Collaboration LBTI / BASF : cosmétiques anti-âge pour le maintien · 2018-10-24 · Debret et al, 2010 Traitement des cellules cutis laxa Réactivation de la synthèse des fibres

Laboratoire de Biologie Tissulaire et Ingénierie Thérapeutique

UMR 5305 CNRS/UCBL - LyonRomain DEBRET, PhD

Collaboration LBTI / BASF : cosmétiques anti-âge pour le maintien

de l’élasticité de la peau

JournéeVieillissement Cutané25 septembre 2018

Eric Perrier Pascal Sommer

Les origines : fin 90’s / début 2000’s

Directeur R&D

COLETICA/ENGELHARD/BASF

Directeur de recherche CNRS

IBCP UMR5086 / LBTI UMR5305

Développement d’actifs

dermo-cosmétologiques

Assemblage des

fibres élastiques

Recherche de solutions dermo-cosmétologiques pour

la réparation des fibres élastiques lors du vieillissement cutané Journée Vieillissement Cutané – 25/09/18

Ultrastructure des Fibres Élastiques

Microfibrilles de fibrilline (MF)

Cœur d’élastine (E)

0.3 µm

Mecham and Heuser, 1991

E

MF

Journée Vieillissement Cutané – 25/09/18

Le Comportement Élastique

ÉLASTICITÉ

De l’organe

FONCTION

Fibre élastique

Réticulations

Tropoélastine

LOX,LOXL1LOXL1Enzymes = lysyl-oxydases


Cenizo et al., 2006

Brevet FR2855968B1, 13/06/2003

40 % LOX 65 % LOXL1

Fibroblastes âgés

Thèse Valérie Cenizo : 2001 - 2005

Arrêt de synthèseSynthèse

~20 ans âge

Microfibrilles

Elastine

LOXLOXL

20 extraits végétaux aqueux

Aneth et Ephédra = +++

Criblage

Validation sur peau reconstruite

LOXL1

LOXLOXL1


Développement produit : Lys’lastineTM


Projet Européen « ELAST-AGE » : 2006 - 2009

Lysyl oxydase-like 1 (LOXL1) diminuée avec l’âge – mécanisme ?

Etude du vieillissement chronologique

Processus lent

Multifactoriel

Dépendant du mode de vie

Très forte variabilité interindividuelle

Mutation

génétique

Perte ou gain

de fonction

protéique

Vieillissement

prématuré(organe/individu)

Lien de

causalité

Maladies

progéroïdes

Stratégie alternative

Étude mécanistique compliquée

Nécessité de grandes cohortes


Image d’après Claus et al., 2008 Image d’après Pober et al., 2008 Image d’après Vanakker et al., 2006

Cutis laxa

Mauvais assemblage

des fibres élastiques

Williams-Beuren Pseudoxanthome élastique

Quantité moindre

d’élastine

Calcification et

dégradation accrue des

fibres élastiques

Phénotype cutané

généralisé dès l’enfance

Phénotype cutané peu

présent(cardiovasculaire prédominant)

Phénotype cutané +/-

localisé à l’âge adulte

Comprendre par la pathologie


Claus et al, 2008

Garçon 9 ans

FBLN5 (p.C217R)Biopsies

Derme lacunaire

Fibres élastiques absentes

Lamina densaplus fine

50 % LOXL1

La cutis laxa : caractérisation histologique et transcriptomique


Sain

LOXL1

ADN

Sp-1 Sp-1

DNMT3ACutis laxa

CG CG

Me Me

Sp-1 Sp-1

5 aza-dC

Debret et al, 2010

Traitement des cellules cutis laxa

Réactivation de la synthèse des fibres

élastiques par inhibition des DNMTs


Moulin et al., 2017

Brevet FR2999926B1, 21/12/2012

Thèse Léa Moulin : 2009 - 2012

LOXL1

-2172

-323-494

½ ERE

-430

Sp1

-407 -372

-494 -323

CpG

island

Sp1

primer R

primer F

0

0.2

0.4

0.6

0.8

1

1.2

O.D

.a

na

lysi

s

IP D

NM

T3

A /

In

pu

t

< 10 > 59

Age group of fibroblast strains

(years)

*1.4

IP DNMT3A

Input

<10 years group >59 years group

172 bp -

172 bp -

172 bp -

IP IgG

0%

Percen

tag

e o

f L

OX

L1

prom

ote

r

meth

yla

tion

< 10 > 59

Age group of fibroblast strains

(years)

*16%

14%

12%

10%

8%

6%

4%

2%

Le promoteur LOXL1 présente une hyperméthylation

La DNMT3A est associée au promoteur

Transfert au vieillissement chronologique


Résultats

Sélection bibliographique : contenu en monoterpènes

Viabilité des fibroblastes, couleur, odeur et disponibilité des extraits végétaux

Criblage par PCR en temps réel : action positive sur l’expression des gènes LOXL1,

FBLN5, COL1A1 et MFAP2

Sélection en HRM-PCR: action négative sur la méthylation du promoteur LOXL1

Action négative sur l’activité de la DNMT3A recombinante en système de transfection

transitoire

Action positive sur le dépôt de LOXL1 dans la matrice extra-cellulaire par des fibroblastes

âgés

700 extraits végétaux (400 espèces)



21 extraits végétaux




1 extrait végétal

Brevetabilité, FTO

Origanum majorana : marjolaineFemme de 62 ans

Stratégie de crible d’actifs cosmétiques


La marjolaine est un inhibiteur de DNMT3A

Tend à la diminution du niveau de méthylation du promoteur LOXL1

Résultats

0%

5%

10%

15%

20%

25%

Origanum

majorana 1%

Untreated

Percen

tag

e o

f L

OX

L1

prom

ote

r

meth

yla

tion

p=0.117

0

5

10

15

20

25

30

**

Untreated Origanum

majorana 1%

Mock DNMT3A

#

Effet du traitement sur l’activité de la DNMT3A et la méthylation du

promoteur LOXL1

Moulin et al., 2017

Brevet FR2999926B1, 21/12/2012Journée Vieillissement Cutané – 25/09/18

Untr

eat

ed

Ori

gan

um

maj

ora

na

1%

DAPI-LOXL1

10 µm

10 µm

0

0.5

1

1.5

2

2.5

LO

XL

1 m

RN

A expressio

n

Untreated Origanum

majorana 1%

*

Effet du traitement sur l’expression et la sécrétion de LOXL1 (fibroblastes 62 ans)

La marjolaine augmente l’expression et la sécrétion de LOXL1

Moulin et al., 2017

Brevet FR2999926B1, 21/12/2012Journée Vieillissement Cutané – 25/09/18

Développement produit : DermagenistTM


Remerciements

Fonction et Dynamique du Tissu Cutané

LBTI UMR5305 CNRS-UCBL

Pascal Sommer

Léa Moulin

Alengo Nyamay’Antu

Charlotte Jouvène

Eric Perrier

Valérie Cenizo

Valérie André

Sabine Pain

Corinne Reymermier

[email protected]

BASF – Beauty Care Solutions

ICON CREDITS (noun project) Danil Polshin

H Alberto Gongora

Peter Van Driel

Vladimir Belochkin

Anthony Bossard

Andrejs Kirma

Damar Bintang

Gregor CresnarJournée Vieillissement Cutané – 25/09/18

Documents

Collaboration LBTI / BASF : cosmétiques anti-âge pour le maintien · 2018-10-24 · Debret et al, 2010 Traitement des cellules cutis laxa Réactivation de la synthèse des fibres