56
BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HC Y HÀ NI NGUYN HỮU TRƢỜNG NGHIÊN CU MỐI TƢƠNG QUAN GIA MỨC ĐỘ HOẠT ĐỘNG CA BNH VI MT STKHÁNG THTRONG LUPUS BAN ĐỎ HTHNG Chuyên ngành: Dng và Min dch Mã s: 62720109 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC HÀ NỘI - 2017

BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

  • Upload
    others

  • View
    0

  • Download
    0

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

BỘ GIAacuteO DỤC amp ĐAgraveO TẠO BỘ Y TẾ

TRƢỜNG ĐẠI HỌC Y HAgrave NỘI

NGUYỄN HỮU TRƢỜNG

NGHIEcircN CỨU MỐI TƢƠNG QUAN

GIỮA MỨC ĐỘ HOẠT ĐỘNG CỦA BỆNH

VỚI MỘT SỐ TỰ KHAacuteNG THỂ

TRONG LUPUS BAN ĐỎ HỆ THỐNG

Chuyecircn ngagravenh Dị ứng vagrave Miễn dịch

Matilde số 62720109

TOacuteM TẮT LUẬN AacuteN TIẾN SĨ Y HỌC

HAgrave NỘI - 2017

Cocircng trigravenh được hoagraven thagravenh tại

TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HAgrave NỘI

Người hướng dẫn khoa học

PGSTS TRẦN THUacuteY HẠNH

Phản biện 1 PGSTS Nguyễn Văn Đoagraven

Phản biện 2 PGSTS Đặng Văn Em

Phản biện 3 PGSTS Trịnh Mạnh Hugraveng

Luận văn sẽ được bảo vệ tại Hội đồng chấm luận aacuten Tiến sỹ Y học

cấp trường tổ chức tại trường Đại học Y Hagrave Nội vagraveo

hồi giờ ngagravey thaacuteng năm

Luận văn coacute thể được tigravem thấy tại

- Thư viện Quốc gia

- Thư viện Thocircng tin y học trung ương

- Thư viện trường Đại học Y Hagrave Nội

- Thư viện bệnh viện Bạch Mai

DANH MỤC CAacuteC BAgraveI BAacuteO ĐAtilde ĐƯỢC COcircNG BỐ

LIEcircN QUAN ĐẾN ĐỀ TAgraveI

1 Nguyễn Hữu Trường (2014) Nghiecircn cứu mối liecircn quan

giữa nồng độ C3 C4 huyết tương với một số đặc điểm

lacircm sagraveng cận lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của bệnh ở

bệnh nhacircn lupus ban đỏ hệ thống Tạp chiacute Y học Quacircn sự

số 302 tr 26 - 30

2 Nguyễn Hữu Trường (2014) Tương quan giữa nồng độ

khaacuteng thể khaacuteng dsDNA với mức độ hoạt động của bệnh

lupus ban đỏ hệ thống Tạp chiacute Y học Thực hagravenh số 10

(937) tr 2 - 5

3 Nguyễn Hữu Trường (2015) Liecircn quan giữa khaacuteng thể

khaacuteng C1q với caacutec yếu tố bổ thể C3 C4 vagrave biểu hiện lacircm

sagraveng của bệnh Lupus ban đỏ hệ thống Tạp chiacute Y học Lacircm

sagraveng số 90 tr 54- 61

4 Nguyễn Hữu Trường (2015) Khaacuteng thể khaacuteng

nucleosome ở bệnh nhacircn Lupus ban đỏ hệ thống vagrave mối

liecircn quan với mức độ hoạt động của bệnh Tạp chiacute Y học

Việt Nam tập 427 số 1 (2) tr 9 - 14

5 Nguyễn Quang Tugraveng Nguyễn Hữu Trường (2015)

Nghiecircn cứu mối liecircn quan giữa tigravenh trạng giảm tiểu cầu

với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của bệnh

Lupus ban đỏ hệ thống Tạp chiacute Y học Việt Nam tập 427

số 1 (2) tr 50 - 55

1

CAacuteC CHỮ VIẾT TẮT

ACR American College of Rheumatology (Hội Khớp học Mỹ)

AUC Area under the ROC curve (Diện tiacutech dưới đường cong ROC)

CLS cận lacircm sagraveng

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

KT khaacuteng thể

KTKN khaacuteng thể khaacuteng nhacircn

LBĐHT Lupus ban đỏ hệ thống

Nucl nucleosome

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

MỞ ĐẦU

1 Tiacutenh cấp thiết của đề tagravei

Lupus ban đỏ hệ thống (LBĐHT) lagrave một trong những bệnh tự

miễn dịch hệ thống thường gặp nhất với độ lưu hagravenh ước tiacutenh

khoảng 20 - 150 ca 100000 dacircn riecircng ở phụ nữ lagrave khoảng 164 - 406

ca 100000 dacircn Bệnh đặc trưng bởi sự xuất hiện của caacutec tế bagraveo

lympho B vagrave T tự phản ứng chịu traacutech nhiệm sản xuất ra hagraveng loạt

tự khaacuteng thể bệnh lyacute nhằm vagraveo caacutec khaacuteng nguyecircn điacutech ở trong nhacircn

bagraveo tương magraveng tế bagraveo huyết tương hoặc caacutec protein nền Cho đến

nay đatilde coacute gần 180 loại tự khaacuteng thể liecircn quan đến LBĐHT được xaacutec

định trong đoacute nhiều loại được chứng minh coacute vai trograve rất quan trọng

đối với sự higravenh thagravenh vagrave tiến triển của bệnh lagrave yếu tố khởi phaacutet phản

ứng viecircm tự miễn dẫn đến tổn thương caacutec hệ cơ quan Trecircn lacircm

sagraveng nhiều loại tự khaacuteng thể đatilde thể hiện khaacute rotilde vai trograve trong chẩn

đoaacuten đaacutenh giaacute mức độ hoạt động vagrave tiecircn lượng đối với LBĐHT Sự

xuất hiện của caacutec tự khaacuteng thể đồng thời với caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng

gợi yacute sẽ hỗ trợ rất nhiều cho việc chẩn đoaacuten xaacutec định bệnh Becircn cạnh

4 loại tự khaacuteng thể kinh điển đatilde được đưa vagraveo caacutec tiecircu chuẩn phacircn

loại bệnh của Hội Khớp học Mỹ (ACR-1997) vagrave Nhoacutem Hợp taacutec

Quốc tế về LBĐHT (SLICC- 2012) một số tự khaacuteng thể mới như

2

khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng C1q hellip cũng đều cho thấy độ

nhạy vagrave độ đặc hiệu khaacute cao trong chẩn đoaacuten LBĐHT vagrave caacutec tổn

thương nội tạng của bệnh Becircn cạnh đoacute một số loại khaacuteng thể đatilde

được chứng minh coacute mối liecircn quan khaacute rotilde rệt với mức độ hoạt động

của bệnh vagrave một số tổn thương nội tạng của LBĐHT như caacutec khaacuteng

thể khaacuteng dsDNA khaacuteng nucleosome khaacuteng C1qhellip Sự xuất hiện

vagrave biến đổi nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể nagravey phản aacutenh khaacute tốt sự

dao động hoạt tiacutenh vagrave coacute thể giuacutep dự baacuteo trước caacutec đợt cấp của bệnh

Do đoacute nhiều loại tự khaacuteng thể đatilde được sử dụng rộng ratildei trong thực

hagravenh lacircm sagraveng như những cocircng cụ giuacutep hỗ trợ việc đaacutenh giaacute vagrave theo

dotildei mức độ hoạt động của LBĐHT một caacutech nhanh choacuteng vagrave tiện lợi

Việc coacute được những hiểu biết đầy đủ hơn về đặc điểm của caacutec

tự khaacuteng thể trong LBĐHT coacute thể giuacutep caacutec thagravey thuốc coacute thecircm

những cocircng cụ coacute tiacutenh khả thi vagrave đủ độ tin cậy để chẩn đoaacuten đaacutenh

giaacute vagrave theo dotildei mức độ hoạt động của bệnh Vigrave lyacute do nagravey tocirci quyết

định lựa chọn đề tagravei ldquoNghiecircn cứu mối tương quan giữa mức độ hoạt

động của bệnh với một số tự khaacuteng thể trong lupus ban đỏ hệ thốngrdquo

nhằm caacutec mục tiecircu sau

1 Xaacutec định tỷ lệ dương tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten bệnh

lupus ban đỏ hệ thống của caacutec tự khaacuteng thể khaacuteng nhacircn khaacuteng dsDNA

khaacuteng C1q vagrave khaacuteng nucleosome

2 Khảo saacutet mối liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể nagravey với một số

biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của bệnh lupus ban đỏ hệ

thống

2 Những đoacuteng goacutep mới của đề tagravei

Đacircy lagrave cocircng trigravenh đầu tiecircn trong nước nghiecircn cứu giaacute trị chẩn

đoaacuten LBĐHT vagrave tổn thương thận lupus của caacutec khaacuteng thể mới lagrave

khaacuteng thể khaacuteng nucleosome vagrave khaacuteng C1q coacute so saacutenh với hai loại

3

khaacuteng thể cổ điển lagrave khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) vagrave khaacuteng

dsDNA nhằm tigravem kiếm những cocircng cụ tối ưu cho việc chẩn đoaacuten

bệnh Kết quả thu được của nghiecircn cứu đatilde cho thấy giaacute trị rất tốt của

khaacuteng thể khaacuteng nucleosome trong chẩn đoaacuten LBĐHT vagrave độ đặc

hiệu cao của khaacuteng thể khaacuteng C1q với tổn thương thận lupus

Đacircy cũng lagrave nghiecircn cứu theo dotildei dọc đầu tiecircn ở Việt Nam đaacutenh

giaacute mối liecircn quan giữa sự dương tiacutenh vagrave nồng độ của KTKN khaacuteng

dsDNA khaacuteng C1q vagrave khaacuteng nucleosome với mức độ hoạt động của

bệnh LBĐHT vagrave tổn thương thận lupus Kết quả thu được của nghiecircn

cứu đatilde cho thấy KT khaacuteng nucleosome coacute liecircn quan với mức độ hoạt

động của bệnh chặt chẽ hơn vagrave giaacute trị dự baacuteo đợt cấp bệnh tốt hơn so

với KT khaacuteng dsDNA Khaacuteng thể khaacuteng C1q cũng coacute mối liecircn quan

với sự xuất hiện vagrave mức độ hoạt động của tổn thương thận lupus chặt

chẽ hơn so với KT khaacuteng dsDNA

3 Bố cục của luận aacuten

Luận aacuten gồm 144 trang gồm Đặt vấn đề (2 trang) tổng quan

tagravei liệu (42 trang) đối tượng vagrave phương phaacutep nghiecircn cứu (17 trang)

kết quả nghiecircn cứu (30 trang) bagraven luận (50 trang) kết luận (2 trang)

vagrave kiến nghị (1 trang)

Toagraven bộ luận aacuten coacute 48 bảng 15 higravenh sơ đồ vagrave biểu đồ

Tagravei liệu tham khảo bao gồm 191 tagravei liệu (9 tiếng Việt vagrave 182

tiếng Anh)

Chƣơng 1 TỔNG QUAN TAgraveI LIỆU

11 Vagravei neacutet về cơ chế điều hogravea vagrave tiacutenh chất sinh bệnh học của caacutec

tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Caacutec tế bagraveo B tự phản ứng bị hoạt hoacutea khi gặp caacutec tự khaacuteng

nguyecircn đặc hiệu với sự coacute mặt của caacutec tế bagraveo T hỗ trợ Sau đoacute

chuacuteng trải qua quaacute trigravenh chuyển đổi isotype siecircu đột biến dạng cơ

4

thể vagrave chọn lọc dograveng để tạo ra caacutec tế bagraveo B hiệu ứng coacute chức năng

giải phoacuteng caacutec tự khaacuteng thể IgG vagraveo hệ tuần hoagraven Caacutec khaacuteng thể

nagravey tạo thagravenh PHMD dư thừa tiacutech tụ vagrave gacircy tổn thương viecircm tại caacutec

cơ quan

12 Tổng quan chẩn đoaacuten vagrave đaacutenh giaacute độ hoạt động của LBĐHT

121 Chẩn đoaacuten LBĐHT

Lupus ban đỏ hệ thống coacute biểu hiện lacircm sagraveng rất đa dạng nhưng

phần lớn caacutec biểu hiện lagrave khocircng đặc hiệu gacircy khoacute khăn cho việc chẩn

đoaacuten Hiện chưa coacute caacutec cocircng cụ dagravenh riecircng cho chẩn đoaacuten LBĐHT

necircn caacutec bộ tiecircu chuẩn phacircn loại bệnh của Hội Khớp học Mỹ năm

1997 (ACR 1997) vagrave Tổ chức Hợp taacutec Quốc tế về LBĐHT năm 2012

(SLICC 2012) thường được sử dụng trecircn lacircm sagraveng cho mục điacutech nagravey

122 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của LBĐHT khocircng coacute yếu tố

chỉ điểm đơn lẻ coacute thể đaacutenh giaacute chiacutenh xaacutec mức độ hoạt động của

bệnh Chưa coacute cocircng cụ đaacutenh giaacute vagrave đo lường mức độ hoạt động của

LBĐHT nagraveo được cho lagrave tối ưu để aacutep dụng trong thực tiễn

13 Yacute nghĩa lacircm sagraveng của một số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

131 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh coacute độ

nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh rất cao với LBĐHT nhưng độ đặc

hiệu thấp do coacute thể gặp trong nhiều bệnh khaacutec Khaacuteng thể nagravey coacute

mối liecircn quan khocircng rotilde rệt với mức độ hoạt động của LBĐHT

132 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng dsDNA coacute độ đặc hiệu cao

(95-100) vagrave lagrave một trong caacutec tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten LBĐHT tuy

nhiecircn độ nhạy khocircng cao vigrave noacute thường chỉ dương tiacutenh tạm thời

Khaacuteng thể nagravey coacute mối tương quan thuận khaacute rotilde với mức độ hoạt

động của bệnh KT khaacuteng dsDNA coacute độ nhạy khaacute cao trong chẩn

đoaacuten phacircn biệt giữa LBĐHT ổn định vagrave hoạt động nhưng khocircng

hằng định giữa caacutec nghiecircn cứu Theo dotildei định kỳ khaacuteng thể nagravey ở

5

bệnh nhacircn LBĐHT cho thấy sự biến đổi nồng độ của noacute coacute liecircn

quan rotilde rệt với sự xuất hiện caacutec đợt cấp của bệnh sau đoacute

133 Khaacuteng thể khaacuteng C1q được tigravem thấy trong LBĐHT vagrave nhiều

bệnh lyacute khaacutec như magravey đay viecircm mạch giảm bổ thể phugrave mạch di

truyền viecircm khớp dạng thấp hellip Khaacuteng thể nagravey coacute độ nhạy vagrave độ đặc

hiệu khocircng cao trong chẩn đoaacuten LBĐHT nhưng lagrave một trong những

khaacuteng thể coacute liecircn quan rotilde rệt nhất với tổn thương thận lupus Nồng

độ của KT khaacuteng C1q coacute mối tương quan chặt chẽ với mức độ hoạt

động của LBĐHT đặc biệt lagrave với tổn thương thận Khaacuteng thể nagravey coacute

giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh vagrave độ đặc hiệu khaacute cao với đợt cấp thận lupus

134 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute độ

nhạy dao động trong khoảng 50-90 vagrave độ đặc hiệu lagrave 90-99 trong

chẩn đoaacuten LBĐHT Caacutec nghiecircn cứu so saacutenh đối đầu giữa khaacuteng thể

nagravey vagrave KT khaacuteng dsDNA cho thấy KT khaacuteng Nucl coacute độ đặc hiệu

tương đương nhưng độ nhạy cao hơn so rotilde rệt Ngoagravei ra nồng độ KT

khaacuteng Nucl cũng coacute mối tương quan chặt chẽ với caacutec chỉ số đaacutenh giaacute

mức độ hoạt động của bệnh vagrave tổn thương thận lupus

Chƣơng 2 ĐỐI TƢỢNG VAgrave PHƢƠNG PHAacuteP

21 Đối tƣợng nghiecircn cứu

211 Nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT

Bao gồm 128 bệnh nhacircn được chẩn đoaacuten lupus ban đỏ hệ

thống theo tiecircu chuẩn SLICC 2012 theo dotildei vagrave điều trị tại Trung tacircm

Dị ứng ndash Miễn dịch Lacircm sagraveng vagrave Phograveng Quản lyacute bệnh lupus ban đỏ

hệ thống Khoa Khaacutem bệnh - Bệnh viện Bạch Mai từ thaacuteng 032014

đến thaacuteng 022016

Tiecircu chuẩn loại trừ phụ nữ coacute thai bệnh nhacircn coacute mắc kegravem

caacutec bệnh nội khoa nặng như tiểu đường suy tim suy chức năng gan

6

bệnh nhacircn bị mắc giang mai hoặc HIVAIDS bệnh nhacircn coacute mắc

kegravem caacutec bệnh tự miễn khaacutec bệnh nhacircn khocircng đồng yacute tham gia

nghiecircn cứu

212 Nhoacutem chứng

Nhoacutem chứng bệnh bao gồm 39 người mắc caacutec bệnh tự

miễn dịch khaacutec LBĐHT được chẩn đoaacuten xaacutec định vagrave điều trị tại

Trung tacircm Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng BV Bạch Mai vagrave phograveng

khaacutem chuyecircn khoa Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng khoa Khaacutem Bệnh

BV Bạch Mai từ 22016 đến 4 2016

Khocircng phacircn biệt tuổi giới nghề nghiệp trigravenh độ học vấn

nơi cư truacute

Khocircng bị suy tế bagraveo gan hoặc hoặc nhiễm HIVAIDS

Chấp nhận tham gia nghiecircn cứu

Nhoacutem chứng khỏe mạnh 30 người khỏe mạnh coacute độ tuổi

vagrave phacircn bố giới tiacutenh tương đồng với nhoacutem bệnh nhacircn nghiecircn cứu

Khocircng coacute tiền sử mắc caacutec bệnh lyacute tự miễn khocircng coacute người

thacircn thuộc caacutec thế hệ thứ nhất vagrave thứ 2 mắc caacutec bệnh lyacute tự miễn dịch

Khocircng phacircn biệt nghề nghiệp trigravenh độ học vấn nơi cư truacute

Chấp nhận tham gia nghiecircn cứu

22 Phƣơng phaacutep nghiecircn cứu

221 Phƣơng phaacutep nghiecircn cứu Mocirc tả cắt ngang + theo dotildei dọc

222 Chọn mẫu

Mẫu nghiecircn cứu được lấy theo phương phaacutep chọn mẫu thuận

tiện Caacutec đối tượng được lựa chọn theo trigravenh tự thời gian khocircng

phacircn biệt tuổi taacutec giới tiacutenh mức độ hoạt động vagrave hủy hoại vĩnh viễn

223 Cỡ mẫu

Cỡ mẫu nghiecircn cứu mocirc tả cắt ngang được tiacutenh dựa theo cocircng

thức dugraveng để ước tiacutenh một tỷ lệ của tổ chức y tế thế giới

7

trong đoacute n lagrave cỡ mẫu tối thiểu lagrave mức yacute nghĩa thống kecirc tương ứng

với khoảng tin cậy 95 = 005 Z1-2 lagrave Z score tương ứng với

mức yacute nghĩa thống kecirc mong muốn với = 005 thigrave Z1-2 = 196 p lagrave

tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng nucleosome ở bệnh nhacircn LBĐHT (p

= 0909 theo Đặng Thu Hương - Tạp chiacute Y học Thagravenh phố Hồ Chiacute

Minh 2013 tập 17 phụ bản 1 tr 294-300) q = 1 - p = 0091 d lagrave độ

chiacutenh xaacutec tuyệt đối mong muốn chọn d = 005 Từ đoacute tiacutenh được n =

1271 Nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute cỡ mẫu lagrave 128 bệnh nhacircn

224 Caacutec bƣớc tiến hagravenh nghiecircn cứu

2241 Nhoacutem bệnh nhacircn lupus ban đỏ hệ thống

Lựa chọn vagraveo danh saacutech nghiecircn cứu vagrave gắn matilde bệnh aacuten

Lần khaacutem 1 khaacutem lacircm sagraveng khai thaacutec tiền sử xeacutet nghiệm

CLS thocircng thường (định lượng urecirc creatinin glucose AST ALT

albumin cholesterol triglyceride C3 vagrave C4 bổ thể trong huyết thanh

tế bagraveo niệu trụ niệu định lượng protein niệu 24 giờhellip) định lượng

khaacuteng thể khaacuteng nhacircn khaacuteng dsDNA khaacuteng nucleosome vagrave khaacuteng

C1q phacircn tiacutech caacutec nhoacutem triệu chứng bệnh đaacutenh giaacute điểm SELENA-

SLEDAI mức độ hoạt động của bệnh sự xuất hiện đợt cấp của

bệnh Chỉ số Hoạt động Thận của SLICC 2008 đợt cấp thận lupus

Theo dotildei định kỳ caacutec bệnh nhacircn được thăm khaacutem định kỳ

hagraveng thaacuteng hoặc ngay khi coacute caacutec dấu hiệu bất thường Quaacute trigravenh

nghiecircn cứu kết thuacutec khi bệnh nhacircn được theo dotildei đủ 12 thaacuteng hoặc

khi được phaacutet hiện coacute thai hoặc bị mất theo dotildei Caacutec bước thăm

khaacutem gồm khaacutem lacircm sagraveng xeacutet nghiệm CLS thocircng thường đaacutenh giaacute

caacutec triệu chứng bệnh sự xuất hiện đợt cấp của LBĐHT điểm SLICC

thận sự xuất hiện của đợt cấp thận lupus Định lượng khaacuteng thể

trong caacutec lần khaacutem coacute ghi nhận đợt cấp mới xuất hiện của bệnh hoặc

8

caacutec lần khaacutem được thực hiện trong vograveng 2 thaacuteng sau khi người bệnh

ra đatilde khỏi đợt cấp vagrave lần khaacutem cuối cugraveng Đaacutenh giaacute điểm SLEDAI

vagrave mức độ hoạt động bệnh ở caacutec lần khaacutem coacute xeacutet nghiệm khaacuteng thể

2242 Nhoacutem chứng 2 nhoacutem chứng được tiến hagravenh xeacutet nghiệm 4

loại khaacuteng thể tương tự nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT ở lần khaacutem 1

225 Địa điểm vagrave phƣơng phaacutep tiến hagravenh caacutec xeacutet nghiệm CLS

2251 Caacutec xeacutet nghiệm cận lacircm sagraveng thocircng thường được thực hiện

tại caacutec khoa phograveng tương ứng của Bệnh viện Bạch Mai

2252 Xeacutet nghiệm caacutec tự khaacuteng thể

a Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) vagrave khaacuteng dsDNA được định lượng

bằng kỹ thuật ELISA trecircn maacutey baacuten tự động Imarkreg của Hatildeng BIO-

RAD (kit của Hatildeng DRG) Địa điểm thực hiện phograveng xeacutet nghiệm

miễn dịch Trung tacircm Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng BV Bạch Mai

b Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng nucleosome được phaacutet hiện vagrave

định lượng bằng kỹ thuật ELISA trecircn maacutey tự động Alegriareg của

Hatildeng Orgentec (Đức) sử dụng kit của Hatildeng Orgentec Địa điểm

thực hiện tại Khoa Xeacutet nghiệm BV Đại học Y Hagrave Nội

226 Caacutec tiecircu chuẩn đaacutenh giaacute đƣợc sử dụng trong nghiecircn cứu

2261 Đaacutenh giaacute caacutec biểu hiện của bệnh LBĐHT dựa theo caacutec

tiecircu chuẩn lacircm sagraveng của SLICC 2012

2262 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của bệnh dựa theo tiecircu chuẩn

đaacutenh giaacute của cocircng cụ SELENA-SLEDAI

2263 Đaacutenh giaacute đợt cấp của LBĐHT Dựa vagraveo định nghĩa sử dụng

trong nghiecircn cứu SELENA

2264 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của tổn thương thận lupus

dựa vagraveo chỉ số hoạt động thận của SLICC năm 2008

2265 Đaacutenh giaacute đợt cấp tổn thương thận lupus dựa theo tiecircu

chuẩn của EULAR năm 2009

9

227 Sai số vagrave caacutech khắc phục sai số khắc phục caacutec sai số bằng

caacutech khai thaacutec kỹ triệu chứng lacircm sagraveng tiền sử kiểm tra vagrave đaacutenh giaacute

lại caacutec chỉ số hoạt động bệnh lagravem sạch số liệu trước khi xử lyacute

228 Xử lyacute số liệu Caacutec số liệu nghiecircn cứu được xử lyacute bằng phần

mềm toaacuten thống kecirc MEDCALC 140

229 Đạo đức của nghiecircn cứu

Nghiecircn cứu được tiến hagravenh tại caacutec cơ sở y tế coacute uy tiacuten với sự

đồng yacute của latildenh đạo caacutec đơn vị Đacircy lagrave nghiecircn cứu mocirc tả khocircng coacute

can thiệp tất cả caacutec đối tượng nghiecircn cứu đều tự nguyện tham gia

Caacutec số liệu thu được chỉ phục vụ cho mục điacutech nghiecircn cứu vagrave chăm

soacutec sức khỏe người bệnh khocircng phục vụ cho caacutec mục điacutech khaacutec

Chƣơng 3 KẾT QUẢ NGHIEcircN CỨU

31 Đặc điểm chung của caacutec đối tƣợng nghiecircn cứu

Bảng 31 Đặc điểm về tuổi vagrave giới

Nhoacutem nghiecircn cứu n Tuổi (X ) Tỷ lệ nữ nam

Nhoacutem LBĐHT 128 311 946 1322

Nhoacutem chứng bệnh 39 4305 17 333

Nhoacutem chứng khỏe 30 3163 1357 14

p 000036

04

0011

074

Nhoacutem LBĐHT so với nhoacutem chứng bệnh

Nhoacutem LBĐHT so với nhoacutem chứng khỏe

Tuổi trung bigravenh của nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lagrave 311 946

thấp hơn so với nhoacutem chứng bệnh (p = 000036) nhưng khocircng khaacutec

biệt so với nhoacutem chứng khỏe mạnh (p = 04) Tỷ lệ nữnam ở nhoacutem

LBĐHT lagrave 1322 tương đương nhoacutem chứng khỏe mạnh (p = 074)

nhưng cao hơn so với nhoacutem chứng bệnh (p = 0011)

Bảng 32 Phacircn bố theo nhoacutem tuổi của nhoacutem LBĐHT

Nhoacutem tuổi 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Tổng

10

n 1 67 52 7 1 128

Tỷ lệ 08 523 406 55 08 100

Caacutec bệnh nhacircn phần lớn gặp trong nhoacutem tuổi 20 ndash 30 (437)

vagrave 31 ndash 40 (336) thấp nhất lagrave ở nhoacutem gt 50 tuổi (47) Phacircn bố

caacutec nhoacutem tuổi khocircng coacute sự khaacutec biệt giữa 2 giới với p = 051

Bảng 33 Phacircn bố bệnh nhacircn LBĐHT theo thời gian mắc bệnh

Khoảng thời

gian (năm) Số lƣợng Tỷ lệ ()

Thời gian

trung bigravenh

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

TỔNG SỐ 128 100 517 37

Thời gian mắc bệnh của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT gặp nhiều

nhất trong khoảng 2 ndash 5 năm (516) vagrave 6 ndash 10 năm (25) Thời

gian mắc bệnh trung bigravenh lagrave 517 37 (năm)

Bảng 34 Phacircn bố bệnh nhacircn LBĐHT theo tuổi khởi phaacutet bệnh

Nhoacutem tuổi Số lƣợng Tỷ lệ () Tuổi trung bigravenh

15 14 109 1271 23

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

TỔNG SỐ 128 100 2593 974

Phần lớn bệnh nhacircn khởi phaacutet bệnh ở độ tuổi 16 ndash 25 (43) vagrave

26 ndash 35 (281) Số bệnh nhacircn khởi phaacutet bệnh sau 45 tuổi chỉ chiếm

11

39 Tuổi phaacutet bệnh trung bigravenh của caacutec bệnh nhacircn lagrave 2593 974

Tiền sử mắc LBĐHT của người thacircn 6128 bệnh nhacircn

LBĐHT coacute người thacircn trong gia đigravenh (cha mẹ anh chị em ruột)

cugraveng mắc LBĐHT chiếm tỷ lệ 469

12

Bảng 35 Một số biểu hiện lacircm sagraveng ở thời điểm đầu nghiecircn cứu

Tỷ lệ gặp cao nhất lagrave caacutec biểu hiện giảm bổ thể (622) rụng

toacutec (531) vagrave tổn thương thận (453) Iacutet gặp nhất lagrave caacutec biểu hiện

viecircm thanh mạc tan maacuteu (23) vagrave tổn thương thần kinh (31)

Bảng 36 Mức độ hoạt động của LBĐHT

TT Mức độ hoạt động Số lƣợng Tỷ lệ ()

1 Ổn định 15 117

2 Hoạt động nhẹ 57 445

3 Hoạt động trung bigravenh 37 289

4 Hoạt động mạnh 19 148

5 Đợt cấp LBĐHT 51 398

6 Điểm SLEDAI (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Điểm SLICC thận (X ) 312 42 (0 - 15)

TT Tiecircu chuẩn n Tỷ lệ ()

1 Caacutec tổn thương da lupus cấp baacuten cấp 49 383

2 Caacutec tổn thương da lupus mạn tiacutenh 21 164

3 Loeacutet niecircm mạc 9 7

4 Rụng toacutec 68 531

5 Biểu hiện khớp 45 352

6 Viecircm thanh mạc 3 23

7 Tổn thương thận 58 453

8 Tổn thương thần kinh 4 31

9 Thiếu maacuteu tan maacuteu 3 23

10 Giảm bạch cầu 42 328

11 Giảm tiểu cầu 5 39

12 Giảm bổ thể 79 622

13

Ở thời điểm khởi đầu nghiecircn cứu phần lớn bệnh nhacircn coacute bệnh

hoạt động ở mức độ nhẹ vagrave trung bigravenh (lần lượt chiếm 445 vagrave

289) Điểm SLEDAI dao động khaacute lớn trong khoảng 0 ndash 41

(trung bigravenh lagrave 661 62) Tỷ lệ bệnh nhacircn coacute đợt cấp LBĐHT lagrave

398 Điểm SLICC thận lupus trung bigravenh lagrave 312 42

32 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của

caacutec tự khaacuteng thể

Bảng 37 Tỷ lệ dương tiacutenh của tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Nhoacutem chứng

bệnh

(n = 39)

Nhoacutem chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN 859 5385 67 3333

Khaacuteng dsDNA 641 256 67 435

Khaacuteng Nucl 813 256 0 145

Khaacuteng C1q 25 0 0 0

Tỷ lệ dương tiacutenh của caacutec khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh nhacircn

LBĐHT theo thứ tự KTKN (859) gt khaacuteng Nucl (813) gt khaacuteng

dsDNA (641) gt khaacuteng C1q (25) tất cả đều cao hơn rotilde rệt so

với caacutec nhoacutem chứng với p lt 0005

Bảng 38 Nồng độ trung bigravenh của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Chứng

bệnh

(n = 39)

Chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Khaacuteng dsDNA (IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

Khaacuteng Nucl (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Khaacuteng C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

14

Nồng độ trung bigravenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 945 1385 (IUml) vagrave 3221 6034

(IUml) đều cao hơn caacutec nhoacutem chứng với p lt 00001

Bảng 39 Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 8594 6667 8271 7187

Khaacuteng dsDNA 6406 9565 9647 5863

Khaacuteng Nucl 8125 9855 9905 7391

Khaacuteng C1q 25 100 100 4182

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute độ đặc hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương

tiacutenh với LBĐHT tương đương KT khaacuteng dsDNA nhưng độ nhạy vagrave

giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh đều cao hơn Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh cao nhất trong 4 khaacuteng thể trong

khi đoacute KTKN coacute độ nhạy cao nhất nhưng độ đặc hiệu lagrave thấp nhất

Bảng 310 Giaacute trị chẩn đoaacuten của caacutec khaacuteng thể qua đường cong ROC

Khaacuteng thể (AUC) KTKN

(0716)

Khaacuteng

dsDNA

(089)

Khaacuteng

C1q

(0676)

Khaacuteng

Nucl

(0911)

KTKN (0716) p=00001 p=044 plt0001

Khaacuteng dsDNA (089) p=00001 plt0001 p=044

Khaacuteng C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

Khaacuteng Nucl (0911) plt0001 p=044 plt0001

Caacutec khaacuteng thể khaacuteng Nucl khaacuteng dsDNA KTKN vagrave khaacuteng

C1q lần lượt coacute giaacute trị rất tốt tốt khaacute tốt vagrave iacutet giaacute trị trong chẩn đoaacuten

15

LBĐHT Diện tiacutech dưới đường cong ROC (AUC) của caacutec KT khaacuteng

Nucl vagrave khaacuteng dsDNA đều cao hơn coacute yacute nghĩa thống kecirc so với

KTKN vagrave khaacuteng C1q

33 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Bảng 311 Liecircn quan giữa KTKN với caacutec biểu hiện của LBĐHT

Nhoacutem triệu

chứng

KTKN KT khaacuteng

dsDNA

KT khaacuteng

C1q

KT khaacuteng

Nucl

OR p OR p OR p OR p

Tổn thương da

lupus cấp baacuten

cấp

311 007 258 00056 082 055 238 008

Tổn thương da

lupus mạn tiacutenh 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Loeacutet niecircm mạc 057 04 055 026 121 074 291 031

Rụng toacutec 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Biểu hiện khớp 166 025 118 055 142 021 179 017

Viecircm thanh mạc 106 097 129 083 12 088 143 081

Tổn thương

thận 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Tổn thương

thần kinh 088 091 025 01 039 039 025 008

Tan maacuteu 044 048 064 066 026 037 168 066

Giảm BC 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Giảm TC 149 071 3 016 446 002 204 05

Giảm bổ thể 1006 lt00001 327 lt00001 372 lt00001 1611 lt0001

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute

16

liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn

quan với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp tổn thương

da lupus mạn tiacutenh giảm BC vagrave giảm bổ thể Khaacuteng thể khaacuteng C1q

dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng

toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan

với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Bảng 312 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể ở bệnh nhacircn LBĐHT

Khaacuteng thể Tỷ lệ (+) OR p

KTKN (+)

Khaacuteng dsDNA 6932 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3227 393 0012

Khaacuteng Nucl 8924 1089 lt00001

Khaacuteng dsDNA

(+)

KTKN 9943 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3714 274 00005

Khaacuteng Nucl 9543 1144 lt00001

Khaacuteng C1q (+)

Khaacuteng dsDNA 7647 274 00005

KTKN 9529 393 0012

Khaacuteng Nucl 9412 43 0003

Khaacuteng Nucl (+)

KTKN 9333 1089 lt00001

Khaacuteng C1q 3333 43 0003

Khaacuteng dsDNA 6958 1144 lt00001

Sự dương tiacutenh của caacutec tự khaacuteng thể đều coacute mối liecircn quan thuận

coacute yacute nghĩa thống kecirc với nhau (p lt 005) trong đoacute mối liecircn quan rotilde

rệt nhất lagrave giữa 3 khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng Nucl vagrave KTKN

17

Bảng 313 Liecircn quan giữa tự khaacuteng thể với độ hoạt động của bệnh

Khaacuteng thể

Mức độ hoạt động của LBĐHT p

Mạnh

(n = 36) (I)

Trung bigravenh

(n = 67)(II)

Nhẹổn

(n = 185)(III) I vagrave II II vagrave III

KTKN 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Khaacuteng

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Khaacuteng

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

Khaacuteng

Nucl

100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt0000

1

So với nhoacutem bệnh hoạt động trung bigravenh tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh cao hơn rotilde rệt với p =

00025 Nồng độ trung bigravenh của khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave KT

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh đều cao hơn rotilde rệt Tỷ lệ

(+) vagrave nồng độ trung bigravenh của 4 khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh hoạt động

trung bigravenh đều cao hơn so với nhoacutem bệnh hoạt động nhẹ ổn định

Bảng 314 Tương quan giữa nồng độ khaacuteng thể với điểm SLEDAI vagrave

điểm SLICC thận

Khaacuteng thể SLEDAI SLICC thận

r p r p

KTKN 0306 lt00001 0143 lt0013

Khaacuteng dsDNA 056 lt00001 0216 00002

Khaacuteng C1q 0433 lt00001 0399 lt00001

Khaacuteng Nucl 0648 lt00001 0348 00082

18

Nồng độ KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA tương quan thuận

chặt chẽ nhất với điểm SLEDAI (p lt 0001) Nồng độ KT khaacuteng

C1q tương quan chặt chẽ nhất với điểm SLICC thận (r = 0399)

Bảng 315 Thay đổi nồng độ caacutec khaacuteng thể sau đợt cấp

Khaacuteng thể Tỷ lệ

giảm

Khaacutec biệt

trung bigravenh

Test t

gheacutep cặp p

KTKN (OD) 625 -034 -143 016

Khaacuteng dsDNA (IUml) 6458 -19949 -1793 008

Khaacuteng C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

Khaacuteng Nucl (IUml) 8333 -47509 -39 00003

Với 48 đợt cấp được theo dotildei nồng độ trung bigravenh của caacutec KT

khaacuteng C1q (p = 0037) vagrave khaacuteng Nucl (p = 00003) sau đợt cấp giảm

coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Bảng 316 Giaacute trị dự đoaacuten đợt cấp LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 9759 6714 3227 9459

Khaacuteng dsDNA 759 4537 36 823

Khaacuteng C1q 5783 8195 5647 8276

Khaacuteng Nucl 9759 2244 3375 9583

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng C1q 4819 878 6154 8072

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng Nucl 759 4927 3772 8347

Khaacuteng Nucl + Khaacuteng C1q 5783 8439 60 8317

Trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT KTKN vagrave khaacuteng Nucl đều coacute

độ nhạy cao vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh cao gt 94 nhưng độ đặc hiệu

khaacute thấp Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu cao nhất (8195)

đặc biệt khi dương tiacutenh đồng thời với KT khaacuteng dsDNA (878)

19

Chƣơng 4 BAgraveN LUẬN

41 Đặc điểm của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT

411 Phacircn bố về tuổi vagrave giới tỷ lệ bệnh nhacircn nữ chiếm tới

9297 với tuổi trung bigravenh lagrave 311 946 trong đoacute phần lớn thuộc

nhoacutem tuổi từ 16 ndash 45 (929) Kết quả nagravey hoagraven toagraven phugrave hợp với

những kết quả nghiecircn cứu trước đacircy cho thấy đặc điểm dịch tễ học

cơ bản của LBĐHT lagrave thường xảy ra ở phụ nữ trong độ tuổi sinh đẻ

412 Về tuổi khởi phaacutet bệnh phần lớn bệnh nhacircn LBĐHT

khởi phaacutet bệnh trong giai đoạn 15 - 45 tuổi (852) tuổi khởi phaacutet

bệnh trung bigravenh lagrave 2593 974 Khaacute nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học

trecircn qui mocirc lớn cho thấy LBĐHT thường coacute xu hướng khởi phaacutet ở

nữ giới trong nhoacutem tuổi từ 15 - 45 giai đoạn coacute sự hoạt động mạnh

mẽ nhất của caacutec tuyến nội tiết hướng sinh dục nữ

413 Tiền sử gia đigravenh coacute ngƣời mắc LBĐHT 469 số

bệnh nhacircn LBĐHT coacute iacutet nhất một người thacircn trong gia đigravenh cugraveng

mắc bệnh Nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học đatilde cho thấy tỷ lệ mắc

LBĐHT ở những người thacircn của người bệnh thường cao gấp khoảng

10 - 20 lần so với tỷ lệ mắc chung trong cộng đồng (4 - 12) cho

thấy vai trograve của yếu tố di truyền trong cơ chế bệnh sinh của LBĐHT

414 Caacutec biểu hiện của LBĐHT Caacutec biểu hiện bệnh gặp

nhiều nhất lagrave rụng toacutec - 531 tổn thương thận - 453 tổn thương

da lupus cấp baacuten cấp - 383 giảm bạch cầu - 382 vagrave giảm bổ

thể - 622 Những kết quả nagravey khaacute tương đồng với nghiecircn cứu của

nhiều taacutec giả trong vagrave ngoagravei nước tuy nhiecircn tỷ lệ viecircm thanh mạc

tổn thương thần kinh vagrave giảm tiểu cầu gặp khaacute thấp nguyecircn nhacircn coacute

thể do sự khaacutec nhau trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu vagrave sự

khaacutec biệt về đặc điểm lacircm sagraveng của LBĐHT giữa caacutec chủng tộc

20

42 Về tỷ lệ dƣơng tiacutenh vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự

khaacuteng thể

421 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN)

Về tỷ lệ dương tiacutenh 859 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute KTKN

dương tiacutenh ở lần khaacutem 1 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ

dương tiacutenh của KTKN ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute sự dao động khaacute lớn

trong khoảng 60 ndash 100 nguyecircn nhacircn coacute thể lagrave do sự khaacutec biệt

trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu thiết kế nghiecircn cứu kỹ

thuật xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể sự

đảo chiều huyết thanh của KTKN

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm

tiacutenh của KTKN lần lượt lagrave 8594 vagrave 7231 khaacute thấp so với caacutec

kết quả nghiecircn cứu trước đacircy nguyecircn nhacircn coacute thể do nhoacutem bệnh

nhacircn nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute tỷ lệ KTKN acircm tiacutenh khaacute cao

(141) sự khaacutec biệt về caacutech thức lựa chọn vagrave đặc điểm của nhoacutem

chứng Độ đặc hiệu của KTKN với LBĐHT lagrave khaacute thấp (4615)

khi sử dụng nhoacutem chứng mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec nguyecircn nhacircn lagrave

do KTKN coacute thể xuất hiện trong nhiều bệnh lyacute tự miễn khaacutec

422 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA

Về tỷ lệ dương tiacutenh bệnh nhacircn LBĐHT 641 số bệnh nhacircn

LBĐHT trong nghiecircn cứu coacute KT khaacuteng dsDNA dương tiacutenh nằm

trong dải biến thiecircn 37 - 85 của caacutec kết quả nghiecircn cứu trước đacircy

Caacutec yếu tố coacute ảnh hưởng rotilde rệt nhất đến tỷ lệ nagravey lagrave mức độ hoạt

động vagrave tổn thương nội tạng của caacutec đối tượng nghiecircn cứu kỹ thuật

xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ đặc hiệu của KT khaacuteng

dsDNA trong chẩn đoaacuten LBĐHT ở nghiecircn cứu nagravey lagrave 9333 khi sử

dụng nhoacutem chứng khỏe mạnh vagrave 9744 khi sử dụng nhoacutem chứng

21

mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec tức lagrave hoagraven toagraven phugrave hợp với caacutec kết quả

nghiecircn cứu trước đacircy (95 ndash 100) Traacutei với độ đặc hiệu độ nhạy của

KT khaacuteng dsDNA với LBĐHT thường khocircng cao vagrave coacute khoảng dao

động khaacute lớn (13 - 86) Nguyecircn nhacircn coacute thể do tiacutenh chất dao động

thường xuyecircn của khaacuteng thể nagravey trong quaacute trigravenh diễn biến bệnh vagrave

độ nhạy khaacutec nhau của caacutec kỹ thuật xeacutet nghiệm miễn dịch

423 Khaacuteng thể khaacuteng C1q

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở bệnh nhacircn LBĐHT dao động trong khoảng 15 ndash

63 theo caacutec nghiecircn cứu trước đacircy kết quả của chuacuteng tocirci lagrave 25 ở

lần khaacutem 1 Trong 3 nghiecircn cứu coacute cỡ mẫu lớn nhất của Julkunen H

(2012) Mok CC (2010) vagrave Orbai AM (2015) tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q đều tương đối thấp vagrave iacutet coacute sự khaacutec biệt

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT KT khaacuteng C1q coacute giaacute trị keacutem

nhất trong chẩn đoaacuten vagrave phacircn loại LBĐHT với diện tiacutech dưới đường

cong ROC lagrave 0676 vagrave độ nhạy chỉ lagrave 25 Tỷ lệ dương tiacutenh thấp vagrave

dao động thường xuyecircn ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute thể lagrave nguyecircn nhacircn

chiacutenh lagravem giảm độ nhạy của khaacuteng thể nagravey trong chẩn đoaacuten bệnh

424 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome (KT khaacuteng Nucl )

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT Tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT trong nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci

lagrave 813 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ nagravey coacute khoảng dao

động rộng từ 45 đến 100 nguyecircn nhacircn lagrave do sự khaacutec biệt của caacutec

đối tượng nghiecircn cứu về chủng tộc vagrave mức độ hoạt động bệnh

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT nhiều nghiecircn cứu đatilde cho thấy độ

đặc hiệu rất cao của KT khaacuteng Nucl với LBĐHT (90 ndash 100) tương

đồng với kết quả thu được của chuacuteng tocirci lagrave 987 Nguyecircn nhacircn coacute

thể do nucleosome lagrave tự khaacuteng nguyecircn coacute vai trograve quan trọng trong cơ

22

chế bệnh sinh của LBĐHT Độ nhạy của KT khaacuteng Nucl với

LBĐHT trong nghiecircn cứu nagravey lagrave 8125 cao hơn so với KT khaacuteng

dsDNA (6406)

43 Về liecircn quan giữa caacutec khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

431 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh (ge 12

OD) ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với sự xuất

hiện của giảm bổ thể vagrave caacutec tự khaacuteng thể khaacutec Mối liecircn quan giữa

khaacuteng thể nagravey với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của

LBĐHT trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy lagrave khocircng rotilde rệt do thiếu

những bằng chứng đaacuteng tin cậy

432 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với caacutec biểu

hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp hoặc mạn tiacutenh giảm bạch cầu

vagrave giảm bổ thể nhưng khocircng liecircn quan với tổn thương thận lupus

Nồng độ vagrave tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng dsDNA ở nhoacutem bệnh

nhacircn trong đợt cấp đều cao hơn so với nhoacutem ngoagravei đợt cấp tuy nhiecircn

khaacuteng thể nagravey coacute liecircn quan khocircng hằng định với cả hoạt tiacutenh chung

của LBĐHT vagrave tổn thương thận đặc biệt lagrave với đợt cấp của bệnh

433 Khaacuteng thể khaacuteng C1q khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh ở

bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan rotilde rệt với sự xuất hiện của tổn thương

thận vagrave giảm bổ thể Độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey trong dự baacuteo tổn

thương thận lupus cao hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại vagrave nồng độ của noacute

tương quan nghịch khaacute chặt với cả bổ thể C3 vagrave C4 (p lt 00001) Tỷ

lệ vagrave nồng độ trung bigravenh của KT khaacuteng C1q đều coacute xu hướng tăng

dần theo mức độ hoạt động của bệnh Tương quan giữa nồng độ KT

khaacuteng C1q với điểm SLICC thận vagrave độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey

trong dự baacuteo đợt cấp thận lupus cũng tốt hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại

23

434 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện tổn thương

da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận giảm BC vagrave giảm bổ thể Độ

nhạy trong dự baacuteo tổn thương thận lupus của KT khaacuteng Nucl cao

hơn so với caacutec khaacuteng thể cograven lại Tương quan với nồng độ bổ thể vagrave

điểm SLEDAI của khaacuteng thể nagravey cũng chặt chẽ hơn caacutec khaacuteng thể

cograven lại

KẾT LUẬN

Qua nghiecircn cứu 128 bệnh nhacircn LBĐHT với nhoacutem chứng gồm

39 người mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec vagrave 30 người khỏe mạnh chuacuteng

tocirci xin đưa ra một số kết luận sau

1 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten của một

số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể

Tỷ lệ dương tiacutenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 855 641 25 vagrave

813 tất cả đều cao hơn rotilde rệt so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở 587 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute

KT khaacuteng dsDNA acircm tiacutenh

Nồng độ trung bigravenh của caacutec KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng

C1q vagrave khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 3221 6034 (IUml) vagrave 945 1385

(IUml) tất cả đều cao hơn so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn coacute độ nhạy cao (8594) nhưng độ đặc

hiệu thấp (6667) với LBĐHT Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh 100 với LBĐHT nhưng độ nhạy

rất thấp (25)

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 2: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

Cocircng trigravenh được hoagraven thagravenh tại

TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HAgrave NỘI

Người hướng dẫn khoa học

PGSTS TRẦN THUacuteY HẠNH

Phản biện 1 PGSTS Nguyễn Văn Đoagraven

Phản biện 2 PGSTS Đặng Văn Em

Phản biện 3 PGSTS Trịnh Mạnh Hugraveng

Luận văn sẽ được bảo vệ tại Hội đồng chấm luận aacuten Tiến sỹ Y học

cấp trường tổ chức tại trường Đại học Y Hagrave Nội vagraveo

hồi giờ ngagravey thaacuteng năm

Luận văn coacute thể được tigravem thấy tại

- Thư viện Quốc gia

- Thư viện Thocircng tin y học trung ương

- Thư viện trường Đại học Y Hagrave Nội

- Thư viện bệnh viện Bạch Mai

DANH MỤC CAacuteC BAgraveI BAacuteO ĐAtilde ĐƯỢC COcircNG BỐ

LIEcircN QUAN ĐẾN ĐỀ TAgraveI

1 Nguyễn Hữu Trường (2014) Nghiecircn cứu mối liecircn quan

giữa nồng độ C3 C4 huyết tương với một số đặc điểm

lacircm sagraveng cận lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của bệnh ở

bệnh nhacircn lupus ban đỏ hệ thống Tạp chiacute Y học Quacircn sự

số 302 tr 26 - 30

2 Nguyễn Hữu Trường (2014) Tương quan giữa nồng độ

khaacuteng thể khaacuteng dsDNA với mức độ hoạt động của bệnh

lupus ban đỏ hệ thống Tạp chiacute Y học Thực hagravenh số 10

(937) tr 2 - 5

3 Nguyễn Hữu Trường (2015) Liecircn quan giữa khaacuteng thể

khaacuteng C1q với caacutec yếu tố bổ thể C3 C4 vagrave biểu hiện lacircm

sagraveng của bệnh Lupus ban đỏ hệ thống Tạp chiacute Y học Lacircm

sagraveng số 90 tr 54- 61

4 Nguyễn Hữu Trường (2015) Khaacuteng thể khaacuteng

nucleosome ở bệnh nhacircn Lupus ban đỏ hệ thống vagrave mối

liecircn quan với mức độ hoạt động của bệnh Tạp chiacute Y học

Việt Nam tập 427 số 1 (2) tr 9 - 14

5 Nguyễn Quang Tugraveng Nguyễn Hữu Trường (2015)

Nghiecircn cứu mối liecircn quan giữa tigravenh trạng giảm tiểu cầu

với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của bệnh

Lupus ban đỏ hệ thống Tạp chiacute Y học Việt Nam tập 427

số 1 (2) tr 50 - 55

1

CAacuteC CHỮ VIẾT TẮT

ACR American College of Rheumatology (Hội Khớp học Mỹ)

AUC Area under the ROC curve (Diện tiacutech dưới đường cong ROC)

CLS cận lacircm sagraveng

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

KT khaacuteng thể

KTKN khaacuteng thể khaacuteng nhacircn

LBĐHT Lupus ban đỏ hệ thống

Nucl nucleosome

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

MỞ ĐẦU

1 Tiacutenh cấp thiết của đề tagravei

Lupus ban đỏ hệ thống (LBĐHT) lagrave một trong những bệnh tự

miễn dịch hệ thống thường gặp nhất với độ lưu hagravenh ước tiacutenh

khoảng 20 - 150 ca 100000 dacircn riecircng ở phụ nữ lagrave khoảng 164 - 406

ca 100000 dacircn Bệnh đặc trưng bởi sự xuất hiện của caacutec tế bagraveo

lympho B vagrave T tự phản ứng chịu traacutech nhiệm sản xuất ra hagraveng loạt

tự khaacuteng thể bệnh lyacute nhằm vagraveo caacutec khaacuteng nguyecircn điacutech ở trong nhacircn

bagraveo tương magraveng tế bagraveo huyết tương hoặc caacutec protein nền Cho đến

nay đatilde coacute gần 180 loại tự khaacuteng thể liecircn quan đến LBĐHT được xaacutec

định trong đoacute nhiều loại được chứng minh coacute vai trograve rất quan trọng

đối với sự higravenh thagravenh vagrave tiến triển của bệnh lagrave yếu tố khởi phaacutet phản

ứng viecircm tự miễn dẫn đến tổn thương caacutec hệ cơ quan Trecircn lacircm

sagraveng nhiều loại tự khaacuteng thể đatilde thể hiện khaacute rotilde vai trograve trong chẩn

đoaacuten đaacutenh giaacute mức độ hoạt động vagrave tiecircn lượng đối với LBĐHT Sự

xuất hiện của caacutec tự khaacuteng thể đồng thời với caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng

gợi yacute sẽ hỗ trợ rất nhiều cho việc chẩn đoaacuten xaacutec định bệnh Becircn cạnh

4 loại tự khaacuteng thể kinh điển đatilde được đưa vagraveo caacutec tiecircu chuẩn phacircn

loại bệnh của Hội Khớp học Mỹ (ACR-1997) vagrave Nhoacutem Hợp taacutec

Quốc tế về LBĐHT (SLICC- 2012) một số tự khaacuteng thể mới như

2

khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng C1q hellip cũng đều cho thấy độ

nhạy vagrave độ đặc hiệu khaacute cao trong chẩn đoaacuten LBĐHT vagrave caacutec tổn

thương nội tạng của bệnh Becircn cạnh đoacute một số loại khaacuteng thể đatilde

được chứng minh coacute mối liecircn quan khaacute rotilde rệt với mức độ hoạt động

của bệnh vagrave một số tổn thương nội tạng của LBĐHT như caacutec khaacuteng

thể khaacuteng dsDNA khaacuteng nucleosome khaacuteng C1qhellip Sự xuất hiện

vagrave biến đổi nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể nagravey phản aacutenh khaacute tốt sự

dao động hoạt tiacutenh vagrave coacute thể giuacutep dự baacuteo trước caacutec đợt cấp của bệnh

Do đoacute nhiều loại tự khaacuteng thể đatilde được sử dụng rộng ratildei trong thực

hagravenh lacircm sagraveng như những cocircng cụ giuacutep hỗ trợ việc đaacutenh giaacute vagrave theo

dotildei mức độ hoạt động của LBĐHT một caacutech nhanh choacuteng vagrave tiện lợi

Việc coacute được những hiểu biết đầy đủ hơn về đặc điểm của caacutec

tự khaacuteng thể trong LBĐHT coacute thể giuacutep caacutec thagravey thuốc coacute thecircm

những cocircng cụ coacute tiacutenh khả thi vagrave đủ độ tin cậy để chẩn đoaacuten đaacutenh

giaacute vagrave theo dotildei mức độ hoạt động của bệnh Vigrave lyacute do nagravey tocirci quyết

định lựa chọn đề tagravei ldquoNghiecircn cứu mối tương quan giữa mức độ hoạt

động của bệnh với một số tự khaacuteng thể trong lupus ban đỏ hệ thốngrdquo

nhằm caacutec mục tiecircu sau

1 Xaacutec định tỷ lệ dương tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten bệnh

lupus ban đỏ hệ thống của caacutec tự khaacuteng thể khaacuteng nhacircn khaacuteng dsDNA

khaacuteng C1q vagrave khaacuteng nucleosome

2 Khảo saacutet mối liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể nagravey với một số

biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của bệnh lupus ban đỏ hệ

thống

2 Những đoacuteng goacutep mới của đề tagravei

Đacircy lagrave cocircng trigravenh đầu tiecircn trong nước nghiecircn cứu giaacute trị chẩn

đoaacuten LBĐHT vagrave tổn thương thận lupus của caacutec khaacuteng thể mới lagrave

khaacuteng thể khaacuteng nucleosome vagrave khaacuteng C1q coacute so saacutenh với hai loại

3

khaacuteng thể cổ điển lagrave khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) vagrave khaacuteng

dsDNA nhằm tigravem kiếm những cocircng cụ tối ưu cho việc chẩn đoaacuten

bệnh Kết quả thu được của nghiecircn cứu đatilde cho thấy giaacute trị rất tốt của

khaacuteng thể khaacuteng nucleosome trong chẩn đoaacuten LBĐHT vagrave độ đặc

hiệu cao của khaacuteng thể khaacuteng C1q với tổn thương thận lupus

Đacircy cũng lagrave nghiecircn cứu theo dotildei dọc đầu tiecircn ở Việt Nam đaacutenh

giaacute mối liecircn quan giữa sự dương tiacutenh vagrave nồng độ của KTKN khaacuteng

dsDNA khaacuteng C1q vagrave khaacuteng nucleosome với mức độ hoạt động của

bệnh LBĐHT vagrave tổn thương thận lupus Kết quả thu được của nghiecircn

cứu đatilde cho thấy KT khaacuteng nucleosome coacute liecircn quan với mức độ hoạt

động của bệnh chặt chẽ hơn vagrave giaacute trị dự baacuteo đợt cấp bệnh tốt hơn so

với KT khaacuteng dsDNA Khaacuteng thể khaacuteng C1q cũng coacute mối liecircn quan

với sự xuất hiện vagrave mức độ hoạt động của tổn thương thận lupus chặt

chẽ hơn so với KT khaacuteng dsDNA

3 Bố cục của luận aacuten

Luận aacuten gồm 144 trang gồm Đặt vấn đề (2 trang) tổng quan

tagravei liệu (42 trang) đối tượng vagrave phương phaacutep nghiecircn cứu (17 trang)

kết quả nghiecircn cứu (30 trang) bagraven luận (50 trang) kết luận (2 trang)

vagrave kiến nghị (1 trang)

Toagraven bộ luận aacuten coacute 48 bảng 15 higravenh sơ đồ vagrave biểu đồ

Tagravei liệu tham khảo bao gồm 191 tagravei liệu (9 tiếng Việt vagrave 182

tiếng Anh)

Chƣơng 1 TỔNG QUAN TAgraveI LIỆU

11 Vagravei neacutet về cơ chế điều hogravea vagrave tiacutenh chất sinh bệnh học của caacutec

tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Caacutec tế bagraveo B tự phản ứng bị hoạt hoacutea khi gặp caacutec tự khaacuteng

nguyecircn đặc hiệu với sự coacute mặt của caacutec tế bagraveo T hỗ trợ Sau đoacute

chuacuteng trải qua quaacute trigravenh chuyển đổi isotype siecircu đột biến dạng cơ

4

thể vagrave chọn lọc dograveng để tạo ra caacutec tế bagraveo B hiệu ứng coacute chức năng

giải phoacuteng caacutec tự khaacuteng thể IgG vagraveo hệ tuần hoagraven Caacutec khaacuteng thể

nagravey tạo thagravenh PHMD dư thừa tiacutech tụ vagrave gacircy tổn thương viecircm tại caacutec

cơ quan

12 Tổng quan chẩn đoaacuten vagrave đaacutenh giaacute độ hoạt động của LBĐHT

121 Chẩn đoaacuten LBĐHT

Lupus ban đỏ hệ thống coacute biểu hiện lacircm sagraveng rất đa dạng nhưng

phần lớn caacutec biểu hiện lagrave khocircng đặc hiệu gacircy khoacute khăn cho việc chẩn

đoaacuten Hiện chưa coacute caacutec cocircng cụ dagravenh riecircng cho chẩn đoaacuten LBĐHT

necircn caacutec bộ tiecircu chuẩn phacircn loại bệnh của Hội Khớp học Mỹ năm

1997 (ACR 1997) vagrave Tổ chức Hợp taacutec Quốc tế về LBĐHT năm 2012

(SLICC 2012) thường được sử dụng trecircn lacircm sagraveng cho mục điacutech nagravey

122 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của LBĐHT khocircng coacute yếu tố

chỉ điểm đơn lẻ coacute thể đaacutenh giaacute chiacutenh xaacutec mức độ hoạt động của

bệnh Chưa coacute cocircng cụ đaacutenh giaacute vagrave đo lường mức độ hoạt động của

LBĐHT nagraveo được cho lagrave tối ưu để aacutep dụng trong thực tiễn

13 Yacute nghĩa lacircm sagraveng của một số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

131 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh coacute độ

nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh rất cao với LBĐHT nhưng độ đặc

hiệu thấp do coacute thể gặp trong nhiều bệnh khaacutec Khaacuteng thể nagravey coacute

mối liecircn quan khocircng rotilde rệt với mức độ hoạt động của LBĐHT

132 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng dsDNA coacute độ đặc hiệu cao

(95-100) vagrave lagrave một trong caacutec tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten LBĐHT tuy

nhiecircn độ nhạy khocircng cao vigrave noacute thường chỉ dương tiacutenh tạm thời

Khaacuteng thể nagravey coacute mối tương quan thuận khaacute rotilde với mức độ hoạt

động của bệnh KT khaacuteng dsDNA coacute độ nhạy khaacute cao trong chẩn

đoaacuten phacircn biệt giữa LBĐHT ổn định vagrave hoạt động nhưng khocircng

hằng định giữa caacutec nghiecircn cứu Theo dotildei định kỳ khaacuteng thể nagravey ở

5

bệnh nhacircn LBĐHT cho thấy sự biến đổi nồng độ của noacute coacute liecircn

quan rotilde rệt với sự xuất hiện caacutec đợt cấp của bệnh sau đoacute

133 Khaacuteng thể khaacuteng C1q được tigravem thấy trong LBĐHT vagrave nhiều

bệnh lyacute khaacutec như magravey đay viecircm mạch giảm bổ thể phugrave mạch di

truyền viecircm khớp dạng thấp hellip Khaacuteng thể nagravey coacute độ nhạy vagrave độ đặc

hiệu khocircng cao trong chẩn đoaacuten LBĐHT nhưng lagrave một trong những

khaacuteng thể coacute liecircn quan rotilde rệt nhất với tổn thương thận lupus Nồng

độ của KT khaacuteng C1q coacute mối tương quan chặt chẽ với mức độ hoạt

động của LBĐHT đặc biệt lagrave với tổn thương thận Khaacuteng thể nagravey coacute

giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh vagrave độ đặc hiệu khaacute cao với đợt cấp thận lupus

134 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute độ

nhạy dao động trong khoảng 50-90 vagrave độ đặc hiệu lagrave 90-99 trong

chẩn đoaacuten LBĐHT Caacutec nghiecircn cứu so saacutenh đối đầu giữa khaacuteng thể

nagravey vagrave KT khaacuteng dsDNA cho thấy KT khaacuteng Nucl coacute độ đặc hiệu

tương đương nhưng độ nhạy cao hơn so rotilde rệt Ngoagravei ra nồng độ KT

khaacuteng Nucl cũng coacute mối tương quan chặt chẽ với caacutec chỉ số đaacutenh giaacute

mức độ hoạt động của bệnh vagrave tổn thương thận lupus

Chƣơng 2 ĐỐI TƢỢNG VAgrave PHƢƠNG PHAacuteP

21 Đối tƣợng nghiecircn cứu

211 Nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT

Bao gồm 128 bệnh nhacircn được chẩn đoaacuten lupus ban đỏ hệ

thống theo tiecircu chuẩn SLICC 2012 theo dotildei vagrave điều trị tại Trung tacircm

Dị ứng ndash Miễn dịch Lacircm sagraveng vagrave Phograveng Quản lyacute bệnh lupus ban đỏ

hệ thống Khoa Khaacutem bệnh - Bệnh viện Bạch Mai từ thaacuteng 032014

đến thaacuteng 022016

Tiecircu chuẩn loại trừ phụ nữ coacute thai bệnh nhacircn coacute mắc kegravem

caacutec bệnh nội khoa nặng như tiểu đường suy tim suy chức năng gan

6

bệnh nhacircn bị mắc giang mai hoặc HIVAIDS bệnh nhacircn coacute mắc

kegravem caacutec bệnh tự miễn khaacutec bệnh nhacircn khocircng đồng yacute tham gia

nghiecircn cứu

212 Nhoacutem chứng

Nhoacutem chứng bệnh bao gồm 39 người mắc caacutec bệnh tự

miễn dịch khaacutec LBĐHT được chẩn đoaacuten xaacutec định vagrave điều trị tại

Trung tacircm Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng BV Bạch Mai vagrave phograveng

khaacutem chuyecircn khoa Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng khoa Khaacutem Bệnh

BV Bạch Mai từ 22016 đến 4 2016

Khocircng phacircn biệt tuổi giới nghề nghiệp trigravenh độ học vấn

nơi cư truacute

Khocircng bị suy tế bagraveo gan hoặc hoặc nhiễm HIVAIDS

Chấp nhận tham gia nghiecircn cứu

Nhoacutem chứng khỏe mạnh 30 người khỏe mạnh coacute độ tuổi

vagrave phacircn bố giới tiacutenh tương đồng với nhoacutem bệnh nhacircn nghiecircn cứu

Khocircng coacute tiền sử mắc caacutec bệnh lyacute tự miễn khocircng coacute người

thacircn thuộc caacutec thế hệ thứ nhất vagrave thứ 2 mắc caacutec bệnh lyacute tự miễn dịch

Khocircng phacircn biệt nghề nghiệp trigravenh độ học vấn nơi cư truacute

Chấp nhận tham gia nghiecircn cứu

22 Phƣơng phaacutep nghiecircn cứu

221 Phƣơng phaacutep nghiecircn cứu Mocirc tả cắt ngang + theo dotildei dọc

222 Chọn mẫu

Mẫu nghiecircn cứu được lấy theo phương phaacutep chọn mẫu thuận

tiện Caacutec đối tượng được lựa chọn theo trigravenh tự thời gian khocircng

phacircn biệt tuổi taacutec giới tiacutenh mức độ hoạt động vagrave hủy hoại vĩnh viễn

223 Cỡ mẫu

Cỡ mẫu nghiecircn cứu mocirc tả cắt ngang được tiacutenh dựa theo cocircng

thức dugraveng để ước tiacutenh một tỷ lệ của tổ chức y tế thế giới

7

trong đoacute n lagrave cỡ mẫu tối thiểu lagrave mức yacute nghĩa thống kecirc tương ứng

với khoảng tin cậy 95 = 005 Z1-2 lagrave Z score tương ứng với

mức yacute nghĩa thống kecirc mong muốn với = 005 thigrave Z1-2 = 196 p lagrave

tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng nucleosome ở bệnh nhacircn LBĐHT (p

= 0909 theo Đặng Thu Hương - Tạp chiacute Y học Thagravenh phố Hồ Chiacute

Minh 2013 tập 17 phụ bản 1 tr 294-300) q = 1 - p = 0091 d lagrave độ

chiacutenh xaacutec tuyệt đối mong muốn chọn d = 005 Từ đoacute tiacutenh được n =

1271 Nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute cỡ mẫu lagrave 128 bệnh nhacircn

224 Caacutec bƣớc tiến hagravenh nghiecircn cứu

2241 Nhoacutem bệnh nhacircn lupus ban đỏ hệ thống

Lựa chọn vagraveo danh saacutech nghiecircn cứu vagrave gắn matilde bệnh aacuten

Lần khaacutem 1 khaacutem lacircm sagraveng khai thaacutec tiền sử xeacutet nghiệm

CLS thocircng thường (định lượng urecirc creatinin glucose AST ALT

albumin cholesterol triglyceride C3 vagrave C4 bổ thể trong huyết thanh

tế bagraveo niệu trụ niệu định lượng protein niệu 24 giờhellip) định lượng

khaacuteng thể khaacuteng nhacircn khaacuteng dsDNA khaacuteng nucleosome vagrave khaacuteng

C1q phacircn tiacutech caacutec nhoacutem triệu chứng bệnh đaacutenh giaacute điểm SELENA-

SLEDAI mức độ hoạt động của bệnh sự xuất hiện đợt cấp của

bệnh Chỉ số Hoạt động Thận của SLICC 2008 đợt cấp thận lupus

Theo dotildei định kỳ caacutec bệnh nhacircn được thăm khaacutem định kỳ

hagraveng thaacuteng hoặc ngay khi coacute caacutec dấu hiệu bất thường Quaacute trigravenh

nghiecircn cứu kết thuacutec khi bệnh nhacircn được theo dotildei đủ 12 thaacuteng hoặc

khi được phaacutet hiện coacute thai hoặc bị mất theo dotildei Caacutec bước thăm

khaacutem gồm khaacutem lacircm sagraveng xeacutet nghiệm CLS thocircng thường đaacutenh giaacute

caacutec triệu chứng bệnh sự xuất hiện đợt cấp của LBĐHT điểm SLICC

thận sự xuất hiện của đợt cấp thận lupus Định lượng khaacuteng thể

trong caacutec lần khaacutem coacute ghi nhận đợt cấp mới xuất hiện của bệnh hoặc

8

caacutec lần khaacutem được thực hiện trong vograveng 2 thaacuteng sau khi người bệnh

ra đatilde khỏi đợt cấp vagrave lần khaacutem cuối cugraveng Đaacutenh giaacute điểm SLEDAI

vagrave mức độ hoạt động bệnh ở caacutec lần khaacutem coacute xeacutet nghiệm khaacuteng thể

2242 Nhoacutem chứng 2 nhoacutem chứng được tiến hagravenh xeacutet nghiệm 4

loại khaacuteng thể tương tự nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT ở lần khaacutem 1

225 Địa điểm vagrave phƣơng phaacutep tiến hagravenh caacutec xeacutet nghiệm CLS

2251 Caacutec xeacutet nghiệm cận lacircm sagraveng thocircng thường được thực hiện

tại caacutec khoa phograveng tương ứng của Bệnh viện Bạch Mai

2252 Xeacutet nghiệm caacutec tự khaacuteng thể

a Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) vagrave khaacuteng dsDNA được định lượng

bằng kỹ thuật ELISA trecircn maacutey baacuten tự động Imarkreg của Hatildeng BIO-

RAD (kit của Hatildeng DRG) Địa điểm thực hiện phograveng xeacutet nghiệm

miễn dịch Trung tacircm Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng BV Bạch Mai

b Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng nucleosome được phaacutet hiện vagrave

định lượng bằng kỹ thuật ELISA trecircn maacutey tự động Alegriareg của

Hatildeng Orgentec (Đức) sử dụng kit của Hatildeng Orgentec Địa điểm

thực hiện tại Khoa Xeacutet nghiệm BV Đại học Y Hagrave Nội

226 Caacutec tiecircu chuẩn đaacutenh giaacute đƣợc sử dụng trong nghiecircn cứu

2261 Đaacutenh giaacute caacutec biểu hiện của bệnh LBĐHT dựa theo caacutec

tiecircu chuẩn lacircm sagraveng của SLICC 2012

2262 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của bệnh dựa theo tiecircu chuẩn

đaacutenh giaacute của cocircng cụ SELENA-SLEDAI

2263 Đaacutenh giaacute đợt cấp của LBĐHT Dựa vagraveo định nghĩa sử dụng

trong nghiecircn cứu SELENA

2264 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của tổn thương thận lupus

dựa vagraveo chỉ số hoạt động thận của SLICC năm 2008

2265 Đaacutenh giaacute đợt cấp tổn thương thận lupus dựa theo tiecircu

chuẩn của EULAR năm 2009

9

227 Sai số vagrave caacutech khắc phục sai số khắc phục caacutec sai số bằng

caacutech khai thaacutec kỹ triệu chứng lacircm sagraveng tiền sử kiểm tra vagrave đaacutenh giaacute

lại caacutec chỉ số hoạt động bệnh lagravem sạch số liệu trước khi xử lyacute

228 Xử lyacute số liệu Caacutec số liệu nghiecircn cứu được xử lyacute bằng phần

mềm toaacuten thống kecirc MEDCALC 140

229 Đạo đức của nghiecircn cứu

Nghiecircn cứu được tiến hagravenh tại caacutec cơ sở y tế coacute uy tiacuten với sự

đồng yacute của latildenh đạo caacutec đơn vị Đacircy lagrave nghiecircn cứu mocirc tả khocircng coacute

can thiệp tất cả caacutec đối tượng nghiecircn cứu đều tự nguyện tham gia

Caacutec số liệu thu được chỉ phục vụ cho mục điacutech nghiecircn cứu vagrave chăm

soacutec sức khỏe người bệnh khocircng phục vụ cho caacutec mục điacutech khaacutec

Chƣơng 3 KẾT QUẢ NGHIEcircN CỨU

31 Đặc điểm chung của caacutec đối tƣợng nghiecircn cứu

Bảng 31 Đặc điểm về tuổi vagrave giới

Nhoacutem nghiecircn cứu n Tuổi (X ) Tỷ lệ nữ nam

Nhoacutem LBĐHT 128 311 946 1322

Nhoacutem chứng bệnh 39 4305 17 333

Nhoacutem chứng khỏe 30 3163 1357 14

p 000036

04

0011

074

Nhoacutem LBĐHT so với nhoacutem chứng bệnh

Nhoacutem LBĐHT so với nhoacutem chứng khỏe

Tuổi trung bigravenh của nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lagrave 311 946

thấp hơn so với nhoacutem chứng bệnh (p = 000036) nhưng khocircng khaacutec

biệt so với nhoacutem chứng khỏe mạnh (p = 04) Tỷ lệ nữnam ở nhoacutem

LBĐHT lagrave 1322 tương đương nhoacutem chứng khỏe mạnh (p = 074)

nhưng cao hơn so với nhoacutem chứng bệnh (p = 0011)

Bảng 32 Phacircn bố theo nhoacutem tuổi của nhoacutem LBĐHT

Nhoacutem tuổi 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Tổng

10

n 1 67 52 7 1 128

Tỷ lệ 08 523 406 55 08 100

Caacutec bệnh nhacircn phần lớn gặp trong nhoacutem tuổi 20 ndash 30 (437)

vagrave 31 ndash 40 (336) thấp nhất lagrave ở nhoacutem gt 50 tuổi (47) Phacircn bố

caacutec nhoacutem tuổi khocircng coacute sự khaacutec biệt giữa 2 giới với p = 051

Bảng 33 Phacircn bố bệnh nhacircn LBĐHT theo thời gian mắc bệnh

Khoảng thời

gian (năm) Số lƣợng Tỷ lệ ()

Thời gian

trung bigravenh

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

TỔNG SỐ 128 100 517 37

Thời gian mắc bệnh của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT gặp nhiều

nhất trong khoảng 2 ndash 5 năm (516) vagrave 6 ndash 10 năm (25) Thời

gian mắc bệnh trung bigravenh lagrave 517 37 (năm)

Bảng 34 Phacircn bố bệnh nhacircn LBĐHT theo tuổi khởi phaacutet bệnh

Nhoacutem tuổi Số lƣợng Tỷ lệ () Tuổi trung bigravenh

15 14 109 1271 23

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

TỔNG SỐ 128 100 2593 974

Phần lớn bệnh nhacircn khởi phaacutet bệnh ở độ tuổi 16 ndash 25 (43) vagrave

26 ndash 35 (281) Số bệnh nhacircn khởi phaacutet bệnh sau 45 tuổi chỉ chiếm

11

39 Tuổi phaacutet bệnh trung bigravenh của caacutec bệnh nhacircn lagrave 2593 974

Tiền sử mắc LBĐHT của người thacircn 6128 bệnh nhacircn

LBĐHT coacute người thacircn trong gia đigravenh (cha mẹ anh chị em ruột)

cugraveng mắc LBĐHT chiếm tỷ lệ 469

12

Bảng 35 Một số biểu hiện lacircm sagraveng ở thời điểm đầu nghiecircn cứu

Tỷ lệ gặp cao nhất lagrave caacutec biểu hiện giảm bổ thể (622) rụng

toacutec (531) vagrave tổn thương thận (453) Iacutet gặp nhất lagrave caacutec biểu hiện

viecircm thanh mạc tan maacuteu (23) vagrave tổn thương thần kinh (31)

Bảng 36 Mức độ hoạt động của LBĐHT

TT Mức độ hoạt động Số lƣợng Tỷ lệ ()

1 Ổn định 15 117

2 Hoạt động nhẹ 57 445

3 Hoạt động trung bigravenh 37 289

4 Hoạt động mạnh 19 148

5 Đợt cấp LBĐHT 51 398

6 Điểm SLEDAI (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Điểm SLICC thận (X ) 312 42 (0 - 15)

TT Tiecircu chuẩn n Tỷ lệ ()

1 Caacutec tổn thương da lupus cấp baacuten cấp 49 383

2 Caacutec tổn thương da lupus mạn tiacutenh 21 164

3 Loeacutet niecircm mạc 9 7

4 Rụng toacutec 68 531

5 Biểu hiện khớp 45 352

6 Viecircm thanh mạc 3 23

7 Tổn thương thận 58 453

8 Tổn thương thần kinh 4 31

9 Thiếu maacuteu tan maacuteu 3 23

10 Giảm bạch cầu 42 328

11 Giảm tiểu cầu 5 39

12 Giảm bổ thể 79 622

13

Ở thời điểm khởi đầu nghiecircn cứu phần lớn bệnh nhacircn coacute bệnh

hoạt động ở mức độ nhẹ vagrave trung bigravenh (lần lượt chiếm 445 vagrave

289) Điểm SLEDAI dao động khaacute lớn trong khoảng 0 ndash 41

(trung bigravenh lagrave 661 62) Tỷ lệ bệnh nhacircn coacute đợt cấp LBĐHT lagrave

398 Điểm SLICC thận lupus trung bigravenh lagrave 312 42

32 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của

caacutec tự khaacuteng thể

Bảng 37 Tỷ lệ dương tiacutenh của tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Nhoacutem chứng

bệnh

(n = 39)

Nhoacutem chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN 859 5385 67 3333

Khaacuteng dsDNA 641 256 67 435

Khaacuteng Nucl 813 256 0 145

Khaacuteng C1q 25 0 0 0

Tỷ lệ dương tiacutenh của caacutec khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh nhacircn

LBĐHT theo thứ tự KTKN (859) gt khaacuteng Nucl (813) gt khaacuteng

dsDNA (641) gt khaacuteng C1q (25) tất cả đều cao hơn rotilde rệt so

với caacutec nhoacutem chứng với p lt 0005

Bảng 38 Nồng độ trung bigravenh của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Chứng

bệnh

(n = 39)

Chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Khaacuteng dsDNA (IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

Khaacuteng Nucl (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Khaacuteng C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

14

Nồng độ trung bigravenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 945 1385 (IUml) vagrave 3221 6034

(IUml) đều cao hơn caacutec nhoacutem chứng với p lt 00001

Bảng 39 Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 8594 6667 8271 7187

Khaacuteng dsDNA 6406 9565 9647 5863

Khaacuteng Nucl 8125 9855 9905 7391

Khaacuteng C1q 25 100 100 4182

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute độ đặc hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương

tiacutenh với LBĐHT tương đương KT khaacuteng dsDNA nhưng độ nhạy vagrave

giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh đều cao hơn Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh cao nhất trong 4 khaacuteng thể trong

khi đoacute KTKN coacute độ nhạy cao nhất nhưng độ đặc hiệu lagrave thấp nhất

Bảng 310 Giaacute trị chẩn đoaacuten của caacutec khaacuteng thể qua đường cong ROC

Khaacuteng thể (AUC) KTKN

(0716)

Khaacuteng

dsDNA

(089)

Khaacuteng

C1q

(0676)

Khaacuteng

Nucl

(0911)

KTKN (0716) p=00001 p=044 plt0001

Khaacuteng dsDNA (089) p=00001 plt0001 p=044

Khaacuteng C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

Khaacuteng Nucl (0911) plt0001 p=044 plt0001

Caacutec khaacuteng thể khaacuteng Nucl khaacuteng dsDNA KTKN vagrave khaacuteng

C1q lần lượt coacute giaacute trị rất tốt tốt khaacute tốt vagrave iacutet giaacute trị trong chẩn đoaacuten

15

LBĐHT Diện tiacutech dưới đường cong ROC (AUC) của caacutec KT khaacuteng

Nucl vagrave khaacuteng dsDNA đều cao hơn coacute yacute nghĩa thống kecirc so với

KTKN vagrave khaacuteng C1q

33 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Bảng 311 Liecircn quan giữa KTKN với caacutec biểu hiện của LBĐHT

Nhoacutem triệu

chứng

KTKN KT khaacuteng

dsDNA

KT khaacuteng

C1q

KT khaacuteng

Nucl

OR p OR p OR p OR p

Tổn thương da

lupus cấp baacuten

cấp

311 007 258 00056 082 055 238 008

Tổn thương da

lupus mạn tiacutenh 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Loeacutet niecircm mạc 057 04 055 026 121 074 291 031

Rụng toacutec 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Biểu hiện khớp 166 025 118 055 142 021 179 017

Viecircm thanh mạc 106 097 129 083 12 088 143 081

Tổn thương

thận 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Tổn thương

thần kinh 088 091 025 01 039 039 025 008

Tan maacuteu 044 048 064 066 026 037 168 066

Giảm BC 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Giảm TC 149 071 3 016 446 002 204 05

Giảm bổ thể 1006 lt00001 327 lt00001 372 lt00001 1611 lt0001

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute

16

liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn

quan với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp tổn thương

da lupus mạn tiacutenh giảm BC vagrave giảm bổ thể Khaacuteng thể khaacuteng C1q

dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng

toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan

với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Bảng 312 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể ở bệnh nhacircn LBĐHT

Khaacuteng thể Tỷ lệ (+) OR p

KTKN (+)

Khaacuteng dsDNA 6932 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3227 393 0012

Khaacuteng Nucl 8924 1089 lt00001

Khaacuteng dsDNA

(+)

KTKN 9943 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3714 274 00005

Khaacuteng Nucl 9543 1144 lt00001

Khaacuteng C1q (+)

Khaacuteng dsDNA 7647 274 00005

KTKN 9529 393 0012

Khaacuteng Nucl 9412 43 0003

Khaacuteng Nucl (+)

KTKN 9333 1089 lt00001

Khaacuteng C1q 3333 43 0003

Khaacuteng dsDNA 6958 1144 lt00001

Sự dương tiacutenh của caacutec tự khaacuteng thể đều coacute mối liecircn quan thuận

coacute yacute nghĩa thống kecirc với nhau (p lt 005) trong đoacute mối liecircn quan rotilde

rệt nhất lagrave giữa 3 khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng Nucl vagrave KTKN

17

Bảng 313 Liecircn quan giữa tự khaacuteng thể với độ hoạt động của bệnh

Khaacuteng thể

Mức độ hoạt động của LBĐHT p

Mạnh

(n = 36) (I)

Trung bigravenh

(n = 67)(II)

Nhẹổn

(n = 185)(III) I vagrave II II vagrave III

KTKN 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Khaacuteng

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Khaacuteng

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

Khaacuteng

Nucl

100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt0000

1

So với nhoacutem bệnh hoạt động trung bigravenh tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh cao hơn rotilde rệt với p =

00025 Nồng độ trung bigravenh của khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave KT

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh đều cao hơn rotilde rệt Tỷ lệ

(+) vagrave nồng độ trung bigravenh của 4 khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh hoạt động

trung bigravenh đều cao hơn so với nhoacutem bệnh hoạt động nhẹ ổn định

Bảng 314 Tương quan giữa nồng độ khaacuteng thể với điểm SLEDAI vagrave

điểm SLICC thận

Khaacuteng thể SLEDAI SLICC thận

r p r p

KTKN 0306 lt00001 0143 lt0013

Khaacuteng dsDNA 056 lt00001 0216 00002

Khaacuteng C1q 0433 lt00001 0399 lt00001

Khaacuteng Nucl 0648 lt00001 0348 00082

18

Nồng độ KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA tương quan thuận

chặt chẽ nhất với điểm SLEDAI (p lt 0001) Nồng độ KT khaacuteng

C1q tương quan chặt chẽ nhất với điểm SLICC thận (r = 0399)

Bảng 315 Thay đổi nồng độ caacutec khaacuteng thể sau đợt cấp

Khaacuteng thể Tỷ lệ

giảm

Khaacutec biệt

trung bigravenh

Test t

gheacutep cặp p

KTKN (OD) 625 -034 -143 016

Khaacuteng dsDNA (IUml) 6458 -19949 -1793 008

Khaacuteng C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

Khaacuteng Nucl (IUml) 8333 -47509 -39 00003

Với 48 đợt cấp được theo dotildei nồng độ trung bigravenh của caacutec KT

khaacuteng C1q (p = 0037) vagrave khaacuteng Nucl (p = 00003) sau đợt cấp giảm

coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Bảng 316 Giaacute trị dự đoaacuten đợt cấp LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 9759 6714 3227 9459

Khaacuteng dsDNA 759 4537 36 823

Khaacuteng C1q 5783 8195 5647 8276

Khaacuteng Nucl 9759 2244 3375 9583

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng C1q 4819 878 6154 8072

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng Nucl 759 4927 3772 8347

Khaacuteng Nucl + Khaacuteng C1q 5783 8439 60 8317

Trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT KTKN vagrave khaacuteng Nucl đều coacute

độ nhạy cao vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh cao gt 94 nhưng độ đặc hiệu

khaacute thấp Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu cao nhất (8195)

đặc biệt khi dương tiacutenh đồng thời với KT khaacuteng dsDNA (878)

19

Chƣơng 4 BAgraveN LUẬN

41 Đặc điểm của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT

411 Phacircn bố về tuổi vagrave giới tỷ lệ bệnh nhacircn nữ chiếm tới

9297 với tuổi trung bigravenh lagrave 311 946 trong đoacute phần lớn thuộc

nhoacutem tuổi từ 16 ndash 45 (929) Kết quả nagravey hoagraven toagraven phugrave hợp với

những kết quả nghiecircn cứu trước đacircy cho thấy đặc điểm dịch tễ học

cơ bản của LBĐHT lagrave thường xảy ra ở phụ nữ trong độ tuổi sinh đẻ

412 Về tuổi khởi phaacutet bệnh phần lớn bệnh nhacircn LBĐHT

khởi phaacutet bệnh trong giai đoạn 15 - 45 tuổi (852) tuổi khởi phaacutet

bệnh trung bigravenh lagrave 2593 974 Khaacute nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học

trecircn qui mocirc lớn cho thấy LBĐHT thường coacute xu hướng khởi phaacutet ở

nữ giới trong nhoacutem tuổi từ 15 - 45 giai đoạn coacute sự hoạt động mạnh

mẽ nhất của caacutec tuyến nội tiết hướng sinh dục nữ

413 Tiền sử gia đigravenh coacute ngƣời mắc LBĐHT 469 số

bệnh nhacircn LBĐHT coacute iacutet nhất một người thacircn trong gia đigravenh cugraveng

mắc bệnh Nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học đatilde cho thấy tỷ lệ mắc

LBĐHT ở những người thacircn của người bệnh thường cao gấp khoảng

10 - 20 lần so với tỷ lệ mắc chung trong cộng đồng (4 - 12) cho

thấy vai trograve của yếu tố di truyền trong cơ chế bệnh sinh của LBĐHT

414 Caacutec biểu hiện của LBĐHT Caacutec biểu hiện bệnh gặp

nhiều nhất lagrave rụng toacutec - 531 tổn thương thận - 453 tổn thương

da lupus cấp baacuten cấp - 383 giảm bạch cầu - 382 vagrave giảm bổ

thể - 622 Những kết quả nagravey khaacute tương đồng với nghiecircn cứu của

nhiều taacutec giả trong vagrave ngoagravei nước tuy nhiecircn tỷ lệ viecircm thanh mạc

tổn thương thần kinh vagrave giảm tiểu cầu gặp khaacute thấp nguyecircn nhacircn coacute

thể do sự khaacutec nhau trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu vagrave sự

khaacutec biệt về đặc điểm lacircm sagraveng của LBĐHT giữa caacutec chủng tộc

20

42 Về tỷ lệ dƣơng tiacutenh vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự

khaacuteng thể

421 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN)

Về tỷ lệ dương tiacutenh 859 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute KTKN

dương tiacutenh ở lần khaacutem 1 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ

dương tiacutenh của KTKN ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute sự dao động khaacute lớn

trong khoảng 60 ndash 100 nguyecircn nhacircn coacute thể lagrave do sự khaacutec biệt

trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu thiết kế nghiecircn cứu kỹ

thuật xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể sự

đảo chiều huyết thanh của KTKN

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm

tiacutenh của KTKN lần lượt lagrave 8594 vagrave 7231 khaacute thấp so với caacutec

kết quả nghiecircn cứu trước đacircy nguyecircn nhacircn coacute thể do nhoacutem bệnh

nhacircn nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute tỷ lệ KTKN acircm tiacutenh khaacute cao

(141) sự khaacutec biệt về caacutech thức lựa chọn vagrave đặc điểm của nhoacutem

chứng Độ đặc hiệu của KTKN với LBĐHT lagrave khaacute thấp (4615)

khi sử dụng nhoacutem chứng mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec nguyecircn nhacircn lagrave

do KTKN coacute thể xuất hiện trong nhiều bệnh lyacute tự miễn khaacutec

422 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA

Về tỷ lệ dương tiacutenh bệnh nhacircn LBĐHT 641 số bệnh nhacircn

LBĐHT trong nghiecircn cứu coacute KT khaacuteng dsDNA dương tiacutenh nằm

trong dải biến thiecircn 37 - 85 của caacutec kết quả nghiecircn cứu trước đacircy

Caacutec yếu tố coacute ảnh hưởng rotilde rệt nhất đến tỷ lệ nagravey lagrave mức độ hoạt

động vagrave tổn thương nội tạng của caacutec đối tượng nghiecircn cứu kỹ thuật

xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ đặc hiệu của KT khaacuteng

dsDNA trong chẩn đoaacuten LBĐHT ở nghiecircn cứu nagravey lagrave 9333 khi sử

dụng nhoacutem chứng khỏe mạnh vagrave 9744 khi sử dụng nhoacutem chứng

21

mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec tức lagrave hoagraven toagraven phugrave hợp với caacutec kết quả

nghiecircn cứu trước đacircy (95 ndash 100) Traacutei với độ đặc hiệu độ nhạy của

KT khaacuteng dsDNA với LBĐHT thường khocircng cao vagrave coacute khoảng dao

động khaacute lớn (13 - 86) Nguyecircn nhacircn coacute thể do tiacutenh chất dao động

thường xuyecircn của khaacuteng thể nagravey trong quaacute trigravenh diễn biến bệnh vagrave

độ nhạy khaacutec nhau của caacutec kỹ thuật xeacutet nghiệm miễn dịch

423 Khaacuteng thể khaacuteng C1q

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở bệnh nhacircn LBĐHT dao động trong khoảng 15 ndash

63 theo caacutec nghiecircn cứu trước đacircy kết quả của chuacuteng tocirci lagrave 25 ở

lần khaacutem 1 Trong 3 nghiecircn cứu coacute cỡ mẫu lớn nhất của Julkunen H

(2012) Mok CC (2010) vagrave Orbai AM (2015) tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q đều tương đối thấp vagrave iacutet coacute sự khaacutec biệt

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT KT khaacuteng C1q coacute giaacute trị keacutem

nhất trong chẩn đoaacuten vagrave phacircn loại LBĐHT với diện tiacutech dưới đường

cong ROC lagrave 0676 vagrave độ nhạy chỉ lagrave 25 Tỷ lệ dương tiacutenh thấp vagrave

dao động thường xuyecircn ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute thể lagrave nguyecircn nhacircn

chiacutenh lagravem giảm độ nhạy của khaacuteng thể nagravey trong chẩn đoaacuten bệnh

424 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome (KT khaacuteng Nucl )

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT Tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT trong nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci

lagrave 813 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ nagravey coacute khoảng dao

động rộng từ 45 đến 100 nguyecircn nhacircn lagrave do sự khaacutec biệt của caacutec

đối tượng nghiecircn cứu về chủng tộc vagrave mức độ hoạt động bệnh

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT nhiều nghiecircn cứu đatilde cho thấy độ

đặc hiệu rất cao của KT khaacuteng Nucl với LBĐHT (90 ndash 100) tương

đồng với kết quả thu được của chuacuteng tocirci lagrave 987 Nguyecircn nhacircn coacute

thể do nucleosome lagrave tự khaacuteng nguyecircn coacute vai trograve quan trọng trong cơ

22

chế bệnh sinh của LBĐHT Độ nhạy của KT khaacuteng Nucl với

LBĐHT trong nghiecircn cứu nagravey lagrave 8125 cao hơn so với KT khaacuteng

dsDNA (6406)

43 Về liecircn quan giữa caacutec khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

431 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh (ge 12

OD) ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với sự xuất

hiện của giảm bổ thể vagrave caacutec tự khaacuteng thể khaacutec Mối liecircn quan giữa

khaacuteng thể nagravey với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của

LBĐHT trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy lagrave khocircng rotilde rệt do thiếu

những bằng chứng đaacuteng tin cậy

432 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với caacutec biểu

hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp hoặc mạn tiacutenh giảm bạch cầu

vagrave giảm bổ thể nhưng khocircng liecircn quan với tổn thương thận lupus

Nồng độ vagrave tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng dsDNA ở nhoacutem bệnh

nhacircn trong đợt cấp đều cao hơn so với nhoacutem ngoagravei đợt cấp tuy nhiecircn

khaacuteng thể nagravey coacute liecircn quan khocircng hằng định với cả hoạt tiacutenh chung

của LBĐHT vagrave tổn thương thận đặc biệt lagrave với đợt cấp của bệnh

433 Khaacuteng thể khaacuteng C1q khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh ở

bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan rotilde rệt với sự xuất hiện của tổn thương

thận vagrave giảm bổ thể Độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey trong dự baacuteo tổn

thương thận lupus cao hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại vagrave nồng độ của noacute

tương quan nghịch khaacute chặt với cả bổ thể C3 vagrave C4 (p lt 00001) Tỷ

lệ vagrave nồng độ trung bigravenh của KT khaacuteng C1q đều coacute xu hướng tăng

dần theo mức độ hoạt động của bệnh Tương quan giữa nồng độ KT

khaacuteng C1q với điểm SLICC thận vagrave độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey

trong dự baacuteo đợt cấp thận lupus cũng tốt hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại

23

434 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện tổn thương

da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận giảm BC vagrave giảm bổ thể Độ

nhạy trong dự baacuteo tổn thương thận lupus của KT khaacuteng Nucl cao

hơn so với caacutec khaacuteng thể cograven lại Tương quan với nồng độ bổ thể vagrave

điểm SLEDAI của khaacuteng thể nagravey cũng chặt chẽ hơn caacutec khaacuteng thể

cograven lại

KẾT LUẬN

Qua nghiecircn cứu 128 bệnh nhacircn LBĐHT với nhoacutem chứng gồm

39 người mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec vagrave 30 người khỏe mạnh chuacuteng

tocirci xin đưa ra một số kết luận sau

1 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten của một

số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể

Tỷ lệ dương tiacutenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 855 641 25 vagrave

813 tất cả đều cao hơn rotilde rệt so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở 587 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute

KT khaacuteng dsDNA acircm tiacutenh

Nồng độ trung bigravenh của caacutec KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng

C1q vagrave khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 3221 6034 (IUml) vagrave 945 1385

(IUml) tất cả đều cao hơn so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn coacute độ nhạy cao (8594) nhưng độ đặc

hiệu thấp (6667) với LBĐHT Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh 100 với LBĐHT nhưng độ nhạy

rất thấp (25)

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 3: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

DANH MỤC CAacuteC BAgraveI BAacuteO ĐAtilde ĐƯỢC COcircNG BỐ

LIEcircN QUAN ĐẾN ĐỀ TAgraveI

1 Nguyễn Hữu Trường (2014) Nghiecircn cứu mối liecircn quan

giữa nồng độ C3 C4 huyết tương với một số đặc điểm

lacircm sagraveng cận lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của bệnh ở

bệnh nhacircn lupus ban đỏ hệ thống Tạp chiacute Y học Quacircn sự

số 302 tr 26 - 30

2 Nguyễn Hữu Trường (2014) Tương quan giữa nồng độ

khaacuteng thể khaacuteng dsDNA với mức độ hoạt động của bệnh

lupus ban đỏ hệ thống Tạp chiacute Y học Thực hagravenh số 10

(937) tr 2 - 5

3 Nguyễn Hữu Trường (2015) Liecircn quan giữa khaacuteng thể

khaacuteng C1q với caacutec yếu tố bổ thể C3 C4 vagrave biểu hiện lacircm

sagraveng của bệnh Lupus ban đỏ hệ thống Tạp chiacute Y học Lacircm

sagraveng số 90 tr 54- 61

4 Nguyễn Hữu Trường (2015) Khaacuteng thể khaacuteng

nucleosome ở bệnh nhacircn Lupus ban đỏ hệ thống vagrave mối

liecircn quan với mức độ hoạt động của bệnh Tạp chiacute Y học

Việt Nam tập 427 số 1 (2) tr 9 - 14

5 Nguyễn Quang Tugraveng Nguyễn Hữu Trường (2015)

Nghiecircn cứu mối liecircn quan giữa tigravenh trạng giảm tiểu cầu

với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của bệnh

Lupus ban đỏ hệ thống Tạp chiacute Y học Việt Nam tập 427

số 1 (2) tr 50 - 55

1

CAacuteC CHỮ VIẾT TẮT

ACR American College of Rheumatology (Hội Khớp học Mỹ)

AUC Area under the ROC curve (Diện tiacutech dưới đường cong ROC)

CLS cận lacircm sagraveng

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

KT khaacuteng thể

KTKN khaacuteng thể khaacuteng nhacircn

LBĐHT Lupus ban đỏ hệ thống

Nucl nucleosome

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

MỞ ĐẦU

1 Tiacutenh cấp thiết của đề tagravei

Lupus ban đỏ hệ thống (LBĐHT) lagrave một trong những bệnh tự

miễn dịch hệ thống thường gặp nhất với độ lưu hagravenh ước tiacutenh

khoảng 20 - 150 ca 100000 dacircn riecircng ở phụ nữ lagrave khoảng 164 - 406

ca 100000 dacircn Bệnh đặc trưng bởi sự xuất hiện của caacutec tế bagraveo

lympho B vagrave T tự phản ứng chịu traacutech nhiệm sản xuất ra hagraveng loạt

tự khaacuteng thể bệnh lyacute nhằm vagraveo caacutec khaacuteng nguyecircn điacutech ở trong nhacircn

bagraveo tương magraveng tế bagraveo huyết tương hoặc caacutec protein nền Cho đến

nay đatilde coacute gần 180 loại tự khaacuteng thể liecircn quan đến LBĐHT được xaacutec

định trong đoacute nhiều loại được chứng minh coacute vai trograve rất quan trọng

đối với sự higravenh thagravenh vagrave tiến triển của bệnh lagrave yếu tố khởi phaacutet phản

ứng viecircm tự miễn dẫn đến tổn thương caacutec hệ cơ quan Trecircn lacircm

sagraveng nhiều loại tự khaacuteng thể đatilde thể hiện khaacute rotilde vai trograve trong chẩn

đoaacuten đaacutenh giaacute mức độ hoạt động vagrave tiecircn lượng đối với LBĐHT Sự

xuất hiện của caacutec tự khaacuteng thể đồng thời với caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng

gợi yacute sẽ hỗ trợ rất nhiều cho việc chẩn đoaacuten xaacutec định bệnh Becircn cạnh

4 loại tự khaacuteng thể kinh điển đatilde được đưa vagraveo caacutec tiecircu chuẩn phacircn

loại bệnh của Hội Khớp học Mỹ (ACR-1997) vagrave Nhoacutem Hợp taacutec

Quốc tế về LBĐHT (SLICC- 2012) một số tự khaacuteng thể mới như

2

khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng C1q hellip cũng đều cho thấy độ

nhạy vagrave độ đặc hiệu khaacute cao trong chẩn đoaacuten LBĐHT vagrave caacutec tổn

thương nội tạng của bệnh Becircn cạnh đoacute một số loại khaacuteng thể đatilde

được chứng minh coacute mối liecircn quan khaacute rotilde rệt với mức độ hoạt động

của bệnh vagrave một số tổn thương nội tạng của LBĐHT như caacutec khaacuteng

thể khaacuteng dsDNA khaacuteng nucleosome khaacuteng C1qhellip Sự xuất hiện

vagrave biến đổi nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể nagravey phản aacutenh khaacute tốt sự

dao động hoạt tiacutenh vagrave coacute thể giuacutep dự baacuteo trước caacutec đợt cấp của bệnh

Do đoacute nhiều loại tự khaacuteng thể đatilde được sử dụng rộng ratildei trong thực

hagravenh lacircm sagraveng như những cocircng cụ giuacutep hỗ trợ việc đaacutenh giaacute vagrave theo

dotildei mức độ hoạt động của LBĐHT một caacutech nhanh choacuteng vagrave tiện lợi

Việc coacute được những hiểu biết đầy đủ hơn về đặc điểm của caacutec

tự khaacuteng thể trong LBĐHT coacute thể giuacutep caacutec thagravey thuốc coacute thecircm

những cocircng cụ coacute tiacutenh khả thi vagrave đủ độ tin cậy để chẩn đoaacuten đaacutenh

giaacute vagrave theo dotildei mức độ hoạt động của bệnh Vigrave lyacute do nagravey tocirci quyết

định lựa chọn đề tagravei ldquoNghiecircn cứu mối tương quan giữa mức độ hoạt

động của bệnh với một số tự khaacuteng thể trong lupus ban đỏ hệ thốngrdquo

nhằm caacutec mục tiecircu sau

1 Xaacutec định tỷ lệ dương tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten bệnh

lupus ban đỏ hệ thống của caacutec tự khaacuteng thể khaacuteng nhacircn khaacuteng dsDNA

khaacuteng C1q vagrave khaacuteng nucleosome

2 Khảo saacutet mối liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể nagravey với một số

biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của bệnh lupus ban đỏ hệ

thống

2 Những đoacuteng goacutep mới của đề tagravei

Đacircy lagrave cocircng trigravenh đầu tiecircn trong nước nghiecircn cứu giaacute trị chẩn

đoaacuten LBĐHT vagrave tổn thương thận lupus của caacutec khaacuteng thể mới lagrave

khaacuteng thể khaacuteng nucleosome vagrave khaacuteng C1q coacute so saacutenh với hai loại

3

khaacuteng thể cổ điển lagrave khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) vagrave khaacuteng

dsDNA nhằm tigravem kiếm những cocircng cụ tối ưu cho việc chẩn đoaacuten

bệnh Kết quả thu được của nghiecircn cứu đatilde cho thấy giaacute trị rất tốt của

khaacuteng thể khaacuteng nucleosome trong chẩn đoaacuten LBĐHT vagrave độ đặc

hiệu cao của khaacuteng thể khaacuteng C1q với tổn thương thận lupus

Đacircy cũng lagrave nghiecircn cứu theo dotildei dọc đầu tiecircn ở Việt Nam đaacutenh

giaacute mối liecircn quan giữa sự dương tiacutenh vagrave nồng độ của KTKN khaacuteng

dsDNA khaacuteng C1q vagrave khaacuteng nucleosome với mức độ hoạt động của

bệnh LBĐHT vagrave tổn thương thận lupus Kết quả thu được của nghiecircn

cứu đatilde cho thấy KT khaacuteng nucleosome coacute liecircn quan với mức độ hoạt

động của bệnh chặt chẽ hơn vagrave giaacute trị dự baacuteo đợt cấp bệnh tốt hơn so

với KT khaacuteng dsDNA Khaacuteng thể khaacuteng C1q cũng coacute mối liecircn quan

với sự xuất hiện vagrave mức độ hoạt động của tổn thương thận lupus chặt

chẽ hơn so với KT khaacuteng dsDNA

3 Bố cục của luận aacuten

Luận aacuten gồm 144 trang gồm Đặt vấn đề (2 trang) tổng quan

tagravei liệu (42 trang) đối tượng vagrave phương phaacutep nghiecircn cứu (17 trang)

kết quả nghiecircn cứu (30 trang) bagraven luận (50 trang) kết luận (2 trang)

vagrave kiến nghị (1 trang)

Toagraven bộ luận aacuten coacute 48 bảng 15 higravenh sơ đồ vagrave biểu đồ

Tagravei liệu tham khảo bao gồm 191 tagravei liệu (9 tiếng Việt vagrave 182

tiếng Anh)

Chƣơng 1 TỔNG QUAN TAgraveI LIỆU

11 Vagravei neacutet về cơ chế điều hogravea vagrave tiacutenh chất sinh bệnh học của caacutec

tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Caacutec tế bagraveo B tự phản ứng bị hoạt hoacutea khi gặp caacutec tự khaacuteng

nguyecircn đặc hiệu với sự coacute mặt của caacutec tế bagraveo T hỗ trợ Sau đoacute

chuacuteng trải qua quaacute trigravenh chuyển đổi isotype siecircu đột biến dạng cơ

4

thể vagrave chọn lọc dograveng để tạo ra caacutec tế bagraveo B hiệu ứng coacute chức năng

giải phoacuteng caacutec tự khaacuteng thể IgG vagraveo hệ tuần hoagraven Caacutec khaacuteng thể

nagravey tạo thagravenh PHMD dư thừa tiacutech tụ vagrave gacircy tổn thương viecircm tại caacutec

cơ quan

12 Tổng quan chẩn đoaacuten vagrave đaacutenh giaacute độ hoạt động của LBĐHT

121 Chẩn đoaacuten LBĐHT

Lupus ban đỏ hệ thống coacute biểu hiện lacircm sagraveng rất đa dạng nhưng

phần lớn caacutec biểu hiện lagrave khocircng đặc hiệu gacircy khoacute khăn cho việc chẩn

đoaacuten Hiện chưa coacute caacutec cocircng cụ dagravenh riecircng cho chẩn đoaacuten LBĐHT

necircn caacutec bộ tiecircu chuẩn phacircn loại bệnh của Hội Khớp học Mỹ năm

1997 (ACR 1997) vagrave Tổ chức Hợp taacutec Quốc tế về LBĐHT năm 2012

(SLICC 2012) thường được sử dụng trecircn lacircm sagraveng cho mục điacutech nagravey

122 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của LBĐHT khocircng coacute yếu tố

chỉ điểm đơn lẻ coacute thể đaacutenh giaacute chiacutenh xaacutec mức độ hoạt động của

bệnh Chưa coacute cocircng cụ đaacutenh giaacute vagrave đo lường mức độ hoạt động của

LBĐHT nagraveo được cho lagrave tối ưu để aacutep dụng trong thực tiễn

13 Yacute nghĩa lacircm sagraveng của một số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

131 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh coacute độ

nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh rất cao với LBĐHT nhưng độ đặc

hiệu thấp do coacute thể gặp trong nhiều bệnh khaacutec Khaacuteng thể nagravey coacute

mối liecircn quan khocircng rotilde rệt với mức độ hoạt động của LBĐHT

132 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng dsDNA coacute độ đặc hiệu cao

(95-100) vagrave lagrave một trong caacutec tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten LBĐHT tuy

nhiecircn độ nhạy khocircng cao vigrave noacute thường chỉ dương tiacutenh tạm thời

Khaacuteng thể nagravey coacute mối tương quan thuận khaacute rotilde với mức độ hoạt

động của bệnh KT khaacuteng dsDNA coacute độ nhạy khaacute cao trong chẩn

đoaacuten phacircn biệt giữa LBĐHT ổn định vagrave hoạt động nhưng khocircng

hằng định giữa caacutec nghiecircn cứu Theo dotildei định kỳ khaacuteng thể nagravey ở

5

bệnh nhacircn LBĐHT cho thấy sự biến đổi nồng độ của noacute coacute liecircn

quan rotilde rệt với sự xuất hiện caacutec đợt cấp của bệnh sau đoacute

133 Khaacuteng thể khaacuteng C1q được tigravem thấy trong LBĐHT vagrave nhiều

bệnh lyacute khaacutec như magravey đay viecircm mạch giảm bổ thể phugrave mạch di

truyền viecircm khớp dạng thấp hellip Khaacuteng thể nagravey coacute độ nhạy vagrave độ đặc

hiệu khocircng cao trong chẩn đoaacuten LBĐHT nhưng lagrave một trong những

khaacuteng thể coacute liecircn quan rotilde rệt nhất với tổn thương thận lupus Nồng

độ của KT khaacuteng C1q coacute mối tương quan chặt chẽ với mức độ hoạt

động của LBĐHT đặc biệt lagrave với tổn thương thận Khaacuteng thể nagravey coacute

giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh vagrave độ đặc hiệu khaacute cao với đợt cấp thận lupus

134 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute độ

nhạy dao động trong khoảng 50-90 vagrave độ đặc hiệu lagrave 90-99 trong

chẩn đoaacuten LBĐHT Caacutec nghiecircn cứu so saacutenh đối đầu giữa khaacuteng thể

nagravey vagrave KT khaacuteng dsDNA cho thấy KT khaacuteng Nucl coacute độ đặc hiệu

tương đương nhưng độ nhạy cao hơn so rotilde rệt Ngoagravei ra nồng độ KT

khaacuteng Nucl cũng coacute mối tương quan chặt chẽ với caacutec chỉ số đaacutenh giaacute

mức độ hoạt động của bệnh vagrave tổn thương thận lupus

Chƣơng 2 ĐỐI TƢỢNG VAgrave PHƢƠNG PHAacuteP

21 Đối tƣợng nghiecircn cứu

211 Nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT

Bao gồm 128 bệnh nhacircn được chẩn đoaacuten lupus ban đỏ hệ

thống theo tiecircu chuẩn SLICC 2012 theo dotildei vagrave điều trị tại Trung tacircm

Dị ứng ndash Miễn dịch Lacircm sagraveng vagrave Phograveng Quản lyacute bệnh lupus ban đỏ

hệ thống Khoa Khaacutem bệnh - Bệnh viện Bạch Mai từ thaacuteng 032014

đến thaacuteng 022016

Tiecircu chuẩn loại trừ phụ nữ coacute thai bệnh nhacircn coacute mắc kegravem

caacutec bệnh nội khoa nặng như tiểu đường suy tim suy chức năng gan

6

bệnh nhacircn bị mắc giang mai hoặc HIVAIDS bệnh nhacircn coacute mắc

kegravem caacutec bệnh tự miễn khaacutec bệnh nhacircn khocircng đồng yacute tham gia

nghiecircn cứu

212 Nhoacutem chứng

Nhoacutem chứng bệnh bao gồm 39 người mắc caacutec bệnh tự

miễn dịch khaacutec LBĐHT được chẩn đoaacuten xaacutec định vagrave điều trị tại

Trung tacircm Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng BV Bạch Mai vagrave phograveng

khaacutem chuyecircn khoa Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng khoa Khaacutem Bệnh

BV Bạch Mai từ 22016 đến 4 2016

Khocircng phacircn biệt tuổi giới nghề nghiệp trigravenh độ học vấn

nơi cư truacute

Khocircng bị suy tế bagraveo gan hoặc hoặc nhiễm HIVAIDS

Chấp nhận tham gia nghiecircn cứu

Nhoacutem chứng khỏe mạnh 30 người khỏe mạnh coacute độ tuổi

vagrave phacircn bố giới tiacutenh tương đồng với nhoacutem bệnh nhacircn nghiecircn cứu

Khocircng coacute tiền sử mắc caacutec bệnh lyacute tự miễn khocircng coacute người

thacircn thuộc caacutec thế hệ thứ nhất vagrave thứ 2 mắc caacutec bệnh lyacute tự miễn dịch

Khocircng phacircn biệt nghề nghiệp trigravenh độ học vấn nơi cư truacute

Chấp nhận tham gia nghiecircn cứu

22 Phƣơng phaacutep nghiecircn cứu

221 Phƣơng phaacutep nghiecircn cứu Mocirc tả cắt ngang + theo dotildei dọc

222 Chọn mẫu

Mẫu nghiecircn cứu được lấy theo phương phaacutep chọn mẫu thuận

tiện Caacutec đối tượng được lựa chọn theo trigravenh tự thời gian khocircng

phacircn biệt tuổi taacutec giới tiacutenh mức độ hoạt động vagrave hủy hoại vĩnh viễn

223 Cỡ mẫu

Cỡ mẫu nghiecircn cứu mocirc tả cắt ngang được tiacutenh dựa theo cocircng

thức dugraveng để ước tiacutenh một tỷ lệ của tổ chức y tế thế giới

7

trong đoacute n lagrave cỡ mẫu tối thiểu lagrave mức yacute nghĩa thống kecirc tương ứng

với khoảng tin cậy 95 = 005 Z1-2 lagrave Z score tương ứng với

mức yacute nghĩa thống kecirc mong muốn với = 005 thigrave Z1-2 = 196 p lagrave

tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng nucleosome ở bệnh nhacircn LBĐHT (p

= 0909 theo Đặng Thu Hương - Tạp chiacute Y học Thagravenh phố Hồ Chiacute

Minh 2013 tập 17 phụ bản 1 tr 294-300) q = 1 - p = 0091 d lagrave độ

chiacutenh xaacutec tuyệt đối mong muốn chọn d = 005 Từ đoacute tiacutenh được n =

1271 Nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute cỡ mẫu lagrave 128 bệnh nhacircn

224 Caacutec bƣớc tiến hagravenh nghiecircn cứu

2241 Nhoacutem bệnh nhacircn lupus ban đỏ hệ thống

Lựa chọn vagraveo danh saacutech nghiecircn cứu vagrave gắn matilde bệnh aacuten

Lần khaacutem 1 khaacutem lacircm sagraveng khai thaacutec tiền sử xeacutet nghiệm

CLS thocircng thường (định lượng urecirc creatinin glucose AST ALT

albumin cholesterol triglyceride C3 vagrave C4 bổ thể trong huyết thanh

tế bagraveo niệu trụ niệu định lượng protein niệu 24 giờhellip) định lượng

khaacuteng thể khaacuteng nhacircn khaacuteng dsDNA khaacuteng nucleosome vagrave khaacuteng

C1q phacircn tiacutech caacutec nhoacutem triệu chứng bệnh đaacutenh giaacute điểm SELENA-

SLEDAI mức độ hoạt động của bệnh sự xuất hiện đợt cấp của

bệnh Chỉ số Hoạt động Thận của SLICC 2008 đợt cấp thận lupus

Theo dotildei định kỳ caacutec bệnh nhacircn được thăm khaacutem định kỳ

hagraveng thaacuteng hoặc ngay khi coacute caacutec dấu hiệu bất thường Quaacute trigravenh

nghiecircn cứu kết thuacutec khi bệnh nhacircn được theo dotildei đủ 12 thaacuteng hoặc

khi được phaacutet hiện coacute thai hoặc bị mất theo dotildei Caacutec bước thăm

khaacutem gồm khaacutem lacircm sagraveng xeacutet nghiệm CLS thocircng thường đaacutenh giaacute

caacutec triệu chứng bệnh sự xuất hiện đợt cấp của LBĐHT điểm SLICC

thận sự xuất hiện của đợt cấp thận lupus Định lượng khaacuteng thể

trong caacutec lần khaacutem coacute ghi nhận đợt cấp mới xuất hiện của bệnh hoặc

8

caacutec lần khaacutem được thực hiện trong vograveng 2 thaacuteng sau khi người bệnh

ra đatilde khỏi đợt cấp vagrave lần khaacutem cuối cugraveng Đaacutenh giaacute điểm SLEDAI

vagrave mức độ hoạt động bệnh ở caacutec lần khaacutem coacute xeacutet nghiệm khaacuteng thể

2242 Nhoacutem chứng 2 nhoacutem chứng được tiến hagravenh xeacutet nghiệm 4

loại khaacuteng thể tương tự nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT ở lần khaacutem 1

225 Địa điểm vagrave phƣơng phaacutep tiến hagravenh caacutec xeacutet nghiệm CLS

2251 Caacutec xeacutet nghiệm cận lacircm sagraveng thocircng thường được thực hiện

tại caacutec khoa phograveng tương ứng của Bệnh viện Bạch Mai

2252 Xeacutet nghiệm caacutec tự khaacuteng thể

a Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) vagrave khaacuteng dsDNA được định lượng

bằng kỹ thuật ELISA trecircn maacutey baacuten tự động Imarkreg của Hatildeng BIO-

RAD (kit của Hatildeng DRG) Địa điểm thực hiện phograveng xeacutet nghiệm

miễn dịch Trung tacircm Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng BV Bạch Mai

b Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng nucleosome được phaacutet hiện vagrave

định lượng bằng kỹ thuật ELISA trecircn maacutey tự động Alegriareg của

Hatildeng Orgentec (Đức) sử dụng kit của Hatildeng Orgentec Địa điểm

thực hiện tại Khoa Xeacutet nghiệm BV Đại học Y Hagrave Nội

226 Caacutec tiecircu chuẩn đaacutenh giaacute đƣợc sử dụng trong nghiecircn cứu

2261 Đaacutenh giaacute caacutec biểu hiện của bệnh LBĐHT dựa theo caacutec

tiecircu chuẩn lacircm sagraveng của SLICC 2012

2262 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của bệnh dựa theo tiecircu chuẩn

đaacutenh giaacute của cocircng cụ SELENA-SLEDAI

2263 Đaacutenh giaacute đợt cấp của LBĐHT Dựa vagraveo định nghĩa sử dụng

trong nghiecircn cứu SELENA

2264 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của tổn thương thận lupus

dựa vagraveo chỉ số hoạt động thận của SLICC năm 2008

2265 Đaacutenh giaacute đợt cấp tổn thương thận lupus dựa theo tiecircu

chuẩn của EULAR năm 2009

9

227 Sai số vagrave caacutech khắc phục sai số khắc phục caacutec sai số bằng

caacutech khai thaacutec kỹ triệu chứng lacircm sagraveng tiền sử kiểm tra vagrave đaacutenh giaacute

lại caacutec chỉ số hoạt động bệnh lagravem sạch số liệu trước khi xử lyacute

228 Xử lyacute số liệu Caacutec số liệu nghiecircn cứu được xử lyacute bằng phần

mềm toaacuten thống kecirc MEDCALC 140

229 Đạo đức của nghiecircn cứu

Nghiecircn cứu được tiến hagravenh tại caacutec cơ sở y tế coacute uy tiacuten với sự

đồng yacute của latildenh đạo caacutec đơn vị Đacircy lagrave nghiecircn cứu mocirc tả khocircng coacute

can thiệp tất cả caacutec đối tượng nghiecircn cứu đều tự nguyện tham gia

Caacutec số liệu thu được chỉ phục vụ cho mục điacutech nghiecircn cứu vagrave chăm

soacutec sức khỏe người bệnh khocircng phục vụ cho caacutec mục điacutech khaacutec

Chƣơng 3 KẾT QUẢ NGHIEcircN CỨU

31 Đặc điểm chung của caacutec đối tƣợng nghiecircn cứu

Bảng 31 Đặc điểm về tuổi vagrave giới

Nhoacutem nghiecircn cứu n Tuổi (X ) Tỷ lệ nữ nam

Nhoacutem LBĐHT 128 311 946 1322

Nhoacutem chứng bệnh 39 4305 17 333

Nhoacutem chứng khỏe 30 3163 1357 14

p 000036

04

0011

074

Nhoacutem LBĐHT so với nhoacutem chứng bệnh

Nhoacutem LBĐHT so với nhoacutem chứng khỏe

Tuổi trung bigravenh của nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lagrave 311 946

thấp hơn so với nhoacutem chứng bệnh (p = 000036) nhưng khocircng khaacutec

biệt so với nhoacutem chứng khỏe mạnh (p = 04) Tỷ lệ nữnam ở nhoacutem

LBĐHT lagrave 1322 tương đương nhoacutem chứng khỏe mạnh (p = 074)

nhưng cao hơn so với nhoacutem chứng bệnh (p = 0011)

Bảng 32 Phacircn bố theo nhoacutem tuổi của nhoacutem LBĐHT

Nhoacutem tuổi 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Tổng

10

n 1 67 52 7 1 128

Tỷ lệ 08 523 406 55 08 100

Caacutec bệnh nhacircn phần lớn gặp trong nhoacutem tuổi 20 ndash 30 (437)

vagrave 31 ndash 40 (336) thấp nhất lagrave ở nhoacutem gt 50 tuổi (47) Phacircn bố

caacutec nhoacutem tuổi khocircng coacute sự khaacutec biệt giữa 2 giới với p = 051

Bảng 33 Phacircn bố bệnh nhacircn LBĐHT theo thời gian mắc bệnh

Khoảng thời

gian (năm) Số lƣợng Tỷ lệ ()

Thời gian

trung bigravenh

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

TỔNG SỐ 128 100 517 37

Thời gian mắc bệnh của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT gặp nhiều

nhất trong khoảng 2 ndash 5 năm (516) vagrave 6 ndash 10 năm (25) Thời

gian mắc bệnh trung bigravenh lagrave 517 37 (năm)

Bảng 34 Phacircn bố bệnh nhacircn LBĐHT theo tuổi khởi phaacutet bệnh

Nhoacutem tuổi Số lƣợng Tỷ lệ () Tuổi trung bigravenh

15 14 109 1271 23

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

TỔNG SỐ 128 100 2593 974

Phần lớn bệnh nhacircn khởi phaacutet bệnh ở độ tuổi 16 ndash 25 (43) vagrave

26 ndash 35 (281) Số bệnh nhacircn khởi phaacutet bệnh sau 45 tuổi chỉ chiếm

11

39 Tuổi phaacutet bệnh trung bigravenh của caacutec bệnh nhacircn lagrave 2593 974

Tiền sử mắc LBĐHT của người thacircn 6128 bệnh nhacircn

LBĐHT coacute người thacircn trong gia đigravenh (cha mẹ anh chị em ruột)

cugraveng mắc LBĐHT chiếm tỷ lệ 469

12

Bảng 35 Một số biểu hiện lacircm sagraveng ở thời điểm đầu nghiecircn cứu

Tỷ lệ gặp cao nhất lagrave caacutec biểu hiện giảm bổ thể (622) rụng

toacutec (531) vagrave tổn thương thận (453) Iacutet gặp nhất lagrave caacutec biểu hiện

viecircm thanh mạc tan maacuteu (23) vagrave tổn thương thần kinh (31)

Bảng 36 Mức độ hoạt động của LBĐHT

TT Mức độ hoạt động Số lƣợng Tỷ lệ ()

1 Ổn định 15 117

2 Hoạt động nhẹ 57 445

3 Hoạt động trung bigravenh 37 289

4 Hoạt động mạnh 19 148

5 Đợt cấp LBĐHT 51 398

6 Điểm SLEDAI (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Điểm SLICC thận (X ) 312 42 (0 - 15)

TT Tiecircu chuẩn n Tỷ lệ ()

1 Caacutec tổn thương da lupus cấp baacuten cấp 49 383

2 Caacutec tổn thương da lupus mạn tiacutenh 21 164

3 Loeacutet niecircm mạc 9 7

4 Rụng toacutec 68 531

5 Biểu hiện khớp 45 352

6 Viecircm thanh mạc 3 23

7 Tổn thương thận 58 453

8 Tổn thương thần kinh 4 31

9 Thiếu maacuteu tan maacuteu 3 23

10 Giảm bạch cầu 42 328

11 Giảm tiểu cầu 5 39

12 Giảm bổ thể 79 622

13

Ở thời điểm khởi đầu nghiecircn cứu phần lớn bệnh nhacircn coacute bệnh

hoạt động ở mức độ nhẹ vagrave trung bigravenh (lần lượt chiếm 445 vagrave

289) Điểm SLEDAI dao động khaacute lớn trong khoảng 0 ndash 41

(trung bigravenh lagrave 661 62) Tỷ lệ bệnh nhacircn coacute đợt cấp LBĐHT lagrave

398 Điểm SLICC thận lupus trung bigravenh lagrave 312 42

32 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của

caacutec tự khaacuteng thể

Bảng 37 Tỷ lệ dương tiacutenh của tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Nhoacutem chứng

bệnh

(n = 39)

Nhoacutem chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN 859 5385 67 3333

Khaacuteng dsDNA 641 256 67 435

Khaacuteng Nucl 813 256 0 145

Khaacuteng C1q 25 0 0 0

Tỷ lệ dương tiacutenh của caacutec khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh nhacircn

LBĐHT theo thứ tự KTKN (859) gt khaacuteng Nucl (813) gt khaacuteng

dsDNA (641) gt khaacuteng C1q (25) tất cả đều cao hơn rotilde rệt so

với caacutec nhoacutem chứng với p lt 0005

Bảng 38 Nồng độ trung bigravenh của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Chứng

bệnh

(n = 39)

Chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Khaacuteng dsDNA (IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

Khaacuteng Nucl (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Khaacuteng C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

14

Nồng độ trung bigravenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 945 1385 (IUml) vagrave 3221 6034

(IUml) đều cao hơn caacutec nhoacutem chứng với p lt 00001

Bảng 39 Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 8594 6667 8271 7187

Khaacuteng dsDNA 6406 9565 9647 5863

Khaacuteng Nucl 8125 9855 9905 7391

Khaacuteng C1q 25 100 100 4182

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute độ đặc hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương

tiacutenh với LBĐHT tương đương KT khaacuteng dsDNA nhưng độ nhạy vagrave

giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh đều cao hơn Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh cao nhất trong 4 khaacuteng thể trong

khi đoacute KTKN coacute độ nhạy cao nhất nhưng độ đặc hiệu lagrave thấp nhất

Bảng 310 Giaacute trị chẩn đoaacuten của caacutec khaacuteng thể qua đường cong ROC

Khaacuteng thể (AUC) KTKN

(0716)

Khaacuteng

dsDNA

(089)

Khaacuteng

C1q

(0676)

Khaacuteng

Nucl

(0911)

KTKN (0716) p=00001 p=044 plt0001

Khaacuteng dsDNA (089) p=00001 plt0001 p=044

Khaacuteng C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

Khaacuteng Nucl (0911) plt0001 p=044 plt0001

Caacutec khaacuteng thể khaacuteng Nucl khaacuteng dsDNA KTKN vagrave khaacuteng

C1q lần lượt coacute giaacute trị rất tốt tốt khaacute tốt vagrave iacutet giaacute trị trong chẩn đoaacuten

15

LBĐHT Diện tiacutech dưới đường cong ROC (AUC) của caacutec KT khaacuteng

Nucl vagrave khaacuteng dsDNA đều cao hơn coacute yacute nghĩa thống kecirc so với

KTKN vagrave khaacuteng C1q

33 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Bảng 311 Liecircn quan giữa KTKN với caacutec biểu hiện của LBĐHT

Nhoacutem triệu

chứng

KTKN KT khaacuteng

dsDNA

KT khaacuteng

C1q

KT khaacuteng

Nucl

OR p OR p OR p OR p

Tổn thương da

lupus cấp baacuten

cấp

311 007 258 00056 082 055 238 008

Tổn thương da

lupus mạn tiacutenh 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Loeacutet niecircm mạc 057 04 055 026 121 074 291 031

Rụng toacutec 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Biểu hiện khớp 166 025 118 055 142 021 179 017

Viecircm thanh mạc 106 097 129 083 12 088 143 081

Tổn thương

thận 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Tổn thương

thần kinh 088 091 025 01 039 039 025 008

Tan maacuteu 044 048 064 066 026 037 168 066

Giảm BC 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Giảm TC 149 071 3 016 446 002 204 05

Giảm bổ thể 1006 lt00001 327 lt00001 372 lt00001 1611 lt0001

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute

16

liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn

quan với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp tổn thương

da lupus mạn tiacutenh giảm BC vagrave giảm bổ thể Khaacuteng thể khaacuteng C1q

dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng

toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan

với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Bảng 312 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể ở bệnh nhacircn LBĐHT

Khaacuteng thể Tỷ lệ (+) OR p

KTKN (+)

Khaacuteng dsDNA 6932 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3227 393 0012

Khaacuteng Nucl 8924 1089 lt00001

Khaacuteng dsDNA

(+)

KTKN 9943 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3714 274 00005

Khaacuteng Nucl 9543 1144 lt00001

Khaacuteng C1q (+)

Khaacuteng dsDNA 7647 274 00005

KTKN 9529 393 0012

Khaacuteng Nucl 9412 43 0003

Khaacuteng Nucl (+)

KTKN 9333 1089 lt00001

Khaacuteng C1q 3333 43 0003

Khaacuteng dsDNA 6958 1144 lt00001

Sự dương tiacutenh của caacutec tự khaacuteng thể đều coacute mối liecircn quan thuận

coacute yacute nghĩa thống kecirc với nhau (p lt 005) trong đoacute mối liecircn quan rotilde

rệt nhất lagrave giữa 3 khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng Nucl vagrave KTKN

17

Bảng 313 Liecircn quan giữa tự khaacuteng thể với độ hoạt động của bệnh

Khaacuteng thể

Mức độ hoạt động của LBĐHT p

Mạnh

(n = 36) (I)

Trung bigravenh

(n = 67)(II)

Nhẹổn

(n = 185)(III) I vagrave II II vagrave III

KTKN 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Khaacuteng

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Khaacuteng

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

Khaacuteng

Nucl

100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt0000

1

So với nhoacutem bệnh hoạt động trung bigravenh tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh cao hơn rotilde rệt với p =

00025 Nồng độ trung bigravenh của khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave KT

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh đều cao hơn rotilde rệt Tỷ lệ

(+) vagrave nồng độ trung bigravenh của 4 khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh hoạt động

trung bigravenh đều cao hơn so với nhoacutem bệnh hoạt động nhẹ ổn định

Bảng 314 Tương quan giữa nồng độ khaacuteng thể với điểm SLEDAI vagrave

điểm SLICC thận

Khaacuteng thể SLEDAI SLICC thận

r p r p

KTKN 0306 lt00001 0143 lt0013

Khaacuteng dsDNA 056 lt00001 0216 00002

Khaacuteng C1q 0433 lt00001 0399 lt00001

Khaacuteng Nucl 0648 lt00001 0348 00082

18

Nồng độ KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA tương quan thuận

chặt chẽ nhất với điểm SLEDAI (p lt 0001) Nồng độ KT khaacuteng

C1q tương quan chặt chẽ nhất với điểm SLICC thận (r = 0399)

Bảng 315 Thay đổi nồng độ caacutec khaacuteng thể sau đợt cấp

Khaacuteng thể Tỷ lệ

giảm

Khaacutec biệt

trung bigravenh

Test t

gheacutep cặp p

KTKN (OD) 625 -034 -143 016

Khaacuteng dsDNA (IUml) 6458 -19949 -1793 008

Khaacuteng C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

Khaacuteng Nucl (IUml) 8333 -47509 -39 00003

Với 48 đợt cấp được theo dotildei nồng độ trung bigravenh của caacutec KT

khaacuteng C1q (p = 0037) vagrave khaacuteng Nucl (p = 00003) sau đợt cấp giảm

coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Bảng 316 Giaacute trị dự đoaacuten đợt cấp LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 9759 6714 3227 9459

Khaacuteng dsDNA 759 4537 36 823

Khaacuteng C1q 5783 8195 5647 8276

Khaacuteng Nucl 9759 2244 3375 9583

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng C1q 4819 878 6154 8072

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng Nucl 759 4927 3772 8347

Khaacuteng Nucl + Khaacuteng C1q 5783 8439 60 8317

Trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT KTKN vagrave khaacuteng Nucl đều coacute

độ nhạy cao vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh cao gt 94 nhưng độ đặc hiệu

khaacute thấp Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu cao nhất (8195)

đặc biệt khi dương tiacutenh đồng thời với KT khaacuteng dsDNA (878)

19

Chƣơng 4 BAgraveN LUẬN

41 Đặc điểm của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT

411 Phacircn bố về tuổi vagrave giới tỷ lệ bệnh nhacircn nữ chiếm tới

9297 với tuổi trung bigravenh lagrave 311 946 trong đoacute phần lớn thuộc

nhoacutem tuổi từ 16 ndash 45 (929) Kết quả nagravey hoagraven toagraven phugrave hợp với

những kết quả nghiecircn cứu trước đacircy cho thấy đặc điểm dịch tễ học

cơ bản của LBĐHT lagrave thường xảy ra ở phụ nữ trong độ tuổi sinh đẻ

412 Về tuổi khởi phaacutet bệnh phần lớn bệnh nhacircn LBĐHT

khởi phaacutet bệnh trong giai đoạn 15 - 45 tuổi (852) tuổi khởi phaacutet

bệnh trung bigravenh lagrave 2593 974 Khaacute nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học

trecircn qui mocirc lớn cho thấy LBĐHT thường coacute xu hướng khởi phaacutet ở

nữ giới trong nhoacutem tuổi từ 15 - 45 giai đoạn coacute sự hoạt động mạnh

mẽ nhất của caacutec tuyến nội tiết hướng sinh dục nữ

413 Tiền sử gia đigravenh coacute ngƣời mắc LBĐHT 469 số

bệnh nhacircn LBĐHT coacute iacutet nhất một người thacircn trong gia đigravenh cugraveng

mắc bệnh Nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học đatilde cho thấy tỷ lệ mắc

LBĐHT ở những người thacircn của người bệnh thường cao gấp khoảng

10 - 20 lần so với tỷ lệ mắc chung trong cộng đồng (4 - 12) cho

thấy vai trograve của yếu tố di truyền trong cơ chế bệnh sinh của LBĐHT

414 Caacutec biểu hiện của LBĐHT Caacutec biểu hiện bệnh gặp

nhiều nhất lagrave rụng toacutec - 531 tổn thương thận - 453 tổn thương

da lupus cấp baacuten cấp - 383 giảm bạch cầu - 382 vagrave giảm bổ

thể - 622 Những kết quả nagravey khaacute tương đồng với nghiecircn cứu của

nhiều taacutec giả trong vagrave ngoagravei nước tuy nhiecircn tỷ lệ viecircm thanh mạc

tổn thương thần kinh vagrave giảm tiểu cầu gặp khaacute thấp nguyecircn nhacircn coacute

thể do sự khaacutec nhau trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu vagrave sự

khaacutec biệt về đặc điểm lacircm sagraveng của LBĐHT giữa caacutec chủng tộc

20

42 Về tỷ lệ dƣơng tiacutenh vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự

khaacuteng thể

421 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN)

Về tỷ lệ dương tiacutenh 859 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute KTKN

dương tiacutenh ở lần khaacutem 1 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ

dương tiacutenh của KTKN ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute sự dao động khaacute lớn

trong khoảng 60 ndash 100 nguyecircn nhacircn coacute thể lagrave do sự khaacutec biệt

trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu thiết kế nghiecircn cứu kỹ

thuật xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể sự

đảo chiều huyết thanh của KTKN

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm

tiacutenh của KTKN lần lượt lagrave 8594 vagrave 7231 khaacute thấp so với caacutec

kết quả nghiecircn cứu trước đacircy nguyecircn nhacircn coacute thể do nhoacutem bệnh

nhacircn nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute tỷ lệ KTKN acircm tiacutenh khaacute cao

(141) sự khaacutec biệt về caacutech thức lựa chọn vagrave đặc điểm của nhoacutem

chứng Độ đặc hiệu của KTKN với LBĐHT lagrave khaacute thấp (4615)

khi sử dụng nhoacutem chứng mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec nguyecircn nhacircn lagrave

do KTKN coacute thể xuất hiện trong nhiều bệnh lyacute tự miễn khaacutec

422 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA

Về tỷ lệ dương tiacutenh bệnh nhacircn LBĐHT 641 số bệnh nhacircn

LBĐHT trong nghiecircn cứu coacute KT khaacuteng dsDNA dương tiacutenh nằm

trong dải biến thiecircn 37 - 85 của caacutec kết quả nghiecircn cứu trước đacircy

Caacutec yếu tố coacute ảnh hưởng rotilde rệt nhất đến tỷ lệ nagravey lagrave mức độ hoạt

động vagrave tổn thương nội tạng của caacutec đối tượng nghiecircn cứu kỹ thuật

xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ đặc hiệu của KT khaacuteng

dsDNA trong chẩn đoaacuten LBĐHT ở nghiecircn cứu nagravey lagrave 9333 khi sử

dụng nhoacutem chứng khỏe mạnh vagrave 9744 khi sử dụng nhoacutem chứng

21

mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec tức lagrave hoagraven toagraven phugrave hợp với caacutec kết quả

nghiecircn cứu trước đacircy (95 ndash 100) Traacutei với độ đặc hiệu độ nhạy của

KT khaacuteng dsDNA với LBĐHT thường khocircng cao vagrave coacute khoảng dao

động khaacute lớn (13 - 86) Nguyecircn nhacircn coacute thể do tiacutenh chất dao động

thường xuyecircn của khaacuteng thể nagravey trong quaacute trigravenh diễn biến bệnh vagrave

độ nhạy khaacutec nhau của caacutec kỹ thuật xeacutet nghiệm miễn dịch

423 Khaacuteng thể khaacuteng C1q

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở bệnh nhacircn LBĐHT dao động trong khoảng 15 ndash

63 theo caacutec nghiecircn cứu trước đacircy kết quả của chuacuteng tocirci lagrave 25 ở

lần khaacutem 1 Trong 3 nghiecircn cứu coacute cỡ mẫu lớn nhất của Julkunen H

(2012) Mok CC (2010) vagrave Orbai AM (2015) tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q đều tương đối thấp vagrave iacutet coacute sự khaacutec biệt

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT KT khaacuteng C1q coacute giaacute trị keacutem

nhất trong chẩn đoaacuten vagrave phacircn loại LBĐHT với diện tiacutech dưới đường

cong ROC lagrave 0676 vagrave độ nhạy chỉ lagrave 25 Tỷ lệ dương tiacutenh thấp vagrave

dao động thường xuyecircn ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute thể lagrave nguyecircn nhacircn

chiacutenh lagravem giảm độ nhạy của khaacuteng thể nagravey trong chẩn đoaacuten bệnh

424 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome (KT khaacuteng Nucl )

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT Tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT trong nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci

lagrave 813 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ nagravey coacute khoảng dao

động rộng từ 45 đến 100 nguyecircn nhacircn lagrave do sự khaacutec biệt của caacutec

đối tượng nghiecircn cứu về chủng tộc vagrave mức độ hoạt động bệnh

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT nhiều nghiecircn cứu đatilde cho thấy độ

đặc hiệu rất cao của KT khaacuteng Nucl với LBĐHT (90 ndash 100) tương

đồng với kết quả thu được của chuacuteng tocirci lagrave 987 Nguyecircn nhacircn coacute

thể do nucleosome lagrave tự khaacuteng nguyecircn coacute vai trograve quan trọng trong cơ

22

chế bệnh sinh của LBĐHT Độ nhạy của KT khaacuteng Nucl với

LBĐHT trong nghiecircn cứu nagravey lagrave 8125 cao hơn so với KT khaacuteng

dsDNA (6406)

43 Về liecircn quan giữa caacutec khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

431 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh (ge 12

OD) ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với sự xuất

hiện của giảm bổ thể vagrave caacutec tự khaacuteng thể khaacutec Mối liecircn quan giữa

khaacuteng thể nagravey với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của

LBĐHT trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy lagrave khocircng rotilde rệt do thiếu

những bằng chứng đaacuteng tin cậy

432 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với caacutec biểu

hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp hoặc mạn tiacutenh giảm bạch cầu

vagrave giảm bổ thể nhưng khocircng liecircn quan với tổn thương thận lupus

Nồng độ vagrave tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng dsDNA ở nhoacutem bệnh

nhacircn trong đợt cấp đều cao hơn so với nhoacutem ngoagravei đợt cấp tuy nhiecircn

khaacuteng thể nagravey coacute liecircn quan khocircng hằng định với cả hoạt tiacutenh chung

của LBĐHT vagrave tổn thương thận đặc biệt lagrave với đợt cấp của bệnh

433 Khaacuteng thể khaacuteng C1q khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh ở

bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan rotilde rệt với sự xuất hiện của tổn thương

thận vagrave giảm bổ thể Độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey trong dự baacuteo tổn

thương thận lupus cao hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại vagrave nồng độ của noacute

tương quan nghịch khaacute chặt với cả bổ thể C3 vagrave C4 (p lt 00001) Tỷ

lệ vagrave nồng độ trung bigravenh của KT khaacuteng C1q đều coacute xu hướng tăng

dần theo mức độ hoạt động của bệnh Tương quan giữa nồng độ KT

khaacuteng C1q với điểm SLICC thận vagrave độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey

trong dự baacuteo đợt cấp thận lupus cũng tốt hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại

23

434 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện tổn thương

da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận giảm BC vagrave giảm bổ thể Độ

nhạy trong dự baacuteo tổn thương thận lupus của KT khaacuteng Nucl cao

hơn so với caacutec khaacuteng thể cograven lại Tương quan với nồng độ bổ thể vagrave

điểm SLEDAI của khaacuteng thể nagravey cũng chặt chẽ hơn caacutec khaacuteng thể

cograven lại

KẾT LUẬN

Qua nghiecircn cứu 128 bệnh nhacircn LBĐHT với nhoacutem chứng gồm

39 người mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec vagrave 30 người khỏe mạnh chuacuteng

tocirci xin đưa ra một số kết luận sau

1 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten của một

số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể

Tỷ lệ dương tiacutenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 855 641 25 vagrave

813 tất cả đều cao hơn rotilde rệt so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở 587 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute

KT khaacuteng dsDNA acircm tiacutenh

Nồng độ trung bigravenh của caacutec KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng

C1q vagrave khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 3221 6034 (IUml) vagrave 945 1385

(IUml) tất cả đều cao hơn so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn coacute độ nhạy cao (8594) nhưng độ đặc

hiệu thấp (6667) với LBĐHT Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh 100 với LBĐHT nhưng độ nhạy

rất thấp (25)

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 4: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

1

CAacuteC CHỮ VIẾT TẮT

ACR American College of Rheumatology (Hội Khớp học Mỹ)

AUC Area under the ROC curve (Diện tiacutech dưới đường cong ROC)

CLS cận lacircm sagraveng

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

KT khaacuteng thể

KTKN khaacuteng thể khaacuteng nhacircn

LBĐHT Lupus ban đỏ hệ thống

Nucl nucleosome

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

MỞ ĐẦU

1 Tiacutenh cấp thiết của đề tagravei

Lupus ban đỏ hệ thống (LBĐHT) lagrave một trong những bệnh tự

miễn dịch hệ thống thường gặp nhất với độ lưu hagravenh ước tiacutenh

khoảng 20 - 150 ca 100000 dacircn riecircng ở phụ nữ lagrave khoảng 164 - 406

ca 100000 dacircn Bệnh đặc trưng bởi sự xuất hiện của caacutec tế bagraveo

lympho B vagrave T tự phản ứng chịu traacutech nhiệm sản xuất ra hagraveng loạt

tự khaacuteng thể bệnh lyacute nhằm vagraveo caacutec khaacuteng nguyecircn điacutech ở trong nhacircn

bagraveo tương magraveng tế bagraveo huyết tương hoặc caacutec protein nền Cho đến

nay đatilde coacute gần 180 loại tự khaacuteng thể liecircn quan đến LBĐHT được xaacutec

định trong đoacute nhiều loại được chứng minh coacute vai trograve rất quan trọng

đối với sự higravenh thagravenh vagrave tiến triển của bệnh lagrave yếu tố khởi phaacutet phản

ứng viecircm tự miễn dẫn đến tổn thương caacutec hệ cơ quan Trecircn lacircm

sagraveng nhiều loại tự khaacuteng thể đatilde thể hiện khaacute rotilde vai trograve trong chẩn

đoaacuten đaacutenh giaacute mức độ hoạt động vagrave tiecircn lượng đối với LBĐHT Sự

xuất hiện của caacutec tự khaacuteng thể đồng thời với caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng

gợi yacute sẽ hỗ trợ rất nhiều cho việc chẩn đoaacuten xaacutec định bệnh Becircn cạnh

4 loại tự khaacuteng thể kinh điển đatilde được đưa vagraveo caacutec tiecircu chuẩn phacircn

loại bệnh của Hội Khớp học Mỹ (ACR-1997) vagrave Nhoacutem Hợp taacutec

Quốc tế về LBĐHT (SLICC- 2012) một số tự khaacuteng thể mới như

2

khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng C1q hellip cũng đều cho thấy độ

nhạy vagrave độ đặc hiệu khaacute cao trong chẩn đoaacuten LBĐHT vagrave caacutec tổn

thương nội tạng của bệnh Becircn cạnh đoacute một số loại khaacuteng thể đatilde

được chứng minh coacute mối liecircn quan khaacute rotilde rệt với mức độ hoạt động

của bệnh vagrave một số tổn thương nội tạng của LBĐHT như caacutec khaacuteng

thể khaacuteng dsDNA khaacuteng nucleosome khaacuteng C1qhellip Sự xuất hiện

vagrave biến đổi nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể nagravey phản aacutenh khaacute tốt sự

dao động hoạt tiacutenh vagrave coacute thể giuacutep dự baacuteo trước caacutec đợt cấp của bệnh

Do đoacute nhiều loại tự khaacuteng thể đatilde được sử dụng rộng ratildei trong thực

hagravenh lacircm sagraveng như những cocircng cụ giuacutep hỗ trợ việc đaacutenh giaacute vagrave theo

dotildei mức độ hoạt động của LBĐHT một caacutech nhanh choacuteng vagrave tiện lợi

Việc coacute được những hiểu biết đầy đủ hơn về đặc điểm của caacutec

tự khaacuteng thể trong LBĐHT coacute thể giuacutep caacutec thagravey thuốc coacute thecircm

những cocircng cụ coacute tiacutenh khả thi vagrave đủ độ tin cậy để chẩn đoaacuten đaacutenh

giaacute vagrave theo dotildei mức độ hoạt động của bệnh Vigrave lyacute do nagravey tocirci quyết

định lựa chọn đề tagravei ldquoNghiecircn cứu mối tương quan giữa mức độ hoạt

động của bệnh với một số tự khaacuteng thể trong lupus ban đỏ hệ thốngrdquo

nhằm caacutec mục tiecircu sau

1 Xaacutec định tỷ lệ dương tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten bệnh

lupus ban đỏ hệ thống của caacutec tự khaacuteng thể khaacuteng nhacircn khaacuteng dsDNA

khaacuteng C1q vagrave khaacuteng nucleosome

2 Khảo saacutet mối liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể nagravey với một số

biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của bệnh lupus ban đỏ hệ

thống

2 Những đoacuteng goacutep mới của đề tagravei

Đacircy lagrave cocircng trigravenh đầu tiecircn trong nước nghiecircn cứu giaacute trị chẩn

đoaacuten LBĐHT vagrave tổn thương thận lupus của caacutec khaacuteng thể mới lagrave

khaacuteng thể khaacuteng nucleosome vagrave khaacuteng C1q coacute so saacutenh với hai loại

3

khaacuteng thể cổ điển lagrave khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) vagrave khaacuteng

dsDNA nhằm tigravem kiếm những cocircng cụ tối ưu cho việc chẩn đoaacuten

bệnh Kết quả thu được của nghiecircn cứu đatilde cho thấy giaacute trị rất tốt của

khaacuteng thể khaacuteng nucleosome trong chẩn đoaacuten LBĐHT vagrave độ đặc

hiệu cao của khaacuteng thể khaacuteng C1q với tổn thương thận lupus

Đacircy cũng lagrave nghiecircn cứu theo dotildei dọc đầu tiecircn ở Việt Nam đaacutenh

giaacute mối liecircn quan giữa sự dương tiacutenh vagrave nồng độ của KTKN khaacuteng

dsDNA khaacuteng C1q vagrave khaacuteng nucleosome với mức độ hoạt động của

bệnh LBĐHT vagrave tổn thương thận lupus Kết quả thu được của nghiecircn

cứu đatilde cho thấy KT khaacuteng nucleosome coacute liecircn quan với mức độ hoạt

động của bệnh chặt chẽ hơn vagrave giaacute trị dự baacuteo đợt cấp bệnh tốt hơn so

với KT khaacuteng dsDNA Khaacuteng thể khaacuteng C1q cũng coacute mối liecircn quan

với sự xuất hiện vagrave mức độ hoạt động của tổn thương thận lupus chặt

chẽ hơn so với KT khaacuteng dsDNA

3 Bố cục của luận aacuten

Luận aacuten gồm 144 trang gồm Đặt vấn đề (2 trang) tổng quan

tagravei liệu (42 trang) đối tượng vagrave phương phaacutep nghiecircn cứu (17 trang)

kết quả nghiecircn cứu (30 trang) bagraven luận (50 trang) kết luận (2 trang)

vagrave kiến nghị (1 trang)

Toagraven bộ luận aacuten coacute 48 bảng 15 higravenh sơ đồ vagrave biểu đồ

Tagravei liệu tham khảo bao gồm 191 tagravei liệu (9 tiếng Việt vagrave 182

tiếng Anh)

Chƣơng 1 TỔNG QUAN TAgraveI LIỆU

11 Vagravei neacutet về cơ chế điều hogravea vagrave tiacutenh chất sinh bệnh học của caacutec

tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Caacutec tế bagraveo B tự phản ứng bị hoạt hoacutea khi gặp caacutec tự khaacuteng

nguyecircn đặc hiệu với sự coacute mặt của caacutec tế bagraveo T hỗ trợ Sau đoacute

chuacuteng trải qua quaacute trigravenh chuyển đổi isotype siecircu đột biến dạng cơ

4

thể vagrave chọn lọc dograveng để tạo ra caacutec tế bagraveo B hiệu ứng coacute chức năng

giải phoacuteng caacutec tự khaacuteng thể IgG vagraveo hệ tuần hoagraven Caacutec khaacuteng thể

nagravey tạo thagravenh PHMD dư thừa tiacutech tụ vagrave gacircy tổn thương viecircm tại caacutec

cơ quan

12 Tổng quan chẩn đoaacuten vagrave đaacutenh giaacute độ hoạt động của LBĐHT

121 Chẩn đoaacuten LBĐHT

Lupus ban đỏ hệ thống coacute biểu hiện lacircm sagraveng rất đa dạng nhưng

phần lớn caacutec biểu hiện lagrave khocircng đặc hiệu gacircy khoacute khăn cho việc chẩn

đoaacuten Hiện chưa coacute caacutec cocircng cụ dagravenh riecircng cho chẩn đoaacuten LBĐHT

necircn caacutec bộ tiecircu chuẩn phacircn loại bệnh của Hội Khớp học Mỹ năm

1997 (ACR 1997) vagrave Tổ chức Hợp taacutec Quốc tế về LBĐHT năm 2012

(SLICC 2012) thường được sử dụng trecircn lacircm sagraveng cho mục điacutech nagravey

122 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của LBĐHT khocircng coacute yếu tố

chỉ điểm đơn lẻ coacute thể đaacutenh giaacute chiacutenh xaacutec mức độ hoạt động của

bệnh Chưa coacute cocircng cụ đaacutenh giaacute vagrave đo lường mức độ hoạt động của

LBĐHT nagraveo được cho lagrave tối ưu để aacutep dụng trong thực tiễn

13 Yacute nghĩa lacircm sagraveng của một số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

131 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh coacute độ

nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh rất cao với LBĐHT nhưng độ đặc

hiệu thấp do coacute thể gặp trong nhiều bệnh khaacutec Khaacuteng thể nagravey coacute

mối liecircn quan khocircng rotilde rệt với mức độ hoạt động của LBĐHT

132 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng dsDNA coacute độ đặc hiệu cao

(95-100) vagrave lagrave một trong caacutec tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten LBĐHT tuy

nhiecircn độ nhạy khocircng cao vigrave noacute thường chỉ dương tiacutenh tạm thời

Khaacuteng thể nagravey coacute mối tương quan thuận khaacute rotilde với mức độ hoạt

động của bệnh KT khaacuteng dsDNA coacute độ nhạy khaacute cao trong chẩn

đoaacuten phacircn biệt giữa LBĐHT ổn định vagrave hoạt động nhưng khocircng

hằng định giữa caacutec nghiecircn cứu Theo dotildei định kỳ khaacuteng thể nagravey ở

5

bệnh nhacircn LBĐHT cho thấy sự biến đổi nồng độ của noacute coacute liecircn

quan rotilde rệt với sự xuất hiện caacutec đợt cấp của bệnh sau đoacute

133 Khaacuteng thể khaacuteng C1q được tigravem thấy trong LBĐHT vagrave nhiều

bệnh lyacute khaacutec như magravey đay viecircm mạch giảm bổ thể phugrave mạch di

truyền viecircm khớp dạng thấp hellip Khaacuteng thể nagravey coacute độ nhạy vagrave độ đặc

hiệu khocircng cao trong chẩn đoaacuten LBĐHT nhưng lagrave một trong những

khaacuteng thể coacute liecircn quan rotilde rệt nhất với tổn thương thận lupus Nồng

độ của KT khaacuteng C1q coacute mối tương quan chặt chẽ với mức độ hoạt

động của LBĐHT đặc biệt lagrave với tổn thương thận Khaacuteng thể nagravey coacute

giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh vagrave độ đặc hiệu khaacute cao với đợt cấp thận lupus

134 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute độ

nhạy dao động trong khoảng 50-90 vagrave độ đặc hiệu lagrave 90-99 trong

chẩn đoaacuten LBĐHT Caacutec nghiecircn cứu so saacutenh đối đầu giữa khaacuteng thể

nagravey vagrave KT khaacuteng dsDNA cho thấy KT khaacuteng Nucl coacute độ đặc hiệu

tương đương nhưng độ nhạy cao hơn so rotilde rệt Ngoagravei ra nồng độ KT

khaacuteng Nucl cũng coacute mối tương quan chặt chẽ với caacutec chỉ số đaacutenh giaacute

mức độ hoạt động của bệnh vagrave tổn thương thận lupus

Chƣơng 2 ĐỐI TƢỢNG VAgrave PHƢƠNG PHAacuteP

21 Đối tƣợng nghiecircn cứu

211 Nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT

Bao gồm 128 bệnh nhacircn được chẩn đoaacuten lupus ban đỏ hệ

thống theo tiecircu chuẩn SLICC 2012 theo dotildei vagrave điều trị tại Trung tacircm

Dị ứng ndash Miễn dịch Lacircm sagraveng vagrave Phograveng Quản lyacute bệnh lupus ban đỏ

hệ thống Khoa Khaacutem bệnh - Bệnh viện Bạch Mai từ thaacuteng 032014

đến thaacuteng 022016

Tiecircu chuẩn loại trừ phụ nữ coacute thai bệnh nhacircn coacute mắc kegravem

caacutec bệnh nội khoa nặng như tiểu đường suy tim suy chức năng gan

6

bệnh nhacircn bị mắc giang mai hoặc HIVAIDS bệnh nhacircn coacute mắc

kegravem caacutec bệnh tự miễn khaacutec bệnh nhacircn khocircng đồng yacute tham gia

nghiecircn cứu

212 Nhoacutem chứng

Nhoacutem chứng bệnh bao gồm 39 người mắc caacutec bệnh tự

miễn dịch khaacutec LBĐHT được chẩn đoaacuten xaacutec định vagrave điều trị tại

Trung tacircm Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng BV Bạch Mai vagrave phograveng

khaacutem chuyecircn khoa Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng khoa Khaacutem Bệnh

BV Bạch Mai từ 22016 đến 4 2016

Khocircng phacircn biệt tuổi giới nghề nghiệp trigravenh độ học vấn

nơi cư truacute

Khocircng bị suy tế bagraveo gan hoặc hoặc nhiễm HIVAIDS

Chấp nhận tham gia nghiecircn cứu

Nhoacutem chứng khỏe mạnh 30 người khỏe mạnh coacute độ tuổi

vagrave phacircn bố giới tiacutenh tương đồng với nhoacutem bệnh nhacircn nghiecircn cứu

Khocircng coacute tiền sử mắc caacutec bệnh lyacute tự miễn khocircng coacute người

thacircn thuộc caacutec thế hệ thứ nhất vagrave thứ 2 mắc caacutec bệnh lyacute tự miễn dịch

Khocircng phacircn biệt nghề nghiệp trigravenh độ học vấn nơi cư truacute

Chấp nhận tham gia nghiecircn cứu

22 Phƣơng phaacutep nghiecircn cứu

221 Phƣơng phaacutep nghiecircn cứu Mocirc tả cắt ngang + theo dotildei dọc

222 Chọn mẫu

Mẫu nghiecircn cứu được lấy theo phương phaacutep chọn mẫu thuận

tiện Caacutec đối tượng được lựa chọn theo trigravenh tự thời gian khocircng

phacircn biệt tuổi taacutec giới tiacutenh mức độ hoạt động vagrave hủy hoại vĩnh viễn

223 Cỡ mẫu

Cỡ mẫu nghiecircn cứu mocirc tả cắt ngang được tiacutenh dựa theo cocircng

thức dugraveng để ước tiacutenh một tỷ lệ của tổ chức y tế thế giới

7

trong đoacute n lagrave cỡ mẫu tối thiểu lagrave mức yacute nghĩa thống kecirc tương ứng

với khoảng tin cậy 95 = 005 Z1-2 lagrave Z score tương ứng với

mức yacute nghĩa thống kecirc mong muốn với = 005 thigrave Z1-2 = 196 p lagrave

tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng nucleosome ở bệnh nhacircn LBĐHT (p

= 0909 theo Đặng Thu Hương - Tạp chiacute Y học Thagravenh phố Hồ Chiacute

Minh 2013 tập 17 phụ bản 1 tr 294-300) q = 1 - p = 0091 d lagrave độ

chiacutenh xaacutec tuyệt đối mong muốn chọn d = 005 Từ đoacute tiacutenh được n =

1271 Nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute cỡ mẫu lagrave 128 bệnh nhacircn

224 Caacutec bƣớc tiến hagravenh nghiecircn cứu

2241 Nhoacutem bệnh nhacircn lupus ban đỏ hệ thống

Lựa chọn vagraveo danh saacutech nghiecircn cứu vagrave gắn matilde bệnh aacuten

Lần khaacutem 1 khaacutem lacircm sagraveng khai thaacutec tiền sử xeacutet nghiệm

CLS thocircng thường (định lượng urecirc creatinin glucose AST ALT

albumin cholesterol triglyceride C3 vagrave C4 bổ thể trong huyết thanh

tế bagraveo niệu trụ niệu định lượng protein niệu 24 giờhellip) định lượng

khaacuteng thể khaacuteng nhacircn khaacuteng dsDNA khaacuteng nucleosome vagrave khaacuteng

C1q phacircn tiacutech caacutec nhoacutem triệu chứng bệnh đaacutenh giaacute điểm SELENA-

SLEDAI mức độ hoạt động của bệnh sự xuất hiện đợt cấp của

bệnh Chỉ số Hoạt động Thận của SLICC 2008 đợt cấp thận lupus

Theo dotildei định kỳ caacutec bệnh nhacircn được thăm khaacutem định kỳ

hagraveng thaacuteng hoặc ngay khi coacute caacutec dấu hiệu bất thường Quaacute trigravenh

nghiecircn cứu kết thuacutec khi bệnh nhacircn được theo dotildei đủ 12 thaacuteng hoặc

khi được phaacutet hiện coacute thai hoặc bị mất theo dotildei Caacutec bước thăm

khaacutem gồm khaacutem lacircm sagraveng xeacutet nghiệm CLS thocircng thường đaacutenh giaacute

caacutec triệu chứng bệnh sự xuất hiện đợt cấp của LBĐHT điểm SLICC

thận sự xuất hiện của đợt cấp thận lupus Định lượng khaacuteng thể

trong caacutec lần khaacutem coacute ghi nhận đợt cấp mới xuất hiện của bệnh hoặc

8

caacutec lần khaacutem được thực hiện trong vograveng 2 thaacuteng sau khi người bệnh

ra đatilde khỏi đợt cấp vagrave lần khaacutem cuối cugraveng Đaacutenh giaacute điểm SLEDAI

vagrave mức độ hoạt động bệnh ở caacutec lần khaacutem coacute xeacutet nghiệm khaacuteng thể

2242 Nhoacutem chứng 2 nhoacutem chứng được tiến hagravenh xeacutet nghiệm 4

loại khaacuteng thể tương tự nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT ở lần khaacutem 1

225 Địa điểm vagrave phƣơng phaacutep tiến hagravenh caacutec xeacutet nghiệm CLS

2251 Caacutec xeacutet nghiệm cận lacircm sagraveng thocircng thường được thực hiện

tại caacutec khoa phograveng tương ứng của Bệnh viện Bạch Mai

2252 Xeacutet nghiệm caacutec tự khaacuteng thể

a Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) vagrave khaacuteng dsDNA được định lượng

bằng kỹ thuật ELISA trecircn maacutey baacuten tự động Imarkreg của Hatildeng BIO-

RAD (kit của Hatildeng DRG) Địa điểm thực hiện phograveng xeacutet nghiệm

miễn dịch Trung tacircm Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng BV Bạch Mai

b Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng nucleosome được phaacutet hiện vagrave

định lượng bằng kỹ thuật ELISA trecircn maacutey tự động Alegriareg của

Hatildeng Orgentec (Đức) sử dụng kit của Hatildeng Orgentec Địa điểm

thực hiện tại Khoa Xeacutet nghiệm BV Đại học Y Hagrave Nội

226 Caacutec tiecircu chuẩn đaacutenh giaacute đƣợc sử dụng trong nghiecircn cứu

2261 Đaacutenh giaacute caacutec biểu hiện của bệnh LBĐHT dựa theo caacutec

tiecircu chuẩn lacircm sagraveng của SLICC 2012

2262 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của bệnh dựa theo tiecircu chuẩn

đaacutenh giaacute của cocircng cụ SELENA-SLEDAI

2263 Đaacutenh giaacute đợt cấp của LBĐHT Dựa vagraveo định nghĩa sử dụng

trong nghiecircn cứu SELENA

2264 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của tổn thương thận lupus

dựa vagraveo chỉ số hoạt động thận của SLICC năm 2008

2265 Đaacutenh giaacute đợt cấp tổn thương thận lupus dựa theo tiecircu

chuẩn của EULAR năm 2009

9

227 Sai số vagrave caacutech khắc phục sai số khắc phục caacutec sai số bằng

caacutech khai thaacutec kỹ triệu chứng lacircm sagraveng tiền sử kiểm tra vagrave đaacutenh giaacute

lại caacutec chỉ số hoạt động bệnh lagravem sạch số liệu trước khi xử lyacute

228 Xử lyacute số liệu Caacutec số liệu nghiecircn cứu được xử lyacute bằng phần

mềm toaacuten thống kecirc MEDCALC 140

229 Đạo đức của nghiecircn cứu

Nghiecircn cứu được tiến hagravenh tại caacutec cơ sở y tế coacute uy tiacuten với sự

đồng yacute của latildenh đạo caacutec đơn vị Đacircy lagrave nghiecircn cứu mocirc tả khocircng coacute

can thiệp tất cả caacutec đối tượng nghiecircn cứu đều tự nguyện tham gia

Caacutec số liệu thu được chỉ phục vụ cho mục điacutech nghiecircn cứu vagrave chăm

soacutec sức khỏe người bệnh khocircng phục vụ cho caacutec mục điacutech khaacutec

Chƣơng 3 KẾT QUẢ NGHIEcircN CỨU

31 Đặc điểm chung của caacutec đối tƣợng nghiecircn cứu

Bảng 31 Đặc điểm về tuổi vagrave giới

Nhoacutem nghiecircn cứu n Tuổi (X ) Tỷ lệ nữ nam

Nhoacutem LBĐHT 128 311 946 1322

Nhoacutem chứng bệnh 39 4305 17 333

Nhoacutem chứng khỏe 30 3163 1357 14

p 000036

04

0011

074

Nhoacutem LBĐHT so với nhoacutem chứng bệnh

Nhoacutem LBĐHT so với nhoacutem chứng khỏe

Tuổi trung bigravenh của nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lagrave 311 946

thấp hơn so với nhoacutem chứng bệnh (p = 000036) nhưng khocircng khaacutec

biệt so với nhoacutem chứng khỏe mạnh (p = 04) Tỷ lệ nữnam ở nhoacutem

LBĐHT lagrave 1322 tương đương nhoacutem chứng khỏe mạnh (p = 074)

nhưng cao hơn so với nhoacutem chứng bệnh (p = 0011)

Bảng 32 Phacircn bố theo nhoacutem tuổi của nhoacutem LBĐHT

Nhoacutem tuổi 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Tổng

10

n 1 67 52 7 1 128

Tỷ lệ 08 523 406 55 08 100

Caacutec bệnh nhacircn phần lớn gặp trong nhoacutem tuổi 20 ndash 30 (437)

vagrave 31 ndash 40 (336) thấp nhất lagrave ở nhoacutem gt 50 tuổi (47) Phacircn bố

caacutec nhoacutem tuổi khocircng coacute sự khaacutec biệt giữa 2 giới với p = 051

Bảng 33 Phacircn bố bệnh nhacircn LBĐHT theo thời gian mắc bệnh

Khoảng thời

gian (năm) Số lƣợng Tỷ lệ ()

Thời gian

trung bigravenh

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

TỔNG SỐ 128 100 517 37

Thời gian mắc bệnh của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT gặp nhiều

nhất trong khoảng 2 ndash 5 năm (516) vagrave 6 ndash 10 năm (25) Thời

gian mắc bệnh trung bigravenh lagrave 517 37 (năm)

Bảng 34 Phacircn bố bệnh nhacircn LBĐHT theo tuổi khởi phaacutet bệnh

Nhoacutem tuổi Số lƣợng Tỷ lệ () Tuổi trung bigravenh

15 14 109 1271 23

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

TỔNG SỐ 128 100 2593 974

Phần lớn bệnh nhacircn khởi phaacutet bệnh ở độ tuổi 16 ndash 25 (43) vagrave

26 ndash 35 (281) Số bệnh nhacircn khởi phaacutet bệnh sau 45 tuổi chỉ chiếm

11

39 Tuổi phaacutet bệnh trung bigravenh của caacutec bệnh nhacircn lagrave 2593 974

Tiền sử mắc LBĐHT của người thacircn 6128 bệnh nhacircn

LBĐHT coacute người thacircn trong gia đigravenh (cha mẹ anh chị em ruột)

cugraveng mắc LBĐHT chiếm tỷ lệ 469

12

Bảng 35 Một số biểu hiện lacircm sagraveng ở thời điểm đầu nghiecircn cứu

Tỷ lệ gặp cao nhất lagrave caacutec biểu hiện giảm bổ thể (622) rụng

toacutec (531) vagrave tổn thương thận (453) Iacutet gặp nhất lagrave caacutec biểu hiện

viecircm thanh mạc tan maacuteu (23) vagrave tổn thương thần kinh (31)

Bảng 36 Mức độ hoạt động của LBĐHT

TT Mức độ hoạt động Số lƣợng Tỷ lệ ()

1 Ổn định 15 117

2 Hoạt động nhẹ 57 445

3 Hoạt động trung bigravenh 37 289

4 Hoạt động mạnh 19 148

5 Đợt cấp LBĐHT 51 398

6 Điểm SLEDAI (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Điểm SLICC thận (X ) 312 42 (0 - 15)

TT Tiecircu chuẩn n Tỷ lệ ()

1 Caacutec tổn thương da lupus cấp baacuten cấp 49 383

2 Caacutec tổn thương da lupus mạn tiacutenh 21 164

3 Loeacutet niecircm mạc 9 7

4 Rụng toacutec 68 531

5 Biểu hiện khớp 45 352

6 Viecircm thanh mạc 3 23

7 Tổn thương thận 58 453

8 Tổn thương thần kinh 4 31

9 Thiếu maacuteu tan maacuteu 3 23

10 Giảm bạch cầu 42 328

11 Giảm tiểu cầu 5 39

12 Giảm bổ thể 79 622

13

Ở thời điểm khởi đầu nghiecircn cứu phần lớn bệnh nhacircn coacute bệnh

hoạt động ở mức độ nhẹ vagrave trung bigravenh (lần lượt chiếm 445 vagrave

289) Điểm SLEDAI dao động khaacute lớn trong khoảng 0 ndash 41

(trung bigravenh lagrave 661 62) Tỷ lệ bệnh nhacircn coacute đợt cấp LBĐHT lagrave

398 Điểm SLICC thận lupus trung bigravenh lagrave 312 42

32 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của

caacutec tự khaacuteng thể

Bảng 37 Tỷ lệ dương tiacutenh của tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Nhoacutem chứng

bệnh

(n = 39)

Nhoacutem chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN 859 5385 67 3333

Khaacuteng dsDNA 641 256 67 435

Khaacuteng Nucl 813 256 0 145

Khaacuteng C1q 25 0 0 0

Tỷ lệ dương tiacutenh của caacutec khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh nhacircn

LBĐHT theo thứ tự KTKN (859) gt khaacuteng Nucl (813) gt khaacuteng

dsDNA (641) gt khaacuteng C1q (25) tất cả đều cao hơn rotilde rệt so

với caacutec nhoacutem chứng với p lt 0005

Bảng 38 Nồng độ trung bigravenh của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Chứng

bệnh

(n = 39)

Chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Khaacuteng dsDNA (IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

Khaacuteng Nucl (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Khaacuteng C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

14

Nồng độ trung bigravenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 945 1385 (IUml) vagrave 3221 6034

(IUml) đều cao hơn caacutec nhoacutem chứng với p lt 00001

Bảng 39 Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 8594 6667 8271 7187

Khaacuteng dsDNA 6406 9565 9647 5863

Khaacuteng Nucl 8125 9855 9905 7391

Khaacuteng C1q 25 100 100 4182

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute độ đặc hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương

tiacutenh với LBĐHT tương đương KT khaacuteng dsDNA nhưng độ nhạy vagrave

giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh đều cao hơn Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh cao nhất trong 4 khaacuteng thể trong

khi đoacute KTKN coacute độ nhạy cao nhất nhưng độ đặc hiệu lagrave thấp nhất

Bảng 310 Giaacute trị chẩn đoaacuten của caacutec khaacuteng thể qua đường cong ROC

Khaacuteng thể (AUC) KTKN

(0716)

Khaacuteng

dsDNA

(089)

Khaacuteng

C1q

(0676)

Khaacuteng

Nucl

(0911)

KTKN (0716) p=00001 p=044 plt0001

Khaacuteng dsDNA (089) p=00001 plt0001 p=044

Khaacuteng C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

Khaacuteng Nucl (0911) plt0001 p=044 plt0001

Caacutec khaacuteng thể khaacuteng Nucl khaacuteng dsDNA KTKN vagrave khaacuteng

C1q lần lượt coacute giaacute trị rất tốt tốt khaacute tốt vagrave iacutet giaacute trị trong chẩn đoaacuten

15

LBĐHT Diện tiacutech dưới đường cong ROC (AUC) của caacutec KT khaacuteng

Nucl vagrave khaacuteng dsDNA đều cao hơn coacute yacute nghĩa thống kecirc so với

KTKN vagrave khaacuteng C1q

33 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Bảng 311 Liecircn quan giữa KTKN với caacutec biểu hiện của LBĐHT

Nhoacutem triệu

chứng

KTKN KT khaacuteng

dsDNA

KT khaacuteng

C1q

KT khaacuteng

Nucl

OR p OR p OR p OR p

Tổn thương da

lupus cấp baacuten

cấp

311 007 258 00056 082 055 238 008

Tổn thương da

lupus mạn tiacutenh 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Loeacutet niecircm mạc 057 04 055 026 121 074 291 031

Rụng toacutec 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Biểu hiện khớp 166 025 118 055 142 021 179 017

Viecircm thanh mạc 106 097 129 083 12 088 143 081

Tổn thương

thận 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Tổn thương

thần kinh 088 091 025 01 039 039 025 008

Tan maacuteu 044 048 064 066 026 037 168 066

Giảm BC 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Giảm TC 149 071 3 016 446 002 204 05

Giảm bổ thể 1006 lt00001 327 lt00001 372 lt00001 1611 lt0001

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute

16

liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn

quan với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp tổn thương

da lupus mạn tiacutenh giảm BC vagrave giảm bổ thể Khaacuteng thể khaacuteng C1q

dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng

toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan

với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Bảng 312 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể ở bệnh nhacircn LBĐHT

Khaacuteng thể Tỷ lệ (+) OR p

KTKN (+)

Khaacuteng dsDNA 6932 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3227 393 0012

Khaacuteng Nucl 8924 1089 lt00001

Khaacuteng dsDNA

(+)

KTKN 9943 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3714 274 00005

Khaacuteng Nucl 9543 1144 lt00001

Khaacuteng C1q (+)

Khaacuteng dsDNA 7647 274 00005

KTKN 9529 393 0012

Khaacuteng Nucl 9412 43 0003

Khaacuteng Nucl (+)

KTKN 9333 1089 lt00001

Khaacuteng C1q 3333 43 0003

Khaacuteng dsDNA 6958 1144 lt00001

Sự dương tiacutenh của caacutec tự khaacuteng thể đều coacute mối liecircn quan thuận

coacute yacute nghĩa thống kecirc với nhau (p lt 005) trong đoacute mối liecircn quan rotilde

rệt nhất lagrave giữa 3 khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng Nucl vagrave KTKN

17

Bảng 313 Liecircn quan giữa tự khaacuteng thể với độ hoạt động của bệnh

Khaacuteng thể

Mức độ hoạt động của LBĐHT p

Mạnh

(n = 36) (I)

Trung bigravenh

(n = 67)(II)

Nhẹổn

(n = 185)(III) I vagrave II II vagrave III

KTKN 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Khaacuteng

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Khaacuteng

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

Khaacuteng

Nucl

100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt0000

1

So với nhoacutem bệnh hoạt động trung bigravenh tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh cao hơn rotilde rệt với p =

00025 Nồng độ trung bigravenh của khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave KT

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh đều cao hơn rotilde rệt Tỷ lệ

(+) vagrave nồng độ trung bigravenh của 4 khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh hoạt động

trung bigravenh đều cao hơn so với nhoacutem bệnh hoạt động nhẹ ổn định

Bảng 314 Tương quan giữa nồng độ khaacuteng thể với điểm SLEDAI vagrave

điểm SLICC thận

Khaacuteng thể SLEDAI SLICC thận

r p r p

KTKN 0306 lt00001 0143 lt0013

Khaacuteng dsDNA 056 lt00001 0216 00002

Khaacuteng C1q 0433 lt00001 0399 lt00001

Khaacuteng Nucl 0648 lt00001 0348 00082

18

Nồng độ KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA tương quan thuận

chặt chẽ nhất với điểm SLEDAI (p lt 0001) Nồng độ KT khaacuteng

C1q tương quan chặt chẽ nhất với điểm SLICC thận (r = 0399)

Bảng 315 Thay đổi nồng độ caacutec khaacuteng thể sau đợt cấp

Khaacuteng thể Tỷ lệ

giảm

Khaacutec biệt

trung bigravenh

Test t

gheacutep cặp p

KTKN (OD) 625 -034 -143 016

Khaacuteng dsDNA (IUml) 6458 -19949 -1793 008

Khaacuteng C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

Khaacuteng Nucl (IUml) 8333 -47509 -39 00003

Với 48 đợt cấp được theo dotildei nồng độ trung bigravenh của caacutec KT

khaacuteng C1q (p = 0037) vagrave khaacuteng Nucl (p = 00003) sau đợt cấp giảm

coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Bảng 316 Giaacute trị dự đoaacuten đợt cấp LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 9759 6714 3227 9459

Khaacuteng dsDNA 759 4537 36 823

Khaacuteng C1q 5783 8195 5647 8276

Khaacuteng Nucl 9759 2244 3375 9583

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng C1q 4819 878 6154 8072

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng Nucl 759 4927 3772 8347

Khaacuteng Nucl + Khaacuteng C1q 5783 8439 60 8317

Trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT KTKN vagrave khaacuteng Nucl đều coacute

độ nhạy cao vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh cao gt 94 nhưng độ đặc hiệu

khaacute thấp Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu cao nhất (8195)

đặc biệt khi dương tiacutenh đồng thời với KT khaacuteng dsDNA (878)

19

Chƣơng 4 BAgraveN LUẬN

41 Đặc điểm của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT

411 Phacircn bố về tuổi vagrave giới tỷ lệ bệnh nhacircn nữ chiếm tới

9297 với tuổi trung bigravenh lagrave 311 946 trong đoacute phần lớn thuộc

nhoacutem tuổi từ 16 ndash 45 (929) Kết quả nagravey hoagraven toagraven phugrave hợp với

những kết quả nghiecircn cứu trước đacircy cho thấy đặc điểm dịch tễ học

cơ bản của LBĐHT lagrave thường xảy ra ở phụ nữ trong độ tuổi sinh đẻ

412 Về tuổi khởi phaacutet bệnh phần lớn bệnh nhacircn LBĐHT

khởi phaacutet bệnh trong giai đoạn 15 - 45 tuổi (852) tuổi khởi phaacutet

bệnh trung bigravenh lagrave 2593 974 Khaacute nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học

trecircn qui mocirc lớn cho thấy LBĐHT thường coacute xu hướng khởi phaacutet ở

nữ giới trong nhoacutem tuổi từ 15 - 45 giai đoạn coacute sự hoạt động mạnh

mẽ nhất của caacutec tuyến nội tiết hướng sinh dục nữ

413 Tiền sử gia đigravenh coacute ngƣời mắc LBĐHT 469 số

bệnh nhacircn LBĐHT coacute iacutet nhất một người thacircn trong gia đigravenh cugraveng

mắc bệnh Nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học đatilde cho thấy tỷ lệ mắc

LBĐHT ở những người thacircn của người bệnh thường cao gấp khoảng

10 - 20 lần so với tỷ lệ mắc chung trong cộng đồng (4 - 12) cho

thấy vai trograve của yếu tố di truyền trong cơ chế bệnh sinh của LBĐHT

414 Caacutec biểu hiện của LBĐHT Caacutec biểu hiện bệnh gặp

nhiều nhất lagrave rụng toacutec - 531 tổn thương thận - 453 tổn thương

da lupus cấp baacuten cấp - 383 giảm bạch cầu - 382 vagrave giảm bổ

thể - 622 Những kết quả nagravey khaacute tương đồng với nghiecircn cứu của

nhiều taacutec giả trong vagrave ngoagravei nước tuy nhiecircn tỷ lệ viecircm thanh mạc

tổn thương thần kinh vagrave giảm tiểu cầu gặp khaacute thấp nguyecircn nhacircn coacute

thể do sự khaacutec nhau trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu vagrave sự

khaacutec biệt về đặc điểm lacircm sagraveng của LBĐHT giữa caacutec chủng tộc

20

42 Về tỷ lệ dƣơng tiacutenh vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự

khaacuteng thể

421 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN)

Về tỷ lệ dương tiacutenh 859 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute KTKN

dương tiacutenh ở lần khaacutem 1 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ

dương tiacutenh của KTKN ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute sự dao động khaacute lớn

trong khoảng 60 ndash 100 nguyecircn nhacircn coacute thể lagrave do sự khaacutec biệt

trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu thiết kế nghiecircn cứu kỹ

thuật xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể sự

đảo chiều huyết thanh của KTKN

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm

tiacutenh của KTKN lần lượt lagrave 8594 vagrave 7231 khaacute thấp so với caacutec

kết quả nghiecircn cứu trước đacircy nguyecircn nhacircn coacute thể do nhoacutem bệnh

nhacircn nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute tỷ lệ KTKN acircm tiacutenh khaacute cao

(141) sự khaacutec biệt về caacutech thức lựa chọn vagrave đặc điểm của nhoacutem

chứng Độ đặc hiệu của KTKN với LBĐHT lagrave khaacute thấp (4615)

khi sử dụng nhoacutem chứng mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec nguyecircn nhacircn lagrave

do KTKN coacute thể xuất hiện trong nhiều bệnh lyacute tự miễn khaacutec

422 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA

Về tỷ lệ dương tiacutenh bệnh nhacircn LBĐHT 641 số bệnh nhacircn

LBĐHT trong nghiecircn cứu coacute KT khaacuteng dsDNA dương tiacutenh nằm

trong dải biến thiecircn 37 - 85 của caacutec kết quả nghiecircn cứu trước đacircy

Caacutec yếu tố coacute ảnh hưởng rotilde rệt nhất đến tỷ lệ nagravey lagrave mức độ hoạt

động vagrave tổn thương nội tạng của caacutec đối tượng nghiecircn cứu kỹ thuật

xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ đặc hiệu của KT khaacuteng

dsDNA trong chẩn đoaacuten LBĐHT ở nghiecircn cứu nagravey lagrave 9333 khi sử

dụng nhoacutem chứng khỏe mạnh vagrave 9744 khi sử dụng nhoacutem chứng

21

mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec tức lagrave hoagraven toagraven phugrave hợp với caacutec kết quả

nghiecircn cứu trước đacircy (95 ndash 100) Traacutei với độ đặc hiệu độ nhạy của

KT khaacuteng dsDNA với LBĐHT thường khocircng cao vagrave coacute khoảng dao

động khaacute lớn (13 - 86) Nguyecircn nhacircn coacute thể do tiacutenh chất dao động

thường xuyecircn của khaacuteng thể nagravey trong quaacute trigravenh diễn biến bệnh vagrave

độ nhạy khaacutec nhau của caacutec kỹ thuật xeacutet nghiệm miễn dịch

423 Khaacuteng thể khaacuteng C1q

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở bệnh nhacircn LBĐHT dao động trong khoảng 15 ndash

63 theo caacutec nghiecircn cứu trước đacircy kết quả của chuacuteng tocirci lagrave 25 ở

lần khaacutem 1 Trong 3 nghiecircn cứu coacute cỡ mẫu lớn nhất của Julkunen H

(2012) Mok CC (2010) vagrave Orbai AM (2015) tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q đều tương đối thấp vagrave iacutet coacute sự khaacutec biệt

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT KT khaacuteng C1q coacute giaacute trị keacutem

nhất trong chẩn đoaacuten vagrave phacircn loại LBĐHT với diện tiacutech dưới đường

cong ROC lagrave 0676 vagrave độ nhạy chỉ lagrave 25 Tỷ lệ dương tiacutenh thấp vagrave

dao động thường xuyecircn ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute thể lagrave nguyecircn nhacircn

chiacutenh lagravem giảm độ nhạy của khaacuteng thể nagravey trong chẩn đoaacuten bệnh

424 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome (KT khaacuteng Nucl )

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT Tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT trong nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci

lagrave 813 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ nagravey coacute khoảng dao

động rộng từ 45 đến 100 nguyecircn nhacircn lagrave do sự khaacutec biệt của caacutec

đối tượng nghiecircn cứu về chủng tộc vagrave mức độ hoạt động bệnh

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT nhiều nghiecircn cứu đatilde cho thấy độ

đặc hiệu rất cao của KT khaacuteng Nucl với LBĐHT (90 ndash 100) tương

đồng với kết quả thu được của chuacuteng tocirci lagrave 987 Nguyecircn nhacircn coacute

thể do nucleosome lagrave tự khaacuteng nguyecircn coacute vai trograve quan trọng trong cơ

22

chế bệnh sinh của LBĐHT Độ nhạy của KT khaacuteng Nucl với

LBĐHT trong nghiecircn cứu nagravey lagrave 8125 cao hơn so với KT khaacuteng

dsDNA (6406)

43 Về liecircn quan giữa caacutec khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

431 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh (ge 12

OD) ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với sự xuất

hiện của giảm bổ thể vagrave caacutec tự khaacuteng thể khaacutec Mối liecircn quan giữa

khaacuteng thể nagravey với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của

LBĐHT trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy lagrave khocircng rotilde rệt do thiếu

những bằng chứng đaacuteng tin cậy

432 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với caacutec biểu

hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp hoặc mạn tiacutenh giảm bạch cầu

vagrave giảm bổ thể nhưng khocircng liecircn quan với tổn thương thận lupus

Nồng độ vagrave tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng dsDNA ở nhoacutem bệnh

nhacircn trong đợt cấp đều cao hơn so với nhoacutem ngoagravei đợt cấp tuy nhiecircn

khaacuteng thể nagravey coacute liecircn quan khocircng hằng định với cả hoạt tiacutenh chung

của LBĐHT vagrave tổn thương thận đặc biệt lagrave với đợt cấp của bệnh

433 Khaacuteng thể khaacuteng C1q khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh ở

bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan rotilde rệt với sự xuất hiện của tổn thương

thận vagrave giảm bổ thể Độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey trong dự baacuteo tổn

thương thận lupus cao hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại vagrave nồng độ của noacute

tương quan nghịch khaacute chặt với cả bổ thể C3 vagrave C4 (p lt 00001) Tỷ

lệ vagrave nồng độ trung bigravenh của KT khaacuteng C1q đều coacute xu hướng tăng

dần theo mức độ hoạt động của bệnh Tương quan giữa nồng độ KT

khaacuteng C1q với điểm SLICC thận vagrave độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey

trong dự baacuteo đợt cấp thận lupus cũng tốt hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại

23

434 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện tổn thương

da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận giảm BC vagrave giảm bổ thể Độ

nhạy trong dự baacuteo tổn thương thận lupus của KT khaacuteng Nucl cao

hơn so với caacutec khaacuteng thể cograven lại Tương quan với nồng độ bổ thể vagrave

điểm SLEDAI của khaacuteng thể nagravey cũng chặt chẽ hơn caacutec khaacuteng thể

cograven lại

KẾT LUẬN

Qua nghiecircn cứu 128 bệnh nhacircn LBĐHT với nhoacutem chứng gồm

39 người mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec vagrave 30 người khỏe mạnh chuacuteng

tocirci xin đưa ra một số kết luận sau

1 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten của một

số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể

Tỷ lệ dương tiacutenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 855 641 25 vagrave

813 tất cả đều cao hơn rotilde rệt so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở 587 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute

KT khaacuteng dsDNA acircm tiacutenh

Nồng độ trung bigravenh của caacutec KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng

C1q vagrave khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 3221 6034 (IUml) vagrave 945 1385

(IUml) tất cả đều cao hơn so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn coacute độ nhạy cao (8594) nhưng độ đặc

hiệu thấp (6667) với LBĐHT Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh 100 với LBĐHT nhưng độ nhạy

rất thấp (25)

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 5: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

2

khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng C1q hellip cũng đều cho thấy độ

nhạy vagrave độ đặc hiệu khaacute cao trong chẩn đoaacuten LBĐHT vagrave caacutec tổn

thương nội tạng của bệnh Becircn cạnh đoacute một số loại khaacuteng thể đatilde

được chứng minh coacute mối liecircn quan khaacute rotilde rệt với mức độ hoạt động

của bệnh vagrave một số tổn thương nội tạng của LBĐHT như caacutec khaacuteng

thể khaacuteng dsDNA khaacuteng nucleosome khaacuteng C1qhellip Sự xuất hiện

vagrave biến đổi nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể nagravey phản aacutenh khaacute tốt sự

dao động hoạt tiacutenh vagrave coacute thể giuacutep dự baacuteo trước caacutec đợt cấp của bệnh

Do đoacute nhiều loại tự khaacuteng thể đatilde được sử dụng rộng ratildei trong thực

hagravenh lacircm sagraveng như những cocircng cụ giuacutep hỗ trợ việc đaacutenh giaacute vagrave theo

dotildei mức độ hoạt động của LBĐHT một caacutech nhanh choacuteng vagrave tiện lợi

Việc coacute được những hiểu biết đầy đủ hơn về đặc điểm của caacutec

tự khaacuteng thể trong LBĐHT coacute thể giuacutep caacutec thagravey thuốc coacute thecircm

những cocircng cụ coacute tiacutenh khả thi vagrave đủ độ tin cậy để chẩn đoaacuten đaacutenh

giaacute vagrave theo dotildei mức độ hoạt động của bệnh Vigrave lyacute do nagravey tocirci quyết

định lựa chọn đề tagravei ldquoNghiecircn cứu mối tương quan giữa mức độ hoạt

động của bệnh với một số tự khaacuteng thể trong lupus ban đỏ hệ thốngrdquo

nhằm caacutec mục tiecircu sau

1 Xaacutec định tỷ lệ dương tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten bệnh

lupus ban đỏ hệ thống của caacutec tự khaacuteng thể khaacuteng nhacircn khaacuteng dsDNA

khaacuteng C1q vagrave khaacuteng nucleosome

2 Khảo saacutet mối liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể nagravey với một số

biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của bệnh lupus ban đỏ hệ

thống

2 Những đoacuteng goacutep mới của đề tagravei

Đacircy lagrave cocircng trigravenh đầu tiecircn trong nước nghiecircn cứu giaacute trị chẩn

đoaacuten LBĐHT vagrave tổn thương thận lupus của caacutec khaacuteng thể mới lagrave

khaacuteng thể khaacuteng nucleosome vagrave khaacuteng C1q coacute so saacutenh với hai loại

3

khaacuteng thể cổ điển lagrave khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) vagrave khaacuteng

dsDNA nhằm tigravem kiếm những cocircng cụ tối ưu cho việc chẩn đoaacuten

bệnh Kết quả thu được của nghiecircn cứu đatilde cho thấy giaacute trị rất tốt của

khaacuteng thể khaacuteng nucleosome trong chẩn đoaacuten LBĐHT vagrave độ đặc

hiệu cao của khaacuteng thể khaacuteng C1q với tổn thương thận lupus

Đacircy cũng lagrave nghiecircn cứu theo dotildei dọc đầu tiecircn ở Việt Nam đaacutenh

giaacute mối liecircn quan giữa sự dương tiacutenh vagrave nồng độ của KTKN khaacuteng

dsDNA khaacuteng C1q vagrave khaacuteng nucleosome với mức độ hoạt động của

bệnh LBĐHT vagrave tổn thương thận lupus Kết quả thu được của nghiecircn

cứu đatilde cho thấy KT khaacuteng nucleosome coacute liecircn quan với mức độ hoạt

động của bệnh chặt chẽ hơn vagrave giaacute trị dự baacuteo đợt cấp bệnh tốt hơn so

với KT khaacuteng dsDNA Khaacuteng thể khaacuteng C1q cũng coacute mối liecircn quan

với sự xuất hiện vagrave mức độ hoạt động của tổn thương thận lupus chặt

chẽ hơn so với KT khaacuteng dsDNA

3 Bố cục của luận aacuten

Luận aacuten gồm 144 trang gồm Đặt vấn đề (2 trang) tổng quan

tagravei liệu (42 trang) đối tượng vagrave phương phaacutep nghiecircn cứu (17 trang)

kết quả nghiecircn cứu (30 trang) bagraven luận (50 trang) kết luận (2 trang)

vagrave kiến nghị (1 trang)

Toagraven bộ luận aacuten coacute 48 bảng 15 higravenh sơ đồ vagrave biểu đồ

Tagravei liệu tham khảo bao gồm 191 tagravei liệu (9 tiếng Việt vagrave 182

tiếng Anh)

Chƣơng 1 TỔNG QUAN TAgraveI LIỆU

11 Vagravei neacutet về cơ chế điều hogravea vagrave tiacutenh chất sinh bệnh học của caacutec

tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Caacutec tế bagraveo B tự phản ứng bị hoạt hoacutea khi gặp caacutec tự khaacuteng

nguyecircn đặc hiệu với sự coacute mặt của caacutec tế bagraveo T hỗ trợ Sau đoacute

chuacuteng trải qua quaacute trigravenh chuyển đổi isotype siecircu đột biến dạng cơ

4

thể vagrave chọn lọc dograveng để tạo ra caacutec tế bagraveo B hiệu ứng coacute chức năng

giải phoacuteng caacutec tự khaacuteng thể IgG vagraveo hệ tuần hoagraven Caacutec khaacuteng thể

nagravey tạo thagravenh PHMD dư thừa tiacutech tụ vagrave gacircy tổn thương viecircm tại caacutec

cơ quan

12 Tổng quan chẩn đoaacuten vagrave đaacutenh giaacute độ hoạt động của LBĐHT

121 Chẩn đoaacuten LBĐHT

Lupus ban đỏ hệ thống coacute biểu hiện lacircm sagraveng rất đa dạng nhưng

phần lớn caacutec biểu hiện lagrave khocircng đặc hiệu gacircy khoacute khăn cho việc chẩn

đoaacuten Hiện chưa coacute caacutec cocircng cụ dagravenh riecircng cho chẩn đoaacuten LBĐHT

necircn caacutec bộ tiecircu chuẩn phacircn loại bệnh của Hội Khớp học Mỹ năm

1997 (ACR 1997) vagrave Tổ chức Hợp taacutec Quốc tế về LBĐHT năm 2012

(SLICC 2012) thường được sử dụng trecircn lacircm sagraveng cho mục điacutech nagravey

122 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của LBĐHT khocircng coacute yếu tố

chỉ điểm đơn lẻ coacute thể đaacutenh giaacute chiacutenh xaacutec mức độ hoạt động của

bệnh Chưa coacute cocircng cụ đaacutenh giaacute vagrave đo lường mức độ hoạt động của

LBĐHT nagraveo được cho lagrave tối ưu để aacutep dụng trong thực tiễn

13 Yacute nghĩa lacircm sagraveng của một số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

131 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh coacute độ

nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh rất cao với LBĐHT nhưng độ đặc

hiệu thấp do coacute thể gặp trong nhiều bệnh khaacutec Khaacuteng thể nagravey coacute

mối liecircn quan khocircng rotilde rệt với mức độ hoạt động của LBĐHT

132 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng dsDNA coacute độ đặc hiệu cao

(95-100) vagrave lagrave một trong caacutec tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten LBĐHT tuy

nhiecircn độ nhạy khocircng cao vigrave noacute thường chỉ dương tiacutenh tạm thời

Khaacuteng thể nagravey coacute mối tương quan thuận khaacute rotilde với mức độ hoạt

động của bệnh KT khaacuteng dsDNA coacute độ nhạy khaacute cao trong chẩn

đoaacuten phacircn biệt giữa LBĐHT ổn định vagrave hoạt động nhưng khocircng

hằng định giữa caacutec nghiecircn cứu Theo dotildei định kỳ khaacuteng thể nagravey ở

5

bệnh nhacircn LBĐHT cho thấy sự biến đổi nồng độ của noacute coacute liecircn

quan rotilde rệt với sự xuất hiện caacutec đợt cấp của bệnh sau đoacute

133 Khaacuteng thể khaacuteng C1q được tigravem thấy trong LBĐHT vagrave nhiều

bệnh lyacute khaacutec như magravey đay viecircm mạch giảm bổ thể phugrave mạch di

truyền viecircm khớp dạng thấp hellip Khaacuteng thể nagravey coacute độ nhạy vagrave độ đặc

hiệu khocircng cao trong chẩn đoaacuten LBĐHT nhưng lagrave một trong những

khaacuteng thể coacute liecircn quan rotilde rệt nhất với tổn thương thận lupus Nồng

độ của KT khaacuteng C1q coacute mối tương quan chặt chẽ với mức độ hoạt

động của LBĐHT đặc biệt lagrave với tổn thương thận Khaacuteng thể nagravey coacute

giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh vagrave độ đặc hiệu khaacute cao với đợt cấp thận lupus

134 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute độ

nhạy dao động trong khoảng 50-90 vagrave độ đặc hiệu lagrave 90-99 trong

chẩn đoaacuten LBĐHT Caacutec nghiecircn cứu so saacutenh đối đầu giữa khaacuteng thể

nagravey vagrave KT khaacuteng dsDNA cho thấy KT khaacuteng Nucl coacute độ đặc hiệu

tương đương nhưng độ nhạy cao hơn so rotilde rệt Ngoagravei ra nồng độ KT

khaacuteng Nucl cũng coacute mối tương quan chặt chẽ với caacutec chỉ số đaacutenh giaacute

mức độ hoạt động của bệnh vagrave tổn thương thận lupus

Chƣơng 2 ĐỐI TƢỢNG VAgrave PHƢƠNG PHAacuteP

21 Đối tƣợng nghiecircn cứu

211 Nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT

Bao gồm 128 bệnh nhacircn được chẩn đoaacuten lupus ban đỏ hệ

thống theo tiecircu chuẩn SLICC 2012 theo dotildei vagrave điều trị tại Trung tacircm

Dị ứng ndash Miễn dịch Lacircm sagraveng vagrave Phograveng Quản lyacute bệnh lupus ban đỏ

hệ thống Khoa Khaacutem bệnh - Bệnh viện Bạch Mai từ thaacuteng 032014

đến thaacuteng 022016

Tiecircu chuẩn loại trừ phụ nữ coacute thai bệnh nhacircn coacute mắc kegravem

caacutec bệnh nội khoa nặng như tiểu đường suy tim suy chức năng gan

6

bệnh nhacircn bị mắc giang mai hoặc HIVAIDS bệnh nhacircn coacute mắc

kegravem caacutec bệnh tự miễn khaacutec bệnh nhacircn khocircng đồng yacute tham gia

nghiecircn cứu

212 Nhoacutem chứng

Nhoacutem chứng bệnh bao gồm 39 người mắc caacutec bệnh tự

miễn dịch khaacutec LBĐHT được chẩn đoaacuten xaacutec định vagrave điều trị tại

Trung tacircm Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng BV Bạch Mai vagrave phograveng

khaacutem chuyecircn khoa Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng khoa Khaacutem Bệnh

BV Bạch Mai từ 22016 đến 4 2016

Khocircng phacircn biệt tuổi giới nghề nghiệp trigravenh độ học vấn

nơi cư truacute

Khocircng bị suy tế bagraveo gan hoặc hoặc nhiễm HIVAIDS

Chấp nhận tham gia nghiecircn cứu

Nhoacutem chứng khỏe mạnh 30 người khỏe mạnh coacute độ tuổi

vagrave phacircn bố giới tiacutenh tương đồng với nhoacutem bệnh nhacircn nghiecircn cứu

Khocircng coacute tiền sử mắc caacutec bệnh lyacute tự miễn khocircng coacute người

thacircn thuộc caacutec thế hệ thứ nhất vagrave thứ 2 mắc caacutec bệnh lyacute tự miễn dịch

Khocircng phacircn biệt nghề nghiệp trigravenh độ học vấn nơi cư truacute

Chấp nhận tham gia nghiecircn cứu

22 Phƣơng phaacutep nghiecircn cứu

221 Phƣơng phaacutep nghiecircn cứu Mocirc tả cắt ngang + theo dotildei dọc

222 Chọn mẫu

Mẫu nghiecircn cứu được lấy theo phương phaacutep chọn mẫu thuận

tiện Caacutec đối tượng được lựa chọn theo trigravenh tự thời gian khocircng

phacircn biệt tuổi taacutec giới tiacutenh mức độ hoạt động vagrave hủy hoại vĩnh viễn

223 Cỡ mẫu

Cỡ mẫu nghiecircn cứu mocirc tả cắt ngang được tiacutenh dựa theo cocircng

thức dugraveng để ước tiacutenh một tỷ lệ của tổ chức y tế thế giới

7

trong đoacute n lagrave cỡ mẫu tối thiểu lagrave mức yacute nghĩa thống kecirc tương ứng

với khoảng tin cậy 95 = 005 Z1-2 lagrave Z score tương ứng với

mức yacute nghĩa thống kecirc mong muốn với = 005 thigrave Z1-2 = 196 p lagrave

tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng nucleosome ở bệnh nhacircn LBĐHT (p

= 0909 theo Đặng Thu Hương - Tạp chiacute Y học Thagravenh phố Hồ Chiacute

Minh 2013 tập 17 phụ bản 1 tr 294-300) q = 1 - p = 0091 d lagrave độ

chiacutenh xaacutec tuyệt đối mong muốn chọn d = 005 Từ đoacute tiacutenh được n =

1271 Nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute cỡ mẫu lagrave 128 bệnh nhacircn

224 Caacutec bƣớc tiến hagravenh nghiecircn cứu

2241 Nhoacutem bệnh nhacircn lupus ban đỏ hệ thống

Lựa chọn vagraveo danh saacutech nghiecircn cứu vagrave gắn matilde bệnh aacuten

Lần khaacutem 1 khaacutem lacircm sagraveng khai thaacutec tiền sử xeacutet nghiệm

CLS thocircng thường (định lượng urecirc creatinin glucose AST ALT

albumin cholesterol triglyceride C3 vagrave C4 bổ thể trong huyết thanh

tế bagraveo niệu trụ niệu định lượng protein niệu 24 giờhellip) định lượng

khaacuteng thể khaacuteng nhacircn khaacuteng dsDNA khaacuteng nucleosome vagrave khaacuteng

C1q phacircn tiacutech caacutec nhoacutem triệu chứng bệnh đaacutenh giaacute điểm SELENA-

SLEDAI mức độ hoạt động của bệnh sự xuất hiện đợt cấp của

bệnh Chỉ số Hoạt động Thận của SLICC 2008 đợt cấp thận lupus

Theo dotildei định kỳ caacutec bệnh nhacircn được thăm khaacutem định kỳ

hagraveng thaacuteng hoặc ngay khi coacute caacutec dấu hiệu bất thường Quaacute trigravenh

nghiecircn cứu kết thuacutec khi bệnh nhacircn được theo dotildei đủ 12 thaacuteng hoặc

khi được phaacutet hiện coacute thai hoặc bị mất theo dotildei Caacutec bước thăm

khaacutem gồm khaacutem lacircm sagraveng xeacutet nghiệm CLS thocircng thường đaacutenh giaacute

caacutec triệu chứng bệnh sự xuất hiện đợt cấp của LBĐHT điểm SLICC

thận sự xuất hiện của đợt cấp thận lupus Định lượng khaacuteng thể

trong caacutec lần khaacutem coacute ghi nhận đợt cấp mới xuất hiện của bệnh hoặc

8

caacutec lần khaacutem được thực hiện trong vograveng 2 thaacuteng sau khi người bệnh

ra đatilde khỏi đợt cấp vagrave lần khaacutem cuối cugraveng Đaacutenh giaacute điểm SLEDAI

vagrave mức độ hoạt động bệnh ở caacutec lần khaacutem coacute xeacutet nghiệm khaacuteng thể

2242 Nhoacutem chứng 2 nhoacutem chứng được tiến hagravenh xeacutet nghiệm 4

loại khaacuteng thể tương tự nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT ở lần khaacutem 1

225 Địa điểm vagrave phƣơng phaacutep tiến hagravenh caacutec xeacutet nghiệm CLS

2251 Caacutec xeacutet nghiệm cận lacircm sagraveng thocircng thường được thực hiện

tại caacutec khoa phograveng tương ứng của Bệnh viện Bạch Mai

2252 Xeacutet nghiệm caacutec tự khaacuteng thể

a Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) vagrave khaacuteng dsDNA được định lượng

bằng kỹ thuật ELISA trecircn maacutey baacuten tự động Imarkreg của Hatildeng BIO-

RAD (kit của Hatildeng DRG) Địa điểm thực hiện phograveng xeacutet nghiệm

miễn dịch Trung tacircm Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng BV Bạch Mai

b Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng nucleosome được phaacutet hiện vagrave

định lượng bằng kỹ thuật ELISA trecircn maacutey tự động Alegriareg của

Hatildeng Orgentec (Đức) sử dụng kit của Hatildeng Orgentec Địa điểm

thực hiện tại Khoa Xeacutet nghiệm BV Đại học Y Hagrave Nội

226 Caacutec tiecircu chuẩn đaacutenh giaacute đƣợc sử dụng trong nghiecircn cứu

2261 Đaacutenh giaacute caacutec biểu hiện của bệnh LBĐHT dựa theo caacutec

tiecircu chuẩn lacircm sagraveng của SLICC 2012

2262 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của bệnh dựa theo tiecircu chuẩn

đaacutenh giaacute của cocircng cụ SELENA-SLEDAI

2263 Đaacutenh giaacute đợt cấp của LBĐHT Dựa vagraveo định nghĩa sử dụng

trong nghiecircn cứu SELENA

2264 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của tổn thương thận lupus

dựa vagraveo chỉ số hoạt động thận của SLICC năm 2008

2265 Đaacutenh giaacute đợt cấp tổn thương thận lupus dựa theo tiecircu

chuẩn của EULAR năm 2009

9

227 Sai số vagrave caacutech khắc phục sai số khắc phục caacutec sai số bằng

caacutech khai thaacutec kỹ triệu chứng lacircm sagraveng tiền sử kiểm tra vagrave đaacutenh giaacute

lại caacutec chỉ số hoạt động bệnh lagravem sạch số liệu trước khi xử lyacute

228 Xử lyacute số liệu Caacutec số liệu nghiecircn cứu được xử lyacute bằng phần

mềm toaacuten thống kecirc MEDCALC 140

229 Đạo đức của nghiecircn cứu

Nghiecircn cứu được tiến hagravenh tại caacutec cơ sở y tế coacute uy tiacuten với sự

đồng yacute của latildenh đạo caacutec đơn vị Đacircy lagrave nghiecircn cứu mocirc tả khocircng coacute

can thiệp tất cả caacutec đối tượng nghiecircn cứu đều tự nguyện tham gia

Caacutec số liệu thu được chỉ phục vụ cho mục điacutech nghiecircn cứu vagrave chăm

soacutec sức khỏe người bệnh khocircng phục vụ cho caacutec mục điacutech khaacutec

Chƣơng 3 KẾT QUẢ NGHIEcircN CỨU

31 Đặc điểm chung của caacutec đối tƣợng nghiecircn cứu

Bảng 31 Đặc điểm về tuổi vagrave giới

Nhoacutem nghiecircn cứu n Tuổi (X ) Tỷ lệ nữ nam

Nhoacutem LBĐHT 128 311 946 1322

Nhoacutem chứng bệnh 39 4305 17 333

Nhoacutem chứng khỏe 30 3163 1357 14

p 000036

04

0011

074

Nhoacutem LBĐHT so với nhoacutem chứng bệnh

Nhoacutem LBĐHT so với nhoacutem chứng khỏe

Tuổi trung bigravenh của nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lagrave 311 946

thấp hơn so với nhoacutem chứng bệnh (p = 000036) nhưng khocircng khaacutec

biệt so với nhoacutem chứng khỏe mạnh (p = 04) Tỷ lệ nữnam ở nhoacutem

LBĐHT lagrave 1322 tương đương nhoacutem chứng khỏe mạnh (p = 074)

nhưng cao hơn so với nhoacutem chứng bệnh (p = 0011)

Bảng 32 Phacircn bố theo nhoacutem tuổi của nhoacutem LBĐHT

Nhoacutem tuổi 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Tổng

10

n 1 67 52 7 1 128

Tỷ lệ 08 523 406 55 08 100

Caacutec bệnh nhacircn phần lớn gặp trong nhoacutem tuổi 20 ndash 30 (437)

vagrave 31 ndash 40 (336) thấp nhất lagrave ở nhoacutem gt 50 tuổi (47) Phacircn bố

caacutec nhoacutem tuổi khocircng coacute sự khaacutec biệt giữa 2 giới với p = 051

Bảng 33 Phacircn bố bệnh nhacircn LBĐHT theo thời gian mắc bệnh

Khoảng thời

gian (năm) Số lƣợng Tỷ lệ ()

Thời gian

trung bigravenh

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

TỔNG SỐ 128 100 517 37

Thời gian mắc bệnh của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT gặp nhiều

nhất trong khoảng 2 ndash 5 năm (516) vagrave 6 ndash 10 năm (25) Thời

gian mắc bệnh trung bigravenh lagrave 517 37 (năm)

Bảng 34 Phacircn bố bệnh nhacircn LBĐHT theo tuổi khởi phaacutet bệnh

Nhoacutem tuổi Số lƣợng Tỷ lệ () Tuổi trung bigravenh

15 14 109 1271 23

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

TỔNG SỐ 128 100 2593 974

Phần lớn bệnh nhacircn khởi phaacutet bệnh ở độ tuổi 16 ndash 25 (43) vagrave

26 ndash 35 (281) Số bệnh nhacircn khởi phaacutet bệnh sau 45 tuổi chỉ chiếm

11

39 Tuổi phaacutet bệnh trung bigravenh của caacutec bệnh nhacircn lagrave 2593 974

Tiền sử mắc LBĐHT của người thacircn 6128 bệnh nhacircn

LBĐHT coacute người thacircn trong gia đigravenh (cha mẹ anh chị em ruột)

cugraveng mắc LBĐHT chiếm tỷ lệ 469

12

Bảng 35 Một số biểu hiện lacircm sagraveng ở thời điểm đầu nghiecircn cứu

Tỷ lệ gặp cao nhất lagrave caacutec biểu hiện giảm bổ thể (622) rụng

toacutec (531) vagrave tổn thương thận (453) Iacutet gặp nhất lagrave caacutec biểu hiện

viecircm thanh mạc tan maacuteu (23) vagrave tổn thương thần kinh (31)

Bảng 36 Mức độ hoạt động của LBĐHT

TT Mức độ hoạt động Số lƣợng Tỷ lệ ()

1 Ổn định 15 117

2 Hoạt động nhẹ 57 445

3 Hoạt động trung bigravenh 37 289

4 Hoạt động mạnh 19 148

5 Đợt cấp LBĐHT 51 398

6 Điểm SLEDAI (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Điểm SLICC thận (X ) 312 42 (0 - 15)

TT Tiecircu chuẩn n Tỷ lệ ()

1 Caacutec tổn thương da lupus cấp baacuten cấp 49 383

2 Caacutec tổn thương da lupus mạn tiacutenh 21 164

3 Loeacutet niecircm mạc 9 7

4 Rụng toacutec 68 531

5 Biểu hiện khớp 45 352

6 Viecircm thanh mạc 3 23

7 Tổn thương thận 58 453

8 Tổn thương thần kinh 4 31

9 Thiếu maacuteu tan maacuteu 3 23

10 Giảm bạch cầu 42 328

11 Giảm tiểu cầu 5 39

12 Giảm bổ thể 79 622

13

Ở thời điểm khởi đầu nghiecircn cứu phần lớn bệnh nhacircn coacute bệnh

hoạt động ở mức độ nhẹ vagrave trung bigravenh (lần lượt chiếm 445 vagrave

289) Điểm SLEDAI dao động khaacute lớn trong khoảng 0 ndash 41

(trung bigravenh lagrave 661 62) Tỷ lệ bệnh nhacircn coacute đợt cấp LBĐHT lagrave

398 Điểm SLICC thận lupus trung bigravenh lagrave 312 42

32 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của

caacutec tự khaacuteng thể

Bảng 37 Tỷ lệ dương tiacutenh của tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Nhoacutem chứng

bệnh

(n = 39)

Nhoacutem chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN 859 5385 67 3333

Khaacuteng dsDNA 641 256 67 435

Khaacuteng Nucl 813 256 0 145

Khaacuteng C1q 25 0 0 0

Tỷ lệ dương tiacutenh của caacutec khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh nhacircn

LBĐHT theo thứ tự KTKN (859) gt khaacuteng Nucl (813) gt khaacuteng

dsDNA (641) gt khaacuteng C1q (25) tất cả đều cao hơn rotilde rệt so

với caacutec nhoacutem chứng với p lt 0005

Bảng 38 Nồng độ trung bigravenh của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Chứng

bệnh

(n = 39)

Chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Khaacuteng dsDNA (IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

Khaacuteng Nucl (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Khaacuteng C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

14

Nồng độ trung bigravenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 945 1385 (IUml) vagrave 3221 6034

(IUml) đều cao hơn caacutec nhoacutem chứng với p lt 00001

Bảng 39 Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 8594 6667 8271 7187

Khaacuteng dsDNA 6406 9565 9647 5863

Khaacuteng Nucl 8125 9855 9905 7391

Khaacuteng C1q 25 100 100 4182

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute độ đặc hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương

tiacutenh với LBĐHT tương đương KT khaacuteng dsDNA nhưng độ nhạy vagrave

giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh đều cao hơn Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh cao nhất trong 4 khaacuteng thể trong

khi đoacute KTKN coacute độ nhạy cao nhất nhưng độ đặc hiệu lagrave thấp nhất

Bảng 310 Giaacute trị chẩn đoaacuten của caacutec khaacuteng thể qua đường cong ROC

Khaacuteng thể (AUC) KTKN

(0716)

Khaacuteng

dsDNA

(089)

Khaacuteng

C1q

(0676)

Khaacuteng

Nucl

(0911)

KTKN (0716) p=00001 p=044 plt0001

Khaacuteng dsDNA (089) p=00001 plt0001 p=044

Khaacuteng C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

Khaacuteng Nucl (0911) plt0001 p=044 plt0001

Caacutec khaacuteng thể khaacuteng Nucl khaacuteng dsDNA KTKN vagrave khaacuteng

C1q lần lượt coacute giaacute trị rất tốt tốt khaacute tốt vagrave iacutet giaacute trị trong chẩn đoaacuten

15

LBĐHT Diện tiacutech dưới đường cong ROC (AUC) của caacutec KT khaacuteng

Nucl vagrave khaacuteng dsDNA đều cao hơn coacute yacute nghĩa thống kecirc so với

KTKN vagrave khaacuteng C1q

33 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Bảng 311 Liecircn quan giữa KTKN với caacutec biểu hiện của LBĐHT

Nhoacutem triệu

chứng

KTKN KT khaacuteng

dsDNA

KT khaacuteng

C1q

KT khaacuteng

Nucl

OR p OR p OR p OR p

Tổn thương da

lupus cấp baacuten

cấp

311 007 258 00056 082 055 238 008

Tổn thương da

lupus mạn tiacutenh 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Loeacutet niecircm mạc 057 04 055 026 121 074 291 031

Rụng toacutec 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Biểu hiện khớp 166 025 118 055 142 021 179 017

Viecircm thanh mạc 106 097 129 083 12 088 143 081

Tổn thương

thận 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Tổn thương

thần kinh 088 091 025 01 039 039 025 008

Tan maacuteu 044 048 064 066 026 037 168 066

Giảm BC 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Giảm TC 149 071 3 016 446 002 204 05

Giảm bổ thể 1006 lt00001 327 lt00001 372 lt00001 1611 lt0001

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute

16

liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn

quan với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp tổn thương

da lupus mạn tiacutenh giảm BC vagrave giảm bổ thể Khaacuteng thể khaacuteng C1q

dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng

toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan

với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Bảng 312 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể ở bệnh nhacircn LBĐHT

Khaacuteng thể Tỷ lệ (+) OR p

KTKN (+)

Khaacuteng dsDNA 6932 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3227 393 0012

Khaacuteng Nucl 8924 1089 lt00001

Khaacuteng dsDNA

(+)

KTKN 9943 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3714 274 00005

Khaacuteng Nucl 9543 1144 lt00001

Khaacuteng C1q (+)

Khaacuteng dsDNA 7647 274 00005

KTKN 9529 393 0012

Khaacuteng Nucl 9412 43 0003

Khaacuteng Nucl (+)

KTKN 9333 1089 lt00001

Khaacuteng C1q 3333 43 0003

Khaacuteng dsDNA 6958 1144 lt00001

Sự dương tiacutenh của caacutec tự khaacuteng thể đều coacute mối liecircn quan thuận

coacute yacute nghĩa thống kecirc với nhau (p lt 005) trong đoacute mối liecircn quan rotilde

rệt nhất lagrave giữa 3 khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng Nucl vagrave KTKN

17

Bảng 313 Liecircn quan giữa tự khaacuteng thể với độ hoạt động của bệnh

Khaacuteng thể

Mức độ hoạt động của LBĐHT p

Mạnh

(n = 36) (I)

Trung bigravenh

(n = 67)(II)

Nhẹổn

(n = 185)(III) I vagrave II II vagrave III

KTKN 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Khaacuteng

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Khaacuteng

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

Khaacuteng

Nucl

100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt0000

1

So với nhoacutem bệnh hoạt động trung bigravenh tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh cao hơn rotilde rệt với p =

00025 Nồng độ trung bigravenh của khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave KT

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh đều cao hơn rotilde rệt Tỷ lệ

(+) vagrave nồng độ trung bigravenh của 4 khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh hoạt động

trung bigravenh đều cao hơn so với nhoacutem bệnh hoạt động nhẹ ổn định

Bảng 314 Tương quan giữa nồng độ khaacuteng thể với điểm SLEDAI vagrave

điểm SLICC thận

Khaacuteng thể SLEDAI SLICC thận

r p r p

KTKN 0306 lt00001 0143 lt0013

Khaacuteng dsDNA 056 lt00001 0216 00002

Khaacuteng C1q 0433 lt00001 0399 lt00001

Khaacuteng Nucl 0648 lt00001 0348 00082

18

Nồng độ KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA tương quan thuận

chặt chẽ nhất với điểm SLEDAI (p lt 0001) Nồng độ KT khaacuteng

C1q tương quan chặt chẽ nhất với điểm SLICC thận (r = 0399)

Bảng 315 Thay đổi nồng độ caacutec khaacuteng thể sau đợt cấp

Khaacuteng thể Tỷ lệ

giảm

Khaacutec biệt

trung bigravenh

Test t

gheacutep cặp p

KTKN (OD) 625 -034 -143 016

Khaacuteng dsDNA (IUml) 6458 -19949 -1793 008

Khaacuteng C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

Khaacuteng Nucl (IUml) 8333 -47509 -39 00003

Với 48 đợt cấp được theo dotildei nồng độ trung bigravenh của caacutec KT

khaacuteng C1q (p = 0037) vagrave khaacuteng Nucl (p = 00003) sau đợt cấp giảm

coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Bảng 316 Giaacute trị dự đoaacuten đợt cấp LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 9759 6714 3227 9459

Khaacuteng dsDNA 759 4537 36 823

Khaacuteng C1q 5783 8195 5647 8276

Khaacuteng Nucl 9759 2244 3375 9583

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng C1q 4819 878 6154 8072

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng Nucl 759 4927 3772 8347

Khaacuteng Nucl + Khaacuteng C1q 5783 8439 60 8317

Trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT KTKN vagrave khaacuteng Nucl đều coacute

độ nhạy cao vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh cao gt 94 nhưng độ đặc hiệu

khaacute thấp Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu cao nhất (8195)

đặc biệt khi dương tiacutenh đồng thời với KT khaacuteng dsDNA (878)

19

Chƣơng 4 BAgraveN LUẬN

41 Đặc điểm của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT

411 Phacircn bố về tuổi vagrave giới tỷ lệ bệnh nhacircn nữ chiếm tới

9297 với tuổi trung bigravenh lagrave 311 946 trong đoacute phần lớn thuộc

nhoacutem tuổi từ 16 ndash 45 (929) Kết quả nagravey hoagraven toagraven phugrave hợp với

những kết quả nghiecircn cứu trước đacircy cho thấy đặc điểm dịch tễ học

cơ bản của LBĐHT lagrave thường xảy ra ở phụ nữ trong độ tuổi sinh đẻ

412 Về tuổi khởi phaacutet bệnh phần lớn bệnh nhacircn LBĐHT

khởi phaacutet bệnh trong giai đoạn 15 - 45 tuổi (852) tuổi khởi phaacutet

bệnh trung bigravenh lagrave 2593 974 Khaacute nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học

trecircn qui mocirc lớn cho thấy LBĐHT thường coacute xu hướng khởi phaacutet ở

nữ giới trong nhoacutem tuổi từ 15 - 45 giai đoạn coacute sự hoạt động mạnh

mẽ nhất của caacutec tuyến nội tiết hướng sinh dục nữ

413 Tiền sử gia đigravenh coacute ngƣời mắc LBĐHT 469 số

bệnh nhacircn LBĐHT coacute iacutet nhất một người thacircn trong gia đigravenh cugraveng

mắc bệnh Nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học đatilde cho thấy tỷ lệ mắc

LBĐHT ở những người thacircn của người bệnh thường cao gấp khoảng

10 - 20 lần so với tỷ lệ mắc chung trong cộng đồng (4 - 12) cho

thấy vai trograve của yếu tố di truyền trong cơ chế bệnh sinh của LBĐHT

414 Caacutec biểu hiện của LBĐHT Caacutec biểu hiện bệnh gặp

nhiều nhất lagrave rụng toacutec - 531 tổn thương thận - 453 tổn thương

da lupus cấp baacuten cấp - 383 giảm bạch cầu - 382 vagrave giảm bổ

thể - 622 Những kết quả nagravey khaacute tương đồng với nghiecircn cứu của

nhiều taacutec giả trong vagrave ngoagravei nước tuy nhiecircn tỷ lệ viecircm thanh mạc

tổn thương thần kinh vagrave giảm tiểu cầu gặp khaacute thấp nguyecircn nhacircn coacute

thể do sự khaacutec nhau trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu vagrave sự

khaacutec biệt về đặc điểm lacircm sagraveng của LBĐHT giữa caacutec chủng tộc

20

42 Về tỷ lệ dƣơng tiacutenh vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự

khaacuteng thể

421 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN)

Về tỷ lệ dương tiacutenh 859 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute KTKN

dương tiacutenh ở lần khaacutem 1 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ

dương tiacutenh của KTKN ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute sự dao động khaacute lớn

trong khoảng 60 ndash 100 nguyecircn nhacircn coacute thể lagrave do sự khaacutec biệt

trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu thiết kế nghiecircn cứu kỹ

thuật xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể sự

đảo chiều huyết thanh của KTKN

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm

tiacutenh của KTKN lần lượt lagrave 8594 vagrave 7231 khaacute thấp so với caacutec

kết quả nghiecircn cứu trước đacircy nguyecircn nhacircn coacute thể do nhoacutem bệnh

nhacircn nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute tỷ lệ KTKN acircm tiacutenh khaacute cao

(141) sự khaacutec biệt về caacutech thức lựa chọn vagrave đặc điểm của nhoacutem

chứng Độ đặc hiệu của KTKN với LBĐHT lagrave khaacute thấp (4615)

khi sử dụng nhoacutem chứng mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec nguyecircn nhacircn lagrave

do KTKN coacute thể xuất hiện trong nhiều bệnh lyacute tự miễn khaacutec

422 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA

Về tỷ lệ dương tiacutenh bệnh nhacircn LBĐHT 641 số bệnh nhacircn

LBĐHT trong nghiecircn cứu coacute KT khaacuteng dsDNA dương tiacutenh nằm

trong dải biến thiecircn 37 - 85 của caacutec kết quả nghiecircn cứu trước đacircy

Caacutec yếu tố coacute ảnh hưởng rotilde rệt nhất đến tỷ lệ nagravey lagrave mức độ hoạt

động vagrave tổn thương nội tạng của caacutec đối tượng nghiecircn cứu kỹ thuật

xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ đặc hiệu của KT khaacuteng

dsDNA trong chẩn đoaacuten LBĐHT ở nghiecircn cứu nagravey lagrave 9333 khi sử

dụng nhoacutem chứng khỏe mạnh vagrave 9744 khi sử dụng nhoacutem chứng

21

mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec tức lagrave hoagraven toagraven phugrave hợp với caacutec kết quả

nghiecircn cứu trước đacircy (95 ndash 100) Traacutei với độ đặc hiệu độ nhạy của

KT khaacuteng dsDNA với LBĐHT thường khocircng cao vagrave coacute khoảng dao

động khaacute lớn (13 - 86) Nguyecircn nhacircn coacute thể do tiacutenh chất dao động

thường xuyecircn của khaacuteng thể nagravey trong quaacute trigravenh diễn biến bệnh vagrave

độ nhạy khaacutec nhau của caacutec kỹ thuật xeacutet nghiệm miễn dịch

423 Khaacuteng thể khaacuteng C1q

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở bệnh nhacircn LBĐHT dao động trong khoảng 15 ndash

63 theo caacutec nghiecircn cứu trước đacircy kết quả của chuacuteng tocirci lagrave 25 ở

lần khaacutem 1 Trong 3 nghiecircn cứu coacute cỡ mẫu lớn nhất của Julkunen H

(2012) Mok CC (2010) vagrave Orbai AM (2015) tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q đều tương đối thấp vagrave iacutet coacute sự khaacutec biệt

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT KT khaacuteng C1q coacute giaacute trị keacutem

nhất trong chẩn đoaacuten vagrave phacircn loại LBĐHT với diện tiacutech dưới đường

cong ROC lagrave 0676 vagrave độ nhạy chỉ lagrave 25 Tỷ lệ dương tiacutenh thấp vagrave

dao động thường xuyecircn ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute thể lagrave nguyecircn nhacircn

chiacutenh lagravem giảm độ nhạy của khaacuteng thể nagravey trong chẩn đoaacuten bệnh

424 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome (KT khaacuteng Nucl )

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT Tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT trong nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci

lagrave 813 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ nagravey coacute khoảng dao

động rộng từ 45 đến 100 nguyecircn nhacircn lagrave do sự khaacutec biệt của caacutec

đối tượng nghiecircn cứu về chủng tộc vagrave mức độ hoạt động bệnh

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT nhiều nghiecircn cứu đatilde cho thấy độ

đặc hiệu rất cao của KT khaacuteng Nucl với LBĐHT (90 ndash 100) tương

đồng với kết quả thu được của chuacuteng tocirci lagrave 987 Nguyecircn nhacircn coacute

thể do nucleosome lagrave tự khaacuteng nguyecircn coacute vai trograve quan trọng trong cơ

22

chế bệnh sinh của LBĐHT Độ nhạy của KT khaacuteng Nucl với

LBĐHT trong nghiecircn cứu nagravey lagrave 8125 cao hơn so với KT khaacuteng

dsDNA (6406)

43 Về liecircn quan giữa caacutec khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

431 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh (ge 12

OD) ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với sự xuất

hiện của giảm bổ thể vagrave caacutec tự khaacuteng thể khaacutec Mối liecircn quan giữa

khaacuteng thể nagravey với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của

LBĐHT trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy lagrave khocircng rotilde rệt do thiếu

những bằng chứng đaacuteng tin cậy

432 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với caacutec biểu

hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp hoặc mạn tiacutenh giảm bạch cầu

vagrave giảm bổ thể nhưng khocircng liecircn quan với tổn thương thận lupus

Nồng độ vagrave tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng dsDNA ở nhoacutem bệnh

nhacircn trong đợt cấp đều cao hơn so với nhoacutem ngoagravei đợt cấp tuy nhiecircn

khaacuteng thể nagravey coacute liecircn quan khocircng hằng định với cả hoạt tiacutenh chung

của LBĐHT vagrave tổn thương thận đặc biệt lagrave với đợt cấp của bệnh

433 Khaacuteng thể khaacuteng C1q khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh ở

bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan rotilde rệt với sự xuất hiện của tổn thương

thận vagrave giảm bổ thể Độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey trong dự baacuteo tổn

thương thận lupus cao hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại vagrave nồng độ của noacute

tương quan nghịch khaacute chặt với cả bổ thể C3 vagrave C4 (p lt 00001) Tỷ

lệ vagrave nồng độ trung bigravenh của KT khaacuteng C1q đều coacute xu hướng tăng

dần theo mức độ hoạt động của bệnh Tương quan giữa nồng độ KT

khaacuteng C1q với điểm SLICC thận vagrave độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey

trong dự baacuteo đợt cấp thận lupus cũng tốt hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại

23

434 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện tổn thương

da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận giảm BC vagrave giảm bổ thể Độ

nhạy trong dự baacuteo tổn thương thận lupus của KT khaacuteng Nucl cao

hơn so với caacutec khaacuteng thể cograven lại Tương quan với nồng độ bổ thể vagrave

điểm SLEDAI của khaacuteng thể nagravey cũng chặt chẽ hơn caacutec khaacuteng thể

cograven lại

KẾT LUẬN

Qua nghiecircn cứu 128 bệnh nhacircn LBĐHT với nhoacutem chứng gồm

39 người mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec vagrave 30 người khỏe mạnh chuacuteng

tocirci xin đưa ra một số kết luận sau

1 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten của một

số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể

Tỷ lệ dương tiacutenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 855 641 25 vagrave

813 tất cả đều cao hơn rotilde rệt so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở 587 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute

KT khaacuteng dsDNA acircm tiacutenh

Nồng độ trung bigravenh của caacutec KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng

C1q vagrave khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 3221 6034 (IUml) vagrave 945 1385

(IUml) tất cả đều cao hơn so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn coacute độ nhạy cao (8594) nhưng độ đặc

hiệu thấp (6667) với LBĐHT Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh 100 với LBĐHT nhưng độ nhạy

rất thấp (25)

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 6: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

3

khaacuteng thể cổ điển lagrave khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) vagrave khaacuteng

dsDNA nhằm tigravem kiếm những cocircng cụ tối ưu cho việc chẩn đoaacuten

bệnh Kết quả thu được của nghiecircn cứu đatilde cho thấy giaacute trị rất tốt của

khaacuteng thể khaacuteng nucleosome trong chẩn đoaacuten LBĐHT vagrave độ đặc

hiệu cao của khaacuteng thể khaacuteng C1q với tổn thương thận lupus

Đacircy cũng lagrave nghiecircn cứu theo dotildei dọc đầu tiecircn ở Việt Nam đaacutenh

giaacute mối liecircn quan giữa sự dương tiacutenh vagrave nồng độ của KTKN khaacuteng

dsDNA khaacuteng C1q vagrave khaacuteng nucleosome với mức độ hoạt động của

bệnh LBĐHT vagrave tổn thương thận lupus Kết quả thu được của nghiecircn

cứu đatilde cho thấy KT khaacuteng nucleosome coacute liecircn quan với mức độ hoạt

động của bệnh chặt chẽ hơn vagrave giaacute trị dự baacuteo đợt cấp bệnh tốt hơn so

với KT khaacuteng dsDNA Khaacuteng thể khaacuteng C1q cũng coacute mối liecircn quan

với sự xuất hiện vagrave mức độ hoạt động của tổn thương thận lupus chặt

chẽ hơn so với KT khaacuteng dsDNA

3 Bố cục của luận aacuten

Luận aacuten gồm 144 trang gồm Đặt vấn đề (2 trang) tổng quan

tagravei liệu (42 trang) đối tượng vagrave phương phaacutep nghiecircn cứu (17 trang)

kết quả nghiecircn cứu (30 trang) bagraven luận (50 trang) kết luận (2 trang)

vagrave kiến nghị (1 trang)

Toagraven bộ luận aacuten coacute 48 bảng 15 higravenh sơ đồ vagrave biểu đồ

Tagravei liệu tham khảo bao gồm 191 tagravei liệu (9 tiếng Việt vagrave 182

tiếng Anh)

Chƣơng 1 TỔNG QUAN TAgraveI LIỆU

11 Vagravei neacutet về cơ chế điều hogravea vagrave tiacutenh chất sinh bệnh học của caacutec

tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Caacutec tế bagraveo B tự phản ứng bị hoạt hoacutea khi gặp caacutec tự khaacuteng

nguyecircn đặc hiệu với sự coacute mặt của caacutec tế bagraveo T hỗ trợ Sau đoacute

chuacuteng trải qua quaacute trigravenh chuyển đổi isotype siecircu đột biến dạng cơ

4

thể vagrave chọn lọc dograveng để tạo ra caacutec tế bagraveo B hiệu ứng coacute chức năng

giải phoacuteng caacutec tự khaacuteng thể IgG vagraveo hệ tuần hoagraven Caacutec khaacuteng thể

nagravey tạo thagravenh PHMD dư thừa tiacutech tụ vagrave gacircy tổn thương viecircm tại caacutec

cơ quan

12 Tổng quan chẩn đoaacuten vagrave đaacutenh giaacute độ hoạt động của LBĐHT

121 Chẩn đoaacuten LBĐHT

Lupus ban đỏ hệ thống coacute biểu hiện lacircm sagraveng rất đa dạng nhưng

phần lớn caacutec biểu hiện lagrave khocircng đặc hiệu gacircy khoacute khăn cho việc chẩn

đoaacuten Hiện chưa coacute caacutec cocircng cụ dagravenh riecircng cho chẩn đoaacuten LBĐHT

necircn caacutec bộ tiecircu chuẩn phacircn loại bệnh của Hội Khớp học Mỹ năm

1997 (ACR 1997) vagrave Tổ chức Hợp taacutec Quốc tế về LBĐHT năm 2012

(SLICC 2012) thường được sử dụng trecircn lacircm sagraveng cho mục điacutech nagravey

122 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của LBĐHT khocircng coacute yếu tố

chỉ điểm đơn lẻ coacute thể đaacutenh giaacute chiacutenh xaacutec mức độ hoạt động của

bệnh Chưa coacute cocircng cụ đaacutenh giaacute vagrave đo lường mức độ hoạt động của

LBĐHT nagraveo được cho lagrave tối ưu để aacutep dụng trong thực tiễn

13 Yacute nghĩa lacircm sagraveng của một số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

131 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh coacute độ

nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh rất cao với LBĐHT nhưng độ đặc

hiệu thấp do coacute thể gặp trong nhiều bệnh khaacutec Khaacuteng thể nagravey coacute

mối liecircn quan khocircng rotilde rệt với mức độ hoạt động của LBĐHT

132 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng dsDNA coacute độ đặc hiệu cao

(95-100) vagrave lagrave một trong caacutec tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten LBĐHT tuy

nhiecircn độ nhạy khocircng cao vigrave noacute thường chỉ dương tiacutenh tạm thời

Khaacuteng thể nagravey coacute mối tương quan thuận khaacute rotilde với mức độ hoạt

động của bệnh KT khaacuteng dsDNA coacute độ nhạy khaacute cao trong chẩn

đoaacuten phacircn biệt giữa LBĐHT ổn định vagrave hoạt động nhưng khocircng

hằng định giữa caacutec nghiecircn cứu Theo dotildei định kỳ khaacuteng thể nagravey ở

5

bệnh nhacircn LBĐHT cho thấy sự biến đổi nồng độ của noacute coacute liecircn

quan rotilde rệt với sự xuất hiện caacutec đợt cấp của bệnh sau đoacute

133 Khaacuteng thể khaacuteng C1q được tigravem thấy trong LBĐHT vagrave nhiều

bệnh lyacute khaacutec như magravey đay viecircm mạch giảm bổ thể phugrave mạch di

truyền viecircm khớp dạng thấp hellip Khaacuteng thể nagravey coacute độ nhạy vagrave độ đặc

hiệu khocircng cao trong chẩn đoaacuten LBĐHT nhưng lagrave một trong những

khaacuteng thể coacute liecircn quan rotilde rệt nhất với tổn thương thận lupus Nồng

độ của KT khaacuteng C1q coacute mối tương quan chặt chẽ với mức độ hoạt

động của LBĐHT đặc biệt lagrave với tổn thương thận Khaacuteng thể nagravey coacute

giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh vagrave độ đặc hiệu khaacute cao với đợt cấp thận lupus

134 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute độ

nhạy dao động trong khoảng 50-90 vagrave độ đặc hiệu lagrave 90-99 trong

chẩn đoaacuten LBĐHT Caacutec nghiecircn cứu so saacutenh đối đầu giữa khaacuteng thể

nagravey vagrave KT khaacuteng dsDNA cho thấy KT khaacuteng Nucl coacute độ đặc hiệu

tương đương nhưng độ nhạy cao hơn so rotilde rệt Ngoagravei ra nồng độ KT

khaacuteng Nucl cũng coacute mối tương quan chặt chẽ với caacutec chỉ số đaacutenh giaacute

mức độ hoạt động của bệnh vagrave tổn thương thận lupus

Chƣơng 2 ĐỐI TƢỢNG VAgrave PHƢƠNG PHAacuteP

21 Đối tƣợng nghiecircn cứu

211 Nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT

Bao gồm 128 bệnh nhacircn được chẩn đoaacuten lupus ban đỏ hệ

thống theo tiecircu chuẩn SLICC 2012 theo dotildei vagrave điều trị tại Trung tacircm

Dị ứng ndash Miễn dịch Lacircm sagraveng vagrave Phograveng Quản lyacute bệnh lupus ban đỏ

hệ thống Khoa Khaacutem bệnh - Bệnh viện Bạch Mai từ thaacuteng 032014

đến thaacuteng 022016

Tiecircu chuẩn loại trừ phụ nữ coacute thai bệnh nhacircn coacute mắc kegravem

caacutec bệnh nội khoa nặng như tiểu đường suy tim suy chức năng gan

6

bệnh nhacircn bị mắc giang mai hoặc HIVAIDS bệnh nhacircn coacute mắc

kegravem caacutec bệnh tự miễn khaacutec bệnh nhacircn khocircng đồng yacute tham gia

nghiecircn cứu

212 Nhoacutem chứng

Nhoacutem chứng bệnh bao gồm 39 người mắc caacutec bệnh tự

miễn dịch khaacutec LBĐHT được chẩn đoaacuten xaacutec định vagrave điều trị tại

Trung tacircm Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng BV Bạch Mai vagrave phograveng

khaacutem chuyecircn khoa Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng khoa Khaacutem Bệnh

BV Bạch Mai từ 22016 đến 4 2016

Khocircng phacircn biệt tuổi giới nghề nghiệp trigravenh độ học vấn

nơi cư truacute

Khocircng bị suy tế bagraveo gan hoặc hoặc nhiễm HIVAIDS

Chấp nhận tham gia nghiecircn cứu

Nhoacutem chứng khỏe mạnh 30 người khỏe mạnh coacute độ tuổi

vagrave phacircn bố giới tiacutenh tương đồng với nhoacutem bệnh nhacircn nghiecircn cứu

Khocircng coacute tiền sử mắc caacutec bệnh lyacute tự miễn khocircng coacute người

thacircn thuộc caacutec thế hệ thứ nhất vagrave thứ 2 mắc caacutec bệnh lyacute tự miễn dịch

Khocircng phacircn biệt nghề nghiệp trigravenh độ học vấn nơi cư truacute

Chấp nhận tham gia nghiecircn cứu

22 Phƣơng phaacutep nghiecircn cứu

221 Phƣơng phaacutep nghiecircn cứu Mocirc tả cắt ngang + theo dotildei dọc

222 Chọn mẫu

Mẫu nghiecircn cứu được lấy theo phương phaacutep chọn mẫu thuận

tiện Caacutec đối tượng được lựa chọn theo trigravenh tự thời gian khocircng

phacircn biệt tuổi taacutec giới tiacutenh mức độ hoạt động vagrave hủy hoại vĩnh viễn

223 Cỡ mẫu

Cỡ mẫu nghiecircn cứu mocirc tả cắt ngang được tiacutenh dựa theo cocircng

thức dugraveng để ước tiacutenh một tỷ lệ của tổ chức y tế thế giới

7

trong đoacute n lagrave cỡ mẫu tối thiểu lagrave mức yacute nghĩa thống kecirc tương ứng

với khoảng tin cậy 95 = 005 Z1-2 lagrave Z score tương ứng với

mức yacute nghĩa thống kecirc mong muốn với = 005 thigrave Z1-2 = 196 p lagrave

tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng nucleosome ở bệnh nhacircn LBĐHT (p

= 0909 theo Đặng Thu Hương - Tạp chiacute Y học Thagravenh phố Hồ Chiacute

Minh 2013 tập 17 phụ bản 1 tr 294-300) q = 1 - p = 0091 d lagrave độ

chiacutenh xaacutec tuyệt đối mong muốn chọn d = 005 Từ đoacute tiacutenh được n =

1271 Nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute cỡ mẫu lagrave 128 bệnh nhacircn

224 Caacutec bƣớc tiến hagravenh nghiecircn cứu

2241 Nhoacutem bệnh nhacircn lupus ban đỏ hệ thống

Lựa chọn vagraveo danh saacutech nghiecircn cứu vagrave gắn matilde bệnh aacuten

Lần khaacutem 1 khaacutem lacircm sagraveng khai thaacutec tiền sử xeacutet nghiệm

CLS thocircng thường (định lượng urecirc creatinin glucose AST ALT

albumin cholesterol triglyceride C3 vagrave C4 bổ thể trong huyết thanh

tế bagraveo niệu trụ niệu định lượng protein niệu 24 giờhellip) định lượng

khaacuteng thể khaacuteng nhacircn khaacuteng dsDNA khaacuteng nucleosome vagrave khaacuteng

C1q phacircn tiacutech caacutec nhoacutem triệu chứng bệnh đaacutenh giaacute điểm SELENA-

SLEDAI mức độ hoạt động của bệnh sự xuất hiện đợt cấp của

bệnh Chỉ số Hoạt động Thận của SLICC 2008 đợt cấp thận lupus

Theo dotildei định kỳ caacutec bệnh nhacircn được thăm khaacutem định kỳ

hagraveng thaacuteng hoặc ngay khi coacute caacutec dấu hiệu bất thường Quaacute trigravenh

nghiecircn cứu kết thuacutec khi bệnh nhacircn được theo dotildei đủ 12 thaacuteng hoặc

khi được phaacutet hiện coacute thai hoặc bị mất theo dotildei Caacutec bước thăm

khaacutem gồm khaacutem lacircm sagraveng xeacutet nghiệm CLS thocircng thường đaacutenh giaacute

caacutec triệu chứng bệnh sự xuất hiện đợt cấp của LBĐHT điểm SLICC

thận sự xuất hiện của đợt cấp thận lupus Định lượng khaacuteng thể

trong caacutec lần khaacutem coacute ghi nhận đợt cấp mới xuất hiện của bệnh hoặc

8

caacutec lần khaacutem được thực hiện trong vograveng 2 thaacuteng sau khi người bệnh

ra đatilde khỏi đợt cấp vagrave lần khaacutem cuối cugraveng Đaacutenh giaacute điểm SLEDAI

vagrave mức độ hoạt động bệnh ở caacutec lần khaacutem coacute xeacutet nghiệm khaacuteng thể

2242 Nhoacutem chứng 2 nhoacutem chứng được tiến hagravenh xeacutet nghiệm 4

loại khaacuteng thể tương tự nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT ở lần khaacutem 1

225 Địa điểm vagrave phƣơng phaacutep tiến hagravenh caacutec xeacutet nghiệm CLS

2251 Caacutec xeacutet nghiệm cận lacircm sagraveng thocircng thường được thực hiện

tại caacutec khoa phograveng tương ứng của Bệnh viện Bạch Mai

2252 Xeacutet nghiệm caacutec tự khaacuteng thể

a Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) vagrave khaacuteng dsDNA được định lượng

bằng kỹ thuật ELISA trecircn maacutey baacuten tự động Imarkreg của Hatildeng BIO-

RAD (kit của Hatildeng DRG) Địa điểm thực hiện phograveng xeacutet nghiệm

miễn dịch Trung tacircm Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng BV Bạch Mai

b Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng nucleosome được phaacutet hiện vagrave

định lượng bằng kỹ thuật ELISA trecircn maacutey tự động Alegriareg của

Hatildeng Orgentec (Đức) sử dụng kit của Hatildeng Orgentec Địa điểm

thực hiện tại Khoa Xeacutet nghiệm BV Đại học Y Hagrave Nội

226 Caacutec tiecircu chuẩn đaacutenh giaacute đƣợc sử dụng trong nghiecircn cứu

2261 Đaacutenh giaacute caacutec biểu hiện của bệnh LBĐHT dựa theo caacutec

tiecircu chuẩn lacircm sagraveng của SLICC 2012

2262 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của bệnh dựa theo tiecircu chuẩn

đaacutenh giaacute của cocircng cụ SELENA-SLEDAI

2263 Đaacutenh giaacute đợt cấp của LBĐHT Dựa vagraveo định nghĩa sử dụng

trong nghiecircn cứu SELENA

2264 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của tổn thương thận lupus

dựa vagraveo chỉ số hoạt động thận của SLICC năm 2008

2265 Đaacutenh giaacute đợt cấp tổn thương thận lupus dựa theo tiecircu

chuẩn của EULAR năm 2009

9

227 Sai số vagrave caacutech khắc phục sai số khắc phục caacutec sai số bằng

caacutech khai thaacutec kỹ triệu chứng lacircm sagraveng tiền sử kiểm tra vagrave đaacutenh giaacute

lại caacutec chỉ số hoạt động bệnh lagravem sạch số liệu trước khi xử lyacute

228 Xử lyacute số liệu Caacutec số liệu nghiecircn cứu được xử lyacute bằng phần

mềm toaacuten thống kecirc MEDCALC 140

229 Đạo đức của nghiecircn cứu

Nghiecircn cứu được tiến hagravenh tại caacutec cơ sở y tế coacute uy tiacuten với sự

đồng yacute của latildenh đạo caacutec đơn vị Đacircy lagrave nghiecircn cứu mocirc tả khocircng coacute

can thiệp tất cả caacutec đối tượng nghiecircn cứu đều tự nguyện tham gia

Caacutec số liệu thu được chỉ phục vụ cho mục điacutech nghiecircn cứu vagrave chăm

soacutec sức khỏe người bệnh khocircng phục vụ cho caacutec mục điacutech khaacutec

Chƣơng 3 KẾT QUẢ NGHIEcircN CỨU

31 Đặc điểm chung của caacutec đối tƣợng nghiecircn cứu

Bảng 31 Đặc điểm về tuổi vagrave giới

Nhoacutem nghiecircn cứu n Tuổi (X ) Tỷ lệ nữ nam

Nhoacutem LBĐHT 128 311 946 1322

Nhoacutem chứng bệnh 39 4305 17 333

Nhoacutem chứng khỏe 30 3163 1357 14

p 000036

04

0011

074

Nhoacutem LBĐHT so với nhoacutem chứng bệnh

Nhoacutem LBĐHT so với nhoacutem chứng khỏe

Tuổi trung bigravenh của nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lagrave 311 946

thấp hơn so với nhoacutem chứng bệnh (p = 000036) nhưng khocircng khaacutec

biệt so với nhoacutem chứng khỏe mạnh (p = 04) Tỷ lệ nữnam ở nhoacutem

LBĐHT lagrave 1322 tương đương nhoacutem chứng khỏe mạnh (p = 074)

nhưng cao hơn so với nhoacutem chứng bệnh (p = 0011)

Bảng 32 Phacircn bố theo nhoacutem tuổi của nhoacutem LBĐHT

Nhoacutem tuổi 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Tổng

10

n 1 67 52 7 1 128

Tỷ lệ 08 523 406 55 08 100

Caacutec bệnh nhacircn phần lớn gặp trong nhoacutem tuổi 20 ndash 30 (437)

vagrave 31 ndash 40 (336) thấp nhất lagrave ở nhoacutem gt 50 tuổi (47) Phacircn bố

caacutec nhoacutem tuổi khocircng coacute sự khaacutec biệt giữa 2 giới với p = 051

Bảng 33 Phacircn bố bệnh nhacircn LBĐHT theo thời gian mắc bệnh

Khoảng thời

gian (năm) Số lƣợng Tỷ lệ ()

Thời gian

trung bigravenh

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

TỔNG SỐ 128 100 517 37

Thời gian mắc bệnh của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT gặp nhiều

nhất trong khoảng 2 ndash 5 năm (516) vagrave 6 ndash 10 năm (25) Thời

gian mắc bệnh trung bigravenh lagrave 517 37 (năm)

Bảng 34 Phacircn bố bệnh nhacircn LBĐHT theo tuổi khởi phaacutet bệnh

Nhoacutem tuổi Số lƣợng Tỷ lệ () Tuổi trung bigravenh

15 14 109 1271 23

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

TỔNG SỐ 128 100 2593 974

Phần lớn bệnh nhacircn khởi phaacutet bệnh ở độ tuổi 16 ndash 25 (43) vagrave

26 ndash 35 (281) Số bệnh nhacircn khởi phaacutet bệnh sau 45 tuổi chỉ chiếm

11

39 Tuổi phaacutet bệnh trung bigravenh của caacutec bệnh nhacircn lagrave 2593 974

Tiền sử mắc LBĐHT của người thacircn 6128 bệnh nhacircn

LBĐHT coacute người thacircn trong gia đigravenh (cha mẹ anh chị em ruột)

cugraveng mắc LBĐHT chiếm tỷ lệ 469

12

Bảng 35 Một số biểu hiện lacircm sagraveng ở thời điểm đầu nghiecircn cứu

Tỷ lệ gặp cao nhất lagrave caacutec biểu hiện giảm bổ thể (622) rụng

toacutec (531) vagrave tổn thương thận (453) Iacutet gặp nhất lagrave caacutec biểu hiện

viecircm thanh mạc tan maacuteu (23) vagrave tổn thương thần kinh (31)

Bảng 36 Mức độ hoạt động của LBĐHT

TT Mức độ hoạt động Số lƣợng Tỷ lệ ()

1 Ổn định 15 117

2 Hoạt động nhẹ 57 445

3 Hoạt động trung bigravenh 37 289

4 Hoạt động mạnh 19 148

5 Đợt cấp LBĐHT 51 398

6 Điểm SLEDAI (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Điểm SLICC thận (X ) 312 42 (0 - 15)

TT Tiecircu chuẩn n Tỷ lệ ()

1 Caacutec tổn thương da lupus cấp baacuten cấp 49 383

2 Caacutec tổn thương da lupus mạn tiacutenh 21 164

3 Loeacutet niecircm mạc 9 7

4 Rụng toacutec 68 531

5 Biểu hiện khớp 45 352

6 Viecircm thanh mạc 3 23

7 Tổn thương thận 58 453

8 Tổn thương thần kinh 4 31

9 Thiếu maacuteu tan maacuteu 3 23

10 Giảm bạch cầu 42 328

11 Giảm tiểu cầu 5 39

12 Giảm bổ thể 79 622

13

Ở thời điểm khởi đầu nghiecircn cứu phần lớn bệnh nhacircn coacute bệnh

hoạt động ở mức độ nhẹ vagrave trung bigravenh (lần lượt chiếm 445 vagrave

289) Điểm SLEDAI dao động khaacute lớn trong khoảng 0 ndash 41

(trung bigravenh lagrave 661 62) Tỷ lệ bệnh nhacircn coacute đợt cấp LBĐHT lagrave

398 Điểm SLICC thận lupus trung bigravenh lagrave 312 42

32 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của

caacutec tự khaacuteng thể

Bảng 37 Tỷ lệ dương tiacutenh của tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Nhoacutem chứng

bệnh

(n = 39)

Nhoacutem chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN 859 5385 67 3333

Khaacuteng dsDNA 641 256 67 435

Khaacuteng Nucl 813 256 0 145

Khaacuteng C1q 25 0 0 0

Tỷ lệ dương tiacutenh của caacutec khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh nhacircn

LBĐHT theo thứ tự KTKN (859) gt khaacuteng Nucl (813) gt khaacuteng

dsDNA (641) gt khaacuteng C1q (25) tất cả đều cao hơn rotilde rệt so

với caacutec nhoacutem chứng với p lt 0005

Bảng 38 Nồng độ trung bigravenh của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Chứng

bệnh

(n = 39)

Chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Khaacuteng dsDNA (IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

Khaacuteng Nucl (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Khaacuteng C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

14

Nồng độ trung bigravenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 945 1385 (IUml) vagrave 3221 6034

(IUml) đều cao hơn caacutec nhoacutem chứng với p lt 00001

Bảng 39 Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 8594 6667 8271 7187

Khaacuteng dsDNA 6406 9565 9647 5863

Khaacuteng Nucl 8125 9855 9905 7391

Khaacuteng C1q 25 100 100 4182

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute độ đặc hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương

tiacutenh với LBĐHT tương đương KT khaacuteng dsDNA nhưng độ nhạy vagrave

giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh đều cao hơn Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh cao nhất trong 4 khaacuteng thể trong

khi đoacute KTKN coacute độ nhạy cao nhất nhưng độ đặc hiệu lagrave thấp nhất

Bảng 310 Giaacute trị chẩn đoaacuten của caacutec khaacuteng thể qua đường cong ROC

Khaacuteng thể (AUC) KTKN

(0716)

Khaacuteng

dsDNA

(089)

Khaacuteng

C1q

(0676)

Khaacuteng

Nucl

(0911)

KTKN (0716) p=00001 p=044 plt0001

Khaacuteng dsDNA (089) p=00001 plt0001 p=044

Khaacuteng C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

Khaacuteng Nucl (0911) plt0001 p=044 plt0001

Caacutec khaacuteng thể khaacuteng Nucl khaacuteng dsDNA KTKN vagrave khaacuteng

C1q lần lượt coacute giaacute trị rất tốt tốt khaacute tốt vagrave iacutet giaacute trị trong chẩn đoaacuten

15

LBĐHT Diện tiacutech dưới đường cong ROC (AUC) của caacutec KT khaacuteng

Nucl vagrave khaacuteng dsDNA đều cao hơn coacute yacute nghĩa thống kecirc so với

KTKN vagrave khaacuteng C1q

33 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Bảng 311 Liecircn quan giữa KTKN với caacutec biểu hiện của LBĐHT

Nhoacutem triệu

chứng

KTKN KT khaacuteng

dsDNA

KT khaacuteng

C1q

KT khaacuteng

Nucl

OR p OR p OR p OR p

Tổn thương da

lupus cấp baacuten

cấp

311 007 258 00056 082 055 238 008

Tổn thương da

lupus mạn tiacutenh 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Loeacutet niecircm mạc 057 04 055 026 121 074 291 031

Rụng toacutec 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Biểu hiện khớp 166 025 118 055 142 021 179 017

Viecircm thanh mạc 106 097 129 083 12 088 143 081

Tổn thương

thận 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Tổn thương

thần kinh 088 091 025 01 039 039 025 008

Tan maacuteu 044 048 064 066 026 037 168 066

Giảm BC 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Giảm TC 149 071 3 016 446 002 204 05

Giảm bổ thể 1006 lt00001 327 lt00001 372 lt00001 1611 lt0001

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute

16

liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn

quan với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp tổn thương

da lupus mạn tiacutenh giảm BC vagrave giảm bổ thể Khaacuteng thể khaacuteng C1q

dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng

toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan

với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Bảng 312 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể ở bệnh nhacircn LBĐHT

Khaacuteng thể Tỷ lệ (+) OR p

KTKN (+)

Khaacuteng dsDNA 6932 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3227 393 0012

Khaacuteng Nucl 8924 1089 lt00001

Khaacuteng dsDNA

(+)

KTKN 9943 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3714 274 00005

Khaacuteng Nucl 9543 1144 lt00001

Khaacuteng C1q (+)

Khaacuteng dsDNA 7647 274 00005

KTKN 9529 393 0012

Khaacuteng Nucl 9412 43 0003

Khaacuteng Nucl (+)

KTKN 9333 1089 lt00001

Khaacuteng C1q 3333 43 0003

Khaacuteng dsDNA 6958 1144 lt00001

Sự dương tiacutenh của caacutec tự khaacuteng thể đều coacute mối liecircn quan thuận

coacute yacute nghĩa thống kecirc với nhau (p lt 005) trong đoacute mối liecircn quan rotilde

rệt nhất lagrave giữa 3 khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng Nucl vagrave KTKN

17

Bảng 313 Liecircn quan giữa tự khaacuteng thể với độ hoạt động của bệnh

Khaacuteng thể

Mức độ hoạt động của LBĐHT p

Mạnh

(n = 36) (I)

Trung bigravenh

(n = 67)(II)

Nhẹổn

(n = 185)(III) I vagrave II II vagrave III

KTKN 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Khaacuteng

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Khaacuteng

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

Khaacuteng

Nucl

100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt0000

1

So với nhoacutem bệnh hoạt động trung bigravenh tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh cao hơn rotilde rệt với p =

00025 Nồng độ trung bigravenh của khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave KT

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh đều cao hơn rotilde rệt Tỷ lệ

(+) vagrave nồng độ trung bigravenh của 4 khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh hoạt động

trung bigravenh đều cao hơn so với nhoacutem bệnh hoạt động nhẹ ổn định

Bảng 314 Tương quan giữa nồng độ khaacuteng thể với điểm SLEDAI vagrave

điểm SLICC thận

Khaacuteng thể SLEDAI SLICC thận

r p r p

KTKN 0306 lt00001 0143 lt0013

Khaacuteng dsDNA 056 lt00001 0216 00002

Khaacuteng C1q 0433 lt00001 0399 lt00001

Khaacuteng Nucl 0648 lt00001 0348 00082

18

Nồng độ KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA tương quan thuận

chặt chẽ nhất với điểm SLEDAI (p lt 0001) Nồng độ KT khaacuteng

C1q tương quan chặt chẽ nhất với điểm SLICC thận (r = 0399)

Bảng 315 Thay đổi nồng độ caacutec khaacuteng thể sau đợt cấp

Khaacuteng thể Tỷ lệ

giảm

Khaacutec biệt

trung bigravenh

Test t

gheacutep cặp p

KTKN (OD) 625 -034 -143 016

Khaacuteng dsDNA (IUml) 6458 -19949 -1793 008

Khaacuteng C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

Khaacuteng Nucl (IUml) 8333 -47509 -39 00003

Với 48 đợt cấp được theo dotildei nồng độ trung bigravenh của caacutec KT

khaacuteng C1q (p = 0037) vagrave khaacuteng Nucl (p = 00003) sau đợt cấp giảm

coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Bảng 316 Giaacute trị dự đoaacuten đợt cấp LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 9759 6714 3227 9459

Khaacuteng dsDNA 759 4537 36 823

Khaacuteng C1q 5783 8195 5647 8276

Khaacuteng Nucl 9759 2244 3375 9583

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng C1q 4819 878 6154 8072

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng Nucl 759 4927 3772 8347

Khaacuteng Nucl + Khaacuteng C1q 5783 8439 60 8317

Trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT KTKN vagrave khaacuteng Nucl đều coacute

độ nhạy cao vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh cao gt 94 nhưng độ đặc hiệu

khaacute thấp Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu cao nhất (8195)

đặc biệt khi dương tiacutenh đồng thời với KT khaacuteng dsDNA (878)

19

Chƣơng 4 BAgraveN LUẬN

41 Đặc điểm của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT

411 Phacircn bố về tuổi vagrave giới tỷ lệ bệnh nhacircn nữ chiếm tới

9297 với tuổi trung bigravenh lagrave 311 946 trong đoacute phần lớn thuộc

nhoacutem tuổi từ 16 ndash 45 (929) Kết quả nagravey hoagraven toagraven phugrave hợp với

những kết quả nghiecircn cứu trước đacircy cho thấy đặc điểm dịch tễ học

cơ bản của LBĐHT lagrave thường xảy ra ở phụ nữ trong độ tuổi sinh đẻ

412 Về tuổi khởi phaacutet bệnh phần lớn bệnh nhacircn LBĐHT

khởi phaacutet bệnh trong giai đoạn 15 - 45 tuổi (852) tuổi khởi phaacutet

bệnh trung bigravenh lagrave 2593 974 Khaacute nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học

trecircn qui mocirc lớn cho thấy LBĐHT thường coacute xu hướng khởi phaacutet ở

nữ giới trong nhoacutem tuổi từ 15 - 45 giai đoạn coacute sự hoạt động mạnh

mẽ nhất của caacutec tuyến nội tiết hướng sinh dục nữ

413 Tiền sử gia đigravenh coacute ngƣời mắc LBĐHT 469 số

bệnh nhacircn LBĐHT coacute iacutet nhất một người thacircn trong gia đigravenh cugraveng

mắc bệnh Nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học đatilde cho thấy tỷ lệ mắc

LBĐHT ở những người thacircn của người bệnh thường cao gấp khoảng

10 - 20 lần so với tỷ lệ mắc chung trong cộng đồng (4 - 12) cho

thấy vai trograve của yếu tố di truyền trong cơ chế bệnh sinh của LBĐHT

414 Caacutec biểu hiện của LBĐHT Caacutec biểu hiện bệnh gặp

nhiều nhất lagrave rụng toacutec - 531 tổn thương thận - 453 tổn thương

da lupus cấp baacuten cấp - 383 giảm bạch cầu - 382 vagrave giảm bổ

thể - 622 Những kết quả nagravey khaacute tương đồng với nghiecircn cứu của

nhiều taacutec giả trong vagrave ngoagravei nước tuy nhiecircn tỷ lệ viecircm thanh mạc

tổn thương thần kinh vagrave giảm tiểu cầu gặp khaacute thấp nguyecircn nhacircn coacute

thể do sự khaacutec nhau trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu vagrave sự

khaacutec biệt về đặc điểm lacircm sagraveng của LBĐHT giữa caacutec chủng tộc

20

42 Về tỷ lệ dƣơng tiacutenh vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự

khaacuteng thể

421 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN)

Về tỷ lệ dương tiacutenh 859 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute KTKN

dương tiacutenh ở lần khaacutem 1 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ

dương tiacutenh của KTKN ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute sự dao động khaacute lớn

trong khoảng 60 ndash 100 nguyecircn nhacircn coacute thể lagrave do sự khaacutec biệt

trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu thiết kế nghiecircn cứu kỹ

thuật xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể sự

đảo chiều huyết thanh của KTKN

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm

tiacutenh của KTKN lần lượt lagrave 8594 vagrave 7231 khaacute thấp so với caacutec

kết quả nghiecircn cứu trước đacircy nguyecircn nhacircn coacute thể do nhoacutem bệnh

nhacircn nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute tỷ lệ KTKN acircm tiacutenh khaacute cao

(141) sự khaacutec biệt về caacutech thức lựa chọn vagrave đặc điểm của nhoacutem

chứng Độ đặc hiệu của KTKN với LBĐHT lagrave khaacute thấp (4615)

khi sử dụng nhoacutem chứng mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec nguyecircn nhacircn lagrave

do KTKN coacute thể xuất hiện trong nhiều bệnh lyacute tự miễn khaacutec

422 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA

Về tỷ lệ dương tiacutenh bệnh nhacircn LBĐHT 641 số bệnh nhacircn

LBĐHT trong nghiecircn cứu coacute KT khaacuteng dsDNA dương tiacutenh nằm

trong dải biến thiecircn 37 - 85 của caacutec kết quả nghiecircn cứu trước đacircy

Caacutec yếu tố coacute ảnh hưởng rotilde rệt nhất đến tỷ lệ nagravey lagrave mức độ hoạt

động vagrave tổn thương nội tạng của caacutec đối tượng nghiecircn cứu kỹ thuật

xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ đặc hiệu của KT khaacuteng

dsDNA trong chẩn đoaacuten LBĐHT ở nghiecircn cứu nagravey lagrave 9333 khi sử

dụng nhoacutem chứng khỏe mạnh vagrave 9744 khi sử dụng nhoacutem chứng

21

mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec tức lagrave hoagraven toagraven phugrave hợp với caacutec kết quả

nghiecircn cứu trước đacircy (95 ndash 100) Traacutei với độ đặc hiệu độ nhạy của

KT khaacuteng dsDNA với LBĐHT thường khocircng cao vagrave coacute khoảng dao

động khaacute lớn (13 - 86) Nguyecircn nhacircn coacute thể do tiacutenh chất dao động

thường xuyecircn của khaacuteng thể nagravey trong quaacute trigravenh diễn biến bệnh vagrave

độ nhạy khaacutec nhau của caacutec kỹ thuật xeacutet nghiệm miễn dịch

423 Khaacuteng thể khaacuteng C1q

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở bệnh nhacircn LBĐHT dao động trong khoảng 15 ndash

63 theo caacutec nghiecircn cứu trước đacircy kết quả của chuacuteng tocirci lagrave 25 ở

lần khaacutem 1 Trong 3 nghiecircn cứu coacute cỡ mẫu lớn nhất của Julkunen H

(2012) Mok CC (2010) vagrave Orbai AM (2015) tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q đều tương đối thấp vagrave iacutet coacute sự khaacutec biệt

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT KT khaacuteng C1q coacute giaacute trị keacutem

nhất trong chẩn đoaacuten vagrave phacircn loại LBĐHT với diện tiacutech dưới đường

cong ROC lagrave 0676 vagrave độ nhạy chỉ lagrave 25 Tỷ lệ dương tiacutenh thấp vagrave

dao động thường xuyecircn ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute thể lagrave nguyecircn nhacircn

chiacutenh lagravem giảm độ nhạy của khaacuteng thể nagravey trong chẩn đoaacuten bệnh

424 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome (KT khaacuteng Nucl )

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT Tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT trong nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci

lagrave 813 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ nagravey coacute khoảng dao

động rộng từ 45 đến 100 nguyecircn nhacircn lagrave do sự khaacutec biệt của caacutec

đối tượng nghiecircn cứu về chủng tộc vagrave mức độ hoạt động bệnh

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT nhiều nghiecircn cứu đatilde cho thấy độ

đặc hiệu rất cao của KT khaacuteng Nucl với LBĐHT (90 ndash 100) tương

đồng với kết quả thu được của chuacuteng tocirci lagrave 987 Nguyecircn nhacircn coacute

thể do nucleosome lagrave tự khaacuteng nguyecircn coacute vai trograve quan trọng trong cơ

22

chế bệnh sinh của LBĐHT Độ nhạy của KT khaacuteng Nucl với

LBĐHT trong nghiecircn cứu nagravey lagrave 8125 cao hơn so với KT khaacuteng

dsDNA (6406)

43 Về liecircn quan giữa caacutec khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

431 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh (ge 12

OD) ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với sự xuất

hiện của giảm bổ thể vagrave caacutec tự khaacuteng thể khaacutec Mối liecircn quan giữa

khaacuteng thể nagravey với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của

LBĐHT trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy lagrave khocircng rotilde rệt do thiếu

những bằng chứng đaacuteng tin cậy

432 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với caacutec biểu

hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp hoặc mạn tiacutenh giảm bạch cầu

vagrave giảm bổ thể nhưng khocircng liecircn quan với tổn thương thận lupus

Nồng độ vagrave tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng dsDNA ở nhoacutem bệnh

nhacircn trong đợt cấp đều cao hơn so với nhoacutem ngoagravei đợt cấp tuy nhiecircn

khaacuteng thể nagravey coacute liecircn quan khocircng hằng định với cả hoạt tiacutenh chung

của LBĐHT vagrave tổn thương thận đặc biệt lagrave với đợt cấp của bệnh

433 Khaacuteng thể khaacuteng C1q khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh ở

bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan rotilde rệt với sự xuất hiện của tổn thương

thận vagrave giảm bổ thể Độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey trong dự baacuteo tổn

thương thận lupus cao hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại vagrave nồng độ của noacute

tương quan nghịch khaacute chặt với cả bổ thể C3 vagrave C4 (p lt 00001) Tỷ

lệ vagrave nồng độ trung bigravenh của KT khaacuteng C1q đều coacute xu hướng tăng

dần theo mức độ hoạt động của bệnh Tương quan giữa nồng độ KT

khaacuteng C1q với điểm SLICC thận vagrave độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey

trong dự baacuteo đợt cấp thận lupus cũng tốt hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại

23

434 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện tổn thương

da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận giảm BC vagrave giảm bổ thể Độ

nhạy trong dự baacuteo tổn thương thận lupus của KT khaacuteng Nucl cao

hơn so với caacutec khaacuteng thể cograven lại Tương quan với nồng độ bổ thể vagrave

điểm SLEDAI của khaacuteng thể nagravey cũng chặt chẽ hơn caacutec khaacuteng thể

cograven lại

KẾT LUẬN

Qua nghiecircn cứu 128 bệnh nhacircn LBĐHT với nhoacutem chứng gồm

39 người mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec vagrave 30 người khỏe mạnh chuacuteng

tocirci xin đưa ra một số kết luận sau

1 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten của một

số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể

Tỷ lệ dương tiacutenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 855 641 25 vagrave

813 tất cả đều cao hơn rotilde rệt so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở 587 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute

KT khaacuteng dsDNA acircm tiacutenh

Nồng độ trung bigravenh của caacutec KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng

C1q vagrave khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 3221 6034 (IUml) vagrave 945 1385

(IUml) tất cả đều cao hơn so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn coacute độ nhạy cao (8594) nhưng độ đặc

hiệu thấp (6667) với LBĐHT Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh 100 với LBĐHT nhưng độ nhạy

rất thấp (25)

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 7: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

4

thể vagrave chọn lọc dograveng để tạo ra caacutec tế bagraveo B hiệu ứng coacute chức năng

giải phoacuteng caacutec tự khaacuteng thể IgG vagraveo hệ tuần hoagraven Caacutec khaacuteng thể

nagravey tạo thagravenh PHMD dư thừa tiacutech tụ vagrave gacircy tổn thương viecircm tại caacutec

cơ quan

12 Tổng quan chẩn đoaacuten vagrave đaacutenh giaacute độ hoạt động của LBĐHT

121 Chẩn đoaacuten LBĐHT

Lupus ban đỏ hệ thống coacute biểu hiện lacircm sagraveng rất đa dạng nhưng

phần lớn caacutec biểu hiện lagrave khocircng đặc hiệu gacircy khoacute khăn cho việc chẩn

đoaacuten Hiện chưa coacute caacutec cocircng cụ dagravenh riecircng cho chẩn đoaacuten LBĐHT

necircn caacutec bộ tiecircu chuẩn phacircn loại bệnh của Hội Khớp học Mỹ năm

1997 (ACR 1997) vagrave Tổ chức Hợp taacutec Quốc tế về LBĐHT năm 2012

(SLICC 2012) thường được sử dụng trecircn lacircm sagraveng cho mục điacutech nagravey

122 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của LBĐHT khocircng coacute yếu tố

chỉ điểm đơn lẻ coacute thể đaacutenh giaacute chiacutenh xaacutec mức độ hoạt động của

bệnh Chưa coacute cocircng cụ đaacutenh giaacute vagrave đo lường mức độ hoạt động của

LBĐHT nagraveo được cho lagrave tối ưu để aacutep dụng trong thực tiễn

13 Yacute nghĩa lacircm sagraveng của một số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

131 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh coacute độ

nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh rất cao với LBĐHT nhưng độ đặc

hiệu thấp do coacute thể gặp trong nhiều bệnh khaacutec Khaacuteng thể nagravey coacute

mối liecircn quan khocircng rotilde rệt với mức độ hoạt động của LBĐHT

132 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng dsDNA coacute độ đặc hiệu cao

(95-100) vagrave lagrave một trong caacutec tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten LBĐHT tuy

nhiecircn độ nhạy khocircng cao vigrave noacute thường chỉ dương tiacutenh tạm thời

Khaacuteng thể nagravey coacute mối tương quan thuận khaacute rotilde với mức độ hoạt

động của bệnh KT khaacuteng dsDNA coacute độ nhạy khaacute cao trong chẩn

đoaacuten phacircn biệt giữa LBĐHT ổn định vagrave hoạt động nhưng khocircng

hằng định giữa caacutec nghiecircn cứu Theo dotildei định kỳ khaacuteng thể nagravey ở

5

bệnh nhacircn LBĐHT cho thấy sự biến đổi nồng độ của noacute coacute liecircn

quan rotilde rệt với sự xuất hiện caacutec đợt cấp của bệnh sau đoacute

133 Khaacuteng thể khaacuteng C1q được tigravem thấy trong LBĐHT vagrave nhiều

bệnh lyacute khaacutec như magravey đay viecircm mạch giảm bổ thể phugrave mạch di

truyền viecircm khớp dạng thấp hellip Khaacuteng thể nagravey coacute độ nhạy vagrave độ đặc

hiệu khocircng cao trong chẩn đoaacuten LBĐHT nhưng lagrave một trong những

khaacuteng thể coacute liecircn quan rotilde rệt nhất với tổn thương thận lupus Nồng

độ của KT khaacuteng C1q coacute mối tương quan chặt chẽ với mức độ hoạt

động của LBĐHT đặc biệt lagrave với tổn thương thận Khaacuteng thể nagravey coacute

giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh vagrave độ đặc hiệu khaacute cao với đợt cấp thận lupus

134 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute độ

nhạy dao động trong khoảng 50-90 vagrave độ đặc hiệu lagrave 90-99 trong

chẩn đoaacuten LBĐHT Caacutec nghiecircn cứu so saacutenh đối đầu giữa khaacuteng thể

nagravey vagrave KT khaacuteng dsDNA cho thấy KT khaacuteng Nucl coacute độ đặc hiệu

tương đương nhưng độ nhạy cao hơn so rotilde rệt Ngoagravei ra nồng độ KT

khaacuteng Nucl cũng coacute mối tương quan chặt chẽ với caacutec chỉ số đaacutenh giaacute

mức độ hoạt động của bệnh vagrave tổn thương thận lupus

Chƣơng 2 ĐỐI TƢỢNG VAgrave PHƢƠNG PHAacuteP

21 Đối tƣợng nghiecircn cứu

211 Nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT

Bao gồm 128 bệnh nhacircn được chẩn đoaacuten lupus ban đỏ hệ

thống theo tiecircu chuẩn SLICC 2012 theo dotildei vagrave điều trị tại Trung tacircm

Dị ứng ndash Miễn dịch Lacircm sagraveng vagrave Phograveng Quản lyacute bệnh lupus ban đỏ

hệ thống Khoa Khaacutem bệnh - Bệnh viện Bạch Mai từ thaacuteng 032014

đến thaacuteng 022016

Tiecircu chuẩn loại trừ phụ nữ coacute thai bệnh nhacircn coacute mắc kegravem

caacutec bệnh nội khoa nặng như tiểu đường suy tim suy chức năng gan

6

bệnh nhacircn bị mắc giang mai hoặc HIVAIDS bệnh nhacircn coacute mắc

kegravem caacutec bệnh tự miễn khaacutec bệnh nhacircn khocircng đồng yacute tham gia

nghiecircn cứu

212 Nhoacutem chứng

Nhoacutem chứng bệnh bao gồm 39 người mắc caacutec bệnh tự

miễn dịch khaacutec LBĐHT được chẩn đoaacuten xaacutec định vagrave điều trị tại

Trung tacircm Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng BV Bạch Mai vagrave phograveng

khaacutem chuyecircn khoa Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng khoa Khaacutem Bệnh

BV Bạch Mai từ 22016 đến 4 2016

Khocircng phacircn biệt tuổi giới nghề nghiệp trigravenh độ học vấn

nơi cư truacute

Khocircng bị suy tế bagraveo gan hoặc hoặc nhiễm HIVAIDS

Chấp nhận tham gia nghiecircn cứu

Nhoacutem chứng khỏe mạnh 30 người khỏe mạnh coacute độ tuổi

vagrave phacircn bố giới tiacutenh tương đồng với nhoacutem bệnh nhacircn nghiecircn cứu

Khocircng coacute tiền sử mắc caacutec bệnh lyacute tự miễn khocircng coacute người

thacircn thuộc caacutec thế hệ thứ nhất vagrave thứ 2 mắc caacutec bệnh lyacute tự miễn dịch

Khocircng phacircn biệt nghề nghiệp trigravenh độ học vấn nơi cư truacute

Chấp nhận tham gia nghiecircn cứu

22 Phƣơng phaacutep nghiecircn cứu

221 Phƣơng phaacutep nghiecircn cứu Mocirc tả cắt ngang + theo dotildei dọc

222 Chọn mẫu

Mẫu nghiecircn cứu được lấy theo phương phaacutep chọn mẫu thuận

tiện Caacutec đối tượng được lựa chọn theo trigravenh tự thời gian khocircng

phacircn biệt tuổi taacutec giới tiacutenh mức độ hoạt động vagrave hủy hoại vĩnh viễn

223 Cỡ mẫu

Cỡ mẫu nghiecircn cứu mocirc tả cắt ngang được tiacutenh dựa theo cocircng

thức dugraveng để ước tiacutenh một tỷ lệ của tổ chức y tế thế giới

7

trong đoacute n lagrave cỡ mẫu tối thiểu lagrave mức yacute nghĩa thống kecirc tương ứng

với khoảng tin cậy 95 = 005 Z1-2 lagrave Z score tương ứng với

mức yacute nghĩa thống kecirc mong muốn với = 005 thigrave Z1-2 = 196 p lagrave

tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng nucleosome ở bệnh nhacircn LBĐHT (p

= 0909 theo Đặng Thu Hương - Tạp chiacute Y học Thagravenh phố Hồ Chiacute

Minh 2013 tập 17 phụ bản 1 tr 294-300) q = 1 - p = 0091 d lagrave độ

chiacutenh xaacutec tuyệt đối mong muốn chọn d = 005 Từ đoacute tiacutenh được n =

1271 Nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute cỡ mẫu lagrave 128 bệnh nhacircn

224 Caacutec bƣớc tiến hagravenh nghiecircn cứu

2241 Nhoacutem bệnh nhacircn lupus ban đỏ hệ thống

Lựa chọn vagraveo danh saacutech nghiecircn cứu vagrave gắn matilde bệnh aacuten

Lần khaacutem 1 khaacutem lacircm sagraveng khai thaacutec tiền sử xeacutet nghiệm

CLS thocircng thường (định lượng urecirc creatinin glucose AST ALT

albumin cholesterol triglyceride C3 vagrave C4 bổ thể trong huyết thanh

tế bagraveo niệu trụ niệu định lượng protein niệu 24 giờhellip) định lượng

khaacuteng thể khaacuteng nhacircn khaacuteng dsDNA khaacuteng nucleosome vagrave khaacuteng

C1q phacircn tiacutech caacutec nhoacutem triệu chứng bệnh đaacutenh giaacute điểm SELENA-

SLEDAI mức độ hoạt động của bệnh sự xuất hiện đợt cấp của

bệnh Chỉ số Hoạt động Thận của SLICC 2008 đợt cấp thận lupus

Theo dotildei định kỳ caacutec bệnh nhacircn được thăm khaacutem định kỳ

hagraveng thaacuteng hoặc ngay khi coacute caacutec dấu hiệu bất thường Quaacute trigravenh

nghiecircn cứu kết thuacutec khi bệnh nhacircn được theo dotildei đủ 12 thaacuteng hoặc

khi được phaacutet hiện coacute thai hoặc bị mất theo dotildei Caacutec bước thăm

khaacutem gồm khaacutem lacircm sagraveng xeacutet nghiệm CLS thocircng thường đaacutenh giaacute

caacutec triệu chứng bệnh sự xuất hiện đợt cấp của LBĐHT điểm SLICC

thận sự xuất hiện của đợt cấp thận lupus Định lượng khaacuteng thể

trong caacutec lần khaacutem coacute ghi nhận đợt cấp mới xuất hiện của bệnh hoặc

8

caacutec lần khaacutem được thực hiện trong vograveng 2 thaacuteng sau khi người bệnh

ra đatilde khỏi đợt cấp vagrave lần khaacutem cuối cugraveng Đaacutenh giaacute điểm SLEDAI

vagrave mức độ hoạt động bệnh ở caacutec lần khaacutem coacute xeacutet nghiệm khaacuteng thể

2242 Nhoacutem chứng 2 nhoacutem chứng được tiến hagravenh xeacutet nghiệm 4

loại khaacuteng thể tương tự nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT ở lần khaacutem 1

225 Địa điểm vagrave phƣơng phaacutep tiến hagravenh caacutec xeacutet nghiệm CLS

2251 Caacutec xeacutet nghiệm cận lacircm sagraveng thocircng thường được thực hiện

tại caacutec khoa phograveng tương ứng của Bệnh viện Bạch Mai

2252 Xeacutet nghiệm caacutec tự khaacuteng thể

a Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) vagrave khaacuteng dsDNA được định lượng

bằng kỹ thuật ELISA trecircn maacutey baacuten tự động Imarkreg của Hatildeng BIO-

RAD (kit của Hatildeng DRG) Địa điểm thực hiện phograveng xeacutet nghiệm

miễn dịch Trung tacircm Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng BV Bạch Mai

b Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng nucleosome được phaacutet hiện vagrave

định lượng bằng kỹ thuật ELISA trecircn maacutey tự động Alegriareg của

Hatildeng Orgentec (Đức) sử dụng kit của Hatildeng Orgentec Địa điểm

thực hiện tại Khoa Xeacutet nghiệm BV Đại học Y Hagrave Nội

226 Caacutec tiecircu chuẩn đaacutenh giaacute đƣợc sử dụng trong nghiecircn cứu

2261 Đaacutenh giaacute caacutec biểu hiện của bệnh LBĐHT dựa theo caacutec

tiecircu chuẩn lacircm sagraveng của SLICC 2012

2262 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của bệnh dựa theo tiecircu chuẩn

đaacutenh giaacute của cocircng cụ SELENA-SLEDAI

2263 Đaacutenh giaacute đợt cấp của LBĐHT Dựa vagraveo định nghĩa sử dụng

trong nghiecircn cứu SELENA

2264 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của tổn thương thận lupus

dựa vagraveo chỉ số hoạt động thận của SLICC năm 2008

2265 Đaacutenh giaacute đợt cấp tổn thương thận lupus dựa theo tiecircu

chuẩn của EULAR năm 2009

9

227 Sai số vagrave caacutech khắc phục sai số khắc phục caacutec sai số bằng

caacutech khai thaacutec kỹ triệu chứng lacircm sagraveng tiền sử kiểm tra vagrave đaacutenh giaacute

lại caacutec chỉ số hoạt động bệnh lagravem sạch số liệu trước khi xử lyacute

228 Xử lyacute số liệu Caacutec số liệu nghiecircn cứu được xử lyacute bằng phần

mềm toaacuten thống kecirc MEDCALC 140

229 Đạo đức của nghiecircn cứu

Nghiecircn cứu được tiến hagravenh tại caacutec cơ sở y tế coacute uy tiacuten với sự

đồng yacute của latildenh đạo caacutec đơn vị Đacircy lagrave nghiecircn cứu mocirc tả khocircng coacute

can thiệp tất cả caacutec đối tượng nghiecircn cứu đều tự nguyện tham gia

Caacutec số liệu thu được chỉ phục vụ cho mục điacutech nghiecircn cứu vagrave chăm

soacutec sức khỏe người bệnh khocircng phục vụ cho caacutec mục điacutech khaacutec

Chƣơng 3 KẾT QUẢ NGHIEcircN CỨU

31 Đặc điểm chung của caacutec đối tƣợng nghiecircn cứu

Bảng 31 Đặc điểm về tuổi vagrave giới

Nhoacutem nghiecircn cứu n Tuổi (X ) Tỷ lệ nữ nam

Nhoacutem LBĐHT 128 311 946 1322

Nhoacutem chứng bệnh 39 4305 17 333

Nhoacutem chứng khỏe 30 3163 1357 14

p 000036

04

0011

074

Nhoacutem LBĐHT so với nhoacutem chứng bệnh

Nhoacutem LBĐHT so với nhoacutem chứng khỏe

Tuổi trung bigravenh của nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lagrave 311 946

thấp hơn so với nhoacutem chứng bệnh (p = 000036) nhưng khocircng khaacutec

biệt so với nhoacutem chứng khỏe mạnh (p = 04) Tỷ lệ nữnam ở nhoacutem

LBĐHT lagrave 1322 tương đương nhoacutem chứng khỏe mạnh (p = 074)

nhưng cao hơn so với nhoacutem chứng bệnh (p = 0011)

Bảng 32 Phacircn bố theo nhoacutem tuổi của nhoacutem LBĐHT

Nhoacutem tuổi 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Tổng

10

n 1 67 52 7 1 128

Tỷ lệ 08 523 406 55 08 100

Caacutec bệnh nhacircn phần lớn gặp trong nhoacutem tuổi 20 ndash 30 (437)

vagrave 31 ndash 40 (336) thấp nhất lagrave ở nhoacutem gt 50 tuổi (47) Phacircn bố

caacutec nhoacutem tuổi khocircng coacute sự khaacutec biệt giữa 2 giới với p = 051

Bảng 33 Phacircn bố bệnh nhacircn LBĐHT theo thời gian mắc bệnh

Khoảng thời

gian (năm) Số lƣợng Tỷ lệ ()

Thời gian

trung bigravenh

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

TỔNG SỐ 128 100 517 37

Thời gian mắc bệnh của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT gặp nhiều

nhất trong khoảng 2 ndash 5 năm (516) vagrave 6 ndash 10 năm (25) Thời

gian mắc bệnh trung bigravenh lagrave 517 37 (năm)

Bảng 34 Phacircn bố bệnh nhacircn LBĐHT theo tuổi khởi phaacutet bệnh

Nhoacutem tuổi Số lƣợng Tỷ lệ () Tuổi trung bigravenh

15 14 109 1271 23

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

TỔNG SỐ 128 100 2593 974

Phần lớn bệnh nhacircn khởi phaacutet bệnh ở độ tuổi 16 ndash 25 (43) vagrave

26 ndash 35 (281) Số bệnh nhacircn khởi phaacutet bệnh sau 45 tuổi chỉ chiếm

11

39 Tuổi phaacutet bệnh trung bigravenh của caacutec bệnh nhacircn lagrave 2593 974

Tiền sử mắc LBĐHT của người thacircn 6128 bệnh nhacircn

LBĐHT coacute người thacircn trong gia đigravenh (cha mẹ anh chị em ruột)

cugraveng mắc LBĐHT chiếm tỷ lệ 469

12

Bảng 35 Một số biểu hiện lacircm sagraveng ở thời điểm đầu nghiecircn cứu

Tỷ lệ gặp cao nhất lagrave caacutec biểu hiện giảm bổ thể (622) rụng

toacutec (531) vagrave tổn thương thận (453) Iacutet gặp nhất lagrave caacutec biểu hiện

viecircm thanh mạc tan maacuteu (23) vagrave tổn thương thần kinh (31)

Bảng 36 Mức độ hoạt động của LBĐHT

TT Mức độ hoạt động Số lƣợng Tỷ lệ ()

1 Ổn định 15 117

2 Hoạt động nhẹ 57 445

3 Hoạt động trung bigravenh 37 289

4 Hoạt động mạnh 19 148

5 Đợt cấp LBĐHT 51 398

6 Điểm SLEDAI (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Điểm SLICC thận (X ) 312 42 (0 - 15)

TT Tiecircu chuẩn n Tỷ lệ ()

1 Caacutec tổn thương da lupus cấp baacuten cấp 49 383

2 Caacutec tổn thương da lupus mạn tiacutenh 21 164

3 Loeacutet niecircm mạc 9 7

4 Rụng toacutec 68 531

5 Biểu hiện khớp 45 352

6 Viecircm thanh mạc 3 23

7 Tổn thương thận 58 453

8 Tổn thương thần kinh 4 31

9 Thiếu maacuteu tan maacuteu 3 23

10 Giảm bạch cầu 42 328

11 Giảm tiểu cầu 5 39

12 Giảm bổ thể 79 622

13

Ở thời điểm khởi đầu nghiecircn cứu phần lớn bệnh nhacircn coacute bệnh

hoạt động ở mức độ nhẹ vagrave trung bigravenh (lần lượt chiếm 445 vagrave

289) Điểm SLEDAI dao động khaacute lớn trong khoảng 0 ndash 41

(trung bigravenh lagrave 661 62) Tỷ lệ bệnh nhacircn coacute đợt cấp LBĐHT lagrave

398 Điểm SLICC thận lupus trung bigravenh lagrave 312 42

32 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của

caacutec tự khaacuteng thể

Bảng 37 Tỷ lệ dương tiacutenh của tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Nhoacutem chứng

bệnh

(n = 39)

Nhoacutem chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN 859 5385 67 3333

Khaacuteng dsDNA 641 256 67 435

Khaacuteng Nucl 813 256 0 145

Khaacuteng C1q 25 0 0 0

Tỷ lệ dương tiacutenh của caacutec khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh nhacircn

LBĐHT theo thứ tự KTKN (859) gt khaacuteng Nucl (813) gt khaacuteng

dsDNA (641) gt khaacuteng C1q (25) tất cả đều cao hơn rotilde rệt so

với caacutec nhoacutem chứng với p lt 0005

Bảng 38 Nồng độ trung bigravenh của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Chứng

bệnh

(n = 39)

Chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Khaacuteng dsDNA (IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

Khaacuteng Nucl (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Khaacuteng C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

14

Nồng độ trung bigravenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 945 1385 (IUml) vagrave 3221 6034

(IUml) đều cao hơn caacutec nhoacutem chứng với p lt 00001

Bảng 39 Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 8594 6667 8271 7187

Khaacuteng dsDNA 6406 9565 9647 5863

Khaacuteng Nucl 8125 9855 9905 7391

Khaacuteng C1q 25 100 100 4182

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute độ đặc hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương

tiacutenh với LBĐHT tương đương KT khaacuteng dsDNA nhưng độ nhạy vagrave

giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh đều cao hơn Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh cao nhất trong 4 khaacuteng thể trong

khi đoacute KTKN coacute độ nhạy cao nhất nhưng độ đặc hiệu lagrave thấp nhất

Bảng 310 Giaacute trị chẩn đoaacuten của caacutec khaacuteng thể qua đường cong ROC

Khaacuteng thể (AUC) KTKN

(0716)

Khaacuteng

dsDNA

(089)

Khaacuteng

C1q

(0676)

Khaacuteng

Nucl

(0911)

KTKN (0716) p=00001 p=044 plt0001

Khaacuteng dsDNA (089) p=00001 plt0001 p=044

Khaacuteng C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

Khaacuteng Nucl (0911) plt0001 p=044 plt0001

Caacutec khaacuteng thể khaacuteng Nucl khaacuteng dsDNA KTKN vagrave khaacuteng

C1q lần lượt coacute giaacute trị rất tốt tốt khaacute tốt vagrave iacutet giaacute trị trong chẩn đoaacuten

15

LBĐHT Diện tiacutech dưới đường cong ROC (AUC) của caacutec KT khaacuteng

Nucl vagrave khaacuteng dsDNA đều cao hơn coacute yacute nghĩa thống kecirc so với

KTKN vagrave khaacuteng C1q

33 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Bảng 311 Liecircn quan giữa KTKN với caacutec biểu hiện của LBĐHT

Nhoacutem triệu

chứng

KTKN KT khaacuteng

dsDNA

KT khaacuteng

C1q

KT khaacuteng

Nucl

OR p OR p OR p OR p

Tổn thương da

lupus cấp baacuten

cấp

311 007 258 00056 082 055 238 008

Tổn thương da

lupus mạn tiacutenh 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Loeacutet niecircm mạc 057 04 055 026 121 074 291 031

Rụng toacutec 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Biểu hiện khớp 166 025 118 055 142 021 179 017

Viecircm thanh mạc 106 097 129 083 12 088 143 081

Tổn thương

thận 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Tổn thương

thần kinh 088 091 025 01 039 039 025 008

Tan maacuteu 044 048 064 066 026 037 168 066

Giảm BC 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Giảm TC 149 071 3 016 446 002 204 05

Giảm bổ thể 1006 lt00001 327 lt00001 372 lt00001 1611 lt0001

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute

16

liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn

quan với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp tổn thương

da lupus mạn tiacutenh giảm BC vagrave giảm bổ thể Khaacuteng thể khaacuteng C1q

dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng

toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan

với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Bảng 312 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể ở bệnh nhacircn LBĐHT

Khaacuteng thể Tỷ lệ (+) OR p

KTKN (+)

Khaacuteng dsDNA 6932 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3227 393 0012

Khaacuteng Nucl 8924 1089 lt00001

Khaacuteng dsDNA

(+)

KTKN 9943 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3714 274 00005

Khaacuteng Nucl 9543 1144 lt00001

Khaacuteng C1q (+)

Khaacuteng dsDNA 7647 274 00005

KTKN 9529 393 0012

Khaacuteng Nucl 9412 43 0003

Khaacuteng Nucl (+)

KTKN 9333 1089 lt00001

Khaacuteng C1q 3333 43 0003

Khaacuteng dsDNA 6958 1144 lt00001

Sự dương tiacutenh của caacutec tự khaacuteng thể đều coacute mối liecircn quan thuận

coacute yacute nghĩa thống kecirc với nhau (p lt 005) trong đoacute mối liecircn quan rotilde

rệt nhất lagrave giữa 3 khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng Nucl vagrave KTKN

17

Bảng 313 Liecircn quan giữa tự khaacuteng thể với độ hoạt động của bệnh

Khaacuteng thể

Mức độ hoạt động của LBĐHT p

Mạnh

(n = 36) (I)

Trung bigravenh

(n = 67)(II)

Nhẹổn

(n = 185)(III) I vagrave II II vagrave III

KTKN 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Khaacuteng

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Khaacuteng

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

Khaacuteng

Nucl

100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt0000

1

So với nhoacutem bệnh hoạt động trung bigravenh tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh cao hơn rotilde rệt với p =

00025 Nồng độ trung bigravenh của khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave KT

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh đều cao hơn rotilde rệt Tỷ lệ

(+) vagrave nồng độ trung bigravenh của 4 khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh hoạt động

trung bigravenh đều cao hơn so với nhoacutem bệnh hoạt động nhẹ ổn định

Bảng 314 Tương quan giữa nồng độ khaacuteng thể với điểm SLEDAI vagrave

điểm SLICC thận

Khaacuteng thể SLEDAI SLICC thận

r p r p

KTKN 0306 lt00001 0143 lt0013

Khaacuteng dsDNA 056 lt00001 0216 00002

Khaacuteng C1q 0433 lt00001 0399 lt00001

Khaacuteng Nucl 0648 lt00001 0348 00082

18

Nồng độ KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA tương quan thuận

chặt chẽ nhất với điểm SLEDAI (p lt 0001) Nồng độ KT khaacuteng

C1q tương quan chặt chẽ nhất với điểm SLICC thận (r = 0399)

Bảng 315 Thay đổi nồng độ caacutec khaacuteng thể sau đợt cấp

Khaacuteng thể Tỷ lệ

giảm

Khaacutec biệt

trung bigravenh

Test t

gheacutep cặp p

KTKN (OD) 625 -034 -143 016

Khaacuteng dsDNA (IUml) 6458 -19949 -1793 008

Khaacuteng C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

Khaacuteng Nucl (IUml) 8333 -47509 -39 00003

Với 48 đợt cấp được theo dotildei nồng độ trung bigravenh của caacutec KT

khaacuteng C1q (p = 0037) vagrave khaacuteng Nucl (p = 00003) sau đợt cấp giảm

coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Bảng 316 Giaacute trị dự đoaacuten đợt cấp LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 9759 6714 3227 9459

Khaacuteng dsDNA 759 4537 36 823

Khaacuteng C1q 5783 8195 5647 8276

Khaacuteng Nucl 9759 2244 3375 9583

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng C1q 4819 878 6154 8072

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng Nucl 759 4927 3772 8347

Khaacuteng Nucl + Khaacuteng C1q 5783 8439 60 8317

Trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT KTKN vagrave khaacuteng Nucl đều coacute

độ nhạy cao vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh cao gt 94 nhưng độ đặc hiệu

khaacute thấp Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu cao nhất (8195)

đặc biệt khi dương tiacutenh đồng thời với KT khaacuteng dsDNA (878)

19

Chƣơng 4 BAgraveN LUẬN

41 Đặc điểm của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT

411 Phacircn bố về tuổi vagrave giới tỷ lệ bệnh nhacircn nữ chiếm tới

9297 với tuổi trung bigravenh lagrave 311 946 trong đoacute phần lớn thuộc

nhoacutem tuổi từ 16 ndash 45 (929) Kết quả nagravey hoagraven toagraven phugrave hợp với

những kết quả nghiecircn cứu trước đacircy cho thấy đặc điểm dịch tễ học

cơ bản của LBĐHT lagrave thường xảy ra ở phụ nữ trong độ tuổi sinh đẻ

412 Về tuổi khởi phaacutet bệnh phần lớn bệnh nhacircn LBĐHT

khởi phaacutet bệnh trong giai đoạn 15 - 45 tuổi (852) tuổi khởi phaacutet

bệnh trung bigravenh lagrave 2593 974 Khaacute nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học

trecircn qui mocirc lớn cho thấy LBĐHT thường coacute xu hướng khởi phaacutet ở

nữ giới trong nhoacutem tuổi từ 15 - 45 giai đoạn coacute sự hoạt động mạnh

mẽ nhất của caacutec tuyến nội tiết hướng sinh dục nữ

413 Tiền sử gia đigravenh coacute ngƣời mắc LBĐHT 469 số

bệnh nhacircn LBĐHT coacute iacutet nhất một người thacircn trong gia đigravenh cugraveng

mắc bệnh Nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học đatilde cho thấy tỷ lệ mắc

LBĐHT ở những người thacircn của người bệnh thường cao gấp khoảng

10 - 20 lần so với tỷ lệ mắc chung trong cộng đồng (4 - 12) cho

thấy vai trograve của yếu tố di truyền trong cơ chế bệnh sinh của LBĐHT

414 Caacutec biểu hiện của LBĐHT Caacutec biểu hiện bệnh gặp

nhiều nhất lagrave rụng toacutec - 531 tổn thương thận - 453 tổn thương

da lupus cấp baacuten cấp - 383 giảm bạch cầu - 382 vagrave giảm bổ

thể - 622 Những kết quả nagravey khaacute tương đồng với nghiecircn cứu của

nhiều taacutec giả trong vagrave ngoagravei nước tuy nhiecircn tỷ lệ viecircm thanh mạc

tổn thương thần kinh vagrave giảm tiểu cầu gặp khaacute thấp nguyecircn nhacircn coacute

thể do sự khaacutec nhau trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu vagrave sự

khaacutec biệt về đặc điểm lacircm sagraveng của LBĐHT giữa caacutec chủng tộc

20

42 Về tỷ lệ dƣơng tiacutenh vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự

khaacuteng thể

421 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN)

Về tỷ lệ dương tiacutenh 859 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute KTKN

dương tiacutenh ở lần khaacutem 1 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ

dương tiacutenh của KTKN ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute sự dao động khaacute lớn

trong khoảng 60 ndash 100 nguyecircn nhacircn coacute thể lagrave do sự khaacutec biệt

trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu thiết kế nghiecircn cứu kỹ

thuật xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể sự

đảo chiều huyết thanh của KTKN

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm

tiacutenh của KTKN lần lượt lagrave 8594 vagrave 7231 khaacute thấp so với caacutec

kết quả nghiecircn cứu trước đacircy nguyecircn nhacircn coacute thể do nhoacutem bệnh

nhacircn nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute tỷ lệ KTKN acircm tiacutenh khaacute cao

(141) sự khaacutec biệt về caacutech thức lựa chọn vagrave đặc điểm của nhoacutem

chứng Độ đặc hiệu của KTKN với LBĐHT lagrave khaacute thấp (4615)

khi sử dụng nhoacutem chứng mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec nguyecircn nhacircn lagrave

do KTKN coacute thể xuất hiện trong nhiều bệnh lyacute tự miễn khaacutec

422 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA

Về tỷ lệ dương tiacutenh bệnh nhacircn LBĐHT 641 số bệnh nhacircn

LBĐHT trong nghiecircn cứu coacute KT khaacuteng dsDNA dương tiacutenh nằm

trong dải biến thiecircn 37 - 85 của caacutec kết quả nghiecircn cứu trước đacircy

Caacutec yếu tố coacute ảnh hưởng rotilde rệt nhất đến tỷ lệ nagravey lagrave mức độ hoạt

động vagrave tổn thương nội tạng của caacutec đối tượng nghiecircn cứu kỹ thuật

xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ đặc hiệu của KT khaacuteng

dsDNA trong chẩn đoaacuten LBĐHT ở nghiecircn cứu nagravey lagrave 9333 khi sử

dụng nhoacutem chứng khỏe mạnh vagrave 9744 khi sử dụng nhoacutem chứng

21

mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec tức lagrave hoagraven toagraven phugrave hợp với caacutec kết quả

nghiecircn cứu trước đacircy (95 ndash 100) Traacutei với độ đặc hiệu độ nhạy của

KT khaacuteng dsDNA với LBĐHT thường khocircng cao vagrave coacute khoảng dao

động khaacute lớn (13 - 86) Nguyecircn nhacircn coacute thể do tiacutenh chất dao động

thường xuyecircn của khaacuteng thể nagravey trong quaacute trigravenh diễn biến bệnh vagrave

độ nhạy khaacutec nhau của caacutec kỹ thuật xeacutet nghiệm miễn dịch

423 Khaacuteng thể khaacuteng C1q

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở bệnh nhacircn LBĐHT dao động trong khoảng 15 ndash

63 theo caacutec nghiecircn cứu trước đacircy kết quả của chuacuteng tocirci lagrave 25 ở

lần khaacutem 1 Trong 3 nghiecircn cứu coacute cỡ mẫu lớn nhất của Julkunen H

(2012) Mok CC (2010) vagrave Orbai AM (2015) tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q đều tương đối thấp vagrave iacutet coacute sự khaacutec biệt

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT KT khaacuteng C1q coacute giaacute trị keacutem

nhất trong chẩn đoaacuten vagrave phacircn loại LBĐHT với diện tiacutech dưới đường

cong ROC lagrave 0676 vagrave độ nhạy chỉ lagrave 25 Tỷ lệ dương tiacutenh thấp vagrave

dao động thường xuyecircn ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute thể lagrave nguyecircn nhacircn

chiacutenh lagravem giảm độ nhạy của khaacuteng thể nagravey trong chẩn đoaacuten bệnh

424 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome (KT khaacuteng Nucl )

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT Tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT trong nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci

lagrave 813 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ nagravey coacute khoảng dao

động rộng từ 45 đến 100 nguyecircn nhacircn lagrave do sự khaacutec biệt của caacutec

đối tượng nghiecircn cứu về chủng tộc vagrave mức độ hoạt động bệnh

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT nhiều nghiecircn cứu đatilde cho thấy độ

đặc hiệu rất cao của KT khaacuteng Nucl với LBĐHT (90 ndash 100) tương

đồng với kết quả thu được của chuacuteng tocirci lagrave 987 Nguyecircn nhacircn coacute

thể do nucleosome lagrave tự khaacuteng nguyecircn coacute vai trograve quan trọng trong cơ

22

chế bệnh sinh của LBĐHT Độ nhạy của KT khaacuteng Nucl với

LBĐHT trong nghiecircn cứu nagravey lagrave 8125 cao hơn so với KT khaacuteng

dsDNA (6406)

43 Về liecircn quan giữa caacutec khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

431 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh (ge 12

OD) ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với sự xuất

hiện của giảm bổ thể vagrave caacutec tự khaacuteng thể khaacutec Mối liecircn quan giữa

khaacuteng thể nagravey với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của

LBĐHT trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy lagrave khocircng rotilde rệt do thiếu

những bằng chứng đaacuteng tin cậy

432 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với caacutec biểu

hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp hoặc mạn tiacutenh giảm bạch cầu

vagrave giảm bổ thể nhưng khocircng liecircn quan với tổn thương thận lupus

Nồng độ vagrave tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng dsDNA ở nhoacutem bệnh

nhacircn trong đợt cấp đều cao hơn so với nhoacutem ngoagravei đợt cấp tuy nhiecircn

khaacuteng thể nagravey coacute liecircn quan khocircng hằng định với cả hoạt tiacutenh chung

của LBĐHT vagrave tổn thương thận đặc biệt lagrave với đợt cấp của bệnh

433 Khaacuteng thể khaacuteng C1q khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh ở

bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan rotilde rệt với sự xuất hiện của tổn thương

thận vagrave giảm bổ thể Độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey trong dự baacuteo tổn

thương thận lupus cao hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại vagrave nồng độ của noacute

tương quan nghịch khaacute chặt với cả bổ thể C3 vagrave C4 (p lt 00001) Tỷ

lệ vagrave nồng độ trung bigravenh của KT khaacuteng C1q đều coacute xu hướng tăng

dần theo mức độ hoạt động của bệnh Tương quan giữa nồng độ KT

khaacuteng C1q với điểm SLICC thận vagrave độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey

trong dự baacuteo đợt cấp thận lupus cũng tốt hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại

23

434 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện tổn thương

da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận giảm BC vagrave giảm bổ thể Độ

nhạy trong dự baacuteo tổn thương thận lupus của KT khaacuteng Nucl cao

hơn so với caacutec khaacuteng thể cograven lại Tương quan với nồng độ bổ thể vagrave

điểm SLEDAI của khaacuteng thể nagravey cũng chặt chẽ hơn caacutec khaacuteng thể

cograven lại

KẾT LUẬN

Qua nghiecircn cứu 128 bệnh nhacircn LBĐHT với nhoacutem chứng gồm

39 người mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec vagrave 30 người khỏe mạnh chuacuteng

tocirci xin đưa ra một số kết luận sau

1 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten của một

số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể

Tỷ lệ dương tiacutenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 855 641 25 vagrave

813 tất cả đều cao hơn rotilde rệt so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở 587 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute

KT khaacuteng dsDNA acircm tiacutenh

Nồng độ trung bigravenh của caacutec KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng

C1q vagrave khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 3221 6034 (IUml) vagrave 945 1385

(IUml) tất cả đều cao hơn so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn coacute độ nhạy cao (8594) nhưng độ đặc

hiệu thấp (6667) với LBĐHT Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh 100 với LBĐHT nhưng độ nhạy

rất thấp (25)

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 8: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

5

bệnh nhacircn LBĐHT cho thấy sự biến đổi nồng độ của noacute coacute liecircn

quan rotilde rệt với sự xuất hiện caacutec đợt cấp của bệnh sau đoacute

133 Khaacuteng thể khaacuteng C1q được tigravem thấy trong LBĐHT vagrave nhiều

bệnh lyacute khaacutec như magravey đay viecircm mạch giảm bổ thể phugrave mạch di

truyền viecircm khớp dạng thấp hellip Khaacuteng thể nagravey coacute độ nhạy vagrave độ đặc

hiệu khocircng cao trong chẩn đoaacuten LBĐHT nhưng lagrave một trong những

khaacuteng thể coacute liecircn quan rotilde rệt nhất với tổn thương thận lupus Nồng

độ của KT khaacuteng C1q coacute mối tương quan chặt chẽ với mức độ hoạt

động của LBĐHT đặc biệt lagrave với tổn thương thận Khaacuteng thể nagravey coacute

giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh vagrave độ đặc hiệu khaacute cao với đợt cấp thận lupus

134 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute độ

nhạy dao động trong khoảng 50-90 vagrave độ đặc hiệu lagrave 90-99 trong

chẩn đoaacuten LBĐHT Caacutec nghiecircn cứu so saacutenh đối đầu giữa khaacuteng thể

nagravey vagrave KT khaacuteng dsDNA cho thấy KT khaacuteng Nucl coacute độ đặc hiệu

tương đương nhưng độ nhạy cao hơn so rotilde rệt Ngoagravei ra nồng độ KT

khaacuteng Nucl cũng coacute mối tương quan chặt chẽ với caacutec chỉ số đaacutenh giaacute

mức độ hoạt động của bệnh vagrave tổn thương thận lupus

Chƣơng 2 ĐỐI TƢỢNG VAgrave PHƢƠNG PHAacuteP

21 Đối tƣợng nghiecircn cứu

211 Nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT

Bao gồm 128 bệnh nhacircn được chẩn đoaacuten lupus ban đỏ hệ

thống theo tiecircu chuẩn SLICC 2012 theo dotildei vagrave điều trị tại Trung tacircm

Dị ứng ndash Miễn dịch Lacircm sagraveng vagrave Phograveng Quản lyacute bệnh lupus ban đỏ

hệ thống Khoa Khaacutem bệnh - Bệnh viện Bạch Mai từ thaacuteng 032014

đến thaacuteng 022016

Tiecircu chuẩn loại trừ phụ nữ coacute thai bệnh nhacircn coacute mắc kegravem

caacutec bệnh nội khoa nặng như tiểu đường suy tim suy chức năng gan

6

bệnh nhacircn bị mắc giang mai hoặc HIVAIDS bệnh nhacircn coacute mắc

kegravem caacutec bệnh tự miễn khaacutec bệnh nhacircn khocircng đồng yacute tham gia

nghiecircn cứu

212 Nhoacutem chứng

Nhoacutem chứng bệnh bao gồm 39 người mắc caacutec bệnh tự

miễn dịch khaacutec LBĐHT được chẩn đoaacuten xaacutec định vagrave điều trị tại

Trung tacircm Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng BV Bạch Mai vagrave phograveng

khaacutem chuyecircn khoa Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng khoa Khaacutem Bệnh

BV Bạch Mai từ 22016 đến 4 2016

Khocircng phacircn biệt tuổi giới nghề nghiệp trigravenh độ học vấn

nơi cư truacute

Khocircng bị suy tế bagraveo gan hoặc hoặc nhiễm HIVAIDS

Chấp nhận tham gia nghiecircn cứu

Nhoacutem chứng khỏe mạnh 30 người khỏe mạnh coacute độ tuổi

vagrave phacircn bố giới tiacutenh tương đồng với nhoacutem bệnh nhacircn nghiecircn cứu

Khocircng coacute tiền sử mắc caacutec bệnh lyacute tự miễn khocircng coacute người

thacircn thuộc caacutec thế hệ thứ nhất vagrave thứ 2 mắc caacutec bệnh lyacute tự miễn dịch

Khocircng phacircn biệt nghề nghiệp trigravenh độ học vấn nơi cư truacute

Chấp nhận tham gia nghiecircn cứu

22 Phƣơng phaacutep nghiecircn cứu

221 Phƣơng phaacutep nghiecircn cứu Mocirc tả cắt ngang + theo dotildei dọc

222 Chọn mẫu

Mẫu nghiecircn cứu được lấy theo phương phaacutep chọn mẫu thuận

tiện Caacutec đối tượng được lựa chọn theo trigravenh tự thời gian khocircng

phacircn biệt tuổi taacutec giới tiacutenh mức độ hoạt động vagrave hủy hoại vĩnh viễn

223 Cỡ mẫu

Cỡ mẫu nghiecircn cứu mocirc tả cắt ngang được tiacutenh dựa theo cocircng

thức dugraveng để ước tiacutenh một tỷ lệ của tổ chức y tế thế giới

7

trong đoacute n lagrave cỡ mẫu tối thiểu lagrave mức yacute nghĩa thống kecirc tương ứng

với khoảng tin cậy 95 = 005 Z1-2 lagrave Z score tương ứng với

mức yacute nghĩa thống kecirc mong muốn với = 005 thigrave Z1-2 = 196 p lagrave

tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng nucleosome ở bệnh nhacircn LBĐHT (p

= 0909 theo Đặng Thu Hương - Tạp chiacute Y học Thagravenh phố Hồ Chiacute

Minh 2013 tập 17 phụ bản 1 tr 294-300) q = 1 - p = 0091 d lagrave độ

chiacutenh xaacutec tuyệt đối mong muốn chọn d = 005 Từ đoacute tiacutenh được n =

1271 Nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute cỡ mẫu lagrave 128 bệnh nhacircn

224 Caacutec bƣớc tiến hagravenh nghiecircn cứu

2241 Nhoacutem bệnh nhacircn lupus ban đỏ hệ thống

Lựa chọn vagraveo danh saacutech nghiecircn cứu vagrave gắn matilde bệnh aacuten

Lần khaacutem 1 khaacutem lacircm sagraveng khai thaacutec tiền sử xeacutet nghiệm

CLS thocircng thường (định lượng urecirc creatinin glucose AST ALT

albumin cholesterol triglyceride C3 vagrave C4 bổ thể trong huyết thanh

tế bagraveo niệu trụ niệu định lượng protein niệu 24 giờhellip) định lượng

khaacuteng thể khaacuteng nhacircn khaacuteng dsDNA khaacuteng nucleosome vagrave khaacuteng

C1q phacircn tiacutech caacutec nhoacutem triệu chứng bệnh đaacutenh giaacute điểm SELENA-

SLEDAI mức độ hoạt động của bệnh sự xuất hiện đợt cấp của

bệnh Chỉ số Hoạt động Thận của SLICC 2008 đợt cấp thận lupus

Theo dotildei định kỳ caacutec bệnh nhacircn được thăm khaacutem định kỳ

hagraveng thaacuteng hoặc ngay khi coacute caacutec dấu hiệu bất thường Quaacute trigravenh

nghiecircn cứu kết thuacutec khi bệnh nhacircn được theo dotildei đủ 12 thaacuteng hoặc

khi được phaacutet hiện coacute thai hoặc bị mất theo dotildei Caacutec bước thăm

khaacutem gồm khaacutem lacircm sagraveng xeacutet nghiệm CLS thocircng thường đaacutenh giaacute

caacutec triệu chứng bệnh sự xuất hiện đợt cấp của LBĐHT điểm SLICC

thận sự xuất hiện của đợt cấp thận lupus Định lượng khaacuteng thể

trong caacutec lần khaacutem coacute ghi nhận đợt cấp mới xuất hiện của bệnh hoặc

8

caacutec lần khaacutem được thực hiện trong vograveng 2 thaacuteng sau khi người bệnh

ra đatilde khỏi đợt cấp vagrave lần khaacutem cuối cugraveng Đaacutenh giaacute điểm SLEDAI

vagrave mức độ hoạt động bệnh ở caacutec lần khaacutem coacute xeacutet nghiệm khaacuteng thể

2242 Nhoacutem chứng 2 nhoacutem chứng được tiến hagravenh xeacutet nghiệm 4

loại khaacuteng thể tương tự nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT ở lần khaacutem 1

225 Địa điểm vagrave phƣơng phaacutep tiến hagravenh caacutec xeacutet nghiệm CLS

2251 Caacutec xeacutet nghiệm cận lacircm sagraveng thocircng thường được thực hiện

tại caacutec khoa phograveng tương ứng của Bệnh viện Bạch Mai

2252 Xeacutet nghiệm caacutec tự khaacuteng thể

a Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) vagrave khaacuteng dsDNA được định lượng

bằng kỹ thuật ELISA trecircn maacutey baacuten tự động Imarkreg của Hatildeng BIO-

RAD (kit của Hatildeng DRG) Địa điểm thực hiện phograveng xeacutet nghiệm

miễn dịch Trung tacircm Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng BV Bạch Mai

b Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng nucleosome được phaacutet hiện vagrave

định lượng bằng kỹ thuật ELISA trecircn maacutey tự động Alegriareg của

Hatildeng Orgentec (Đức) sử dụng kit của Hatildeng Orgentec Địa điểm

thực hiện tại Khoa Xeacutet nghiệm BV Đại học Y Hagrave Nội

226 Caacutec tiecircu chuẩn đaacutenh giaacute đƣợc sử dụng trong nghiecircn cứu

2261 Đaacutenh giaacute caacutec biểu hiện của bệnh LBĐHT dựa theo caacutec

tiecircu chuẩn lacircm sagraveng của SLICC 2012

2262 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của bệnh dựa theo tiecircu chuẩn

đaacutenh giaacute của cocircng cụ SELENA-SLEDAI

2263 Đaacutenh giaacute đợt cấp của LBĐHT Dựa vagraveo định nghĩa sử dụng

trong nghiecircn cứu SELENA

2264 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của tổn thương thận lupus

dựa vagraveo chỉ số hoạt động thận của SLICC năm 2008

2265 Đaacutenh giaacute đợt cấp tổn thương thận lupus dựa theo tiecircu

chuẩn của EULAR năm 2009

9

227 Sai số vagrave caacutech khắc phục sai số khắc phục caacutec sai số bằng

caacutech khai thaacutec kỹ triệu chứng lacircm sagraveng tiền sử kiểm tra vagrave đaacutenh giaacute

lại caacutec chỉ số hoạt động bệnh lagravem sạch số liệu trước khi xử lyacute

228 Xử lyacute số liệu Caacutec số liệu nghiecircn cứu được xử lyacute bằng phần

mềm toaacuten thống kecirc MEDCALC 140

229 Đạo đức của nghiecircn cứu

Nghiecircn cứu được tiến hagravenh tại caacutec cơ sở y tế coacute uy tiacuten với sự

đồng yacute của latildenh đạo caacutec đơn vị Đacircy lagrave nghiecircn cứu mocirc tả khocircng coacute

can thiệp tất cả caacutec đối tượng nghiecircn cứu đều tự nguyện tham gia

Caacutec số liệu thu được chỉ phục vụ cho mục điacutech nghiecircn cứu vagrave chăm

soacutec sức khỏe người bệnh khocircng phục vụ cho caacutec mục điacutech khaacutec

Chƣơng 3 KẾT QUẢ NGHIEcircN CỨU

31 Đặc điểm chung của caacutec đối tƣợng nghiecircn cứu

Bảng 31 Đặc điểm về tuổi vagrave giới

Nhoacutem nghiecircn cứu n Tuổi (X ) Tỷ lệ nữ nam

Nhoacutem LBĐHT 128 311 946 1322

Nhoacutem chứng bệnh 39 4305 17 333

Nhoacutem chứng khỏe 30 3163 1357 14

p 000036

04

0011

074

Nhoacutem LBĐHT so với nhoacutem chứng bệnh

Nhoacutem LBĐHT so với nhoacutem chứng khỏe

Tuổi trung bigravenh của nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lagrave 311 946

thấp hơn so với nhoacutem chứng bệnh (p = 000036) nhưng khocircng khaacutec

biệt so với nhoacutem chứng khỏe mạnh (p = 04) Tỷ lệ nữnam ở nhoacutem

LBĐHT lagrave 1322 tương đương nhoacutem chứng khỏe mạnh (p = 074)

nhưng cao hơn so với nhoacutem chứng bệnh (p = 0011)

Bảng 32 Phacircn bố theo nhoacutem tuổi của nhoacutem LBĐHT

Nhoacutem tuổi 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Tổng

10

n 1 67 52 7 1 128

Tỷ lệ 08 523 406 55 08 100

Caacutec bệnh nhacircn phần lớn gặp trong nhoacutem tuổi 20 ndash 30 (437)

vagrave 31 ndash 40 (336) thấp nhất lagrave ở nhoacutem gt 50 tuổi (47) Phacircn bố

caacutec nhoacutem tuổi khocircng coacute sự khaacutec biệt giữa 2 giới với p = 051

Bảng 33 Phacircn bố bệnh nhacircn LBĐHT theo thời gian mắc bệnh

Khoảng thời

gian (năm) Số lƣợng Tỷ lệ ()

Thời gian

trung bigravenh

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

TỔNG SỐ 128 100 517 37

Thời gian mắc bệnh của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT gặp nhiều

nhất trong khoảng 2 ndash 5 năm (516) vagrave 6 ndash 10 năm (25) Thời

gian mắc bệnh trung bigravenh lagrave 517 37 (năm)

Bảng 34 Phacircn bố bệnh nhacircn LBĐHT theo tuổi khởi phaacutet bệnh

Nhoacutem tuổi Số lƣợng Tỷ lệ () Tuổi trung bigravenh

15 14 109 1271 23

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

TỔNG SỐ 128 100 2593 974

Phần lớn bệnh nhacircn khởi phaacutet bệnh ở độ tuổi 16 ndash 25 (43) vagrave

26 ndash 35 (281) Số bệnh nhacircn khởi phaacutet bệnh sau 45 tuổi chỉ chiếm

11

39 Tuổi phaacutet bệnh trung bigravenh của caacutec bệnh nhacircn lagrave 2593 974

Tiền sử mắc LBĐHT của người thacircn 6128 bệnh nhacircn

LBĐHT coacute người thacircn trong gia đigravenh (cha mẹ anh chị em ruột)

cugraveng mắc LBĐHT chiếm tỷ lệ 469

12

Bảng 35 Một số biểu hiện lacircm sagraveng ở thời điểm đầu nghiecircn cứu

Tỷ lệ gặp cao nhất lagrave caacutec biểu hiện giảm bổ thể (622) rụng

toacutec (531) vagrave tổn thương thận (453) Iacutet gặp nhất lagrave caacutec biểu hiện

viecircm thanh mạc tan maacuteu (23) vagrave tổn thương thần kinh (31)

Bảng 36 Mức độ hoạt động của LBĐHT

TT Mức độ hoạt động Số lƣợng Tỷ lệ ()

1 Ổn định 15 117

2 Hoạt động nhẹ 57 445

3 Hoạt động trung bigravenh 37 289

4 Hoạt động mạnh 19 148

5 Đợt cấp LBĐHT 51 398

6 Điểm SLEDAI (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Điểm SLICC thận (X ) 312 42 (0 - 15)

TT Tiecircu chuẩn n Tỷ lệ ()

1 Caacutec tổn thương da lupus cấp baacuten cấp 49 383

2 Caacutec tổn thương da lupus mạn tiacutenh 21 164

3 Loeacutet niecircm mạc 9 7

4 Rụng toacutec 68 531

5 Biểu hiện khớp 45 352

6 Viecircm thanh mạc 3 23

7 Tổn thương thận 58 453

8 Tổn thương thần kinh 4 31

9 Thiếu maacuteu tan maacuteu 3 23

10 Giảm bạch cầu 42 328

11 Giảm tiểu cầu 5 39

12 Giảm bổ thể 79 622

13

Ở thời điểm khởi đầu nghiecircn cứu phần lớn bệnh nhacircn coacute bệnh

hoạt động ở mức độ nhẹ vagrave trung bigravenh (lần lượt chiếm 445 vagrave

289) Điểm SLEDAI dao động khaacute lớn trong khoảng 0 ndash 41

(trung bigravenh lagrave 661 62) Tỷ lệ bệnh nhacircn coacute đợt cấp LBĐHT lagrave

398 Điểm SLICC thận lupus trung bigravenh lagrave 312 42

32 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của

caacutec tự khaacuteng thể

Bảng 37 Tỷ lệ dương tiacutenh của tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Nhoacutem chứng

bệnh

(n = 39)

Nhoacutem chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN 859 5385 67 3333

Khaacuteng dsDNA 641 256 67 435

Khaacuteng Nucl 813 256 0 145

Khaacuteng C1q 25 0 0 0

Tỷ lệ dương tiacutenh của caacutec khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh nhacircn

LBĐHT theo thứ tự KTKN (859) gt khaacuteng Nucl (813) gt khaacuteng

dsDNA (641) gt khaacuteng C1q (25) tất cả đều cao hơn rotilde rệt so

với caacutec nhoacutem chứng với p lt 0005

Bảng 38 Nồng độ trung bigravenh của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Chứng

bệnh

(n = 39)

Chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Khaacuteng dsDNA (IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

Khaacuteng Nucl (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Khaacuteng C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

14

Nồng độ trung bigravenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 945 1385 (IUml) vagrave 3221 6034

(IUml) đều cao hơn caacutec nhoacutem chứng với p lt 00001

Bảng 39 Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 8594 6667 8271 7187

Khaacuteng dsDNA 6406 9565 9647 5863

Khaacuteng Nucl 8125 9855 9905 7391

Khaacuteng C1q 25 100 100 4182

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute độ đặc hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương

tiacutenh với LBĐHT tương đương KT khaacuteng dsDNA nhưng độ nhạy vagrave

giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh đều cao hơn Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh cao nhất trong 4 khaacuteng thể trong

khi đoacute KTKN coacute độ nhạy cao nhất nhưng độ đặc hiệu lagrave thấp nhất

Bảng 310 Giaacute trị chẩn đoaacuten của caacutec khaacuteng thể qua đường cong ROC

Khaacuteng thể (AUC) KTKN

(0716)

Khaacuteng

dsDNA

(089)

Khaacuteng

C1q

(0676)

Khaacuteng

Nucl

(0911)

KTKN (0716) p=00001 p=044 plt0001

Khaacuteng dsDNA (089) p=00001 plt0001 p=044

Khaacuteng C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

Khaacuteng Nucl (0911) plt0001 p=044 plt0001

Caacutec khaacuteng thể khaacuteng Nucl khaacuteng dsDNA KTKN vagrave khaacuteng

C1q lần lượt coacute giaacute trị rất tốt tốt khaacute tốt vagrave iacutet giaacute trị trong chẩn đoaacuten

15

LBĐHT Diện tiacutech dưới đường cong ROC (AUC) của caacutec KT khaacuteng

Nucl vagrave khaacuteng dsDNA đều cao hơn coacute yacute nghĩa thống kecirc so với

KTKN vagrave khaacuteng C1q

33 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Bảng 311 Liecircn quan giữa KTKN với caacutec biểu hiện của LBĐHT

Nhoacutem triệu

chứng

KTKN KT khaacuteng

dsDNA

KT khaacuteng

C1q

KT khaacuteng

Nucl

OR p OR p OR p OR p

Tổn thương da

lupus cấp baacuten

cấp

311 007 258 00056 082 055 238 008

Tổn thương da

lupus mạn tiacutenh 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Loeacutet niecircm mạc 057 04 055 026 121 074 291 031

Rụng toacutec 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Biểu hiện khớp 166 025 118 055 142 021 179 017

Viecircm thanh mạc 106 097 129 083 12 088 143 081

Tổn thương

thận 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Tổn thương

thần kinh 088 091 025 01 039 039 025 008

Tan maacuteu 044 048 064 066 026 037 168 066

Giảm BC 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Giảm TC 149 071 3 016 446 002 204 05

Giảm bổ thể 1006 lt00001 327 lt00001 372 lt00001 1611 lt0001

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute

16

liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn

quan với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp tổn thương

da lupus mạn tiacutenh giảm BC vagrave giảm bổ thể Khaacuteng thể khaacuteng C1q

dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng

toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan

với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Bảng 312 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể ở bệnh nhacircn LBĐHT

Khaacuteng thể Tỷ lệ (+) OR p

KTKN (+)

Khaacuteng dsDNA 6932 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3227 393 0012

Khaacuteng Nucl 8924 1089 lt00001

Khaacuteng dsDNA

(+)

KTKN 9943 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3714 274 00005

Khaacuteng Nucl 9543 1144 lt00001

Khaacuteng C1q (+)

Khaacuteng dsDNA 7647 274 00005

KTKN 9529 393 0012

Khaacuteng Nucl 9412 43 0003

Khaacuteng Nucl (+)

KTKN 9333 1089 lt00001

Khaacuteng C1q 3333 43 0003

Khaacuteng dsDNA 6958 1144 lt00001

Sự dương tiacutenh của caacutec tự khaacuteng thể đều coacute mối liecircn quan thuận

coacute yacute nghĩa thống kecirc với nhau (p lt 005) trong đoacute mối liecircn quan rotilde

rệt nhất lagrave giữa 3 khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng Nucl vagrave KTKN

17

Bảng 313 Liecircn quan giữa tự khaacuteng thể với độ hoạt động của bệnh

Khaacuteng thể

Mức độ hoạt động của LBĐHT p

Mạnh

(n = 36) (I)

Trung bigravenh

(n = 67)(II)

Nhẹổn

(n = 185)(III) I vagrave II II vagrave III

KTKN 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Khaacuteng

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Khaacuteng

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

Khaacuteng

Nucl

100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt0000

1

So với nhoacutem bệnh hoạt động trung bigravenh tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh cao hơn rotilde rệt với p =

00025 Nồng độ trung bigravenh của khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave KT

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh đều cao hơn rotilde rệt Tỷ lệ

(+) vagrave nồng độ trung bigravenh của 4 khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh hoạt động

trung bigravenh đều cao hơn so với nhoacutem bệnh hoạt động nhẹ ổn định

Bảng 314 Tương quan giữa nồng độ khaacuteng thể với điểm SLEDAI vagrave

điểm SLICC thận

Khaacuteng thể SLEDAI SLICC thận

r p r p

KTKN 0306 lt00001 0143 lt0013

Khaacuteng dsDNA 056 lt00001 0216 00002

Khaacuteng C1q 0433 lt00001 0399 lt00001

Khaacuteng Nucl 0648 lt00001 0348 00082

18

Nồng độ KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA tương quan thuận

chặt chẽ nhất với điểm SLEDAI (p lt 0001) Nồng độ KT khaacuteng

C1q tương quan chặt chẽ nhất với điểm SLICC thận (r = 0399)

Bảng 315 Thay đổi nồng độ caacutec khaacuteng thể sau đợt cấp

Khaacuteng thể Tỷ lệ

giảm

Khaacutec biệt

trung bigravenh

Test t

gheacutep cặp p

KTKN (OD) 625 -034 -143 016

Khaacuteng dsDNA (IUml) 6458 -19949 -1793 008

Khaacuteng C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

Khaacuteng Nucl (IUml) 8333 -47509 -39 00003

Với 48 đợt cấp được theo dotildei nồng độ trung bigravenh của caacutec KT

khaacuteng C1q (p = 0037) vagrave khaacuteng Nucl (p = 00003) sau đợt cấp giảm

coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Bảng 316 Giaacute trị dự đoaacuten đợt cấp LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 9759 6714 3227 9459

Khaacuteng dsDNA 759 4537 36 823

Khaacuteng C1q 5783 8195 5647 8276

Khaacuteng Nucl 9759 2244 3375 9583

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng C1q 4819 878 6154 8072

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng Nucl 759 4927 3772 8347

Khaacuteng Nucl + Khaacuteng C1q 5783 8439 60 8317

Trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT KTKN vagrave khaacuteng Nucl đều coacute

độ nhạy cao vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh cao gt 94 nhưng độ đặc hiệu

khaacute thấp Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu cao nhất (8195)

đặc biệt khi dương tiacutenh đồng thời với KT khaacuteng dsDNA (878)

19

Chƣơng 4 BAgraveN LUẬN

41 Đặc điểm của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT

411 Phacircn bố về tuổi vagrave giới tỷ lệ bệnh nhacircn nữ chiếm tới

9297 với tuổi trung bigravenh lagrave 311 946 trong đoacute phần lớn thuộc

nhoacutem tuổi từ 16 ndash 45 (929) Kết quả nagravey hoagraven toagraven phugrave hợp với

những kết quả nghiecircn cứu trước đacircy cho thấy đặc điểm dịch tễ học

cơ bản của LBĐHT lagrave thường xảy ra ở phụ nữ trong độ tuổi sinh đẻ

412 Về tuổi khởi phaacutet bệnh phần lớn bệnh nhacircn LBĐHT

khởi phaacutet bệnh trong giai đoạn 15 - 45 tuổi (852) tuổi khởi phaacutet

bệnh trung bigravenh lagrave 2593 974 Khaacute nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học

trecircn qui mocirc lớn cho thấy LBĐHT thường coacute xu hướng khởi phaacutet ở

nữ giới trong nhoacutem tuổi từ 15 - 45 giai đoạn coacute sự hoạt động mạnh

mẽ nhất của caacutec tuyến nội tiết hướng sinh dục nữ

413 Tiền sử gia đigravenh coacute ngƣời mắc LBĐHT 469 số

bệnh nhacircn LBĐHT coacute iacutet nhất một người thacircn trong gia đigravenh cugraveng

mắc bệnh Nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học đatilde cho thấy tỷ lệ mắc

LBĐHT ở những người thacircn của người bệnh thường cao gấp khoảng

10 - 20 lần so với tỷ lệ mắc chung trong cộng đồng (4 - 12) cho

thấy vai trograve của yếu tố di truyền trong cơ chế bệnh sinh của LBĐHT

414 Caacutec biểu hiện của LBĐHT Caacutec biểu hiện bệnh gặp

nhiều nhất lagrave rụng toacutec - 531 tổn thương thận - 453 tổn thương

da lupus cấp baacuten cấp - 383 giảm bạch cầu - 382 vagrave giảm bổ

thể - 622 Những kết quả nagravey khaacute tương đồng với nghiecircn cứu của

nhiều taacutec giả trong vagrave ngoagravei nước tuy nhiecircn tỷ lệ viecircm thanh mạc

tổn thương thần kinh vagrave giảm tiểu cầu gặp khaacute thấp nguyecircn nhacircn coacute

thể do sự khaacutec nhau trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu vagrave sự

khaacutec biệt về đặc điểm lacircm sagraveng của LBĐHT giữa caacutec chủng tộc

20

42 Về tỷ lệ dƣơng tiacutenh vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự

khaacuteng thể

421 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN)

Về tỷ lệ dương tiacutenh 859 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute KTKN

dương tiacutenh ở lần khaacutem 1 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ

dương tiacutenh của KTKN ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute sự dao động khaacute lớn

trong khoảng 60 ndash 100 nguyecircn nhacircn coacute thể lagrave do sự khaacutec biệt

trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu thiết kế nghiecircn cứu kỹ

thuật xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể sự

đảo chiều huyết thanh của KTKN

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm

tiacutenh của KTKN lần lượt lagrave 8594 vagrave 7231 khaacute thấp so với caacutec

kết quả nghiecircn cứu trước đacircy nguyecircn nhacircn coacute thể do nhoacutem bệnh

nhacircn nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute tỷ lệ KTKN acircm tiacutenh khaacute cao

(141) sự khaacutec biệt về caacutech thức lựa chọn vagrave đặc điểm của nhoacutem

chứng Độ đặc hiệu của KTKN với LBĐHT lagrave khaacute thấp (4615)

khi sử dụng nhoacutem chứng mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec nguyecircn nhacircn lagrave

do KTKN coacute thể xuất hiện trong nhiều bệnh lyacute tự miễn khaacutec

422 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA

Về tỷ lệ dương tiacutenh bệnh nhacircn LBĐHT 641 số bệnh nhacircn

LBĐHT trong nghiecircn cứu coacute KT khaacuteng dsDNA dương tiacutenh nằm

trong dải biến thiecircn 37 - 85 của caacutec kết quả nghiecircn cứu trước đacircy

Caacutec yếu tố coacute ảnh hưởng rotilde rệt nhất đến tỷ lệ nagravey lagrave mức độ hoạt

động vagrave tổn thương nội tạng của caacutec đối tượng nghiecircn cứu kỹ thuật

xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ đặc hiệu của KT khaacuteng

dsDNA trong chẩn đoaacuten LBĐHT ở nghiecircn cứu nagravey lagrave 9333 khi sử

dụng nhoacutem chứng khỏe mạnh vagrave 9744 khi sử dụng nhoacutem chứng

21

mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec tức lagrave hoagraven toagraven phugrave hợp với caacutec kết quả

nghiecircn cứu trước đacircy (95 ndash 100) Traacutei với độ đặc hiệu độ nhạy của

KT khaacuteng dsDNA với LBĐHT thường khocircng cao vagrave coacute khoảng dao

động khaacute lớn (13 - 86) Nguyecircn nhacircn coacute thể do tiacutenh chất dao động

thường xuyecircn của khaacuteng thể nagravey trong quaacute trigravenh diễn biến bệnh vagrave

độ nhạy khaacutec nhau của caacutec kỹ thuật xeacutet nghiệm miễn dịch

423 Khaacuteng thể khaacuteng C1q

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở bệnh nhacircn LBĐHT dao động trong khoảng 15 ndash

63 theo caacutec nghiecircn cứu trước đacircy kết quả của chuacuteng tocirci lagrave 25 ở

lần khaacutem 1 Trong 3 nghiecircn cứu coacute cỡ mẫu lớn nhất của Julkunen H

(2012) Mok CC (2010) vagrave Orbai AM (2015) tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q đều tương đối thấp vagrave iacutet coacute sự khaacutec biệt

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT KT khaacuteng C1q coacute giaacute trị keacutem

nhất trong chẩn đoaacuten vagrave phacircn loại LBĐHT với diện tiacutech dưới đường

cong ROC lagrave 0676 vagrave độ nhạy chỉ lagrave 25 Tỷ lệ dương tiacutenh thấp vagrave

dao động thường xuyecircn ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute thể lagrave nguyecircn nhacircn

chiacutenh lagravem giảm độ nhạy của khaacuteng thể nagravey trong chẩn đoaacuten bệnh

424 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome (KT khaacuteng Nucl )

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT Tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT trong nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci

lagrave 813 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ nagravey coacute khoảng dao

động rộng từ 45 đến 100 nguyecircn nhacircn lagrave do sự khaacutec biệt của caacutec

đối tượng nghiecircn cứu về chủng tộc vagrave mức độ hoạt động bệnh

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT nhiều nghiecircn cứu đatilde cho thấy độ

đặc hiệu rất cao của KT khaacuteng Nucl với LBĐHT (90 ndash 100) tương

đồng với kết quả thu được của chuacuteng tocirci lagrave 987 Nguyecircn nhacircn coacute

thể do nucleosome lagrave tự khaacuteng nguyecircn coacute vai trograve quan trọng trong cơ

22

chế bệnh sinh của LBĐHT Độ nhạy của KT khaacuteng Nucl với

LBĐHT trong nghiecircn cứu nagravey lagrave 8125 cao hơn so với KT khaacuteng

dsDNA (6406)

43 Về liecircn quan giữa caacutec khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

431 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh (ge 12

OD) ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với sự xuất

hiện của giảm bổ thể vagrave caacutec tự khaacuteng thể khaacutec Mối liecircn quan giữa

khaacuteng thể nagravey với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của

LBĐHT trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy lagrave khocircng rotilde rệt do thiếu

những bằng chứng đaacuteng tin cậy

432 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với caacutec biểu

hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp hoặc mạn tiacutenh giảm bạch cầu

vagrave giảm bổ thể nhưng khocircng liecircn quan với tổn thương thận lupus

Nồng độ vagrave tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng dsDNA ở nhoacutem bệnh

nhacircn trong đợt cấp đều cao hơn so với nhoacutem ngoagravei đợt cấp tuy nhiecircn

khaacuteng thể nagravey coacute liecircn quan khocircng hằng định với cả hoạt tiacutenh chung

của LBĐHT vagrave tổn thương thận đặc biệt lagrave với đợt cấp của bệnh

433 Khaacuteng thể khaacuteng C1q khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh ở

bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan rotilde rệt với sự xuất hiện của tổn thương

thận vagrave giảm bổ thể Độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey trong dự baacuteo tổn

thương thận lupus cao hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại vagrave nồng độ của noacute

tương quan nghịch khaacute chặt với cả bổ thể C3 vagrave C4 (p lt 00001) Tỷ

lệ vagrave nồng độ trung bigravenh của KT khaacuteng C1q đều coacute xu hướng tăng

dần theo mức độ hoạt động của bệnh Tương quan giữa nồng độ KT

khaacuteng C1q với điểm SLICC thận vagrave độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey

trong dự baacuteo đợt cấp thận lupus cũng tốt hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại

23

434 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện tổn thương

da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận giảm BC vagrave giảm bổ thể Độ

nhạy trong dự baacuteo tổn thương thận lupus của KT khaacuteng Nucl cao

hơn so với caacutec khaacuteng thể cograven lại Tương quan với nồng độ bổ thể vagrave

điểm SLEDAI của khaacuteng thể nagravey cũng chặt chẽ hơn caacutec khaacuteng thể

cograven lại

KẾT LUẬN

Qua nghiecircn cứu 128 bệnh nhacircn LBĐHT với nhoacutem chứng gồm

39 người mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec vagrave 30 người khỏe mạnh chuacuteng

tocirci xin đưa ra một số kết luận sau

1 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten của một

số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể

Tỷ lệ dương tiacutenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 855 641 25 vagrave

813 tất cả đều cao hơn rotilde rệt so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở 587 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute

KT khaacuteng dsDNA acircm tiacutenh

Nồng độ trung bigravenh của caacutec KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng

C1q vagrave khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 3221 6034 (IUml) vagrave 945 1385

(IUml) tất cả đều cao hơn so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn coacute độ nhạy cao (8594) nhưng độ đặc

hiệu thấp (6667) với LBĐHT Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh 100 với LBĐHT nhưng độ nhạy

rất thấp (25)

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 9: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

6

bệnh nhacircn bị mắc giang mai hoặc HIVAIDS bệnh nhacircn coacute mắc

kegravem caacutec bệnh tự miễn khaacutec bệnh nhacircn khocircng đồng yacute tham gia

nghiecircn cứu

212 Nhoacutem chứng

Nhoacutem chứng bệnh bao gồm 39 người mắc caacutec bệnh tự

miễn dịch khaacutec LBĐHT được chẩn đoaacuten xaacutec định vagrave điều trị tại

Trung tacircm Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng BV Bạch Mai vagrave phograveng

khaacutem chuyecircn khoa Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng khoa Khaacutem Bệnh

BV Bạch Mai từ 22016 đến 4 2016

Khocircng phacircn biệt tuổi giới nghề nghiệp trigravenh độ học vấn

nơi cư truacute

Khocircng bị suy tế bagraveo gan hoặc hoặc nhiễm HIVAIDS

Chấp nhận tham gia nghiecircn cứu

Nhoacutem chứng khỏe mạnh 30 người khỏe mạnh coacute độ tuổi

vagrave phacircn bố giới tiacutenh tương đồng với nhoacutem bệnh nhacircn nghiecircn cứu

Khocircng coacute tiền sử mắc caacutec bệnh lyacute tự miễn khocircng coacute người

thacircn thuộc caacutec thế hệ thứ nhất vagrave thứ 2 mắc caacutec bệnh lyacute tự miễn dịch

Khocircng phacircn biệt nghề nghiệp trigravenh độ học vấn nơi cư truacute

Chấp nhận tham gia nghiecircn cứu

22 Phƣơng phaacutep nghiecircn cứu

221 Phƣơng phaacutep nghiecircn cứu Mocirc tả cắt ngang + theo dotildei dọc

222 Chọn mẫu

Mẫu nghiecircn cứu được lấy theo phương phaacutep chọn mẫu thuận

tiện Caacutec đối tượng được lựa chọn theo trigravenh tự thời gian khocircng

phacircn biệt tuổi taacutec giới tiacutenh mức độ hoạt động vagrave hủy hoại vĩnh viễn

223 Cỡ mẫu

Cỡ mẫu nghiecircn cứu mocirc tả cắt ngang được tiacutenh dựa theo cocircng

thức dugraveng để ước tiacutenh một tỷ lệ của tổ chức y tế thế giới

7

trong đoacute n lagrave cỡ mẫu tối thiểu lagrave mức yacute nghĩa thống kecirc tương ứng

với khoảng tin cậy 95 = 005 Z1-2 lagrave Z score tương ứng với

mức yacute nghĩa thống kecirc mong muốn với = 005 thigrave Z1-2 = 196 p lagrave

tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng nucleosome ở bệnh nhacircn LBĐHT (p

= 0909 theo Đặng Thu Hương - Tạp chiacute Y học Thagravenh phố Hồ Chiacute

Minh 2013 tập 17 phụ bản 1 tr 294-300) q = 1 - p = 0091 d lagrave độ

chiacutenh xaacutec tuyệt đối mong muốn chọn d = 005 Từ đoacute tiacutenh được n =

1271 Nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute cỡ mẫu lagrave 128 bệnh nhacircn

224 Caacutec bƣớc tiến hagravenh nghiecircn cứu

2241 Nhoacutem bệnh nhacircn lupus ban đỏ hệ thống

Lựa chọn vagraveo danh saacutech nghiecircn cứu vagrave gắn matilde bệnh aacuten

Lần khaacutem 1 khaacutem lacircm sagraveng khai thaacutec tiền sử xeacutet nghiệm

CLS thocircng thường (định lượng urecirc creatinin glucose AST ALT

albumin cholesterol triglyceride C3 vagrave C4 bổ thể trong huyết thanh

tế bagraveo niệu trụ niệu định lượng protein niệu 24 giờhellip) định lượng

khaacuteng thể khaacuteng nhacircn khaacuteng dsDNA khaacuteng nucleosome vagrave khaacuteng

C1q phacircn tiacutech caacutec nhoacutem triệu chứng bệnh đaacutenh giaacute điểm SELENA-

SLEDAI mức độ hoạt động của bệnh sự xuất hiện đợt cấp của

bệnh Chỉ số Hoạt động Thận của SLICC 2008 đợt cấp thận lupus

Theo dotildei định kỳ caacutec bệnh nhacircn được thăm khaacutem định kỳ

hagraveng thaacuteng hoặc ngay khi coacute caacutec dấu hiệu bất thường Quaacute trigravenh

nghiecircn cứu kết thuacutec khi bệnh nhacircn được theo dotildei đủ 12 thaacuteng hoặc

khi được phaacutet hiện coacute thai hoặc bị mất theo dotildei Caacutec bước thăm

khaacutem gồm khaacutem lacircm sagraveng xeacutet nghiệm CLS thocircng thường đaacutenh giaacute

caacutec triệu chứng bệnh sự xuất hiện đợt cấp của LBĐHT điểm SLICC

thận sự xuất hiện của đợt cấp thận lupus Định lượng khaacuteng thể

trong caacutec lần khaacutem coacute ghi nhận đợt cấp mới xuất hiện của bệnh hoặc

8

caacutec lần khaacutem được thực hiện trong vograveng 2 thaacuteng sau khi người bệnh

ra đatilde khỏi đợt cấp vagrave lần khaacutem cuối cugraveng Đaacutenh giaacute điểm SLEDAI

vagrave mức độ hoạt động bệnh ở caacutec lần khaacutem coacute xeacutet nghiệm khaacuteng thể

2242 Nhoacutem chứng 2 nhoacutem chứng được tiến hagravenh xeacutet nghiệm 4

loại khaacuteng thể tương tự nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT ở lần khaacutem 1

225 Địa điểm vagrave phƣơng phaacutep tiến hagravenh caacutec xeacutet nghiệm CLS

2251 Caacutec xeacutet nghiệm cận lacircm sagraveng thocircng thường được thực hiện

tại caacutec khoa phograveng tương ứng của Bệnh viện Bạch Mai

2252 Xeacutet nghiệm caacutec tự khaacuteng thể

a Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) vagrave khaacuteng dsDNA được định lượng

bằng kỹ thuật ELISA trecircn maacutey baacuten tự động Imarkreg của Hatildeng BIO-

RAD (kit của Hatildeng DRG) Địa điểm thực hiện phograveng xeacutet nghiệm

miễn dịch Trung tacircm Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng BV Bạch Mai

b Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng nucleosome được phaacutet hiện vagrave

định lượng bằng kỹ thuật ELISA trecircn maacutey tự động Alegriareg của

Hatildeng Orgentec (Đức) sử dụng kit của Hatildeng Orgentec Địa điểm

thực hiện tại Khoa Xeacutet nghiệm BV Đại học Y Hagrave Nội

226 Caacutec tiecircu chuẩn đaacutenh giaacute đƣợc sử dụng trong nghiecircn cứu

2261 Đaacutenh giaacute caacutec biểu hiện của bệnh LBĐHT dựa theo caacutec

tiecircu chuẩn lacircm sagraveng của SLICC 2012

2262 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của bệnh dựa theo tiecircu chuẩn

đaacutenh giaacute của cocircng cụ SELENA-SLEDAI

2263 Đaacutenh giaacute đợt cấp của LBĐHT Dựa vagraveo định nghĩa sử dụng

trong nghiecircn cứu SELENA

2264 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của tổn thương thận lupus

dựa vagraveo chỉ số hoạt động thận của SLICC năm 2008

2265 Đaacutenh giaacute đợt cấp tổn thương thận lupus dựa theo tiecircu

chuẩn của EULAR năm 2009

9

227 Sai số vagrave caacutech khắc phục sai số khắc phục caacutec sai số bằng

caacutech khai thaacutec kỹ triệu chứng lacircm sagraveng tiền sử kiểm tra vagrave đaacutenh giaacute

lại caacutec chỉ số hoạt động bệnh lagravem sạch số liệu trước khi xử lyacute

228 Xử lyacute số liệu Caacutec số liệu nghiecircn cứu được xử lyacute bằng phần

mềm toaacuten thống kecirc MEDCALC 140

229 Đạo đức của nghiecircn cứu

Nghiecircn cứu được tiến hagravenh tại caacutec cơ sở y tế coacute uy tiacuten với sự

đồng yacute của latildenh đạo caacutec đơn vị Đacircy lagrave nghiecircn cứu mocirc tả khocircng coacute

can thiệp tất cả caacutec đối tượng nghiecircn cứu đều tự nguyện tham gia

Caacutec số liệu thu được chỉ phục vụ cho mục điacutech nghiecircn cứu vagrave chăm

soacutec sức khỏe người bệnh khocircng phục vụ cho caacutec mục điacutech khaacutec

Chƣơng 3 KẾT QUẢ NGHIEcircN CỨU

31 Đặc điểm chung của caacutec đối tƣợng nghiecircn cứu

Bảng 31 Đặc điểm về tuổi vagrave giới

Nhoacutem nghiecircn cứu n Tuổi (X ) Tỷ lệ nữ nam

Nhoacutem LBĐHT 128 311 946 1322

Nhoacutem chứng bệnh 39 4305 17 333

Nhoacutem chứng khỏe 30 3163 1357 14

p 000036

04

0011

074

Nhoacutem LBĐHT so với nhoacutem chứng bệnh

Nhoacutem LBĐHT so với nhoacutem chứng khỏe

Tuổi trung bigravenh của nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lagrave 311 946

thấp hơn so với nhoacutem chứng bệnh (p = 000036) nhưng khocircng khaacutec

biệt so với nhoacutem chứng khỏe mạnh (p = 04) Tỷ lệ nữnam ở nhoacutem

LBĐHT lagrave 1322 tương đương nhoacutem chứng khỏe mạnh (p = 074)

nhưng cao hơn so với nhoacutem chứng bệnh (p = 0011)

Bảng 32 Phacircn bố theo nhoacutem tuổi của nhoacutem LBĐHT

Nhoacutem tuổi 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Tổng

10

n 1 67 52 7 1 128

Tỷ lệ 08 523 406 55 08 100

Caacutec bệnh nhacircn phần lớn gặp trong nhoacutem tuổi 20 ndash 30 (437)

vagrave 31 ndash 40 (336) thấp nhất lagrave ở nhoacutem gt 50 tuổi (47) Phacircn bố

caacutec nhoacutem tuổi khocircng coacute sự khaacutec biệt giữa 2 giới với p = 051

Bảng 33 Phacircn bố bệnh nhacircn LBĐHT theo thời gian mắc bệnh

Khoảng thời

gian (năm) Số lƣợng Tỷ lệ ()

Thời gian

trung bigravenh

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

TỔNG SỐ 128 100 517 37

Thời gian mắc bệnh của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT gặp nhiều

nhất trong khoảng 2 ndash 5 năm (516) vagrave 6 ndash 10 năm (25) Thời

gian mắc bệnh trung bigravenh lagrave 517 37 (năm)

Bảng 34 Phacircn bố bệnh nhacircn LBĐHT theo tuổi khởi phaacutet bệnh

Nhoacutem tuổi Số lƣợng Tỷ lệ () Tuổi trung bigravenh

15 14 109 1271 23

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

TỔNG SỐ 128 100 2593 974

Phần lớn bệnh nhacircn khởi phaacutet bệnh ở độ tuổi 16 ndash 25 (43) vagrave

26 ndash 35 (281) Số bệnh nhacircn khởi phaacutet bệnh sau 45 tuổi chỉ chiếm

11

39 Tuổi phaacutet bệnh trung bigravenh của caacutec bệnh nhacircn lagrave 2593 974

Tiền sử mắc LBĐHT của người thacircn 6128 bệnh nhacircn

LBĐHT coacute người thacircn trong gia đigravenh (cha mẹ anh chị em ruột)

cugraveng mắc LBĐHT chiếm tỷ lệ 469

12

Bảng 35 Một số biểu hiện lacircm sagraveng ở thời điểm đầu nghiecircn cứu

Tỷ lệ gặp cao nhất lagrave caacutec biểu hiện giảm bổ thể (622) rụng

toacutec (531) vagrave tổn thương thận (453) Iacutet gặp nhất lagrave caacutec biểu hiện

viecircm thanh mạc tan maacuteu (23) vagrave tổn thương thần kinh (31)

Bảng 36 Mức độ hoạt động của LBĐHT

TT Mức độ hoạt động Số lƣợng Tỷ lệ ()

1 Ổn định 15 117

2 Hoạt động nhẹ 57 445

3 Hoạt động trung bigravenh 37 289

4 Hoạt động mạnh 19 148

5 Đợt cấp LBĐHT 51 398

6 Điểm SLEDAI (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Điểm SLICC thận (X ) 312 42 (0 - 15)

TT Tiecircu chuẩn n Tỷ lệ ()

1 Caacutec tổn thương da lupus cấp baacuten cấp 49 383

2 Caacutec tổn thương da lupus mạn tiacutenh 21 164

3 Loeacutet niecircm mạc 9 7

4 Rụng toacutec 68 531

5 Biểu hiện khớp 45 352

6 Viecircm thanh mạc 3 23

7 Tổn thương thận 58 453

8 Tổn thương thần kinh 4 31

9 Thiếu maacuteu tan maacuteu 3 23

10 Giảm bạch cầu 42 328

11 Giảm tiểu cầu 5 39

12 Giảm bổ thể 79 622

13

Ở thời điểm khởi đầu nghiecircn cứu phần lớn bệnh nhacircn coacute bệnh

hoạt động ở mức độ nhẹ vagrave trung bigravenh (lần lượt chiếm 445 vagrave

289) Điểm SLEDAI dao động khaacute lớn trong khoảng 0 ndash 41

(trung bigravenh lagrave 661 62) Tỷ lệ bệnh nhacircn coacute đợt cấp LBĐHT lagrave

398 Điểm SLICC thận lupus trung bigravenh lagrave 312 42

32 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của

caacutec tự khaacuteng thể

Bảng 37 Tỷ lệ dương tiacutenh của tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Nhoacutem chứng

bệnh

(n = 39)

Nhoacutem chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN 859 5385 67 3333

Khaacuteng dsDNA 641 256 67 435

Khaacuteng Nucl 813 256 0 145

Khaacuteng C1q 25 0 0 0

Tỷ lệ dương tiacutenh của caacutec khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh nhacircn

LBĐHT theo thứ tự KTKN (859) gt khaacuteng Nucl (813) gt khaacuteng

dsDNA (641) gt khaacuteng C1q (25) tất cả đều cao hơn rotilde rệt so

với caacutec nhoacutem chứng với p lt 0005

Bảng 38 Nồng độ trung bigravenh của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Chứng

bệnh

(n = 39)

Chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Khaacuteng dsDNA (IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

Khaacuteng Nucl (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Khaacuteng C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

14

Nồng độ trung bigravenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 945 1385 (IUml) vagrave 3221 6034

(IUml) đều cao hơn caacutec nhoacutem chứng với p lt 00001

Bảng 39 Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 8594 6667 8271 7187

Khaacuteng dsDNA 6406 9565 9647 5863

Khaacuteng Nucl 8125 9855 9905 7391

Khaacuteng C1q 25 100 100 4182

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute độ đặc hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương

tiacutenh với LBĐHT tương đương KT khaacuteng dsDNA nhưng độ nhạy vagrave

giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh đều cao hơn Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh cao nhất trong 4 khaacuteng thể trong

khi đoacute KTKN coacute độ nhạy cao nhất nhưng độ đặc hiệu lagrave thấp nhất

Bảng 310 Giaacute trị chẩn đoaacuten của caacutec khaacuteng thể qua đường cong ROC

Khaacuteng thể (AUC) KTKN

(0716)

Khaacuteng

dsDNA

(089)

Khaacuteng

C1q

(0676)

Khaacuteng

Nucl

(0911)

KTKN (0716) p=00001 p=044 plt0001

Khaacuteng dsDNA (089) p=00001 plt0001 p=044

Khaacuteng C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

Khaacuteng Nucl (0911) plt0001 p=044 plt0001

Caacutec khaacuteng thể khaacuteng Nucl khaacuteng dsDNA KTKN vagrave khaacuteng

C1q lần lượt coacute giaacute trị rất tốt tốt khaacute tốt vagrave iacutet giaacute trị trong chẩn đoaacuten

15

LBĐHT Diện tiacutech dưới đường cong ROC (AUC) của caacutec KT khaacuteng

Nucl vagrave khaacuteng dsDNA đều cao hơn coacute yacute nghĩa thống kecirc so với

KTKN vagrave khaacuteng C1q

33 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Bảng 311 Liecircn quan giữa KTKN với caacutec biểu hiện của LBĐHT

Nhoacutem triệu

chứng

KTKN KT khaacuteng

dsDNA

KT khaacuteng

C1q

KT khaacuteng

Nucl

OR p OR p OR p OR p

Tổn thương da

lupus cấp baacuten

cấp

311 007 258 00056 082 055 238 008

Tổn thương da

lupus mạn tiacutenh 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Loeacutet niecircm mạc 057 04 055 026 121 074 291 031

Rụng toacutec 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Biểu hiện khớp 166 025 118 055 142 021 179 017

Viecircm thanh mạc 106 097 129 083 12 088 143 081

Tổn thương

thận 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Tổn thương

thần kinh 088 091 025 01 039 039 025 008

Tan maacuteu 044 048 064 066 026 037 168 066

Giảm BC 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Giảm TC 149 071 3 016 446 002 204 05

Giảm bổ thể 1006 lt00001 327 lt00001 372 lt00001 1611 lt0001

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute

16

liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn

quan với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp tổn thương

da lupus mạn tiacutenh giảm BC vagrave giảm bổ thể Khaacuteng thể khaacuteng C1q

dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng

toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan

với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Bảng 312 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể ở bệnh nhacircn LBĐHT

Khaacuteng thể Tỷ lệ (+) OR p

KTKN (+)

Khaacuteng dsDNA 6932 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3227 393 0012

Khaacuteng Nucl 8924 1089 lt00001

Khaacuteng dsDNA

(+)

KTKN 9943 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3714 274 00005

Khaacuteng Nucl 9543 1144 lt00001

Khaacuteng C1q (+)

Khaacuteng dsDNA 7647 274 00005

KTKN 9529 393 0012

Khaacuteng Nucl 9412 43 0003

Khaacuteng Nucl (+)

KTKN 9333 1089 lt00001

Khaacuteng C1q 3333 43 0003

Khaacuteng dsDNA 6958 1144 lt00001

Sự dương tiacutenh của caacutec tự khaacuteng thể đều coacute mối liecircn quan thuận

coacute yacute nghĩa thống kecirc với nhau (p lt 005) trong đoacute mối liecircn quan rotilde

rệt nhất lagrave giữa 3 khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng Nucl vagrave KTKN

17

Bảng 313 Liecircn quan giữa tự khaacuteng thể với độ hoạt động của bệnh

Khaacuteng thể

Mức độ hoạt động của LBĐHT p

Mạnh

(n = 36) (I)

Trung bigravenh

(n = 67)(II)

Nhẹổn

(n = 185)(III) I vagrave II II vagrave III

KTKN 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Khaacuteng

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Khaacuteng

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

Khaacuteng

Nucl

100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt0000

1

So với nhoacutem bệnh hoạt động trung bigravenh tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh cao hơn rotilde rệt với p =

00025 Nồng độ trung bigravenh của khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave KT

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh đều cao hơn rotilde rệt Tỷ lệ

(+) vagrave nồng độ trung bigravenh của 4 khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh hoạt động

trung bigravenh đều cao hơn so với nhoacutem bệnh hoạt động nhẹ ổn định

Bảng 314 Tương quan giữa nồng độ khaacuteng thể với điểm SLEDAI vagrave

điểm SLICC thận

Khaacuteng thể SLEDAI SLICC thận

r p r p

KTKN 0306 lt00001 0143 lt0013

Khaacuteng dsDNA 056 lt00001 0216 00002

Khaacuteng C1q 0433 lt00001 0399 lt00001

Khaacuteng Nucl 0648 lt00001 0348 00082

18

Nồng độ KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA tương quan thuận

chặt chẽ nhất với điểm SLEDAI (p lt 0001) Nồng độ KT khaacuteng

C1q tương quan chặt chẽ nhất với điểm SLICC thận (r = 0399)

Bảng 315 Thay đổi nồng độ caacutec khaacuteng thể sau đợt cấp

Khaacuteng thể Tỷ lệ

giảm

Khaacutec biệt

trung bigravenh

Test t

gheacutep cặp p

KTKN (OD) 625 -034 -143 016

Khaacuteng dsDNA (IUml) 6458 -19949 -1793 008

Khaacuteng C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

Khaacuteng Nucl (IUml) 8333 -47509 -39 00003

Với 48 đợt cấp được theo dotildei nồng độ trung bigravenh của caacutec KT

khaacuteng C1q (p = 0037) vagrave khaacuteng Nucl (p = 00003) sau đợt cấp giảm

coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Bảng 316 Giaacute trị dự đoaacuten đợt cấp LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 9759 6714 3227 9459

Khaacuteng dsDNA 759 4537 36 823

Khaacuteng C1q 5783 8195 5647 8276

Khaacuteng Nucl 9759 2244 3375 9583

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng C1q 4819 878 6154 8072

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng Nucl 759 4927 3772 8347

Khaacuteng Nucl + Khaacuteng C1q 5783 8439 60 8317

Trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT KTKN vagrave khaacuteng Nucl đều coacute

độ nhạy cao vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh cao gt 94 nhưng độ đặc hiệu

khaacute thấp Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu cao nhất (8195)

đặc biệt khi dương tiacutenh đồng thời với KT khaacuteng dsDNA (878)

19

Chƣơng 4 BAgraveN LUẬN

41 Đặc điểm của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT

411 Phacircn bố về tuổi vagrave giới tỷ lệ bệnh nhacircn nữ chiếm tới

9297 với tuổi trung bigravenh lagrave 311 946 trong đoacute phần lớn thuộc

nhoacutem tuổi từ 16 ndash 45 (929) Kết quả nagravey hoagraven toagraven phugrave hợp với

những kết quả nghiecircn cứu trước đacircy cho thấy đặc điểm dịch tễ học

cơ bản của LBĐHT lagrave thường xảy ra ở phụ nữ trong độ tuổi sinh đẻ

412 Về tuổi khởi phaacutet bệnh phần lớn bệnh nhacircn LBĐHT

khởi phaacutet bệnh trong giai đoạn 15 - 45 tuổi (852) tuổi khởi phaacutet

bệnh trung bigravenh lagrave 2593 974 Khaacute nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học

trecircn qui mocirc lớn cho thấy LBĐHT thường coacute xu hướng khởi phaacutet ở

nữ giới trong nhoacutem tuổi từ 15 - 45 giai đoạn coacute sự hoạt động mạnh

mẽ nhất của caacutec tuyến nội tiết hướng sinh dục nữ

413 Tiền sử gia đigravenh coacute ngƣời mắc LBĐHT 469 số

bệnh nhacircn LBĐHT coacute iacutet nhất một người thacircn trong gia đigravenh cugraveng

mắc bệnh Nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học đatilde cho thấy tỷ lệ mắc

LBĐHT ở những người thacircn của người bệnh thường cao gấp khoảng

10 - 20 lần so với tỷ lệ mắc chung trong cộng đồng (4 - 12) cho

thấy vai trograve của yếu tố di truyền trong cơ chế bệnh sinh của LBĐHT

414 Caacutec biểu hiện của LBĐHT Caacutec biểu hiện bệnh gặp

nhiều nhất lagrave rụng toacutec - 531 tổn thương thận - 453 tổn thương

da lupus cấp baacuten cấp - 383 giảm bạch cầu - 382 vagrave giảm bổ

thể - 622 Những kết quả nagravey khaacute tương đồng với nghiecircn cứu của

nhiều taacutec giả trong vagrave ngoagravei nước tuy nhiecircn tỷ lệ viecircm thanh mạc

tổn thương thần kinh vagrave giảm tiểu cầu gặp khaacute thấp nguyecircn nhacircn coacute

thể do sự khaacutec nhau trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu vagrave sự

khaacutec biệt về đặc điểm lacircm sagraveng của LBĐHT giữa caacutec chủng tộc

20

42 Về tỷ lệ dƣơng tiacutenh vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự

khaacuteng thể

421 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN)

Về tỷ lệ dương tiacutenh 859 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute KTKN

dương tiacutenh ở lần khaacutem 1 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ

dương tiacutenh của KTKN ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute sự dao động khaacute lớn

trong khoảng 60 ndash 100 nguyecircn nhacircn coacute thể lagrave do sự khaacutec biệt

trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu thiết kế nghiecircn cứu kỹ

thuật xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể sự

đảo chiều huyết thanh của KTKN

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm

tiacutenh của KTKN lần lượt lagrave 8594 vagrave 7231 khaacute thấp so với caacutec

kết quả nghiecircn cứu trước đacircy nguyecircn nhacircn coacute thể do nhoacutem bệnh

nhacircn nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute tỷ lệ KTKN acircm tiacutenh khaacute cao

(141) sự khaacutec biệt về caacutech thức lựa chọn vagrave đặc điểm của nhoacutem

chứng Độ đặc hiệu của KTKN với LBĐHT lagrave khaacute thấp (4615)

khi sử dụng nhoacutem chứng mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec nguyecircn nhacircn lagrave

do KTKN coacute thể xuất hiện trong nhiều bệnh lyacute tự miễn khaacutec

422 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA

Về tỷ lệ dương tiacutenh bệnh nhacircn LBĐHT 641 số bệnh nhacircn

LBĐHT trong nghiecircn cứu coacute KT khaacuteng dsDNA dương tiacutenh nằm

trong dải biến thiecircn 37 - 85 của caacutec kết quả nghiecircn cứu trước đacircy

Caacutec yếu tố coacute ảnh hưởng rotilde rệt nhất đến tỷ lệ nagravey lagrave mức độ hoạt

động vagrave tổn thương nội tạng của caacutec đối tượng nghiecircn cứu kỹ thuật

xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ đặc hiệu của KT khaacuteng

dsDNA trong chẩn đoaacuten LBĐHT ở nghiecircn cứu nagravey lagrave 9333 khi sử

dụng nhoacutem chứng khỏe mạnh vagrave 9744 khi sử dụng nhoacutem chứng

21

mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec tức lagrave hoagraven toagraven phugrave hợp với caacutec kết quả

nghiecircn cứu trước đacircy (95 ndash 100) Traacutei với độ đặc hiệu độ nhạy của

KT khaacuteng dsDNA với LBĐHT thường khocircng cao vagrave coacute khoảng dao

động khaacute lớn (13 - 86) Nguyecircn nhacircn coacute thể do tiacutenh chất dao động

thường xuyecircn của khaacuteng thể nagravey trong quaacute trigravenh diễn biến bệnh vagrave

độ nhạy khaacutec nhau của caacutec kỹ thuật xeacutet nghiệm miễn dịch

423 Khaacuteng thể khaacuteng C1q

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở bệnh nhacircn LBĐHT dao động trong khoảng 15 ndash

63 theo caacutec nghiecircn cứu trước đacircy kết quả của chuacuteng tocirci lagrave 25 ở

lần khaacutem 1 Trong 3 nghiecircn cứu coacute cỡ mẫu lớn nhất của Julkunen H

(2012) Mok CC (2010) vagrave Orbai AM (2015) tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q đều tương đối thấp vagrave iacutet coacute sự khaacutec biệt

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT KT khaacuteng C1q coacute giaacute trị keacutem

nhất trong chẩn đoaacuten vagrave phacircn loại LBĐHT với diện tiacutech dưới đường

cong ROC lagrave 0676 vagrave độ nhạy chỉ lagrave 25 Tỷ lệ dương tiacutenh thấp vagrave

dao động thường xuyecircn ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute thể lagrave nguyecircn nhacircn

chiacutenh lagravem giảm độ nhạy của khaacuteng thể nagravey trong chẩn đoaacuten bệnh

424 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome (KT khaacuteng Nucl )

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT Tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT trong nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci

lagrave 813 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ nagravey coacute khoảng dao

động rộng từ 45 đến 100 nguyecircn nhacircn lagrave do sự khaacutec biệt của caacutec

đối tượng nghiecircn cứu về chủng tộc vagrave mức độ hoạt động bệnh

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT nhiều nghiecircn cứu đatilde cho thấy độ

đặc hiệu rất cao của KT khaacuteng Nucl với LBĐHT (90 ndash 100) tương

đồng với kết quả thu được của chuacuteng tocirci lagrave 987 Nguyecircn nhacircn coacute

thể do nucleosome lagrave tự khaacuteng nguyecircn coacute vai trograve quan trọng trong cơ

22

chế bệnh sinh của LBĐHT Độ nhạy của KT khaacuteng Nucl với

LBĐHT trong nghiecircn cứu nagravey lagrave 8125 cao hơn so với KT khaacuteng

dsDNA (6406)

43 Về liecircn quan giữa caacutec khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

431 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh (ge 12

OD) ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với sự xuất

hiện của giảm bổ thể vagrave caacutec tự khaacuteng thể khaacutec Mối liecircn quan giữa

khaacuteng thể nagravey với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của

LBĐHT trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy lagrave khocircng rotilde rệt do thiếu

những bằng chứng đaacuteng tin cậy

432 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với caacutec biểu

hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp hoặc mạn tiacutenh giảm bạch cầu

vagrave giảm bổ thể nhưng khocircng liecircn quan với tổn thương thận lupus

Nồng độ vagrave tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng dsDNA ở nhoacutem bệnh

nhacircn trong đợt cấp đều cao hơn so với nhoacutem ngoagravei đợt cấp tuy nhiecircn

khaacuteng thể nagravey coacute liecircn quan khocircng hằng định với cả hoạt tiacutenh chung

của LBĐHT vagrave tổn thương thận đặc biệt lagrave với đợt cấp của bệnh

433 Khaacuteng thể khaacuteng C1q khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh ở

bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan rotilde rệt với sự xuất hiện của tổn thương

thận vagrave giảm bổ thể Độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey trong dự baacuteo tổn

thương thận lupus cao hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại vagrave nồng độ của noacute

tương quan nghịch khaacute chặt với cả bổ thể C3 vagrave C4 (p lt 00001) Tỷ

lệ vagrave nồng độ trung bigravenh của KT khaacuteng C1q đều coacute xu hướng tăng

dần theo mức độ hoạt động của bệnh Tương quan giữa nồng độ KT

khaacuteng C1q với điểm SLICC thận vagrave độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey

trong dự baacuteo đợt cấp thận lupus cũng tốt hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại

23

434 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện tổn thương

da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận giảm BC vagrave giảm bổ thể Độ

nhạy trong dự baacuteo tổn thương thận lupus của KT khaacuteng Nucl cao

hơn so với caacutec khaacuteng thể cograven lại Tương quan với nồng độ bổ thể vagrave

điểm SLEDAI của khaacuteng thể nagravey cũng chặt chẽ hơn caacutec khaacuteng thể

cograven lại

KẾT LUẬN

Qua nghiecircn cứu 128 bệnh nhacircn LBĐHT với nhoacutem chứng gồm

39 người mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec vagrave 30 người khỏe mạnh chuacuteng

tocirci xin đưa ra một số kết luận sau

1 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten của một

số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể

Tỷ lệ dương tiacutenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 855 641 25 vagrave

813 tất cả đều cao hơn rotilde rệt so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở 587 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute

KT khaacuteng dsDNA acircm tiacutenh

Nồng độ trung bigravenh của caacutec KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng

C1q vagrave khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 3221 6034 (IUml) vagrave 945 1385

(IUml) tất cả đều cao hơn so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn coacute độ nhạy cao (8594) nhưng độ đặc

hiệu thấp (6667) với LBĐHT Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh 100 với LBĐHT nhưng độ nhạy

rất thấp (25)

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 10: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

7

trong đoacute n lagrave cỡ mẫu tối thiểu lagrave mức yacute nghĩa thống kecirc tương ứng

với khoảng tin cậy 95 = 005 Z1-2 lagrave Z score tương ứng với

mức yacute nghĩa thống kecirc mong muốn với = 005 thigrave Z1-2 = 196 p lagrave

tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng nucleosome ở bệnh nhacircn LBĐHT (p

= 0909 theo Đặng Thu Hương - Tạp chiacute Y học Thagravenh phố Hồ Chiacute

Minh 2013 tập 17 phụ bản 1 tr 294-300) q = 1 - p = 0091 d lagrave độ

chiacutenh xaacutec tuyệt đối mong muốn chọn d = 005 Từ đoacute tiacutenh được n =

1271 Nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute cỡ mẫu lagrave 128 bệnh nhacircn

224 Caacutec bƣớc tiến hagravenh nghiecircn cứu

2241 Nhoacutem bệnh nhacircn lupus ban đỏ hệ thống

Lựa chọn vagraveo danh saacutech nghiecircn cứu vagrave gắn matilde bệnh aacuten

Lần khaacutem 1 khaacutem lacircm sagraveng khai thaacutec tiền sử xeacutet nghiệm

CLS thocircng thường (định lượng urecirc creatinin glucose AST ALT

albumin cholesterol triglyceride C3 vagrave C4 bổ thể trong huyết thanh

tế bagraveo niệu trụ niệu định lượng protein niệu 24 giờhellip) định lượng

khaacuteng thể khaacuteng nhacircn khaacuteng dsDNA khaacuteng nucleosome vagrave khaacuteng

C1q phacircn tiacutech caacutec nhoacutem triệu chứng bệnh đaacutenh giaacute điểm SELENA-

SLEDAI mức độ hoạt động của bệnh sự xuất hiện đợt cấp của

bệnh Chỉ số Hoạt động Thận của SLICC 2008 đợt cấp thận lupus

Theo dotildei định kỳ caacutec bệnh nhacircn được thăm khaacutem định kỳ

hagraveng thaacuteng hoặc ngay khi coacute caacutec dấu hiệu bất thường Quaacute trigravenh

nghiecircn cứu kết thuacutec khi bệnh nhacircn được theo dotildei đủ 12 thaacuteng hoặc

khi được phaacutet hiện coacute thai hoặc bị mất theo dotildei Caacutec bước thăm

khaacutem gồm khaacutem lacircm sagraveng xeacutet nghiệm CLS thocircng thường đaacutenh giaacute

caacutec triệu chứng bệnh sự xuất hiện đợt cấp của LBĐHT điểm SLICC

thận sự xuất hiện của đợt cấp thận lupus Định lượng khaacuteng thể

trong caacutec lần khaacutem coacute ghi nhận đợt cấp mới xuất hiện của bệnh hoặc

8

caacutec lần khaacutem được thực hiện trong vograveng 2 thaacuteng sau khi người bệnh

ra đatilde khỏi đợt cấp vagrave lần khaacutem cuối cugraveng Đaacutenh giaacute điểm SLEDAI

vagrave mức độ hoạt động bệnh ở caacutec lần khaacutem coacute xeacutet nghiệm khaacuteng thể

2242 Nhoacutem chứng 2 nhoacutem chứng được tiến hagravenh xeacutet nghiệm 4

loại khaacuteng thể tương tự nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT ở lần khaacutem 1

225 Địa điểm vagrave phƣơng phaacutep tiến hagravenh caacutec xeacutet nghiệm CLS

2251 Caacutec xeacutet nghiệm cận lacircm sagraveng thocircng thường được thực hiện

tại caacutec khoa phograveng tương ứng của Bệnh viện Bạch Mai

2252 Xeacutet nghiệm caacutec tự khaacuteng thể

a Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) vagrave khaacuteng dsDNA được định lượng

bằng kỹ thuật ELISA trecircn maacutey baacuten tự động Imarkreg của Hatildeng BIO-

RAD (kit của Hatildeng DRG) Địa điểm thực hiện phograveng xeacutet nghiệm

miễn dịch Trung tacircm Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng BV Bạch Mai

b Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng nucleosome được phaacutet hiện vagrave

định lượng bằng kỹ thuật ELISA trecircn maacutey tự động Alegriareg của

Hatildeng Orgentec (Đức) sử dụng kit của Hatildeng Orgentec Địa điểm

thực hiện tại Khoa Xeacutet nghiệm BV Đại học Y Hagrave Nội

226 Caacutec tiecircu chuẩn đaacutenh giaacute đƣợc sử dụng trong nghiecircn cứu

2261 Đaacutenh giaacute caacutec biểu hiện của bệnh LBĐHT dựa theo caacutec

tiecircu chuẩn lacircm sagraveng của SLICC 2012

2262 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của bệnh dựa theo tiecircu chuẩn

đaacutenh giaacute của cocircng cụ SELENA-SLEDAI

2263 Đaacutenh giaacute đợt cấp của LBĐHT Dựa vagraveo định nghĩa sử dụng

trong nghiecircn cứu SELENA

2264 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của tổn thương thận lupus

dựa vagraveo chỉ số hoạt động thận của SLICC năm 2008

2265 Đaacutenh giaacute đợt cấp tổn thương thận lupus dựa theo tiecircu

chuẩn của EULAR năm 2009

9

227 Sai số vagrave caacutech khắc phục sai số khắc phục caacutec sai số bằng

caacutech khai thaacutec kỹ triệu chứng lacircm sagraveng tiền sử kiểm tra vagrave đaacutenh giaacute

lại caacutec chỉ số hoạt động bệnh lagravem sạch số liệu trước khi xử lyacute

228 Xử lyacute số liệu Caacutec số liệu nghiecircn cứu được xử lyacute bằng phần

mềm toaacuten thống kecirc MEDCALC 140

229 Đạo đức của nghiecircn cứu

Nghiecircn cứu được tiến hagravenh tại caacutec cơ sở y tế coacute uy tiacuten với sự

đồng yacute của latildenh đạo caacutec đơn vị Đacircy lagrave nghiecircn cứu mocirc tả khocircng coacute

can thiệp tất cả caacutec đối tượng nghiecircn cứu đều tự nguyện tham gia

Caacutec số liệu thu được chỉ phục vụ cho mục điacutech nghiecircn cứu vagrave chăm

soacutec sức khỏe người bệnh khocircng phục vụ cho caacutec mục điacutech khaacutec

Chƣơng 3 KẾT QUẢ NGHIEcircN CỨU

31 Đặc điểm chung của caacutec đối tƣợng nghiecircn cứu

Bảng 31 Đặc điểm về tuổi vagrave giới

Nhoacutem nghiecircn cứu n Tuổi (X ) Tỷ lệ nữ nam

Nhoacutem LBĐHT 128 311 946 1322

Nhoacutem chứng bệnh 39 4305 17 333

Nhoacutem chứng khỏe 30 3163 1357 14

p 000036

04

0011

074

Nhoacutem LBĐHT so với nhoacutem chứng bệnh

Nhoacutem LBĐHT so với nhoacutem chứng khỏe

Tuổi trung bigravenh của nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lagrave 311 946

thấp hơn so với nhoacutem chứng bệnh (p = 000036) nhưng khocircng khaacutec

biệt so với nhoacutem chứng khỏe mạnh (p = 04) Tỷ lệ nữnam ở nhoacutem

LBĐHT lagrave 1322 tương đương nhoacutem chứng khỏe mạnh (p = 074)

nhưng cao hơn so với nhoacutem chứng bệnh (p = 0011)

Bảng 32 Phacircn bố theo nhoacutem tuổi của nhoacutem LBĐHT

Nhoacutem tuổi 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Tổng

10

n 1 67 52 7 1 128

Tỷ lệ 08 523 406 55 08 100

Caacutec bệnh nhacircn phần lớn gặp trong nhoacutem tuổi 20 ndash 30 (437)

vagrave 31 ndash 40 (336) thấp nhất lagrave ở nhoacutem gt 50 tuổi (47) Phacircn bố

caacutec nhoacutem tuổi khocircng coacute sự khaacutec biệt giữa 2 giới với p = 051

Bảng 33 Phacircn bố bệnh nhacircn LBĐHT theo thời gian mắc bệnh

Khoảng thời

gian (năm) Số lƣợng Tỷ lệ ()

Thời gian

trung bigravenh

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

TỔNG SỐ 128 100 517 37

Thời gian mắc bệnh của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT gặp nhiều

nhất trong khoảng 2 ndash 5 năm (516) vagrave 6 ndash 10 năm (25) Thời

gian mắc bệnh trung bigravenh lagrave 517 37 (năm)

Bảng 34 Phacircn bố bệnh nhacircn LBĐHT theo tuổi khởi phaacutet bệnh

Nhoacutem tuổi Số lƣợng Tỷ lệ () Tuổi trung bigravenh

15 14 109 1271 23

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

TỔNG SỐ 128 100 2593 974

Phần lớn bệnh nhacircn khởi phaacutet bệnh ở độ tuổi 16 ndash 25 (43) vagrave

26 ndash 35 (281) Số bệnh nhacircn khởi phaacutet bệnh sau 45 tuổi chỉ chiếm

11

39 Tuổi phaacutet bệnh trung bigravenh của caacutec bệnh nhacircn lagrave 2593 974

Tiền sử mắc LBĐHT của người thacircn 6128 bệnh nhacircn

LBĐHT coacute người thacircn trong gia đigravenh (cha mẹ anh chị em ruột)

cugraveng mắc LBĐHT chiếm tỷ lệ 469

12

Bảng 35 Một số biểu hiện lacircm sagraveng ở thời điểm đầu nghiecircn cứu

Tỷ lệ gặp cao nhất lagrave caacutec biểu hiện giảm bổ thể (622) rụng

toacutec (531) vagrave tổn thương thận (453) Iacutet gặp nhất lagrave caacutec biểu hiện

viecircm thanh mạc tan maacuteu (23) vagrave tổn thương thần kinh (31)

Bảng 36 Mức độ hoạt động của LBĐHT

TT Mức độ hoạt động Số lƣợng Tỷ lệ ()

1 Ổn định 15 117

2 Hoạt động nhẹ 57 445

3 Hoạt động trung bigravenh 37 289

4 Hoạt động mạnh 19 148

5 Đợt cấp LBĐHT 51 398

6 Điểm SLEDAI (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Điểm SLICC thận (X ) 312 42 (0 - 15)

TT Tiecircu chuẩn n Tỷ lệ ()

1 Caacutec tổn thương da lupus cấp baacuten cấp 49 383

2 Caacutec tổn thương da lupus mạn tiacutenh 21 164

3 Loeacutet niecircm mạc 9 7

4 Rụng toacutec 68 531

5 Biểu hiện khớp 45 352

6 Viecircm thanh mạc 3 23

7 Tổn thương thận 58 453

8 Tổn thương thần kinh 4 31

9 Thiếu maacuteu tan maacuteu 3 23

10 Giảm bạch cầu 42 328

11 Giảm tiểu cầu 5 39

12 Giảm bổ thể 79 622

13

Ở thời điểm khởi đầu nghiecircn cứu phần lớn bệnh nhacircn coacute bệnh

hoạt động ở mức độ nhẹ vagrave trung bigravenh (lần lượt chiếm 445 vagrave

289) Điểm SLEDAI dao động khaacute lớn trong khoảng 0 ndash 41

(trung bigravenh lagrave 661 62) Tỷ lệ bệnh nhacircn coacute đợt cấp LBĐHT lagrave

398 Điểm SLICC thận lupus trung bigravenh lagrave 312 42

32 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của

caacutec tự khaacuteng thể

Bảng 37 Tỷ lệ dương tiacutenh của tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Nhoacutem chứng

bệnh

(n = 39)

Nhoacutem chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN 859 5385 67 3333

Khaacuteng dsDNA 641 256 67 435

Khaacuteng Nucl 813 256 0 145

Khaacuteng C1q 25 0 0 0

Tỷ lệ dương tiacutenh của caacutec khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh nhacircn

LBĐHT theo thứ tự KTKN (859) gt khaacuteng Nucl (813) gt khaacuteng

dsDNA (641) gt khaacuteng C1q (25) tất cả đều cao hơn rotilde rệt so

với caacutec nhoacutem chứng với p lt 0005

Bảng 38 Nồng độ trung bigravenh của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Chứng

bệnh

(n = 39)

Chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Khaacuteng dsDNA (IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

Khaacuteng Nucl (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Khaacuteng C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

14

Nồng độ trung bigravenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 945 1385 (IUml) vagrave 3221 6034

(IUml) đều cao hơn caacutec nhoacutem chứng với p lt 00001

Bảng 39 Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 8594 6667 8271 7187

Khaacuteng dsDNA 6406 9565 9647 5863

Khaacuteng Nucl 8125 9855 9905 7391

Khaacuteng C1q 25 100 100 4182

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute độ đặc hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương

tiacutenh với LBĐHT tương đương KT khaacuteng dsDNA nhưng độ nhạy vagrave

giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh đều cao hơn Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh cao nhất trong 4 khaacuteng thể trong

khi đoacute KTKN coacute độ nhạy cao nhất nhưng độ đặc hiệu lagrave thấp nhất

Bảng 310 Giaacute trị chẩn đoaacuten của caacutec khaacuteng thể qua đường cong ROC

Khaacuteng thể (AUC) KTKN

(0716)

Khaacuteng

dsDNA

(089)

Khaacuteng

C1q

(0676)

Khaacuteng

Nucl

(0911)

KTKN (0716) p=00001 p=044 plt0001

Khaacuteng dsDNA (089) p=00001 plt0001 p=044

Khaacuteng C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

Khaacuteng Nucl (0911) plt0001 p=044 plt0001

Caacutec khaacuteng thể khaacuteng Nucl khaacuteng dsDNA KTKN vagrave khaacuteng

C1q lần lượt coacute giaacute trị rất tốt tốt khaacute tốt vagrave iacutet giaacute trị trong chẩn đoaacuten

15

LBĐHT Diện tiacutech dưới đường cong ROC (AUC) của caacutec KT khaacuteng

Nucl vagrave khaacuteng dsDNA đều cao hơn coacute yacute nghĩa thống kecirc so với

KTKN vagrave khaacuteng C1q

33 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Bảng 311 Liecircn quan giữa KTKN với caacutec biểu hiện của LBĐHT

Nhoacutem triệu

chứng

KTKN KT khaacuteng

dsDNA

KT khaacuteng

C1q

KT khaacuteng

Nucl

OR p OR p OR p OR p

Tổn thương da

lupus cấp baacuten

cấp

311 007 258 00056 082 055 238 008

Tổn thương da

lupus mạn tiacutenh 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Loeacutet niecircm mạc 057 04 055 026 121 074 291 031

Rụng toacutec 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Biểu hiện khớp 166 025 118 055 142 021 179 017

Viecircm thanh mạc 106 097 129 083 12 088 143 081

Tổn thương

thận 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Tổn thương

thần kinh 088 091 025 01 039 039 025 008

Tan maacuteu 044 048 064 066 026 037 168 066

Giảm BC 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Giảm TC 149 071 3 016 446 002 204 05

Giảm bổ thể 1006 lt00001 327 lt00001 372 lt00001 1611 lt0001

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute

16

liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn

quan với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp tổn thương

da lupus mạn tiacutenh giảm BC vagrave giảm bổ thể Khaacuteng thể khaacuteng C1q

dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng

toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan

với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Bảng 312 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể ở bệnh nhacircn LBĐHT

Khaacuteng thể Tỷ lệ (+) OR p

KTKN (+)

Khaacuteng dsDNA 6932 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3227 393 0012

Khaacuteng Nucl 8924 1089 lt00001

Khaacuteng dsDNA

(+)

KTKN 9943 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3714 274 00005

Khaacuteng Nucl 9543 1144 lt00001

Khaacuteng C1q (+)

Khaacuteng dsDNA 7647 274 00005

KTKN 9529 393 0012

Khaacuteng Nucl 9412 43 0003

Khaacuteng Nucl (+)

KTKN 9333 1089 lt00001

Khaacuteng C1q 3333 43 0003

Khaacuteng dsDNA 6958 1144 lt00001

Sự dương tiacutenh của caacutec tự khaacuteng thể đều coacute mối liecircn quan thuận

coacute yacute nghĩa thống kecirc với nhau (p lt 005) trong đoacute mối liecircn quan rotilde

rệt nhất lagrave giữa 3 khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng Nucl vagrave KTKN

17

Bảng 313 Liecircn quan giữa tự khaacuteng thể với độ hoạt động của bệnh

Khaacuteng thể

Mức độ hoạt động của LBĐHT p

Mạnh

(n = 36) (I)

Trung bigravenh

(n = 67)(II)

Nhẹổn

(n = 185)(III) I vagrave II II vagrave III

KTKN 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Khaacuteng

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Khaacuteng

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

Khaacuteng

Nucl

100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt0000

1

So với nhoacutem bệnh hoạt động trung bigravenh tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh cao hơn rotilde rệt với p =

00025 Nồng độ trung bigravenh của khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave KT

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh đều cao hơn rotilde rệt Tỷ lệ

(+) vagrave nồng độ trung bigravenh của 4 khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh hoạt động

trung bigravenh đều cao hơn so với nhoacutem bệnh hoạt động nhẹ ổn định

Bảng 314 Tương quan giữa nồng độ khaacuteng thể với điểm SLEDAI vagrave

điểm SLICC thận

Khaacuteng thể SLEDAI SLICC thận

r p r p

KTKN 0306 lt00001 0143 lt0013

Khaacuteng dsDNA 056 lt00001 0216 00002

Khaacuteng C1q 0433 lt00001 0399 lt00001

Khaacuteng Nucl 0648 lt00001 0348 00082

18

Nồng độ KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA tương quan thuận

chặt chẽ nhất với điểm SLEDAI (p lt 0001) Nồng độ KT khaacuteng

C1q tương quan chặt chẽ nhất với điểm SLICC thận (r = 0399)

Bảng 315 Thay đổi nồng độ caacutec khaacuteng thể sau đợt cấp

Khaacuteng thể Tỷ lệ

giảm

Khaacutec biệt

trung bigravenh

Test t

gheacutep cặp p

KTKN (OD) 625 -034 -143 016

Khaacuteng dsDNA (IUml) 6458 -19949 -1793 008

Khaacuteng C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

Khaacuteng Nucl (IUml) 8333 -47509 -39 00003

Với 48 đợt cấp được theo dotildei nồng độ trung bigravenh của caacutec KT

khaacuteng C1q (p = 0037) vagrave khaacuteng Nucl (p = 00003) sau đợt cấp giảm

coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Bảng 316 Giaacute trị dự đoaacuten đợt cấp LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 9759 6714 3227 9459

Khaacuteng dsDNA 759 4537 36 823

Khaacuteng C1q 5783 8195 5647 8276

Khaacuteng Nucl 9759 2244 3375 9583

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng C1q 4819 878 6154 8072

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng Nucl 759 4927 3772 8347

Khaacuteng Nucl + Khaacuteng C1q 5783 8439 60 8317

Trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT KTKN vagrave khaacuteng Nucl đều coacute

độ nhạy cao vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh cao gt 94 nhưng độ đặc hiệu

khaacute thấp Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu cao nhất (8195)

đặc biệt khi dương tiacutenh đồng thời với KT khaacuteng dsDNA (878)

19

Chƣơng 4 BAgraveN LUẬN

41 Đặc điểm của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT

411 Phacircn bố về tuổi vagrave giới tỷ lệ bệnh nhacircn nữ chiếm tới

9297 với tuổi trung bigravenh lagrave 311 946 trong đoacute phần lớn thuộc

nhoacutem tuổi từ 16 ndash 45 (929) Kết quả nagravey hoagraven toagraven phugrave hợp với

những kết quả nghiecircn cứu trước đacircy cho thấy đặc điểm dịch tễ học

cơ bản của LBĐHT lagrave thường xảy ra ở phụ nữ trong độ tuổi sinh đẻ

412 Về tuổi khởi phaacutet bệnh phần lớn bệnh nhacircn LBĐHT

khởi phaacutet bệnh trong giai đoạn 15 - 45 tuổi (852) tuổi khởi phaacutet

bệnh trung bigravenh lagrave 2593 974 Khaacute nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học

trecircn qui mocirc lớn cho thấy LBĐHT thường coacute xu hướng khởi phaacutet ở

nữ giới trong nhoacutem tuổi từ 15 - 45 giai đoạn coacute sự hoạt động mạnh

mẽ nhất của caacutec tuyến nội tiết hướng sinh dục nữ

413 Tiền sử gia đigravenh coacute ngƣời mắc LBĐHT 469 số

bệnh nhacircn LBĐHT coacute iacutet nhất một người thacircn trong gia đigravenh cugraveng

mắc bệnh Nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học đatilde cho thấy tỷ lệ mắc

LBĐHT ở những người thacircn của người bệnh thường cao gấp khoảng

10 - 20 lần so với tỷ lệ mắc chung trong cộng đồng (4 - 12) cho

thấy vai trograve của yếu tố di truyền trong cơ chế bệnh sinh của LBĐHT

414 Caacutec biểu hiện của LBĐHT Caacutec biểu hiện bệnh gặp

nhiều nhất lagrave rụng toacutec - 531 tổn thương thận - 453 tổn thương

da lupus cấp baacuten cấp - 383 giảm bạch cầu - 382 vagrave giảm bổ

thể - 622 Những kết quả nagravey khaacute tương đồng với nghiecircn cứu của

nhiều taacutec giả trong vagrave ngoagravei nước tuy nhiecircn tỷ lệ viecircm thanh mạc

tổn thương thần kinh vagrave giảm tiểu cầu gặp khaacute thấp nguyecircn nhacircn coacute

thể do sự khaacutec nhau trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu vagrave sự

khaacutec biệt về đặc điểm lacircm sagraveng của LBĐHT giữa caacutec chủng tộc

20

42 Về tỷ lệ dƣơng tiacutenh vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự

khaacuteng thể

421 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN)

Về tỷ lệ dương tiacutenh 859 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute KTKN

dương tiacutenh ở lần khaacutem 1 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ

dương tiacutenh của KTKN ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute sự dao động khaacute lớn

trong khoảng 60 ndash 100 nguyecircn nhacircn coacute thể lagrave do sự khaacutec biệt

trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu thiết kế nghiecircn cứu kỹ

thuật xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể sự

đảo chiều huyết thanh của KTKN

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm

tiacutenh của KTKN lần lượt lagrave 8594 vagrave 7231 khaacute thấp so với caacutec

kết quả nghiecircn cứu trước đacircy nguyecircn nhacircn coacute thể do nhoacutem bệnh

nhacircn nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute tỷ lệ KTKN acircm tiacutenh khaacute cao

(141) sự khaacutec biệt về caacutech thức lựa chọn vagrave đặc điểm của nhoacutem

chứng Độ đặc hiệu của KTKN với LBĐHT lagrave khaacute thấp (4615)

khi sử dụng nhoacutem chứng mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec nguyecircn nhacircn lagrave

do KTKN coacute thể xuất hiện trong nhiều bệnh lyacute tự miễn khaacutec

422 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA

Về tỷ lệ dương tiacutenh bệnh nhacircn LBĐHT 641 số bệnh nhacircn

LBĐHT trong nghiecircn cứu coacute KT khaacuteng dsDNA dương tiacutenh nằm

trong dải biến thiecircn 37 - 85 của caacutec kết quả nghiecircn cứu trước đacircy

Caacutec yếu tố coacute ảnh hưởng rotilde rệt nhất đến tỷ lệ nagravey lagrave mức độ hoạt

động vagrave tổn thương nội tạng của caacutec đối tượng nghiecircn cứu kỹ thuật

xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ đặc hiệu của KT khaacuteng

dsDNA trong chẩn đoaacuten LBĐHT ở nghiecircn cứu nagravey lagrave 9333 khi sử

dụng nhoacutem chứng khỏe mạnh vagrave 9744 khi sử dụng nhoacutem chứng

21

mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec tức lagrave hoagraven toagraven phugrave hợp với caacutec kết quả

nghiecircn cứu trước đacircy (95 ndash 100) Traacutei với độ đặc hiệu độ nhạy của

KT khaacuteng dsDNA với LBĐHT thường khocircng cao vagrave coacute khoảng dao

động khaacute lớn (13 - 86) Nguyecircn nhacircn coacute thể do tiacutenh chất dao động

thường xuyecircn của khaacuteng thể nagravey trong quaacute trigravenh diễn biến bệnh vagrave

độ nhạy khaacutec nhau của caacutec kỹ thuật xeacutet nghiệm miễn dịch

423 Khaacuteng thể khaacuteng C1q

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở bệnh nhacircn LBĐHT dao động trong khoảng 15 ndash

63 theo caacutec nghiecircn cứu trước đacircy kết quả của chuacuteng tocirci lagrave 25 ở

lần khaacutem 1 Trong 3 nghiecircn cứu coacute cỡ mẫu lớn nhất của Julkunen H

(2012) Mok CC (2010) vagrave Orbai AM (2015) tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q đều tương đối thấp vagrave iacutet coacute sự khaacutec biệt

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT KT khaacuteng C1q coacute giaacute trị keacutem

nhất trong chẩn đoaacuten vagrave phacircn loại LBĐHT với diện tiacutech dưới đường

cong ROC lagrave 0676 vagrave độ nhạy chỉ lagrave 25 Tỷ lệ dương tiacutenh thấp vagrave

dao động thường xuyecircn ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute thể lagrave nguyecircn nhacircn

chiacutenh lagravem giảm độ nhạy của khaacuteng thể nagravey trong chẩn đoaacuten bệnh

424 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome (KT khaacuteng Nucl )

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT Tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT trong nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci

lagrave 813 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ nagravey coacute khoảng dao

động rộng từ 45 đến 100 nguyecircn nhacircn lagrave do sự khaacutec biệt của caacutec

đối tượng nghiecircn cứu về chủng tộc vagrave mức độ hoạt động bệnh

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT nhiều nghiecircn cứu đatilde cho thấy độ

đặc hiệu rất cao của KT khaacuteng Nucl với LBĐHT (90 ndash 100) tương

đồng với kết quả thu được của chuacuteng tocirci lagrave 987 Nguyecircn nhacircn coacute

thể do nucleosome lagrave tự khaacuteng nguyecircn coacute vai trograve quan trọng trong cơ

22

chế bệnh sinh của LBĐHT Độ nhạy của KT khaacuteng Nucl với

LBĐHT trong nghiecircn cứu nagravey lagrave 8125 cao hơn so với KT khaacuteng

dsDNA (6406)

43 Về liecircn quan giữa caacutec khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

431 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh (ge 12

OD) ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với sự xuất

hiện của giảm bổ thể vagrave caacutec tự khaacuteng thể khaacutec Mối liecircn quan giữa

khaacuteng thể nagravey với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của

LBĐHT trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy lagrave khocircng rotilde rệt do thiếu

những bằng chứng đaacuteng tin cậy

432 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với caacutec biểu

hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp hoặc mạn tiacutenh giảm bạch cầu

vagrave giảm bổ thể nhưng khocircng liecircn quan với tổn thương thận lupus

Nồng độ vagrave tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng dsDNA ở nhoacutem bệnh

nhacircn trong đợt cấp đều cao hơn so với nhoacutem ngoagravei đợt cấp tuy nhiecircn

khaacuteng thể nagravey coacute liecircn quan khocircng hằng định với cả hoạt tiacutenh chung

của LBĐHT vagrave tổn thương thận đặc biệt lagrave với đợt cấp của bệnh

433 Khaacuteng thể khaacuteng C1q khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh ở

bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan rotilde rệt với sự xuất hiện của tổn thương

thận vagrave giảm bổ thể Độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey trong dự baacuteo tổn

thương thận lupus cao hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại vagrave nồng độ của noacute

tương quan nghịch khaacute chặt với cả bổ thể C3 vagrave C4 (p lt 00001) Tỷ

lệ vagrave nồng độ trung bigravenh của KT khaacuteng C1q đều coacute xu hướng tăng

dần theo mức độ hoạt động của bệnh Tương quan giữa nồng độ KT

khaacuteng C1q với điểm SLICC thận vagrave độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey

trong dự baacuteo đợt cấp thận lupus cũng tốt hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại

23

434 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện tổn thương

da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận giảm BC vagrave giảm bổ thể Độ

nhạy trong dự baacuteo tổn thương thận lupus của KT khaacuteng Nucl cao

hơn so với caacutec khaacuteng thể cograven lại Tương quan với nồng độ bổ thể vagrave

điểm SLEDAI của khaacuteng thể nagravey cũng chặt chẽ hơn caacutec khaacuteng thể

cograven lại

KẾT LUẬN

Qua nghiecircn cứu 128 bệnh nhacircn LBĐHT với nhoacutem chứng gồm

39 người mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec vagrave 30 người khỏe mạnh chuacuteng

tocirci xin đưa ra một số kết luận sau

1 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten của một

số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể

Tỷ lệ dương tiacutenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 855 641 25 vagrave

813 tất cả đều cao hơn rotilde rệt so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở 587 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute

KT khaacuteng dsDNA acircm tiacutenh

Nồng độ trung bigravenh của caacutec KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng

C1q vagrave khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 3221 6034 (IUml) vagrave 945 1385

(IUml) tất cả đều cao hơn so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn coacute độ nhạy cao (8594) nhưng độ đặc

hiệu thấp (6667) với LBĐHT Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh 100 với LBĐHT nhưng độ nhạy

rất thấp (25)

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 11: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

8

caacutec lần khaacutem được thực hiện trong vograveng 2 thaacuteng sau khi người bệnh

ra đatilde khỏi đợt cấp vagrave lần khaacutem cuối cugraveng Đaacutenh giaacute điểm SLEDAI

vagrave mức độ hoạt động bệnh ở caacutec lần khaacutem coacute xeacutet nghiệm khaacuteng thể

2242 Nhoacutem chứng 2 nhoacutem chứng được tiến hagravenh xeacutet nghiệm 4

loại khaacuteng thể tương tự nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT ở lần khaacutem 1

225 Địa điểm vagrave phƣơng phaacutep tiến hagravenh caacutec xeacutet nghiệm CLS

2251 Caacutec xeacutet nghiệm cận lacircm sagraveng thocircng thường được thực hiện

tại caacutec khoa phograveng tương ứng của Bệnh viện Bạch Mai

2252 Xeacutet nghiệm caacutec tự khaacuteng thể

a Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) vagrave khaacuteng dsDNA được định lượng

bằng kỹ thuật ELISA trecircn maacutey baacuten tự động Imarkreg của Hatildeng BIO-

RAD (kit của Hatildeng DRG) Địa điểm thực hiện phograveng xeacutet nghiệm

miễn dịch Trung tacircm Dị ứng - Miễn dịch Lacircm sagraveng BV Bạch Mai

b Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng nucleosome được phaacutet hiện vagrave

định lượng bằng kỹ thuật ELISA trecircn maacutey tự động Alegriareg của

Hatildeng Orgentec (Đức) sử dụng kit của Hatildeng Orgentec Địa điểm

thực hiện tại Khoa Xeacutet nghiệm BV Đại học Y Hagrave Nội

226 Caacutec tiecircu chuẩn đaacutenh giaacute đƣợc sử dụng trong nghiecircn cứu

2261 Đaacutenh giaacute caacutec biểu hiện của bệnh LBĐHT dựa theo caacutec

tiecircu chuẩn lacircm sagraveng của SLICC 2012

2262 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của bệnh dựa theo tiecircu chuẩn

đaacutenh giaacute của cocircng cụ SELENA-SLEDAI

2263 Đaacutenh giaacute đợt cấp của LBĐHT Dựa vagraveo định nghĩa sử dụng

trong nghiecircn cứu SELENA

2264 Đaacutenh giaacute mức độ hoạt động của tổn thương thận lupus

dựa vagraveo chỉ số hoạt động thận của SLICC năm 2008

2265 Đaacutenh giaacute đợt cấp tổn thương thận lupus dựa theo tiecircu

chuẩn của EULAR năm 2009

9

227 Sai số vagrave caacutech khắc phục sai số khắc phục caacutec sai số bằng

caacutech khai thaacutec kỹ triệu chứng lacircm sagraveng tiền sử kiểm tra vagrave đaacutenh giaacute

lại caacutec chỉ số hoạt động bệnh lagravem sạch số liệu trước khi xử lyacute

228 Xử lyacute số liệu Caacutec số liệu nghiecircn cứu được xử lyacute bằng phần

mềm toaacuten thống kecirc MEDCALC 140

229 Đạo đức của nghiecircn cứu

Nghiecircn cứu được tiến hagravenh tại caacutec cơ sở y tế coacute uy tiacuten với sự

đồng yacute của latildenh đạo caacutec đơn vị Đacircy lagrave nghiecircn cứu mocirc tả khocircng coacute

can thiệp tất cả caacutec đối tượng nghiecircn cứu đều tự nguyện tham gia

Caacutec số liệu thu được chỉ phục vụ cho mục điacutech nghiecircn cứu vagrave chăm

soacutec sức khỏe người bệnh khocircng phục vụ cho caacutec mục điacutech khaacutec

Chƣơng 3 KẾT QUẢ NGHIEcircN CỨU

31 Đặc điểm chung của caacutec đối tƣợng nghiecircn cứu

Bảng 31 Đặc điểm về tuổi vagrave giới

Nhoacutem nghiecircn cứu n Tuổi (X ) Tỷ lệ nữ nam

Nhoacutem LBĐHT 128 311 946 1322

Nhoacutem chứng bệnh 39 4305 17 333

Nhoacutem chứng khỏe 30 3163 1357 14

p 000036

04

0011

074

Nhoacutem LBĐHT so với nhoacutem chứng bệnh

Nhoacutem LBĐHT so với nhoacutem chứng khỏe

Tuổi trung bigravenh của nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lagrave 311 946

thấp hơn so với nhoacutem chứng bệnh (p = 000036) nhưng khocircng khaacutec

biệt so với nhoacutem chứng khỏe mạnh (p = 04) Tỷ lệ nữnam ở nhoacutem

LBĐHT lagrave 1322 tương đương nhoacutem chứng khỏe mạnh (p = 074)

nhưng cao hơn so với nhoacutem chứng bệnh (p = 0011)

Bảng 32 Phacircn bố theo nhoacutem tuổi của nhoacutem LBĐHT

Nhoacutem tuổi 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Tổng

10

n 1 67 52 7 1 128

Tỷ lệ 08 523 406 55 08 100

Caacutec bệnh nhacircn phần lớn gặp trong nhoacutem tuổi 20 ndash 30 (437)

vagrave 31 ndash 40 (336) thấp nhất lagrave ở nhoacutem gt 50 tuổi (47) Phacircn bố

caacutec nhoacutem tuổi khocircng coacute sự khaacutec biệt giữa 2 giới với p = 051

Bảng 33 Phacircn bố bệnh nhacircn LBĐHT theo thời gian mắc bệnh

Khoảng thời

gian (năm) Số lƣợng Tỷ lệ ()

Thời gian

trung bigravenh

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

TỔNG SỐ 128 100 517 37

Thời gian mắc bệnh của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT gặp nhiều

nhất trong khoảng 2 ndash 5 năm (516) vagrave 6 ndash 10 năm (25) Thời

gian mắc bệnh trung bigravenh lagrave 517 37 (năm)

Bảng 34 Phacircn bố bệnh nhacircn LBĐHT theo tuổi khởi phaacutet bệnh

Nhoacutem tuổi Số lƣợng Tỷ lệ () Tuổi trung bigravenh

15 14 109 1271 23

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

TỔNG SỐ 128 100 2593 974

Phần lớn bệnh nhacircn khởi phaacutet bệnh ở độ tuổi 16 ndash 25 (43) vagrave

26 ndash 35 (281) Số bệnh nhacircn khởi phaacutet bệnh sau 45 tuổi chỉ chiếm

11

39 Tuổi phaacutet bệnh trung bigravenh của caacutec bệnh nhacircn lagrave 2593 974

Tiền sử mắc LBĐHT của người thacircn 6128 bệnh nhacircn

LBĐHT coacute người thacircn trong gia đigravenh (cha mẹ anh chị em ruột)

cugraveng mắc LBĐHT chiếm tỷ lệ 469

12

Bảng 35 Một số biểu hiện lacircm sagraveng ở thời điểm đầu nghiecircn cứu

Tỷ lệ gặp cao nhất lagrave caacutec biểu hiện giảm bổ thể (622) rụng

toacutec (531) vagrave tổn thương thận (453) Iacutet gặp nhất lagrave caacutec biểu hiện

viecircm thanh mạc tan maacuteu (23) vagrave tổn thương thần kinh (31)

Bảng 36 Mức độ hoạt động của LBĐHT

TT Mức độ hoạt động Số lƣợng Tỷ lệ ()

1 Ổn định 15 117

2 Hoạt động nhẹ 57 445

3 Hoạt động trung bigravenh 37 289

4 Hoạt động mạnh 19 148

5 Đợt cấp LBĐHT 51 398

6 Điểm SLEDAI (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Điểm SLICC thận (X ) 312 42 (0 - 15)

TT Tiecircu chuẩn n Tỷ lệ ()

1 Caacutec tổn thương da lupus cấp baacuten cấp 49 383

2 Caacutec tổn thương da lupus mạn tiacutenh 21 164

3 Loeacutet niecircm mạc 9 7

4 Rụng toacutec 68 531

5 Biểu hiện khớp 45 352

6 Viecircm thanh mạc 3 23

7 Tổn thương thận 58 453

8 Tổn thương thần kinh 4 31

9 Thiếu maacuteu tan maacuteu 3 23

10 Giảm bạch cầu 42 328

11 Giảm tiểu cầu 5 39

12 Giảm bổ thể 79 622

13

Ở thời điểm khởi đầu nghiecircn cứu phần lớn bệnh nhacircn coacute bệnh

hoạt động ở mức độ nhẹ vagrave trung bigravenh (lần lượt chiếm 445 vagrave

289) Điểm SLEDAI dao động khaacute lớn trong khoảng 0 ndash 41

(trung bigravenh lagrave 661 62) Tỷ lệ bệnh nhacircn coacute đợt cấp LBĐHT lagrave

398 Điểm SLICC thận lupus trung bigravenh lagrave 312 42

32 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của

caacutec tự khaacuteng thể

Bảng 37 Tỷ lệ dương tiacutenh của tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Nhoacutem chứng

bệnh

(n = 39)

Nhoacutem chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN 859 5385 67 3333

Khaacuteng dsDNA 641 256 67 435

Khaacuteng Nucl 813 256 0 145

Khaacuteng C1q 25 0 0 0

Tỷ lệ dương tiacutenh của caacutec khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh nhacircn

LBĐHT theo thứ tự KTKN (859) gt khaacuteng Nucl (813) gt khaacuteng

dsDNA (641) gt khaacuteng C1q (25) tất cả đều cao hơn rotilde rệt so

với caacutec nhoacutem chứng với p lt 0005

Bảng 38 Nồng độ trung bigravenh của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Chứng

bệnh

(n = 39)

Chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Khaacuteng dsDNA (IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

Khaacuteng Nucl (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Khaacuteng C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

14

Nồng độ trung bigravenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 945 1385 (IUml) vagrave 3221 6034

(IUml) đều cao hơn caacutec nhoacutem chứng với p lt 00001

Bảng 39 Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 8594 6667 8271 7187

Khaacuteng dsDNA 6406 9565 9647 5863

Khaacuteng Nucl 8125 9855 9905 7391

Khaacuteng C1q 25 100 100 4182

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute độ đặc hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương

tiacutenh với LBĐHT tương đương KT khaacuteng dsDNA nhưng độ nhạy vagrave

giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh đều cao hơn Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh cao nhất trong 4 khaacuteng thể trong

khi đoacute KTKN coacute độ nhạy cao nhất nhưng độ đặc hiệu lagrave thấp nhất

Bảng 310 Giaacute trị chẩn đoaacuten của caacutec khaacuteng thể qua đường cong ROC

Khaacuteng thể (AUC) KTKN

(0716)

Khaacuteng

dsDNA

(089)

Khaacuteng

C1q

(0676)

Khaacuteng

Nucl

(0911)

KTKN (0716) p=00001 p=044 plt0001

Khaacuteng dsDNA (089) p=00001 plt0001 p=044

Khaacuteng C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

Khaacuteng Nucl (0911) plt0001 p=044 plt0001

Caacutec khaacuteng thể khaacuteng Nucl khaacuteng dsDNA KTKN vagrave khaacuteng

C1q lần lượt coacute giaacute trị rất tốt tốt khaacute tốt vagrave iacutet giaacute trị trong chẩn đoaacuten

15

LBĐHT Diện tiacutech dưới đường cong ROC (AUC) của caacutec KT khaacuteng

Nucl vagrave khaacuteng dsDNA đều cao hơn coacute yacute nghĩa thống kecirc so với

KTKN vagrave khaacuteng C1q

33 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Bảng 311 Liecircn quan giữa KTKN với caacutec biểu hiện của LBĐHT

Nhoacutem triệu

chứng

KTKN KT khaacuteng

dsDNA

KT khaacuteng

C1q

KT khaacuteng

Nucl

OR p OR p OR p OR p

Tổn thương da

lupus cấp baacuten

cấp

311 007 258 00056 082 055 238 008

Tổn thương da

lupus mạn tiacutenh 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Loeacutet niecircm mạc 057 04 055 026 121 074 291 031

Rụng toacutec 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Biểu hiện khớp 166 025 118 055 142 021 179 017

Viecircm thanh mạc 106 097 129 083 12 088 143 081

Tổn thương

thận 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Tổn thương

thần kinh 088 091 025 01 039 039 025 008

Tan maacuteu 044 048 064 066 026 037 168 066

Giảm BC 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Giảm TC 149 071 3 016 446 002 204 05

Giảm bổ thể 1006 lt00001 327 lt00001 372 lt00001 1611 lt0001

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute

16

liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn

quan với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp tổn thương

da lupus mạn tiacutenh giảm BC vagrave giảm bổ thể Khaacuteng thể khaacuteng C1q

dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng

toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan

với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Bảng 312 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể ở bệnh nhacircn LBĐHT

Khaacuteng thể Tỷ lệ (+) OR p

KTKN (+)

Khaacuteng dsDNA 6932 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3227 393 0012

Khaacuteng Nucl 8924 1089 lt00001

Khaacuteng dsDNA

(+)

KTKN 9943 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3714 274 00005

Khaacuteng Nucl 9543 1144 lt00001

Khaacuteng C1q (+)

Khaacuteng dsDNA 7647 274 00005

KTKN 9529 393 0012

Khaacuteng Nucl 9412 43 0003

Khaacuteng Nucl (+)

KTKN 9333 1089 lt00001

Khaacuteng C1q 3333 43 0003

Khaacuteng dsDNA 6958 1144 lt00001

Sự dương tiacutenh của caacutec tự khaacuteng thể đều coacute mối liecircn quan thuận

coacute yacute nghĩa thống kecirc với nhau (p lt 005) trong đoacute mối liecircn quan rotilde

rệt nhất lagrave giữa 3 khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng Nucl vagrave KTKN

17

Bảng 313 Liecircn quan giữa tự khaacuteng thể với độ hoạt động của bệnh

Khaacuteng thể

Mức độ hoạt động của LBĐHT p

Mạnh

(n = 36) (I)

Trung bigravenh

(n = 67)(II)

Nhẹổn

(n = 185)(III) I vagrave II II vagrave III

KTKN 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Khaacuteng

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Khaacuteng

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

Khaacuteng

Nucl

100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt0000

1

So với nhoacutem bệnh hoạt động trung bigravenh tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh cao hơn rotilde rệt với p =

00025 Nồng độ trung bigravenh của khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave KT

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh đều cao hơn rotilde rệt Tỷ lệ

(+) vagrave nồng độ trung bigravenh của 4 khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh hoạt động

trung bigravenh đều cao hơn so với nhoacutem bệnh hoạt động nhẹ ổn định

Bảng 314 Tương quan giữa nồng độ khaacuteng thể với điểm SLEDAI vagrave

điểm SLICC thận

Khaacuteng thể SLEDAI SLICC thận

r p r p

KTKN 0306 lt00001 0143 lt0013

Khaacuteng dsDNA 056 lt00001 0216 00002

Khaacuteng C1q 0433 lt00001 0399 lt00001

Khaacuteng Nucl 0648 lt00001 0348 00082

18

Nồng độ KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA tương quan thuận

chặt chẽ nhất với điểm SLEDAI (p lt 0001) Nồng độ KT khaacuteng

C1q tương quan chặt chẽ nhất với điểm SLICC thận (r = 0399)

Bảng 315 Thay đổi nồng độ caacutec khaacuteng thể sau đợt cấp

Khaacuteng thể Tỷ lệ

giảm

Khaacutec biệt

trung bigravenh

Test t

gheacutep cặp p

KTKN (OD) 625 -034 -143 016

Khaacuteng dsDNA (IUml) 6458 -19949 -1793 008

Khaacuteng C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

Khaacuteng Nucl (IUml) 8333 -47509 -39 00003

Với 48 đợt cấp được theo dotildei nồng độ trung bigravenh của caacutec KT

khaacuteng C1q (p = 0037) vagrave khaacuteng Nucl (p = 00003) sau đợt cấp giảm

coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Bảng 316 Giaacute trị dự đoaacuten đợt cấp LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 9759 6714 3227 9459

Khaacuteng dsDNA 759 4537 36 823

Khaacuteng C1q 5783 8195 5647 8276

Khaacuteng Nucl 9759 2244 3375 9583

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng C1q 4819 878 6154 8072

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng Nucl 759 4927 3772 8347

Khaacuteng Nucl + Khaacuteng C1q 5783 8439 60 8317

Trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT KTKN vagrave khaacuteng Nucl đều coacute

độ nhạy cao vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh cao gt 94 nhưng độ đặc hiệu

khaacute thấp Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu cao nhất (8195)

đặc biệt khi dương tiacutenh đồng thời với KT khaacuteng dsDNA (878)

19

Chƣơng 4 BAgraveN LUẬN

41 Đặc điểm của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT

411 Phacircn bố về tuổi vagrave giới tỷ lệ bệnh nhacircn nữ chiếm tới

9297 với tuổi trung bigravenh lagrave 311 946 trong đoacute phần lớn thuộc

nhoacutem tuổi từ 16 ndash 45 (929) Kết quả nagravey hoagraven toagraven phugrave hợp với

những kết quả nghiecircn cứu trước đacircy cho thấy đặc điểm dịch tễ học

cơ bản của LBĐHT lagrave thường xảy ra ở phụ nữ trong độ tuổi sinh đẻ

412 Về tuổi khởi phaacutet bệnh phần lớn bệnh nhacircn LBĐHT

khởi phaacutet bệnh trong giai đoạn 15 - 45 tuổi (852) tuổi khởi phaacutet

bệnh trung bigravenh lagrave 2593 974 Khaacute nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học

trecircn qui mocirc lớn cho thấy LBĐHT thường coacute xu hướng khởi phaacutet ở

nữ giới trong nhoacutem tuổi từ 15 - 45 giai đoạn coacute sự hoạt động mạnh

mẽ nhất của caacutec tuyến nội tiết hướng sinh dục nữ

413 Tiền sử gia đigravenh coacute ngƣời mắc LBĐHT 469 số

bệnh nhacircn LBĐHT coacute iacutet nhất một người thacircn trong gia đigravenh cugraveng

mắc bệnh Nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học đatilde cho thấy tỷ lệ mắc

LBĐHT ở những người thacircn của người bệnh thường cao gấp khoảng

10 - 20 lần so với tỷ lệ mắc chung trong cộng đồng (4 - 12) cho

thấy vai trograve của yếu tố di truyền trong cơ chế bệnh sinh của LBĐHT

414 Caacutec biểu hiện của LBĐHT Caacutec biểu hiện bệnh gặp

nhiều nhất lagrave rụng toacutec - 531 tổn thương thận - 453 tổn thương

da lupus cấp baacuten cấp - 383 giảm bạch cầu - 382 vagrave giảm bổ

thể - 622 Những kết quả nagravey khaacute tương đồng với nghiecircn cứu của

nhiều taacutec giả trong vagrave ngoagravei nước tuy nhiecircn tỷ lệ viecircm thanh mạc

tổn thương thần kinh vagrave giảm tiểu cầu gặp khaacute thấp nguyecircn nhacircn coacute

thể do sự khaacutec nhau trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu vagrave sự

khaacutec biệt về đặc điểm lacircm sagraveng của LBĐHT giữa caacutec chủng tộc

20

42 Về tỷ lệ dƣơng tiacutenh vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự

khaacuteng thể

421 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN)

Về tỷ lệ dương tiacutenh 859 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute KTKN

dương tiacutenh ở lần khaacutem 1 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ

dương tiacutenh của KTKN ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute sự dao động khaacute lớn

trong khoảng 60 ndash 100 nguyecircn nhacircn coacute thể lagrave do sự khaacutec biệt

trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu thiết kế nghiecircn cứu kỹ

thuật xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể sự

đảo chiều huyết thanh của KTKN

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm

tiacutenh của KTKN lần lượt lagrave 8594 vagrave 7231 khaacute thấp so với caacutec

kết quả nghiecircn cứu trước đacircy nguyecircn nhacircn coacute thể do nhoacutem bệnh

nhacircn nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute tỷ lệ KTKN acircm tiacutenh khaacute cao

(141) sự khaacutec biệt về caacutech thức lựa chọn vagrave đặc điểm của nhoacutem

chứng Độ đặc hiệu của KTKN với LBĐHT lagrave khaacute thấp (4615)

khi sử dụng nhoacutem chứng mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec nguyecircn nhacircn lagrave

do KTKN coacute thể xuất hiện trong nhiều bệnh lyacute tự miễn khaacutec

422 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA

Về tỷ lệ dương tiacutenh bệnh nhacircn LBĐHT 641 số bệnh nhacircn

LBĐHT trong nghiecircn cứu coacute KT khaacuteng dsDNA dương tiacutenh nằm

trong dải biến thiecircn 37 - 85 của caacutec kết quả nghiecircn cứu trước đacircy

Caacutec yếu tố coacute ảnh hưởng rotilde rệt nhất đến tỷ lệ nagravey lagrave mức độ hoạt

động vagrave tổn thương nội tạng của caacutec đối tượng nghiecircn cứu kỹ thuật

xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ đặc hiệu của KT khaacuteng

dsDNA trong chẩn đoaacuten LBĐHT ở nghiecircn cứu nagravey lagrave 9333 khi sử

dụng nhoacutem chứng khỏe mạnh vagrave 9744 khi sử dụng nhoacutem chứng

21

mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec tức lagrave hoagraven toagraven phugrave hợp với caacutec kết quả

nghiecircn cứu trước đacircy (95 ndash 100) Traacutei với độ đặc hiệu độ nhạy của

KT khaacuteng dsDNA với LBĐHT thường khocircng cao vagrave coacute khoảng dao

động khaacute lớn (13 - 86) Nguyecircn nhacircn coacute thể do tiacutenh chất dao động

thường xuyecircn của khaacuteng thể nagravey trong quaacute trigravenh diễn biến bệnh vagrave

độ nhạy khaacutec nhau của caacutec kỹ thuật xeacutet nghiệm miễn dịch

423 Khaacuteng thể khaacuteng C1q

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở bệnh nhacircn LBĐHT dao động trong khoảng 15 ndash

63 theo caacutec nghiecircn cứu trước đacircy kết quả của chuacuteng tocirci lagrave 25 ở

lần khaacutem 1 Trong 3 nghiecircn cứu coacute cỡ mẫu lớn nhất của Julkunen H

(2012) Mok CC (2010) vagrave Orbai AM (2015) tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q đều tương đối thấp vagrave iacutet coacute sự khaacutec biệt

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT KT khaacuteng C1q coacute giaacute trị keacutem

nhất trong chẩn đoaacuten vagrave phacircn loại LBĐHT với diện tiacutech dưới đường

cong ROC lagrave 0676 vagrave độ nhạy chỉ lagrave 25 Tỷ lệ dương tiacutenh thấp vagrave

dao động thường xuyecircn ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute thể lagrave nguyecircn nhacircn

chiacutenh lagravem giảm độ nhạy của khaacuteng thể nagravey trong chẩn đoaacuten bệnh

424 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome (KT khaacuteng Nucl )

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT Tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT trong nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci

lagrave 813 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ nagravey coacute khoảng dao

động rộng từ 45 đến 100 nguyecircn nhacircn lagrave do sự khaacutec biệt của caacutec

đối tượng nghiecircn cứu về chủng tộc vagrave mức độ hoạt động bệnh

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT nhiều nghiecircn cứu đatilde cho thấy độ

đặc hiệu rất cao của KT khaacuteng Nucl với LBĐHT (90 ndash 100) tương

đồng với kết quả thu được của chuacuteng tocirci lagrave 987 Nguyecircn nhacircn coacute

thể do nucleosome lagrave tự khaacuteng nguyecircn coacute vai trograve quan trọng trong cơ

22

chế bệnh sinh của LBĐHT Độ nhạy của KT khaacuteng Nucl với

LBĐHT trong nghiecircn cứu nagravey lagrave 8125 cao hơn so với KT khaacuteng

dsDNA (6406)

43 Về liecircn quan giữa caacutec khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

431 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh (ge 12

OD) ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với sự xuất

hiện của giảm bổ thể vagrave caacutec tự khaacuteng thể khaacutec Mối liecircn quan giữa

khaacuteng thể nagravey với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của

LBĐHT trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy lagrave khocircng rotilde rệt do thiếu

những bằng chứng đaacuteng tin cậy

432 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với caacutec biểu

hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp hoặc mạn tiacutenh giảm bạch cầu

vagrave giảm bổ thể nhưng khocircng liecircn quan với tổn thương thận lupus

Nồng độ vagrave tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng dsDNA ở nhoacutem bệnh

nhacircn trong đợt cấp đều cao hơn so với nhoacutem ngoagravei đợt cấp tuy nhiecircn

khaacuteng thể nagravey coacute liecircn quan khocircng hằng định với cả hoạt tiacutenh chung

của LBĐHT vagrave tổn thương thận đặc biệt lagrave với đợt cấp của bệnh

433 Khaacuteng thể khaacuteng C1q khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh ở

bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan rotilde rệt với sự xuất hiện của tổn thương

thận vagrave giảm bổ thể Độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey trong dự baacuteo tổn

thương thận lupus cao hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại vagrave nồng độ của noacute

tương quan nghịch khaacute chặt với cả bổ thể C3 vagrave C4 (p lt 00001) Tỷ

lệ vagrave nồng độ trung bigravenh của KT khaacuteng C1q đều coacute xu hướng tăng

dần theo mức độ hoạt động của bệnh Tương quan giữa nồng độ KT

khaacuteng C1q với điểm SLICC thận vagrave độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey

trong dự baacuteo đợt cấp thận lupus cũng tốt hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại

23

434 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện tổn thương

da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận giảm BC vagrave giảm bổ thể Độ

nhạy trong dự baacuteo tổn thương thận lupus của KT khaacuteng Nucl cao

hơn so với caacutec khaacuteng thể cograven lại Tương quan với nồng độ bổ thể vagrave

điểm SLEDAI của khaacuteng thể nagravey cũng chặt chẽ hơn caacutec khaacuteng thể

cograven lại

KẾT LUẬN

Qua nghiecircn cứu 128 bệnh nhacircn LBĐHT với nhoacutem chứng gồm

39 người mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec vagrave 30 người khỏe mạnh chuacuteng

tocirci xin đưa ra một số kết luận sau

1 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten của một

số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể

Tỷ lệ dương tiacutenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 855 641 25 vagrave

813 tất cả đều cao hơn rotilde rệt so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở 587 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute

KT khaacuteng dsDNA acircm tiacutenh

Nồng độ trung bigravenh của caacutec KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng

C1q vagrave khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 3221 6034 (IUml) vagrave 945 1385

(IUml) tất cả đều cao hơn so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn coacute độ nhạy cao (8594) nhưng độ đặc

hiệu thấp (6667) với LBĐHT Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh 100 với LBĐHT nhưng độ nhạy

rất thấp (25)

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 12: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

9

227 Sai số vagrave caacutech khắc phục sai số khắc phục caacutec sai số bằng

caacutech khai thaacutec kỹ triệu chứng lacircm sagraveng tiền sử kiểm tra vagrave đaacutenh giaacute

lại caacutec chỉ số hoạt động bệnh lagravem sạch số liệu trước khi xử lyacute

228 Xử lyacute số liệu Caacutec số liệu nghiecircn cứu được xử lyacute bằng phần

mềm toaacuten thống kecirc MEDCALC 140

229 Đạo đức của nghiecircn cứu

Nghiecircn cứu được tiến hagravenh tại caacutec cơ sở y tế coacute uy tiacuten với sự

đồng yacute của latildenh đạo caacutec đơn vị Đacircy lagrave nghiecircn cứu mocirc tả khocircng coacute

can thiệp tất cả caacutec đối tượng nghiecircn cứu đều tự nguyện tham gia

Caacutec số liệu thu được chỉ phục vụ cho mục điacutech nghiecircn cứu vagrave chăm

soacutec sức khỏe người bệnh khocircng phục vụ cho caacutec mục điacutech khaacutec

Chƣơng 3 KẾT QUẢ NGHIEcircN CỨU

31 Đặc điểm chung của caacutec đối tƣợng nghiecircn cứu

Bảng 31 Đặc điểm về tuổi vagrave giới

Nhoacutem nghiecircn cứu n Tuổi (X ) Tỷ lệ nữ nam

Nhoacutem LBĐHT 128 311 946 1322

Nhoacutem chứng bệnh 39 4305 17 333

Nhoacutem chứng khỏe 30 3163 1357 14

p 000036

04

0011

074

Nhoacutem LBĐHT so với nhoacutem chứng bệnh

Nhoacutem LBĐHT so với nhoacutem chứng khỏe

Tuổi trung bigravenh của nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lagrave 311 946

thấp hơn so với nhoacutem chứng bệnh (p = 000036) nhưng khocircng khaacutec

biệt so với nhoacutem chứng khỏe mạnh (p = 04) Tỷ lệ nữnam ở nhoacutem

LBĐHT lagrave 1322 tương đương nhoacutem chứng khỏe mạnh (p = 074)

nhưng cao hơn so với nhoacutem chứng bệnh (p = 0011)

Bảng 32 Phacircn bố theo nhoacutem tuổi của nhoacutem LBĐHT

Nhoacutem tuổi 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Tổng

10

n 1 67 52 7 1 128

Tỷ lệ 08 523 406 55 08 100

Caacutec bệnh nhacircn phần lớn gặp trong nhoacutem tuổi 20 ndash 30 (437)

vagrave 31 ndash 40 (336) thấp nhất lagrave ở nhoacutem gt 50 tuổi (47) Phacircn bố

caacutec nhoacutem tuổi khocircng coacute sự khaacutec biệt giữa 2 giới với p = 051

Bảng 33 Phacircn bố bệnh nhacircn LBĐHT theo thời gian mắc bệnh

Khoảng thời

gian (năm) Số lƣợng Tỷ lệ ()

Thời gian

trung bigravenh

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

TỔNG SỐ 128 100 517 37

Thời gian mắc bệnh của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT gặp nhiều

nhất trong khoảng 2 ndash 5 năm (516) vagrave 6 ndash 10 năm (25) Thời

gian mắc bệnh trung bigravenh lagrave 517 37 (năm)

Bảng 34 Phacircn bố bệnh nhacircn LBĐHT theo tuổi khởi phaacutet bệnh

Nhoacutem tuổi Số lƣợng Tỷ lệ () Tuổi trung bigravenh

15 14 109 1271 23

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

TỔNG SỐ 128 100 2593 974

Phần lớn bệnh nhacircn khởi phaacutet bệnh ở độ tuổi 16 ndash 25 (43) vagrave

26 ndash 35 (281) Số bệnh nhacircn khởi phaacutet bệnh sau 45 tuổi chỉ chiếm

11

39 Tuổi phaacutet bệnh trung bigravenh của caacutec bệnh nhacircn lagrave 2593 974

Tiền sử mắc LBĐHT của người thacircn 6128 bệnh nhacircn

LBĐHT coacute người thacircn trong gia đigravenh (cha mẹ anh chị em ruột)

cugraveng mắc LBĐHT chiếm tỷ lệ 469

12

Bảng 35 Một số biểu hiện lacircm sagraveng ở thời điểm đầu nghiecircn cứu

Tỷ lệ gặp cao nhất lagrave caacutec biểu hiện giảm bổ thể (622) rụng

toacutec (531) vagrave tổn thương thận (453) Iacutet gặp nhất lagrave caacutec biểu hiện

viecircm thanh mạc tan maacuteu (23) vagrave tổn thương thần kinh (31)

Bảng 36 Mức độ hoạt động của LBĐHT

TT Mức độ hoạt động Số lƣợng Tỷ lệ ()

1 Ổn định 15 117

2 Hoạt động nhẹ 57 445

3 Hoạt động trung bigravenh 37 289

4 Hoạt động mạnh 19 148

5 Đợt cấp LBĐHT 51 398

6 Điểm SLEDAI (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Điểm SLICC thận (X ) 312 42 (0 - 15)

TT Tiecircu chuẩn n Tỷ lệ ()

1 Caacutec tổn thương da lupus cấp baacuten cấp 49 383

2 Caacutec tổn thương da lupus mạn tiacutenh 21 164

3 Loeacutet niecircm mạc 9 7

4 Rụng toacutec 68 531

5 Biểu hiện khớp 45 352

6 Viecircm thanh mạc 3 23

7 Tổn thương thận 58 453

8 Tổn thương thần kinh 4 31

9 Thiếu maacuteu tan maacuteu 3 23

10 Giảm bạch cầu 42 328

11 Giảm tiểu cầu 5 39

12 Giảm bổ thể 79 622

13

Ở thời điểm khởi đầu nghiecircn cứu phần lớn bệnh nhacircn coacute bệnh

hoạt động ở mức độ nhẹ vagrave trung bigravenh (lần lượt chiếm 445 vagrave

289) Điểm SLEDAI dao động khaacute lớn trong khoảng 0 ndash 41

(trung bigravenh lagrave 661 62) Tỷ lệ bệnh nhacircn coacute đợt cấp LBĐHT lagrave

398 Điểm SLICC thận lupus trung bigravenh lagrave 312 42

32 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của

caacutec tự khaacuteng thể

Bảng 37 Tỷ lệ dương tiacutenh của tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Nhoacutem chứng

bệnh

(n = 39)

Nhoacutem chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN 859 5385 67 3333

Khaacuteng dsDNA 641 256 67 435

Khaacuteng Nucl 813 256 0 145

Khaacuteng C1q 25 0 0 0

Tỷ lệ dương tiacutenh của caacutec khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh nhacircn

LBĐHT theo thứ tự KTKN (859) gt khaacuteng Nucl (813) gt khaacuteng

dsDNA (641) gt khaacuteng C1q (25) tất cả đều cao hơn rotilde rệt so

với caacutec nhoacutem chứng với p lt 0005

Bảng 38 Nồng độ trung bigravenh của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Chứng

bệnh

(n = 39)

Chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Khaacuteng dsDNA (IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

Khaacuteng Nucl (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Khaacuteng C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

14

Nồng độ trung bigravenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 945 1385 (IUml) vagrave 3221 6034

(IUml) đều cao hơn caacutec nhoacutem chứng với p lt 00001

Bảng 39 Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 8594 6667 8271 7187

Khaacuteng dsDNA 6406 9565 9647 5863

Khaacuteng Nucl 8125 9855 9905 7391

Khaacuteng C1q 25 100 100 4182

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute độ đặc hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương

tiacutenh với LBĐHT tương đương KT khaacuteng dsDNA nhưng độ nhạy vagrave

giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh đều cao hơn Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh cao nhất trong 4 khaacuteng thể trong

khi đoacute KTKN coacute độ nhạy cao nhất nhưng độ đặc hiệu lagrave thấp nhất

Bảng 310 Giaacute trị chẩn đoaacuten của caacutec khaacuteng thể qua đường cong ROC

Khaacuteng thể (AUC) KTKN

(0716)

Khaacuteng

dsDNA

(089)

Khaacuteng

C1q

(0676)

Khaacuteng

Nucl

(0911)

KTKN (0716) p=00001 p=044 plt0001

Khaacuteng dsDNA (089) p=00001 plt0001 p=044

Khaacuteng C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

Khaacuteng Nucl (0911) plt0001 p=044 plt0001

Caacutec khaacuteng thể khaacuteng Nucl khaacuteng dsDNA KTKN vagrave khaacuteng

C1q lần lượt coacute giaacute trị rất tốt tốt khaacute tốt vagrave iacutet giaacute trị trong chẩn đoaacuten

15

LBĐHT Diện tiacutech dưới đường cong ROC (AUC) của caacutec KT khaacuteng

Nucl vagrave khaacuteng dsDNA đều cao hơn coacute yacute nghĩa thống kecirc so với

KTKN vagrave khaacuteng C1q

33 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Bảng 311 Liecircn quan giữa KTKN với caacutec biểu hiện của LBĐHT

Nhoacutem triệu

chứng

KTKN KT khaacuteng

dsDNA

KT khaacuteng

C1q

KT khaacuteng

Nucl

OR p OR p OR p OR p

Tổn thương da

lupus cấp baacuten

cấp

311 007 258 00056 082 055 238 008

Tổn thương da

lupus mạn tiacutenh 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Loeacutet niecircm mạc 057 04 055 026 121 074 291 031

Rụng toacutec 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Biểu hiện khớp 166 025 118 055 142 021 179 017

Viecircm thanh mạc 106 097 129 083 12 088 143 081

Tổn thương

thận 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Tổn thương

thần kinh 088 091 025 01 039 039 025 008

Tan maacuteu 044 048 064 066 026 037 168 066

Giảm BC 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Giảm TC 149 071 3 016 446 002 204 05

Giảm bổ thể 1006 lt00001 327 lt00001 372 lt00001 1611 lt0001

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute

16

liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn

quan với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp tổn thương

da lupus mạn tiacutenh giảm BC vagrave giảm bổ thể Khaacuteng thể khaacuteng C1q

dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng

toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan

với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Bảng 312 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể ở bệnh nhacircn LBĐHT

Khaacuteng thể Tỷ lệ (+) OR p

KTKN (+)

Khaacuteng dsDNA 6932 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3227 393 0012

Khaacuteng Nucl 8924 1089 lt00001

Khaacuteng dsDNA

(+)

KTKN 9943 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3714 274 00005

Khaacuteng Nucl 9543 1144 lt00001

Khaacuteng C1q (+)

Khaacuteng dsDNA 7647 274 00005

KTKN 9529 393 0012

Khaacuteng Nucl 9412 43 0003

Khaacuteng Nucl (+)

KTKN 9333 1089 lt00001

Khaacuteng C1q 3333 43 0003

Khaacuteng dsDNA 6958 1144 lt00001

Sự dương tiacutenh của caacutec tự khaacuteng thể đều coacute mối liecircn quan thuận

coacute yacute nghĩa thống kecirc với nhau (p lt 005) trong đoacute mối liecircn quan rotilde

rệt nhất lagrave giữa 3 khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng Nucl vagrave KTKN

17

Bảng 313 Liecircn quan giữa tự khaacuteng thể với độ hoạt động của bệnh

Khaacuteng thể

Mức độ hoạt động của LBĐHT p

Mạnh

(n = 36) (I)

Trung bigravenh

(n = 67)(II)

Nhẹổn

(n = 185)(III) I vagrave II II vagrave III

KTKN 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Khaacuteng

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Khaacuteng

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

Khaacuteng

Nucl

100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt0000

1

So với nhoacutem bệnh hoạt động trung bigravenh tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh cao hơn rotilde rệt với p =

00025 Nồng độ trung bigravenh của khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave KT

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh đều cao hơn rotilde rệt Tỷ lệ

(+) vagrave nồng độ trung bigravenh của 4 khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh hoạt động

trung bigravenh đều cao hơn so với nhoacutem bệnh hoạt động nhẹ ổn định

Bảng 314 Tương quan giữa nồng độ khaacuteng thể với điểm SLEDAI vagrave

điểm SLICC thận

Khaacuteng thể SLEDAI SLICC thận

r p r p

KTKN 0306 lt00001 0143 lt0013

Khaacuteng dsDNA 056 lt00001 0216 00002

Khaacuteng C1q 0433 lt00001 0399 lt00001

Khaacuteng Nucl 0648 lt00001 0348 00082

18

Nồng độ KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA tương quan thuận

chặt chẽ nhất với điểm SLEDAI (p lt 0001) Nồng độ KT khaacuteng

C1q tương quan chặt chẽ nhất với điểm SLICC thận (r = 0399)

Bảng 315 Thay đổi nồng độ caacutec khaacuteng thể sau đợt cấp

Khaacuteng thể Tỷ lệ

giảm

Khaacutec biệt

trung bigravenh

Test t

gheacutep cặp p

KTKN (OD) 625 -034 -143 016

Khaacuteng dsDNA (IUml) 6458 -19949 -1793 008

Khaacuteng C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

Khaacuteng Nucl (IUml) 8333 -47509 -39 00003

Với 48 đợt cấp được theo dotildei nồng độ trung bigravenh của caacutec KT

khaacuteng C1q (p = 0037) vagrave khaacuteng Nucl (p = 00003) sau đợt cấp giảm

coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Bảng 316 Giaacute trị dự đoaacuten đợt cấp LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 9759 6714 3227 9459

Khaacuteng dsDNA 759 4537 36 823

Khaacuteng C1q 5783 8195 5647 8276

Khaacuteng Nucl 9759 2244 3375 9583

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng C1q 4819 878 6154 8072

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng Nucl 759 4927 3772 8347

Khaacuteng Nucl + Khaacuteng C1q 5783 8439 60 8317

Trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT KTKN vagrave khaacuteng Nucl đều coacute

độ nhạy cao vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh cao gt 94 nhưng độ đặc hiệu

khaacute thấp Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu cao nhất (8195)

đặc biệt khi dương tiacutenh đồng thời với KT khaacuteng dsDNA (878)

19

Chƣơng 4 BAgraveN LUẬN

41 Đặc điểm của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT

411 Phacircn bố về tuổi vagrave giới tỷ lệ bệnh nhacircn nữ chiếm tới

9297 với tuổi trung bigravenh lagrave 311 946 trong đoacute phần lớn thuộc

nhoacutem tuổi từ 16 ndash 45 (929) Kết quả nagravey hoagraven toagraven phugrave hợp với

những kết quả nghiecircn cứu trước đacircy cho thấy đặc điểm dịch tễ học

cơ bản của LBĐHT lagrave thường xảy ra ở phụ nữ trong độ tuổi sinh đẻ

412 Về tuổi khởi phaacutet bệnh phần lớn bệnh nhacircn LBĐHT

khởi phaacutet bệnh trong giai đoạn 15 - 45 tuổi (852) tuổi khởi phaacutet

bệnh trung bigravenh lagrave 2593 974 Khaacute nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học

trecircn qui mocirc lớn cho thấy LBĐHT thường coacute xu hướng khởi phaacutet ở

nữ giới trong nhoacutem tuổi từ 15 - 45 giai đoạn coacute sự hoạt động mạnh

mẽ nhất của caacutec tuyến nội tiết hướng sinh dục nữ

413 Tiền sử gia đigravenh coacute ngƣời mắc LBĐHT 469 số

bệnh nhacircn LBĐHT coacute iacutet nhất một người thacircn trong gia đigravenh cugraveng

mắc bệnh Nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học đatilde cho thấy tỷ lệ mắc

LBĐHT ở những người thacircn của người bệnh thường cao gấp khoảng

10 - 20 lần so với tỷ lệ mắc chung trong cộng đồng (4 - 12) cho

thấy vai trograve của yếu tố di truyền trong cơ chế bệnh sinh của LBĐHT

414 Caacutec biểu hiện của LBĐHT Caacutec biểu hiện bệnh gặp

nhiều nhất lagrave rụng toacutec - 531 tổn thương thận - 453 tổn thương

da lupus cấp baacuten cấp - 383 giảm bạch cầu - 382 vagrave giảm bổ

thể - 622 Những kết quả nagravey khaacute tương đồng với nghiecircn cứu của

nhiều taacutec giả trong vagrave ngoagravei nước tuy nhiecircn tỷ lệ viecircm thanh mạc

tổn thương thần kinh vagrave giảm tiểu cầu gặp khaacute thấp nguyecircn nhacircn coacute

thể do sự khaacutec nhau trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu vagrave sự

khaacutec biệt về đặc điểm lacircm sagraveng của LBĐHT giữa caacutec chủng tộc

20

42 Về tỷ lệ dƣơng tiacutenh vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự

khaacuteng thể

421 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN)

Về tỷ lệ dương tiacutenh 859 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute KTKN

dương tiacutenh ở lần khaacutem 1 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ

dương tiacutenh của KTKN ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute sự dao động khaacute lớn

trong khoảng 60 ndash 100 nguyecircn nhacircn coacute thể lagrave do sự khaacutec biệt

trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu thiết kế nghiecircn cứu kỹ

thuật xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể sự

đảo chiều huyết thanh của KTKN

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm

tiacutenh của KTKN lần lượt lagrave 8594 vagrave 7231 khaacute thấp so với caacutec

kết quả nghiecircn cứu trước đacircy nguyecircn nhacircn coacute thể do nhoacutem bệnh

nhacircn nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute tỷ lệ KTKN acircm tiacutenh khaacute cao

(141) sự khaacutec biệt về caacutech thức lựa chọn vagrave đặc điểm của nhoacutem

chứng Độ đặc hiệu của KTKN với LBĐHT lagrave khaacute thấp (4615)

khi sử dụng nhoacutem chứng mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec nguyecircn nhacircn lagrave

do KTKN coacute thể xuất hiện trong nhiều bệnh lyacute tự miễn khaacutec

422 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA

Về tỷ lệ dương tiacutenh bệnh nhacircn LBĐHT 641 số bệnh nhacircn

LBĐHT trong nghiecircn cứu coacute KT khaacuteng dsDNA dương tiacutenh nằm

trong dải biến thiecircn 37 - 85 của caacutec kết quả nghiecircn cứu trước đacircy

Caacutec yếu tố coacute ảnh hưởng rotilde rệt nhất đến tỷ lệ nagravey lagrave mức độ hoạt

động vagrave tổn thương nội tạng của caacutec đối tượng nghiecircn cứu kỹ thuật

xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ đặc hiệu của KT khaacuteng

dsDNA trong chẩn đoaacuten LBĐHT ở nghiecircn cứu nagravey lagrave 9333 khi sử

dụng nhoacutem chứng khỏe mạnh vagrave 9744 khi sử dụng nhoacutem chứng

21

mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec tức lagrave hoagraven toagraven phugrave hợp với caacutec kết quả

nghiecircn cứu trước đacircy (95 ndash 100) Traacutei với độ đặc hiệu độ nhạy của

KT khaacuteng dsDNA với LBĐHT thường khocircng cao vagrave coacute khoảng dao

động khaacute lớn (13 - 86) Nguyecircn nhacircn coacute thể do tiacutenh chất dao động

thường xuyecircn của khaacuteng thể nagravey trong quaacute trigravenh diễn biến bệnh vagrave

độ nhạy khaacutec nhau của caacutec kỹ thuật xeacutet nghiệm miễn dịch

423 Khaacuteng thể khaacuteng C1q

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở bệnh nhacircn LBĐHT dao động trong khoảng 15 ndash

63 theo caacutec nghiecircn cứu trước đacircy kết quả của chuacuteng tocirci lagrave 25 ở

lần khaacutem 1 Trong 3 nghiecircn cứu coacute cỡ mẫu lớn nhất của Julkunen H

(2012) Mok CC (2010) vagrave Orbai AM (2015) tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q đều tương đối thấp vagrave iacutet coacute sự khaacutec biệt

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT KT khaacuteng C1q coacute giaacute trị keacutem

nhất trong chẩn đoaacuten vagrave phacircn loại LBĐHT với diện tiacutech dưới đường

cong ROC lagrave 0676 vagrave độ nhạy chỉ lagrave 25 Tỷ lệ dương tiacutenh thấp vagrave

dao động thường xuyecircn ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute thể lagrave nguyecircn nhacircn

chiacutenh lagravem giảm độ nhạy của khaacuteng thể nagravey trong chẩn đoaacuten bệnh

424 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome (KT khaacuteng Nucl )

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT Tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT trong nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci

lagrave 813 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ nagravey coacute khoảng dao

động rộng từ 45 đến 100 nguyecircn nhacircn lagrave do sự khaacutec biệt của caacutec

đối tượng nghiecircn cứu về chủng tộc vagrave mức độ hoạt động bệnh

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT nhiều nghiecircn cứu đatilde cho thấy độ

đặc hiệu rất cao của KT khaacuteng Nucl với LBĐHT (90 ndash 100) tương

đồng với kết quả thu được của chuacuteng tocirci lagrave 987 Nguyecircn nhacircn coacute

thể do nucleosome lagrave tự khaacuteng nguyecircn coacute vai trograve quan trọng trong cơ

22

chế bệnh sinh của LBĐHT Độ nhạy của KT khaacuteng Nucl với

LBĐHT trong nghiecircn cứu nagravey lagrave 8125 cao hơn so với KT khaacuteng

dsDNA (6406)

43 Về liecircn quan giữa caacutec khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

431 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh (ge 12

OD) ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với sự xuất

hiện của giảm bổ thể vagrave caacutec tự khaacuteng thể khaacutec Mối liecircn quan giữa

khaacuteng thể nagravey với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của

LBĐHT trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy lagrave khocircng rotilde rệt do thiếu

những bằng chứng đaacuteng tin cậy

432 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với caacutec biểu

hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp hoặc mạn tiacutenh giảm bạch cầu

vagrave giảm bổ thể nhưng khocircng liecircn quan với tổn thương thận lupus

Nồng độ vagrave tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng dsDNA ở nhoacutem bệnh

nhacircn trong đợt cấp đều cao hơn so với nhoacutem ngoagravei đợt cấp tuy nhiecircn

khaacuteng thể nagravey coacute liecircn quan khocircng hằng định với cả hoạt tiacutenh chung

của LBĐHT vagrave tổn thương thận đặc biệt lagrave với đợt cấp của bệnh

433 Khaacuteng thể khaacuteng C1q khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh ở

bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan rotilde rệt với sự xuất hiện của tổn thương

thận vagrave giảm bổ thể Độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey trong dự baacuteo tổn

thương thận lupus cao hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại vagrave nồng độ của noacute

tương quan nghịch khaacute chặt với cả bổ thể C3 vagrave C4 (p lt 00001) Tỷ

lệ vagrave nồng độ trung bigravenh của KT khaacuteng C1q đều coacute xu hướng tăng

dần theo mức độ hoạt động của bệnh Tương quan giữa nồng độ KT

khaacuteng C1q với điểm SLICC thận vagrave độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey

trong dự baacuteo đợt cấp thận lupus cũng tốt hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại

23

434 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện tổn thương

da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận giảm BC vagrave giảm bổ thể Độ

nhạy trong dự baacuteo tổn thương thận lupus của KT khaacuteng Nucl cao

hơn so với caacutec khaacuteng thể cograven lại Tương quan với nồng độ bổ thể vagrave

điểm SLEDAI của khaacuteng thể nagravey cũng chặt chẽ hơn caacutec khaacuteng thể

cograven lại

KẾT LUẬN

Qua nghiecircn cứu 128 bệnh nhacircn LBĐHT với nhoacutem chứng gồm

39 người mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec vagrave 30 người khỏe mạnh chuacuteng

tocirci xin đưa ra một số kết luận sau

1 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten của một

số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể

Tỷ lệ dương tiacutenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 855 641 25 vagrave

813 tất cả đều cao hơn rotilde rệt so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở 587 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute

KT khaacuteng dsDNA acircm tiacutenh

Nồng độ trung bigravenh của caacutec KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng

C1q vagrave khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 3221 6034 (IUml) vagrave 945 1385

(IUml) tất cả đều cao hơn so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn coacute độ nhạy cao (8594) nhưng độ đặc

hiệu thấp (6667) với LBĐHT Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh 100 với LBĐHT nhưng độ nhạy

rất thấp (25)

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 13: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

10

n 1 67 52 7 1 128

Tỷ lệ 08 523 406 55 08 100

Caacutec bệnh nhacircn phần lớn gặp trong nhoacutem tuổi 20 ndash 30 (437)

vagrave 31 ndash 40 (336) thấp nhất lagrave ở nhoacutem gt 50 tuổi (47) Phacircn bố

caacutec nhoacutem tuổi khocircng coacute sự khaacutec biệt giữa 2 giới với p = 051

Bảng 33 Phacircn bố bệnh nhacircn LBĐHT theo thời gian mắc bệnh

Khoảng thời

gian (năm) Số lƣợng Tỷ lệ ()

Thời gian

trung bigravenh

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

TỔNG SỐ 128 100 517 37

Thời gian mắc bệnh của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT gặp nhiều

nhất trong khoảng 2 ndash 5 năm (516) vagrave 6 ndash 10 năm (25) Thời

gian mắc bệnh trung bigravenh lagrave 517 37 (năm)

Bảng 34 Phacircn bố bệnh nhacircn LBĐHT theo tuổi khởi phaacutet bệnh

Nhoacutem tuổi Số lƣợng Tỷ lệ () Tuổi trung bigravenh

15 14 109 1271 23

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

TỔNG SỐ 128 100 2593 974

Phần lớn bệnh nhacircn khởi phaacutet bệnh ở độ tuổi 16 ndash 25 (43) vagrave

26 ndash 35 (281) Số bệnh nhacircn khởi phaacutet bệnh sau 45 tuổi chỉ chiếm

11

39 Tuổi phaacutet bệnh trung bigravenh của caacutec bệnh nhacircn lagrave 2593 974

Tiền sử mắc LBĐHT của người thacircn 6128 bệnh nhacircn

LBĐHT coacute người thacircn trong gia đigravenh (cha mẹ anh chị em ruột)

cugraveng mắc LBĐHT chiếm tỷ lệ 469

12

Bảng 35 Một số biểu hiện lacircm sagraveng ở thời điểm đầu nghiecircn cứu

Tỷ lệ gặp cao nhất lagrave caacutec biểu hiện giảm bổ thể (622) rụng

toacutec (531) vagrave tổn thương thận (453) Iacutet gặp nhất lagrave caacutec biểu hiện

viecircm thanh mạc tan maacuteu (23) vagrave tổn thương thần kinh (31)

Bảng 36 Mức độ hoạt động của LBĐHT

TT Mức độ hoạt động Số lƣợng Tỷ lệ ()

1 Ổn định 15 117

2 Hoạt động nhẹ 57 445

3 Hoạt động trung bigravenh 37 289

4 Hoạt động mạnh 19 148

5 Đợt cấp LBĐHT 51 398

6 Điểm SLEDAI (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Điểm SLICC thận (X ) 312 42 (0 - 15)

TT Tiecircu chuẩn n Tỷ lệ ()

1 Caacutec tổn thương da lupus cấp baacuten cấp 49 383

2 Caacutec tổn thương da lupus mạn tiacutenh 21 164

3 Loeacutet niecircm mạc 9 7

4 Rụng toacutec 68 531

5 Biểu hiện khớp 45 352

6 Viecircm thanh mạc 3 23

7 Tổn thương thận 58 453

8 Tổn thương thần kinh 4 31

9 Thiếu maacuteu tan maacuteu 3 23

10 Giảm bạch cầu 42 328

11 Giảm tiểu cầu 5 39

12 Giảm bổ thể 79 622

13

Ở thời điểm khởi đầu nghiecircn cứu phần lớn bệnh nhacircn coacute bệnh

hoạt động ở mức độ nhẹ vagrave trung bigravenh (lần lượt chiếm 445 vagrave

289) Điểm SLEDAI dao động khaacute lớn trong khoảng 0 ndash 41

(trung bigravenh lagrave 661 62) Tỷ lệ bệnh nhacircn coacute đợt cấp LBĐHT lagrave

398 Điểm SLICC thận lupus trung bigravenh lagrave 312 42

32 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của

caacutec tự khaacuteng thể

Bảng 37 Tỷ lệ dương tiacutenh của tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Nhoacutem chứng

bệnh

(n = 39)

Nhoacutem chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN 859 5385 67 3333

Khaacuteng dsDNA 641 256 67 435

Khaacuteng Nucl 813 256 0 145

Khaacuteng C1q 25 0 0 0

Tỷ lệ dương tiacutenh của caacutec khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh nhacircn

LBĐHT theo thứ tự KTKN (859) gt khaacuteng Nucl (813) gt khaacuteng

dsDNA (641) gt khaacuteng C1q (25) tất cả đều cao hơn rotilde rệt so

với caacutec nhoacutem chứng với p lt 0005

Bảng 38 Nồng độ trung bigravenh của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Chứng

bệnh

(n = 39)

Chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Khaacuteng dsDNA (IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

Khaacuteng Nucl (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Khaacuteng C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

14

Nồng độ trung bigravenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 945 1385 (IUml) vagrave 3221 6034

(IUml) đều cao hơn caacutec nhoacutem chứng với p lt 00001

Bảng 39 Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 8594 6667 8271 7187

Khaacuteng dsDNA 6406 9565 9647 5863

Khaacuteng Nucl 8125 9855 9905 7391

Khaacuteng C1q 25 100 100 4182

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute độ đặc hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương

tiacutenh với LBĐHT tương đương KT khaacuteng dsDNA nhưng độ nhạy vagrave

giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh đều cao hơn Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh cao nhất trong 4 khaacuteng thể trong

khi đoacute KTKN coacute độ nhạy cao nhất nhưng độ đặc hiệu lagrave thấp nhất

Bảng 310 Giaacute trị chẩn đoaacuten của caacutec khaacuteng thể qua đường cong ROC

Khaacuteng thể (AUC) KTKN

(0716)

Khaacuteng

dsDNA

(089)

Khaacuteng

C1q

(0676)

Khaacuteng

Nucl

(0911)

KTKN (0716) p=00001 p=044 plt0001

Khaacuteng dsDNA (089) p=00001 plt0001 p=044

Khaacuteng C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

Khaacuteng Nucl (0911) plt0001 p=044 plt0001

Caacutec khaacuteng thể khaacuteng Nucl khaacuteng dsDNA KTKN vagrave khaacuteng

C1q lần lượt coacute giaacute trị rất tốt tốt khaacute tốt vagrave iacutet giaacute trị trong chẩn đoaacuten

15

LBĐHT Diện tiacutech dưới đường cong ROC (AUC) của caacutec KT khaacuteng

Nucl vagrave khaacuteng dsDNA đều cao hơn coacute yacute nghĩa thống kecirc so với

KTKN vagrave khaacuteng C1q

33 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Bảng 311 Liecircn quan giữa KTKN với caacutec biểu hiện của LBĐHT

Nhoacutem triệu

chứng

KTKN KT khaacuteng

dsDNA

KT khaacuteng

C1q

KT khaacuteng

Nucl

OR p OR p OR p OR p

Tổn thương da

lupus cấp baacuten

cấp

311 007 258 00056 082 055 238 008

Tổn thương da

lupus mạn tiacutenh 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Loeacutet niecircm mạc 057 04 055 026 121 074 291 031

Rụng toacutec 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Biểu hiện khớp 166 025 118 055 142 021 179 017

Viecircm thanh mạc 106 097 129 083 12 088 143 081

Tổn thương

thận 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Tổn thương

thần kinh 088 091 025 01 039 039 025 008

Tan maacuteu 044 048 064 066 026 037 168 066

Giảm BC 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Giảm TC 149 071 3 016 446 002 204 05

Giảm bổ thể 1006 lt00001 327 lt00001 372 lt00001 1611 lt0001

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute

16

liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn

quan với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp tổn thương

da lupus mạn tiacutenh giảm BC vagrave giảm bổ thể Khaacuteng thể khaacuteng C1q

dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng

toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan

với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Bảng 312 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể ở bệnh nhacircn LBĐHT

Khaacuteng thể Tỷ lệ (+) OR p

KTKN (+)

Khaacuteng dsDNA 6932 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3227 393 0012

Khaacuteng Nucl 8924 1089 lt00001

Khaacuteng dsDNA

(+)

KTKN 9943 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3714 274 00005

Khaacuteng Nucl 9543 1144 lt00001

Khaacuteng C1q (+)

Khaacuteng dsDNA 7647 274 00005

KTKN 9529 393 0012

Khaacuteng Nucl 9412 43 0003

Khaacuteng Nucl (+)

KTKN 9333 1089 lt00001

Khaacuteng C1q 3333 43 0003

Khaacuteng dsDNA 6958 1144 lt00001

Sự dương tiacutenh của caacutec tự khaacuteng thể đều coacute mối liecircn quan thuận

coacute yacute nghĩa thống kecirc với nhau (p lt 005) trong đoacute mối liecircn quan rotilde

rệt nhất lagrave giữa 3 khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng Nucl vagrave KTKN

17

Bảng 313 Liecircn quan giữa tự khaacuteng thể với độ hoạt động của bệnh

Khaacuteng thể

Mức độ hoạt động của LBĐHT p

Mạnh

(n = 36) (I)

Trung bigravenh

(n = 67)(II)

Nhẹổn

(n = 185)(III) I vagrave II II vagrave III

KTKN 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Khaacuteng

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Khaacuteng

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

Khaacuteng

Nucl

100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt0000

1

So với nhoacutem bệnh hoạt động trung bigravenh tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh cao hơn rotilde rệt với p =

00025 Nồng độ trung bigravenh của khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave KT

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh đều cao hơn rotilde rệt Tỷ lệ

(+) vagrave nồng độ trung bigravenh của 4 khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh hoạt động

trung bigravenh đều cao hơn so với nhoacutem bệnh hoạt động nhẹ ổn định

Bảng 314 Tương quan giữa nồng độ khaacuteng thể với điểm SLEDAI vagrave

điểm SLICC thận

Khaacuteng thể SLEDAI SLICC thận

r p r p

KTKN 0306 lt00001 0143 lt0013

Khaacuteng dsDNA 056 lt00001 0216 00002

Khaacuteng C1q 0433 lt00001 0399 lt00001

Khaacuteng Nucl 0648 lt00001 0348 00082

18

Nồng độ KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA tương quan thuận

chặt chẽ nhất với điểm SLEDAI (p lt 0001) Nồng độ KT khaacuteng

C1q tương quan chặt chẽ nhất với điểm SLICC thận (r = 0399)

Bảng 315 Thay đổi nồng độ caacutec khaacuteng thể sau đợt cấp

Khaacuteng thể Tỷ lệ

giảm

Khaacutec biệt

trung bigravenh

Test t

gheacutep cặp p

KTKN (OD) 625 -034 -143 016

Khaacuteng dsDNA (IUml) 6458 -19949 -1793 008

Khaacuteng C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

Khaacuteng Nucl (IUml) 8333 -47509 -39 00003

Với 48 đợt cấp được theo dotildei nồng độ trung bigravenh của caacutec KT

khaacuteng C1q (p = 0037) vagrave khaacuteng Nucl (p = 00003) sau đợt cấp giảm

coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Bảng 316 Giaacute trị dự đoaacuten đợt cấp LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 9759 6714 3227 9459

Khaacuteng dsDNA 759 4537 36 823

Khaacuteng C1q 5783 8195 5647 8276

Khaacuteng Nucl 9759 2244 3375 9583

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng C1q 4819 878 6154 8072

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng Nucl 759 4927 3772 8347

Khaacuteng Nucl + Khaacuteng C1q 5783 8439 60 8317

Trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT KTKN vagrave khaacuteng Nucl đều coacute

độ nhạy cao vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh cao gt 94 nhưng độ đặc hiệu

khaacute thấp Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu cao nhất (8195)

đặc biệt khi dương tiacutenh đồng thời với KT khaacuteng dsDNA (878)

19

Chƣơng 4 BAgraveN LUẬN

41 Đặc điểm của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT

411 Phacircn bố về tuổi vagrave giới tỷ lệ bệnh nhacircn nữ chiếm tới

9297 với tuổi trung bigravenh lagrave 311 946 trong đoacute phần lớn thuộc

nhoacutem tuổi từ 16 ndash 45 (929) Kết quả nagravey hoagraven toagraven phugrave hợp với

những kết quả nghiecircn cứu trước đacircy cho thấy đặc điểm dịch tễ học

cơ bản của LBĐHT lagrave thường xảy ra ở phụ nữ trong độ tuổi sinh đẻ

412 Về tuổi khởi phaacutet bệnh phần lớn bệnh nhacircn LBĐHT

khởi phaacutet bệnh trong giai đoạn 15 - 45 tuổi (852) tuổi khởi phaacutet

bệnh trung bigravenh lagrave 2593 974 Khaacute nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học

trecircn qui mocirc lớn cho thấy LBĐHT thường coacute xu hướng khởi phaacutet ở

nữ giới trong nhoacutem tuổi từ 15 - 45 giai đoạn coacute sự hoạt động mạnh

mẽ nhất của caacutec tuyến nội tiết hướng sinh dục nữ

413 Tiền sử gia đigravenh coacute ngƣời mắc LBĐHT 469 số

bệnh nhacircn LBĐHT coacute iacutet nhất một người thacircn trong gia đigravenh cugraveng

mắc bệnh Nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học đatilde cho thấy tỷ lệ mắc

LBĐHT ở những người thacircn của người bệnh thường cao gấp khoảng

10 - 20 lần so với tỷ lệ mắc chung trong cộng đồng (4 - 12) cho

thấy vai trograve của yếu tố di truyền trong cơ chế bệnh sinh của LBĐHT

414 Caacutec biểu hiện của LBĐHT Caacutec biểu hiện bệnh gặp

nhiều nhất lagrave rụng toacutec - 531 tổn thương thận - 453 tổn thương

da lupus cấp baacuten cấp - 383 giảm bạch cầu - 382 vagrave giảm bổ

thể - 622 Những kết quả nagravey khaacute tương đồng với nghiecircn cứu của

nhiều taacutec giả trong vagrave ngoagravei nước tuy nhiecircn tỷ lệ viecircm thanh mạc

tổn thương thần kinh vagrave giảm tiểu cầu gặp khaacute thấp nguyecircn nhacircn coacute

thể do sự khaacutec nhau trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu vagrave sự

khaacutec biệt về đặc điểm lacircm sagraveng của LBĐHT giữa caacutec chủng tộc

20

42 Về tỷ lệ dƣơng tiacutenh vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự

khaacuteng thể

421 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN)

Về tỷ lệ dương tiacutenh 859 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute KTKN

dương tiacutenh ở lần khaacutem 1 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ

dương tiacutenh của KTKN ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute sự dao động khaacute lớn

trong khoảng 60 ndash 100 nguyecircn nhacircn coacute thể lagrave do sự khaacutec biệt

trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu thiết kế nghiecircn cứu kỹ

thuật xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể sự

đảo chiều huyết thanh của KTKN

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm

tiacutenh của KTKN lần lượt lagrave 8594 vagrave 7231 khaacute thấp so với caacutec

kết quả nghiecircn cứu trước đacircy nguyecircn nhacircn coacute thể do nhoacutem bệnh

nhacircn nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute tỷ lệ KTKN acircm tiacutenh khaacute cao

(141) sự khaacutec biệt về caacutech thức lựa chọn vagrave đặc điểm của nhoacutem

chứng Độ đặc hiệu của KTKN với LBĐHT lagrave khaacute thấp (4615)

khi sử dụng nhoacutem chứng mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec nguyecircn nhacircn lagrave

do KTKN coacute thể xuất hiện trong nhiều bệnh lyacute tự miễn khaacutec

422 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA

Về tỷ lệ dương tiacutenh bệnh nhacircn LBĐHT 641 số bệnh nhacircn

LBĐHT trong nghiecircn cứu coacute KT khaacuteng dsDNA dương tiacutenh nằm

trong dải biến thiecircn 37 - 85 của caacutec kết quả nghiecircn cứu trước đacircy

Caacutec yếu tố coacute ảnh hưởng rotilde rệt nhất đến tỷ lệ nagravey lagrave mức độ hoạt

động vagrave tổn thương nội tạng của caacutec đối tượng nghiecircn cứu kỹ thuật

xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ đặc hiệu của KT khaacuteng

dsDNA trong chẩn đoaacuten LBĐHT ở nghiecircn cứu nagravey lagrave 9333 khi sử

dụng nhoacutem chứng khỏe mạnh vagrave 9744 khi sử dụng nhoacutem chứng

21

mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec tức lagrave hoagraven toagraven phugrave hợp với caacutec kết quả

nghiecircn cứu trước đacircy (95 ndash 100) Traacutei với độ đặc hiệu độ nhạy của

KT khaacuteng dsDNA với LBĐHT thường khocircng cao vagrave coacute khoảng dao

động khaacute lớn (13 - 86) Nguyecircn nhacircn coacute thể do tiacutenh chất dao động

thường xuyecircn của khaacuteng thể nagravey trong quaacute trigravenh diễn biến bệnh vagrave

độ nhạy khaacutec nhau của caacutec kỹ thuật xeacutet nghiệm miễn dịch

423 Khaacuteng thể khaacuteng C1q

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở bệnh nhacircn LBĐHT dao động trong khoảng 15 ndash

63 theo caacutec nghiecircn cứu trước đacircy kết quả của chuacuteng tocirci lagrave 25 ở

lần khaacutem 1 Trong 3 nghiecircn cứu coacute cỡ mẫu lớn nhất của Julkunen H

(2012) Mok CC (2010) vagrave Orbai AM (2015) tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q đều tương đối thấp vagrave iacutet coacute sự khaacutec biệt

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT KT khaacuteng C1q coacute giaacute trị keacutem

nhất trong chẩn đoaacuten vagrave phacircn loại LBĐHT với diện tiacutech dưới đường

cong ROC lagrave 0676 vagrave độ nhạy chỉ lagrave 25 Tỷ lệ dương tiacutenh thấp vagrave

dao động thường xuyecircn ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute thể lagrave nguyecircn nhacircn

chiacutenh lagravem giảm độ nhạy của khaacuteng thể nagravey trong chẩn đoaacuten bệnh

424 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome (KT khaacuteng Nucl )

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT Tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT trong nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci

lagrave 813 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ nagravey coacute khoảng dao

động rộng từ 45 đến 100 nguyecircn nhacircn lagrave do sự khaacutec biệt của caacutec

đối tượng nghiecircn cứu về chủng tộc vagrave mức độ hoạt động bệnh

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT nhiều nghiecircn cứu đatilde cho thấy độ

đặc hiệu rất cao của KT khaacuteng Nucl với LBĐHT (90 ndash 100) tương

đồng với kết quả thu được của chuacuteng tocirci lagrave 987 Nguyecircn nhacircn coacute

thể do nucleosome lagrave tự khaacuteng nguyecircn coacute vai trograve quan trọng trong cơ

22

chế bệnh sinh của LBĐHT Độ nhạy của KT khaacuteng Nucl với

LBĐHT trong nghiecircn cứu nagravey lagrave 8125 cao hơn so với KT khaacuteng

dsDNA (6406)

43 Về liecircn quan giữa caacutec khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

431 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh (ge 12

OD) ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với sự xuất

hiện của giảm bổ thể vagrave caacutec tự khaacuteng thể khaacutec Mối liecircn quan giữa

khaacuteng thể nagravey với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của

LBĐHT trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy lagrave khocircng rotilde rệt do thiếu

những bằng chứng đaacuteng tin cậy

432 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với caacutec biểu

hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp hoặc mạn tiacutenh giảm bạch cầu

vagrave giảm bổ thể nhưng khocircng liecircn quan với tổn thương thận lupus

Nồng độ vagrave tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng dsDNA ở nhoacutem bệnh

nhacircn trong đợt cấp đều cao hơn so với nhoacutem ngoagravei đợt cấp tuy nhiecircn

khaacuteng thể nagravey coacute liecircn quan khocircng hằng định với cả hoạt tiacutenh chung

của LBĐHT vagrave tổn thương thận đặc biệt lagrave với đợt cấp của bệnh

433 Khaacuteng thể khaacuteng C1q khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh ở

bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan rotilde rệt với sự xuất hiện của tổn thương

thận vagrave giảm bổ thể Độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey trong dự baacuteo tổn

thương thận lupus cao hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại vagrave nồng độ của noacute

tương quan nghịch khaacute chặt với cả bổ thể C3 vagrave C4 (p lt 00001) Tỷ

lệ vagrave nồng độ trung bigravenh của KT khaacuteng C1q đều coacute xu hướng tăng

dần theo mức độ hoạt động của bệnh Tương quan giữa nồng độ KT

khaacuteng C1q với điểm SLICC thận vagrave độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey

trong dự baacuteo đợt cấp thận lupus cũng tốt hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại

23

434 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện tổn thương

da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận giảm BC vagrave giảm bổ thể Độ

nhạy trong dự baacuteo tổn thương thận lupus của KT khaacuteng Nucl cao

hơn so với caacutec khaacuteng thể cograven lại Tương quan với nồng độ bổ thể vagrave

điểm SLEDAI của khaacuteng thể nagravey cũng chặt chẽ hơn caacutec khaacuteng thể

cograven lại

KẾT LUẬN

Qua nghiecircn cứu 128 bệnh nhacircn LBĐHT với nhoacutem chứng gồm

39 người mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec vagrave 30 người khỏe mạnh chuacuteng

tocirci xin đưa ra một số kết luận sau

1 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten của một

số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể

Tỷ lệ dương tiacutenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 855 641 25 vagrave

813 tất cả đều cao hơn rotilde rệt so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở 587 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute

KT khaacuteng dsDNA acircm tiacutenh

Nồng độ trung bigravenh của caacutec KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng

C1q vagrave khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 3221 6034 (IUml) vagrave 945 1385

(IUml) tất cả đều cao hơn so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn coacute độ nhạy cao (8594) nhưng độ đặc

hiệu thấp (6667) với LBĐHT Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh 100 với LBĐHT nhưng độ nhạy

rất thấp (25)

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 14: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

11

39 Tuổi phaacutet bệnh trung bigravenh của caacutec bệnh nhacircn lagrave 2593 974

Tiền sử mắc LBĐHT của người thacircn 6128 bệnh nhacircn

LBĐHT coacute người thacircn trong gia đigravenh (cha mẹ anh chị em ruột)

cugraveng mắc LBĐHT chiếm tỷ lệ 469

12

Bảng 35 Một số biểu hiện lacircm sagraveng ở thời điểm đầu nghiecircn cứu

Tỷ lệ gặp cao nhất lagrave caacutec biểu hiện giảm bổ thể (622) rụng

toacutec (531) vagrave tổn thương thận (453) Iacutet gặp nhất lagrave caacutec biểu hiện

viecircm thanh mạc tan maacuteu (23) vagrave tổn thương thần kinh (31)

Bảng 36 Mức độ hoạt động của LBĐHT

TT Mức độ hoạt động Số lƣợng Tỷ lệ ()

1 Ổn định 15 117

2 Hoạt động nhẹ 57 445

3 Hoạt động trung bigravenh 37 289

4 Hoạt động mạnh 19 148

5 Đợt cấp LBĐHT 51 398

6 Điểm SLEDAI (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Điểm SLICC thận (X ) 312 42 (0 - 15)

TT Tiecircu chuẩn n Tỷ lệ ()

1 Caacutec tổn thương da lupus cấp baacuten cấp 49 383

2 Caacutec tổn thương da lupus mạn tiacutenh 21 164

3 Loeacutet niecircm mạc 9 7

4 Rụng toacutec 68 531

5 Biểu hiện khớp 45 352

6 Viecircm thanh mạc 3 23

7 Tổn thương thận 58 453

8 Tổn thương thần kinh 4 31

9 Thiếu maacuteu tan maacuteu 3 23

10 Giảm bạch cầu 42 328

11 Giảm tiểu cầu 5 39

12 Giảm bổ thể 79 622

13

Ở thời điểm khởi đầu nghiecircn cứu phần lớn bệnh nhacircn coacute bệnh

hoạt động ở mức độ nhẹ vagrave trung bigravenh (lần lượt chiếm 445 vagrave

289) Điểm SLEDAI dao động khaacute lớn trong khoảng 0 ndash 41

(trung bigravenh lagrave 661 62) Tỷ lệ bệnh nhacircn coacute đợt cấp LBĐHT lagrave

398 Điểm SLICC thận lupus trung bigravenh lagrave 312 42

32 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của

caacutec tự khaacuteng thể

Bảng 37 Tỷ lệ dương tiacutenh của tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Nhoacutem chứng

bệnh

(n = 39)

Nhoacutem chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN 859 5385 67 3333

Khaacuteng dsDNA 641 256 67 435

Khaacuteng Nucl 813 256 0 145

Khaacuteng C1q 25 0 0 0

Tỷ lệ dương tiacutenh của caacutec khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh nhacircn

LBĐHT theo thứ tự KTKN (859) gt khaacuteng Nucl (813) gt khaacuteng

dsDNA (641) gt khaacuteng C1q (25) tất cả đều cao hơn rotilde rệt so

với caacutec nhoacutem chứng với p lt 0005

Bảng 38 Nồng độ trung bigravenh của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Chứng

bệnh

(n = 39)

Chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Khaacuteng dsDNA (IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

Khaacuteng Nucl (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Khaacuteng C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

14

Nồng độ trung bigravenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 945 1385 (IUml) vagrave 3221 6034

(IUml) đều cao hơn caacutec nhoacutem chứng với p lt 00001

Bảng 39 Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 8594 6667 8271 7187

Khaacuteng dsDNA 6406 9565 9647 5863

Khaacuteng Nucl 8125 9855 9905 7391

Khaacuteng C1q 25 100 100 4182

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute độ đặc hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương

tiacutenh với LBĐHT tương đương KT khaacuteng dsDNA nhưng độ nhạy vagrave

giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh đều cao hơn Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh cao nhất trong 4 khaacuteng thể trong

khi đoacute KTKN coacute độ nhạy cao nhất nhưng độ đặc hiệu lagrave thấp nhất

Bảng 310 Giaacute trị chẩn đoaacuten của caacutec khaacuteng thể qua đường cong ROC

Khaacuteng thể (AUC) KTKN

(0716)

Khaacuteng

dsDNA

(089)

Khaacuteng

C1q

(0676)

Khaacuteng

Nucl

(0911)

KTKN (0716) p=00001 p=044 plt0001

Khaacuteng dsDNA (089) p=00001 plt0001 p=044

Khaacuteng C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

Khaacuteng Nucl (0911) plt0001 p=044 plt0001

Caacutec khaacuteng thể khaacuteng Nucl khaacuteng dsDNA KTKN vagrave khaacuteng

C1q lần lượt coacute giaacute trị rất tốt tốt khaacute tốt vagrave iacutet giaacute trị trong chẩn đoaacuten

15

LBĐHT Diện tiacutech dưới đường cong ROC (AUC) của caacutec KT khaacuteng

Nucl vagrave khaacuteng dsDNA đều cao hơn coacute yacute nghĩa thống kecirc so với

KTKN vagrave khaacuteng C1q

33 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Bảng 311 Liecircn quan giữa KTKN với caacutec biểu hiện của LBĐHT

Nhoacutem triệu

chứng

KTKN KT khaacuteng

dsDNA

KT khaacuteng

C1q

KT khaacuteng

Nucl

OR p OR p OR p OR p

Tổn thương da

lupus cấp baacuten

cấp

311 007 258 00056 082 055 238 008

Tổn thương da

lupus mạn tiacutenh 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Loeacutet niecircm mạc 057 04 055 026 121 074 291 031

Rụng toacutec 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Biểu hiện khớp 166 025 118 055 142 021 179 017

Viecircm thanh mạc 106 097 129 083 12 088 143 081

Tổn thương

thận 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Tổn thương

thần kinh 088 091 025 01 039 039 025 008

Tan maacuteu 044 048 064 066 026 037 168 066

Giảm BC 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Giảm TC 149 071 3 016 446 002 204 05

Giảm bổ thể 1006 lt00001 327 lt00001 372 lt00001 1611 lt0001

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute

16

liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn

quan với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp tổn thương

da lupus mạn tiacutenh giảm BC vagrave giảm bổ thể Khaacuteng thể khaacuteng C1q

dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng

toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan

với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Bảng 312 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể ở bệnh nhacircn LBĐHT

Khaacuteng thể Tỷ lệ (+) OR p

KTKN (+)

Khaacuteng dsDNA 6932 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3227 393 0012

Khaacuteng Nucl 8924 1089 lt00001

Khaacuteng dsDNA

(+)

KTKN 9943 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3714 274 00005

Khaacuteng Nucl 9543 1144 lt00001

Khaacuteng C1q (+)

Khaacuteng dsDNA 7647 274 00005

KTKN 9529 393 0012

Khaacuteng Nucl 9412 43 0003

Khaacuteng Nucl (+)

KTKN 9333 1089 lt00001

Khaacuteng C1q 3333 43 0003

Khaacuteng dsDNA 6958 1144 lt00001

Sự dương tiacutenh của caacutec tự khaacuteng thể đều coacute mối liecircn quan thuận

coacute yacute nghĩa thống kecirc với nhau (p lt 005) trong đoacute mối liecircn quan rotilde

rệt nhất lagrave giữa 3 khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng Nucl vagrave KTKN

17

Bảng 313 Liecircn quan giữa tự khaacuteng thể với độ hoạt động của bệnh

Khaacuteng thể

Mức độ hoạt động của LBĐHT p

Mạnh

(n = 36) (I)

Trung bigravenh

(n = 67)(II)

Nhẹổn

(n = 185)(III) I vagrave II II vagrave III

KTKN 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Khaacuteng

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Khaacuteng

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

Khaacuteng

Nucl

100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt0000

1

So với nhoacutem bệnh hoạt động trung bigravenh tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh cao hơn rotilde rệt với p =

00025 Nồng độ trung bigravenh của khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave KT

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh đều cao hơn rotilde rệt Tỷ lệ

(+) vagrave nồng độ trung bigravenh của 4 khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh hoạt động

trung bigravenh đều cao hơn so với nhoacutem bệnh hoạt động nhẹ ổn định

Bảng 314 Tương quan giữa nồng độ khaacuteng thể với điểm SLEDAI vagrave

điểm SLICC thận

Khaacuteng thể SLEDAI SLICC thận

r p r p

KTKN 0306 lt00001 0143 lt0013

Khaacuteng dsDNA 056 lt00001 0216 00002

Khaacuteng C1q 0433 lt00001 0399 lt00001

Khaacuteng Nucl 0648 lt00001 0348 00082

18

Nồng độ KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA tương quan thuận

chặt chẽ nhất với điểm SLEDAI (p lt 0001) Nồng độ KT khaacuteng

C1q tương quan chặt chẽ nhất với điểm SLICC thận (r = 0399)

Bảng 315 Thay đổi nồng độ caacutec khaacuteng thể sau đợt cấp

Khaacuteng thể Tỷ lệ

giảm

Khaacutec biệt

trung bigravenh

Test t

gheacutep cặp p

KTKN (OD) 625 -034 -143 016

Khaacuteng dsDNA (IUml) 6458 -19949 -1793 008

Khaacuteng C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

Khaacuteng Nucl (IUml) 8333 -47509 -39 00003

Với 48 đợt cấp được theo dotildei nồng độ trung bigravenh của caacutec KT

khaacuteng C1q (p = 0037) vagrave khaacuteng Nucl (p = 00003) sau đợt cấp giảm

coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Bảng 316 Giaacute trị dự đoaacuten đợt cấp LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 9759 6714 3227 9459

Khaacuteng dsDNA 759 4537 36 823

Khaacuteng C1q 5783 8195 5647 8276

Khaacuteng Nucl 9759 2244 3375 9583

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng C1q 4819 878 6154 8072

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng Nucl 759 4927 3772 8347

Khaacuteng Nucl + Khaacuteng C1q 5783 8439 60 8317

Trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT KTKN vagrave khaacuteng Nucl đều coacute

độ nhạy cao vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh cao gt 94 nhưng độ đặc hiệu

khaacute thấp Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu cao nhất (8195)

đặc biệt khi dương tiacutenh đồng thời với KT khaacuteng dsDNA (878)

19

Chƣơng 4 BAgraveN LUẬN

41 Đặc điểm của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT

411 Phacircn bố về tuổi vagrave giới tỷ lệ bệnh nhacircn nữ chiếm tới

9297 với tuổi trung bigravenh lagrave 311 946 trong đoacute phần lớn thuộc

nhoacutem tuổi từ 16 ndash 45 (929) Kết quả nagravey hoagraven toagraven phugrave hợp với

những kết quả nghiecircn cứu trước đacircy cho thấy đặc điểm dịch tễ học

cơ bản của LBĐHT lagrave thường xảy ra ở phụ nữ trong độ tuổi sinh đẻ

412 Về tuổi khởi phaacutet bệnh phần lớn bệnh nhacircn LBĐHT

khởi phaacutet bệnh trong giai đoạn 15 - 45 tuổi (852) tuổi khởi phaacutet

bệnh trung bigravenh lagrave 2593 974 Khaacute nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học

trecircn qui mocirc lớn cho thấy LBĐHT thường coacute xu hướng khởi phaacutet ở

nữ giới trong nhoacutem tuổi từ 15 - 45 giai đoạn coacute sự hoạt động mạnh

mẽ nhất của caacutec tuyến nội tiết hướng sinh dục nữ

413 Tiền sử gia đigravenh coacute ngƣời mắc LBĐHT 469 số

bệnh nhacircn LBĐHT coacute iacutet nhất một người thacircn trong gia đigravenh cugraveng

mắc bệnh Nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học đatilde cho thấy tỷ lệ mắc

LBĐHT ở những người thacircn của người bệnh thường cao gấp khoảng

10 - 20 lần so với tỷ lệ mắc chung trong cộng đồng (4 - 12) cho

thấy vai trograve của yếu tố di truyền trong cơ chế bệnh sinh của LBĐHT

414 Caacutec biểu hiện của LBĐHT Caacutec biểu hiện bệnh gặp

nhiều nhất lagrave rụng toacutec - 531 tổn thương thận - 453 tổn thương

da lupus cấp baacuten cấp - 383 giảm bạch cầu - 382 vagrave giảm bổ

thể - 622 Những kết quả nagravey khaacute tương đồng với nghiecircn cứu của

nhiều taacutec giả trong vagrave ngoagravei nước tuy nhiecircn tỷ lệ viecircm thanh mạc

tổn thương thần kinh vagrave giảm tiểu cầu gặp khaacute thấp nguyecircn nhacircn coacute

thể do sự khaacutec nhau trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu vagrave sự

khaacutec biệt về đặc điểm lacircm sagraveng của LBĐHT giữa caacutec chủng tộc

20

42 Về tỷ lệ dƣơng tiacutenh vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự

khaacuteng thể

421 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN)

Về tỷ lệ dương tiacutenh 859 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute KTKN

dương tiacutenh ở lần khaacutem 1 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ

dương tiacutenh của KTKN ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute sự dao động khaacute lớn

trong khoảng 60 ndash 100 nguyecircn nhacircn coacute thể lagrave do sự khaacutec biệt

trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu thiết kế nghiecircn cứu kỹ

thuật xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể sự

đảo chiều huyết thanh của KTKN

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm

tiacutenh của KTKN lần lượt lagrave 8594 vagrave 7231 khaacute thấp so với caacutec

kết quả nghiecircn cứu trước đacircy nguyecircn nhacircn coacute thể do nhoacutem bệnh

nhacircn nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute tỷ lệ KTKN acircm tiacutenh khaacute cao

(141) sự khaacutec biệt về caacutech thức lựa chọn vagrave đặc điểm của nhoacutem

chứng Độ đặc hiệu của KTKN với LBĐHT lagrave khaacute thấp (4615)

khi sử dụng nhoacutem chứng mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec nguyecircn nhacircn lagrave

do KTKN coacute thể xuất hiện trong nhiều bệnh lyacute tự miễn khaacutec

422 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA

Về tỷ lệ dương tiacutenh bệnh nhacircn LBĐHT 641 số bệnh nhacircn

LBĐHT trong nghiecircn cứu coacute KT khaacuteng dsDNA dương tiacutenh nằm

trong dải biến thiecircn 37 - 85 của caacutec kết quả nghiecircn cứu trước đacircy

Caacutec yếu tố coacute ảnh hưởng rotilde rệt nhất đến tỷ lệ nagravey lagrave mức độ hoạt

động vagrave tổn thương nội tạng của caacutec đối tượng nghiecircn cứu kỹ thuật

xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ đặc hiệu của KT khaacuteng

dsDNA trong chẩn đoaacuten LBĐHT ở nghiecircn cứu nagravey lagrave 9333 khi sử

dụng nhoacutem chứng khỏe mạnh vagrave 9744 khi sử dụng nhoacutem chứng

21

mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec tức lagrave hoagraven toagraven phugrave hợp với caacutec kết quả

nghiecircn cứu trước đacircy (95 ndash 100) Traacutei với độ đặc hiệu độ nhạy của

KT khaacuteng dsDNA với LBĐHT thường khocircng cao vagrave coacute khoảng dao

động khaacute lớn (13 - 86) Nguyecircn nhacircn coacute thể do tiacutenh chất dao động

thường xuyecircn của khaacuteng thể nagravey trong quaacute trigravenh diễn biến bệnh vagrave

độ nhạy khaacutec nhau của caacutec kỹ thuật xeacutet nghiệm miễn dịch

423 Khaacuteng thể khaacuteng C1q

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở bệnh nhacircn LBĐHT dao động trong khoảng 15 ndash

63 theo caacutec nghiecircn cứu trước đacircy kết quả của chuacuteng tocirci lagrave 25 ở

lần khaacutem 1 Trong 3 nghiecircn cứu coacute cỡ mẫu lớn nhất của Julkunen H

(2012) Mok CC (2010) vagrave Orbai AM (2015) tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q đều tương đối thấp vagrave iacutet coacute sự khaacutec biệt

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT KT khaacuteng C1q coacute giaacute trị keacutem

nhất trong chẩn đoaacuten vagrave phacircn loại LBĐHT với diện tiacutech dưới đường

cong ROC lagrave 0676 vagrave độ nhạy chỉ lagrave 25 Tỷ lệ dương tiacutenh thấp vagrave

dao động thường xuyecircn ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute thể lagrave nguyecircn nhacircn

chiacutenh lagravem giảm độ nhạy của khaacuteng thể nagravey trong chẩn đoaacuten bệnh

424 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome (KT khaacuteng Nucl )

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT Tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT trong nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci

lagrave 813 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ nagravey coacute khoảng dao

động rộng từ 45 đến 100 nguyecircn nhacircn lagrave do sự khaacutec biệt của caacutec

đối tượng nghiecircn cứu về chủng tộc vagrave mức độ hoạt động bệnh

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT nhiều nghiecircn cứu đatilde cho thấy độ

đặc hiệu rất cao của KT khaacuteng Nucl với LBĐHT (90 ndash 100) tương

đồng với kết quả thu được của chuacuteng tocirci lagrave 987 Nguyecircn nhacircn coacute

thể do nucleosome lagrave tự khaacuteng nguyecircn coacute vai trograve quan trọng trong cơ

22

chế bệnh sinh của LBĐHT Độ nhạy của KT khaacuteng Nucl với

LBĐHT trong nghiecircn cứu nagravey lagrave 8125 cao hơn so với KT khaacuteng

dsDNA (6406)

43 Về liecircn quan giữa caacutec khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

431 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh (ge 12

OD) ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với sự xuất

hiện của giảm bổ thể vagrave caacutec tự khaacuteng thể khaacutec Mối liecircn quan giữa

khaacuteng thể nagravey với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của

LBĐHT trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy lagrave khocircng rotilde rệt do thiếu

những bằng chứng đaacuteng tin cậy

432 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với caacutec biểu

hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp hoặc mạn tiacutenh giảm bạch cầu

vagrave giảm bổ thể nhưng khocircng liecircn quan với tổn thương thận lupus

Nồng độ vagrave tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng dsDNA ở nhoacutem bệnh

nhacircn trong đợt cấp đều cao hơn so với nhoacutem ngoagravei đợt cấp tuy nhiecircn

khaacuteng thể nagravey coacute liecircn quan khocircng hằng định với cả hoạt tiacutenh chung

của LBĐHT vagrave tổn thương thận đặc biệt lagrave với đợt cấp của bệnh

433 Khaacuteng thể khaacuteng C1q khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh ở

bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan rotilde rệt với sự xuất hiện của tổn thương

thận vagrave giảm bổ thể Độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey trong dự baacuteo tổn

thương thận lupus cao hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại vagrave nồng độ của noacute

tương quan nghịch khaacute chặt với cả bổ thể C3 vagrave C4 (p lt 00001) Tỷ

lệ vagrave nồng độ trung bigravenh của KT khaacuteng C1q đều coacute xu hướng tăng

dần theo mức độ hoạt động của bệnh Tương quan giữa nồng độ KT

khaacuteng C1q với điểm SLICC thận vagrave độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey

trong dự baacuteo đợt cấp thận lupus cũng tốt hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại

23

434 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện tổn thương

da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận giảm BC vagrave giảm bổ thể Độ

nhạy trong dự baacuteo tổn thương thận lupus của KT khaacuteng Nucl cao

hơn so với caacutec khaacuteng thể cograven lại Tương quan với nồng độ bổ thể vagrave

điểm SLEDAI của khaacuteng thể nagravey cũng chặt chẽ hơn caacutec khaacuteng thể

cograven lại

KẾT LUẬN

Qua nghiecircn cứu 128 bệnh nhacircn LBĐHT với nhoacutem chứng gồm

39 người mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec vagrave 30 người khỏe mạnh chuacuteng

tocirci xin đưa ra một số kết luận sau

1 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten của một

số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể

Tỷ lệ dương tiacutenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 855 641 25 vagrave

813 tất cả đều cao hơn rotilde rệt so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở 587 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute

KT khaacuteng dsDNA acircm tiacutenh

Nồng độ trung bigravenh của caacutec KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng

C1q vagrave khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 3221 6034 (IUml) vagrave 945 1385

(IUml) tất cả đều cao hơn so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn coacute độ nhạy cao (8594) nhưng độ đặc

hiệu thấp (6667) với LBĐHT Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh 100 với LBĐHT nhưng độ nhạy

rất thấp (25)

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 15: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

12

Bảng 35 Một số biểu hiện lacircm sagraveng ở thời điểm đầu nghiecircn cứu

Tỷ lệ gặp cao nhất lagrave caacutec biểu hiện giảm bổ thể (622) rụng

toacutec (531) vagrave tổn thương thận (453) Iacutet gặp nhất lagrave caacutec biểu hiện

viecircm thanh mạc tan maacuteu (23) vagrave tổn thương thần kinh (31)

Bảng 36 Mức độ hoạt động của LBĐHT

TT Mức độ hoạt động Số lƣợng Tỷ lệ ()

1 Ổn định 15 117

2 Hoạt động nhẹ 57 445

3 Hoạt động trung bigravenh 37 289

4 Hoạt động mạnh 19 148

5 Đợt cấp LBĐHT 51 398

6 Điểm SLEDAI (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Điểm SLICC thận (X ) 312 42 (0 - 15)

TT Tiecircu chuẩn n Tỷ lệ ()

1 Caacutec tổn thương da lupus cấp baacuten cấp 49 383

2 Caacutec tổn thương da lupus mạn tiacutenh 21 164

3 Loeacutet niecircm mạc 9 7

4 Rụng toacutec 68 531

5 Biểu hiện khớp 45 352

6 Viecircm thanh mạc 3 23

7 Tổn thương thận 58 453

8 Tổn thương thần kinh 4 31

9 Thiếu maacuteu tan maacuteu 3 23

10 Giảm bạch cầu 42 328

11 Giảm tiểu cầu 5 39

12 Giảm bổ thể 79 622

13

Ở thời điểm khởi đầu nghiecircn cứu phần lớn bệnh nhacircn coacute bệnh

hoạt động ở mức độ nhẹ vagrave trung bigravenh (lần lượt chiếm 445 vagrave

289) Điểm SLEDAI dao động khaacute lớn trong khoảng 0 ndash 41

(trung bigravenh lagrave 661 62) Tỷ lệ bệnh nhacircn coacute đợt cấp LBĐHT lagrave

398 Điểm SLICC thận lupus trung bigravenh lagrave 312 42

32 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của

caacutec tự khaacuteng thể

Bảng 37 Tỷ lệ dương tiacutenh của tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Nhoacutem chứng

bệnh

(n = 39)

Nhoacutem chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN 859 5385 67 3333

Khaacuteng dsDNA 641 256 67 435

Khaacuteng Nucl 813 256 0 145

Khaacuteng C1q 25 0 0 0

Tỷ lệ dương tiacutenh của caacutec khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh nhacircn

LBĐHT theo thứ tự KTKN (859) gt khaacuteng Nucl (813) gt khaacuteng

dsDNA (641) gt khaacuteng C1q (25) tất cả đều cao hơn rotilde rệt so

với caacutec nhoacutem chứng với p lt 0005

Bảng 38 Nồng độ trung bigravenh của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Chứng

bệnh

(n = 39)

Chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Khaacuteng dsDNA (IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

Khaacuteng Nucl (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Khaacuteng C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

14

Nồng độ trung bigravenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 945 1385 (IUml) vagrave 3221 6034

(IUml) đều cao hơn caacutec nhoacutem chứng với p lt 00001

Bảng 39 Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 8594 6667 8271 7187

Khaacuteng dsDNA 6406 9565 9647 5863

Khaacuteng Nucl 8125 9855 9905 7391

Khaacuteng C1q 25 100 100 4182

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute độ đặc hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương

tiacutenh với LBĐHT tương đương KT khaacuteng dsDNA nhưng độ nhạy vagrave

giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh đều cao hơn Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh cao nhất trong 4 khaacuteng thể trong

khi đoacute KTKN coacute độ nhạy cao nhất nhưng độ đặc hiệu lagrave thấp nhất

Bảng 310 Giaacute trị chẩn đoaacuten của caacutec khaacuteng thể qua đường cong ROC

Khaacuteng thể (AUC) KTKN

(0716)

Khaacuteng

dsDNA

(089)

Khaacuteng

C1q

(0676)

Khaacuteng

Nucl

(0911)

KTKN (0716) p=00001 p=044 plt0001

Khaacuteng dsDNA (089) p=00001 plt0001 p=044

Khaacuteng C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

Khaacuteng Nucl (0911) plt0001 p=044 plt0001

Caacutec khaacuteng thể khaacuteng Nucl khaacuteng dsDNA KTKN vagrave khaacuteng

C1q lần lượt coacute giaacute trị rất tốt tốt khaacute tốt vagrave iacutet giaacute trị trong chẩn đoaacuten

15

LBĐHT Diện tiacutech dưới đường cong ROC (AUC) của caacutec KT khaacuteng

Nucl vagrave khaacuteng dsDNA đều cao hơn coacute yacute nghĩa thống kecirc so với

KTKN vagrave khaacuteng C1q

33 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Bảng 311 Liecircn quan giữa KTKN với caacutec biểu hiện của LBĐHT

Nhoacutem triệu

chứng

KTKN KT khaacuteng

dsDNA

KT khaacuteng

C1q

KT khaacuteng

Nucl

OR p OR p OR p OR p

Tổn thương da

lupus cấp baacuten

cấp

311 007 258 00056 082 055 238 008

Tổn thương da

lupus mạn tiacutenh 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Loeacutet niecircm mạc 057 04 055 026 121 074 291 031

Rụng toacutec 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Biểu hiện khớp 166 025 118 055 142 021 179 017

Viecircm thanh mạc 106 097 129 083 12 088 143 081

Tổn thương

thận 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Tổn thương

thần kinh 088 091 025 01 039 039 025 008

Tan maacuteu 044 048 064 066 026 037 168 066

Giảm BC 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Giảm TC 149 071 3 016 446 002 204 05

Giảm bổ thể 1006 lt00001 327 lt00001 372 lt00001 1611 lt0001

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute

16

liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn

quan với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp tổn thương

da lupus mạn tiacutenh giảm BC vagrave giảm bổ thể Khaacuteng thể khaacuteng C1q

dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng

toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan

với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Bảng 312 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể ở bệnh nhacircn LBĐHT

Khaacuteng thể Tỷ lệ (+) OR p

KTKN (+)

Khaacuteng dsDNA 6932 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3227 393 0012

Khaacuteng Nucl 8924 1089 lt00001

Khaacuteng dsDNA

(+)

KTKN 9943 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3714 274 00005

Khaacuteng Nucl 9543 1144 lt00001

Khaacuteng C1q (+)

Khaacuteng dsDNA 7647 274 00005

KTKN 9529 393 0012

Khaacuteng Nucl 9412 43 0003

Khaacuteng Nucl (+)

KTKN 9333 1089 lt00001

Khaacuteng C1q 3333 43 0003

Khaacuteng dsDNA 6958 1144 lt00001

Sự dương tiacutenh của caacutec tự khaacuteng thể đều coacute mối liecircn quan thuận

coacute yacute nghĩa thống kecirc với nhau (p lt 005) trong đoacute mối liecircn quan rotilde

rệt nhất lagrave giữa 3 khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng Nucl vagrave KTKN

17

Bảng 313 Liecircn quan giữa tự khaacuteng thể với độ hoạt động của bệnh

Khaacuteng thể

Mức độ hoạt động của LBĐHT p

Mạnh

(n = 36) (I)

Trung bigravenh

(n = 67)(II)

Nhẹổn

(n = 185)(III) I vagrave II II vagrave III

KTKN 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Khaacuteng

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Khaacuteng

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

Khaacuteng

Nucl

100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt0000

1

So với nhoacutem bệnh hoạt động trung bigravenh tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh cao hơn rotilde rệt với p =

00025 Nồng độ trung bigravenh của khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave KT

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh đều cao hơn rotilde rệt Tỷ lệ

(+) vagrave nồng độ trung bigravenh của 4 khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh hoạt động

trung bigravenh đều cao hơn so với nhoacutem bệnh hoạt động nhẹ ổn định

Bảng 314 Tương quan giữa nồng độ khaacuteng thể với điểm SLEDAI vagrave

điểm SLICC thận

Khaacuteng thể SLEDAI SLICC thận

r p r p

KTKN 0306 lt00001 0143 lt0013

Khaacuteng dsDNA 056 lt00001 0216 00002

Khaacuteng C1q 0433 lt00001 0399 lt00001

Khaacuteng Nucl 0648 lt00001 0348 00082

18

Nồng độ KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA tương quan thuận

chặt chẽ nhất với điểm SLEDAI (p lt 0001) Nồng độ KT khaacuteng

C1q tương quan chặt chẽ nhất với điểm SLICC thận (r = 0399)

Bảng 315 Thay đổi nồng độ caacutec khaacuteng thể sau đợt cấp

Khaacuteng thể Tỷ lệ

giảm

Khaacutec biệt

trung bigravenh

Test t

gheacutep cặp p

KTKN (OD) 625 -034 -143 016

Khaacuteng dsDNA (IUml) 6458 -19949 -1793 008

Khaacuteng C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

Khaacuteng Nucl (IUml) 8333 -47509 -39 00003

Với 48 đợt cấp được theo dotildei nồng độ trung bigravenh của caacutec KT

khaacuteng C1q (p = 0037) vagrave khaacuteng Nucl (p = 00003) sau đợt cấp giảm

coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Bảng 316 Giaacute trị dự đoaacuten đợt cấp LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 9759 6714 3227 9459

Khaacuteng dsDNA 759 4537 36 823

Khaacuteng C1q 5783 8195 5647 8276

Khaacuteng Nucl 9759 2244 3375 9583

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng C1q 4819 878 6154 8072

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng Nucl 759 4927 3772 8347

Khaacuteng Nucl + Khaacuteng C1q 5783 8439 60 8317

Trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT KTKN vagrave khaacuteng Nucl đều coacute

độ nhạy cao vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh cao gt 94 nhưng độ đặc hiệu

khaacute thấp Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu cao nhất (8195)

đặc biệt khi dương tiacutenh đồng thời với KT khaacuteng dsDNA (878)

19

Chƣơng 4 BAgraveN LUẬN

41 Đặc điểm của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT

411 Phacircn bố về tuổi vagrave giới tỷ lệ bệnh nhacircn nữ chiếm tới

9297 với tuổi trung bigravenh lagrave 311 946 trong đoacute phần lớn thuộc

nhoacutem tuổi từ 16 ndash 45 (929) Kết quả nagravey hoagraven toagraven phugrave hợp với

những kết quả nghiecircn cứu trước đacircy cho thấy đặc điểm dịch tễ học

cơ bản của LBĐHT lagrave thường xảy ra ở phụ nữ trong độ tuổi sinh đẻ

412 Về tuổi khởi phaacutet bệnh phần lớn bệnh nhacircn LBĐHT

khởi phaacutet bệnh trong giai đoạn 15 - 45 tuổi (852) tuổi khởi phaacutet

bệnh trung bigravenh lagrave 2593 974 Khaacute nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học

trecircn qui mocirc lớn cho thấy LBĐHT thường coacute xu hướng khởi phaacutet ở

nữ giới trong nhoacutem tuổi từ 15 - 45 giai đoạn coacute sự hoạt động mạnh

mẽ nhất của caacutec tuyến nội tiết hướng sinh dục nữ

413 Tiền sử gia đigravenh coacute ngƣời mắc LBĐHT 469 số

bệnh nhacircn LBĐHT coacute iacutet nhất một người thacircn trong gia đigravenh cugraveng

mắc bệnh Nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học đatilde cho thấy tỷ lệ mắc

LBĐHT ở những người thacircn của người bệnh thường cao gấp khoảng

10 - 20 lần so với tỷ lệ mắc chung trong cộng đồng (4 - 12) cho

thấy vai trograve của yếu tố di truyền trong cơ chế bệnh sinh của LBĐHT

414 Caacutec biểu hiện của LBĐHT Caacutec biểu hiện bệnh gặp

nhiều nhất lagrave rụng toacutec - 531 tổn thương thận - 453 tổn thương

da lupus cấp baacuten cấp - 383 giảm bạch cầu - 382 vagrave giảm bổ

thể - 622 Những kết quả nagravey khaacute tương đồng với nghiecircn cứu của

nhiều taacutec giả trong vagrave ngoagravei nước tuy nhiecircn tỷ lệ viecircm thanh mạc

tổn thương thần kinh vagrave giảm tiểu cầu gặp khaacute thấp nguyecircn nhacircn coacute

thể do sự khaacutec nhau trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu vagrave sự

khaacutec biệt về đặc điểm lacircm sagraveng của LBĐHT giữa caacutec chủng tộc

20

42 Về tỷ lệ dƣơng tiacutenh vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự

khaacuteng thể

421 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN)

Về tỷ lệ dương tiacutenh 859 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute KTKN

dương tiacutenh ở lần khaacutem 1 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ

dương tiacutenh của KTKN ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute sự dao động khaacute lớn

trong khoảng 60 ndash 100 nguyecircn nhacircn coacute thể lagrave do sự khaacutec biệt

trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu thiết kế nghiecircn cứu kỹ

thuật xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể sự

đảo chiều huyết thanh của KTKN

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm

tiacutenh của KTKN lần lượt lagrave 8594 vagrave 7231 khaacute thấp so với caacutec

kết quả nghiecircn cứu trước đacircy nguyecircn nhacircn coacute thể do nhoacutem bệnh

nhacircn nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute tỷ lệ KTKN acircm tiacutenh khaacute cao

(141) sự khaacutec biệt về caacutech thức lựa chọn vagrave đặc điểm của nhoacutem

chứng Độ đặc hiệu của KTKN với LBĐHT lagrave khaacute thấp (4615)

khi sử dụng nhoacutem chứng mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec nguyecircn nhacircn lagrave

do KTKN coacute thể xuất hiện trong nhiều bệnh lyacute tự miễn khaacutec

422 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA

Về tỷ lệ dương tiacutenh bệnh nhacircn LBĐHT 641 số bệnh nhacircn

LBĐHT trong nghiecircn cứu coacute KT khaacuteng dsDNA dương tiacutenh nằm

trong dải biến thiecircn 37 - 85 của caacutec kết quả nghiecircn cứu trước đacircy

Caacutec yếu tố coacute ảnh hưởng rotilde rệt nhất đến tỷ lệ nagravey lagrave mức độ hoạt

động vagrave tổn thương nội tạng của caacutec đối tượng nghiecircn cứu kỹ thuật

xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ đặc hiệu của KT khaacuteng

dsDNA trong chẩn đoaacuten LBĐHT ở nghiecircn cứu nagravey lagrave 9333 khi sử

dụng nhoacutem chứng khỏe mạnh vagrave 9744 khi sử dụng nhoacutem chứng

21

mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec tức lagrave hoagraven toagraven phugrave hợp với caacutec kết quả

nghiecircn cứu trước đacircy (95 ndash 100) Traacutei với độ đặc hiệu độ nhạy của

KT khaacuteng dsDNA với LBĐHT thường khocircng cao vagrave coacute khoảng dao

động khaacute lớn (13 - 86) Nguyecircn nhacircn coacute thể do tiacutenh chất dao động

thường xuyecircn của khaacuteng thể nagravey trong quaacute trigravenh diễn biến bệnh vagrave

độ nhạy khaacutec nhau của caacutec kỹ thuật xeacutet nghiệm miễn dịch

423 Khaacuteng thể khaacuteng C1q

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở bệnh nhacircn LBĐHT dao động trong khoảng 15 ndash

63 theo caacutec nghiecircn cứu trước đacircy kết quả của chuacuteng tocirci lagrave 25 ở

lần khaacutem 1 Trong 3 nghiecircn cứu coacute cỡ mẫu lớn nhất của Julkunen H

(2012) Mok CC (2010) vagrave Orbai AM (2015) tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q đều tương đối thấp vagrave iacutet coacute sự khaacutec biệt

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT KT khaacuteng C1q coacute giaacute trị keacutem

nhất trong chẩn đoaacuten vagrave phacircn loại LBĐHT với diện tiacutech dưới đường

cong ROC lagrave 0676 vagrave độ nhạy chỉ lagrave 25 Tỷ lệ dương tiacutenh thấp vagrave

dao động thường xuyecircn ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute thể lagrave nguyecircn nhacircn

chiacutenh lagravem giảm độ nhạy của khaacuteng thể nagravey trong chẩn đoaacuten bệnh

424 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome (KT khaacuteng Nucl )

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT Tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT trong nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci

lagrave 813 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ nagravey coacute khoảng dao

động rộng từ 45 đến 100 nguyecircn nhacircn lagrave do sự khaacutec biệt của caacutec

đối tượng nghiecircn cứu về chủng tộc vagrave mức độ hoạt động bệnh

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT nhiều nghiecircn cứu đatilde cho thấy độ

đặc hiệu rất cao của KT khaacuteng Nucl với LBĐHT (90 ndash 100) tương

đồng với kết quả thu được của chuacuteng tocirci lagrave 987 Nguyecircn nhacircn coacute

thể do nucleosome lagrave tự khaacuteng nguyecircn coacute vai trograve quan trọng trong cơ

22

chế bệnh sinh của LBĐHT Độ nhạy của KT khaacuteng Nucl với

LBĐHT trong nghiecircn cứu nagravey lagrave 8125 cao hơn so với KT khaacuteng

dsDNA (6406)

43 Về liecircn quan giữa caacutec khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

431 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh (ge 12

OD) ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với sự xuất

hiện của giảm bổ thể vagrave caacutec tự khaacuteng thể khaacutec Mối liecircn quan giữa

khaacuteng thể nagravey với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của

LBĐHT trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy lagrave khocircng rotilde rệt do thiếu

những bằng chứng đaacuteng tin cậy

432 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với caacutec biểu

hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp hoặc mạn tiacutenh giảm bạch cầu

vagrave giảm bổ thể nhưng khocircng liecircn quan với tổn thương thận lupus

Nồng độ vagrave tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng dsDNA ở nhoacutem bệnh

nhacircn trong đợt cấp đều cao hơn so với nhoacutem ngoagravei đợt cấp tuy nhiecircn

khaacuteng thể nagravey coacute liecircn quan khocircng hằng định với cả hoạt tiacutenh chung

của LBĐHT vagrave tổn thương thận đặc biệt lagrave với đợt cấp của bệnh

433 Khaacuteng thể khaacuteng C1q khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh ở

bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan rotilde rệt với sự xuất hiện của tổn thương

thận vagrave giảm bổ thể Độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey trong dự baacuteo tổn

thương thận lupus cao hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại vagrave nồng độ của noacute

tương quan nghịch khaacute chặt với cả bổ thể C3 vagrave C4 (p lt 00001) Tỷ

lệ vagrave nồng độ trung bigravenh của KT khaacuteng C1q đều coacute xu hướng tăng

dần theo mức độ hoạt động của bệnh Tương quan giữa nồng độ KT

khaacuteng C1q với điểm SLICC thận vagrave độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey

trong dự baacuteo đợt cấp thận lupus cũng tốt hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại

23

434 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện tổn thương

da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận giảm BC vagrave giảm bổ thể Độ

nhạy trong dự baacuteo tổn thương thận lupus của KT khaacuteng Nucl cao

hơn so với caacutec khaacuteng thể cograven lại Tương quan với nồng độ bổ thể vagrave

điểm SLEDAI của khaacuteng thể nagravey cũng chặt chẽ hơn caacutec khaacuteng thể

cograven lại

KẾT LUẬN

Qua nghiecircn cứu 128 bệnh nhacircn LBĐHT với nhoacutem chứng gồm

39 người mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec vagrave 30 người khỏe mạnh chuacuteng

tocirci xin đưa ra một số kết luận sau

1 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten của một

số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể

Tỷ lệ dương tiacutenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 855 641 25 vagrave

813 tất cả đều cao hơn rotilde rệt so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở 587 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute

KT khaacuteng dsDNA acircm tiacutenh

Nồng độ trung bigravenh của caacutec KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng

C1q vagrave khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 3221 6034 (IUml) vagrave 945 1385

(IUml) tất cả đều cao hơn so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn coacute độ nhạy cao (8594) nhưng độ đặc

hiệu thấp (6667) với LBĐHT Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh 100 với LBĐHT nhưng độ nhạy

rất thấp (25)

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 16: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

13

Ở thời điểm khởi đầu nghiecircn cứu phần lớn bệnh nhacircn coacute bệnh

hoạt động ở mức độ nhẹ vagrave trung bigravenh (lần lượt chiếm 445 vagrave

289) Điểm SLEDAI dao động khaacute lớn trong khoảng 0 ndash 41

(trung bigravenh lagrave 661 62) Tỷ lệ bệnh nhacircn coacute đợt cấp LBĐHT lagrave

398 Điểm SLICC thận lupus trung bigravenh lagrave 312 42

32 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của

caacutec tự khaacuteng thể

Bảng 37 Tỷ lệ dương tiacutenh của tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Nhoacutem chứng

bệnh

(n = 39)

Nhoacutem chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN 859 5385 67 3333

Khaacuteng dsDNA 641 256 67 435

Khaacuteng Nucl 813 256 0 145

Khaacuteng C1q 25 0 0 0

Tỷ lệ dương tiacutenh của caacutec khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh nhacircn

LBĐHT theo thứ tự KTKN (859) gt khaacuteng Nucl (813) gt khaacuteng

dsDNA (641) gt khaacuteng C1q (25) tất cả đều cao hơn rotilde rệt so

với caacutec nhoacutem chứng với p lt 0005

Bảng 38 Nồng độ trung bigravenh của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể

Nhoacutem

LBĐHT

(n = 128)

Chứng

bệnh

(n = 39)

Chứng

khỏe

(n = 30)

Nhoacutem

chứng

(n = 69)

KTKN (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Khaacuteng dsDNA (IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

Khaacuteng Nucl (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Khaacuteng C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

14

Nồng độ trung bigravenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 945 1385 (IUml) vagrave 3221 6034

(IUml) đều cao hơn caacutec nhoacutem chứng với p lt 00001

Bảng 39 Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 8594 6667 8271 7187

Khaacuteng dsDNA 6406 9565 9647 5863

Khaacuteng Nucl 8125 9855 9905 7391

Khaacuteng C1q 25 100 100 4182

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute độ đặc hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương

tiacutenh với LBĐHT tương đương KT khaacuteng dsDNA nhưng độ nhạy vagrave

giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh đều cao hơn Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh cao nhất trong 4 khaacuteng thể trong

khi đoacute KTKN coacute độ nhạy cao nhất nhưng độ đặc hiệu lagrave thấp nhất

Bảng 310 Giaacute trị chẩn đoaacuten của caacutec khaacuteng thể qua đường cong ROC

Khaacuteng thể (AUC) KTKN

(0716)

Khaacuteng

dsDNA

(089)

Khaacuteng

C1q

(0676)

Khaacuteng

Nucl

(0911)

KTKN (0716) p=00001 p=044 plt0001

Khaacuteng dsDNA (089) p=00001 plt0001 p=044

Khaacuteng C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

Khaacuteng Nucl (0911) plt0001 p=044 plt0001

Caacutec khaacuteng thể khaacuteng Nucl khaacuteng dsDNA KTKN vagrave khaacuteng

C1q lần lượt coacute giaacute trị rất tốt tốt khaacute tốt vagrave iacutet giaacute trị trong chẩn đoaacuten

15

LBĐHT Diện tiacutech dưới đường cong ROC (AUC) của caacutec KT khaacuteng

Nucl vagrave khaacuteng dsDNA đều cao hơn coacute yacute nghĩa thống kecirc so với

KTKN vagrave khaacuteng C1q

33 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Bảng 311 Liecircn quan giữa KTKN với caacutec biểu hiện của LBĐHT

Nhoacutem triệu

chứng

KTKN KT khaacuteng

dsDNA

KT khaacuteng

C1q

KT khaacuteng

Nucl

OR p OR p OR p OR p

Tổn thương da

lupus cấp baacuten

cấp

311 007 258 00056 082 055 238 008

Tổn thương da

lupus mạn tiacutenh 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Loeacutet niecircm mạc 057 04 055 026 121 074 291 031

Rụng toacutec 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Biểu hiện khớp 166 025 118 055 142 021 179 017

Viecircm thanh mạc 106 097 129 083 12 088 143 081

Tổn thương

thận 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Tổn thương

thần kinh 088 091 025 01 039 039 025 008

Tan maacuteu 044 048 064 066 026 037 168 066

Giảm BC 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Giảm TC 149 071 3 016 446 002 204 05

Giảm bổ thể 1006 lt00001 327 lt00001 372 lt00001 1611 lt0001

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute

16

liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn

quan với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp tổn thương

da lupus mạn tiacutenh giảm BC vagrave giảm bổ thể Khaacuteng thể khaacuteng C1q

dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng

toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan

với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Bảng 312 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể ở bệnh nhacircn LBĐHT

Khaacuteng thể Tỷ lệ (+) OR p

KTKN (+)

Khaacuteng dsDNA 6932 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3227 393 0012

Khaacuteng Nucl 8924 1089 lt00001

Khaacuteng dsDNA

(+)

KTKN 9943 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3714 274 00005

Khaacuteng Nucl 9543 1144 lt00001

Khaacuteng C1q (+)

Khaacuteng dsDNA 7647 274 00005

KTKN 9529 393 0012

Khaacuteng Nucl 9412 43 0003

Khaacuteng Nucl (+)

KTKN 9333 1089 lt00001

Khaacuteng C1q 3333 43 0003

Khaacuteng dsDNA 6958 1144 lt00001

Sự dương tiacutenh của caacutec tự khaacuteng thể đều coacute mối liecircn quan thuận

coacute yacute nghĩa thống kecirc với nhau (p lt 005) trong đoacute mối liecircn quan rotilde

rệt nhất lagrave giữa 3 khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng Nucl vagrave KTKN

17

Bảng 313 Liecircn quan giữa tự khaacuteng thể với độ hoạt động của bệnh

Khaacuteng thể

Mức độ hoạt động của LBĐHT p

Mạnh

(n = 36) (I)

Trung bigravenh

(n = 67)(II)

Nhẹổn

(n = 185)(III) I vagrave II II vagrave III

KTKN 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Khaacuteng

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Khaacuteng

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

Khaacuteng

Nucl

100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt0000

1

So với nhoacutem bệnh hoạt động trung bigravenh tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh cao hơn rotilde rệt với p =

00025 Nồng độ trung bigravenh của khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave KT

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh đều cao hơn rotilde rệt Tỷ lệ

(+) vagrave nồng độ trung bigravenh của 4 khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh hoạt động

trung bigravenh đều cao hơn so với nhoacutem bệnh hoạt động nhẹ ổn định

Bảng 314 Tương quan giữa nồng độ khaacuteng thể với điểm SLEDAI vagrave

điểm SLICC thận

Khaacuteng thể SLEDAI SLICC thận

r p r p

KTKN 0306 lt00001 0143 lt0013

Khaacuteng dsDNA 056 lt00001 0216 00002

Khaacuteng C1q 0433 lt00001 0399 lt00001

Khaacuteng Nucl 0648 lt00001 0348 00082

18

Nồng độ KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA tương quan thuận

chặt chẽ nhất với điểm SLEDAI (p lt 0001) Nồng độ KT khaacuteng

C1q tương quan chặt chẽ nhất với điểm SLICC thận (r = 0399)

Bảng 315 Thay đổi nồng độ caacutec khaacuteng thể sau đợt cấp

Khaacuteng thể Tỷ lệ

giảm

Khaacutec biệt

trung bigravenh

Test t

gheacutep cặp p

KTKN (OD) 625 -034 -143 016

Khaacuteng dsDNA (IUml) 6458 -19949 -1793 008

Khaacuteng C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

Khaacuteng Nucl (IUml) 8333 -47509 -39 00003

Với 48 đợt cấp được theo dotildei nồng độ trung bigravenh của caacutec KT

khaacuteng C1q (p = 0037) vagrave khaacuteng Nucl (p = 00003) sau đợt cấp giảm

coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Bảng 316 Giaacute trị dự đoaacuten đợt cấp LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 9759 6714 3227 9459

Khaacuteng dsDNA 759 4537 36 823

Khaacuteng C1q 5783 8195 5647 8276

Khaacuteng Nucl 9759 2244 3375 9583

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng C1q 4819 878 6154 8072

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng Nucl 759 4927 3772 8347

Khaacuteng Nucl + Khaacuteng C1q 5783 8439 60 8317

Trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT KTKN vagrave khaacuteng Nucl đều coacute

độ nhạy cao vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh cao gt 94 nhưng độ đặc hiệu

khaacute thấp Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu cao nhất (8195)

đặc biệt khi dương tiacutenh đồng thời với KT khaacuteng dsDNA (878)

19

Chƣơng 4 BAgraveN LUẬN

41 Đặc điểm của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT

411 Phacircn bố về tuổi vagrave giới tỷ lệ bệnh nhacircn nữ chiếm tới

9297 với tuổi trung bigravenh lagrave 311 946 trong đoacute phần lớn thuộc

nhoacutem tuổi từ 16 ndash 45 (929) Kết quả nagravey hoagraven toagraven phugrave hợp với

những kết quả nghiecircn cứu trước đacircy cho thấy đặc điểm dịch tễ học

cơ bản của LBĐHT lagrave thường xảy ra ở phụ nữ trong độ tuổi sinh đẻ

412 Về tuổi khởi phaacutet bệnh phần lớn bệnh nhacircn LBĐHT

khởi phaacutet bệnh trong giai đoạn 15 - 45 tuổi (852) tuổi khởi phaacutet

bệnh trung bigravenh lagrave 2593 974 Khaacute nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học

trecircn qui mocirc lớn cho thấy LBĐHT thường coacute xu hướng khởi phaacutet ở

nữ giới trong nhoacutem tuổi từ 15 - 45 giai đoạn coacute sự hoạt động mạnh

mẽ nhất của caacutec tuyến nội tiết hướng sinh dục nữ

413 Tiền sử gia đigravenh coacute ngƣời mắc LBĐHT 469 số

bệnh nhacircn LBĐHT coacute iacutet nhất một người thacircn trong gia đigravenh cugraveng

mắc bệnh Nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học đatilde cho thấy tỷ lệ mắc

LBĐHT ở những người thacircn của người bệnh thường cao gấp khoảng

10 - 20 lần so với tỷ lệ mắc chung trong cộng đồng (4 - 12) cho

thấy vai trograve của yếu tố di truyền trong cơ chế bệnh sinh của LBĐHT

414 Caacutec biểu hiện của LBĐHT Caacutec biểu hiện bệnh gặp

nhiều nhất lagrave rụng toacutec - 531 tổn thương thận - 453 tổn thương

da lupus cấp baacuten cấp - 383 giảm bạch cầu - 382 vagrave giảm bổ

thể - 622 Những kết quả nagravey khaacute tương đồng với nghiecircn cứu của

nhiều taacutec giả trong vagrave ngoagravei nước tuy nhiecircn tỷ lệ viecircm thanh mạc

tổn thương thần kinh vagrave giảm tiểu cầu gặp khaacute thấp nguyecircn nhacircn coacute

thể do sự khaacutec nhau trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu vagrave sự

khaacutec biệt về đặc điểm lacircm sagraveng của LBĐHT giữa caacutec chủng tộc

20

42 Về tỷ lệ dƣơng tiacutenh vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự

khaacuteng thể

421 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN)

Về tỷ lệ dương tiacutenh 859 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute KTKN

dương tiacutenh ở lần khaacutem 1 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ

dương tiacutenh của KTKN ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute sự dao động khaacute lớn

trong khoảng 60 ndash 100 nguyecircn nhacircn coacute thể lagrave do sự khaacutec biệt

trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu thiết kế nghiecircn cứu kỹ

thuật xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể sự

đảo chiều huyết thanh của KTKN

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm

tiacutenh của KTKN lần lượt lagrave 8594 vagrave 7231 khaacute thấp so với caacutec

kết quả nghiecircn cứu trước đacircy nguyecircn nhacircn coacute thể do nhoacutem bệnh

nhacircn nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute tỷ lệ KTKN acircm tiacutenh khaacute cao

(141) sự khaacutec biệt về caacutech thức lựa chọn vagrave đặc điểm của nhoacutem

chứng Độ đặc hiệu của KTKN với LBĐHT lagrave khaacute thấp (4615)

khi sử dụng nhoacutem chứng mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec nguyecircn nhacircn lagrave

do KTKN coacute thể xuất hiện trong nhiều bệnh lyacute tự miễn khaacutec

422 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA

Về tỷ lệ dương tiacutenh bệnh nhacircn LBĐHT 641 số bệnh nhacircn

LBĐHT trong nghiecircn cứu coacute KT khaacuteng dsDNA dương tiacutenh nằm

trong dải biến thiecircn 37 - 85 của caacutec kết quả nghiecircn cứu trước đacircy

Caacutec yếu tố coacute ảnh hưởng rotilde rệt nhất đến tỷ lệ nagravey lagrave mức độ hoạt

động vagrave tổn thương nội tạng của caacutec đối tượng nghiecircn cứu kỹ thuật

xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ đặc hiệu của KT khaacuteng

dsDNA trong chẩn đoaacuten LBĐHT ở nghiecircn cứu nagravey lagrave 9333 khi sử

dụng nhoacutem chứng khỏe mạnh vagrave 9744 khi sử dụng nhoacutem chứng

21

mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec tức lagrave hoagraven toagraven phugrave hợp với caacutec kết quả

nghiecircn cứu trước đacircy (95 ndash 100) Traacutei với độ đặc hiệu độ nhạy của

KT khaacuteng dsDNA với LBĐHT thường khocircng cao vagrave coacute khoảng dao

động khaacute lớn (13 - 86) Nguyecircn nhacircn coacute thể do tiacutenh chất dao động

thường xuyecircn của khaacuteng thể nagravey trong quaacute trigravenh diễn biến bệnh vagrave

độ nhạy khaacutec nhau của caacutec kỹ thuật xeacutet nghiệm miễn dịch

423 Khaacuteng thể khaacuteng C1q

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở bệnh nhacircn LBĐHT dao động trong khoảng 15 ndash

63 theo caacutec nghiecircn cứu trước đacircy kết quả của chuacuteng tocirci lagrave 25 ở

lần khaacutem 1 Trong 3 nghiecircn cứu coacute cỡ mẫu lớn nhất của Julkunen H

(2012) Mok CC (2010) vagrave Orbai AM (2015) tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q đều tương đối thấp vagrave iacutet coacute sự khaacutec biệt

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT KT khaacuteng C1q coacute giaacute trị keacutem

nhất trong chẩn đoaacuten vagrave phacircn loại LBĐHT với diện tiacutech dưới đường

cong ROC lagrave 0676 vagrave độ nhạy chỉ lagrave 25 Tỷ lệ dương tiacutenh thấp vagrave

dao động thường xuyecircn ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute thể lagrave nguyecircn nhacircn

chiacutenh lagravem giảm độ nhạy của khaacuteng thể nagravey trong chẩn đoaacuten bệnh

424 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome (KT khaacuteng Nucl )

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT Tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT trong nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci

lagrave 813 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ nagravey coacute khoảng dao

động rộng từ 45 đến 100 nguyecircn nhacircn lagrave do sự khaacutec biệt của caacutec

đối tượng nghiecircn cứu về chủng tộc vagrave mức độ hoạt động bệnh

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT nhiều nghiecircn cứu đatilde cho thấy độ

đặc hiệu rất cao của KT khaacuteng Nucl với LBĐHT (90 ndash 100) tương

đồng với kết quả thu được của chuacuteng tocirci lagrave 987 Nguyecircn nhacircn coacute

thể do nucleosome lagrave tự khaacuteng nguyecircn coacute vai trograve quan trọng trong cơ

22

chế bệnh sinh của LBĐHT Độ nhạy của KT khaacuteng Nucl với

LBĐHT trong nghiecircn cứu nagravey lagrave 8125 cao hơn so với KT khaacuteng

dsDNA (6406)

43 Về liecircn quan giữa caacutec khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

431 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh (ge 12

OD) ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với sự xuất

hiện của giảm bổ thể vagrave caacutec tự khaacuteng thể khaacutec Mối liecircn quan giữa

khaacuteng thể nagravey với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của

LBĐHT trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy lagrave khocircng rotilde rệt do thiếu

những bằng chứng đaacuteng tin cậy

432 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với caacutec biểu

hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp hoặc mạn tiacutenh giảm bạch cầu

vagrave giảm bổ thể nhưng khocircng liecircn quan với tổn thương thận lupus

Nồng độ vagrave tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng dsDNA ở nhoacutem bệnh

nhacircn trong đợt cấp đều cao hơn so với nhoacutem ngoagravei đợt cấp tuy nhiecircn

khaacuteng thể nagravey coacute liecircn quan khocircng hằng định với cả hoạt tiacutenh chung

của LBĐHT vagrave tổn thương thận đặc biệt lagrave với đợt cấp của bệnh

433 Khaacuteng thể khaacuteng C1q khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh ở

bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan rotilde rệt với sự xuất hiện của tổn thương

thận vagrave giảm bổ thể Độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey trong dự baacuteo tổn

thương thận lupus cao hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại vagrave nồng độ của noacute

tương quan nghịch khaacute chặt với cả bổ thể C3 vagrave C4 (p lt 00001) Tỷ

lệ vagrave nồng độ trung bigravenh của KT khaacuteng C1q đều coacute xu hướng tăng

dần theo mức độ hoạt động của bệnh Tương quan giữa nồng độ KT

khaacuteng C1q với điểm SLICC thận vagrave độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey

trong dự baacuteo đợt cấp thận lupus cũng tốt hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại

23

434 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện tổn thương

da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận giảm BC vagrave giảm bổ thể Độ

nhạy trong dự baacuteo tổn thương thận lupus của KT khaacuteng Nucl cao

hơn so với caacutec khaacuteng thể cograven lại Tương quan với nồng độ bổ thể vagrave

điểm SLEDAI của khaacuteng thể nagravey cũng chặt chẽ hơn caacutec khaacuteng thể

cograven lại

KẾT LUẬN

Qua nghiecircn cứu 128 bệnh nhacircn LBĐHT với nhoacutem chứng gồm

39 người mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec vagrave 30 người khỏe mạnh chuacuteng

tocirci xin đưa ra một số kết luận sau

1 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten của một

số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể

Tỷ lệ dương tiacutenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 855 641 25 vagrave

813 tất cả đều cao hơn rotilde rệt so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở 587 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute

KT khaacuteng dsDNA acircm tiacutenh

Nồng độ trung bigravenh của caacutec KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng

C1q vagrave khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 3221 6034 (IUml) vagrave 945 1385

(IUml) tất cả đều cao hơn so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn coacute độ nhạy cao (8594) nhưng độ đặc

hiệu thấp (6667) với LBĐHT Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh 100 với LBĐHT nhưng độ nhạy

rất thấp (25)

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 17: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

14

Nồng độ trung bigravenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 945 1385 (IUml) vagrave 3221 6034

(IUml) đều cao hơn caacutec nhoacutem chứng với p lt 00001

Bảng 39 Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 8594 6667 8271 7187

Khaacuteng dsDNA 6406 9565 9647 5863

Khaacuteng Nucl 8125 9855 9905 7391

Khaacuteng C1q 25 100 100 4182

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute độ đặc hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương

tiacutenh với LBĐHT tương đương KT khaacuteng dsDNA nhưng độ nhạy vagrave

giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh đều cao hơn Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh cao nhất trong 4 khaacuteng thể trong

khi đoacute KTKN coacute độ nhạy cao nhất nhưng độ đặc hiệu lagrave thấp nhất

Bảng 310 Giaacute trị chẩn đoaacuten của caacutec khaacuteng thể qua đường cong ROC

Khaacuteng thể (AUC) KTKN

(0716)

Khaacuteng

dsDNA

(089)

Khaacuteng

C1q

(0676)

Khaacuteng

Nucl

(0911)

KTKN (0716) p=00001 p=044 plt0001

Khaacuteng dsDNA (089) p=00001 plt0001 p=044

Khaacuteng C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

Khaacuteng Nucl (0911) plt0001 p=044 plt0001

Caacutec khaacuteng thể khaacuteng Nucl khaacuteng dsDNA KTKN vagrave khaacuteng

C1q lần lượt coacute giaacute trị rất tốt tốt khaacute tốt vagrave iacutet giaacute trị trong chẩn đoaacuten

15

LBĐHT Diện tiacutech dưới đường cong ROC (AUC) của caacutec KT khaacuteng

Nucl vagrave khaacuteng dsDNA đều cao hơn coacute yacute nghĩa thống kecirc so với

KTKN vagrave khaacuteng C1q

33 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Bảng 311 Liecircn quan giữa KTKN với caacutec biểu hiện của LBĐHT

Nhoacutem triệu

chứng

KTKN KT khaacuteng

dsDNA

KT khaacuteng

C1q

KT khaacuteng

Nucl

OR p OR p OR p OR p

Tổn thương da

lupus cấp baacuten

cấp

311 007 258 00056 082 055 238 008

Tổn thương da

lupus mạn tiacutenh 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Loeacutet niecircm mạc 057 04 055 026 121 074 291 031

Rụng toacutec 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Biểu hiện khớp 166 025 118 055 142 021 179 017

Viecircm thanh mạc 106 097 129 083 12 088 143 081

Tổn thương

thận 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Tổn thương

thần kinh 088 091 025 01 039 039 025 008

Tan maacuteu 044 048 064 066 026 037 168 066

Giảm BC 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Giảm TC 149 071 3 016 446 002 204 05

Giảm bổ thể 1006 lt00001 327 lt00001 372 lt00001 1611 lt0001

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute

16

liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn

quan với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp tổn thương

da lupus mạn tiacutenh giảm BC vagrave giảm bổ thể Khaacuteng thể khaacuteng C1q

dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng

toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan

với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Bảng 312 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể ở bệnh nhacircn LBĐHT

Khaacuteng thể Tỷ lệ (+) OR p

KTKN (+)

Khaacuteng dsDNA 6932 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3227 393 0012

Khaacuteng Nucl 8924 1089 lt00001

Khaacuteng dsDNA

(+)

KTKN 9943 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3714 274 00005

Khaacuteng Nucl 9543 1144 lt00001

Khaacuteng C1q (+)

Khaacuteng dsDNA 7647 274 00005

KTKN 9529 393 0012

Khaacuteng Nucl 9412 43 0003

Khaacuteng Nucl (+)

KTKN 9333 1089 lt00001

Khaacuteng C1q 3333 43 0003

Khaacuteng dsDNA 6958 1144 lt00001

Sự dương tiacutenh của caacutec tự khaacuteng thể đều coacute mối liecircn quan thuận

coacute yacute nghĩa thống kecirc với nhau (p lt 005) trong đoacute mối liecircn quan rotilde

rệt nhất lagrave giữa 3 khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng Nucl vagrave KTKN

17

Bảng 313 Liecircn quan giữa tự khaacuteng thể với độ hoạt động của bệnh

Khaacuteng thể

Mức độ hoạt động của LBĐHT p

Mạnh

(n = 36) (I)

Trung bigravenh

(n = 67)(II)

Nhẹổn

(n = 185)(III) I vagrave II II vagrave III

KTKN 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Khaacuteng

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Khaacuteng

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

Khaacuteng

Nucl

100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt0000

1

So với nhoacutem bệnh hoạt động trung bigravenh tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh cao hơn rotilde rệt với p =

00025 Nồng độ trung bigravenh của khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave KT

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh đều cao hơn rotilde rệt Tỷ lệ

(+) vagrave nồng độ trung bigravenh của 4 khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh hoạt động

trung bigravenh đều cao hơn so với nhoacutem bệnh hoạt động nhẹ ổn định

Bảng 314 Tương quan giữa nồng độ khaacuteng thể với điểm SLEDAI vagrave

điểm SLICC thận

Khaacuteng thể SLEDAI SLICC thận

r p r p

KTKN 0306 lt00001 0143 lt0013

Khaacuteng dsDNA 056 lt00001 0216 00002

Khaacuteng C1q 0433 lt00001 0399 lt00001

Khaacuteng Nucl 0648 lt00001 0348 00082

18

Nồng độ KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA tương quan thuận

chặt chẽ nhất với điểm SLEDAI (p lt 0001) Nồng độ KT khaacuteng

C1q tương quan chặt chẽ nhất với điểm SLICC thận (r = 0399)

Bảng 315 Thay đổi nồng độ caacutec khaacuteng thể sau đợt cấp

Khaacuteng thể Tỷ lệ

giảm

Khaacutec biệt

trung bigravenh

Test t

gheacutep cặp p

KTKN (OD) 625 -034 -143 016

Khaacuteng dsDNA (IUml) 6458 -19949 -1793 008

Khaacuteng C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

Khaacuteng Nucl (IUml) 8333 -47509 -39 00003

Với 48 đợt cấp được theo dotildei nồng độ trung bigravenh của caacutec KT

khaacuteng C1q (p = 0037) vagrave khaacuteng Nucl (p = 00003) sau đợt cấp giảm

coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Bảng 316 Giaacute trị dự đoaacuten đợt cấp LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 9759 6714 3227 9459

Khaacuteng dsDNA 759 4537 36 823

Khaacuteng C1q 5783 8195 5647 8276

Khaacuteng Nucl 9759 2244 3375 9583

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng C1q 4819 878 6154 8072

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng Nucl 759 4927 3772 8347

Khaacuteng Nucl + Khaacuteng C1q 5783 8439 60 8317

Trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT KTKN vagrave khaacuteng Nucl đều coacute

độ nhạy cao vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh cao gt 94 nhưng độ đặc hiệu

khaacute thấp Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu cao nhất (8195)

đặc biệt khi dương tiacutenh đồng thời với KT khaacuteng dsDNA (878)

19

Chƣơng 4 BAgraveN LUẬN

41 Đặc điểm của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT

411 Phacircn bố về tuổi vagrave giới tỷ lệ bệnh nhacircn nữ chiếm tới

9297 với tuổi trung bigravenh lagrave 311 946 trong đoacute phần lớn thuộc

nhoacutem tuổi từ 16 ndash 45 (929) Kết quả nagravey hoagraven toagraven phugrave hợp với

những kết quả nghiecircn cứu trước đacircy cho thấy đặc điểm dịch tễ học

cơ bản của LBĐHT lagrave thường xảy ra ở phụ nữ trong độ tuổi sinh đẻ

412 Về tuổi khởi phaacutet bệnh phần lớn bệnh nhacircn LBĐHT

khởi phaacutet bệnh trong giai đoạn 15 - 45 tuổi (852) tuổi khởi phaacutet

bệnh trung bigravenh lagrave 2593 974 Khaacute nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học

trecircn qui mocirc lớn cho thấy LBĐHT thường coacute xu hướng khởi phaacutet ở

nữ giới trong nhoacutem tuổi từ 15 - 45 giai đoạn coacute sự hoạt động mạnh

mẽ nhất của caacutec tuyến nội tiết hướng sinh dục nữ

413 Tiền sử gia đigravenh coacute ngƣời mắc LBĐHT 469 số

bệnh nhacircn LBĐHT coacute iacutet nhất một người thacircn trong gia đigravenh cugraveng

mắc bệnh Nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học đatilde cho thấy tỷ lệ mắc

LBĐHT ở những người thacircn của người bệnh thường cao gấp khoảng

10 - 20 lần so với tỷ lệ mắc chung trong cộng đồng (4 - 12) cho

thấy vai trograve của yếu tố di truyền trong cơ chế bệnh sinh của LBĐHT

414 Caacutec biểu hiện của LBĐHT Caacutec biểu hiện bệnh gặp

nhiều nhất lagrave rụng toacutec - 531 tổn thương thận - 453 tổn thương

da lupus cấp baacuten cấp - 383 giảm bạch cầu - 382 vagrave giảm bổ

thể - 622 Những kết quả nagravey khaacute tương đồng với nghiecircn cứu của

nhiều taacutec giả trong vagrave ngoagravei nước tuy nhiecircn tỷ lệ viecircm thanh mạc

tổn thương thần kinh vagrave giảm tiểu cầu gặp khaacute thấp nguyecircn nhacircn coacute

thể do sự khaacutec nhau trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu vagrave sự

khaacutec biệt về đặc điểm lacircm sagraveng của LBĐHT giữa caacutec chủng tộc

20

42 Về tỷ lệ dƣơng tiacutenh vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự

khaacuteng thể

421 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN)

Về tỷ lệ dương tiacutenh 859 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute KTKN

dương tiacutenh ở lần khaacutem 1 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ

dương tiacutenh của KTKN ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute sự dao động khaacute lớn

trong khoảng 60 ndash 100 nguyecircn nhacircn coacute thể lagrave do sự khaacutec biệt

trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu thiết kế nghiecircn cứu kỹ

thuật xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể sự

đảo chiều huyết thanh của KTKN

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm

tiacutenh của KTKN lần lượt lagrave 8594 vagrave 7231 khaacute thấp so với caacutec

kết quả nghiecircn cứu trước đacircy nguyecircn nhacircn coacute thể do nhoacutem bệnh

nhacircn nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute tỷ lệ KTKN acircm tiacutenh khaacute cao

(141) sự khaacutec biệt về caacutech thức lựa chọn vagrave đặc điểm của nhoacutem

chứng Độ đặc hiệu của KTKN với LBĐHT lagrave khaacute thấp (4615)

khi sử dụng nhoacutem chứng mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec nguyecircn nhacircn lagrave

do KTKN coacute thể xuất hiện trong nhiều bệnh lyacute tự miễn khaacutec

422 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA

Về tỷ lệ dương tiacutenh bệnh nhacircn LBĐHT 641 số bệnh nhacircn

LBĐHT trong nghiecircn cứu coacute KT khaacuteng dsDNA dương tiacutenh nằm

trong dải biến thiecircn 37 - 85 của caacutec kết quả nghiecircn cứu trước đacircy

Caacutec yếu tố coacute ảnh hưởng rotilde rệt nhất đến tỷ lệ nagravey lagrave mức độ hoạt

động vagrave tổn thương nội tạng của caacutec đối tượng nghiecircn cứu kỹ thuật

xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ đặc hiệu của KT khaacuteng

dsDNA trong chẩn đoaacuten LBĐHT ở nghiecircn cứu nagravey lagrave 9333 khi sử

dụng nhoacutem chứng khỏe mạnh vagrave 9744 khi sử dụng nhoacutem chứng

21

mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec tức lagrave hoagraven toagraven phugrave hợp với caacutec kết quả

nghiecircn cứu trước đacircy (95 ndash 100) Traacutei với độ đặc hiệu độ nhạy của

KT khaacuteng dsDNA với LBĐHT thường khocircng cao vagrave coacute khoảng dao

động khaacute lớn (13 - 86) Nguyecircn nhacircn coacute thể do tiacutenh chất dao động

thường xuyecircn của khaacuteng thể nagravey trong quaacute trigravenh diễn biến bệnh vagrave

độ nhạy khaacutec nhau của caacutec kỹ thuật xeacutet nghiệm miễn dịch

423 Khaacuteng thể khaacuteng C1q

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở bệnh nhacircn LBĐHT dao động trong khoảng 15 ndash

63 theo caacutec nghiecircn cứu trước đacircy kết quả của chuacuteng tocirci lagrave 25 ở

lần khaacutem 1 Trong 3 nghiecircn cứu coacute cỡ mẫu lớn nhất của Julkunen H

(2012) Mok CC (2010) vagrave Orbai AM (2015) tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q đều tương đối thấp vagrave iacutet coacute sự khaacutec biệt

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT KT khaacuteng C1q coacute giaacute trị keacutem

nhất trong chẩn đoaacuten vagrave phacircn loại LBĐHT với diện tiacutech dưới đường

cong ROC lagrave 0676 vagrave độ nhạy chỉ lagrave 25 Tỷ lệ dương tiacutenh thấp vagrave

dao động thường xuyecircn ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute thể lagrave nguyecircn nhacircn

chiacutenh lagravem giảm độ nhạy của khaacuteng thể nagravey trong chẩn đoaacuten bệnh

424 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome (KT khaacuteng Nucl )

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT Tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT trong nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci

lagrave 813 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ nagravey coacute khoảng dao

động rộng từ 45 đến 100 nguyecircn nhacircn lagrave do sự khaacutec biệt của caacutec

đối tượng nghiecircn cứu về chủng tộc vagrave mức độ hoạt động bệnh

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT nhiều nghiecircn cứu đatilde cho thấy độ

đặc hiệu rất cao của KT khaacuteng Nucl với LBĐHT (90 ndash 100) tương

đồng với kết quả thu được của chuacuteng tocirci lagrave 987 Nguyecircn nhacircn coacute

thể do nucleosome lagrave tự khaacuteng nguyecircn coacute vai trograve quan trọng trong cơ

22

chế bệnh sinh của LBĐHT Độ nhạy của KT khaacuteng Nucl với

LBĐHT trong nghiecircn cứu nagravey lagrave 8125 cao hơn so với KT khaacuteng

dsDNA (6406)

43 Về liecircn quan giữa caacutec khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

431 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh (ge 12

OD) ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với sự xuất

hiện của giảm bổ thể vagrave caacutec tự khaacuteng thể khaacutec Mối liecircn quan giữa

khaacuteng thể nagravey với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của

LBĐHT trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy lagrave khocircng rotilde rệt do thiếu

những bằng chứng đaacuteng tin cậy

432 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với caacutec biểu

hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp hoặc mạn tiacutenh giảm bạch cầu

vagrave giảm bổ thể nhưng khocircng liecircn quan với tổn thương thận lupus

Nồng độ vagrave tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng dsDNA ở nhoacutem bệnh

nhacircn trong đợt cấp đều cao hơn so với nhoacutem ngoagravei đợt cấp tuy nhiecircn

khaacuteng thể nagravey coacute liecircn quan khocircng hằng định với cả hoạt tiacutenh chung

của LBĐHT vagrave tổn thương thận đặc biệt lagrave với đợt cấp của bệnh

433 Khaacuteng thể khaacuteng C1q khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh ở

bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan rotilde rệt với sự xuất hiện của tổn thương

thận vagrave giảm bổ thể Độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey trong dự baacuteo tổn

thương thận lupus cao hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại vagrave nồng độ của noacute

tương quan nghịch khaacute chặt với cả bổ thể C3 vagrave C4 (p lt 00001) Tỷ

lệ vagrave nồng độ trung bigravenh của KT khaacuteng C1q đều coacute xu hướng tăng

dần theo mức độ hoạt động của bệnh Tương quan giữa nồng độ KT

khaacuteng C1q với điểm SLICC thận vagrave độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey

trong dự baacuteo đợt cấp thận lupus cũng tốt hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại

23

434 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện tổn thương

da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận giảm BC vagrave giảm bổ thể Độ

nhạy trong dự baacuteo tổn thương thận lupus của KT khaacuteng Nucl cao

hơn so với caacutec khaacuteng thể cograven lại Tương quan với nồng độ bổ thể vagrave

điểm SLEDAI của khaacuteng thể nagravey cũng chặt chẽ hơn caacutec khaacuteng thể

cograven lại

KẾT LUẬN

Qua nghiecircn cứu 128 bệnh nhacircn LBĐHT với nhoacutem chứng gồm

39 người mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec vagrave 30 người khỏe mạnh chuacuteng

tocirci xin đưa ra một số kết luận sau

1 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten của một

số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể

Tỷ lệ dương tiacutenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 855 641 25 vagrave

813 tất cả đều cao hơn rotilde rệt so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở 587 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute

KT khaacuteng dsDNA acircm tiacutenh

Nồng độ trung bigravenh của caacutec KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng

C1q vagrave khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 3221 6034 (IUml) vagrave 945 1385

(IUml) tất cả đều cao hơn so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn coacute độ nhạy cao (8594) nhưng độ đặc

hiệu thấp (6667) với LBĐHT Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh 100 với LBĐHT nhưng độ nhạy

rất thấp (25)

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 18: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

15

LBĐHT Diện tiacutech dưới đường cong ROC (AUC) của caacutec KT khaacuteng

Nucl vagrave khaacuteng dsDNA đều cao hơn coacute yacute nghĩa thống kecirc so với

KTKN vagrave khaacuteng C1q

33 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Bảng 311 Liecircn quan giữa KTKN với caacutec biểu hiện của LBĐHT

Nhoacutem triệu

chứng

KTKN KT khaacuteng

dsDNA

KT khaacuteng

C1q

KT khaacuteng

Nucl

OR p OR p OR p OR p

Tổn thương da

lupus cấp baacuten

cấp

311 007 258 00056 082 055 238 008

Tổn thương da

lupus mạn tiacutenh 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Loeacutet niecircm mạc 057 04 055 026 121 074 291 031

Rụng toacutec 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Biểu hiện khớp 166 025 118 055 142 021 179 017

Viecircm thanh mạc 106 097 129 083 12 088 143 081

Tổn thương

thận 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Tổn thương

thần kinh 088 091 025 01 039 039 025 008

Tan maacuteu 044 048 064 066 026 037 168 066

Giảm BC 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Giảm TC 149 071 3 016 446 002 204 05

Giảm bổ thể 1006 lt00001 327 lt00001 372 lt00001 1611 lt0001

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute

16

liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn

quan với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp tổn thương

da lupus mạn tiacutenh giảm BC vagrave giảm bổ thể Khaacuteng thể khaacuteng C1q

dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng

toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan

với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Bảng 312 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể ở bệnh nhacircn LBĐHT

Khaacuteng thể Tỷ lệ (+) OR p

KTKN (+)

Khaacuteng dsDNA 6932 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3227 393 0012

Khaacuteng Nucl 8924 1089 lt00001

Khaacuteng dsDNA

(+)

KTKN 9943 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3714 274 00005

Khaacuteng Nucl 9543 1144 lt00001

Khaacuteng C1q (+)

Khaacuteng dsDNA 7647 274 00005

KTKN 9529 393 0012

Khaacuteng Nucl 9412 43 0003

Khaacuteng Nucl (+)

KTKN 9333 1089 lt00001

Khaacuteng C1q 3333 43 0003

Khaacuteng dsDNA 6958 1144 lt00001

Sự dương tiacutenh của caacutec tự khaacuteng thể đều coacute mối liecircn quan thuận

coacute yacute nghĩa thống kecirc với nhau (p lt 005) trong đoacute mối liecircn quan rotilde

rệt nhất lagrave giữa 3 khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng Nucl vagrave KTKN

17

Bảng 313 Liecircn quan giữa tự khaacuteng thể với độ hoạt động của bệnh

Khaacuteng thể

Mức độ hoạt động của LBĐHT p

Mạnh

(n = 36) (I)

Trung bigravenh

(n = 67)(II)

Nhẹổn

(n = 185)(III) I vagrave II II vagrave III

KTKN 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Khaacuteng

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Khaacuteng

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

Khaacuteng

Nucl

100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt0000

1

So với nhoacutem bệnh hoạt động trung bigravenh tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh cao hơn rotilde rệt với p =

00025 Nồng độ trung bigravenh của khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave KT

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh đều cao hơn rotilde rệt Tỷ lệ

(+) vagrave nồng độ trung bigravenh của 4 khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh hoạt động

trung bigravenh đều cao hơn so với nhoacutem bệnh hoạt động nhẹ ổn định

Bảng 314 Tương quan giữa nồng độ khaacuteng thể với điểm SLEDAI vagrave

điểm SLICC thận

Khaacuteng thể SLEDAI SLICC thận

r p r p

KTKN 0306 lt00001 0143 lt0013

Khaacuteng dsDNA 056 lt00001 0216 00002

Khaacuteng C1q 0433 lt00001 0399 lt00001

Khaacuteng Nucl 0648 lt00001 0348 00082

18

Nồng độ KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA tương quan thuận

chặt chẽ nhất với điểm SLEDAI (p lt 0001) Nồng độ KT khaacuteng

C1q tương quan chặt chẽ nhất với điểm SLICC thận (r = 0399)

Bảng 315 Thay đổi nồng độ caacutec khaacuteng thể sau đợt cấp

Khaacuteng thể Tỷ lệ

giảm

Khaacutec biệt

trung bigravenh

Test t

gheacutep cặp p

KTKN (OD) 625 -034 -143 016

Khaacuteng dsDNA (IUml) 6458 -19949 -1793 008

Khaacuteng C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

Khaacuteng Nucl (IUml) 8333 -47509 -39 00003

Với 48 đợt cấp được theo dotildei nồng độ trung bigravenh của caacutec KT

khaacuteng C1q (p = 0037) vagrave khaacuteng Nucl (p = 00003) sau đợt cấp giảm

coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Bảng 316 Giaacute trị dự đoaacuten đợt cấp LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 9759 6714 3227 9459

Khaacuteng dsDNA 759 4537 36 823

Khaacuteng C1q 5783 8195 5647 8276

Khaacuteng Nucl 9759 2244 3375 9583

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng C1q 4819 878 6154 8072

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng Nucl 759 4927 3772 8347

Khaacuteng Nucl + Khaacuteng C1q 5783 8439 60 8317

Trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT KTKN vagrave khaacuteng Nucl đều coacute

độ nhạy cao vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh cao gt 94 nhưng độ đặc hiệu

khaacute thấp Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu cao nhất (8195)

đặc biệt khi dương tiacutenh đồng thời với KT khaacuteng dsDNA (878)

19

Chƣơng 4 BAgraveN LUẬN

41 Đặc điểm của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT

411 Phacircn bố về tuổi vagrave giới tỷ lệ bệnh nhacircn nữ chiếm tới

9297 với tuổi trung bigravenh lagrave 311 946 trong đoacute phần lớn thuộc

nhoacutem tuổi từ 16 ndash 45 (929) Kết quả nagravey hoagraven toagraven phugrave hợp với

những kết quả nghiecircn cứu trước đacircy cho thấy đặc điểm dịch tễ học

cơ bản của LBĐHT lagrave thường xảy ra ở phụ nữ trong độ tuổi sinh đẻ

412 Về tuổi khởi phaacutet bệnh phần lớn bệnh nhacircn LBĐHT

khởi phaacutet bệnh trong giai đoạn 15 - 45 tuổi (852) tuổi khởi phaacutet

bệnh trung bigravenh lagrave 2593 974 Khaacute nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học

trecircn qui mocirc lớn cho thấy LBĐHT thường coacute xu hướng khởi phaacutet ở

nữ giới trong nhoacutem tuổi từ 15 - 45 giai đoạn coacute sự hoạt động mạnh

mẽ nhất của caacutec tuyến nội tiết hướng sinh dục nữ

413 Tiền sử gia đigravenh coacute ngƣời mắc LBĐHT 469 số

bệnh nhacircn LBĐHT coacute iacutet nhất một người thacircn trong gia đigravenh cugraveng

mắc bệnh Nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học đatilde cho thấy tỷ lệ mắc

LBĐHT ở những người thacircn của người bệnh thường cao gấp khoảng

10 - 20 lần so với tỷ lệ mắc chung trong cộng đồng (4 - 12) cho

thấy vai trograve của yếu tố di truyền trong cơ chế bệnh sinh của LBĐHT

414 Caacutec biểu hiện của LBĐHT Caacutec biểu hiện bệnh gặp

nhiều nhất lagrave rụng toacutec - 531 tổn thương thận - 453 tổn thương

da lupus cấp baacuten cấp - 383 giảm bạch cầu - 382 vagrave giảm bổ

thể - 622 Những kết quả nagravey khaacute tương đồng với nghiecircn cứu của

nhiều taacutec giả trong vagrave ngoagravei nước tuy nhiecircn tỷ lệ viecircm thanh mạc

tổn thương thần kinh vagrave giảm tiểu cầu gặp khaacute thấp nguyecircn nhacircn coacute

thể do sự khaacutec nhau trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu vagrave sự

khaacutec biệt về đặc điểm lacircm sagraveng của LBĐHT giữa caacutec chủng tộc

20

42 Về tỷ lệ dƣơng tiacutenh vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự

khaacuteng thể

421 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN)

Về tỷ lệ dương tiacutenh 859 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute KTKN

dương tiacutenh ở lần khaacutem 1 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ

dương tiacutenh của KTKN ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute sự dao động khaacute lớn

trong khoảng 60 ndash 100 nguyecircn nhacircn coacute thể lagrave do sự khaacutec biệt

trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu thiết kế nghiecircn cứu kỹ

thuật xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể sự

đảo chiều huyết thanh của KTKN

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm

tiacutenh của KTKN lần lượt lagrave 8594 vagrave 7231 khaacute thấp so với caacutec

kết quả nghiecircn cứu trước đacircy nguyecircn nhacircn coacute thể do nhoacutem bệnh

nhacircn nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute tỷ lệ KTKN acircm tiacutenh khaacute cao

(141) sự khaacutec biệt về caacutech thức lựa chọn vagrave đặc điểm của nhoacutem

chứng Độ đặc hiệu của KTKN với LBĐHT lagrave khaacute thấp (4615)

khi sử dụng nhoacutem chứng mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec nguyecircn nhacircn lagrave

do KTKN coacute thể xuất hiện trong nhiều bệnh lyacute tự miễn khaacutec

422 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA

Về tỷ lệ dương tiacutenh bệnh nhacircn LBĐHT 641 số bệnh nhacircn

LBĐHT trong nghiecircn cứu coacute KT khaacuteng dsDNA dương tiacutenh nằm

trong dải biến thiecircn 37 - 85 của caacutec kết quả nghiecircn cứu trước đacircy

Caacutec yếu tố coacute ảnh hưởng rotilde rệt nhất đến tỷ lệ nagravey lagrave mức độ hoạt

động vagrave tổn thương nội tạng của caacutec đối tượng nghiecircn cứu kỹ thuật

xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ đặc hiệu của KT khaacuteng

dsDNA trong chẩn đoaacuten LBĐHT ở nghiecircn cứu nagravey lagrave 9333 khi sử

dụng nhoacutem chứng khỏe mạnh vagrave 9744 khi sử dụng nhoacutem chứng

21

mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec tức lagrave hoagraven toagraven phugrave hợp với caacutec kết quả

nghiecircn cứu trước đacircy (95 ndash 100) Traacutei với độ đặc hiệu độ nhạy của

KT khaacuteng dsDNA với LBĐHT thường khocircng cao vagrave coacute khoảng dao

động khaacute lớn (13 - 86) Nguyecircn nhacircn coacute thể do tiacutenh chất dao động

thường xuyecircn của khaacuteng thể nagravey trong quaacute trigravenh diễn biến bệnh vagrave

độ nhạy khaacutec nhau của caacutec kỹ thuật xeacutet nghiệm miễn dịch

423 Khaacuteng thể khaacuteng C1q

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở bệnh nhacircn LBĐHT dao động trong khoảng 15 ndash

63 theo caacutec nghiecircn cứu trước đacircy kết quả của chuacuteng tocirci lagrave 25 ở

lần khaacutem 1 Trong 3 nghiecircn cứu coacute cỡ mẫu lớn nhất của Julkunen H

(2012) Mok CC (2010) vagrave Orbai AM (2015) tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q đều tương đối thấp vagrave iacutet coacute sự khaacutec biệt

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT KT khaacuteng C1q coacute giaacute trị keacutem

nhất trong chẩn đoaacuten vagrave phacircn loại LBĐHT với diện tiacutech dưới đường

cong ROC lagrave 0676 vagrave độ nhạy chỉ lagrave 25 Tỷ lệ dương tiacutenh thấp vagrave

dao động thường xuyecircn ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute thể lagrave nguyecircn nhacircn

chiacutenh lagravem giảm độ nhạy của khaacuteng thể nagravey trong chẩn đoaacuten bệnh

424 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome (KT khaacuteng Nucl )

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT Tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT trong nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci

lagrave 813 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ nagravey coacute khoảng dao

động rộng từ 45 đến 100 nguyecircn nhacircn lagrave do sự khaacutec biệt của caacutec

đối tượng nghiecircn cứu về chủng tộc vagrave mức độ hoạt động bệnh

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT nhiều nghiecircn cứu đatilde cho thấy độ

đặc hiệu rất cao của KT khaacuteng Nucl với LBĐHT (90 ndash 100) tương

đồng với kết quả thu được của chuacuteng tocirci lagrave 987 Nguyecircn nhacircn coacute

thể do nucleosome lagrave tự khaacuteng nguyecircn coacute vai trograve quan trọng trong cơ

22

chế bệnh sinh của LBĐHT Độ nhạy của KT khaacuteng Nucl với

LBĐHT trong nghiecircn cứu nagravey lagrave 8125 cao hơn so với KT khaacuteng

dsDNA (6406)

43 Về liecircn quan giữa caacutec khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

431 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh (ge 12

OD) ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với sự xuất

hiện của giảm bổ thể vagrave caacutec tự khaacuteng thể khaacutec Mối liecircn quan giữa

khaacuteng thể nagravey với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của

LBĐHT trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy lagrave khocircng rotilde rệt do thiếu

những bằng chứng đaacuteng tin cậy

432 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với caacutec biểu

hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp hoặc mạn tiacutenh giảm bạch cầu

vagrave giảm bổ thể nhưng khocircng liecircn quan với tổn thương thận lupus

Nồng độ vagrave tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng dsDNA ở nhoacutem bệnh

nhacircn trong đợt cấp đều cao hơn so với nhoacutem ngoagravei đợt cấp tuy nhiecircn

khaacuteng thể nagravey coacute liecircn quan khocircng hằng định với cả hoạt tiacutenh chung

của LBĐHT vagrave tổn thương thận đặc biệt lagrave với đợt cấp của bệnh

433 Khaacuteng thể khaacuteng C1q khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh ở

bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan rotilde rệt với sự xuất hiện của tổn thương

thận vagrave giảm bổ thể Độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey trong dự baacuteo tổn

thương thận lupus cao hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại vagrave nồng độ của noacute

tương quan nghịch khaacute chặt với cả bổ thể C3 vagrave C4 (p lt 00001) Tỷ

lệ vagrave nồng độ trung bigravenh của KT khaacuteng C1q đều coacute xu hướng tăng

dần theo mức độ hoạt động của bệnh Tương quan giữa nồng độ KT

khaacuteng C1q với điểm SLICC thận vagrave độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey

trong dự baacuteo đợt cấp thận lupus cũng tốt hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại

23

434 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện tổn thương

da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận giảm BC vagrave giảm bổ thể Độ

nhạy trong dự baacuteo tổn thương thận lupus của KT khaacuteng Nucl cao

hơn so với caacutec khaacuteng thể cograven lại Tương quan với nồng độ bổ thể vagrave

điểm SLEDAI của khaacuteng thể nagravey cũng chặt chẽ hơn caacutec khaacuteng thể

cograven lại

KẾT LUẬN

Qua nghiecircn cứu 128 bệnh nhacircn LBĐHT với nhoacutem chứng gồm

39 người mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec vagrave 30 người khỏe mạnh chuacuteng

tocirci xin đưa ra một số kết luận sau

1 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten của một

số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể

Tỷ lệ dương tiacutenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 855 641 25 vagrave

813 tất cả đều cao hơn rotilde rệt so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở 587 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute

KT khaacuteng dsDNA acircm tiacutenh

Nồng độ trung bigravenh của caacutec KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng

C1q vagrave khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 3221 6034 (IUml) vagrave 945 1385

(IUml) tất cả đều cao hơn so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn coacute độ nhạy cao (8594) nhưng độ đặc

hiệu thấp (6667) với LBĐHT Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh 100 với LBĐHT nhưng độ nhạy

rất thấp (25)

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 19: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

16

liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn

quan với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp tổn thương

da lupus mạn tiacutenh giảm BC vagrave giảm bổ thể Khaacuteng thể khaacuteng C1q

dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện rụng

toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan

với caacutec biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Bảng 312 Liecircn quan giữa caacutec tự khaacuteng thể ở bệnh nhacircn LBĐHT

Khaacuteng thể Tỷ lệ (+) OR p

KTKN (+)

Khaacuteng dsDNA 6932 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3227 393 0012

Khaacuteng Nucl 8924 1089 lt00001

Khaacuteng dsDNA

(+)

KTKN 9943 8135 lt00001

Khaacuteng C1q 3714 274 00005

Khaacuteng Nucl 9543 1144 lt00001

Khaacuteng C1q (+)

Khaacuteng dsDNA 7647 274 00005

KTKN 9529 393 0012

Khaacuteng Nucl 9412 43 0003

Khaacuteng Nucl (+)

KTKN 9333 1089 lt00001

Khaacuteng C1q 3333 43 0003

Khaacuteng dsDNA 6958 1144 lt00001

Sự dương tiacutenh của caacutec tự khaacuteng thể đều coacute mối liecircn quan thuận

coacute yacute nghĩa thống kecirc với nhau (p lt 005) trong đoacute mối liecircn quan rotilde

rệt nhất lagrave giữa 3 khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng Nucl vagrave KTKN

17

Bảng 313 Liecircn quan giữa tự khaacuteng thể với độ hoạt động của bệnh

Khaacuteng thể

Mức độ hoạt động của LBĐHT p

Mạnh

(n = 36) (I)

Trung bigravenh

(n = 67)(II)

Nhẹổn

(n = 185)(III) I vagrave II II vagrave III

KTKN 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Khaacuteng

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Khaacuteng

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

Khaacuteng

Nucl

100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt0000

1

So với nhoacutem bệnh hoạt động trung bigravenh tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh cao hơn rotilde rệt với p =

00025 Nồng độ trung bigravenh của khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave KT

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh đều cao hơn rotilde rệt Tỷ lệ

(+) vagrave nồng độ trung bigravenh của 4 khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh hoạt động

trung bigravenh đều cao hơn so với nhoacutem bệnh hoạt động nhẹ ổn định

Bảng 314 Tương quan giữa nồng độ khaacuteng thể với điểm SLEDAI vagrave

điểm SLICC thận

Khaacuteng thể SLEDAI SLICC thận

r p r p

KTKN 0306 lt00001 0143 lt0013

Khaacuteng dsDNA 056 lt00001 0216 00002

Khaacuteng C1q 0433 lt00001 0399 lt00001

Khaacuteng Nucl 0648 lt00001 0348 00082

18

Nồng độ KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA tương quan thuận

chặt chẽ nhất với điểm SLEDAI (p lt 0001) Nồng độ KT khaacuteng

C1q tương quan chặt chẽ nhất với điểm SLICC thận (r = 0399)

Bảng 315 Thay đổi nồng độ caacutec khaacuteng thể sau đợt cấp

Khaacuteng thể Tỷ lệ

giảm

Khaacutec biệt

trung bigravenh

Test t

gheacutep cặp p

KTKN (OD) 625 -034 -143 016

Khaacuteng dsDNA (IUml) 6458 -19949 -1793 008

Khaacuteng C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

Khaacuteng Nucl (IUml) 8333 -47509 -39 00003

Với 48 đợt cấp được theo dotildei nồng độ trung bigravenh của caacutec KT

khaacuteng C1q (p = 0037) vagrave khaacuteng Nucl (p = 00003) sau đợt cấp giảm

coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Bảng 316 Giaacute trị dự đoaacuten đợt cấp LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 9759 6714 3227 9459

Khaacuteng dsDNA 759 4537 36 823

Khaacuteng C1q 5783 8195 5647 8276

Khaacuteng Nucl 9759 2244 3375 9583

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng C1q 4819 878 6154 8072

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng Nucl 759 4927 3772 8347

Khaacuteng Nucl + Khaacuteng C1q 5783 8439 60 8317

Trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT KTKN vagrave khaacuteng Nucl đều coacute

độ nhạy cao vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh cao gt 94 nhưng độ đặc hiệu

khaacute thấp Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu cao nhất (8195)

đặc biệt khi dương tiacutenh đồng thời với KT khaacuteng dsDNA (878)

19

Chƣơng 4 BAgraveN LUẬN

41 Đặc điểm của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT

411 Phacircn bố về tuổi vagrave giới tỷ lệ bệnh nhacircn nữ chiếm tới

9297 với tuổi trung bigravenh lagrave 311 946 trong đoacute phần lớn thuộc

nhoacutem tuổi từ 16 ndash 45 (929) Kết quả nagravey hoagraven toagraven phugrave hợp với

những kết quả nghiecircn cứu trước đacircy cho thấy đặc điểm dịch tễ học

cơ bản của LBĐHT lagrave thường xảy ra ở phụ nữ trong độ tuổi sinh đẻ

412 Về tuổi khởi phaacutet bệnh phần lớn bệnh nhacircn LBĐHT

khởi phaacutet bệnh trong giai đoạn 15 - 45 tuổi (852) tuổi khởi phaacutet

bệnh trung bigravenh lagrave 2593 974 Khaacute nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học

trecircn qui mocirc lớn cho thấy LBĐHT thường coacute xu hướng khởi phaacutet ở

nữ giới trong nhoacutem tuổi từ 15 - 45 giai đoạn coacute sự hoạt động mạnh

mẽ nhất của caacutec tuyến nội tiết hướng sinh dục nữ

413 Tiền sử gia đigravenh coacute ngƣời mắc LBĐHT 469 số

bệnh nhacircn LBĐHT coacute iacutet nhất một người thacircn trong gia đigravenh cugraveng

mắc bệnh Nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học đatilde cho thấy tỷ lệ mắc

LBĐHT ở những người thacircn của người bệnh thường cao gấp khoảng

10 - 20 lần so với tỷ lệ mắc chung trong cộng đồng (4 - 12) cho

thấy vai trograve của yếu tố di truyền trong cơ chế bệnh sinh của LBĐHT

414 Caacutec biểu hiện của LBĐHT Caacutec biểu hiện bệnh gặp

nhiều nhất lagrave rụng toacutec - 531 tổn thương thận - 453 tổn thương

da lupus cấp baacuten cấp - 383 giảm bạch cầu - 382 vagrave giảm bổ

thể - 622 Những kết quả nagravey khaacute tương đồng với nghiecircn cứu của

nhiều taacutec giả trong vagrave ngoagravei nước tuy nhiecircn tỷ lệ viecircm thanh mạc

tổn thương thần kinh vagrave giảm tiểu cầu gặp khaacute thấp nguyecircn nhacircn coacute

thể do sự khaacutec nhau trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu vagrave sự

khaacutec biệt về đặc điểm lacircm sagraveng của LBĐHT giữa caacutec chủng tộc

20

42 Về tỷ lệ dƣơng tiacutenh vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự

khaacuteng thể

421 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN)

Về tỷ lệ dương tiacutenh 859 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute KTKN

dương tiacutenh ở lần khaacutem 1 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ

dương tiacutenh của KTKN ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute sự dao động khaacute lớn

trong khoảng 60 ndash 100 nguyecircn nhacircn coacute thể lagrave do sự khaacutec biệt

trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu thiết kế nghiecircn cứu kỹ

thuật xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể sự

đảo chiều huyết thanh của KTKN

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm

tiacutenh của KTKN lần lượt lagrave 8594 vagrave 7231 khaacute thấp so với caacutec

kết quả nghiecircn cứu trước đacircy nguyecircn nhacircn coacute thể do nhoacutem bệnh

nhacircn nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute tỷ lệ KTKN acircm tiacutenh khaacute cao

(141) sự khaacutec biệt về caacutech thức lựa chọn vagrave đặc điểm của nhoacutem

chứng Độ đặc hiệu của KTKN với LBĐHT lagrave khaacute thấp (4615)

khi sử dụng nhoacutem chứng mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec nguyecircn nhacircn lagrave

do KTKN coacute thể xuất hiện trong nhiều bệnh lyacute tự miễn khaacutec

422 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA

Về tỷ lệ dương tiacutenh bệnh nhacircn LBĐHT 641 số bệnh nhacircn

LBĐHT trong nghiecircn cứu coacute KT khaacuteng dsDNA dương tiacutenh nằm

trong dải biến thiecircn 37 - 85 của caacutec kết quả nghiecircn cứu trước đacircy

Caacutec yếu tố coacute ảnh hưởng rotilde rệt nhất đến tỷ lệ nagravey lagrave mức độ hoạt

động vagrave tổn thương nội tạng của caacutec đối tượng nghiecircn cứu kỹ thuật

xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ đặc hiệu của KT khaacuteng

dsDNA trong chẩn đoaacuten LBĐHT ở nghiecircn cứu nagravey lagrave 9333 khi sử

dụng nhoacutem chứng khỏe mạnh vagrave 9744 khi sử dụng nhoacutem chứng

21

mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec tức lagrave hoagraven toagraven phugrave hợp với caacutec kết quả

nghiecircn cứu trước đacircy (95 ndash 100) Traacutei với độ đặc hiệu độ nhạy của

KT khaacuteng dsDNA với LBĐHT thường khocircng cao vagrave coacute khoảng dao

động khaacute lớn (13 - 86) Nguyecircn nhacircn coacute thể do tiacutenh chất dao động

thường xuyecircn của khaacuteng thể nagravey trong quaacute trigravenh diễn biến bệnh vagrave

độ nhạy khaacutec nhau của caacutec kỹ thuật xeacutet nghiệm miễn dịch

423 Khaacuteng thể khaacuteng C1q

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở bệnh nhacircn LBĐHT dao động trong khoảng 15 ndash

63 theo caacutec nghiecircn cứu trước đacircy kết quả của chuacuteng tocirci lagrave 25 ở

lần khaacutem 1 Trong 3 nghiecircn cứu coacute cỡ mẫu lớn nhất của Julkunen H

(2012) Mok CC (2010) vagrave Orbai AM (2015) tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q đều tương đối thấp vagrave iacutet coacute sự khaacutec biệt

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT KT khaacuteng C1q coacute giaacute trị keacutem

nhất trong chẩn đoaacuten vagrave phacircn loại LBĐHT với diện tiacutech dưới đường

cong ROC lagrave 0676 vagrave độ nhạy chỉ lagrave 25 Tỷ lệ dương tiacutenh thấp vagrave

dao động thường xuyecircn ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute thể lagrave nguyecircn nhacircn

chiacutenh lagravem giảm độ nhạy của khaacuteng thể nagravey trong chẩn đoaacuten bệnh

424 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome (KT khaacuteng Nucl )

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT Tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT trong nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci

lagrave 813 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ nagravey coacute khoảng dao

động rộng từ 45 đến 100 nguyecircn nhacircn lagrave do sự khaacutec biệt của caacutec

đối tượng nghiecircn cứu về chủng tộc vagrave mức độ hoạt động bệnh

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT nhiều nghiecircn cứu đatilde cho thấy độ

đặc hiệu rất cao của KT khaacuteng Nucl với LBĐHT (90 ndash 100) tương

đồng với kết quả thu được của chuacuteng tocirci lagrave 987 Nguyecircn nhacircn coacute

thể do nucleosome lagrave tự khaacuteng nguyecircn coacute vai trograve quan trọng trong cơ

22

chế bệnh sinh của LBĐHT Độ nhạy của KT khaacuteng Nucl với

LBĐHT trong nghiecircn cứu nagravey lagrave 8125 cao hơn so với KT khaacuteng

dsDNA (6406)

43 Về liecircn quan giữa caacutec khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

431 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh (ge 12

OD) ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với sự xuất

hiện của giảm bổ thể vagrave caacutec tự khaacuteng thể khaacutec Mối liecircn quan giữa

khaacuteng thể nagravey với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của

LBĐHT trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy lagrave khocircng rotilde rệt do thiếu

những bằng chứng đaacuteng tin cậy

432 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với caacutec biểu

hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp hoặc mạn tiacutenh giảm bạch cầu

vagrave giảm bổ thể nhưng khocircng liecircn quan với tổn thương thận lupus

Nồng độ vagrave tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng dsDNA ở nhoacutem bệnh

nhacircn trong đợt cấp đều cao hơn so với nhoacutem ngoagravei đợt cấp tuy nhiecircn

khaacuteng thể nagravey coacute liecircn quan khocircng hằng định với cả hoạt tiacutenh chung

của LBĐHT vagrave tổn thương thận đặc biệt lagrave với đợt cấp của bệnh

433 Khaacuteng thể khaacuteng C1q khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh ở

bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan rotilde rệt với sự xuất hiện của tổn thương

thận vagrave giảm bổ thể Độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey trong dự baacuteo tổn

thương thận lupus cao hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại vagrave nồng độ của noacute

tương quan nghịch khaacute chặt với cả bổ thể C3 vagrave C4 (p lt 00001) Tỷ

lệ vagrave nồng độ trung bigravenh của KT khaacuteng C1q đều coacute xu hướng tăng

dần theo mức độ hoạt động của bệnh Tương quan giữa nồng độ KT

khaacuteng C1q với điểm SLICC thận vagrave độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey

trong dự baacuteo đợt cấp thận lupus cũng tốt hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại

23

434 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện tổn thương

da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận giảm BC vagrave giảm bổ thể Độ

nhạy trong dự baacuteo tổn thương thận lupus của KT khaacuteng Nucl cao

hơn so với caacutec khaacuteng thể cograven lại Tương quan với nồng độ bổ thể vagrave

điểm SLEDAI của khaacuteng thể nagravey cũng chặt chẽ hơn caacutec khaacuteng thể

cograven lại

KẾT LUẬN

Qua nghiecircn cứu 128 bệnh nhacircn LBĐHT với nhoacutem chứng gồm

39 người mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec vagrave 30 người khỏe mạnh chuacuteng

tocirci xin đưa ra một số kết luận sau

1 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten của một

số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể

Tỷ lệ dương tiacutenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 855 641 25 vagrave

813 tất cả đều cao hơn rotilde rệt so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở 587 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute

KT khaacuteng dsDNA acircm tiacutenh

Nồng độ trung bigravenh của caacutec KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng

C1q vagrave khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 3221 6034 (IUml) vagrave 945 1385

(IUml) tất cả đều cao hơn so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn coacute độ nhạy cao (8594) nhưng độ đặc

hiệu thấp (6667) với LBĐHT Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh 100 với LBĐHT nhưng độ nhạy

rất thấp (25)

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 20: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

17

Bảng 313 Liecircn quan giữa tự khaacuteng thể với độ hoạt động của bệnh

Khaacuteng thể

Mức độ hoạt động của LBĐHT p

Mạnh

(n = 36) (I)

Trung bigravenh

(n = 67)(II)

Nhẹổn

(n = 185)(III) I vagrave II II vagrave III

KTKN 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Khaacuteng

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Khaacuteng

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

Khaacuteng

Nucl

100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt0000

1

So với nhoacutem bệnh hoạt động trung bigravenh tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh cao hơn rotilde rệt với p =

00025 Nồng độ trung bigravenh của khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave KT

khaacuteng Nucl ở nhoacutem bệnh hoạt động mạnh đều cao hơn rotilde rệt Tỷ lệ

(+) vagrave nồng độ trung bigravenh của 4 khaacuteng thể ở nhoacutem bệnh hoạt động

trung bigravenh đều cao hơn so với nhoacutem bệnh hoạt động nhẹ ổn định

Bảng 314 Tương quan giữa nồng độ khaacuteng thể với điểm SLEDAI vagrave

điểm SLICC thận

Khaacuteng thể SLEDAI SLICC thận

r p r p

KTKN 0306 lt00001 0143 lt0013

Khaacuteng dsDNA 056 lt00001 0216 00002

Khaacuteng C1q 0433 lt00001 0399 lt00001

Khaacuteng Nucl 0648 lt00001 0348 00082

18

Nồng độ KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA tương quan thuận

chặt chẽ nhất với điểm SLEDAI (p lt 0001) Nồng độ KT khaacuteng

C1q tương quan chặt chẽ nhất với điểm SLICC thận (r = 0399)

Bảng 315 Thay đổi nồng độ caacutec khaacuteng thể sau đợt cấp

Khaacuteng thể Tỷ lệ

giảm

Khaacutec biệt

trung bigravenh

Test t

gheacutep cặp p

KTKN (OD) 625 -034 -143 016

Khaacuteng dsDNA (IUml) 6458 -19949 -1793 008

Khaacuteng C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

Khaacuteng Nucl (IUml) 8333 -47509 -39 00003

Với 48 đợt cấp được theo dotildei nồng độ trung bigravenh của caacutec KT

khaacuteng C1q (p = 0037) vagrave khaacuteng Nucl (p = 00003) sau đợt cấp giảm

coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Bảng 316 Giaacute trị dự đoaacuten đợt cấp LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 9759 6714 3227 9459

Khaacuteng dsDNA 759 4537 36 823

Khaacuteng C1q 5783 8195 5647 8276

Khaacuteng Nucl 9759 2244 3375 9583

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng C1q 4819 878 6154 8072

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng Nucl 759 4927 3772 8347

Khaacuteng Nucl + Khaacuteng C1q 5783 8439 60 8317

Trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT KTKN vagrave khaacuteng Nucl đều coacute

độ nhạy cao vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh cao gt 94 nhưng độ đặc hiệu

khaacute thấp Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu cao nhất (8195)

đặc biệt khi dương tiacutenh đồng thời với KT khaacuteng dsDNA (878)

19

Chƣơng 4 BAgraveN LUẬN

41 Đặc điểm của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT

411 Phacircn bố về tuổi vagrave giới tỷ lệ bệnh nhacircn nữ chiếm tới

9297 với tuổi trung bigravenh lagrave 311 946 trong đoacute phần lớn thuộc

nhoacutem tuổi từ 16 ndash 45 (929) Kết quả nagravey hoagraven toagraven phugrave hợp với

những kết quả nghiecircn cứu trước đacircy cho thấy đặc điểm dịch tễ học

cơ bản của LBĐHT lagrave thường xảy ra ở phụ nữ trong độ tuổi sinh đẻ

412 Về tuổi khởi phaacutet bệnh phần lớn bệnh nhacircn LBĐHT

khởi phaacutet bệnh trong giai đoạn 15 - 45 tuổi (852) tuổi khởi phaacutet

bệnh trung bigravenh lagrave 2593 974 Khaacute nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học

trecircn qui mocirc lớn cho thấy LBĐHT thường coacute xu hướng khởi phaacutet ở

nữ giới trong nhoacutem tuổi từ 15 - 45 giai đoạn coacute sự hoạt động mạnh

mẽ nhất của caacutec tuyến nội tiết hướng sinh dục nữ

413 Tiền sử gia đigravenh coacute ngƣời mắc LBĐHT 469 số

bệnh nhacircn LBĐHT coacute iacutet nhất một người thacircn trong gia đigravenh cugraveng

mắc bệnh Nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học đatilde cho thấy tỷ lệ mắc

LBĐHT ở những người thacircn của người bệnh thường cao gấp khoảng

10 - 20 lần so với tỷ lệ mắc chung trong cộng đồng (4 - 12) cho

thấy vai trograve của yếu tố di truyền trong cơ chế bệnh sinh của LBĐHT

414 Caacutec biểu hiện của LBĐHT Caacutec biểu hiện bệnh gặp

nhiều nhất lagrave rụng toacutec - 531 tổn thương thận - 453 tổn thương

da lupus cấp baacuten cấp - 383 giảm bạch cầu - 382 vagrave giảm bổ

thể - 622 Những kết quả nagravey khaacute tương đồng với nghiecircn cứu của

nhiều taacutec giả trong vagrave ngoagravei nước tuy nhiecircn tỷ lệ viecircm thanh mạc

tổn thương thần kinh vagrave giảm tiểu cầu gặp khaacute thấp nguyecircn nhacircn coacute

thể do sự khaacutec nhau trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu vagrave sự

khaacutec biệt về đặc điểm lacircm sagraveng của LBĐHT giữa caacutec chủng tộc

20

42 Về tỷ lệ dƣơng tiacutenh vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự

khaacuteng thể

421 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN)

Về tỷ lệ dương tiacutenh 859 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute KTKN

dương tiacutenh ở lần khaacutem 1 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ

dương tiacutenh của KTKN ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute sự dao động khaacute lớn

trong khoảng 60 ndash 100 nguyecircn nhacircn coacute thể lagrave do sự khaacutec biệt

trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu thiết kế nghiecircn cứu kỹ

thuật xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể sự

đảo chiều huyết thanh của KTKN

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm

tiacutenh của KTKN lần lượt lagrave 8594 vagrave 7231 khaacute thấp so với caacutec

kết quả nghiecircn cứu trước đacircy nguyecircn nhacircn coacute thể do nhoacutem bệnh

nhacircn nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute tỷ lệ KTKN acircm tiacutenh khaacute cao

(141) sự khaacutec biệt về caacutech thức lựa chọn vagrave đặc điểm của nhoacutem

chứng Độ đặc hiệu của KTKN với LBĐHT lagrave khaacute thấp (4615)

khi sử dụng nhoacutem chứng mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec nguyecircn nhacircn lagrave

do KTKN coacute thể xuất hiện trong nhiều bệnh lyacute tự miễn khaacutec

422 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA

Về tỷ lệ dương tiacutenh bệnh nhacircn LBĐHT 641 số bệnh nhacircn

LBĐHT trong nghiecircn cứu coacute KT khaacuteng dsDNA dương tiacutenh nằm

trong dải biến thiecircn 37 - 85 của caacutec kết quả nghiecircn cứu trước đacircy

Caacutec yếu tố coacute ảnh hưởng rotilde rệt nhất đến tỷ lệ nagravey lagrave mức độ hoạt

động vagrave tổn thương nội tạng của caacutec đối tượng nghiecircn cứu kỹ thuật

xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ đặc hiệu của KT khaacuteng

dsDNA trong chẩn đoaacuten LBĐHT ở nghiecircn cứu nagravey lagrave 9333 khi sử

dụng nhoacutem chứng khỏe mạnh vagrave 9744 khi sử dụng nhoacutem chứng

21

mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec tức lagrave hoagraven toagraven phugrave hợp với caacutec kết quả

nghiecircn cứu trước đacircy (95 ndash 100) Traacutei với độ đặc hiệu độ nhạy của

KT khaacuteng dsDNA với LBĐHT thường khocircng cao vagrave coacute khoảng dao

động khaacute lớn (13 - 86) Nguyecircn nhacircn coacute thể do tiacutenh chất dao động

thường xuyecircn của khaacuteng thể nagravey trong quaacute trigravenh diễn biến bệnh vagrave

độ nhạy khaacutec nhau của caacutec kỹ thuật xeacutet nghiệm miễn dịch

423 Khaacuteng thể khaacuteng C1q

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở bệnh nhacircn LBĐHT dao động trong khoảng 15 ndash

63 theo caacutec nghiecircn cứu trước đacircy kết quả của chuacuteng tocirci lagrave 25 ở

lần khaacutem 1 Trong 3 nghiecircn cứu coacute cỡ mẫu lớn nhất của Julkunen H

(2012) Mok CC (2010) vagrave Orbai AM (2015) tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q đều tương đối thấp vagrave iacutet coacute sự khaacutec biệt

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT KT khaacuteng C1q coacute giaacute trị keacutem

nhất trong chẩn đoaacuten vagrave phacircn loại LBĐHT với diện tiacutech dưới đường

cong ROC lagrave 0676 vagrave độ nhạy chỉ lagrave 25 Tỷ lệ dương tiacutenh thấp vagrave

dao động thường xuyecircn ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute thể lagrave nguyecircn nhacircn

chiacutenh lagravem giảm độ nhạy của khaacuteng thể nagravey trong chẩn đoaacuten bệnh

424 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome (KT khaacuteng Nucl )

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT Tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT trong nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci

lagrave 813 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ nagravey coacute khoảng dao

động rộng từ 45 đến 100 nguyecircn nhacircn lagrave do sự khaacutec biệt của caacutec

đối tượng nghiecircn cứu về chủng tộc vagrave mức độ hoạt động bệnh

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT nhiều nghiecircn cứu đatilde cho thấy độ

đặc hiệu rất cao của KT khaacuteng Nucl với LBĐHT (90 ndash 100) tương

đồng với kết quả thu được của chuacuteng tocirci lagrave 987 Nguyecircn nhacircn coacute

thể do nucleosome lagrave tự khaacuteng nguyecircn coacute vai trograve quan trọng trong cơ

22

chế bệnh sinh của LBĐHT Độ nhạy của KT khaacuteng Nucl với

LBĐHT trong nghiecircn cứu nagravey lagrave 8125 cao hơn so với KT khaacuteng

dsDNA (6406)

43 Về liecircn quan giữa caacutec khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

431 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh (ge 12

OD) ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với sự xuất

hiện của giảm bổ thể vagrave caacutec tự khaacuteng thể khaacutec Mối liecircn quan giữa

khaacuteng thể nagravey với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của

LBĐHT trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy lagrave khocircng rotilde rệt do thiếu

những bằng chứng đaacuteng tin cậy

432 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với caacutec biểu

hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp hoặc mạn tiacutenh giảm bạch cầu

vagrave giảm bổ thể nhưng khocircng liecircn quan với tổn thương thận lupus

Nồng độ vagrave tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng dsDNA ở nhoacutem bệnh

nhacircn trong đợt cấp đều cao hơn so với nhoacutem ngoagravei đợt cấp tuy nhiecircn

khaacuteng thể nagravey coacute liecircn quan khocircng hằng định với cả hoạt tiacutenh chung

của LBĐHT vagrave tổn thương thận đặc biệt lagrave với đợt cấp của bệnh

433 Khaacuteng thể khaacuteng C1q khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh ở

bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan rotilde rệt với sự xuất hiện của tổn thương

thận vagrave giảm bổ thể Độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey trong dự baacuteo tổn

thương thận lupus cao hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại vagrave nồng độ của noacute

tương quan nghịch khaacute chặt với cả bổ thể C3 vagrave C4 (p lt 00001) Tỷ

lệ vagrave nồng độ trung bigravenh của KT khaacuteng C1q đều coacute xu hướng tăng

dần theo mức độ hoạt động của bệnh Tương quan giữa nồng độ KT

khaacuteng C1q với điểm SLICC thận vagrave độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey

trong dự baacuteo đợt cấp thận lupus cũng tốt hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại

23

434 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện tổn thương

da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận giảm BC vagrave giảm bổ thể Độ

nhạy trong dự baacuteo tổn thương thận lupus của KT khaacuteng Nucl cao

hơn so với caacutec khaacuteng thể cograven lại Tương quan với nồng độ bổ thể vagrave

điểm SLEDAI của khaacuteng thể nagravey cũng chặt chẽ hơn caacutec khaacuteng thể

cograven lại

KẾT LUẬN

Qua nghiecircn cứu 128 bệnh nhacircn LBĐHT với nhoacutem chứng gồm

39 người mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec vagrave 30 người khỏe mạnh chuacuteng

tocirci xin đưa ra một số kết luận sau

1 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten của một

số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể

Tỷ lệ dương tiacutenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 855 641 25 vagrave

813 tất cả đều cao hơn rotilde rệt so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở 587 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute

KT khaacuteng dsDNA acircm tiacutenh

Nồng độ trung bigravenh của caacutec KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng

C1q vagrave khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 3221 6034 (IUml) vagrave 945 1385

(IUml) tất cả đều cao hơn so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn coacute độ nhạy cao (8594) nhưng độ đặc

hiệu thấp (6667) với LBĐHT Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh 100 với LBĐHT nhưng độ nhạy

rất thấp (25)

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 21: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

18

Nồng độ KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA tương quan thuận

chặt chẽ nhất với điểm SLEDAI (p lt 0001) Nồng độ KT khaacuteng

C1q tương quan chặt chẽ nhất với điểm SLICC thận (r = 0399)

Bảng 315 Thay đổi nồng độ caacutec khaacuteng thể sau đợt cấp

Khaacuteng thể Tỷ lệ

giảm

Khaacutec biệt

trung bigravenh

Test t

gheacutep cặp p

KTKN (OD) 625 -034 -143 016

Khaacuteng dsDNA (IUml) 6458 -19949 -1793 008

Khaacuteng C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

Khaacuteng Nucl (IUml) 8333 -47509 -39 00003

Với 48 đợt cấp được theo dotildei nồng độ trung bigravenh của caacutec KT

khaacuteng C1q (p = 0037) vagrave khaacuteng Nucl (p = 00003) sau đợt cấp giảm

coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Bảng 316 Giaacute trị dự đoaacuten đợt cấp LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể Độ nhạy Độ đặc

hiệu

Giaacute trị dự

baacuteo (+)

Giaacute trị dự

baacuteo (-)

KTKN 9759 6714 3227 9459

Khaacuteng dsDNA 759 4537 36 823

Khaacuteng C1q 5783 8195 5647 8276

Khaacuteng Nucl 9759 2244 3375 9583

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng C1q 4819 878 6154 8072

Khaacuteng dsDNA + Khaacuteng Nucl 759 4927 3772 8347

Khaacuteng Nucl + Khaacuteng C1q 5783 8439 60 8317

Trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT KTKN vagrave khaacuteng Nucl đều coacute

độ nhạy cao vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm tiacutenh cao gt 94 nhưng độ đặc hiệu

khaacute thấp Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu cao nhất (8195)

đặc biệt khi dương tiacutenh đồng thời với KT khaacuteng dsDNA (878)

19

Chƣơng 4 BAgraveN LUẬN

41 Đặc điểm của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT

411 Phacircn bố về tuổi vagrave giới tỷ lệ bệnh nhacircn nữ chiếm tới

9297 với tuổi trung bigravenh lagrave 311 946 trong đoacute phần lớn thuộc

nhoacutem tuổi từ 16 ndash 45 (929) Kết quả nagravey hoagraven toagraven phugrave hợp với

những kết quả nghiecircn cứu trước đacircy cho thấy đặc điểm dịch tễ học

cơ bản của LBĐHT lagrave thường xảy ra ở phụ nữ trong độ tuổi sinh đẻ

412 Về tuổi khởi phaacutet bệnh phần lớn bệnh nhacircn LBĐHT

khởi phaacutet bệnh trong giai đoạn 15 - 45 tuổi (852) tuổi khởi phaacutet

bệnh trung bigravenh lagrave 2593 974 Khaacute nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học

trecircn qui mocirc lớn cho thấy LBĐHT thường coacute xu hướng khởi phaacutet ở

nữ giới trong nhoacutem tuổi từ 15 - 45 giai đoạn coacute sự hoạt động mạnh

mẽ nhất của caacutec tuyến nội tiết hướng sinh dục nữ

413 Tiền sử gia đigravenh coacute ngƣời mắc LBĐHT 469 số

bệnh nhacircn LBĐHT coacute iacutet nhất một người thacircn trong gia đigravenh cugraveng

mắc bệnh Nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học đatilde cho thấy tỷ lệ mắc

LBĐHT ở những người thacircn của người bệnh thường cao gấp khoảng

10 - 20 lần so với tỷ lệ mắc chung trong cộng đồng (4 - 12) cho

thấy vai trograve của yếu tố di truyền trong cơ chế bệnh sinh của LBĐHT

414 Caacutec biểu hiện của LBĐHT Caacutec biểu hiện bệnh gặp

nhiều nhất lagrave rụng toacutec - 531 tổn thương thận - 453 tổn thương

da lupus cấp baacuten cấp - 383 giảm bạch cầu - 382 vagrave giảm bổ

thể - 622 Những kết quả nagravey khaacute tương đồng với nghiecircn cứu của

nhiều taacutec giả trong vagrave ngoagravei nước tuy nhiecircn tỷ lệ viecircm thanh mạc

tổn thương thần kinh vagrave giảm tiểu cầu gặp khaacute thấp nguyecircn nhacircn coacute

thể do sự khaacutec nhau trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu vagrave sự

khaacutec biệt về đặc điểm lacircm sagraveng của LBĐHT giữa caacutec chủng tộc

20

42 Về tỷ lệ dƣơng tiacutenh vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự

khaacuteng thể

421 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN)

Về tỷ lệ dương tiacutenh 859 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute KTKN

dương tiacutenh ở lần khaacutem 1 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ

dương tiacutenh của KTKN ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute sự dao động khaacute lớn

trong khoảng 60 ndash 100 nguyecircn nhacircn coacute thể lagrave do sự khaacutec biệt

trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu thiết kế nghiecircn cứu kỹ

thuật xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể sự

đảo chiều huyết thanh của KTKN

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm

tiacutenh của KTKN lần lượt lagrave 8594 vagrave 7231 khaacute thấp so với caacutec

kết quả nghiecircn cứu trước đacircy nguyecircn nhacircn coacute thể do nhoacutem bệnh

nhacircn nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute tỷ lệ KTKN acircm tiacutenh khaacute cao

(141) sự khaacutec biệt về caacutech thức lựa chọn vagrave đặc điểm của nhoacutem

chứng Độ đặc hiệu của KTKN với LBĐHT lagrave khaacute thấp (4615)

khi sử dụng nhoacutem chứng mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec nguyecircn nhacircn lagrave

do KTKN coacute thể xuất hiện trong nhiều bệnh lyacute tự miễn khaacutec

422 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA

Về tỷ lệ dương tiacutenh bệnh nhacircn LBĐHT 641 số bệnh nhacircn

LBĐHT trong nghiecircn cứu coacute KT khaacuteng dsDNA dương tiacutenh nằm

trong dải biến thiecircn 37 - 85 của caacutec kết quả nghiecircn cứu trước đacircy

Caacutec yếu tố coacute ảnh hưởng rotilde rệt nhất đến tỷ lệ nagravey lagrave mức độ hoạt

động vagrave tổn thương nội tạng của caacutec đối tượng nghiecircn cứu kỹ thuật

xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ đặc hiệu của KT khaacuteng

dsDNA trong chẩn đoaacuten LBĐHT ở nghiecircn cứu nagravey lagrave 9333 khi sử

dụng nhoacutem chứng khỏe mạnh vagrave 9744 khi sử dụng nhoacutem chứng

21

mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec tức lagrave hoagraven toagraven phugrave hợp với caacutec kết quả

nghiecircn cứu trước đacircy (95 ndash 100) Traacutei với độ đặc hiệu độ nhạy của

KT khaacuteng dsDNA với LBĐHT thường khocircng cao vagrave coacute khoảng dao

động khaacute lớn (13 - 86) Nguyecircn nhacircn coacute thể do tiacutenh chất dao động

thường xuyecircn của khaacuteng thể nagravey trong quaacute trigravenh diễn biến bệnh vagrave

độ nhạy khaacutec nhau của caacutec kỹ thuật xeacutet nghiệm miễn dịch

423 Khaacuteng thể khaacuteng C1q

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở bệnh nhacircn LBĐHT dao động trong khoảng 15 ndash

63 theo caacutec nghiecircn cứu trước đacircy kết quả của chuacuteng tocirci lagrave 25 ở

lần khaacutem 1 Trong 3 nghiecircn cứu coacute cỡ mẫu lớn nhất của Julkunen H

(2012) Mok CC (2010) vagrave Orbai AM (2015) tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q đều tương đối thấp vagrave iacutet coacute sự khaacutec biệt

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT KT khaacuteng C1q coacute giaacute trị keacutem

nhất trong chẩn đoaacuten vagrave phacircn loại LBĐHT với diện tiacutech dưới đường

cong ROC lagrave 0676 vagrave độ nhạy chỉ lagrave 25 Tỷ lệ dương tiacutenh thấp vagrave

dao động thường xuyecircn ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute thể lagrave nguyecircn nhacircn

chiacutenh lagravem giảm độ nhạy của khaacuteng thể nagravey trong chẩn đoaacuten bệnh

424 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome (KT khaacuteng Nucl )

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT Tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT trong nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci

lagrave 813 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ nagravey coacute khoảng dao

động rộng từ 45 đến 100 nguyecircn nhacircn lagrave do sự khaacutec biệt của caacutec

đối tượng nghiecircn cứu về chủng tộc vagrave mức độ hoạt động bệnh

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT nhiều nghiecircn cứu đatilde cho thấy độ

đặc hiệu rất cao của KT khaacuteng Nucl với LBĐHT (90 ndash 100) tương

đồng với kết quả thu được của chuacuteng tocirci lagrave 987 Nguyecircn nhacircn coacute

thể do nucleosome lagrave tự khaacuteng nguyecircn coacute vai trograve quan trọng trong cơ

22

chế bệnh sinh của LBĐHT Độ nhạy của KT khaacuteng Nucl với

LBĐHT trong nghiecircn cứu nagravey lagrave 8125 cao hơn so với KT khaacuteng

dsDNA (6406)

43 Về liecircn quan giữa caacutec khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

431 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh (ge 12

OD) ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với sự xuất

hiện của giảm bổ thể vagrave caacutec tự khaacuteng thể khaacutec Mối liecircn quan giữa

khaacuteng thể nagravey với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của

LBĐHT trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy lagrave khocircng rotilde rệt do thiếu

những bằng chứng đaacuteng tin cậy

432 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với caacutec biểu

hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp hoặc mạn tiacutenh giảm bạch cầu

vagrave giảm bổ thể nhưng khocircng liecircn quan với tổn thương thận lupus

Nồng độ vagrave tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng dsDNA ở nhoacutem bệnh

nhacircn trong đợt cấp đều cao hơn so với nhoacutem ngoagravei đợt cấp tuy nhiecircn

khaacuteng thể nagravey coacute liecircn quan khocircng hằng định với cả hoạt tiacutenh chung

của LBĐHT vagrave tổn thương thận đặc biệt lagrave với đợt cấp của bệnh

433 Khaacuteng thể khaacuteng C1q khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh ở

bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan rotilde rệt với sự xuất hiện của tổn thương

thận vagrave giảm bổ thể Độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey trong dự baacuteo tổn

thương thận lupus cao hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại vagrave nồng độ của noacute

tương quan nghịch khaacute chặt với cả bổ thể C3 vagrave C4 (p lt 00001) Tỷ

lệ vagrave nồng độ trung bigravenh của KT khaacuteng C1q đều coacute xu hướng tăng

dần theo mức độ hoạt động của bệnh Tương quan giữa nồng độ KT

khaacuteng C1q với điểm SLICC thận vagrave độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey

trong dự baacuteo đợt cấp thận lupus cũng tốt hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại

23

434 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện tổn thương

da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận giảm BC vagrave giảm bổ thể Độ

nhạy trong dự baacuteo tổn thương thận lupus của KT khaacuteng Nucl cao

hơn so với caacutec khaacuteng thể cograven lại Tương quan với nồng độ bổ thể vagrave

điểm SLEDAI của khaacuteng thể nagravey cũng chặt chẽ hơn caacutec khaacuteng thể

cograven lại

KẾT LUẬN

Qua nghiecircn cứu 128 bệnh nhacircn LBĐHT với nhoacutem chứng gồm

39 người mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec vagrave 30 người khỏe mạnh chuacuteng

tocirci xin đưa ra một số kết luận sau

1 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten của một

số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể

Tỷ lệ dương tiacutenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 855 641 25 vagrave

813 tất cả đều cao hơn rotilde rệt so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở 587 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute

KT khaacuteng dsDNA acircm tiacutenh

Nồng độ trung bigravenh của caacutec KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng

C1q vagrave khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 3221 6034 (IUml) vagrave 945 1385

(IUml) tất cả đều cao hơn so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn coacute độ nhạy cao (8594) nhưng độ đặc

hiệu thấp (6667) với LBĐHT Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh 100 với LBĐHT nhưng độ nhạy

rất thấp (25)

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 22: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

19

Chƣơng 4 BAgraveN LUẬN

41 Đặc điểm của caacutec bệnh nhacircn LBĐHT

411 Phacircn bố về tuổi vagrave giới tỷ lệ bệnh nhacircn nữ chiếm tới

9297 với tuổi trung bigravenh lagrave 311 946 trong đoacute phần lớn thuộc

nhoacutem tuổi từ 16 ndash 45 (929) Kết quả nagravey hoagraven toagraven phugrave hợp với

những kết quả nghiecircn cứu trước đacircy cho thấy đặc điểm dịch tễ học

cơ bản của LBĐHT lagrave thường xảy ra ở phụ nữ trong độ tuổi sinh đẻ

412 Về tuổi khởi phaacutet bệnh phần lớn bệnh nhacircn LBĐHT

khởi phaacutet bệnh trong giai đoạn 15 - 45 tuổi (852) tuổi khởi phaacutet

bệnh trung bigravenh lagrave 2593 974 Khaacute nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học

trecircn qui mocirc lớn cho thấy LBĐHT thường coacute xu hướng khởi phaacutet ở

nữ giới trong nhoacutem tuổi từ 15 - 45 giai đoạn coacute sự hoạt động mạnh

mẽ nhất của caacutec tuyến nội tiết hướng sinh dục nữ

413 Tiền sử gia đigravenh coacute ngƣời mắc LBĐHT 469 số

bệnh nhacircn LBĐHT coacute iacutet nhất một người thacircn trong gia đigravenh cugraveng

mắc bệnh Nhiều nghiecircn cứu dịch tễ học đatilde cho thấy tỷ lệ mắc

LBĐHT ở những người thacircn của người bệnh thường cao gấp khoảng

10 - 20 lần so với tỷ lệ mắc chung trong cộng đồng (4 - 12) cho

thấy vai trograve của yếu tố di truyền trong cơ chế bệnh sinh của LBĐHT

414 Caacutec biểu hiện của LBĐHT Caacutec biểu hiện bệnh gặp

nhiều nhất lagrave rụng toacutec - 531 tổn thương thận - 453 tổn thương

da lupus cấp baacuten cấp - 383 giảm bạch cầu - 382 vagrave giảm bổ

thể - 622 Những kết quả nagravey khaacute tương đồng với nghiecircn cứu của

nhiều taacutec giả trong vagrave ngoagravei nước tuy nhiecircn tỷ lệ viecircm thanh mạc

tổn thương thần kinh vagrave giảm tiểu cầu gặp khaacute thấp nguyecircn nhacircn coacute

thể do sự khaacutec nhau trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu vagrave sự

khaacutec biệt về đặc điểm lacircm sagraveng của LBĐHT giữa caacutec chủng tộc

20

42 Về tỷ lệ dƣơng tiacutenh vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự

khaacuteng thể

421 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN)

Về tỷ lệ dương tiacutenh 859 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute KTKN

dương tiacutenh ở lần khaacutem 1 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ

dương tiacutenh của KTKN ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute sự dao động khaacute lớn

trong khoảng 60 ndash 100 nguyecircn nhacircn coacute thể lagrave do sự khaacutec biệt

trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu thiết kế nghiecircn cứu kỹ

thuật xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể sự

đảo chiều huyết thanh của KTKN

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm

tiacutenh của KTKN lần lượt lagrave 8594 vagrave 7231 khaacute thấp so với caacutec

kết quả nghiecircn cứu trước đacircy nguyecircn nhacircn coacute thể do nhoacutem bệnh

nhacircn nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute tỷ lệ KTKN acircm tiacutenh khaacute cao

(141) sự khaacutec biệt về caacutech thức lựa chọn vagrave đặc điểm của nhoacutem

chứng Độ đặc hiệu của KTKN với LBĐHT lagrave khaacute thấp (4615)

khi sử dụng nhoacutem chứng mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec nguyecircn nhacircn lagrave

do KTKN coacute thể xuất hiện trong nhiều bệnh lyacute tự miễn khaacutec

422 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA

Về tỷ lệ dương tiacutenh bệnh nhacircn LBĐHT 641 số bệnh nhacircn

LBĐHT trong nghiecircn cứu coacute KT khaacuteng dsDNA dương tiacutenh nằm

trong dải biến thiecircn 37 - 85 của caacutec kết quả nghiecircn cứu trước đacircy

Caacutec yếu tố coacute ảnh hưởng rotilde rệt nhất đến tỷ lệ nagravey lagrave mức độ hoạt

động vagrave tổn thương nội tạng của caacutec đối tượng nghiecircn cứu kỹ thuật

xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ đặc hiệu của KT khaacuteng

dsDNA trong chẩn đoaacuten LBĐHT ở nghiecircn cứu nagravey lagrave 9333 khi sử

dụng nhoacutem chứng khỏe mạnh vagrave 9744 khi sử dụng nhoacutem chứng

21

mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec tức lagrave hoagraven toagraven phugrave hợp với caacutec kết quả

nghiecircn cứu trước đacircy (95 ndash 100) Traacutei với độ đặc hiệu độ nhạy của

KT khaacuteng dsDNA với LBĐHT thường khocircng cao vagrave coacute khoảng dao

động khaacute lớn (13 - 86) Nguyecircn nhacircn coacute thể do tiacutenh chất dao động

thường xuyecircn của khaacuteng thể nagravey trong quaacute trigravenh diễn biến bệnh vagrave

độ nhạy khaacutec nhau của caacutec kỹ thuật xeacutet nghiệm miễn dịch

423 Khaacuteng thể khaacuteng C1q

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở bệnh nhacircn LBĐHT dao động trong khoảng 15 ndash

63 theo caacutec nghiecircn cứu trước đacircy kết quả của chuacuteng tocirci lagrave 25 ở

lần khaacutem 1 Trong 3 nghiecircn cứu coacute cỡ mẫu lớn nhất của Julkunen H

(2012) Mok CC (2010) vagrave Orbai AM (2015) tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q đều tương đối thấp vagrave iacutet coacute sự khaacutec biệt

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT KT khaacuteng C1q coacute giaacute trị keacutem

nhất trong chẩn đoaacuten vagrave phacircn loại LBĐHT với diện tiacutech dưới đường

cong ROC lagrave 0676 vagrave độ nhạy chỉ lagrave 25 Tỷ lệ dương tiacutenh thấp vagrave

dao động thường xuyecircn ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute thể lagrave nguyecircn nhacircn

chiacutenh lagravem giảm độ nhạy của khaacuteng thể nagravey trong chẩn đoaacuten bệnh

424 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome (KT khaacuteng Nucl )

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT Tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT trong nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci

lagrave 813 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ nagravey coacute khoảng dao

động rộng từ 45 đến 100 nguyecircn nhacircn lagrave do sự khaacutec biệt của caacutec

đối tượng nghiecircn cứu về chủng tộc vagrave mức độ hoạt động bệnh

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT nhiều nghiecircn cứu đatilde cho thấy độ

đặc hiệu rất cao của KT khaacuteng Nucl với LBĐHT (90 ndash 100) tương

đồng với kết quả thu được của chuacuteng tocirci lagrave 987 Nguyecircn nhacircn coacute

thể do nucleosome lagrave tự khaacuteng nguyecircn coacute vai trograve quan trọng trong cơ

22

chế bệnh sinh của LBĐHT Độ nhạy của KT khaacuteng Nucl với

LBĐHT trong nghiecircn cứu nagravey lagrave 8125 cao hơn so với KT khaacuteng

dsDNA (6406)

43 Về liecircn quan giữa caacutec khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

431 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh (ge 12

OD) ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với sự xuất

hiện của giảm bổ thể vagrave caacutec tự khaacuteng thể khaacutec Mối liecircn quan giữa

khaacuteng thể nagravey với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của

LBĐHT trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy lagrave khocircng rotilde rệt do thiếu

những bằng chứng đaacuteng tin cậy

432 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với caacutec biểu

hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp hoặc mạn tiacutenh giảm bạch cầu

vagrave giảm bổ thể nhưng khocircng liecircn quan với tổn thương thận lupus

Nồng độ vagrave tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng dsDNA ở nhoacutem bệnh

nhacircn trong đợt cấp đều cao hơn so với nhoacutem ngoagravei đợt cấp tuy nhiecircn

khaacuteng thể nagravey coacute liecircn quan khocircng hằng định với cả hoạt tiacutenh chung

của LBĐHT vagrave tổn thương thận đặc biệt lagrave với đợt cấp của bệnh

433 Khaacuteng thể khaacuteng C1q khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh ở

bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan rotilde rệt với sự xuất hiện của tổn thương

thận vagrave giảm bổ thể Độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey trong dự baacuteo tổn

thương thận lupus cao hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại vagrave nồng độ của noacute

tương quan nghịch khaacute chặt với cả bổ thể C3 vagrave C4 (p lt 00001) Tỷ

lệ vagrave nồng độ trung bigravenh của KT khaacuteng C1q đều coacute xu hướng tăng

dần theo mức độ hoạt động của bệnh Tương quan giữa nồng độ KT

khaacuteng C1q với điểm SLICC thận vagrave độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey

trong dự baacuteo đợt cấp thận lupus cũng tốt hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại

23

434 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện tổn thương

da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận giảm BC vagrave giảm bổ thể Độ

nhạy trong dự baacuteo tổn thương thận lupus của KT khaacuteng Nucl cao

hơn so với caacutec khaacuteng thể cograven lại Tương quan với nồng độ bổ thể vagrave

điểm SLEDAI của khaacuteng thể nagravey cũng chặt chẽ hơn caacutec khaacuteng thể

cograven lại

KẾT LUẬN

Qua nghiecircn cứu 128 bệnh nhacircn LBĐHT với nhoacutem chứng gồm

39 người mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec vagrave 30 người khỏe mạnh chuacuteng

tocirci xin đưa ra một số kết luận sau

1 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten của một

số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể

Tỷ lệ dương tiacutenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 855 641 25 vagrave

813 tất cả đều cao hơn rotilde rệt so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở 587 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute

KT khaacuteng dsDNA acircm tiacutenh

Nồng độ trung bigravenh của caacutec KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng

C1q vagrave khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 3221 6034 (IUml) vagrave 945 1385

(IUml) tất cả đều cao hơn so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn coacute độ nhạy cao (8594) nhưng độ đặc

hiệu thấp (6667) với LBĐHT Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh 100 với LBĐHT nhưng độ nhạy

rất thấp (25)

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 23: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

20

42 Về tỷ lệ dƣơng tiacutenh vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự

khaacuteng thể

421 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN)

Về tỷ lệ dương tiacutenh 859 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute KTKN

dương tiacutenh ở lần khaacutem 1 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ

dương tiacutenh của KTKN ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute sự dao động khaacute lớn

trong khoảng 60 ndash 100 nguyecircn nhacircn coacute thể lagrave do sự khaacutec biệt

trong caacutech lựa chọn đối tượng nghiecircn cứu thiết kế nghiecircn cứu kỹ

thuật xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể sự

đảo chiều huyết thanh của KTKN

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ nhạy vagrave giaacute trị dự baacuteo acircm

tiacutenh của KTKN lần lượt lagrave 8594 vagrave 7231 khaacute thấp so với caacutec

kết quả nghiecircn cứu trước đacircy nguyecircn nhacircn coacute thể do nhoacutem bệnh

nhacircn nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci coacute tỷ lệ KTKN acircm tiacutenh khaacute cao

(141) sự khaacutec biệt về caacutech thức lựa chọn vagrave đặc điểm của nhoacutem

chứng Độ đặc hiệu của KTKN với LBĐHT lagrave khaacute thấp (4615)

khi sử dụng nhoacutem chứng mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec nguyecircn nhacircn lagrave

do KTKN coacute thể xuất hiện trong nhiều bệnh lyacute tự miễn khaacutec

422 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA

Về tỷ lệ dương tiacutenh bệnh nhacircn LBĐHT 641 số bệnh nhacircn

LBĐHT trong nghiecircn cứu coacute KT khaacuteng dsDNA dương tiacutenh nằm

trong dải biến thiecircn 37 - 85 của caacutec kết quả nghiecircn cứu trước đacircy

Caacutec yếu tố coacute ảnh hưởng rotilde rệt nhất đến tỷ lệ nagravey lagrave mức độ hoạt

động vagrave tổn thương nội tạng của caacutec đối tượng nghiecircn cứu kỹ thuật

xeacutet nghiệm vagrave điểm cắt đaacutenh giaacute dương tiacutenh của khaacuteng thể

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT độ đặc hiệu của KT khaacuteng

dsDNA trong chẩn đoaacuten LBĐHT ở nghiecircn cứu nagravey lagrave 9333 khi sử

dụng nhoacutem chứng khỏe mạnh vagrave 9744 khi sử dụng nhoacutem chứng

21

mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec tức lagrave hoagraven toagraven phugrave hợp với caacutec kết quả

nghiecircn cứu trước đacircy (95 ndash 100) Traacutei với độ đặc hiệu độ nhạy của

KT khaacuteng dsDNA với LBĐHT thường khocircng cao vagrave coacute khoảng dao

động khaacute lớn (13 - 86) Nguyecircn nhacircn coacute thể do tiacutenh chất dao động

thường xuyecircn của khaacuteng thể nagravey trong quaacute trigravenh diễn biến bệnh vagrave

độ nhạy khaacutec nhau của caacutec kỹ thuật xeacutet nghiệm miễn dịch

423 Khaacuteng thể khaacuteng C1q

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở bệnh nhacircn LBĐHT dao động trong khoảng 15 ndash

63 theo caacutec nghiecircn cứu trước đacircy kết quả của chuacuteng tocirci lagrave 25 ở

lần khaacutem 1 Trong 3 nghiecircn cứu coacute cỡ mẫu lớn nhất của Julkunen H

(2012) Mok CC (2010) vagrave Orbai AM (2015) tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q đều tương đối thấp vagrave iacutet coacute sự khaacutec biệt

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT KT khaacuteng C1q coacute giaacute trị keacutem

nhất trong chẩn đoaacuten vagrave phacircn loại LBĐHT với diện tiacutech dưới đường

cong ROC lagrave 0676 vagrave độ nhạy chỉ lagrave 25 Tỷ lệ dương tiacutenh thấp vagrave

dao động thường xuyecircn ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute thể lagrave nguyecircn nhacircn

chiacutenh lagravem giảm độ nhạy của khaacuteng thể nagravey trong chẩn đoaacuten bệnh

424 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome (KT khaacuteng Nucl )

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT Tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT trong nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci

lagrave 813 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ nagravey coacute khoảng dao

động rộng từ 45 đến 100 nguyecircn nhacircn lagrave do sự khaacutec biệt của caacutec

đối tượng nghiecircn cứu về chủng tộc vagrave mức độ hoạt động bệnh

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT nhiều nghiecircn cứu đatilde cho thấy độ

đặc hiệu rất cao của KT khaacuteng Nucl với LBĐHT (90 ndash 100) tương

đồng với kết quả thu được của chuacuteng tocirci lagrave 987 Nguyecircn nhacircn coacute

thể do nucleosome lagrave tự khaacuteng nguyecircn coacute vai trograve quan trọng trong cơ

22

chế bệnh sinh của LBĐHT Độ nhạy của KT khaacuteng Nucl với

LBĐHT trong nghiecircn cứu nagravey lagrave 8125 cao hơn so với KT khaacuteng

dsDNA (6406)

43 Về liecircn quan giữa caacutec khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

431 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh (ge 12

OD) ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với sự xuất

hiện của giảm bổ thể vagrave caacutec tự khaacuteng thể khaacutec Mối liecircn quan giữa

khaacuteng thể nagravey với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của

LBĐHT trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy lagrave khocircng rotilde rệt do thiếu

những bằng chứng đaacuteng tin cậy

432 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với caacutec biểu

hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp hoặc mạn tiacutenh giảm bạch cầu

vagrave giảm bổ thể nhưng khocircng liecircn quan với tổn thương thận lupus

Nồng độ vagrave tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng dsDNA ở nhoacutem bệnh

nhacircn trong đợt cấp đều cao hơn so với nhoacutem ngoagravei đợt cấp tuy nhiecircn

khaacuteng thể nagravey coacute liecircn quan khocircng hằng định với cả hoạt tiacutenh chung

của LBĐHT vagrave tổn thương thận đặc biệt lagrave với đợt cấp của bệnh

433 Khaacuteng thể khaacuteng C1q khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh ở

bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan rotilde rệt với sự xuất hiện của tổn thương

thận vagrave giảm bổ thể Độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey trong dự baacuteo tổn

thương thận lupus cao hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại vagrave nồng độ của noacute

tương quan nghịch khaacute chặt với cả bổ thể C3 vagrave C4 (p lt 00001) Tỷ

lệ vagrave nồng độ trung bigravenh của KT khaacuteng C1q đều coacute xu hướng tăng

dần theo mức độ hoạt động của bệnh Tương quan giữa nồng độ KT

khaacuteng C1q với điểm SLICC thận vagrave độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey

trong dự baacuteo đợt cấp thận lupus cũng tốt hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại

23

434 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện tổn thương

da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận giảm BC vagrave giảm bổ thể Độ

nhạy trong dự baacuteo tổn thương thận lupus của KT khaacuteng Nucl cao

hơn so với caacutec khaacuteng thể cograven lại Tương quan với nồng độ bổ thể vagrave

điểm SLEDAI của khaacuteng thể nagravey cũng chặt chẽ hơn caacutec khaacuteng thể

cograven lại

KẾT LUẬN

Qua nghiecircn cứu 128 bệnh nhacircn LBĐHT với nhoacutem chứng gồm

39 người mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec vagrave 30 người khỏe mạnh chuacuteng

tocirci xin đưa ra một số kết luận sau

1 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten của một

số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể

Tỷ lệ dương tiacutenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 855 641 25 vagrave

813 tất cả đều cao hơn rotilde rệt so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở 587 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute

KT khaacuteng dsDNA acircm tiacutenh

Nồng độ trung bigravenh của caacutec KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng

C1q vagrave khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 3221 6034 (IUml) vagrave 945 1385

(IUml) tất cả đều cao hơn so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn coacute độ nhạy cao (8594) nhưng độ đặc

hiệu thấp (6667) với LBĐHT Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh 100 với LBĐHT nhưng độ nhạy

rất thấp (25)

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 24: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

21

mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec tức lagrave hoagraven toagraven phugrave hợp với caacutec kết quả

nghiecircn cứu trước đacircy (95 ndash 100) Traacutei với độ đặc hiệu độ nhạy của

KT khaacuteng dsDNA với LBĐHT thường khocircng cao vagrave coacute khoảng dao

động khaacute lớn (13 - 86) Nguyecircn nhacircn coacute thể do tiacutenh chất dao động

thường xuyecircn của khaacuteng thể nagravey trong quaacute trigravenh diễn biến bệnh vagrave

độ nhạy khaacutec nhau của caacutec kỹ thuật xeacutet nghiệm miễn dịch

423 Khaacuteng thể khaacuteng C1q

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q ở bệnh nhacircn LBĐHT dao động trong khoảng 15 ndash

63 theo caacutec nghiecircn cứu trước đacircy kết quả của chuacuteng tocirci lagrave 25 ở

lần khaacutem 1 Trong 3 nghiecircn cứu coacute cỡ mẫu lớn nhất của Julkunen H

(2012) Mok CC (2010) vagrave Orbai AM (2015) tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng C1q đều tương đối thấp vagrave iacutet coacute sự khaacutec biệt

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT KT khaacuteng C1q coacute giaacute trị keacutem

nhất trong chẩn đoaacuten vagrave phacircn loại LBĐHT với diện tiacutech dưới đường

cong ROC lagrave 0676 vagrave độ nhạy chỉ lagrave 25 Tỷ lệ dương tiacutenh thấp vagrave

dao động thường xuyecircn ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute thể lagrave nguyecircn nhacircn

chiacutenh lagravem giảm độ nhạy của khaacuteng thể nagravey trong chẩn đoaacuten bệnh

424 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome (KT khaacuteng Nucl )

Về tỷ lệ dương tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT Tỷ lệ dương tiacutenh của

KT khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT trong nghiecircn cứu của chuacuteng tocirci

lagrave 813 Trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy tỷ lệ nagravey coacute khoảng dao

động rộng từ 45 đến 100 nguyecircn nhacircn lagrave do sự khaacutec biệt của caacutec

đối tượng nghiecircn cứu về chủng tộc vagrave mức độ hoạt động bệnh

Về giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT nhiều nghiecircn cứu đatilde cho thấy độ

đặc hiệu rất cao của KT khaacuteng Nucl với LBĐHT (90 ndash 100) tương

đồng với kết quả thu được của chuacuteng tocirci lagrave 987 Nguyecircn nhacircn coacute

thể do nucleosome lagrave tự khaacuteng nguyecircn coacute vai trograve quan trọng trong cơ

22

chế bệnh sinh của LBĐHT Độ nhạy của KT khaacuteng Nucl với

LBĐHT trong nghiecircn cứu nagravey lagrave 8125 cao hơn so với KT khaacuteng

dsDNA (6406)

43 Về liecircn quan giữa caacutec khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

431 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh (ge 12

OD) ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với sự xuất

hiện của giảm bổ thể vagrave caacutec tự khaacuteng thể khaacutec Mối liecircn quan giữa

khaacuteng thể nagravey với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của

LBĐHT trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy lagrave khocircng rotilde rệt do thiếu

những bằng chứng đaacuteng tin cậy

432 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với caacutec biểu

hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp hoặc mạn tiacutenh giảm bạch cầu

vagrave giảm bổ thể nhưng khocircng liecircn quan với tổn thương thận lupus

Nồng độ vagrave tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng dsDNA ở nhoacutem bệnh

nhacircn trong đợt cấp đều cao hơn so với nhoacutem ngoagravei đợt cấp tuy nhiecircn

khaacuteng thể nagravey coacute liecircn quan khocircng hằng định với cả hoạt tiacutenh chung

của LBĐHT vagrave tổn thương thận đặc biệt lagrave với đợt cấp của bệnh

433 Khaacuteng thể khaacuteng C1q khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh ở

bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan rotilde rệt với sự xuất hiện của tổn thương

thận vagrave giảm bổ thể Độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey trong dự baacuteo tổn

thương thận lupus cao hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại vagrave nồng độ của noacute

tương quan nghịch khaacute chặt với cả bổ thể C3 vagrave C4 (p lt 00001) Tỷ

lệ vagrave nồng độ trung bigravenh của KT khaacuteng C1q đều coacute xu hướng tăng

dần theo mức độ hoạt động của bệnh Tương quan giữa nồng độ KT

khaacuteng C1q với điểm SLICC thận vagrave độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey

trong dự baacuteo đợt cấp thận lupus cũng tốt hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại

23

434 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện tổn thương

da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận giảm BC vagrave giảm bổ thể Độ

nhạy trong dự baacuteo tổn thương thận lupus của KT khaacuteng Nucl cao

hơn so với caacutec khaacuteng thể cograven lại Tương quan với nồng độ bổ thể vagrave

điểm SLEDAI của khaacuteng thể nagravey cũng chặt chẽ hơn caacutec khaacuteng thể

cograven lại

KẾT LUẬN

Qua nghiecircn cứu 128 bệnh nhacircn LBĐHT với nhoacutem chứng gồm

39 người mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec vagrave 30 người khỏe mạnh chuacuteng

tocirci xin đưa ra một số kết luận sau

1 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten của một

số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể

Tỷ lệ dương tiacutenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 855 641 25 vagrave

813 tất cả đều cao hơn rotilde rệt so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở 587 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute

KT khaacuteng dsDNA acircm tiacutenh

Nồng độ trung bigravenh của caacutec KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng

C1q vagrave khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 3221 6034 (IUml) vagrave 945 1385

(IUml) tất cả đều cao hơn so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn coacute độ nhạy cao (8594) nhưng độ đặc

hiệu thấp (6667) với LBĐHT Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh 100 với LBĐHT nhưng độ nhạy

rất thấp (25)

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 25: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

22

chế bệnh sinh của LBĐHT Độ nhạy của KT khaacuteng Nucl với

LBĐHT trong nghiecircn cứu nagravey lagrave 8125 cao hơn so với KT khaacuteng

dsDNA (6406)

43 Về liecircn quan giữa caacutec khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

431 Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn (KTKN) KTKN dương tiacutenh (ge 12

OD) ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với sự xuất

hiện của giảm bổ thể vagrave caacutec tự khaacuteng thể khaacutec Mối liecircn quan giữa

khaacuteng thể nagravey với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave mức độ hoạt động của

LBĐHT trong caacutec nghiecircn cứu trước đacircy lagrave khocircng rotilde rệt do thiếu

những bằng chứng đaacuteng tin cậy

432 Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan coacute yacute nghĩa thống kecirc với caacutec biểu

hiện tổn thương da lupus cấp baacuten cấp hoặc mạn tiacutenh giảm bạch cầu

vagrave giảm bổ thể nhưng khocircng liecircn quan với tổn thương thận lupus

Nồng độ vagrave tỷ lệ dương tiacutenh của KT khaacuteng dsDNA ở nhoacutem bệnh

nhacircn trong đợt cấp đều cao hơn so với nhoacutem ngoagravei đợt cấp tuy nhiecircn

khaacuteng thể nagravey coacute liecircn quan khocircng hằng định với cả hoạt tiacutenh chung

của LBĐHT vagrave tổn thương thận đặc biệt lagrave với đợt cấp của bệnh

433 Khaacuteng thể khaacuteng C1q khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh ở

bệnh nhacircn LBĐHT liecircn quan rotilde rệt với sự xuất hiện của tổn thương

thận vagrave giảm bổ thể Độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey trong dự baacuteo tổn

thương thận lupus cao hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại vagrave nồng độ của noacute

tương quan nghịch khaacute chặt với cả bổ thể C3 vagrave C4 (p lt 00001) Tỷ

lệ vagrave nồng độ trung bigravenh của KT khaacuteng C1q đều coacute xu hướng tăng

dần theo mức độ hoạt động của bệnh Tương quan giữa nồng độ KT

khaacuteng C1q với điểm SLICC thận vagrave độ đặc hiệu của khaacuteng thể nagravey

trong dự baacuteo đợt cấp thận lupus cũng tốt hơn caacutec khaacuteng thể cograven lại

23

434 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện tổn thương

da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận giảm BC vagrave giảm bổ thể Độ

nhạy trong dự baacuteo tổn thương thận lupus của KT khaacuteng Nucl cao

hơn so với caacutec khaacuteng thể cograven lại Tương quan với nồng độ bổ thể vagrave

điểm SLEDAI của khaacuteng thể nagravey cũng chặt chẽ hơn caacutec khaacuteng thể

cograven lại

KẾT LUẬN

Qua nghiecircn cứu 128 bệnh nhacircn LBĐHT với nhoacutem chứng gồm

39 người mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec vagrave 30 người khỏe mạnh chuacuteng

tocirci xin đưa ra một số kết luận sau

1 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten của một

số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể

Tỷ lệ dương tiacutenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 855 641 25 vagrave

813 tất cả đều cao hơn rotilde rệt so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở 587 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute

KT khaacuteng dsDNA acircm tiacutenh

Nồng độ trung bigravenh của caacutec KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng

C1q vagrave khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 3221 6034 (IUml) vagrave 945 1385

(IUml) tất cả đều cao hơn so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn coacute độ nhạy cao (8594) nhưng độ đặc

hiệu thấp (6667) với LBĐHT Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh 100 với LBĐHT nhưng độ nhạy

rất thấp (25)

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 26: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

23

434 Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương

tiacutenh ở bệnh nhacircn LBĐHT coacute liecircn quan với caacutec biểu hiện tổn thương

da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận giảm BC vagrave giảm bổ thể Độ

nhạy trong dự baacuteo tổn thương thận lupus của KT khaacuteng Nucl cao

hơn so với caacutec khaacuteng thể cograven lại Tương quan với nồng độ bổ thể vagrave

điểm SLEDAI của khaacuteng thể nagravey cũng chặt chẽ hơn caacutec khaacuteng thể

cograven lại

KẾT LUẬN

Qua nghiecircn cứu 128 bệnh nhacircn LBĐHT với nhoacutem chứng gồm

39 người mắc caacutec bệnh tự miễn khaacutec vagrave 30 người khỏe mạnh chuacuteng

tocirci xin đưa ra một số kết luận sau

1 Tỷ lệ dƣơng tiacutenh nồng độ vagrave giaacute trị chẩn đoaacuten của một

số tự khaacuteng thể trong LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ của caacutec tự khaacuteng thể

Tỷ lệ dương tiacutenh của KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng C1q vagrave

khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 855 641 25 vagrave

813 tất cả đều cao hơn rotilde rệt so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh ở 587 số bệnh nhacircn LBĐHT coacute

KT khaacuteng dsDNA acircm tiacutenh

Nồng độ trung bigravenh của caacutec KTKN khaacuteng dsDNA khaacuteng

C1q vagrave khaacuteng Nucl ở bệnh nhacircn LBĐHT lần lượt lagrave 218 098

(OD) 1794 4817 (IUml) 3221 6034 (IUml) vagrave 945 1385

(IUml) tất cả đều cao hơn so với nhoacutem chứng với p lt 00001

Giaacute trị chẩn đoaacuten LBĐHT của caacutec tự khaacuteng thể

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn coacute độ nhạy cao (8594) nhưng độ đặc

hiệu thấp (6667) với LBĐHT Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc

hiệu vagrave giaacute trị dự baacuteo dương tiacutenh 100 với LBĐHT nhưng độ nhạy

rất thấp (25)

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 27: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

24

Caacutec KT khaacuteng Nucl vagrave khaacuteng dsDNA cugraveng coacute độ đặc hiệu

rất cao với LBĐHT (lần lượt 9855 vagrave 9565) nhưng KT khaacuteng

Nucl coacute độ nhạy cao hơn rotilde rệt (8125 so với 6406)

Qua phacircn tiacutech đường cong ROC KT khaacuteng Nucl coacute giaacute trị tốt

nhất trong chẩn đoaacuten LBĐHT (AUC = 0912)

2 Mối liecircn quan của caacutec tự khaacuteng thể với biểu hiện lacircm sagraveng vagrave

mức độ hoạt động của LBĐHT

Mối liecircn quan với caacutec biểu hiện lacircm sagraveng vagrave cận lacircm sagraveng

của LBĐHT

Khaacuteng thể khaacuteng nhacircn dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng dsDNA dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa

thống kecirc với biểu hiện tổn thương da giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng C1q dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với caacutec biểu hiện rụng toacutec tổn thương thận giảm bạch cầu giảm

tiểu cầu vagrave giảm bổ thể

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl dương tiacutenh liecircn quan coacute yacute nghĩa thống

kecirc với biểu hiện tổn thương da lupus mạn tiacutenh tổn thương thận

giảm bạch cầu vagrave giảm bổ thể

Nồng độ caacutec khaacuteng thể đều coacute tương quan thuận với nhau

chặt chẽ nhất lagrave giữa khaacuteng thể khaacuteng dsDNA vagrave khaacuteng nucleosome

(r = 053 p lt 00001)

Mối liecircn quan với mức độ hoạt động của LBĐHT

Tỷ lệ dương tiacutenh vagrave nồng độ trung bigravenh của caacutec khaacuteng thể ở

nhoacutem bệnh hoạt động đều cao hơn ở nhoacutem bệnh ổn định (p lt 002)

ở nhoacutem coacute đợt cấp cũng đều cao hơn nhoacutem ngoagravei đợt cấp (p lt 001)

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 28: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

25

Khaacuteng thể khaacuteng Nucl coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLEDAI (r = 0648) vagrave giaacute trị tốt nhất trong dự baacuteo đợt cấp LBĐHT

(AUC = 0828)

Nồng độ của caacutec khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng Nucl sau đợt

cấp LBĐHT đều giảm coacute yacute nghĩa thống kecirc so với trong đợt cấp

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute tương quan chặt chẽ nhất với điểm

SLICC hoạt tiacutenh thận (r = 0399) vagrave độ đặc hiệu cao nhất trong dự

baacuteo đợt cấp thận lupus (8069) Khaacuteng thể khaacuteng C1q vagrave khaacuteng

dsDNA cugraveng dương tiacutenh coacute độ đặc hiệu trong dự baacuteo đợt cấp thận

lupus lagrave 867

KIẾN NGHỊ

Khaacuteng thể khaacuteng nucleosome coacute độ nhạy vagrave độ đặc hiệu cao

trong chẩn đoaacuten LBĐHT do đoacute cần được phaacutet hiện vagrave đo lường ở

caacutec bệnh nhacircn coacute dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute LBĐHT nhưng chưa đủ

tiecircu chuẩn chẩn đoaacuten bệnh Becircn cạnh đoacute khaacuteng thể nagravey cograven coacute mối

liecircn quan khaacute chặt chẽ với mức độ hoạt động của LBĐHT necircn cũng

cần được theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị hoặc ngay khi coacute

caacutec dấu hiệu lacircm sagraveng gợi yacute sự thay đổi mức độ hoạt động của bệnh

để coacute thể phaacutet hiện sớm caacutec đợt cấp LBĐHT vagrave điều trị kịp thời

Khaacuteng thể khaacuteng C1q coacute độ đặc hiệu khaacute cao với tổn thương

thận lupus do đoacute cần được xeacutet nghiệm trong caacutec trường hợp nghi

ngờ coacute tổn thương nagravey trecircn lacircm sagraveng Khaacuteng C1q cũng necircn được

theo dotildei định kỳ trong quaacute trigravenh điều trị viecircm cầu thận lupus nhằm

dự baacuteo sớm caacutec đợt cấp thận lupus

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 29: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

NGUYEN HUU TRUONG

STUDY ON THE RELATIONSHIP BETWEEN

DISEASE ACTIVITY WITH SOME AUTOANTIBODIES

IN SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

Subject Allergy and Immunology

Code 62720109

Summary of Thesis of Philosophy Doctor in Medicine

HANOI - 2017

MINISTRY OF

EDUCATION amp TRAINING

MINISTRY OF

HEALTH

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 30: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

Research completed in

HANOI MEDICAL UNIVERSITY

Scientific supervisors

Assoc Prof PhD Tran Thuy Hanh

Scientific reviewer 1 Assoc Prof PhD Nguyen Van Doan

Scientific reviewer 2 Assoc Prof PhD Dang Van Em

Scientific reviewer 3 Assoc Prof PhD Trinh Manh Hung

The thesis will be defended in front of The Council for

Philosophy Doctor in Medicine at Hanoi Medical University

Athelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphelliphellip2017

The thesis can be founf at

The National Library

Central Medical Information Library

Hanoi Medical University Library

Bachmai Hospital Library

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 31: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

LIST OF PUBLISHED PAPERS RELATIVE TO THIS

DISSERTATION

1 Nguyen Huu Truong (2014) Study the relationship

between plasma C3 and C4 levels with some clinical

subclinical manifestations and disease activity in patients

with systemic lupus erythematosus Journal of Military

Medicine 302 26 - 30

2 Nguyen Huu Truong (2014) Correlation between anti-

dsDNA antibody concentration and activity level of

systemic lupus erythematosus Journal of Practical

Medicine 10 (937) 2 - 5

3 Nguyen Huu Truong (2015) Relationship between anti-

C1q antibody with complement factors C3 C4 and

clinical manifestations of systemic lupus erythematosus

Journal of Clinical Medicine 90 54- 61

4 Nguyen Huu Truong (2015) Antinucleosome antibodies

in systemic lupus erythematosus patients and their

association with disease activity Vietnamese Medical

Journal 427 1 (2) 9 - 14

5 Nguyen Quang Tung Nguyen Huu Truong (2015) Study

on the relationship between thrombocytopenia with

clinical manifestations and disease activity of systemic

lupus erythematosus Vietnamese Medical Journal 427 1

(2) 50 - 55

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 32: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

1

ABBREVIATIONS

ACR American College of Rheumatology

ANA Antinuclear antibody

Anti-dsDNA Anti-double stranded DNA

AnuA Antinucleosome antibodies

AUC Area under the ROC curve

ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

NPV Negative Predictive Value

PPV Positive Predictive Value

SLE Systemic Lupus Erythematosus

SLEDAI Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index

SLICC Systemic Lupus International Collaborating Clinics

INTRODUCTION

1 Urgency of topics

Systemic Lupus Erythematosus (SLE) is one of the most

common systemic autoimmune diseases with an estimated

prevalence in the range of 20 to 150 cases per 100000 population in

women it is around 164 to 406 cases per 100000 population Which

is approximately three times more than four decades ago

SLE is characterized by the presence of self-responsive B and

T lymphocytes responsible for the production of a series of

pathological autoantibodies that target the target antigens in the

nucleus cytoplasm cellular membrane basal protein or plasma It

was first discovered in the 1950s so far there have been nearly 180

autoantibodies related to the disease identified of which many have

been shown to play a important role for the formation and

progression of the disease triggers autoimmune inflammation and

leading to organ damage In addition the practical implications of

many autoantibodies in SLE are well established in clinical settings

particularly in the role of diagnosis assessment of activity and

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 33: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

2

prognosis The presence of autoantibodies along with the clinical

manifestations suggesting SLE will greatly assist in the diagnosis of

the disease In addition to the four classical autoantibodies that have

been included in the SLE classification criteria of American College

of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE International

Collaboration Group (SLICC-2012) several new autoantibodies such

as antinucleosome anti-C1q antibodies also showed high

sensitivity and specificity in the diagnosis of SLE and organ damage

In addition some antibodies have been shown to be significantly

associated with disease activity and some SLE organ damage such as

anti-dsDNA antinucleosome anti-C1q antibodies and so on The

presences and fluctuations of these autoantibodies reflect well the

variations in disease activity and predict the flares Hence many

autoantibodies have been extensively used in clinical practice as

tools that supporting the rapid and convenient assessment and

monitoring of SLE activity

Having a better understanding of the characteristics of

autoantibodies in SLE can help clinicians have more feasible and

reliable tools for diagnosing evaluating and monitoring disease

activity For this reason I decided to select the topic Study of the

relationship between disease activity with some autoantibodies in

systemic lupus erythematosus for the following purposes

1 Define the incidence concentration and diagnostic value for

systemic lupus erythematosus of antinuclear antibody anti-dsDNA

anti-C1q and antinucleosome antibodies

2 Survey the relationship between these autoantibodies with

some clinical manifestations and disease activity of systemic lupus

erythematosus

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 34: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

3

2 New contributions of the thesis

This is the first study in Vietnam to study the diagnostic value

of SLE and lupus nephropathy of new antibodies namely

antinucleosome and anti-C1q antibody in comparison with classical

antinuclear antibodies and anti-dsDNA antibodies in search of

optimal tools for diagnosis The results of this study have shown the

very good value of antinucleosome antibodies in the diagnosis of

SLE and the high specificity of anti-C1q antibodies to lupus

nephropathy

This is also the first longitudinal study in Vietnam to evaluate

the association between the incidences and concentrations of anti-

nuclear antibodies anti-dsDNA anti-C1q and antinucleosome

antibodies to SLE activity and lupus nephropathy The results of the

study have shown that antinucleosome antibodies are stronger

associated with disease activity and a better prognosis value than

anti-dsDNA antibodies Anti-C1q antibodies are also more closely

related to the presence and activity of lupus nephropathy than those

of anti-dsDNA antibodies

3 Layout of the thesis

144 page thesis include Introduction (2 pages) Chapter 1-

Overview (42 pages) Chapter 2 - Objects and Methods (17 pages)

Chapter 3 - Results (30 pages) Chapter 4 - Discussions (50 pages)

Chapter 5 - Conclusions (2 pages) and Recommendations (1 page)

The thesis has 48 tables 12 charts and figures and 191 references

(including 09 Vietnamese documents and 182 English documents)

Chapter 1 OVERVIEW

11 A brief description of the mechanism of regulation and

pathophysiology of autoantibodies in SLE

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 35: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

4

Self-reactive B-cells are activated when they encounter

specific self-antigens with the presence of T-helper cells They then

undergo an isotype transformation process super mutation and

clonal selection to generate effector B-cell that release IgG

antibodies into the circulattion These antibodies form excess of

immune complexes which accumulate and cause inflammatory

reactions at the organs

12 Overview of diagnosis and evaluation of SLE activity

121 Diagnosis of SLE

Systemic lupus erythematosus has a wide variety of clinical

manifestations but the majority of manifestations are not specific

making many difficulties for diagnosis There are no specific tools

available for SLE diagnosis so the SLE classification criteria of

American College of Rheumatology (ACR-1997) and the SLE

International Collaboration Group (SLICC-2012) are usually used in

clinical for this purpose

122 Evaluation of the level of activity of SLE there is not a

single indicator that can accurately measure the level of disease

activity None of indices which have been proposed to evaluate and

measure SLE activity is considered to be optimal for use in practice

13 Clinical implications of some autoantibodies in SLE

131 Antinuclear antibody (ANA)

ANA positive has a very high sensitivity and NPV for SLE

but low specificity because it can be found in other diseases This

antibody has an unclear association with the activity of SLE

132 Anti-dsDNA antibodies

Anti-dsDNA antibodies are highly specific to SLE (95-100)

and are one of the diagnostic criteria however its sensitivity is not

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 36: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

5

high because it is usually temporarily positive These antibodies are

thought to be positively correlated with the disease activity assessed

by various indices Anti-dsDNA antibodies are quite sensitive in the

differential diagnosis of stable and unstable SLE but in only some

studies Periodical monitoring of these antibodies in SLE patients

showed that its fluctuations was significantly associated with the

occurrence of subsequent flares

133 Anti-C1q antibody

Anti-C1q antibody is found in SLE and many other diseases

such as hypocomplementemic urticarial vasculitis hereditary

angioedema rheumatoid arthritis This antibody has low sensitivity

and specificity in SLE diagnosis but it is one of the antibodies most

significantly associated with lupus nephropathy The concentration

of anti-C1q antibody is strongly correlated with the level of SLE

activity especially with renal injuries This antibody has a high

negative predictive value and specificity with lupus nephritis

134 Antinucleosome antibody (AnuA)

Antinucleosome antibody has a sensitivity range of 50-90

and a specificity of 90-99 for SLE diagnosis The studies

comparing between this antibody with anti-dsDNA antibodies show

that antinucleosome antibody has similar specificity but its

sensitivity is significantly higher In addition antinucleosome

antibody are also closely correlated with indices measuring the

activity of SLE and lupus nephropathy

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 37: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

6

CHAPTER 2 SUBJECTS AND METHODS

21 Study subjects

211 SLE patient group

Include 128 patients who were diagnosed with systemic

lupus erythematosus according to SLICC 2012 criteria monitored

and treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and

Systemic Lupus Erythematosus Clinics of the Outpatient

Department ndash Bach Mai Hospital from Mar 2014 to Feb 2016

Exclusion criteria pregnant women patients with severe

medical conditions such as diabetes heart failure liver failure

patients with syphilis or HIV AIDS patients with other

autoimmune diseases patients refuse to participate in the study

212 Control group

Autoimmune disease control group includes 39 people

suffering from autoimmune diseases other SLE was diagnosed and

treated at the Allergy amp Clinical Immunology Center and Allergy amp

Clinical Immunology Clinics of of the Outpatient Department - Bach

Mai Hospital from Feb 2016 to Apr 2016

Irrespect of age gender occupation education level and

place of residence

Do not have hepatocellular insufficiency or HIV AIDS

infection

Accept to participate in the study

Healthy control group 30 healthy individuals with age and

sex distribution are similar to the SLE patient group

Do not have any autoimmune diseases no the first and

second degree relatives have autoimmune diseases

Regardless of age gender occupation education level

and place of residence

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 38: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

7

Accept to participate in the study

22 Methods

221 Methods of study prospective cross-sectional

descriptive 222 Sample selection Samples were selected by

convenient sampling The objects are selected in chronological

order irrespective of age sex level of activity and damage

223 Sample size

Sample size calculated according to the formula

n is the minimum sample size is a statistically significant level

corresponding to a 95 confidence interval = 005 Z1-2 is the Z

score corresponding to the desired statistical significance level

where = 005 Z1-2 = 196 p is the positive rate of antinucleosome

antibody in SLE patients (choose p = 0909 according to Dang Thu

Huong - Ho Chi Minh City Journal of Medicine Vol17 Appendix 1

pp 294-300) q = 1 - p = 0091 d is the absolute precision desired

choose d = 005 From there calculate n = 1271 Our study has a

sample size of 128 patients

224 Steps to conduct

2241 SLE patients group After being selected for the study and

coding list patients will undergo the following research steps

Examination 1st evaluation of clinical manifestations and

disease history regular laboratory evaluation (determination of urea

creatinine dextrose AST ALT albumin cholesterol triglyceride

C3 and C4 serum concentrations urinary sediment 24-hour urine

protein levels) quantification of antinuclear antibody anti-dsDNA

antinucleosome and anti-C1q antibodies analysis of SLICC 2012

clinical criteria assessment of SELENA-SLEDAI score disease

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 39: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

8

activity levels the occurrence of flares SLICC 2008 Renal Activity

Index

Periodical follow-up Patients are examined on a monthly

basis or as soon as the patients has abnormal symptoms The study

was terminated when patients were followed for 12 months or when

they were found to be pregnant or lost follow-up Steps of

examination include clinical examination regular laboratory

assessment analysis of SLICC 2012 clinical criteria the occurrence

of SLE flares or lupus renal flares SLICC 2008 Renal Activity Index

Antibodies were measured in the visits with new recorded flare or

visits were conducted within 2 months after the patient had left the

flare or the last visit Evaluation of SLEDAI score and level of

disease activity at visits in which the antibodies were measured

2242 Control groups Two control groups were tested for four

antibodies similar to the SLE patient group at visit 1

225 Places and methods of conducting laboratory evaluations

2251 Regular subclinical tests are performed at the corresponding

departments of Bach Mai Hospital

2252 Tests of antibodies

a Antinuclear and anti-dsDNA antibodies were measured by the

ELISA technique on the semi-autonomated machine Imarkreg from

BIO-RAD (DRG kit) Place of performance Immuno-laboratory of

Allergy amp Clinical Immunology Center of Bach Mai Hospital

b Antinucleosome and anti-C1q antibodies were detected and

quantified by ELISA technique on Orgentecs Alegriareg automated

machine using Orgentecs kit Place of performance Department of

Laboratories of Hanoi Medical University Hospital

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 40: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

9

226 Evaluation criteria used in the study

2261 Evaluate the manifestations of SLE based on the SLICC

2012 clinical criteria

2262 Evaluate the levels of disease activity based on the

SELENA-SLEDAI score

2263 Evaluate the occurrence of SLE flares based on the

definition used in the SELENA study

2264 Evaluate the levels of renal activity based on the SLICC

2008 Renal Activity Index

2265 Evaluate the occurrence of lupus renal flares based on

EULAR definition in 2009

227 Errors and methods to fix the error Correction of errors by

careful clinical examination disease history examination and re-

evaluation of disease activity clean data before processing

228 Data processing The data were processed by MEDCALC

140 statistical software

229 Ethics Research Research is conducted in prestigious

medical centers with the consent of the leaders of the units This is

descriptive study no intervention based on the willingness of the

participate The data are collected for research and patient care

purposes only and not for other purposes

CHAPTER 3 RESULTS

31 General characteristics of the studied subjects

Table 31 Age and sex characteristics

Nhoacutem nghiecircn cứu n Age (X ) FM ratio

SLE 128 311 946 1322

Autoimmune control 39 4305 17 333

Healthy control 30 3163 1357 14

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 41: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

10

p 000036

04

0011

074

SLE vs Autoimmune control

SLE vs Healthy control

The mean age of the SLE patients was 311 946 lower than

the autoimmune controls (p = 000036) but not significantly

different from the healthy controls (p = 04) The males females

ratio in the SLE group were 1322 which was equivalent to the

healthy controls (p = 074) but higher than the autoimmune control

group (p = 0011)

Table 32 Distribution of patients according to age group

Age group 15 16 - 30 31 - 45 46 - 60 gt 60 Total

n 1 67 52 7 1 128

08 523 406 55 08 100

Patients were mostly found in the age group of 20-30 (437)

and 31-40 (336) the lowest among those aged gt 50 years (47)

Both groups were homogenous related to age (p = 051)

Table 33 Distribution of patients according to SLE duration

Duration (year) n X

1 16 125 1

2 - 5 66 516 333 109

6 - 10 32 250 763 143

gt 10 14 109 13 18

Total 128 100 517 37

The majority of SLE patients has disease duration in about 2-5

years (516) and 6-10 years (25) Average disease duration in the

SLE group was 517 37 (years)

Table 34 Distribution of patients according to age of SLE onset

Age of onset group n X

15 14 109 1271 23

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 42: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

11

16 - 25 55 430 2035 276

26 - 35 36 281 2994 278

36 - 45 18 141 3772 44

gt 45 5 39 53 367

Total 128 100 2593 974

The majority of patients develop SLE at age of 16-25 years

(43) and 26-35 years (281) The percentage of patients who

develop the disease after age of 45 is only 39 The average age of

SLE onset was 2593 974

Family history of SLE 6 SLE patients (469) have relatives

(parents siblings) with SLE

The highest frequency of SLE manifestations at the beginning

of the study was for low complement (622) alopecia (531) and

nephropathy (453) The least common manifestations was

serositis hemolysis (23) and neurologic disorder (31)

Table 35 SLE manifestations at the beginning of the study

TT Manifestations n

1 Acute cutaneous lupus 49 383

2 Chronic cutaneous lupus 21 164

3 Oral ulcerations 9 7

4 Nonscarring alopecia 68 531

5 Synovitis involving two or more joints 45 352

6 Serositis 3 23

7 Renal disorder 58 453

8 Neurologic disorder 4 31

9 Hemolytic anemia 3 23

10 Leukopenia or lymphopenia 42 328

11 Thrombocytopenia 5 39

12 Hypocomplementemia 79 622

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 43: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

12

Table 36 Levels of SLE activity

Disease activity n

1 Inactive 15 117

2 Mild active 57 445

3 Moderate active 37 289

4 High active 19 148

5 SLE flare-up 51 398

6 SLEDAI score (X ) 661 62 (0 - 41)

7 Renal SLICC score (X ) 312 42 (0 - 15)

At the beginning of the study the majority of patients had

mild to moderate activity of disease (445 and 289

respectively) SLEDAI scores range from 0 to 41 (661 62) 51

patients (398) had SLE flares The average of SLICC Renal

Activity score was 312 42

32 Prevalance concentration and diagnostic utility of

autoantibodies

Table 37 The prevalance of autoantibody

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA 859 5385 67 3333

Anti-dsDNA 641 256 67 435

AnuA 813 256 0 145

Anti-C1q 25 0 0 0

The prevalence of antibodies in the SLE group in descending

order was for ANA 859 AnuA 813 anti-dsDNA 641 and

anti-C1q 25 All of them were significantly higher than control

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 44: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

13

groups (p lt 0005)

Table 38 Average concentration of autoantibodies

Antibody SLE

(n = 128)

Autoimmune

control

(n = 39)

Healthy

control

(n = 30)

Control

(n = 69)

ANA (OD) 218 098 192 139 048 036 129 128

Anti-dsDNA(IUml) 1794 4817 251 244 177 358 219 299

AnuA (IUml) 3221 6034 993 62 779 439 9 558

Anti-C1q (IUml) 945 1385 391 22 252 092 33 189

The average concentrations of ANA anti-dsDNA anti-C1q

and AnuA in the SLE patients were 218 098 (OD) 1794 4817

(IUml) 3221 6034 (IUml) and 945 1385 (IUml)

respectively All were higher than control subjects (p lt 00001)

Table 39 Diagnostic utility of antibodies in SLE

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 8594 6667 8271 7187

Anti-dsDNA 6406 9565 9647 5863

AnuA 8125 9855 9905 7391

Anti-C1q 25 100 100 4182

Compared to anti-dsDNA antibodies AnuA has an equivalent

specificity and positive predictive value for SLE but higher

sensitivity and negative predictive value The anti-C1q antibody has

the highest specificity and positive predictive value while ANA has

the highest sensitivity for SLE but itrsquos specificity is the lowest

Table 310 ROC Curve Analysis for the diagnostic utility of antibodies

Antibody (AUC) ANA Anti- Anti-C1q AnuA

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 45: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

14

(0716) dsDNA(089) (0676) (0911)

ANA (0716) p=00001 p=044 plt0001

Anti-dsDNA(089) p=00001 plt0001 p=044

Anti-C1q (0676) p=044 plt0001 plt0001

AnuA (0911) plt0001 p=044 plt0001

Antinucleosome anti-dsDNA ANA and anti-C1q antibodies

has very good good medium and little value in SLE diagnosis

respectively The area under the ROC curve (AUC) of the AnuA and

anti-dsDNA antibodies were significantly higher than ANA and

anti-C1q antibodies

33 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

Table 311 Relationship between antibodies with the manifestations of SLE

Manifestation ANA Anti-dsDNA Anti-C1q AnuA

OR p OR p OR p OR p

Acute cutaneous

lupus 311 007 258 00056 082 055 238 008

Chronic

cutaneous lupus 325 0057 245 00073 172 0076 457 00137

Oral ulcerations 057 04 055 026 121 074 291 031

Alopecia 246 0016 1004 099 233 00016 16 014

Synovitis 166 025 118 055 142 021 179 017

Serositis 106 097 129 083 12 088 143 081

Renal disorder 126 051 116 054 441 lt00001 442 00001

Neurologic

disorder 088 091 025 01 039 039 025 008

Hemolytic anemia 044 048 064 066 026 037 168 066

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 46: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

15

Leukopenia 774 00057 377 lt00001 2 0012 664 0002

Thrombocytopenia 149 071 3 016 446 002 204 05

Low complement 1006 lt0001 327 lt0001 372 lt0001 1611 lt0001

Positive ANA in SLE patients are associated with alopecia

leukopenia and low complement The positive anti-dsDNA

antibody in SLE patients is associated with acutesubacute or

chronic cutaneous lupus leukopenia and low complement Positive

anti-C1q antibody in SLE patients is associated with alopecia

nephropathy leukopenia thrombocytopenia and low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE is associated with chronic

lupus erythematosu cutaneous lupus nephropathy leukopenia and

low complement

Table 312 Relationship between autoantibodies in SLE patients

Antibody Prevalence OR p

ANA (+)

Anti-dsDNA 6932 8135 lt00001

Anti-C1q 3227 393 0012

AnuA 8924 1089 lt00001

Anti-

dsDNA(+)

ANA 9943 8135 lt00001

Anti-C1q 3714 274 00005

AnuA 9543 1144 lt00001

Anti-C1q (+)

Anti-dsDNA 7647 274 00005

ANA 9529 393 0012

AnuA 9412 43 0003

AnuA (+)

ANA 9333 1089 lt00001

Anti-C1q 3333 43 0003

Anti-dsDNA 6958 1144 lt00001

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 47: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

16

The positivity of autoantibodies was significantly related

to each other (p lt 005) in which the relations between anti-

dsDNA antibodies AnuA and ANA are most closed

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 48: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

17

Table 313 Relationship between autoantibodies with SLE activity

Antibody

Level of disease activity p

High

(n = 36) (I)

Moderate

(n = 67)(II)

Mildinactive

(n = 185)(III) I amp II II amp III

ANA 9722 9701 8162 058

0004

OD 278 153 274 122 213 121 078

lt0001

Anti-

dsDNA

8611 7015 5243 0119 0018

IUml 4023 1431 1543 1458 90938567 00012 000008

Anti-

C1q

7222 3881 1784 00025 0001

IUml 2708 2828 1614 2251 757 1134 0034 000017

AnuA 100 100 7405 lt0001

IUml 1014 9108 53576574 11891802 00019 lt00001

Compared to the group of patients with moderate activity the

prevalence of anti-C1q antibody in high activity group was

significantly higher (p = 00025) The average concentration of anti-

dsDNA anti-C1q antibodies and AnuA in high activity group of

patients were also significantly higher The prevalence and mean

concentration of the 4 antibodies in the moderate activity group were

higher than that of the mild activity inactivity group

Table 314 Correlation between concentration of antibodies and

SLEDAI and SLICC Renal Activity score

Antibody SLEDAI SLICC Renal Activity

r p r p

ANA 0306 lt 00001 0143 lt 0013

Anti-dsDNA 056 lt 00001 0216 00002

Anti-C1q 0433 lt 00001 0399 lt 00001

AnuA 0648 lt 00001 0348 00082

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 49: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

18

Concentration of anti-dsDNA antibodies and AnuA were most

closely correlated with SLEDAI score (p lt 0001) while

concentration of anti-C1q antibody was most closely correlated with

SLICC renal activity score (r = 0399)

Table 315 Change the concentration of antibodies after the flares

Antibody Decreased

level ()

Change of

mean

Paired t-

test p

ANA (OD) 625 -034 -143 016

Anti-dsDNA(IUml) 6458 -19949 -1793 008

Anti-C1q (IUml) 625 -635 -214 0037

AnuA (IUml) 8333 -47509 -39 00003

With 48 monitored flares the mean concentrations of anti-C1q

(p = 0037) and AnuA (p = 00003) were significantly reduced after

the flares

Table 316 The predicted utility for SLE flares of autoantibodies

Antibody Sensitivity Specificity PPV NPV

ANA 9759 6714 3227 9459

Anti-dsDNA 759 4537 36 823

Anti-C1q 5783 8195 5647 8276

AnuA 9759 2244 3375 9583

Anti-dsDNA+ Anti-C1q 4819 878 6154 8072

Anti-dsDNA+ AnuA 759 4927 3772 8347

AnuA + Anti-C1q 5783 8439 60 8317

ANA and AnuA have high sensitivity and NPV (gt 94) but

their specificity are very low for prediction of SLE flares The anti-

C1q antibody has the highest specificity (8195) especially when

it is co-positive with anti-dsDNA antibodies (878)

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 50: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

19

CHAPTER 4 DISCUSSION

41 General characteristics of SLE patients

411 Distribution of patients according to age and sex

There were 118 (9297) women in SLE patient group with an

average age of 311 946 of which the majority of patient were

aged 16-45 (929) These results are similar to previous researched

results suggesting that the primary epidemiological characteristics of

SLE are more likely to occur in women of childbearing age

412 Age of SLE onset

The majority of patients develop SLE at age of 15 - 45 (852)

average age of disease onset is 2593 974 Many epidemiological

studies have shown that SLE is more likely to develop in women of

15-45 age group the period with the highest activity of female sex

hormones

413 Family history of SLE

Six SLE patients (469) have at least one relative with SLE

Many epidemiological studies have shown that the prevalence of

SLE in relatives of SLE patients is usually 10 to 20 times higher than

that of the general population (4-12) suggesting the role of genetic

factor in the pathogenesis of SLE

414 SLE manifestations

The most common SLE manifestations are hair loss - 531

nephropathy - 453 acutesubacute cutaneous lupus - 383

leukopenia - 382 and low complement - 622 These results are

quite consistent with those of other authors however the prevalence

of serositis neurologic disorders and thrombocytopenia are relatively

low which may be due to differences in the choices of samples and

differences in SLE clinical characteristics across races

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 51: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

20

42 Prevalence and SLE diagnostic utility of autoantibodies

421 Antinuclear antibody (ANA)

Prevalence in SLE patients 859 of SLE patients had

positive ANA at the first visit In previous studies the prevalence of

ANA in SLE patients ranged from 60 - 100 The cause of this wide

oscillation may be due to differences in the choice of samples study

design testing techniques and positive cut points for antibody the

seroconversion of ANA

SLE diagnostic utility The sensitivity and negative predictive

value of ANA were 8594 and 7231 respectively which is quite

low compared to the previous study results The cause of this

difference may be due to the high proportion of SLE patients with

negative ANA in this study (141) the differences in the choice of

controls and characteristics of these subjects The specificity of ANA

for diagnosis of SLE is quite low (4615) when SLE cases were

compared with other autoimmune diseases which is due to the fact

that ANA may be found in many other autoimmune diseases

422 Anti-dsDNA antibodies

Prevalence in SLE patients 641 of SLE patients in this

study have positive anti-dsDNA antibodies which agrees with the

previous study results (37-85) The most significant factors

influencing this value were the level of disease activity and organ

damage of studied subjects the testing technique and the cut-off

point for the antibody evaluation

SLE diagnostic utility The specificity of anti-dsDNA

antibodies in SLE diagnosis when SLE cases were compared with

healthy controls and other autoimmune diseases was 9333 and

9744 respectively These values are quitely similar to previous

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 52: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

21

research results (95 - 100) Contrary to the specificity the

sensitivity of anti-dsDNA antibodies to SLE is generally not high

and widely variable (13-86) The frequent fluctuation of this

antibody in the course of disease and the different sensitivity of

immunoassay techniques may be the cause of this variations

423 Anti-C1q antibody

Prevalence in SLE patients The prevalence of anti-C1q

antibody in SLE patients widely ranged from 15 to 63 in the

previous studies our results were 25 at the first visit In 3 large

sample size studies of Julkunen H (2012) Mok CC (2010) and Orbai

AM (2015) the prevalence of anti-C1q antibody in SLE patients

were relatively low with little differences

SLE diagnostic utility The anti-C1q antibody has the worst

value in SLE diagnosis with an area under the ROC curve of 0676

and a sensitivity of 25 The low prevalence and frequent

fluctuations of anti-C1q antibody in SLE patients may be the main

cause of decreased sensitivity of this antibody in disease diagnosis

424 Antinucleosome antibodies (AnuA )

Prevalence in SLE patients The prevalence of AnuA in SLE

patients in this study was 813 In previous studies this value

widely ranged from 45 to 100 which was due to the differences

in race and levels of disease activity of studied subjects

SLE diagnostic utility Many studies have shown high

specificity (90-100) of AnuA in SLE diagnosis which agrees to

our results (987) The possible cause of this high specificity is that

nucleosome is a self-antigen with an important role in the

pathogenesis of SLE The sensitivity of AnuA to SLE in this study

was 8125 higher than that of anti-dsDNA antibodies (6406)

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 53: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

22

43 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

431 Antinuclear antibody (ANA)

The positive ANA (ge 12 OD) in SLE patients was

significantly related to the occurrence of low complement and other

autoantibodies The association between this antibody with the

clinical manifestations and activity of SLE in previous studies is

unclear due to the lack of reliable evidences

432 Anti-dsDNA antibodies

The positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is

significantly associated with acutesubacute cutaneous lupus

leukopenia and low complement but not with lupus nephritis The

serum levels and prevalence of anti-dsDNA antibodies in the flares

are higher than those in the stable periods of disease however this

antibody is not constantly related to both SLE and lupus nephritis

activity especially with flares of disease

433 Anti-C1q antibody

The positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

associated with the occurrence of nephropathy and low complement

The specificity of this antibody in predicting lupus nephropathy is

higher than that of the remaining antibodies and its concentration is

closely inversely correlated with both C3 and C4 complement

concentrations (p lt 00001) The prevalence and mean concentration

of anti-C1q antibody tends to increase with the level of disease

activity The correlation between anti-C1q antibody concentration

with SLICC renal activity score and the specificity of this antibody

in predicting lupus nephropathy are also better than the remaining

antibodies

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 54: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

23

434 Anti-nucleosome antibody (AnuA)

The positive AnuA in SLE patients is associated with chronic

cutaneous lupus nephropathy leukopenia and low complement

Sensitivity in predicting lupus nephropathy of AnuA is higher than

that of remaining antibodies The correlation with C3 C4

complement concentrations and SLEDAI score of this antibody is

also closer than the remaining antibodies

CHAPTER 5 CONCLUSION

The study on 128 systemic lupus erythematosus (SLE) patients

and a control group of 39 patients with other autoimmune diseases

and 30 healthy people we would like to draw some conclusions

1 Prevalence concentration and diagnostic utility of some

antibodies in SLE

Prevalence and concentration of antibodies

The prevalence of antinuclear anti-dsDNA anti-C1q and

antinucleosome antibody in SLE patients are 855 641 25

and 813 respectively All are significantly higher than the control

subjects (p lt00001) Antinucleosome antibody is positive in 587

of SLE patients with negative anti-dsDNA antibodies

The average concentration of antinuclear anti-dsDNA anti-

C1q and antinucleosome antibody in SLE patients are 218 098

(OD) 1794 4817 (IU ml) 3221 6034 (IU ml) and 945

1385 (IU ml) respectively All are higher than the control subjects

with p lt 00001

SLE diagnostic utility of antibodies

Antinuclear antibodies have a high sensitivity (8594) but

low specificity (6667) with SLE Anti-C1q antibodies have a high

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 55: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

24

specificity and positive predictive value (100) with SLE but itrsquos

sensitivity is very low (25)

The antinucleosome and anti-dsDNA antibodies have high

specificity with SLE (9855 and 9565 respectively) but the

sensitivity of antinucleosome antibody is significantly higher

(8125 vs 6406)

Antinucleosome antibody has the best utility in SLE diagnosis

(AUC = 0912) in ROC curve analysis

2 Relationship between autoantibodies with clinical

characteristics and activity of SLE

The relations to SLE manifestations

Positive antinuclear antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia leukopenia and low complement

Positive anti-dsDNA antibody in SLE patients is significantly

related to cutaneous lupus leukopenia and low complement

Positive anti-C1q antibody in SLE patients is significantly

related to alopecia nephropathy leukopenia thrombocytopenia and

low complement

Positive antinucleosome antibody in SLE patients is

significantly related to chronic cutaneous lupus nephropathy

leukopenia and low complement

The concentration of antibodies are positively correlated each

other The correlation between antinucleosome and anti-dsDNA

antibody is strongest (r = 053 p lt 00001)

The relation to SLE activity

The prevalence and average levels of antibodies in the active

disease group are higher in the inactive disease group (p lt002) The

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment

Page 56: BỘ GIÁO DỤC & ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠ Ọ ỘI NGUYỄ …sdh.hmu.edu.vn/images/ngcuusinh/NguyenHuuTruong-tt.pdf · bỘ giÁo dỤc & ĐÀo tẠo bỘ y tẾ

25

prevalence and average levels of antibodies in flares are also

significantly higher than in inactive disease periods (p lt 001)

Concentration of antinucleosome antibody is strongest

correlated with SLEDAI score (r = 0648) and best in predicting of

SLE exacerbations (AUC = 0828)

The concentration of anti-C1q and antinucleosome antibodies

are significantly decreased after SLE exacerbations

Concentration of anti-C1q antibody is strongest correlated

with SLICC renal activity score (r = 0399) and highest specificity in

predicting of renal flares (8069) The specificity in predicting

renal flares is 867 when anti-C1q and anti-dsDNA antibodies are

positive together

RECOMMENDATIONS

Antinucleosome antibody has high sensitivity and specificity

in SLE diagnosis therefore it should be tested and measured in

patients with suspected manifestations of SLE but lack of criteria for

diagnosis In addition this antibody is closely related to the level of

activity of SLE so it should also be periodically monitored or tested

as soon as the patients has clinical signs suggesting a change of the

disease activity to early detect and manage SLE flares

Anti-C1q antibody has a high specificity for lupus

nephropathy so it should be tested in cases of suspected clinical

manifestations This antibody should also be periodically monitored

during lupus nephritis treatment