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    COMUNICACION BREVE

    Billetes como fomites de bacterias con potencialpatogeno para el hombre

    Paper Currency as Fomite for Bacteria with Human Pathogenic Potential

    C a rl os A lb e rt o B e ta n cu r', S a nt ia g o E s tr ad a '. M a rf a T e re s a C eb a ll os ', E li sa S a n c he z ', A n a M a rf a A b ad ',C la u dia V a ne q as ", L in a M a rf a S a la z ar "

    Resumentntroducden; EI papel moneda es uno delos artfculos de mayor circulaci6n en el mun-do. En Colombia, la materia prima para laelaboraci6n de los billetes es 100% fibra dealgod6n, 1 0 que Ie confiere una estructuraporosa que Ie permite alojar diferentes tiposde detritus y que posibilitarfa la colonizaci6nmicrobiana de dicho papel.Objetivo: Determinar la presencia y el tipode contaminaci6n bacteriana en los billetescirculantes en Medellfn.Materiales y rnetodos: Por convenien-

    cia, en el perfodo de diciembre 2008 amayo 2009, se seleccionaron 101 billetespara analisis microbiol6gico. Dicho analisisconsisti6 en el aislamiento de la microbiotabacteriana presente en ambas superficies de

    1 Profesor titular, Facultad de Medicina, Universidad CES,Medellfn, Colombia

    2 Director, Laboratorio Clfnico, Congregaci6n Mariana,Medellfn, Colombia

    3 Secci6n de Microbiologfa, Laboratorio Clfnico,Congregaci6n Mariana, Medellfn, Colombia

    4 Estudiante de pregrado, Facultad de Medicina, UniversidadCES,Medellfn, Colombia

    5 Grupo de Investigaci6n en Ciencias Basicas,Facultad deMedicina, Universidad CES, Medellfn, Colombia

    los billetes, empleando la tecnica del hisopoy siembra en aislamiento en agar sangre yen agar McConkey, asi como la clasificaci6ntaxon6mica de los aislamientos obtenidos.Resultados: EI 91,1% de los billetes eva-luados presentaba contaminaci6n micro-biana, y se obtuvieron 124 aislamientos.EI genero mas frecuentemente aisladocorrespondi6 a Bacil lus spp., aislado en 65de los cultivos (52,4%). EI41,9% de los ais-lamientos correspondfa a bacterias poten-cialmente pat6genas para el hombre, comoestafilococos coagulasa negativos (20,2%) ybacilos gramnegativos de la familia Entero-bacteriaceae (15,3%), de los cuales, Pantoeacloacae fue la especie mas frecuentementeaislada (8,9%). EI 17,7% de los aislamientoscorrespondfa a bacterias de origen posible-mente enterico,Conclusion: EIpapel moneda colombianopuede actuar como f6mite de micro biotaambiental y de bacterias potencialmentepat6genas para el hombre.Corresponding author:Carlos Alberto Betancur, Calle 51 N45-93, consultorio 325,Clfnica SOMA, Medellfn, Colombia. Telefono: (0574) 512-1753. [email protected]

    Recibido: 27/12/2009; Aceptado: 03/05/2010

    mailto:[email protected]:[email protected]
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    Billetes como fomites de bacter ias con potencial patoqeno para el hombre

    Palabras clave: papel moneda, fomite,microorganismos patoqenos,AbstractIntroduction: Paper currency is one of the

    articles of highest circulation worldwide. InColombia, the raw material for its manu-facture is 100% cotton fiber, which gives ita porous structure that allows bills to lodgedifferent types of debris and enables micro-bial colonization of this paper.Aim: Determine the presence of bacterialcontamination and its type in bills circulat-ing in the city of Medellin.Materials and methods: Out of conve-

    nience, 101 bills were selected for microbio-logical examination from December 2008 toMay 2009. This analysis included the isola-tion of the bacterial microbiota present onboth surfaces of the notes, using the swabtechnique and performing the taxonomicclassification of the isolates obtained.Results: 91.1% of the evaluated bills pre-

    sented microbial contamination for a totalof 124 isolates. The genus most frequentlyisolated corresponded to BaciLLus; it wasisolated in 65 cultures (52.4%).41.9% of theisolates corresponded to bacteria potentia-lly pathogenic to humans, such as coagula-se-negative staphylococci (20.2%) and Ente-robacteriaceae gram-negative rods (15.3%),Pantoea cloacae being the most frequentlyisolated species (8.9%).17.7% of the isolatescorresponded to enteric bacteria.Conclusion: Colombian bills can act as

    fomite for environmental microbiota andbacteria which are potentially pathogenicto people.Keywords: Paper currency, fomite, patho-

    genic microorganisms

    Introducci6nEI papel moneda es uno de los artfculos demayor circulacion en el mundo, por 1 0 que unsolo billete puede recorrer grandes distanciasy ser manipulado por muchas personas. Losbilletes colombianos estan elaborados en el100% de fibras de alqodon (1), 1 0 que les con-fiere una superficie porosa y rugosa que nosolo brinda al tacto una textura fadlmente dis-tinguible, sino que, edemas, posibilita el de-posito de diferentes tipos de partfculas, comopolvo y microorganismos, los cuales puedenestar presentes por diversos lapsos de tiempoy ser diseminados a muchos ambientes me-diante su rnanipulacion (2).En el 2000, Pope et al. reportaron contami-nacion bacteriana en el 94% de un grupo de68 billetes de dolares estadounidenses. Eneste estudio, se obtuvieron 93 aislamientosbacteria nos y solo en cuatro de estos billetesno se obtuvo crecimiento microbiano (3). Sinembargo, un trabajo anterior a este estudio,realizado por Abrams y Waters en 1970,reporto que el 42% de los billetes anali-zados porta ban bacterias potencial mentepatoqenas (Escherichia coli, Klebsiella spp.,Pseudomonas spp. y Proteus mirobilis; (4).Otros estudios realizados en Africa, inclusivereportaron la contaminacion de los bille-tes circulantes con nematodos intestinales(Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura yEnterobios vermicularis) (5,6). Ademas de lacontaminacion microbiana, en el papel mo-neda tarnbien se ha detectado la presenciade otras sustancias como psicofarmacos (7).Pese a los estudios antes descritos, real mentees poca la literatura disponible sobre la con-tarninacion microbiana del papel moneda ysu papel como fomites de microorganismospotencial mente patoqenos. Por 1 0 tanto, elobjetivo del presente estudio consistio enidentificar la presencia de contarninacionbacteriana en billetes circulantes en Mede-

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    B etancur C A, Estrada 5, C eba llos M T, e t. al .

    IIIn, realizando una dasificaclon taxonomicade los aislamientos, para determinar si el pa-pel moneda colombiano se comporta comofornite de microorganismos potencialmentepatoqenos para el hombre. Adernas, se re-laciono la nominacion y la fecha de ernisionde los billetes con la presencia de contami-nacion bacteriana, como medida indirectade su mayor 0menor circulacion.Materiales y metodosT ip o de estud io : se llevo a cabo un estudiodescriptivo prospectivo.Muestra: se selecciono una muestra porconveniencia de 101 billetes, captados enlas cajas de pago del Laboratorio Clfnico dela Conqreqacion Mariana, en el periodo dediciembre 2008 a mayo 2009. Tarnbien porconveniencia, se seleccionaron seis billetespor dfa, dos veces a la semana, hasta alcan-zar el numero muestral convenido. La no-rninacion, fecha de edicion y serie de cadauno de los billetes incluidos en el estudio, seregistraron en una base de datos generadapara tal fin.Anal is is microbiol6gico: cada billete se frotopor ambas carascon un aplicador de alqodonesteril, previamente humedecido en caldo deinfusion cerebro-corazon (Brain Heart Infu-sion BHI) (BD,Franklin Lakes,NJUSA).Posteriormente, dicho aplicador fue intro-ducido, sometido a aqitacion y escurridocontra las paredes del tuba que contenfa elcaldo BHI, en el que se habfa humedecidopreviamente. EI caldo se incubo a 36C du-rante 48 horas, verificando la presencia deturbidez cada 24 horas.Cuando se evidencio turbidez, se realize unacoloracion deGram paraverificar la presenciayel tipo de contarninaclon bacteriana presente,asf como una siembra del aislamiento en agar

    sangre y agar McConkey (BD,Franklin Lakes,NJ USA), los cuales se incubaron a 36C por12 a 18 horas. Posteriormente, se determinernacroscopicamente el nurnero de morfotiposde colonias presentes,asfcomo la morfologfay tincion de Gram, con el objetivo de orientarel proceso de identiflcacion. Dicho proceso serealize siguiendo procesos estandarizados.Los bacilos gramnegativos que no pudieronidentificarse empleando la serie metabolicatradicional (agar triple azucar0TSI,agar lisina,agar citrato, medio paradeterminacion de sul-furo, movilidad e indol 0 SIMY agar urea), seidentificaron mediante el metoda automatiza-do mini-API (Biomerieux Industry). Loscocosgrampositivos clasificados como estafilococoscoagulasa negativos, no fueron identificadoshasta el nivel de especie.En cada uno de los ensayos realizados sehizo control de esterilidad para cada unode los medias empleados, asf como paralos aplicadores de alqodon utilizados parafrotar la superficie de los billetes.Anal is is estadfst ico: para lasvariables cuan-titativas se calcularon medidas de tendenciacentral (media aritrnetica) y de dispersion(desviacion estandar). Para las variables cua-litativas, se calcularon frecuencias absolutasy relativas. Paradichos anallsis, se ernpleo elprograma estadfstico SPSS,version 15.0.ResultadosDe los 101 billetes analizados, seobtuvieron124 aislamientos. De estes, el genero masfrecuentemente aislado correspondlo a Ba-cillus spp., aislado en 65 billetes (52,4%).Otras bacterias aisladas correspondieron acocos grampositivos, en 29 billetes (23,4%),y los estafilococos coagulasa negativosfueron los que predominaron, los cuales seaislaron en 25 billetes (20,2%).

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    Tambien fue posible aislar bacterias conmorfologfa de bacilos gramnegativos en 30de los billetes (24,2%). Diecinueve de dichosaislamientos (15,3%) correspondieron amiembros de la familia Enterobacter iaceae ,y P a nto ea a giom er an s (anteriormente, En-t er obac te r ag iome rans) fue la especie masfrecuentemente aislada (8,9%). Siete de losbacilos gramnegativos aislados (5,6%) nopudieron ser clasificados taxon6micamente.Enla tabla 1 se resume la identidad y la can-tidad de los aislamientos obtenidos.Con respecto al nurnero aislado de morfoti-pos distintos de colonia en cada uno de losbilletes, en 28 de ellos se obtuvo crecimien-to sirnultaneo de dos morfotipos diferentes,mientras que 5610en dos se aislaron tres di-ferentes tipos de colonias. Ennueve billetesno se obtuvo crecimiento alguno; dicho deotra manera, 91,1% de los billetes evalua-dos present6 contaminaci6n microbiana. EI41,9% de dicha contaminaci6n correspon-di6 a bacterias potencial mente pat6genaspara el hombre, de las cuales, 17,7% fueronbacterias de origen posiblemente enterico,

    AI evaluar la relaci6n entre la nominaci6n delos billetes y el cultivo positivo se encontr6que, independientemente de la primera,todos los billetes presentaron contamina-ci6n bacteriana, la cual fue mas frecuenteen aquellos con nominaci6n de dos milpesos (tabla 2).Ademas, no se encontr6 unaasocracion estadfsticamente significativa(p=0,998) entre la nominaci6n de los billetesy la contaminaci6n con bacterias entericas,a pesar de que la distribuci6n del nurnerode billetes de las diferentes denominacionesfue uniforme.Cuando se relacion6 la fecha de edici6n conla positividad del cultivo, se encontr6 quese obtuvo crecimiento en billetes de todaslas ediciones, siendo este mas frecuente enlos billetes editados en el 2006, edici6n queconstituy6 el grupo con mayor nurnero debilletes analizados (65,3%) (tabla 3).Adernas,no hubo asociaci6n (p=0,892) entre la fechade emisi6n de los billetes y la presencia decontaminaci6n con bacterias entericas: aun-que, como ya se mencion6, se present6 unsesgo con respecto al nurnero de billetes encada ana de emisi6n analizado (tabla 3).

    Tabla 1. Clasl flcacion taxonornlca y ruimero de los aislamientos obtenidosMorfologia segun la

    t inci6n de GramClasificaci6n taxon6mica Numero de aislamientos

    obtenidosBacilos grampositivos Bacillus spp. 65 52,4

    Staphylococcus coagulasa negativos 25 20,2Cocos grampositivos Enterococcus spp. 3 2,4

    Streptococcus spp. 1 0,8Pa nt oea a ggl ome ra n s 11 8,9Bacilos gramnegativos fermentadores 7 5,6de glucosa, no identificadosEs che ri ch ia c ol i 4 3,2Bacilos gramnegativosA cin eto ba cte r sp p. 4 3,2En te ro b ac te r c lo a ca e 2 1,6K le b si el la p n eumoni ae 2 1,6

    n=124 aislamientos

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    Betancur CA, Estrada 5, Ceballos MT, et. al .Tabla 2. Relacion de la norninacion del bil lete y cultivopositivo.

    1.000 1 15 162.000 0 17 175.000 2 16 1810.000 4 16 2020.000 1 16 1750.000 0 13 13Total 8 93 101

    Discusi6nSi bien los billetes pueden ser consideradosambientes hostiles para el desarrollo de unamicrobiota residente, es posible que permi-tan la colonizaci6n microbiana transitoria, lacual puede simplemente ser parte de la mi-crobiota ambiental 0, por el contrario, tenerpotencial pat6geno para el hombre. Esto sedebe a que el papel moneda es, quiza, unode los objetos de mayor circulaci6n a nivelmundial y, por 10 tanto, esta expuesto alcontacto con multiples personas y super-ficies, 10 cual 10 convierte en vehfculo detransporte de diversos tipos de partfculas,incluidos los microorganismos. Se asumeque los microorganismos provienen, prin-cipalmente, de las partfculas de polvo quese alojan en la superficie del billete, 0 delcontacto con nuestras manes y todo 10queelias han tocado.AI manipular el papel moneda, no 5610trans-ferimos parte de la microbiota presente ennuestras manos, sino que, adernas, la micro-biota presente en el, puede ser intercambiadacon estasy desde alii a otras partes de nuestrocuerpo, 0 a otros objetos que tambien actuencomo f6mites. Esto es de particular impor-tancia si se tiene en cuenta que, en nuestromedio, existen diversas costumbres cuandose trata de manipular los billetes, como, por

    ejemplo, guardarlos en contacto con otraszonas del cuerpo (dentro del sosten 0 en lasmedias) y contarlos con los dedos humedeci-dos con saliva,entre otros.Semmelweis (8) demostr6 que las manes delpersonal de salud y, por 10tanto, las de to-das las personas, son portadoras de micro-organismos, subrayando su papel en la dise-minaci6n de agentes etiol6gicos de Indoleinfeccioso, algunos de ellos multirresisten-tes, especialmente cuando no se aplican lasprecauciones universales de bioseguridad.Sin embargo, desde inicios del siglo pasado,ya en nuestro pais, se temfa que la monedacirculante jugaba un papel importante en latransmisi6n del bacilo de Hansen (Mycobac-te rium Lep ra e), por 10que se acuii6 una mo-neda especial para los leprocomios (9).Eneste trabajo se encontr6 que el 91,1% delos billetes presentaba contaminaci6n bac-teriana, de la cual, eI41,9% estaba represen-tada por bacterias con potencial pat6genopara el hombre. De estes, 22 aislamientos(17,7%) correspondieron a bacterias cuyoorigen era posiblemente enterico (Escheri-ch ia coli, P an to ea a gLome ra ns, E nte ro ba cte rTabla 3. Relacion de la fecha de edicion del billete ycult ivo posit ivo .

    Fecha de emisi6n1" semestre de 2003 0 1 11" semestre de 2004 0 4 42'0 semestre de 2004 0 2 21" semestre de 2005 0 4 42'0 semestre de 2005 1 3 41" semestre de 2006 1 27 282'0 semestre de 2006 5 48 532'0 semestre de 2007 0 2 21" semestre de 2008 1 1 22'0 semestre de 2009 0 1 1

    Total 8 93 101

    ....

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    c lo acae , KLebsie lla pneumoniae y Enterococ-cus spp.) y, por 1 0 tanto, sugestivo de conta-minaci6n fecal.Bacterias tales como E . co li , KLebsie lla spp.,Pantoea sp. y Enterobacter spp., son pat6ge-nos frecuentes productores de infeccionesurinarias, neumonfa, infecci6n de heridas,etc.,y pueden ser resistentes a multiples an-tibi6ticos 0 hacerse resistentes a ellos, tal ycomo es el caso de las cepas productoras debetalactamasas de espectro extendido (10,11).De tal manera que la distribuci6n de estetipo de cepas pudiera verse facilitada por lamanipulaci6n de los billetes.Otros bacilos gramnegativos, como aquellosdel genero Acinetobacter aislados en el 3,2%de los billetes, son bacterias consideradas debaja virulencia, pero con un patr6n de resis-tencia que adquiere relevancia en circunstan-ciasde infecciones hospitalarias (12).

    Con respecto a los estafilococos coagulasanegativos, las bacterias con potencial pat6-geno mas frecuentemente aisladas en el es-tudio (20,2%),si bien no fueron identificadosa nivel de especie, suponemos que parte deeste grupo estuvo representado por aque-lias bacterias del grupo que hacen parte dela microbiota normal de piel del ser huma-no. Dicha microbiota suele mantener unarelaci6n simbi6tica con su huesped, pero,cuando se pierde la continuidad en la piel,en las barreras mucosas 0 se altera el equi-librio entre la bacteria y el huesped, puedenpenetrar, colonizar e infectar otros tejidos,produciendo procesos de fndole patol6gico(13,14). Su papel como agentes etiol6gicos enentidades clfnicas tales como bacteriemiaen pacientes inmunosuprimidos, infeccionesurinarias, infecciones asociadas a dispositi-vos medicos de diversa Indole, osteomielitis,endoftalmitis despues de cirugfas oculares,etc., ha side bien documentado (15).

    EI segundo coco Gram positivo mas fre-cuentemente aislado (2,4%), correspondi6 algenero Enterococcus, bacterias de especialsignificancia si setiene en cuenta que hacenparte de la microbiota del sistema gastroin-testinal de los mamfferos (16,17), 1 0 cual indicasu posible origen fecal. Esta bacteria ha sideasociada como agente etiol6gico de infec-ciones urinarias, bacteriemia y endocarditis,infecciones intraabdominales y pelvicas,infecciones de pieI (diffcil atribuirle su papelen este tipo de infecciones), sepsis neonataly, en raras ocasiones, meningitis (13,17).En 1 0 concerniente a las bacterias del gene-ro Bacil lus, estas constituyeron el principalgrupo bacteriano contaminante; se aisl6 en52,4% de los billetes. Estos hallazgos sonsimilares a los encontrados por Xu et aL. (18),Pope et aL. (3) y Uneke et aL. (6). Las bacteriasdel genero Bacil lus se adaptan bien a lascondiciones ambientales extremas, me-diante la formaci6n de esporas, las cualesles permiten sobrevivir en el suelo y sertransportadas por las partfculas de polvo,tolerando temperaturas extremas, condi-ciones de desecaci6n e, inclusive, la acci6nde detergentes y altas concentraciones dealcohol antiseptico (19,20). Por 1 0 tanto, el he-cho de aislar bacterias de este genero, tantoen una superficie como en una muestraclfnica, haria pensar siempre en contamina-ci6n con microbiota ambiental (21). Algunasespecies de Bacil lus y sus toxinas han sideimplicadas como agentes etiol6gicos de en-fermedades transmitidas por alimentos (22).Adernas, se sabe que se adhieren al plasticode los cateteres vasculares, 1 0 que explica supapel en las bacteriemias que se presentanen algunos pacientes (23). Los cateteres deHickman, retirados de pacientes con cancery bacteriemia persistente por Bacil lus spp.,evidenciaron la producci6n de exopollsaca-ride bacteriano cuando fueron sometidos amicroscopia electr6nica de barrido (24).

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    Betancur CA, Estrada S,Ceballos MT, et. 01 .

    En 10que respecta a la nominaci6n y al afiode edici6n del billete en relaci6n con la con-taminaci6n bacteriana, 5610es posible decirque estuvo presente sin distinci6n algunade las caracteristicas antes mencionadas.No fue posible determinar si a mayor nivelde circulaci6n, habra mayor grado de con-taminaci6n.Esclaro que los billetes son uno de los ele-mentos de mayor circulaci6n en el mundo yque su papel como posibles f6mites ha sidedocumentado por nuestro trabajo. Esto nosavala para reforzar la idea de la importanciadel lavado de manes despues de tocar unbillete, asl como su adecuada manipulaci6ny almacenamiento cuando entren en con-tacto con nosotros.Referencias1. Segured.com. Los tres niveles de seguridad de un billete.

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