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Comparación de dos métodos diagnósticos para la determinación de anticuerpos de tipo IgM e IgG contra el virus de Epstein Barr. J, Guzmán 1 ; M, Iturriza 2 ; L, Agostini 2 ; M, Flores 3 ; N, Tovar de Isea 3 ; K, Pérez 3 ; C, Najm; N, Camacho 1 ; N, García 1 ; N, Silva 1 1 Corpodiagnostica, C.A.; 2 Laboratorio Policlínica Metropolitana; 3 Laboratorio AVILAB INTRODUCCION El virus de Epstein-Barr (VEB), es un virus linfotrópico perteneciente a la familia Herpeviridae, que se encuentra mundialmente distribuido (1). Cerca del 90% de la población mundial es portadora de VEB y, aunque etiológicamente se ha asociado con un vasto número de enfermedades, en la gran mayoría de las personas se establece una infección latente durante toda la vida (2) Existe una gran cantidad de herramientas diagnósticas que pueden ser empleadas para la detección del VEB, sin embargo la serología es el mejor método para el diagnóstico de infecciones primarias por dicho virus. En aproximadamente 85% de los casos de mononucleosis, la infección primaria puede ser detectada a través de los anticuerpos heterófilos. Asimismo, son potencialmente útiles para el diagnóstico de la MI las determinaciones de anticuerpos de las subclases IgG e IgM frente a los complejos antigénicos VCA (integrado por proteínas de la cápside del virus), EA (proteínas no estructurales en su mayoría que intervienen en la replicación del ácido nucleico viral) y EBNA (integrado por proteínas reguladoras multifuncionales no estructurales de localización nuclear) (3) REFERENCIAS 1. Perez G, Taborda M, Toffi A, y col. Desarrollo de improntas para el diagnostico del virus de epstein barr por inmunofluorescencia indirecta. Medicina.(Buenos Aires) 2005; 65: 315-320 2. Chacon M, Naveda O, Castillo O y col. Prevalencia de anticuerpos anti-citomegalovirus y anti-virus Epstein-Barr en Valencia, Estado Carabobo, Venezuela. Rev. Soc. Ven. Microbiol. (Venezuela) 2002; 22: 131-135. 3. Linde A. Diagnosis of Epstein-Barr virus-related diseases. Scand J Infect Dis Suppl. 1996;100:83-8. 4. Fica A. Síndrome de mononucleosis infecciosa en pacientes adolescentes y adultos. Rev. chil. infectol. 2003; 20(4): 235-242. METODOLOGIA Población y Muestra Se analizaron 96 sueros de pacientes recibidos en los laboratorios de la Clínica El Avila y Policlínica Metropolitana ubicados en el Distrito Capital- Venezuela en el periodo de Agosto y Septiembre 2010 por el equipo Chorus Diesse y por el método VIRapid MONO M&G de Vircell; para la determinación de anticuerpos contra VEB. 50 muestras fueron procesados por el laboratorio de la clínica el AVILA (AVILAB) y 46 fueron procesados por el laboratorio de la Policlínica Metropolitana. En Avilab se realizaron determinaciones de anticuerpos IgM, IgG y EBNA IgG mientras que en la clínica Metropolitana solo se determinaron anticuerpos IgM e IgG contra VCA de VEB. Por lo tanto, para el análisis estadístico se tomaron en cuenta los resultados para la determinación de anticuerpos IgM e IgG contra VCA VEB. RESULTADOS VIRapid MONO M&G Chorus Diese Negativo (-) 88 87 Positivo (+) 8 5 Indeterminado (+/-) 0 4 -Índice de concordancia 93,8% (87,0 a 97,1%). Intervalo de Confianza del 95% -Índice Kappa de Cohen 62,1% (32,7 a 91,5%) Kappa> 75% indica "alto" concordancia. Tabla 1. Comparación de los resultados obtenidos de IgM contra VCA del VEB por VIRapid MONO M&G vs equipo Chorus Diesse. Tabla 2. Comparación de los resultados obtenidos de IgG contra VCA del VEB por VIRapid MONO M&G vs equipo Chorus Diese. VIRapid MONO M&G Chorus Diese Negativo (-) 19 19 Positivo (+) 77 76 Indeterminado (+/-) 0 1 -Índice de concordancia 94,8% (88,4 a 97,8%). Intervalo de Confianza del 95% -Índice Kappa de Cohen 84,0% (70,4 a 97,7%) Kappa> 75% indica "alto" concordancia. DISCUSION El VEB afecta alrededor del 90% de la población mundial y persiste durante toda la vida en el huésped, en los linfocitos B, (células de larga vida, responsables de la persistencia de la infección) y en las células epiteliales de la cavidad oral, (probablemente responsables de su propagación (2). La infección aguda por este agente ocurre principalmente en adolescentes y adultos los cuales desarrollan tradicionalmente el cuadro de mononucleosis infecciosa (4) El método VIRapid MONO M&G permite la detección simultánea de los 4 marcadores serológicos principales en la infección por VEB; dos de tipo IgM, VCA y heterófilos y dos de IgG, VCA y EBNA, mediante una técnica rápida, sencilla y que puede ser reportada en minutos al médico tratante y paciente. Al comparar la metodología VIRapid MONO M&G versus el ELISA automatizado del equipo Chorus Diesse se obtuvo que para la detección de anticuerpos anti-VCA de tipo IgM existe una correlación de 93,8%, lo cual demuestra una sensibilidad y especificidad similar entre ambas metodologías. En cuanto a la detección de anticuerpos anti VCA de tipo IgG, se encontró un índice de correlación de 94,8% con un índice de Kappa de Cohen de 84%, lo cual indica una buena correlación entre ambas metodologías. OBJETIVO Comparar el método VIRapid MONO M&G de Vircell vs el equipo Chorus de DIESSE Diagnostica Senese S.p.A. para la determinación de IgM e IgG contra el virus de Epstein Barr. Equipo Chorus Diese Chorus Diesse es un analizador multi-parámetros para las enfermedades infecciosas y autoinmunes en dispositivos individuales basado en la técnica de ELISA. VIRapid MONO M&G Test inmunocromatográfico VIRapid MONO M&G de Vircell, el cual es una alternativa de diagnóstico en formato multitest que permite la detección simultánea de los 4 marcadores serológicos principales en la infección por VEB; dos de tipo IgM, VCA y heterófilos y dos de IgG, VCA y EBNA. Línea control 2° Línea de prueba: PB HA 1° Línea de prueba: VCA IgM Línea control 2° Línea de prueba: EBNA IgG 1° Línea de prueba: VCA IgG Detección de anticuerpos IgM anti-EBV Detección de anticuerpos IgG anti-EBV

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Comparación de dos métodos diagnósticos para la determinación de anticuerpos de tipo IgM e IgG contra el virus de Epstein Barr.

J, Guzmán1; M, Iturriza2; L, Agostini2; M, Flores3; N, Tovar de Isea3; K, Pérez3; C, Najm; N, Camacho1; N, García1; N, Silva1

1 Corpodiagnostica, C.A.; 2Laboratorio Policlínica Metropolitana; 3Laboratorio AVILAB

INTRODUCCION

El virus de Epstein-Barr (VEB), es un virus linfotrópico perteneciente a la familia

Herpeviridae, que se encuentra mundialmente distribuido (1). Cerca del 90% de la

población mundial es portadora de VEB y, aunque etiológicamente se ha asociado

con un vasto número de enfermedades, en la gran mayoría de las personas se

establece una infección latente durante toda la vida (2)

Existe una gran cantidad de herramientas diagnósticas que pueden ser

empleadas para la detección del VEB, sin embargo la serología es el mejor método

para el diagnóstico de infecciones primarias por dicho virus. En aproximadamente

85% de los casos de mononucleosis, la infección primaria puede ser detectada a

través de los anticuerpos heterófilos. Asimismo, son potencialmente útiles para el

diagnóstico de la MI las determinaciones de anticuerpos de las subclases IgG e IgM

frente a los complejos antigénicos VCA (integrado por proteínas de la cápside del

virus), EA (proteínas no estructurales en su mayoría que intervienen en la

replicación del ácido nucleico viral) y EBNA (integrado por proteínas reguladoras

multifuncionales no estructurales de localización nuclear) (3)

REFERENCIAS

1. Perez G, Taborda M, Toffi A, y col. Desarrollo de improntas para el diagnostico del virus de epstein barr por

inmunofluorescencia indirecta. Medicina.(Buenos Aires) 2005; 65: 315-320

2. Chacon M, Naveda O, Castillo O y col. Prevalencia de anticuerpos anti-citomegalovirus y anti-virus Epstein-Barr en

Valencia, Estado Carabobo, Venezuela. Rev. Soc. Ven. Microbiol. (Venezuela) 2002; 22: 131-135.

3. Linde A. Diagnosis of Epstein-Barr virus-related diseases. Scand J Infect Dis Suppl. 1996;100:83-8.

4. Fica A. Síndrome de mononucleosis infecciosa en pacientes adolescentes y adultos. Rev. chil. infectol. 2003; 20(4):

235-242.

METODOLOGIA

Población y Muestra

Se analizaron 96 sueros de pacientes recibidos en los laboratorios de la Clínica

El Avila y Policlínica Metropolitana ubicados en el Distrito Capital- Venezuela en el

periodo de Agosto y Septiembre 2010 por el equipo Chorus Diesse y por el método

VIRapid MONO M&G de Vircell; para la determinación de anticuerpos contra VEB.

50 muestras fueron procesados por el laboratorio de la clínica el AVILA (AVILAB) y

46 fueron procesados por el laboratorio de la Policlínica Metropolitana. En Avilab se

realizaron determinaciones de anticuerpos IgM, IgG y EBNA IgG mientras que en la

clínica Metropolitana solo se determinaron anticuerpos IgM e IgG contra VCA de

VEB. Por lo tanto, para el análisis estadístico se tomaron en cuenta los resultados

para la determinación de anticuerpos IgM e IgG contra VCA VEB.

RESULTADOS

VIRapid MONO M&G Chorus Diese

Negativo (-) 88 87

Positivo (+) 8 5

Indeterminado (+/-) 0 4

-Índice de concordancia 93,8% (87,0 a 97,1%). Intervalo de Confianza del 95%

-Índice Kappa de Cohen 62,1% (32,7 a 91,5%)

Kappa> 75% indica "alto" concordancia.

Tabla 1. Comparación de los resultados obtenidos de IgM contra VCA del

VEB por VIRapid MONO M&G vs equipo Chorus Diesse.

Tabla 2. Comparación de los resultados obtenidos de IgG contra VCA del

VEB por VIRapid MONO M&G vs equipo Chorus Diese.

VIRapid MONO M&G Chorus Diese

Negativo (-) 19 19

Positivo (+) 77 76

Indeterminado (+/-) 0 1

-Índice de concordancia 94,8% (88,4 a 97,8%). Intervalo de Confianza del 95%

-Índice Kappa de Cohen 84,0% (70,4 a 97,7%)

Kappa> 75% indica "alto" concordancia.

DISCUSION

El VEB afecta alrededor del 90% de la población mundial y persiste durante toda

la vida en el huésped, en los linfocitos B, (células de larga vida, responsables de la

persistencia de la infección) y en las células epiteliales de la cavidad oral,

(probablemente responsables de su propagación (2). La infección aguda por este

agente ocurre principalmente en adolescentes y adultos los cuales desarrollan

tradicionalmente el cuadro de mononucleosis infecciosa (4)

El método VIRapid MONO M&G permite la detección simultánea de los 4

marcadores serológicos principales en la infección por VEB; dos de tipo IgM, VCA y

heterófilos y dos de IgG, VCA y EBNA, mediante una técnica rápida, sencilla y que

puede ser reportada en minutos al médico tratante y paciente.

Al comparar la metodología VIRapid MONO M&G versus el ELISA automatizado

del equipo Chorus Diesse se obtuvo que para la detección de anticuerpos anti-VCA

de tipo IgM existe una correlación de 93,8%, lo cual demuestra una sensibilidad y

especificidad similar entre ambas metodologías.

En cuanto a la detección de anticuerpos anti VCA de tipo IgG, se encontró un

índice de correlación de 94,8% con un índice de Kappa de Cohen de 84%, lo cual

indica una buena correlación entre ambas metodologías.

OBJETIVO

Comparar el método VIRapid MONO M&G de Vircell vs el equipo Chorus de

DIESSE Diagnostica Senese S.p.A. para la determinación de IgM e IgG contra el

virus de Epstein Barr.

Equipo Chorus Diese

Chorus Diesse es un analizador multi-parámetros para las enfermedades

infecciosas y autoinmunes en dispositivos individuales basado en la técnica de

ELISA.

VIRapid MONO M&G

Test inmunocromatográfico

VIRapid MONO M&G de Vircell, el

cual es una alternativa de

diagnóstico en formato multitest que

permite la detección simultánea de

los 4 marcadores serológicos

principales en la infección por VEB;

dos de tipo IgM, VCA y heterófilos y

dos de IgG, VCA y EBNA.

Línea control

2° Línea de prueba: PB HA

1° Línea de prueba: VCA IgM

Línea control

2° Línea de prueba: EBNA IgG

1° Línea de prueba: VCA IgG

Detección de anticuerpos IgM anti-EBV

Detección de anticuerpos IgG anti-EBV