Analisis obat dalam berbagai cairan

biologis

Oleh : Hendri Wasito, S. Farm., Apt.

JURUSAN FARMASI FKIKUNIVERSITAS JENDERAL SOEDIRMAN

Tinjaua umum

Sampel Biologis

Pengambilan Sampel Darah

Diambil dari venipuncture (vena)

Alat : syringe / vacutainer apparatus / kateter vena

Volume sesuai kebutuhan biasanya 5 – 15 mL

Mula-mula bagian atas lengan diikat diolekan antiseptik pengambilan sampel darah dengan hati-hati

Penanganan Sampel Darah ... (1)

Sampel darah jangan digojog karena bisa terjadi hemolisis

darah yang dianalisis dapat berupa : darah total, serum, plasma, fraksi bebas protein

jika obat yang akan dianalisis peka terhadap degradasi enzim, maka segera didinginkan atau degradasi enzimnya.

Penanganan Sampel Darah ... (2)

pengumpulan, penanganan, penyimpanan, dan penandaan contoh sampel darah yang tepat akan meningkatkan hasil analisis yang dilakukan.

sampel harus dianalisis segera atau disimpan dengan teknik penyimpanan yang sesuai prosedur, semakin lama serum/plasma bersentuhan dengan eritrosit, semakin besar penurunan kadar obat

Serum dan Plasma Darah

Untuk mendapatkan serum : darah utuh didiamkan ± 20 menit , disentrifuge kemudian diambil beningannya

Untuk mendapatkan plasma : Darah utuh + antikoagulan disentrifuge, diambil beningannya

Penggunaan plasma untuk analisis lebih sering dipakai karena jumlah obat lebih banyak (bebas & terikat protein plasma)

Sampel Urine

Untuk studi obat atau metabolitnya melalui ginjal

Mudah dilakukan & banyak lama dan selang waktu

penampungan urin sesuai dengan karakteristik obat yang akan diuji

Umumnya tidak mengandung lipid dan protein, mudah diekstraksi menggunakan pelarut organik.

Penanganan Sampel Urine

wadah penampung urine harus inert dan bebas dari bahan pengganggu analisi

untuk menghindari kontaminasi mikroba urin dapat disimpan dalam lemari pendingin

untuk analisi biasanya diperlukan 10–15 ml urine

hasil penetapan obat dari urine memberi informasi yang penting tentang timbunan obat dalam tubuh

Sampel Feses

Untuk studi metabolisme kesetimbangan massa, dan analisis obat dan metabolitnya yang terlihat di empedu

Mudah & banyak dalam analisis perlu

diperhatikan homogenasi dari feses untuk dianalisis selanjutnya

Sampel Saliva

Orang normal mampu memproduksi saliva lebih dari 2 L dalam sehari.

Sebagai alternatif jika tidak memungkinkan mengambil darah

Mengandung obat dalam bentuk tidak terionisasi & tidak terikat protein

Tratmen untuk analisis lebih mudah dan sederhana.

Pengambilan Sampel Saliva

Karakteristik cairan pelarut untuk mempersiapkan sampel biologis

untuk proses ekstasiPELARUT MANFAAT KEKURANGAN

Akuadest Melartkan relatif baik, tidak merusak jaringan, pH mendekati 7.0

Derajat ionisasinya tinggi, tidak merusak enzim pengganggu

Asam lemah (< 0.5 N)

Melarutkan relatif baik, mampu mendenaturasi enzyme, pH akhir < 7.0, meminimalkan terjadinya busa

Tidak baik untuk senyawa yang sensitif terhadap asam

Asam kuat (> 0.5 N)

Melarutkan dengan baik, denaturasi semua enzyme dan protein, pHakhir < 4.0

Bisa terjadi agregasi, tidak sesuai untuk senyawa yang sensitif asam, dapat merusak jaringan

Basa lemah (< 0.5 N)

Melarutkan relatif baik, mendenaturasi beberapa enzyme, pH akhir > 7.0

Tidak sesuai untuk senyawa yang sensitif terhadap basa, dapat mengakibatkan berbusa (foaming)

Basa kuat (> 0.5 N)

Melarutkan relatif baik, mendenaturasi semua enzyme dan protein, pH akhir > 10.0

Bisa terjadi agregasi, tidak sesuai untuk yang sensitif basa, dapat merusak jaringan, mengakibatkan busa yang lebih kuat

Alat yang digunakan dalam bioanalisis

Tersedia dan terjangkau Sesuai untuk sampel maupun

senyawa yang dianalisis Selalu dikalibrasi dengan baik Terawat dan memiliki

performa yang baik Tujuannya :

data yang dihasilkan dari alat reliabel

data tidak hilang atau menghasilkan data yang inaccurate

DISKUSI …

Apa saja yang harus diperhatikan dalam melakukan analisis obat atau metabolit obat dalam sampel / cairan biologis ?

Bagaimana treatmen / preparasi sampel cairan biologis sehingga siap untuk dilakukan analisis dengan metode yang sesuai ?

Apa yang perlu diperhatikan dalam memilih metode analisi obat atau metabolit obat dalam sampel cairan biologis ?

JAWABLAH PERTANYAAN BERIKUT, DENGAN JELAS, LENGKAP, DAN SISTEMATIS !

H A T U R N U H U N …

JANGAN LUPA UNTUK MENGERJAKAN TUGAS TERSTRUKTUR SESUAI DENGAN PEDOMAN YANG

TELAH DIBERIKAN, DAN SEGERA DIKUMPULKAN !!!