BUKU 1redaksional sebagaimana tercantum pada ralat cetakan sebelumnya; serta penyempurnaan lainnya. Ucapan terimakasih disampaikan kepada semua pihak yang telah berperan dalam penyusunan

(Amcia mtµigi.1u11, Omelina arl,Hirea, ParaserianU1e felcaJaria, Pii1U11 lll#!Fkusii,

·a macrop/1yUa)

BUKU 1

KEMENTERIAN KEHUTANAN

BADAN PENELITIAN DAN PENGEMB GAN KEHUTANAN DALAi PENELITIAN TEKNOLOG PERBENIHAN TANAMAN HUTAN

JI, Pakuan Cilieuleut, PO Box 105 BOGOR 16001 Telp/Fax: 0251 8327768. ·£ mail: [email protected]

BOGOR 2014

PEDOMAN UJICEPAT VIABILITAS BENIH TANAMAN HUTAN

(Acacia mangium, Gmelina arborea, Paraserianthes f ale at aria, Pinus merkusii,

Swietenia macrophylla)

Oleh: Muhammad Zanzibar

N anang Hercliana lnsan N ovita

Enok Rohani K Adang Muharam Endang Ismiati Hasan Royani

Achmad Suprayogi

BUKU 1

KEMENTERIAN KEHUTANAN

BADAN PENELITIAN DAN PENGEMBANGAN KEHUTANAN BALAI PENELITIAN TEKNOLOGI PERBENIHAN TANAMAN HUTAN

JI. Pakuan Ciheuleut, PO Box 105 BOGOR 16001 Telp/Fax: 02Sl 83·27768 Email: [email protected]

BOGOR2014

KATA PENGANTAR

Kegiatan pengujian benih merupakan hal yang penting dalam produksi semai dan pemasaran bibit. Standardisasi metode pengujian dan mutu benih yang telah dihasilkan oleh Balai Litbang Teknologi Perbenihan sebelumnya memuat uji perkecambahan (langsung). Sehingga untuk penyempurnaannya perlu dilengkapi dengan teknologi uji cepat viabilite\S, agar para pengguna memiliki alternatif lain dalam melakukan pengujian benih.

Buku ini berisi standar prosedur uji cepat viabilitas benih berdasarkan uji tetrazolium topografis, uji hidrogen peroksida, uji eksisi embrio dan uji belah untuk 5 jenis benih tanaman hutan (Acacia mangium, Gmelina arborea, Paraserianthes falcataria, Pi nus merkusii dan Swietenia macrophyl/a) serta kunci interpretasi benih hidup dan benih mati berdasarkan uji cepat yang digunakan.

Diharapkan informasi ini dapat membantu dan mempermudah para peneliti, akademisi dan laboran dalam melakukan aktivitas pengujian benih, serta pengguna lainnya dalam rangka memperoleh kepastian informasi kualitas benih dengan cepat.

Ucapan terima kasih disampaikan kepada semua pihak yang telah membantu, baik tenaga maupun pikirannya sehingga buku ini dapat tersusun.

Bogor, September 2003 Kepala Balai Litbang Teknologi Perbeni

Ir. Darmawan Budiantho, MP NIP. 080052517

KATA PENGANTAR CETAKAN KEDUA

Dalam rangka penyebarluasan hasil penelitian dalam bentuk yang lebih praktis, Balai Penelitian Teknologi Perbenihan Tana man Hutan (BPTPTH) telah menerbitkan buku Pedoman Uji Cepat Viabilitas Benih Tanaman Hutan yang memuat informasi tentang standar prosedur uji cepat viabilitas benih berdasarkan Uji Tetrazolium Topografis; Uji Hidrogen Peroksida; Uji Eksisi Embrio dan Uji Selah untuk 5 jenis benih tanaman hutan, serta kunci interpretasi benih hidup dan benih mati berdasarkan uji cepatyang digunakan.

Teknologi uji cepat viabilitas benih merupakan alternatif lain dalam melakukan pengujian benih. Informasi tersebut dikemas dalam bentuk praktis, lengkap, informatif dan mudah diaplikasikan untuk mengetahui kualitas benih secara cepat.

Buku Pedoman Uji Cepat Viabilitas Benih Tanaman Hutan memperoleh respon yang positif dari: instansi pemerintah; swasta; maupun masyarakat umum. Berkaitan dengan hal tersebut mengakibatkan banyaknya permintaan terhadap buku ini. BPTPTH secara bertahap melakukan pencetakan ulang buku Pedoman Uji Cepat Viabilitas Benih Tanaman Hutan, yang didalam buku cetakan ke dua tersebut telah dilakukan penyempurnaan antara lain nama Balai Litbang Teknologi Perbenihan diubah menjadi Balai Penelitian Teknologi Perbenihan Tanaman Hutan; perbaikan redaksional sebagaimana tercantum pada ralat cetakan sebelumnya; serta penyempurnaan lainnya.

Ucapan terimakasih disampaikan kepada semua pihak yang telah berperan dalam penyusunan Buku Pedoman Uji Cepat Viabilitas Benih Tanaman Hutan cetakan ke dua ini, sehingga buku ini dapatdisusun dan dicetakulang kembali.

Semoga buku ini bermanfaat.

Bogor, Desember 2014 Kepala Balai,

1002

iii

DAFTAR ISI

KATA PENGANTAR ............................................ . .... ... . .................. .

KATA PENGANTAR CETAKAN KEDUA.. .. . . . . . . . . .. .. . . . . . . . .. .. . ... . . .. . . . . . . . . . . . .. iii

DAFTAR ISI .............................................. .. ................................ v

DAFTAR TASEL . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ix

DAFTAR GAMSAR . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . .. .. . ... . . . . . . . . .. . . . . .. . xi

DAFTAR LAMPI RAN ................................................................... .... xiii

I. PENDAHULUAN . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . .. . .. . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . 1

1.1. Mutu Senih ... ... ....... ....... ... .... ... .. ............ ... ... .... .... ...... 1 1.2. Viabilitas ................................................................... 1 1.3. Pengujian Viabilitas ...... ..... .... .................... .... ....... ...... 1 1.4. Uji Cepat Viabilitas . . .. . .... .. .. .. .. .. .. .. .. .. . .. .. ... .. . . . . . . .. .. .. . .. . 2 1.5. Standardisasi Uji Cepat Viabilitas ...... ..................... ...... 2

II. METODE UJI CE PAT VIASILITAS .. . .. .. .. .. ... .... .. .. ... .. . .. .. . .. . . .. . .. .. . 5

2.1. Uji Tetrazolium Topografis .. .. .. ... .. .. .. .. .. . . . .. ... .. . .. .. .. .. .. . .. . 5 2.2. Uji Hidrogen Peroksida..... .. .. . .. .. . ... ... . . .. . ... . .. .. .. .. . . .. . .. .. .. 6 2.3. Uji Eksisi Em brio......................................................... 6 2.4. Uji Selah.................................................................... 7

III. UJI CEPAT VIASILITAS JEN IS Acacia mangium . . . .. ... . ... . . .. ... . .. .. . 9

3.1. Umum....................................................................... 9 3.2. Uji Tetrazolium Topografis .... .. .. .. .. ...... .. . . . . ... . .. . . .. .... ... .. . 9

3.2.1. Standardisasi Prosedur ................. .......... ....... ... 9 3.2.2. Kunci Interpretasi ... ........... .......... .......... .... ...... 11

3.3. Uji Hidrogen Peroksida......... ...... .. .. .. .. ... .. . ... . .. . . .. . . .. .. .... 12 3.3.1. Standardisasi Prosedur .... .. .. .. .. .. .. .. .. . ... . .. . .. .. .. ... 12 3.3.2. Kunci Interpretasi .......... ........................ .......... 13

3.4. Uji Eksisi Em brio......................................................... 13 3.4.1. Standardisasi Prosedur....... ... ... .. .. .. . .. .. . .. . . .. . . . ... 13 3.4.2. Kunci Interpretasi ....... ................. .................... 14

3.5. Uji Selah.................................................................... 15

3.5.1. Standardisasi Prosedur ... ................. .. ............ ... 15 3.5.2. Kunci Interpretasi ................. ........................... 16

v

IV. UJI CEPAT VIABILITAS JENIS Gmelia arborea ........................... 19

4.1. Umum ....................................................................... 19 4.2. Uji Tetrazolium Topografis ...... ..... ...... .... .... .... .. .. .. .. .... ... 19

4.2.1. Standardisasi Prosedur ..................................... 19 4.2.2. Kunci Interpretasi ....................................... . .... 21

4.3. Uji Hidrogen Peroksida ................................................. 21 4.3.1. Standardisasi Prosedur .......... .... .. ..... ...... .......... 21 4.3.2. Kunci Interpretasi .. .. .. .. .. .. .. .. . . .. .. .. .. .. . . .. .. . . .. .. . . .. 23

4.4. Uji Eksisi Em brio......................................................... 23 4.4.1. Standardisasi Prosedur.................................. .. . 23 4.4.2. Kunci Interpretasi .......... .... .......... ................. ... 2S

4.S. Uji Belah .................................................................... 2S 4.S.1. Standardisasi Prosedur .......... ................. .......... 2S 4.S.2. Kunci Interpretasi .......... ....... .... ...... ........... ...... 26

V. UJI CE PAT VIABILITAS JEN IS Paraserianthes fa/cataria ... .. .. . . .. .. . 29

S.l. Umum ....................................................•.................. 29 S.2. Uji Tetrazolium Topografis ... .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. .. . .. .. 29

S.2.1. Standardisasi Prosedur .. . .. .. .. .. ......... .... ... . ... ...... 29 S.2.2. Kunci Interpretasi ............................................ 31

S.3. Uji Hidrogen Peroksida................................ .. .. .. . . .. .. . .. . . 33 S.3.1. Standardisasi Prosedur ....... ... ..... ... .. .... .......... ... 33 S.3.2. Kunci Interpretasi ...... .... .. .. .. .. ......... ........... ...... 34

S.4. Uji Eksisi Em brio......................................................... 34 S.4.1. Standardisasi Prosedur..................................... 34 S.4.2. Kunci Interpretasi............................................ 3S

S.S. Uji Belah ... ... .. . . . . . . .. . .. .. ... . . . .... ... .... .. . .... ... .. . .... .. . . .. . ... .. . 36 S.5.1. Standardisasi Prosedur..................................... 36 S.S.2. Kunci Interpretasi ........................... ................. 36

VI. UJI CE PAT VIABILITAS JEN IS Pin us merkusii............................ 39

6.1. Umum ....................................................................... 39 6.2. Uji Tetrazolium Topografis ... .. ... .. . . .. . .. . .... .. ... .. .. .... .. . . .. ... 39

6.2.1. Standardisasi Prosedur ... .... ... .. .. ...... .... . .. .. .. .. .. .. 39 6.2.2. Kunci Interpretasi......... .... .... . .. . .. .. .. .... .. .... .... ... 40

6.3. Uji Hidrogen Peroksida ................................................. 41 6.3.1. Standardisasi Prosedur ..................................... 41 6.3.2. Kunci Interpretasi ......... ... .. .. ... .. ...... ..... .. .... ... .. . 43

6.4. Uji Eksisi Em brio......................................................... 43 6.4.1. Standardisasi Prosedur...... .... .. .. ...... .... .... .. .... .. . 43 6.4.2. Kunci Interpretasi .................. .... .. ... .... .......... ... 44

6.S. Uji Belah .................................................................... 44 6. S.1. Standardisasi Prosedur................... .... . .. .. . .. .. .. .. 44 6.5.2. Kunci Interpretasi ......... ... ................... ... .... .. .... 45

vi

VII. UJI CEPAT VIABILITAS JEN IS Swietenia mecrophyl/a....... .. . . .. . . . . 49

7.1. Umum ....................................................................... 49 7 .2. Uji Tetrazolium Topografis ... . . .. . .. . . .. .. . . . . . . . . . .. . .. .. . .. . . . . . . . .. 49

7.2.1. Standardisasi Prosedur ..................................... 49 7.2.2. Kunci Interpretasi ............................................ 51

7 .3. Uji Hidrogen Peroksida..................... .... . . . .. . . . .. . . . .. . .. . . .. .. 52 7.3.1. Standardisasi Prosedur ..................................... 52 7.3.2. Kunci Interpretasi ................................. ..... .. .... 53

7.4. Uji Eksisi Embrio ......................................................... 53 7.4.1. Standardisasi Prosedur....... .. . . . .. .. . . . .. . .. . . . . . .. . . .... 53 7.4.2. Kunci Interpretasi ... .... ... ... . ... ..... .. ... .... .. . ....... ... 54

7.5. Uji Selah .. ... ..... .......................................................... 55 7.5.1. Standardisasi Prosedur ... ..................... ............. 55 7.5.2. Kunci Interpretasi ....... ..................................... 56

DAFTAR PUSTAKA . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 59

LAMPIRAN ............................................................... .. ............... 61

vii

No.

DAFTAR TABEL

Te ks Hal.

1. Kunci Interpretasi Uji Tetrazolium untuk Senih A. mangium . . . . . . . . 11

2. Kunci lnterpretasi Uji Eksisi Em brio untuk Senih A. mangium . . . . . 15

3. Kunci Interpretasi Uji Selah untuk Senih A. mangium . . . . . . . .. . . . . . . . 16

4. Kunci Interpretasi Uji Tetrazolium untuk Senih G. arborea . . . . . . . . .. 22

5. Kunci lnterpretasi Uji Eksisi Em brio untuk Senih G. arborea . . . . . .. 25

6. Kunci lnterpretasi Uji Selah untuk Senih G. arborea . . . . . .. . . . . . . . . . . . 27

7. Kunci lnterpretasi Uji Tetrazolium untuk Senih P. fa/cataria ........ 32

8 Kunci Interpretasi Uji Eksisi Embrio untuk Senih P. falcataria ...... 35

9. Kunci Interpretasi Uji Selah untuk Senih P. falcataria . . . . . . . . . . . . . . . . 37

10. Kunci Interpretasi Uji Tetrazolium untuk Senih P. merkusii .......... 41

11. Kunci Interpretasi Uji Eksisi Em brio untuk Senih P. merkusii ........ 44

12. Kunci Interpretasi Uji Selah untuk Senih P. merkusii ................... 46

13. Kunci lnterpretasi Uji Tetrazolium untuk Senih 5. macrophylla ..... 51

14. Kunci lnterpretasi Hasil Uji Eksisi untuk Senih 5. macrqphylla . . .. 55

15. Kunci Interpretasi Uji Selah untuk Senih 5. macrophylla ... ....... .. . 56

ix

No.

1.

' 2.

3.

4.

5.

6.

7.

8.

9.

10.

11.

12.

13.

14.

15.

DAFTAR GAMBAR

Te ks Hal.

Sketsa Struktur Senih A. manglum .... .. .. .. .. .. .. .. ...... .. .... .. .. .... .. .. 9

Sketsa Pola Pewarnaan Hasil Uji Tetrazolium pada Senih A. mangium . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . .. . . .. . . . . . . . . .. . . .. . . .. . . . . . .. .. . .. . . .. . . . . . . .. .. . . 11

Senih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Tetrazolium untuk Senih A. mangium .. . ..... .... .. . .... ... .......... .. .. ... .... ... ... ........... .... 17

Senih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Hidrogen Peroksida untuk Senih A. mangium ... . . . . .. .. . . . ... . ... . .. ... . .. . .. .. .. . . . . . .. . .. . . .. . ... . 17

Senih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Eksisi Embrio untuk Senih A. mangium......... .... . . . . . . . . .. . .. . ... ... . .. . . . . .... . . . ... . . .. ... ... . . .. . 17

Senih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Selah untuk Senih A. mangium......... .. . . . . . . . . . . . . .. . .. . . . . . . . .. .. . . ... .. . . .. .. . . . . . .. .. . .. . 17

Sketsa Struktur Senih G. arborea ........ ........ ................... ......... 19

Sketsa Pola Pewarnaan Hasil Uji Tetrazolium pada Senih G. arborea .. . . . . . . . . . . . . . . . . . .. .. . . . . . . . . .. .. . . .. . . .. .. . . . .. . . . . . .. . .. .. . . . .. .. . . . . . . 22

Senih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Tetrazolium untuk Senih G. arborea . . . . . . . . . . . . . . . . . .. .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . .. . . . .. . . . . . . . .. . . 28

Senih Viabel (a) dan Non·viabel (b) Hasil Uji Hidrogen Peroksida untuk Senih G. arborea ........................................... : ............. 28

Senih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Eksisi Embrio untuk Senih G. orborea . .. . .. . . . . . . . . . . . ... . . . . . . . ... . . . . . . . . ... . . . . .. . . . . . . . . ... .. . . . . . . 28

Senih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Selah untuk Senih G. arborea . . . . . .. .. . .. . . . .. . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. .. . . . .. . . . . .. . . . . .. . . . . . . .. . 28

Sketsa Struktur Senih P. falcataria .. .... .. .. . .. .... .. .. .... .. .... .... .. .. .. . 29

Sketsa Pola Pewarnaan Hasil Uji Tetrazolium pada Senih P. falcataria . . . . . .. .. . . .. . . . . .. . . . .. .. . . . . . .. . .. . . . . . .. . . . .. . . . . . . . . . . .. . . .. . . . . . .. . . 32

Senih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Tetrazolium untuk Senih P. falcataria .................................................................. 38

xi

16. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Hidrogen Peroksida untuk Benih P. falcataria . . . . . . . . .. .. .. .. . .. .. .. . .. .. .. . .. . . . . . . .... .. ... . .. . . . . . 38

17. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Eksisi Embrio untuk Benih P. fa/cataria .. .. .. . . . .. . . .. . . .. .. .. .. .. . . . . .. .. .. .. . . .. . .. . .. . .. .. . . . .. . . . . . . 38

18. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Belah untuk Benih P. falcataria . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 38

19. Sketsa Struktur Benih P. merkusii ........................................... 35

20. Sketsa Pola Pewarnaan Hasil Uji Tetrazolium pada Benih P. merkusii .......................................................... ... ............. 41

21. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Tetrazolium untuk Benih P. merkusii ......................................................... 47

22. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Hidrogen Peroksida untuk Benih P. merkusii ........................ ~ ................................ 47

23. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Eksisi Embrio untuk Benih P. merkusii .................... .. .... ..... ................................... 47

24. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Belah untuk Benih P. merkusii ..................... .... ..... ....... ... ..... ... ................... 47

25. Sketsa Struktur Benih S. macrophyl/a ...................................... 49

26. Sketsa Pola Pewarnaan Hasil Uji Tetrazolium pada Benih S. macrophyl/a . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 51 .

27. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Tetrazolium untuk Benih S. macrophyi/a . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ... . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 57

28. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Hidrogen Peroksida untuk Benih S. macrophylla .................................................... 57

29. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Eksisi Embrio untuk Benih S. macrophylla ............................................................. 57

30. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Belah untuk Benih S. macrophylla .. . . .. . .. . . . .. .. .. .. .. .. .. . .. . . .. .. .. .. . .. .. . .. .. . .. .. .. .. .. . 57

xii

DAFTAR LAMPIRAN

No. Te ks

1. Bahan dan Alat yang Digunakan untuk Uji Cepat Viabilitas Benih (a). Uji Tetrazolium, (b). Uji Hidrogen Peroksida,

Hal.

(c). Uji Eksisi Em brio dan (e). Uji Belah .................................... 61

2. Prosedur Pengambilan Contoh Benih untuk Pengujian .... .... .. .. .... 62

3. Cara Pembuatan Larutan Tetrazolium .. .. .. .... .. .. ...... .... .... .. .. .. .. .. 63

4. Cara Pembuatan Larutan Hidrogen Peroksida .. .. .. .. .. .. .. .. . .. .... .. .. . 64

5. Glosari . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . .. . . . . . . .. . . . . . . . . .. . . . . . .. . . . . .. . . . . . 65

xiii

I. PENDAHULUAN

1.1. Mutu Benih

Keberhasilan penanaman terutama dalam skala yang besar sangat dipengaruhi oleh interaksi antara faktor-faktor biotik, klimatik, edafik, teknik maupun manajemen. Secara tidak langsung faktor teknik seringkali dinyatakan sebagai penyebab utama kegagalan, misalnya karena rendahnya mutu benih. Untuk membedakan suatu benih bermutu atau tidak, secara visual sangat sulit. Apabila benih ditanam tanpa melalui proses pengujian mutu, maka perbedaan baru akan terlihat setelah benih tumbuh di lapangan atau setelah tanaman berproduksi, sehingga konsumen benih akan dirugikan karena kehilangan waktu, biaya dan kemungkinan harus melakukan penanaman ulang (Sadjad, 1980). Informasi yang diperoleh dari pengujian benih akan bermanfaat bagi produsen, penjual maupun konsumen benih, karena mendapat keterangan yang dapat dipercaya tentang mutu atau kualitas dari suatu benih. Pengujian benih adalah penilaian secara objektif tentang mutu benih yang diproduksi atau diedarkan.

Pengujian benih terdiri dari: pengujian karakteristik fisik benih dan pengujian karakteristik biologis benih. Pengujian karakteristik benih meliputi : Kemurnian benih, kadar air benih dan berat 1000 butir. Sedangkan karakteristik biologis benih meliputi: pendugaan viabilitas dan vigor benih. Secara garis besar pengujian kualitas suatu kelompok benih dapat dilakukan berdasarkan metode indikasi viabilitas benih.

1.2. Viabilitas

Viabilitas benih merupakan refleksi dari mutu benih, yang dapat didefinisikan sebagai daya hidup benih yang ditunjukkan oleh fenomena pertumbuhan benih atau gejala metabolismenya dan dapat pula ditunjukkan oleh keadaan organel sitoplasma atau kromosom. Sementara Gordon (1992), menyatakan bahwa viabilitas adalah kemampuan yang dimiliki oleh benih untuk berkecambah, sedangkan perkecambahan adalah keberhasilan proses di dalam benih untuk menghasilkan semai yang baik di persemaian.

1.3. Pengujian Viabilitas

Viabilitas benih dapat dideteksi melalui beberapa pendekatan, pendekatan yang paling lazim dilakukan adalam melalui pendekatan fisiologis. Metode pendekatan fisiologis ini dibagi menjadi metode langsung dan tidak langsung. Metode langsung yaitu apabila pengamatan dilakukan pada setiap individu benih, sedangkan metode tidak langsung jika deteksi viabilitas tersebut dilakukan terhadap sejumlah benih sekaligus. Deteksi viabilitas benih dari gejala pertumbuhannya disebut penilaian dengan indikasi langsung, sedangkan penilaian viabilitas benih dari gejala metabolisme, bentuk fisik yang kesemuanya tanpa memperlihatkan gejala pertumbuhan disebut pendekatan dengan indikasi tidak langsung.

Pada pengujian viabilitas benih dengan menggunakan indikator pertumbuhan kecambahnya sering disebut dengan indikasi langsung, di mana yang dinilai

1

adalah kenormalan pertumbuhan kecambah dan dilakukan dalam jangka waktu tertentu. Sedangkan metode pengujian yang didasarkan pada proses metabolisme benih yang merupakan indikasi tak langsung atau sering disebut juga dengan uji cepat.

1.4. Uji Cepat Viabilitas

Pendugaan potensial perkecambahan dari suatu kelompok benih dengan mengecambahkannya langsung merupakan suatu metode yang hampir relevan dalam praktek bidang kehutanan. Tetapi pengujian tersebut akan membutuhkan waktu yang lama, seperti yang diungkapkan oleh Zanzibar (1996), bahwa pelaksanaan pengujian viabilitas benih dengan menggunakan indikator gejala pertumbuhan kecambah biasanya memerlukan waktu yang relatif lama. Untuk jenis pohon hutan, waktu yang diperlukan berkisar antara 7- 30 hari tergantung pada jenis benihnya. Dalam beberapa keadaan, jenis-jenis tertentu secara normal akan berkecambah secara lambat atau menunjukan gejala dormansi sehingga informasi mengenai viabilitas benih tidak dapat segera diperoleh. Keadaan ini akan berpengaruh terhadap benih yang diuji dan keputusan tentang pengadaan benih untuk keperluan yang bersangkutan misalnya untuk penanaman. Sehingga diperlukan metode pengujian viabilitas benih yang dapat menduga secara akurat namun lebih cepat dari pada pengujian perkecambahan secara langsung. Dalam hal ini maka dikembangkan uji cepat viabilitas benih.

Tujuan dari uji cepat viabilitas benih menurut Manan (1976) dan Willan (1985), adalah:

(a). Untuk menentukan secara cepat viabilitas benih suatu spesies yang berkecambah normal secara lambat atau menunjukkan dormansi di bawah perkecambahan normal.

(b ). Untuk menentukan viabilitas dari suatu sampel yang pada akhir uji perkecambahan menyatakan suatu persentase yang tinggi dar:i yang tidak berkecambah (hard seed).

Beberapa metode uji cepat yang dapat digunakan dalam menduga viabilitas benih, antara lain: uji belah (cutting test), uji tetrazolium, uji hidrogen peroksida, metode radiografi, uji eksisi embrio, uji daya hantar listrik dan uji indigo carmine.

1.5. Standardisasi Uji Cepat Viabilitas

Penilaian secara objektif dapat dilaksanakan dengan baik dalam melakukan uji cepat viabilitas bila ditetapkan adanya pembakuan dalam segala segi, mulai dari benih yang diuji, metode pengujian, alat pengujian, skill atau keahlian tenaga penguji sampai dengan parameter yang digunakan untuk menilai hasil pengujian tersebut.

Standarisasi uji cepat viabilitas benih tanaman hutan mencakup standar prosedur pengujuan dan kunci interpretasi. Pedoman standarisasi uji cepat viabilitas ini diharapkan dapat membantu mempermudah aktivitas berbagai pihak yang berkepentingan dalam pengujian benih. Dengan adanya pedoman

2

standar ini maka hasil pengujian lot benih akan seragam jika dikerjakan oleh pihak lain, informasi data hasil pengujian diharapkan mempunyai keakuratan yang cukup baik dan dapat digunakan sebagai acuan dalam rangka penerapan aspek legalitas perbenihan.

Metode uji cepat viabilitas benih tanaman hutan yang terdapat dalam pedoman ini meliputi : (1). Uji Tetrazolium Topografis (Tetrazolium Topography Test), (2). Uji Hidrogen Peroksida (Hidrogen Peroxida Test), (3). Uji Eksisi Embrio (Exicion Embryo Test) dan ( 4). Uji Selah (Cutting Test). Sedangkan jenis benih tanaman hutan yang diuji meliputi : (1). Akasia (Acacia mangium), (2). Gmelina (Gme/ina arborea), (3). Sengon (Paraserianthes falcataria), (4). Pinus (Pinus merkusil) dan (5). Mahoni (Swietenia macrophyl/a).

3

II. METODE UJI CEPAT VIABIUTAS

2.1. Uji Tetrazolium Topografis

Metode ini merupakan salah satu dari sejumlah metode uji secara biokimia yang telah dikembangkan dan merupakan teknik pengujian yang cukup tepat untuk menduga viabilitas benih. Dengan mengunakan metode ini, dalam waktu kurang lebih 24 jam viabilitas dari suatu kelompok benih telah dapat diduga. Walaupun metode uji tetrazolium telah dinyatakan oleh ISTA sebagai metode resmi untuk beberapa jenis kayu daun lebar dan konifer pada tahun 1976, tetapi sampai saat ini metode dan standar pengujian dengan cara tetrazolium untuk benih tanaman hutan masih sangat sedikit yang telah dibakukan dalam peraturan pengujian internasional/ISTA.

Metode uji tetrazolium menggunakan prinsip bahwa setiap sel hidup akan berwarna merah oleh reduksi dari suatu pewarnaan garam tetrazolium dan membentuk endapan formazan merah sedangkan sel-sel yang mati menunjukan warna putih. Dengan merendamnya terlebih dahulu selama semalam, kemudian dibelah dan direndan dalam larutan garam selama beberapa jam, telah dapat menunjukan reaksi yang jelas dan dapat membedakan antara sel yang masih hid up dengan yang sudah mati.

Reaksi tesebut diringkas sebagai berikut:

+2W HCI

2, 3, 5 trifenil tetrazolium chlorida 2, 3, 5 trifenil formazan

Enzim yang mendorong terjadinya proses ini adalah dehidrogenase dan kegiatan ini berkaitan dengan respirasi. Faktor-faktor yang mempengaruhi reaksi tetrazolium menurut Byrd (1983) adalah suhu, pH larutan, perlakuan terhadap benih, konsentrasi larutan dan tekanan udara tempat pengujian dilakukan.

Menurut Sutopo (1998), beberapa kelebihan dan kekurangan uji tetrazolium antara lain:

5

(a). Jika diperlukan keterangan segera tentang viabilitas dari suatu kelompok benih tertentu, maka uji tetrazolium akan dapat memberikan keterangan lebih cepat dibanding uji perkecambahan secara langsung. Tetapi untuk pelaksanaan uji tetrazolium diperlukan waktu yang lebih lama dari pada uji Perkecambahan secara langsung.

(b ). Untuk benih-benih yang sangat dominan atau yang lambat berkecambah lebih menguntungkan bila menggunakan uji tetrazolium.

(C). Kadangkala suatu kelompok benih gagal berkecemabah atau mungkin berkecambah lebih lam bat dari biasanya disebabkan oleh tipe dormansi after ripening. Untuk menentukan viabilitas benih tersebut secara cepat maka dapatdigunakan uji tetrazolium.

(d). Efek phytotoxic dari fungisida, insektisida atau fumigasi dengan metyl bromide yang telah diperlakukan pada benih tidak dapat diketahui dengan uji tetrazolium.

(e). Uji tetrazolium tidak selalu dapat memberikan keterangan tentang kerusakan pada benih yang disebabkan oleh proses pengeringan.

(f). Uji tetrazolium memerlukan lebih banyak kecakapan dan keputusan dari pada yang biasa diperlukan dalam uji perkecambahan secara langsung. Seringkali diperlukan beberapa kali pembesaran untuk dapat mempelajari dengan seksama pola noda dan lokasi daerah nekrotik yang tidak ternoda.

2.2. Uji Hidrogen Peroksida

Hidrogen peroksida (HZOZ) merupakan suatu larutan yang dapat merangsang perkecambahan benih, sehingga dapat digunakan untuk uji perkecambahan terhadap beberapa benih jenis konifer di Amerika Barat (Willan, 1985). Menurut Leadem (1984), metode pengujian benih dengan menggunakan hidrogen peroksida merupakan satu-satunya uji cepat viabilitas benih yang dapat merangsang perkecambahan benih dan dapat digunakan untuk mempercepat perkecambahan. Namun uji ini memerlukan waktu selama satu minggu penuh dan pengujiannya agak sulit untuk benih-benih yang berukuran kecil.

Keuntungan penggunaan metode hidrogen peroksida sebagai uji cepat viabilitas benih antara lain: tidak mahal dan alat-alat yang dibutuhkan cukup sederhana, bersifat objektif dan sederhana dalam penyiapannya. Sedangkan kekurangan dari metode pengujian ini antara lain: tidak praktis untuk benih yang berukuran kecil, pengujiannya bersifat merusak dan relatif lambat (memerlukan waktu 7-8 hari sampai memberikan hasil pengujian yang memuaskan).

2.3. Uji Eksisi Embrio

Merupakan uji viabilitas benih yang mempunyai nilai yang khusus karena digunakan terutama untuk mendeterminasi viabilitas benih yang bisanya berkecambah lambat atau memperlihatkan dormansi karena kulit benih dan/ atau embrio. Viabilitas benih tersebut dapat dideterminasi secara cepat 5 - 14 hari melalui pengamatan terhadap perilaku embrio dalam kondisi jaringan setelah pemotongan dan inkubasi selanjutnya. Embrio yang viabel akan memperlihatkan warna hijau, tumbuh atau tetap segar sementara embrio yang non viabel akan rusak. Meskipun uji ini bersifat labour intensif dan memerlukan keterampilan

6

serta kesabaran dalam memotong embrio benih secara utuh, tapi merupakan alternatif yang dapat diterima untuk uji viabilitas benih, terutama untuk benihbenih yang memerlukan waktu yang lama jika diuji dengan metode pengujian yang umum, biasanya mencapai 60 hari.

Menurut Bonner et al. (1994), keuntungan penggunaan metode eksisi embrio sebagai uji cepat viabilitas benih antara lain: peralatan yang dibutuhkan untuk pengujian cukup sederhana, yang diuji merupakan kondisi benih sebenarnya dan mudah untuk dievaluasi. Sedangkan kekurangan dari metode ini antara lain: bersifat labour intensive dan memerlukan waktu yang panjang dalam mempersiapkan benih sebelum diuji, pengujiannya bersifat merusak dan relatif lambat (memerlukan waktu 10 - 14 hari sampai memberikan hasil pengujian yang memuaskan).

2.4. Uji Belah

Uji belah (cutting test) merupakan suatu metode uji cepat yang biasanya digunakan untuk menguji viabilitas benih dalam jumlah yang banyak. Uji ini dapat digunakan di lapangan untuk memperkirakan benih yang telah masak atau kualitas kumpulan benih (seed lot) dalam kegiatan pengumpulan benih.

Metode ini merupakan salah satu metode pengujian viabilitas benih yang paling sederhana, yang dilakukan dengan cara melihat secara langsung dengan mata terhadap benih yang telah dibelah dengan pisau atau skapel. Jika endospermnya mempunyai warna normal dengan embrio yang baik, maka benih tersebut mempunyai kemungkinan untuk berkecambah, sehingga pengujian ini bersifat sangat subjektif. Dengan hanya melihat penampilannya secara langsung, benih tersebut seperti hidup padahal kalau dikecambahkan mungkin tidak akan berkecambah. Sehingga hasil dari pengujian ini akan memberikan nilai perkecambahan yang lebih bes~r dibanding keadaan sebenarnya.

Menurut Boner et al. ( 1994), keuntungan uji cepat viabilita? benih dengan metode belah antara lain: merupakan metode uji viabilitas benih yang cepat dan murah, dapat digunakan di lapangan untuk memeriksa kualitas benih yang dikumpulkan pada saat pemanenan dan hasil pengujian cukup akurat untuk benih-benih yang masih segar. Sedangkan kekurangan dari metode pengujian ini antara lain: sulit dilakukan untuk benih-benih yang berukuran kecil, memberikan hasil pengujian yang tidak tepat untuk benih-benih yang telah mengalami penyimpanan dan merupakan uji yang merusak.

7

III. UJI CEPATVIABILITASJENISAcacia mangium

3.1. UMUM

Benih A. mangium memiliki kulit benih yang keras dan sulit ditembus air. Bila benih tersebut dikecambahkan secara konvensional dengan metode uji di atas kertas (UDK) maupun di rumah kaca diperlukan waktu lebih kurang 21 hari.

A. mangium, termasuk kedalam famili Leguminosae, umumnya memiliki 3 bagian dasar benih yaitu embrio, jaringan penyimpan cadangan makanan dan pelindung biji. Jaringan penyimpan cadangan makanan berupa kotiledon, sedangkan embrio terdiri dari radikel dan plumula. Pengamatan terhadap benih yang akan diuji dengan menggunakan metode uji cepat viabilitas difokuskan pada strukturtumbuh benihnya berupa radikel, plumula dan kotiledon CGambar 1).

-----Kulit benih

Kotiledon

Plumula

Radikel

Gambar 1. Sketsa Struktur Benih A. mangium

3.2. UJI TETRAZOLIUM TOPOGRAFIS

3.2.1. Standardisasi Prosedur

3.2.1.1. BahandanAlat

Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, garam tetrazolium (2,3,5,triphenil tetrazolium chlorida), Na2HP02.2H20, KH2P04, etanol 70%, kertas merang dan aluminium foil.

Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset silet, oven, alat pengaduk, saringan, semprotan tangan, timbangan dan alat pembagi benih. Gambar bahan dan alat yang digunakan untuk uji tetrazolium dapat di Ii hat pada Lampi ran 1.

3.2.1.2. Pengambilan Conteh Benih

Pengambilan contoh benih dimaksudkan agar mutu benih yang diperoleh benarbenar mewakili kelompok benih (seed lot) yang hendak diuji. Prosedur pengambilan contoh dilakukan berdasarkan Pedoman Standarisasi Pengujian, Mutu Fisik dan Fisiologis Benih Tanaman Hutan (BTP, 2000), yang selengkapnya disajikan pada Lampiran 2. Jumlah benih yang diperlukan untuk pengujian ini adalah 4 x 100 butir benih. ·

9

3.2.1.3. Sterilisasi Bahan dan Alat

Cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, silet, alat pengaduk, saringan, kertas merang dan aluminium foil dipanaskan dalam oven pada suhu 105 °C selama 24 jam. Sterilisasi dapat juga dilakukan dengan menyemprotkan etanol 70% secara merata ke seluruh bagian alat tersebut dengan menggunakan semprotan tangan.

3.2.1.4. Pembuatan Larutan Tetrazolium

Cara pembuatan larutan tetrazolium disajikan pada Lampiran 3.

3.2.1.5. Pengkondisian, Perendaman dan Pengujian

Pengkondisian, perendaman dalam larutan tetrazolium dan pengujian dilakukan dengan cara sebagai berikut:

(1) Lubangi ujung kulit benih (berlawanan arah dengan radikel) dengan gunting kuku. Pada saat melubangi kulit, jangan sampai terkena kotiledon, karena akan mempengaruhi pola pewarnaan yang terbentuk.

(2) Rendam benih tersebut dalam aquades selama 24 jam di dalam gelas piala.

(3) Kupas kulit dan belah benih menjadi keping benih dengan silet, Pengupasan dan pembelahan benih harus dilakukan secara hati-hati, jangan sampai terjadi cacat. Pada saat membelah, kondisi radikel, plumula, dan kotiledon harus terbagi dua.

(4) Rendam salah satu keping benih dalam larutan tetrazolium 1 % yang ditempatkan dalam gelas piala yang telah ditutup dan dilapisi seluruhnya dengan aluminium foil (volume larutan tetrazolium = 3 x volume benih).

(5) Masukkan gelas piala tersebut ke dalam oven dengan suhu 40 °C selama . 2jam.

(6) Tempatkan benih dalam saringan, lalu bilas dengan aquades selama 30 -60 detik.

(7) Tempatkan benih pada cawan petri yang beriz)i 2 lembar kertas merang lembab untuk dianalisis pola pewarnaan yang terbentuk pada radikel, plumula dan kotiledon.

(8) Amati intensitas dan luas pewarnaan yang terbentuk. Intensitas pewarnaan dibagi menjadi warna merah (M), merah muda (Mm) dan putih (P), sedangkan penghitungan luas pewarnaan (%) dilakukan dengan membandingkan masing-masing warna yang terbentuk terhadap luas keseluruhan permukaan bagian dalam keping benih. Pola pewarnaan yang terbentuk dicocokkan dengan kunci interpretasi.

10

3.2.2. Kunci Interpretasi

Viabilitas benih A. mangium yang diuji dapat diketahui dengan melihat persentase pola pewarnaan yang terbentuk dan mencocokkannya dengan kunci interpretasi pada Tabel 1 dan Gambar 2, sedangkan contoh benih viabel dan non viabel hasil uji tetrazolium dapat dilihat pada Gambar 3.

Tabel 1. Kunci Interpretasi Hasil Uji Tetrazolium untuk Benih A. mangium

Benih No. Krfterta

1. 2.

3. lOOM

Viabel 4. 100 M Terdapat Mm dan tanpa P

5. 100 M 5 - 20 P tertetak jauh di atas/tJdak di sekltar embrio dan memlllki ~ 50 M

6. TerdapatMm dan tan p

0 - 5 p terletak jauh di atas/tldak di sekitar embrio dan memilikl ~ 50 M'

1. 100 M > so .P · 2. 100M > 20 P dan memllikl < so M

Non Vrabel 3.

4. > 5 P dan memlliki < 50 M

5.

Benih Viabel

2a 2b 3a 3b

4a 4b Sa Sb 6a 6b

Benih Non Viabel

1 2 3 4a 4b s Gambar 2. Sketsa Pola Pewarnaan Hasil Uji Tetrazolium pada Benih A. mangium

11

Berdasarkan Tabel 1 dan Gambar 2, secara umum kunci interpretasi uji tetrazolium untuk benih A. mangium adalah sebagai berikut:

(1). Benih viabel

a. Radikel dan plumula berwarna merah sampai merah muda tanpa putih.

b. Kotiledon berwarna merah sampai 50 % putih (terletak jauh di atas/ tidakdi sekitar poros embrio) dan memiliki 3 50% merah.

(2). Benih non viabel

a. Terdapat warna putih pada radikel dan plumula.

b. Pada kotiledon terdapat > 50 % putih dengan warna merah < 50 % merah.

3.3. UJI HIDROGEN PEROKSIDA


3.3.1.1. Bahan dan Alat

Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, larutan hidrogen peroksida, benomil, etanol 70%, kertas merang dan aluminium foil. Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, penggaris, oven, alat pengaduk, inkubator dan alat pembagi benih. Gambar bahan dan alat yang digunakan untuk uji hidrogen peroksida dapat dilihat pada Lampi ran 1.

3.3.1.2. Pengambilan Contoh Benih

Pengambilan contoh benih dimaksudkan agar mutu benih yang diperoleh benarbenar mewakili kelompok benih (seed lot) yang hendak diuji. Prosedur pengambilan contoh dilakukan berdasarkan Pedoman Standarisasi Pengujian Mutu Fisik dan Fisiologis Benih Tanaman Hutan (BTP, 2000), yan_g selengkapnya disajikan pada Lampiran 2. Jumlah benih yang diperlukan untuk pengujian ini adalah 4 x 100 butir benih.


3.3.1.3.1. Sterilisasi dengan Oven/Etanol

Cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, alat pengaduk, kertas merang dan aluminium foil dipanaskan dalam oven pada suhu 105 °C selama 24 jam. Sterilisasi dapat juga dilakukan dengan menyemprotkan etanol 70% secara merata ke seluruh bagian alat tersebut dengan menggunakan semprotan tangan.

3.3.1.3.2. Sterilisasi dengan Benomil

Benih yang akan diuji disterilkan dengan cara merendamnya di dalam benomil selama 1 jam, kemudian di bi las dengan aquades dan benih siap untuk diuji.

3.3.1.4. Pembuatan Larutan Hidrogen Peroksida

Cara pembuatan larutan hidrogen peroksida disajikan pada Lampiran 4.

12


Pengkondisian, perendaman dalam larutan hidrogen peroksida dan pengujian dilakukan dengan cara sebagai berikut :

(1) Sterilkan benihA. mangium dengan benomil (lihat3.3.1.3.2.).

(2) Potong ujung kulit benih (berlawanan arah dengan radikel) dengan gunting kuku.

(3) Rendam benih tersebut dalam larutan H20 2 0,5% (volume larutan H20 2 = 3 x volume benih) dalam gelas piala yang ditutup dengan aluminium foil.

(4) Masukkan gelas piala tersebut ke dalam inkubator atau ruangan gelap pada suhu 20 - 30 °C. Pengujian dilakukan selama 7 hari.

(5) Ganti larutan HZOz dengan larutan HzOz yang baru pada hari ke-1 dan ke-4.

(6) Bilas benih dengan aquades, kemudian tempatkan benih tersebut dalam cawan petri yang berisi 2 lembar kertas merang lembab.

(7) Ukur panjang radikel yang muncul dengan penggaris, kemudian hasil pengukuran tersebut dicocokkan dengan kunci interpretasi.


Kunci interpretasi untuk benih viabel dan non viabel hasil uji hidrogen peroksida didasarkan pada panjang radikel yang muncul pada akhir periode pengamatan. Benih viabel memiliki panjang radikel ~ 0,5 mm, sedangkan benih non viabel memiliki panjang radikel < 0,5 mm atau tidak terjadi pemunculan radikel. Contoh benih viabel dan non viabel hasil uji hidrogen peroksida dapat dilihat pada Gambar4. ·

3.4. UJI EKSISI EMBRIO



Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, benomil, etanol 70% dan kertas saring. Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, silet, lup, semprotan tangan, oven, inkubator, laminar flow dan alat pembagi benih. Gambar bahan dan alat yang digunakan untuk uji eksisi embrio dapat dilihat pada Lampi ran 1.


Pengambilan contoh benih dimaksudkan agar mutu benih yang diperoleh benarbenar mewakili kelompok benih (seed lot) yang hendak diuji. Prosedur pengambilan contoh dilakukan berdasarkan Pedoman Standarisasi Pengujian Mutu Fisik dan Fisiologis Benih Tanaman Hutan (BTP, 2000), yang selengkapnya disajikan pada Lampiran 2. Jumlah benih yang diperlukan untuk pengujian ini adalah 4 x 100 butir benih.

13



Cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, silet dan kertas saring dipanaskan dalam oven pada suhu 105 °C selama 24 jam. Sterilisasi dapat juga dilakukan dengan menyemprotkan etanol 70% secara merata ke seluruh bagian alat tersebut dengan menggunakan semprotan tangan.

3.4.1.3.2. Sterilisasi dengan Benomil

Benih yang akan diuji disterilkan dengan cara merendamnya di dalam benomil selama 1 jam, kemudian di bi las dengan aquades dan benih siap untuk diuj i.

3.4.1.4. Pengkondisian, Pemotongan Embrio dan Pengujian

Pengkondisian, pemotongan embrio dan pengujian dilakukan dengan cara sebagai berikut :

(1) Sterilkan benih A. mangium dengan benomil (lihat 3.4.1.3.2.).

(2) Lubangi ujung kulit benih (berlawanan arah dengan radikel) dengan gunting kuku.

(3) Rendam benih tersebut dalam aquades selama 24 jam dengan suhu perendaman 25 °C.

(4) Ganti air perendam 2 x sehari guna mencegah terakumulasinya eksudat yang dikeluarkan oleh benih.

(5) Belah benih dan keluarkan embrionya dengan menggunakan silet. Ketika membelah, kondisi plumula dan radikel harus utuh (tidak boleh ikut terbelah atau cacat). Untuk menjamin kondisi aseptik selama kegiatan pemotongan, lakukan kegiatan di dalam laminar flow atau di tempat yang steril. Peralatan yang digunakan harus selalu dalam keadaan steril.

(6) Letakkan embrio pada cawan petri yang berisi media berupa 2 lembar kertas saring lembab.

(7) Masukkan cawan petri tersebut ke dalam inkubator atau ruang kamar pada suhu konstan (20 - 25 °C) selama 5 hari dengan periode pencahayaan minimal 8 jam per hari.

(8) Amati setiap hari kondisi embrio dan buang embrio yang busuk dan berjamur. Apabila media mulai kering, semprotkan aquades secukupnya.

(9) Kondisi radikel dan plumula yang diperoleh pada akhir pengamatan, dicocokkan dengan kunci interpretasi.


Kunci interpretasi hasil uji eksisi embrio untuk embrio benih A. mangium dapat dilihat pada Tabel 2, sedangkan contoh embrio viabel dan non viabel hasil uji eksisi em brio dapat dilihat pada Gambar 5.

14

Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, etanol 70% dan kertas merang. Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, silet, semprotan tangan, lup, oven dan alat pembagi benih. Gambar bahan dan a lat yang digunakan untuk uji belah dapat dilihat pada Lampiran 1.

Tabel 2. Kunci Interpretasi Hasil Uji Eksisi Embrio untuk Benih A. mangium

Embrio Viabel Embrio Non Viabel

- Terjadi pertumbuhan pada radikel dan - lidak terjadi pertumbuhan pada radikel plumula dan plumula

- Embrio tetap kokoh/segar - Embrio cepat rusak, lunak/membusuk

- Berwama kuning atau kuning kehijauan - Berwama putih dan mengeluarkan cairan - Terjadi pengotoran berwama coklat atau

3.5. UJI SELAH



hitam

Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, etanol 70% dan kertas merang. Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, silet, semprotan tangan, lup, oven dan alat pembagi benih. Gambar bahan dan a lat yang digunakan untuk uji belah dapat dilihat pada Lampiran 1.


Pengambilan contoh benih dimaksudkan agar mutu benih yang diperoleh benarbenar mewakili kelompok benih (seed lot) yang hendak diuji. Prosedur pengambilan contoh dilakukan berdasarkan Pedoman Standarisasi Pengujian Mutu Fisik dan Fisiologis Benlh Tanaman Hutan (EITP, 2000), yang selengkapnya disajikan pada Lampiran 2. Jumlah benih yang diperlukan untuk pengujian ini adalah 4 x 100 butir benih.


Cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, silet dan kertas merang dipanaskan dalam oven pada suhu 105 °C selama 24 jam. Sterilisasi dapat juga dilakukan dengan menyemprotkan etanol 70% secara merata ke seluruh bagian a lat tersebut dengan menggunakan semprotan tangan.

3.5.1.4. Pengkondisian, Pembelahan dan Pengujian Benih

Pengkondisian, pembelahan dan pengujian benih dilakukan dengan cara sebagai berikut:

(1) Lubangi ujung kulit benih (berlawanan dengan arah radikel) dengan gunting kuku.

(2) Rendam benih tersebut dalam aquades selama 24 jam dalam gelas piala.

(3) Kupas kulit benih dan belah benih searah keping (memanjang) dengan menggunakan silet. Radikel, plumula dan kotiledon harus terbagi dua.

15

(4) Amati warna dan penampakan radikel, plumula dan kotiledon dengan mata telanjang atau menggunakan kaca pembesar (lup), sehingga dapat ditentukan benih tersebut viabel atau non viabel, sesuai dengan kunci i nterpretasi.


Kunci interpretasi hasil uji belah untuk benih A. mangium dapat dilihat pada Tabel 3, sedangkan contoh benih viabel dan non viabel hasil uji belah dapat dilihat pada Gambar 6.

Tabel 3. Kunci Interpretasi Hasil Uji Selah untuk Benih A. mangium

Benih Viabel Benih Non Viabel

Struktur tumbuh berwama kuning, . Struktur tumbuh berwarna putih atau putih kuning kehijauan atau putih kekuningan kecoklatan dan kering atau lunak/layu dan segar I . Terdapat kerusakan mekanis

- Tidak terdapat kerusakan mekanis I - Berbau busuk

16

~

.....i

Gambar3.

Gambar 5.

(a)

(b)

Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Gambar4. Hasil Uji Tetrazolium untuk Benih A. mangium

Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Gambar6. Hasil Uji Eksisi Embrio untuk Benih A. mangium

,

Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Hidrogen Peroksida untuk Benih A. mangium

Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Belah untuk Benih A. mangium

IV. UJI CEPAT VIABILITAS JENIS Gmelina arborea

4.1.UMUM

G. arborea yang dikenal dengan jati putih, termasuk ke dalam famili Verbenaceae. Jenis ini merupakan salah satu jenis komersil yang banyak ditanam dalam program pembangunan HTI meskipun jenis ini termasuk jenis pohon asing (exotic). Untuk mengetahui viabilitas benih G. arborea secara konvensional dengan mengecambahkannya di persemaian pada media campuran tanah dan pasir (1: 1) memerlukan waktu lebih kurang 30 hari.

Buah G. arborea termasuk buah basah, panjangnya sekitar 20 - 35 mm dan mengkilap, pericarp keras dan beraroma manis, mempunyai mesocarp yang lunak (pulpy) dan endocarp keras dengan panjang sekitar 10 - 25 mm. Biji umumnya terdiri dari empat ruang embrio (poliembrio), terkadang lima embrio. Benih G. arborea memiliki struktur tumbuh yang terdiri dari extreme tip of radicle, embryonic axis dan kotiledon. Bagian-bagian benih tersebut akan menjadi fokus pengamatan pada uji cepat viabilitas. Struktur tumbuh benih G. arborea dapat dilihat pada Gambar 7.

extreme tip of radicle

embryonic axis

kotiledon

Gambar 7. Sketsa Struktur Benih G. arborea




Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, garam tetrazolium (2,3,5-triphenil betrazolium chlorida), Na2HP04.2H20, KH2P04, etanol 70%, natrium hipoklorit, kertas merang, lembaran plastik dan aluminium foil.

Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, gelas piala, ragum, martil, pinset, silet, oven, alat pengaduk, saringan, semprotan tangan, timbangan dan alat pembagi benih. Gambar bahan dan alat yang digunakan untuk uji tetrazolium dapat dilihat pada Lampi ran 1. ·

19





Cawan petri, gelas piala, pinset, silet, alat pengaduk, saringan, kertas merang dan aluminium foil dipanaskan dalam oven pada suhu 105 °C selama 24 jam. Sterilisasi dapat juga dilakukan dengan cara menyemprotkan etanol 70% secara merata ke seluruh bagian alat tersebut dengan menggunakan semprotan tangan.

4.2.1.3.2. Sterilisasi dengan Larutan Natrium Hipoklorit

Benih-benih yang telah dikeluarkan dari endocarp-nya, disterilkan dengan cara merendamnya dalam larutan natrium hipoklorit (pengenceran 1: 5) selama 5 menit, kemudian dibilas dengan aquades dan benih siap diuji.

4.2.1.4. Pembuatan LarutanTetrazolium



Pengkondisian, perendaman dalam larutan tetrazolium dan pengujian dilakukan dengan cara sebagai berikut :

(1) Keluarkan benih G. arborea dari endocarpnya dengan menggunakan ragum dan martil secara hati-hati. Kondisi benih jangan sampai cacat atau rusak, karena akan mempengaruhi pola pewarnaan yang terber)tuk.

(2) Ambil salah satu benih dalam satu endocarp untuk mewakili satu biji G. arborea.

(3) Sterilkan benih-benih tersebut dengan natrium hipoklorit (Ii hat 4.2.1.3.2).

( 4) Lembabkan benih tersebut pada 6 lembar kertas merang lembab selama 24 jam. Kertas merang lembab yang berisi benih tersebut dimasukkan ke dalam plastik atau cawan petri untuk mencegah penguapan.

(5) Kupas kulit benih dan belah benih menjadi keping benih dengan menggunakan silet. Pengupasan dan pembelahan benih harus dilakukan secara hati-hati, jangan sampai terjadi cacat. Pada saat membelah, kondisi extreme tip of radicle, embryonic axis dan kotiledon harus terbagi dua.

(6) Rendam salah satu keping benih dalam larutan tetrazolium 0,5% yang ditempatkan dalam gelas piala yang telah ditutup dan dilapisi seluruhnya dengan aluminium foil (volume larutan tetrazolium = 3 x volume benih).

20

(7) Masukkan gelas piala tersebut ke dalam oven dengan suhu 40 °C selama 4 jam.

(8) Tempatkan benih dalam saringan, lalu bilas benih dengan aquades selama 30-60 detik.

(9) Tempatkan benih pada cawan petri yang berisi 2 lembar kertas merang lembab untuk dianalisis pola pewarnaan yang terbentuk pada extreme tip of radicle, embryonic axis dan kotiledon.

(10) Amati intensitas dan luas pewarnaan yang terbentuk. Intensitas pewarnaan dibagi menjadi warna merah (M), merah muda (Mm) dan putih (P), sec:langkan penghitungan luas pewarnaan (%) dilakukan dengan membandingkan masing-masing warna yang terbentuk terhadap luas keseluruhan permukaan bagian dalam keping benih. Pola pewarnaan yang terbentuk dicocokkan dengan kunci interpretasi.


Viabilitas benih G. arborea yang diuji dapat diketahui dengan melihat persentase pola pewarnaan yang terbentuk dan mencocokkannya dengan kunci interpretasi pada Tabel 4 dan Gambar 8, sedangkan contoh benih viabel dan non viabel hasil uji tetrazolium dapat dilihat pada Gambar 9.




Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, larutan hidrogen peroksida, natrium hipoklorit, etanol 70%, kertas merang dan aluminium foil. .

alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, gelas piala, ragum, martil, pinset, penggaris, oven, alat pengaduk, inkubator dan alat pembagi benih. Gambar. bahan dan alat yang digunakan untuk uji hidrogen peroksida dapat dilihat pada lampiran 1.





Cawan petri, gelas piala, pinset, alat pengaduk, kertas merang dan aluminium

21

..

foil dipanaskan dalam oven pada suhu 105 °C selama 24 jam. Sterilisasi dapat juga dilakukan dengan menyemprotkan etanol 70% secara merata ke seluruh bagian a lat tersebut dengan menggunakan semprotan tangan.


Benih-benih yang akan diuji dan telah dikeluarkan dari endocarp-nya, disterilkan dengan cara merendamnya dalam larutan natrium hipoklorit (pengenceran)

Tabel 4. Kunci Interpretasi Hasil Uji Tetrazolium untuk Benih G. arborea

No. Persentase Pola Pewamaan Struktur Tumbuh Benih (%) Benih

Kriteria Extreme tip of radic/e Embryonic axis Kotiledon

1. 100 M 100 M 100 M

2. 100 M 100 M ~ 10 p

Viabel 3. 100 p 100 M 100 M

4. 100 p 100 M s 10 p

5. 100 M Terdapat P 100 M

1. 100 M Terdapat P ~ 10 p

2. 100 Mm 100 Mm 100 Mm

Non Viabel 3. 100 p Terdapat Mm Terdapat Mm

4. 100 p 100 p Terdapat Mm

5. 100 p 100 p 100 p

Benih Viabel

1 2 3 4 5

Benih Non Viabel

1 2 3 4 5

Gambar 8. Skeksa Pola Penawaran Hasil Uji Tetrazolium pada Benih G. arborea

22

1: 5) selama 5 men it, kemudian di bi las dengan aquades dan benih siap untuk diuji.




Pengkondisian, perendaman dalam larutan hidrogen peroksida dan pengujian diakukan dengan cara sebagai berikut :

(1) Keluarkan benih dari endocarp-nya dengan menggunakan ragum dan martil secara hati-hati. Kondisi benih jangan sampai retak atau cacat, karena benih akan cepat terkontaminasi oleh jamur.


(3) Sterilkan benih-benih tersebut dengan natrium hipoklorit (Ii hat 4.3.1.3.2.).

(4) Rendam benih tersebut dalam larutan Hi02 2% (volume larutan Hi02 = 3 xvolume benih) dalam gelas piala yang ditutup dengan aluminium foil.

(5) Masukkan gelas piala tersebut ke dalam inkubator atau ruangan gelap pada suhu 20 - 30 °C. Pengujian dilakukan selama 4 hari.

(6) Ganti larutan Hi02 dengan larutan Hi02 yang baru pada hari ke-1 dan ke-3.


(8) Ukur panjang radikel yang muncul dengan penggaris, kemudian hasil pengukuran dicocokkan d~ngan kunci interpretasi.


kunci interpretasi untuk benih viabel dan non viabel hasil uji hidrogen peroksida didasarkan pada panjang radikel yang muncul pada akhir periode pengamatan. Benih viabel memiliki panjang radikel ~ 2 mm dan atau kotiledon terbuka, sedangkan benih non viabel memiliki panjang radikel < 2 mm atau tidak terjadi pemunculan radikel. Contoh benih viabel dan non viabel hasil uji hidrogen peroksida dapat dilihat pada Gambar 10.




Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, natrium hipoklorit, etanol 70%,

23

kertas saring, kertas merang dan lembaran plastik. Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, gelas piala, ragum, martil, pinset, silet, lup, semprotan tangan, oven, inkubator, laminar flow dan alat pembagi benih. Gambar bahan dan a lat yang digunakan untuk uji eksisi embrio dapat dilihat pada Lampi ran 1.





Cawan petri, gelas piala, pinset, silet, kertas saring dan kertas merang dipanaskan dalam oven pada suhu 105 °C selama 24 jam. Sterilisasi dapat juga dilakukan dengan menyemprotkan etanol 70% secara merata ke seluruh bagian a lat tersebut dengan menggunakan semprotan tangan.


Benih-benih yang akan diuji dan telah dikeluarkan dari endocarp-nya, disterilkan dengan cara merendamnya dalam larutan natrium hipoklorit (pengenceran 1 : 5) selama 5 menit, kemudian dibilas dengan aquades dan benih siap untuk diuji.


Pengkondisian, pemotongan embrio dan pengujian dilakukan dengan cara sebagai berikut:

(1) Keluarkan benih G. arborea dari endocarp-nya dengan nienggunakan ragum dan martil secara hati-hati. Kondisi benih jangan sampai retak, cacat atau rusak, karena benih akan mudah terkontaminasi oleh jamur.

(2) Ambi l salah satu benih dalam satu endocarp untuk mewakili satu biji G. arborea.

(3) Sterilkan benih-benih tersebut dengan natrium hipoklorit (Ii hat 4.4.1.3.2).

(4) Lembabkan benih tersebut pada 6 lembar kertas merang lembab selama 24 jam. Kertas merang lembab yang berisi benih tersebut dimasukkan ke dalam plastik atau cawan petri agar benih tidak kering/mencegah penguapan.

(5) Kupas kulit benih dengan silet dan untuk memisahkan extreme tip of radicle dan embryonic axis dari kotiledonnya, potong bagian kotiledon yang berada di sekitar embryonic axis dengan menggunakan silet membentuk potongan segitiga. Pengupasan kulit benih dan pemotongan extreme tip of radicle dan embryonic axis harus dilakukan secara hati-

24

hati, kondlsi extreme tip of radicle dan embryonic axis harus utuh (tidak boleh terpotong atau cacat). Untuk menjamin kondisi aseptik selama kegiatan pemotongan, lakukan kegiatan di dalam laminar flow di tempat yang steril. Peralatan yang digunakan harus selalu dalam keadaan steril.

(6) Letakkan extreme t ip of radicle dan embryonic axis yang telah dipisahkan tersebut pada cawan petri yang berisi media berupa 2 lembar kertas saring lembab.


(8) Amati setiap hari kondisi extreme tip of radicle dan embryonic axis dan buang bila busuk dan berjamur. Apabila media mulai kering, semprotkan aquadessecukupnya.

(9) Kondisi embryonic axis dan extreme tip of radicle yang diperoleh pada akhir pengamatan, dicocokkan dengan kunci interpretasi.


Kunci interpretasi hasil uji eksisi embrio untuk embrio benih G. arborea dapat pada Tabel 5, sedangkan contoh embrio viabel dan non viabel hasil uji em brio dapat dilihat pada Gambar 11.

5. Kunci Interpretasi Hasil Uji Eksisi Embrio untuk Benih G. arborea

Embrio Viabel

Terjadi pertumbuhan akar serabut pada _extreme tip of radicle dan berwarna putih

- Embryonic axis berwarna hijau - Tetap kokoh/segar

Pada bekas potongan terlihat pengotoran berwarna coklat kering

4.5.UJI BELAH



r Embrio Non Viabel

- Tidak terjadi pertumbuhan akar serabut pada extreme tip of radicle

Extreme tip of radicle dan embryonic axis berwarna coklat ata1:1 putih kekuningan dan mengeluarkan cairan

Busuk/lunak

Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, etanol 70%, natrium hipoklorit, kertas merang dan lembaran plastik. Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, gelas piala, ragum, martil, pinset, silet, lup, semprotan tangan, oven dan alat pembagi benih. Gambar bahan dan alat yang digunakan untuk uji belah dapat dilihat pada Lampiran 1.


Pengambilan contoh benih dimaksudkan agar mutu benih yang diperoleh benarbenar mewakili kelompok benih (seed lot) yang hendak diuji. Prosedur pengambilan contoh dilakukan berdasarkan Pedoman Standarisasi Pengujian

25

Mutu Fisik dan Fisiologis Benih Tanaman Hutan (BTP, 2000), yang selengkapnya disajikan pada Lampiran 2. Jumlah benih yang diperlukan untuk pengujian ini adalah 4 x 100 butir benih.



Cawan petri, gelas piala, pinset, silet dan kertas merang dipanaskan dalam oven pada suhu 105 °C selama 24 jam. Sterilisasi dapat juga dilakukan dengan menyemprotkan etanol 70% secara merata ke seluruh bagian alat tersebut dengan menggunakan semprotan tangan.


Benih-benih yang akan diuji dan telah dikeluarkan dari endocarpnya, disterilkan dengan cara merendamnya dalam larutan natrium hipoklorit (pengenceran 1 : 5) selama 5 menit, kemudian dibilas dengan aquades dan benih siap untuk diuji.

4.5.1.4. Pengkondisian, Pembelahan dan Pengujian Benin


(1) Keluarkan benih G. arborea dari endocarp-nya dengan menggunakan ragum dan martil secara hati-hati. Kondisi benih jangan sampai retak, cacat atau rusak, karena benih akan mudah terkontaminasi oleh jamur.


(3) Sterilkan benih-benih tersebut dengan natrium hipoklorit (Ii hat 4.5.1.3.2.).

( 4) Lembabkan benih tersebut pada 6 lembar kertas merang lembab selama 24 jam. Kertas merang lembab yang berisi benih tersebut dimasukkan ke dalam plastik atau cawan petri agar benih tidak kering/mencegah penguapan.

(5) Kupas kulit benih dan belah benih searah keping (memanjang) dengan menggunakan silet. Extreme tip of radicle, embryonic axis dan kotiledon harus terbagi dua.

(6) Amati warna dan penampakan extreme tip of radicle, embryonic axis dan kotiledon dengan mata telanjang atau menggunakan kaca pembesar (lup), sehingga dapatditentukan benih tersebutviabel atau non viabel sesuai dengan kunci interpretasi.


Kunci interpretasi hasil uji belah untuk benih G. arborea dapat dilihat pada Tabel 6, sedangkan contoh benih viabel dan non viabel hasil uji belah dapat dilihat pada Gambar 12.

26

6. Kunci Interpretasi Hasil Uji Belah untuk Benih G. arborea

Benih Vlabel I Benih Non Viabel

- Embryonic axis, extreme tip of radicle dan T - Embryonic axis, extreme tip of radicle dan kotiledon segar · kotiledon kering, kurang segar, lunak/layu

- Berwarna putih - Berwarna putih kekuningan atau putih kecoklatan

27

N CX>

Gambar 9. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Tetrazolium untuk Benih A. arborea

Gambar 11. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Eksisi Embrio untuk Benih A. arborea

,

Gambar 10. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Hidrogen Peroksida untuk Benih A. arborea

Gambar 12. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Belah untuk Benih A. arborea

V. UJI CEPAT VIABILITAS JENIS Paraserianthes fa/cataria

5.1. UMUM

P. fa/cataria yang dikenal dengan nama sengon laut, termasuk ke dalam famili Leguminosae. Uji viabilitas benih P. falcataria secara konvensional yang dilakukan dengan metode uji di atas kertas (UDK) memerlukan waktu lebih kurang 14 hari.

Seperti benih-benih yang tergolong ke dalam famiii Leguminosae lainnya, benih P. fa/cataria juga memiliki 3 bagian dasar benih yaitu embrio, jaringan penyimpan cadangan makanan dan pelindung biji. Pengamatan terhadap benih yang akan diuji dengan menggunakan metode uji cepat viabilitas difokuskan pada struktur tumbuh benihnya berupa radikel, plumula dan kotiledon (Gambar 13).

Kulit benih

Kotiledon

Plumula

Radikel

Gambar 13. Sketsa Struktur Benih P. Falcataria




Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, garam tetrazolium (2,3,5-triphenil tetrazolium chlorida), Na2HP04.2H20, KH2P04, etanol 70%, kertas merang, lembaran plastik dan aluminium foil.

Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, silet, oven, alat pengaduk, saringan, semprotan tangan, timbangan dan alat pembagi benih. Gambar bahan dan alat yang digunakan untuk uji tetrazolium dapat dilihat pada Lampi ran 1.


Pengambilan contoh benih dimaksudkan agar mutu benih yang diperoleh benarbenar mewakili kelompok benih (seed lot) yang hendak diuji. Prosedur pengambilan contoh dilakukan berdasarkan Pedoman Standarisasi Pengujian

29

Mutu Fisik dan Fisiologis Benih Tanaman Hutan (BTP, 2000), yang selengkapnya disaj ikan pada Lampiran 2. Jumlah benih yang diperlukan untuk penguj ian ini adalah 4 x 100 butir benih.


Cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, silet, alat pengaduk, saringan, kertas merang dan alumunium foil dipanaskan dalam oven pada suhu 105 °c selama 24 jam. Sterilisasi dapat juga dilakukan dengan menyemprotkan etanol 70% secara merata ke seluruh bagian alat tersebut dengan menggunakan semprotan tangan.




Uji tetrazolium pada benih P. falcataria dapat dilakukan dengan dua cara, yaitu 1) menggunakan keping benih yang direndam dalam larutan tetrazolium 0,5% selama 2 jam, atau 2) menggunakan benih utuh yang direndam dalam larutan tetrazolium 1 % selama 3 jam.

5.2.1.5.1. Menggunakan Keping Benih


(1) Lubangi ujung kulit benih (berlawanan arah dengan radikel) dengan gunting kuku. Pada saat melubangi kulit benih, jangan sampai terkena kotiledon, karena akan mempengaruhi pola pewarnaan yang terbentuk.

(2) Lembabkan benih tersebut pada 6 lembar kertas merang lembab selama 24 jam. Kertas merang lembab yang berisi benih tersebut dimasukkan ke dalam plastik atau cawan petri untuk mencegah penguapan . .

(3) Kupas kulit benih dan belah benih menjadi keping benih dengan menggunakan silet. Pengupasan dan pembelahan benih harus dilakukan secara hati-hati, jangan sampai terjadi cacat. Pada saat membelah, kondisi radikel, plumula dan kotiledon harus terbagi dua. ,

(4) Rendam salah satu keping benih dalam larutan tetrazolium 0,5% yang ditempatkan dalam gelas piala yang telah ditutup dan dilapisi seluruhnya dengan aluminium foil (volume larutan tetrazolium = 3 x volume benih).

(5) Masukkan gelas piala tersebut ke dalam oven dengan suhu 40 °C selama 2jam.

(6) Tempatkan benih dalam saringan, lalu bilas benih dengan aquades selama 30 - 60 detik.

(7) Tempatkan benih pada cawan petri yang berisi 2 lembar kertas merang lembab untuk dianalisis pola pewarnaan yang terbentuk pada radikel plumula dan kotiledon.

30

(8) Amati intensitas dan Was pewarnaan yang terbentuk. Intensitas pewarnaan dibagi menjadi warna merah (M), merah muda (Mm) dan putih (P), sedangkan penghitungan luas pewarnaan (%) dilakukan dengan membandingkan masing-masing warna yang terbentuk terhadap luas keseluruhan permukaan bagian dalam keping benih. Pola pewarnaan yang terbentuk dicocokkan dengan kunci interpretasi.

5.2.1.5.2. Menggunakan Benih Utuh


(1) Lubangi ujung kulit benih (berlawanan arah dengan radikel) dengan gunting kuku. Pada saat melubangi kulit benih, jangan sampai terkena kotiledon, karena akan mempengaruhi pola pewarnaan yang terbentuk.

(2) Lembabkan benih tersebut pada 6 lembar kertas merang lembab selama 24 jam. Kertas merang lembab yang berisi benih tersebut dimasukkan ke dalam plastik atau cawan petri untuk mencegah penguapan.

(3) Kupas kulit benih dengan menggunakan silet. Pengupasan kulit benih harus dilakukan secara hati-hati, jangan sampai terjadi cacat.

( 4) Rendam benih tersebut dalam larutan tetrazolium 1 % yang ditempatkan dalam gelas piala yang telah ditutup dan dilapisi seluruhnya dengan aluminium foil (volume larutan tetrazolium = 3 x volume benih).


(6) Tempatkan benih dalam saringan, lalu bilas benih dengan aquades selama 30 - 60 detik.

(7) Selah benih tersebut menjadi keping benih dengan menggunakan silet. Pada saat membelah, kondisi radikel, plumula dan kotiledon· harus terbagi dua.

(8) Ambil salah satu keping benih dan tempatkan pada cawan petri yang berisi 2 lembar kertas merang lembab untuk dianalisis pola pewarnaan yang terbentuk pada radikel, plumula dan kotiledon.

(9) Amati intensitas dan luas pewarnaan yang terbentuk. Intensitas pewarnaan dibagi menjadi warna merah (M), merah muda (Mm) dan putih (P), sedangkan penghitungan luas pewarnaan (%) dilakukan dengan membandingkan masing-masing warna yang terbentuk terhadap luas keseluruhan permukaan bagian dalam keping benih. Pola pewarnaan yang terbentuk dicocokkan dengan kunci interpretasi.


Viabilitas benih P. falcataria yang diuji dapat diketahui dengan melihat persentase pewarnaan yang terbentuk dan mencocokkannya dengan kunci interpretasi Pada Tabel 7 dan Gambar 14, sedangkan contoh benih viabel dan non viabel hasil uji tetrazolium dapat dilihat pada Gambar 15. ·

31

Tabel 7. Kunci Interpretasi Hasil Uji Tetrazolium untuk Benih P. falcataria

Benih No. Persentase Pola Pewamaan Struktur Tumbuh Benih (O/o)

Krtteria Radikel Plumula Kotiledon

1. 100 M 100 M lOOM

2. 100 M 100 M Terdapat Mm dan tanpa P

Viabel 5 - 40 P yang terletak jauh di

3. 100 M 100 M atas atau tidak di sekitar poros embrio dan memiliki 2: 60 M

4. Terdapat M, Mm Terdapat M, Mm Terdapat M, Mm atau memiliki dan tanpa P dan tanpa P :5 20 P dengan 2: 60 M

1. 100 M 100 M > 40 P dan memiliki < 60 M

I 2. - Terdapat P -

Non Viabel 3. Terdapat P - -Merah Merah Merah kehitaman, layu

4. kehitaman, layu kehitaman, layu (Overstain) ( Overstain)

(Overstain)

Benih Viabel

1 2a 2b 3a 3b 4a 4b

Benih Non Viabel

1 2 3 4

Gambar 14. Sketsa Pola Pewarnaan Hasil Uji Tetrazolium pada Benih P. falcataria

32

5.3. UJI HI DROGEN PEROKSIDA

5.3. 1. Standardisasi Prosedur

5.3. 1.1. Bahan dan Alat

Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, larutan hidrogen peroksida, natrium hipoklorit, etanol 70%, kertas merang dan aluminium foil.

Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, penggaris, oven, alat pengaduk, inkubator dan alat pembagi benih. Gambar bahan dan alat yang digunakan untuk uji hidrogen peroksida dapat dilihat Lampiran 1.


Pengambilan contoh benih dimaksudkan agar mutu benih yang diperoleh benarbenar mewakili kelompok benih (seed lot) yang hendak diuji. Prosedur pengambilan contoh dilakukan berdasarkan Pedoman Standarisasi Penguj ian Mutu Fisik dan Fisiologis Benih Tanaman Hutan (BTP, 2000), yang selengkapnya disajikan pada Lampiran 2. Jumlah benih yang diperlukan untuk pengujian ini adalah 4 x 100 butir benih.



Cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, alat pengaduk, kertas merang dan aluminium foil dipanaskan dalam oven pada suhu 105 °C selama 24 jam. Sterilisasi dapat juga dilakukan dengan menyemprotkan etanol 70% secara merata ke seluruh bagian alat tersebut dengan menggunakan semprotan tangan.

5.3. 1.3.2. Sterilisasi dengan Larutan Natrium Hipoklorit

Benih yang akan diuji disterilkan dengan cara merendamnya di dalam larutan natrium hipoklorit (pengenceran 1 : 5) selama 15 menit, kemudian dibilas dengan aquades dan benih siap untuk diuji .


Cara pembuatan larutan hidrogen peroksida disajikan pada Lampi ran 4.

5.3.1.5. Pengkondisian, Perendaman dan Penguj ian


(1) Sterilkan benih P. falcataria dengan natrium hipoklorit (lihat 5.3.1.3.2.).

(2) Potong ujung kulit benih (berlawanan arah dengan radikel) dengan gunting kuku.

(3) Rendam benih tersebut dalam larutan H20 2 0,5% (volume larutan H20 2 = 3 x volume benih) dalam gelas piala yang ditutup dengan aluminium foil.

( 4) Masukkan gelas piala tersebut ke dalam inkubator atau ruangan gelap pada suhu 20 - 30 °C. Pengujian dilakukan sela~a 7 hari.

33

(5) Ganti larutan H202 dengan larutan H202 yang baru pada hari ke-1 dan ke-4.


(7) Ukur panjang radikel yang muncul dengan penggaris, kemudian hasil pengukuran dicocokkan dengan kunci interpretasi.


Kunci interpretasi untuk benih viabel dan non viabel hasil uji hidrogen peroksida didasarkan pada panjang radikel yang muncul pada akhir periode pengamatan Benih viabel memiliki panjang radikel ~ 1 mm, sedangkan benih non viabel memiliki panjang radikel < 1 mm atau tidak terjadi pemunculan radikel. Conteh benih viabel dan non viabel hasil uji hidrogen peroksida dapat dilihat pada Gambar 16.




Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, natrium hipoklorit, etanol 70% dan kertas saring. Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, gelas piala gunting kuku, pinset, silet, alat pengaduk, lup, semprotan tangan, oven, inkubator, laminar flow dan alat pembagi benih. Gambar bahan dan alat yang digunakan untuk uji eksisi embrio dapat dilihat pada Lampi ran 1.


Pepgambilan contoh benih dimaksudkan agar mutu benih yang diperoleh benarbenar mewakili kelompok benih (seed lot) yang hendak diuji. Prosedur pengambilan contoh dilakukan berdasarkan Pedoman Standarisasi Pengujian Mutu Fisik dan Fisiologis Benih Tanaman Hutan (B-FP, 2000), yang selengkapnya disajikan pada Lampiran 2. Jumlah benih yang diperlukan untuk pengujian ini adalah 4 x 100 butir benih.



Cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, silet dan kertas saring dipanaskan dalam oven pada suhu 105 °C selama 24 jam. Sterilisasi dapat juga dilakukan dengan menyemprotkan etanol 70% secara merata ke seluruh bagian alat tersebut dengan menggunakan semprotan tangan.


Benih yang akan diuji disterilkan dengan cara merendamnya di dalam larutan natrium hipoklorit (pengenceran 1: 5) selama 5 menit, kemudian dibilas dengan aquades dan benih siap untuk diuji.

34

5.4.1.4. Pengkondisian, Pemotongan Em brio dan Pengujian

Pengkondisian, pemotongan embrio dan pengujian dilakukan dengan cara sebagai berikut:

(1) Sterilkan benih P. falcataria dengan natrium hipoklorit (lihat 5.4.1.3.2.).

(2) Lubangi ujung kulit benih (berlawanan arah dengan radikel) dengan gunting kuku.

(3) Rendam benih tersebut dalam aquades selama 24 jam dengan suhu perendaman 25 °C.

(4) Ganti air perendam 2 x sehari guna mencegah terakumulasinya eksudat yang dikeluarkan oleh benih.

(5) Belah benih dan keluarkan embrionya dengan menggunakan silet. Ketika membelah, kondisi plumula dan radikel harus utuh (tidak boleh ikut terbelah atau cacat). Untuk menjamin kondisi aseptik selama kegiatan pemotongan, lakukan kegiatan di dalam laminar flow atau di tempat yang steril. Peralatan yang digunakan harus selalu dalam keadaan steril.

(6) Letakkan embrio pada cawan petri yang berisi media berupa 2 lembar kertas saring lembab.



(9) Kondisi radikel dan plumula yang diperoleh pada akhir pengamatan, dicocokkan dengan kunci interpretasi.


Kunci interpretasi hasil uji eksisi embrio untuk embrio benih P. fa/cataria dapat pada Tabel 8, sedangkan contoh embrio viabel dan non viabel hasil uji embrio dapat dilihat pada Gambar 17.

Tabel 8. Kunci Interpretasi Hasil Uji Eksisi Embrio untuk Benih P. falcataria

Embrio Viabel

- Terjadi pertumbuhan pada radikel dan 1 -~um~a l

Embrio tetap kokoh/segar 1-Berwarna putih atau pu~h kehijauan I :

Embrio Non Viabel

Tidak terjadi pertumbuhan pada radikel dan plumula Embrio cepat rusak/membusuk Berwarna putih kecoklatan dan mengeluarkan cairan Terjadi pengotoran berwarna coklat atau hitam

35

5.6. UJI BELAH



Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, etanol 70% dan kertas merang Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, silet, lup, semprotan tangan, oven dan alat pembagi benih. Gambar bahan dan alat yang digunakan untuk uji belah dapat dilihat pada Lampi ran 1.




Cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, silet dan kertas merang dipanaskan dalam oven pada suhu 105 °C selama 24 jam. Sterilisasi dapat juga dilakukan dengan cara menyemprotkan etanol 70% secara merata ke seluruh bagian a lat tersebut dengan menggunakan semprotan tangan.



(1) Lubangi ujung kulit benih (berlawanan dengan arah radikel) dengan gunting kuku.

(2) Rendam benih tersebut dalam aquades selama 24 jam dalam gelas piala

(3) Kupas kulit benih dan belah benih searah keping (memanjang) dengan menggunakan silet. Radikel, plumula dan kotiledon harus terbagi dua.

(4) Amati warna dan penampakan radikel, plumula dan kotiledon dengan mata telanjang atau menggunakan kaca pembesar (lup), sehingga dapat ditentukan benih tersebut viabel atau non viabel, sesuai dengan kunci interpretasi.


Kunci interpretasi hasil uji belah untuk benih P. falcataria dapat dilihat pada Tabel 9, sedangkan contoh benih viabel dan non viabel hasil uji belah dapat dilihat pada Gambar 18.

36

Tabel 9. Kunci Interpretasi Hasil Uji Selah untuk Benih P. falcataria

Benih Viabel I Benih Non Viabel I i

- Radikel berwama putih atau - Radikel berwarna putih, putih

kuning muda dan segar kehijauan/kecoklatan dan kering atau lunak/layu

Plumula berwara putih kehijauan - Plumula berwarna putih, putih kekuningan,

atau kuning muda dan segar kuning atau coklat dan kering atau lunak/layu

- Kotiledon berwarna hijau - Kotiledon berwarna hijau, hijau kecoklatan atau

muda/hijau kekuningan atau kuning dan kering atau lunak/layu

kuning dan segar - Terdapat kerusakan mekanis

- Tidak terdapat kerusakan mekanis - Berbau busuk

37

w CX>

Gambar 15. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Tetrazolium untuk Benih P. fa/cataria

Gambar 17. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Eksisi Embrio untuk Benih P. fa/cataria

,

Gambar 16. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Hidrogen Peroksida untuk Benih P. falcataria

Gambar 18. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Belah untuk Benih P. fa/ca taria

VI. UJI CEPATVIABILITASJENISPinus merkusii

6.1.UMUM

P. merkusii yang dikenal dengan nama tusam, termasuk ke dalam famili Pinaceae. Uji viabilitas secara konvensional dengan mengecambahkan benih P. merkusii melalui metode uji di atas kertas (UDK) memerlukan waktu lebih kurang 24 hari.

Fokus pengamatan pada uji cepat viabilitas benih P. merkusii dilakukan terhadap embriodan endosperma (Gambar 19).

Kulit benih

Endosperm a Kotiledon

Hipokotil

Radikel

Gambar 19. Sketsa Struktur Benih P.merkusii





Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, silet, oven, alat pengaduk, saringan, semprotan tangan, timbangan dan alat pembagi benih. Gambar bahan dan alat yang digunakan untuk uji tetrazolium dapat dilihat pada Lampiran 1.


Pengambilan contoh benih dimaksudkan agar mutu benih yang diperoleh benarbenar mewakili kelompok benih (seed lot) yang hendak diuji. Prosedur pengambilan contoh dilakukan berdasarkan Pedoman Standarisasi Pengujian Mutu Fisik dan Fisiologis Benih Tanaman Hutan (BT-P, 2000), yang selengkapnya disajikan pada Lampiran 2. Jumlah benih yang diperlukan untuk pengujian ini adalah 4 x 100 butir benih.

39


Cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, silet, alat pengaduk, saringan, kertas merang dan aluminium foil dipanaskan dalam oven pada suhu 105 oc selama 24 jam. Sterilisasi dapat juga dilakukan dengan menyemprotkan etanol 70% secara merata ke seluruh bagian alat tersebut dengan menggunakan semprotan tangan.





(1) Kupas kulit benih P. merkusii dengan cara menggunting ujung kulit benih dengan gunting kuku atau pinset. Pengupasan kulit benih dilakukan secara hati-hati, jangan sampai endosperma cacat atau rusak.

(2) Lembabkan benih tersebut pada 6 lembar kertas merang basah selama 24 jam. Tebarkan benih pada kertas merang basah, kemudian kertas digulung dan dimasukkan ke dalam plastik agar benih tidak kering.

(3) Kupas kulit ari yang melekat pada benih dengan pinset. Selama kegiatan pengupasan kulit ari tersebut, benih harus selalu dalam keadaan lembab.

(4) Rendam benih tersebut dalam larutan tetrazolium 0,5% yang ditempatkan dalam gelas piala yang telah ditutup dan dilapisi seluruhnya dengan aluminium foil (volume larutan tetrazolium = 3 x volume benih).


(6) Tempatkan benih dalam saringan, lalu bilas benih dengan aquades selama 30 - 60 detik. ·

(7) Selah benih tersebut dengan menggunakan silet. Pada saat membelah, kondisi embrio (radikel dan kotiledon) dan endosperma harus terbagi dua.

(8) Tempatkan benih pada cawan petri yang berisi 2 lembar kertas merang lembab untuk dianalisis pola pewarnaan yang terbentuk pada embrio (radikel dan kotiledon) dan enclosperma.

(9) Amati intensitas dan luas pewarnaan yang terbentuk. Intensitas pewarnaan dibagi menjadi warna merah (M), merah muda (Mm) dan putih (P), sedangkan penghitungan luas pewarnaan (%) dilakukan dengan membandingkan masing-masing warna yang terbentuk terhadap luas keseluruhan permukaan bagian dalam keping benih. Pola pewarriaan yang terbentuk dicocokkan dengan kunci interpretasi.


Viabilitas benih P. merkusii yang diuji dapat diketahui dengan melihat persentase pola pewarnaan yang terbentuk dan mencocokkannya dengan kunci interpretasi pada Tabel 10 dan Gambar 20, sedangkan contoh benih viabel dan non viabel hasil uji tetrazolium dapatdilihat pada Gambar 21.

40




Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, larutan hidrogen peroksida,

Tabel 10. Kunci I nterpretasi Hasil Uji Tetrazolium untuk Benih P.merkusii

No. Persentase Pola Pewamaan StrukturTumbuh Benih (O/o)

Benih K.rttA!rla Embrio Endospenna

Radikel Kotiledon

1. 100M 100 M 100 M 2. 100M 100 M Terdapat Mm dan tanpa P 3. lOOM 100M :S 20 P dan memiliki ~ 50 M

Viabel Terdapat Mm dan 4. 100 M tanpa P 100 M

5. Terdapat Mm

100M 100 M dan tanpa P 1. lOOM lOOM > 20 P dan memiliki < 50 M

. 2. 100 M Terdapat Mm dan Terdapat Mm dan tanpa P tanpa P

Non Viabel 3. 100M TerdapatP -4.

TerdapatMm 100M Terdapat Mm dan tanpa P dan tanpa P

5. Terdapat P - -6. OVerstain OVerstain OVerstain

Benih Viabel

1 2a 2b 4 5

Benih Non Viabel

1 2 3 4 5 6

Gambar 20. Sketsa Pola Pewarnaan Hasil Uji Tetrazolium pada Benih P. merkusii

41

natrium hipoklorit, etanol 70%, kertas merang dan aluminium foil.

Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, penggaris, oven, alat pengaduk, inkubator dan alat pembagi benih. Gambar bahan dan alat yang digunakan untuk uji tetrazolium dapat dilihat pada Lampiran 1.





Cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, alat pengaduk, kertas merang dan aluminium foil dipanaskan dalam oven pada suhu 105 °C selama 24 jam. Sterilisasi dapat juga dilakukan dengan menyemprotkan etanol 70% secara merata ke seluruh bagian a lat tersebut dengan menggunakan semprotan tangan.


Benih yang akan diuji disterilkan dengan cara merendamnya di dalam larutan natrium hipoklorit (pengenceran 1 : 5) selama 5 menit, kemudian dibilas dengan aquades dan benih siap untuk diuji.


Cara pembuatan larutan hidrogen peroksida disajikan pada Lampi ran 4.



(1) Sterilkan benih P. merkusii dengan natrium hipoklorit (lihat6.3.1.3.2.).

(2) Potong ujung kulit benih P. merkusii dengan gunting kuku.

(3) Rendam benih tersebut dalam larutan H20 2 1 % (volume larutan H202= 3 x volume benih) dalam gelas piala yang ditutup dengan aluminium foil.

4) Masukkan gelas piala tersebut ke dalam inkubator atau ruangan gelap pada suhu 20 - 30 °C. Pengujian dilakukan selama 7 hari.

(5) Ganti larutan H202 dengan larutan H202 yang baru pada hari ke-1, ke-3 dan ke-4.

(6) Silas benih dengan aquades, kemudian tempatkan benih tersebut dalam cawan petri yang berisi 2 lembar kertas merang lembab.


42

I •

6.3.2. Kunci lnterpretasi

Kunci interpretasi hasil uji hidrogen peroksida didasarkan pada panjang radikel yang muncul pada akhir periode pengamatan. Benih viabel memiliki panjang radikel ~ 1 mm, sedangkan benih non viabel memiHki panjang radikel < 1 mm atau tidak terjadi pemunculan radikel. Contoh benih viabel dan non viabel hasil uji hidrogen peroksida dapat dilihat pada Gambar 22.




Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, natrium hipoklorit, etanol 70%, kertas saring, kertas merang dan lembaran plastik. Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, silet, alat pengaduk, lup, semprotan tangan, oven, inkubator, laminar flow dan alat pembagi benih. Gambar bahan dan alat yang digunakan untuk uji eksisi embrio dapat dilihat pada Lampiran 1.





Cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, silet, kertas saring dan kertas merang dipanaskan dalam oven pada suhu 105 °C selama 24 jam. Sterilisasi dapat juga dilakukan dengan menyemprotkan etanol 70% secara merata ke seluruh bagian a lat tersebut dengan menggunakan semprotan tangan.


Benih yang akan diuji disterilkan dengan cara merendamnya di dalam larutan natrium hipoklorit (pengenceran 1: 5) selama 5 men it, kemudian di bi las dengan aquades dan benih siap untuk diuji.


Pengkondisian, pemotongan embrio dan pengujian dilakukan dengan cara sebagai berikut :

(1) Sterilkan benih P. merkusii dengan natrium hipoklorit (lihat 6.4.1.3.2.).

(2) Ku pas kulit benih dengan pinset atau gunting kuku.

(3) Lembabkan benih tersebut pada 6 lembar kertas merang basah selama

43

24 jam. Tebarkan benih pada kertas merang basah, kemudian kertas digulung dan dimasukkan ke dalam plastik agar benih tidak kering.

( 4) Kupas kulit ari yang melekat pada benih dengan pinset. Selama kegiatan pengupasan kulit ari tersebut, benih harus selalu dalam keadaan lembab.

(5) Belah sedikit bagian endosperma dengan menggunakan silet dan keluarkan embrionya secara hati-hati. Ketika membelah, kondisi embrio harus utuh (tidak boleh ikut terbelah atau cacat). Untuk menjamin kondisi aseptik selama kegiatan pemotongan, lakukan kegiatan di dalam laminar flow atau di tempat yang steril. Peralatan yang digunakan harus selalu dalam keadaan steril.

(6) Letakkan embrio pada cawan petri yang berisi media 3 lembar kertas saring lembab.



(9) Kondisi embrio (radikel dan kotiledon) yang diperoleh pada akhir pengamatan, dicocokkan dengan kunci interpretasi.


Kunci interpretasi hasil uji eksisi embrio untuk embrio benih P. merkusii dapat dilihat pada Tabel 11, sedangkan contoh embrio viabel dan non viabel hasil uji eksisi em brio dapat dilihat pada Gambar 23.

Tabel 11. Kunci Interpretasi Hasil Uji Eksisi Embrio untuk Benih P. merkusii

Embrio Viabel

Terjadi pertumbuhan pada radikel dan kotiledon Kotiledon tumbuh mekar Embrio tetap kokoh/segar

- Berwarna kuning atau kuning kehijauan

6.5. UJI BELAH

- · 6.5.1. Standardisasi Prosedur

6.5.1.1. Bahan-dan Aiat

f Embrio non Viabel

Tidak terjadi pertumbuhan pada radikel dan kotiledon

- Embrio cepat rusak, lunak/membusuk Berwarna abu-abu, coktat dan mengeluarkan cairan

Bahan-bahan yany digunakan adalah aquades, etanol 70%, natrium hipoklork kertas merang dan lembaran plastik. Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, silet, lup, semprotan tangan, oven dan alat pembagi benih. Gambar bahan dan alat yang digunakan untuk uji belah dapat dilihat pada Lampiran 1.

44




Cawan petri, gelas piala, gunting kuku, pinset, silet dan kertas merang dipanaskan dalam oven pada suhu 105 °C selama 24 jam. Sterilisasi dapat juga dilakukan dengan cara menyemprotkan etanol 70% secara merata ke seluruh bagian a lat tersebut dengan menggunakan semprotan tangan.



(1) Sterilkan benih P. merkusii dengan natrium hipokiorit (lihat 6.5.1.3.2.).

(2) Kupas kulit benih dengan pinset atau gunting kuku.

(3) Lembabkan benih tersebut pada 6 lembar kertas merang basah selama 24 jam. Kertas merang basah yang berisi benih tersebut dimasukkan ke dalam plastik atau cawan petri agar benih tidak kering/mencegah penguapan.

(4) Kupas kulit ari benih dengan pinset dan belah benih dengan menggunakan silet Embrio dan endosperma harus terbagi dua.

(5) Amati warna dan penampakan embrio dan endosperma dengan mata telanjang atau menggunakan kaca pembesar (lup), sehingga dapat ditentukan benih tersebut viabel atau non viabel, sesuai dengan kunci interpretasi.


Kunci interpretasi hasil uji belah untuk benih P. merkusii dapat dilihat pada Tabel 12, sedangkan contoh benih viabel dan non viabel hasil uji belah dapat di Ii hat pada Gambar 24.

45

Tabel 12. Kunci Interpretasi Hasil Uji Belah untuk Benih P. merkusii

Benih Viabel

- Embrio berwarna putih atau kuning dan segar

- Endosperma berwarna putih dan segar

- Tidak terdapat kerusakan mekanis

46

T l Benih Non Viabel

- Embrio berwarna putih kekuningan dan kenng atau lunak/layu

- Endosperma berwarna putih atau coklat dan kering atau lunak/layu

- Terdapat kerusakan mekanis

- Berbau busuk

~ '-J

Gambar21. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Tetrazolium untuk Benih P. merkusii

Gambar 23 . Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Eksisi Embrio untuk Benih P. merkusii

Gambar 22. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Hidrogen Peroksida untuk Benih P. merkusii

Gambar 24. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Belah untuk Benih P. merkusii

\ --,

VII. UJI CEPAT VIABILITAS JENIS Swietenia macrophyl/a

7.1. UMUM

S. macrophyl/a yang dikenal dengan nama mahoni daun besar, termasuk ke dalam famili Meliaceae. Uji viabilitas benih S. macrophylla secara konvensional yang dilakukan di persemaian pada media pasir tanah (1 : 1) memerlukan waktu lebih kurang 30-40 hari.

Fokus pengamatan pada uji cepat viabilitas benih S. macrophyl/a dilakukan terhadap struktur tumbuh benihnya yang terdiri dari mikrofil (titik tumbuh) dan kotiledon (Gambar 25).

Hilum

Mikrooil Chalaza

Gambar 25. Sketsa Struktur Benih S. macrophyJ/a

7 .2. UJI TETRAZOLIUM TOPOGRAFIS

7 .2.1. Standardisasi Prosedur



Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, gelas piala, pinset, silet atau pisau tajam, oven, alat pengaduk, saringan, semprotan tangan, timbangan dan alat pembagi benih. Gambar bahan dan alat yang digunakan untuk uji tetrazolium dapat dilihat pada Lampi ran 1.

49




Cawan petri, gelas piala, pinset, silet atau pisau tajam, alat pengaduk, saringan, kertas merang dan aluminium foil dipanaskan dalam oven pada suhu 105 °C selama 24 jam. Sterilisasi dapat juga dilakukan dengan menyemprotkan etanol 70% secara merata ke seluruh bagian alat tersebut dengan menggunakan semprotan tangan.





(1) Kupas kulit benih secara hati-hati dengan menggunakan silet. Pada saat mengupas kulit benih, silet tidak boleh mengenai benih, karena akan mempengaruhi pola pewarnaan yang terbentuk.

(2) Lembabkan benih tersebut pada 6 lembar kertas merang basah selama 24 jam. Kertas merang basah yang berisi benih tersebut dimasukkan ke dalam plastik untuk mencegah penguapan.

(3)

(4)

(5)

(6)

(7)

(8)

50

Selah benih menjadi 2 bagian melalui titik tumbuhnya dengan silet atau pisau tajam. Pada saat membelah benih, usahakan tidak sampaf terputus.

Rendam benih dalam larutan tetrazolium 0,5% yang ditempatkan dalam gelas piala yang telah ditutup dan dilapisi seluruhnya dengan aluminium foil (volume larutan tetrazolium = 3 x volume benih).

Masukkan gelas piala tersebut ke dalam oven dengan suhu 40 °C selama 4jam.

Tempatkan benih dalam saringan, lalu bilas benih dengan aquades selama 30- 60 detik.

Tempatkan benih pada cawan petri yang berisi 2 lembar kertas merang lembab untuk dianalisis pola pewarnaan yang terbentuk pada titik tumbuh dan kotiledon.

Amati intensitas dan luas pewarnaan yang terbentuk. Intensitas pewarnaan dibagi menjadi warna merah (M), merah muda (Mm) dan putih (P), sedangkan penghitungan luas pewarnaan (%) dilakukan dengan membandingkan masing-masing warna yang terbentuk terhadap luas keseluruhan permukaan bagian dalam keping benih. Pola pewarnaan yang terbentukdicocokkan dengan kunci interpretasi.

-'


Viabilitas benih 5. macrophyl/a yang diuji dapat diketahui dengan melihat persentase pola pewarnaan yang terbentuk dan mencocokkannya dengan kunci interpretasi pada Tabel 13 dan Gambar 26, sedangkan contoh benih viabel dan non viabel hasil uji tetrazolium dapat dilihat pada Gambar 27.

Tabel 13. Kunci Interpretasi Hasil Uji Tetrazolium untuk Benih 5. macrophylla

Benih No. Persentase Pola Pewamaan Stnlktur Tumbuh Benih (O/o)

Krlterla ntlk tumbuh Endosperma

1. 100 M 100 M

Via be I 2. 100 M Terdapat Mm, tan pa P d an memlliki ~ 30 M

3. 100 M :5 20 P dan memiliki ~ 40 M

1. 100 M Terdapat Mm, P dan memiliki < 30 M

Non Viabel 2. 100 M > 20 P dan memlliki < 40 M

3. Terdapat Mm atau P -

Benih Viabel

2 3

Benih Non Viabel

2 3

Gambar 26. Sketsa Pola Pewarnaan Hasil Uji Tetrazolium pada Benih 5. macrophylla

51

7 .3. UJI HIDROGEN PEROKSIDA



Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, larutan hidrogen peroksida, natrium hipoklorit, etanol 70%, kertas merang dan aluminium foil.

Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, gelas piala, pinset, silet, penggaris, oven, alat pengaduk, inkubator dan alat pembagi benih. Gambar bahan dan alat yang digunakan untuk uji hidrogen peroksida dapat dilihat pada Lampiran 1.



7.3.1.3. Sterilisasi Bahan dan Alat 7.3.1.3.1. Sterilisasi dengan Oven/Etanol

Cawan petri, gelas piala, pinset, silet, alat pengaduk, kertas merang dan aluminium foil dipanaskan dalam oven pada suhu 105 °C selama 24 jam. Sterilisasi dapat juga dilakukan dengan menyemprotkan etanol 70% secara merata ke seluruh bagian alattersebutdengan menggunakan semprotan tangan.


Benih yang akan diuji disterilkan dengan cara merendamnya di dalam larutan natrium hipoklorit (pengenceran 1: 5) selama 5 menit, kemudian dibilas dengan aquades dan benih siap untuk diuji.





( 1) Ku pas kulit benih secara hati-hati dengan menggunakan silet. Pada saat mengupas kulit benih, silet tidak boleh mengenai benih.

(2) Sterilkan benih tersebut dengan natrium hipoklorit (lihat 7.3.1.3.2.).

(3) Rendam benih tersebut dalam larutan H202 1 % (volume larutan H202 = 3 x volume benih) dalam gelas piala yang ditutup dengan aluminium foil.

52

-'

( 4) Masukkan gelas piala tersebut ke dalam inkubator atau ruangan gelap pada suhu 20 - 30 °C. Pengujian dilakukan selama 7 hari.

(5) Ganti larutan H202 dengan larutan Hi02 yang baru pada hari ke-1 dan ke-4.



7 .3.2. Kunci Interpretasi

Kunci interpretasi untuk benih viabel dan non viabel hasil uji hidrogen peroksida didasarkan pada panjang radikel yang muncul pada akhir periode pengamatan. Benih viabel memiliki panjang radikel ~1 mm, sedangkan benih non viabel memiiiki panjang radikel < 1 mm atau tidak terjadi pemunculan radikel. Conteh benih viabel dan non viabel hasil uji hidrogen peroksida dapat dilihat pada Gambar28.

7 .4. UJI EKSISI EM BRIO



Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, natrium hipoklorit, etanol 70%, kertas saring, kertas merang dan lembaran plastik.

Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, gelas piala, pinset, sifet, lup, semprotan tangan, oven, inkubator, laminar flow dan alat pembagi benih. Gambar bahan dan alat yang digunakan untuk uji eksisi embrio dapat dilihat pada Lampiran 1.





Cawan petri, gelas piala, pinset, silet, kertas saring dan kertas merang dipanaskan dalam oven pada suhu 105 °C selama 24 jam. Sterilisasi dapat juga dilakukan dengan menyemprotkan etanol 70% secara merata ke seluruh bagian a lat tersebut dengan menggunakan semprotan tangan.

53


Benih yang akan diuji disterilkan dengan cara merendamnya di dalam larutan natrium hipoklorit (pengenceran 1: 5) selama 5 men it, kemudian di bi las dengan aquades dan benih siap untuk diuji.

7.4.1.4. Pengkondisian, Pemotongan Embrio dan Pehgujian

Pegkondisian, pemotongan embrio dan pengujian dilakukan dengan cara sebagai berikut:

( 1) Sterilkan benih yang akan diuji dengan natrium hipoklorit (Ii hat 7.4.1.3.2.).

(2) Kupas kulit benih secara hati-hati dengan menggunakan silet. Pada saat mengupas kulit benih, silet tidak boleh mengenai benih.

(3) Lembabkan benih tersebut pada 6 lembar kertas merang basah selama 24 jam. Kertas merang basah yang berisi benih tersebut dimasukkan ke dalam plastik untuk mencegah penguapan.

(4) Potong bagian di sekeliling titik tumbuh dengan menggunakan silet sehingga membentuk potongan segitiga. Kondisi titik tumbuh harus utuh (tidak boleh cacat atau terpotong). Untuk menjamin kondisi aseptik selama kegiatan pemotongan, lakukan kegiatan di dalam laminar flow atau di tempat yang steril. Peralatan yang digunakan harus selalu dalam keadaan steril.

(5) Letakkan embrio (titik tumbuh) pada cawan petri yang berisi media 2 lembar kertas saring lembab.


(7) Amati setiap hari kondisi embrio dan buang embrio yang busuk dan berjamur. Apabila media mulai kering, semprotkan aquades seGukupnya.

(8) Kondisi embrio (titik tumbuh) yang diperoleh pada akhir pengamatan, dicocokkan dengan kunci interpretasi.


Kunci interpretasi hasil uji eksisi embrio untuk embrio benih S.macrophyl/a dapat dilihat pada Tabel 14, sedangkan contoh embrio viabel dan non viabel hasil uji eksisi em brio dapat di Ii hat pada Gambar 29.

54

Tabel 14. Kunci Interpretasi Hasil Uji Eksisi Embrio untuk Benih S. macrophyl/a

Embrio Viabel J · Terjadi pertumbuhan pada titik tumbuh l -

berupa radikel yang berwarna putih I Tetap kokoh/segar -

Pada bekas potongan terlihat pengotoran l -berwarna coklat kering l

7 .5. UJI BE LAH



Embrlo Non Viabel

Tidak terjadi pertumbuhan pada titik tumbuh

Titik tumbuh berwarna hijau tumut

Berbau busuk dan lunak/layu

Bahan-bahan yang digunakan adalah aquades, etanol 70% dan kertas merang. Alat-alat yang digunakan adalah cawan petri, silet atau pisau tajam, lup, semprotan tangan, oven dan alat pembagi benih. Gambar bahan dan alat yang digunakan untuk uji belah dapat dilihat pada Lampiran 1.




Cawan petri, pinset, silet atau pisau tajam dan kertas merang dipanaskan dalam oven pada suhu 105 °C selama 24 jam. Sterilisasi dapat juga dilakukan dengan menyemprotkan etanol 70% secara merata ke seluruh bagian alat tersebut dengan menggunakan semprotan tangan.



(1) Kupas kulit benih secara hati-hati dengan menggunakan silet. Pada saat mengupas kulit benih, silet tidak boleh mengenai benih.

(2) Belah benih menjadi 2 bagian melalui titik tumbuhnya dengan silet atau pisau tajam.

(3) Amati warna dan penampakan titik tumbuh dan kotiledon dengan mata telanjang atau menggunakan kaca pembesar (lup), sehingga dapat ditentukan benih tersebut hidup atau mati, sesuai dengan kunci interpretasi.

55


Kunci interpretasi hasil uji belah untuk benih S. macrophyl/a dapat dilihat pada Tabel 15, sedangkan contoh benih viabel dan non viabel hasil uji belah dapat dilihat pada Gambar 30.

Tabel 15. Kunci Interpretasi Hasil Uji Belah untuk Benih S. macrophyl/a

56

Benih Viabel Benih Non Viabel Titik tumbuh berwarna putih atau kunrng I - Titik tumbuh berwarna putih kekuningan

dan kering atau lunak/layu dan segar Endosperma berwarna putih dan segar Ttdak terdapat kerusakan rnekanis

- Endosperma berwarna put1h atau coklat dan kering atau lunak/layu Terdapat kerusakan mekarns

· - Berbau busuk

V1

"'

Gambar 27. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Tetrazolium untuk Benih s. macrophylla

••

Gambar 29. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasi l Uji Eksisi Embrio untuk Benih s. macrophylla

,

Gambar 28. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Hasil Uji Hidrogen Peroksida untuk Benih s. macrophyl/a

Gambar 30. Benih Viabel (a) dan Non Viabel (b) Has i l Uji Belah untuk Benih s. macrophylla

I •

DAFTAR PUSTAKA

Bhodthipuks, J., P. Pukkitayacame, B. P. S. Wang, S. Saelim and S. L. Yu. 1994. Rapid Viability Testing of Tropical Tree Seed. Training Course Proceeding No. 4. ASEAN Forest Tree Seed Centre Project. Thailand.

Bonner, F. T, J. A. Vozzo, W. W. Elam and S. B. Land Jr. 1994. Tree Seed Technology Training Course: Instructor's Manual. United State Departemen of Agriculture, Forest Service, Southern Forest Experiment Station. New Orleans.

Byrd, H. W. 1988. Pedoman Teknologi Benih (Terjemahan). State College. Mississipi.

Gordon, A. G. 1992. Seed Testing in Seed Manual for Forest Trees. Forestry Commision. London.

ISTA. 1985. Seed Science and Technology. International Seed Testing Association. Zurich, Switzerland.

____ . 1991. Buku Pegangan Benih Pohon dan Belukar, Terjemahan dari Tree and Shrub Seed Hand Book. Indonesia Forest Seed Project, Directorate of Forest Seed Ministry of Forestry and Estate Crops, Danish International Development Assiatance. Indonesia - Denmark.

Laloup, M. 1955. Seed Testing. FAO of United Nation. Rome.

Leadem, C. L. 1984. Quick Test for Tree Seed Viability. Management Report No. 18 ISSN. 0702 - 9861. B. C. Ministry Forest Land Research Branch.

Manan, S. 1976. Silvikultur. Proyek Pengembangan Peningkatan Mutu Perguruan Tinggi IPB. Bogor.

Mugnisjah, W. Q. dan A. setiawan. 1990. Pengantar Produksi benih. Rajawali Press. Jakarta.

Sadjad, S. 1980. Panduan Pembinaan Mutu Benih tanaman Hutan. Kerjasama Proyek Pusat Perbenihan Kehutanan Direktorat Reboisasi dan Rehabilitasi Direktorat Jenderal Kehutanan dengan Lembaga Afiliasi Institut Pertanian Bogor. Bogor.

____ . 1993. Dari Benih Kepada Benih. PT Gramedia Widiasarana Indonesia. Jakarta.

Sutopo, L. 1993. Teknologi Benih. CV Rajawali Pers. Jakarta.

Willan, R. L. 1985. A Guide to Forest Seed Handling. DANIDA Forest Seed Centre Hunlebaek Denmark- FAO.

Zanzibar, M. 1996. Aplikasi Uji Cepat Viabilitas pada benih Tanaman Hutan. Presiding Ekpose Program dan Hasil-Hasil Penelitian Perbenihan Kehutanan. Balai Teknologi Perbenihan, Sadan Penelitian dan Pengembangan Departemen Kehutanan. Bogor.

59

Lampiran 1. Bahan dan Alat yang Digunakan untuk Uji Cepat Viabilitas Benih (a). Uji Tetrazolium, (b). Uji Hidrogen Peroksida, (c). Uji Eksisi Embrio dan (e) . Uji Selah

(a) (b)

(c) (d)

61

Lampiran 2. Prosedur Pengambilan Contoh Benih Untuk Pengujian (BTP, 2000)

2

4

I 1+2+3+41

! .___1_+_3___.---·I s + 6 • 1+ s I

! B---19•10+11+12 I

! ~--+ Cofttolt ~

1. Contoh kirim dan komposit dihamparkan, kemudian dibagi menjadi 4 bagian, yaitu 1, 2, 3 dan 4.

2. Bagian 1 dan 3 dicampur, kemudian dihamparkan dan selanjutnya dibagi menjadi 4 bagian yaitu 5, 6, 7 dan 8.

3. Langkah 2 selanjutnya hingga diperoleh contoh kerja sesuai dengan ketentuan.

62

~

Lampi ran 3. Cara Pembuatan Larutan Tetrazolium

Pembuatan larutan tetrazolium dilakukan dengan cara sebagai berikut :

(1) Larutan I : Larutkan 9,078 gram KH2PO, dalam aquades lOOOml

(2) Larutan II : Larutkan 11,876 gram Na2HP04.2H20 dalam aquades 1000 ml

(3) Larutan Penyangga : campurkan 400 ml Larutan I dengan 600 ml Larutan II (2 : 3)

(4) Larutan Tetrazolium 1 % : Masukkan 10 gram garam tetrazolium (2,3,5 triphenil tetrazolium chlorida) ke dalam 1000 ml Larutan Penyangga

(5) Larutan Tetrazolium 0,5% : Masukkan 5 gram garam tetrazolium (2,3,5 triphenil tetrazolium chlorida) ke dalam 1000 ml Larutan Penyangga

(6) Larutan Tetrazolium harus dihindarkan dari cahaya langsung, yaitu dengan cara menempatkan larutan tersebut ke dalam gelas piala yang telah dilapisi aluminium foil. Pencampuran benih dengan larutan tersebut dilakukan dalam kamar gelap. Selain itu, apabila tidak digunakan, larutan tersebut disimpan dalam lemari es.

63

Lampiran 4. Cara Pembuatan Larutan Hidrogen Peroksida

Larutan H202 yang dijual di pasaran umumnya memiliki konsentrasi yang masih tinggi, yaitu 35%, sedangkan yang digunakan untuk uji H202 ini berkisar antara 0,5 - 2%. Oleh karena itu larutan H20 2 35% harus diencerkan terlebih dahulu. Rumus yang digunakan untuk reaksi pengenceran adalah sebagai berikut:

dimana: C1 = konsentrasi larutan asli C, = konsentrasi larutan yang diinginkan V, = volume larutan asli yang diperlukan untuk memperoleh

larutan yang diinginkan V, = volume larutan yang diinginkan

Pembuatan larutan hidrogen peroksida dilakukan dengan cara sebagai berikut:

(1) Larutan H202 0,5% Campurkan 14,29 ml larutan H202 35% ke dalam 985,71 ml aquades sehingga diperoleh 1000 ml larutan H202 0,5%.

(2) Larutan H20 21 % Campurkan 28,57 ml larutan H202 35% ke dalam 971,43 ml aquades sehingga diperoleh 1000 ml larutan H202 1 %.

(3) Larutan H202 2% campurkan 57,14 ml larutan H202 35% ke dalam. 942,86 ml aquades sehingga diperoleh 1000 ml larutan H202 2%.

64

Lampiran 5. Glosari

Benih (botanis)

Benih (perundangundangan

Benih ortodoks

Benih rekalsitran

Conteh benih

Conteh kerja

Conteh kiriman

Conteh komposit

Conteh primer

Dormansi

Em brio

Garam tetrazolium

Germinator

Hidrogen peroksida (HzOz)

Biji tumbuhan yang digunakan manusia untuk tujuan pertanaman.

Semua bahan tanaman baik yang dihasilkan secara generatif maupun vegetatif.

Watak/sifat dapat disimpan lama (tidak cepat menurun viabilitasnya) pada kondisi kadar air benih yang rendah ( 4 -8 %) dalam penyimpanan.

Watak/sifat benih benih cepat menurun viabilitasnya dan memerlukan kadar air yang tinggi (20 - 50 % ) dalam penyimpanannya yang mendekati atau sama dengan kadar air benih segar.

Sejumlah benih, baik dalam ukuran volume atau berat yang ditarik dari masing-masing lot benih dengan cara acak, untuk kepentingan pengujian benih.

Sebagian contoh kiri man yang akan diuji

Sebagian atau seluruh contoh komposit yang dikirim ke laboratorium pengujian.

Campuran semua contoh primer yang diambil dari lot benih.

Sejumlah benih yang diambil dari satu titik di dalam lot benih.

Proses beristirahatnya suatu tanaman, bagian tanaman atau jaringan yang dalam kondisi petumbuhan yang op ti mum tidak menunjukan pertumbuhan sewajarnya.

Satu tanaman baru yang terjadi dan bersatunya garnet jantan dan garnet betina pada proses pembuahan.

Merupakan suatu senyawa kimia dengan rumus 2,3,5 triphenyl tetrazolium clorida atau bromida yang digunakan sebagai pewarna untuk menbedakan sel hidup dengan sel mati pada uji tetrazoliurn,

Alat pengecambah yang memenuhi syarat optimum dalam faktor tumbuh, yaitu kelembaban udara, suhu dan cahaya yang optimum.

Suatu larutan yang tidak stabil dan tidak berwarna, larutan ini dapat larut dalam air dan alkohol serta mudah didekomposisikan dalam air dan oksigen bila disimpan pada suhu yang terlalu tinggi/rendah atau di bawah cahaya langsung.

65

Kecambah normal

Kotiledon

Lot

Plumula

Radikel

Rag um

Sterilisasi

UAK

(uji antar kertas)

UDK (uji di atas kertas)

Uji belah (cutting test)

Uji cepat viabilitas

Uji eksisi embrio

Uji hidrogen peroksida

66

Kecambah benih yang tumbuh normal sesuai ketentuan baku dalam pengujian viabilitas benih, untuk mensimulasikan pertumbuhan normal tanaman di lapangan.

Bagian dari struktur tumbuh benih yang berfungsi sebagai jaringan cadangan makanan.

Sejumlah benih yang akan diuji mutunya.

Bagian dari struktur tumbuh benih yang akan membentuk organ batang.

Bagian dari struktur tumbuh benih yang akan membentuk organ akar.

Uji daya berkecambah benih, di mana contoh kerja diletakan di antara substrat kertas yang telah dilembabkan.

Kegiatan pembebasan/pembersihan suatu objek (alat, bahan atau media) dari organisme yang tidak diinginkan, seperti fungi, bakteri, virus atau yang tainnya.

Uji daya berkecambah benih, di mana contoh kerja diletakan di antara substrat kertas yang telah dilembabkan.

Uji daya berkecambah benih, di mana contoh kerja diletakan di atas substrat kertas yang telah dilembabkan.

Merupakan salah satu uji cepat viabilitas benih dengan cara melihat langsung penampakan struktur tumbuhnya yang menunjukan kondisi yang baik(hidup).

Metode pengujian viabilitas benih yang didasarkan pada proses metabolisme benih yang merupakar:i indikasi tak langsung.

Merupakan salah satu uji cepat viabilitas benih yang dilakukan dengan mengamati perilaku embrio dalam kondisi jaringan setelah pemotongan dan inkubasi selanjutnya, di mana embrio yang viabel akan memperlihatkan warna hijau, tumbuh atau tetap segar sementa ra em brio yang non viabel akan rusak.

Merupakan salah satu uji cepat viabilitas benih dengan memanfaatkan sifat larutan hidrogen peroksida yang dapat merangsang perkecambahan benih dan dapat digunakan untuk mempercepat perkecambahan.

Uji tetrazolium

Via be I

Viabilitas benih

Viablitas potensial

Viabilitas total

Vigorbenih

Merupakan salah satu uji cepat viabilitas benih secara biokimia yang didasarkan kepada pewarnaan yang dihasilkan setiap sel hidup dengan garam tetrazolium yang membentuk endapan formazan merah sedangkan sel-sel yang mati menunjukan warna putih

Hid up

Kemampuan benih untuk hidup, yang ditunjukan oleh gejala pertumbuhan atau gejala metabolismenya dan dapat pula ditunjukkan oleh keadaan organel sitoplasma atau kromosom.

Viabilitas benih yang menunjukkan kemampuan benih tumbuh normal dalam kondisi optimim menghasilkan tanaman normal yang berproduksi normal.

Mencerminkan daya hidup benih yang hanya ditunjukkan oleh sekedar gejala hidup benih melalui metabolisme benih, misalnya kemampuan benih mengambil oksigen pada saat tertentu.

Viabilitas benih yang menunjukkan kemampuan benih

67

ISBN : 979 - 3539 - 00 - 3 (No. Jilid lengkap) ISBN : 979 - 3539 - 01 - 1 (Jilid 1)

Documents

BUKU 1redaksional sebagaimana tercantum pada ralat cetakan sebelumnya; serta penyempurnaan lainnya. Ucapan terimakasih disampaikan kepada semua pihak yang telah berperan dalam penyusunan