, in ambito biologico, si traduce in un importante ruolo di contenimento/inattivazione della replicazione virale.

Principi attivi: Diphedac®, Complesso surfactante (composto da Alchil-dimetil-benzil ammonio cloruro e Lauryl.E.S.), Alcol isopropilico, Faracide liquid mix, Olio essenziale di Eucalipto, Olio essenziale di Agrumi, Idrossido di sodio, EDTA acido, Blu Patent, Acqua demineralizzata q.b.

6.3 Piano di campionamento

Per la prova batteriologica è stato effettuato:◦ un prelievo tramite tampone sterile, dopo decontaminazione e trattamento con

HYGIENIO/ADANTIUM PLUS di un piano di lavoro in acciaio ;

7. MATERIALI E METODI UTILIZZATI

7.1 Terreni di coltura e strumenti determinazione batterica

TERRENI DI COLTURA UTILIZZATI PER LA RILEVAZIONE DELLA CARICA CONTAMINANTE:

Terreno

Tipo di terreno utilizzato: Plate Count Agar (PCA)Ditta produttrice: BiogeneticsLotto: 118480/073Scadenza: 01/12/15

I ceppi atcc utilizzati per la contaminazione

Salmonella ATCC 14028Escherichia coli ATCC 25922Staphylococcus aureus ATCC 25923Listeria monocytogenes ATCC 11

Tutti i terreni sopra specificati sono sterili. La preparazione dei terreni è stata effettuata secondo le indicazioni del produttore e/o del metodo di riferimento.

SPECIFICHE DELLE APPARECCHIATURE UTILIZZATE PER LE PROVE:

Incubatore a 30°C

Numero d'inventario:01Costruttore: TERMOSTABIL KtModello: K2 TECampo di misura e prova: 20°C-70°C, utilizzato a 30°C ± 1°C

Frigorifero - congelatore

Numero d'inventario:04Costruttore: INDESITModello: TAAN 3VCampo di misura e prova: frigorifero utilizzato da +2°C / +8°C

Frigorifero

Numero d'inventario:06Costruttore: KELVINATORModello: KG 101Campo di misura e prova: frigorifero utilizzato da +2°C / +5°C

Conta colonie

Numero d'inventario:16Costruttore: STUARTModello: SC6Campo di misura e prova: na

Data logger (inserito all'interno dell'incubatore )

Numero d'inventario:09Numero di matricola:0526-0116Costruttore: Escort Data Logging Systems Ltd, New ZealandModello: 62 D 32Campo di misura e prova: utilizzato a 30°C ± 1°C

Data logger (inserito all'interno del frigorifero 4)

Numero d'inventario:21Numaro di matricola: MI-BH-358-082Costruttore: Escort Data Logging Systems LimitedModello: MI-0E-D-2-LCampo di misura e prova: - 40°C/+65°C utilizzato tra 2°C e 5°C

8. PROCEDURE OPERATIVE CONTA MICROBIOLOGICA

8.1 Modalità di esecuzione delle prove di analisi biologica

Una superficie in acciaio inox delle dimensioni di 600 x 400 mm è stata contaminata con

l'inoculo batterico ATCC (sopra descritto).

È stato prelevato il primo tampone (Campione Numero: 01 Tampone di riferimento ).

La superficie è stato trattata con il getto vapore generato da Hygienio contenente il

disinfettante ADANTIUM PLUS diluito al 2,5%: per un periodo di 60 secondi circa.

Dopo un periodo attesa di 5 minuti è stato strisciato il secondo tampone (Campione

Numero: 7) sulla superficie in acciaio contaminata.

8.2 Modalità di esecuzione delle prove

Microrganismi a 30°C

Si è presa una piastra Petri sterile e si è trasferito per mezzo di una pipetta sterile 1 ml

della sospensione iniziale (diluizione 10-1).A partire dalla sospensione iniziale, si sono

ottenute delle diluizioni scalari fino ad arrivare alla diluizione 10-4.

Da ciascuna diluizione si è prelevato 1 ml, ponendolo in una piastra Petri, all'interno

della quale è stato versato per inclusione il terreno di coltura PCA. Un volta solidificate,

le Piastre sono state poste ad incubare a 30°C per 72 h ± 3 h. Si è quindi proceduto alla

lettura delle Piastre mediante l'utilizzo del conta colonie, calcolando il numero di unità

formanti colonie per ml.

8.3 Modalità di conteggio delle colonie

Il Laboratorio per le tecniche di numerazione utilizza una piastra per diluizione per almeno due diluizioni successive. Dopo il periodo di incubazione necessario si conta il numero di colonie.

M icrorganismi a 30°c

I metodi di prova in oggetto prevedono un conteggio massimo di colonie sulla piastra pari a 300.

➢ Per le piastre non contenenti colonie, il Laboratorio esprime il risultato come <10 ufc per cm2.

➢ Per le piastre contenenti un numero di colonie compreso tra 1 e 3 su tutte le piastre

seminate, il Laboratorio esprime il risultato come < 4 x d ufc per cm2.

➢ Per le piastre contenenti un numero di colonie compreso tra 4 e 300, il Laboratorio applica, dopo aver verificato la proporzionalità delle diluizioni, la formula del caso generale della ISO 7218, cioè N = ∑C/ V x 1,1 x d dove:

Σ C è la somma del numero totale di colonie contate su tutte le piastre;V è il volume dell’inoculo versato in ogni piastra, in ml;d è la diluizione corrispondente alla prima diluizione considerata (d = 1 quando si considera il prodotto liquido non diluito del campione di prova).

9. RISULTATI

I risultati ottenuti sono riassunti nella tabella seguente e riportati nel certificato riportato negli allegati (ALLEGATI VI- XI )

CONTA MICROBIOLOGICA (UFC/ml)

RISULTATI Pre Trattamento

Carica microbica totale tampone di controllo N01 2,8 x 103 (UFC/cm2)

Post Trattamento

Carica microbica totale tampone di controllo N07 dopo un tempo di contatto di 5 minuti

< 1 (UFC/cm2)

10. CONCLUSIONI

I risultati ottenuti con il sistema di disinfezione Hygienio-ADANTIUM PLUS sono stati molto soddisfacenti, evidenziando l'efficacia del trattamento che nel tempo di contatto di 5 minuti ricondiziona le superfici contaminate.La prova effettuata per la ricerca dei microorganismi risulta essere positiva soddisfacendo a pieno gli obiettivi preposti.Come si evince dai rapporti di prova della conta dei microrganismi, il processo raggiunge la massima efficacia in 5 minuti di contatto abbattendo totalmente la carica batterica. Il raggiungimento di tale abbattimento nel tempo di pochi minuti, permette di proseguire con tutta tranquillità le normali attività ambulatoriali .Tale risultato è utile alla valutazione di un ritorno economico in ambito di operatività Sanitaria traducendosi in riduzione della spesa economica su materiali, operatori professionali e nel complesso risk management.

11. ALLEGATI

I. Foto Test Batterico

II. CERTIFICAZIONE ACCREDIA LABORATORIO JACARONI- “ Requisiti generali per la competenza dei Laboratori di prova e taratura”.

III. IQNet / DQS- Certificazione ISO 9001:2008 US LABS Srl.

IV. ISTITUTO SUPERIORE DI SANITA'-Approvazione del sistema di garanzia della qualità della produzione e/o della sterilizzazione della FIS&DM Srl.

V. RAPPORTO DI PROVA JACARONI DIAGNOSTICA 3656/2014.VI. RAPPORTO DI PROVA JACARONI DIAGNOSTICA 3662/2014.

.

ALLEGATI

ALLEGATO IFoto Test Batterico

Foto 1: Contaminazione batterica della superficie Foto2 : Prelievo tampone prima del trattamento con Hygienio

Foto 3: Trattamento con Hygienio-Adantium Plus Foto 4: Prelievo tampone a 5 minuti dal trattamento

ALLEGATO II

ALLEGATO III

ALLEGATO IV

ALLEGATO V

ALLEGATO VI