Técnicas de laboratorio ii

Técnicas de Laboratorio II

Mario Ariel Aranda

Company Logo

La Materia

FechaDía

Mes ClaseN°

Unidad N°

Contenidos

19 03 01 I Hematología y Hemostasia

26 03 02 II Química Nefrológica

02 04 03 - Feriado Nacional

09 04 04 II Química Nefrológica

16 04 05 III Análisis de Líquidos de punción

07 05 08 I, II y III Primer Examen parcial

14 05 09 IV Proteinograma

21 05 10 IV Proteinograma

28 05 11 V Endocrinología Clínica

04 06 12 V Endocrinología Clínica

11 06 13 VI Nociones Básicas de análisis

18 06 14 VI Nociones básicas de análisis

25 06 15 VI Nociones básicas de análisis

02 07 16 IV, V y VI

Segundo Examen Parcial

Company Logo

Semana Seminario Trabajo practico

19/03 Hematología Hemostasia (seminario)

26/03 Química Nefrológica I Hematología I

02/04 Feriado nacional Feriado nacional

09/04 Química Nefrológica II Hematología II

16/04 Citología Hemostasia

23/04 Líquidos de punción I Química Nefrológica

30/04 Líquidos de Punción II Citología

07//05 Primer Examen parcial Líquidos de Punción I

14/05 Proteinograma I Líquidos de Punción II

21/05 Proteinograma II Proteinogramas

28/05 Endocrinología Clínica I Endocrinología Clínica II

04/06 Endocrinología Clinica III Inmunoserología

11/06 Parasitología Parasitología

18/06 Parasitología Parasitología

25/06 Caso Integrador (discusión) Repaso

02/07 Segundo Examen parcial Caso Integrador (exposición)

Cronograma de actividades

Company Logo

Contenidos para Hoy

1. Introducción1. Introducción1. Introducción1. Introducción

2. Hematología2. Hematología2. Hematología2. Hematología

3. Hemograma3. Hemograma3. Hemograma3. Hemograma

4. Hemostasia4. Hemostasia4. Hemostasia4. Hemostasia

5. Laboratorio de Hemostasia5. Laboratorio de Hemostasia5. Laboratorio de Hemostasia5. Laboratorio de Hemostasia

Company Logo

Si no tengo el nombre: María, Mario, Marcos, Marin…?

Company Logo

Si no tengo la ubicación del paciente, a quién le entregamos el resultado? Clínica, Traumatología, Guardia, …?

Company Logo

Si no tengo el diagnóstico, o no se entiende, y el suero es lipémico o ictérico, o la glucemia es elevada, o hay parámetros alterados, es esperado o hallazgo de laboratorio?

Company Logo

Si no se entiende el pedido, qué le hacemos?

Company Logo

Causas de rechazo de muestras

Company Logo

Causas de rechazo de muestras

Company Logo

Salud del paciente

Hematología

Breves nociones teóricas y Técnicas de Análisis

Company Logo

Células madres

No pueden distinguirse morfológicamenteCD34+Stem Cells de sangre periférica

pueden recuperarse: TransplanteEstroma de la M.O: Microambiente

necesario para el crecimiento y desarrollo de las Stem Cells.

Company Logo

Hematocrito H:47% M:42%

Hemoglobina H:16g% M:14 g%

Eritrocitos H:5x106 M: 4,5x106

Leucocitos H y M: 5.000-10.000

Plaquetas H y M:150.000-300.000

Company Logo

ADULTOS relativaN: 45-65%E: 0-4%B: 0-1%L: 20-45%M: 1-12%Niños promedioN 50%L 40%

ADULTOS absolutaN 1,8 -7,1 x 109/LE 0,0-0,4 x 109/LB 0,0-1,0 x 109/LL 0,8-4,9 x 109/LM 0,04-1,3 x 109/LNiños promedioN 0,4o x 109/LL 0,31 x 109/L

Company Logo

Neutrófi lo

Cayado

Company Logo

SE REFIERE A ALTERACIONES POR CANTIDAD DE LOS DISTINTOS LEUCOCITOS

Company Logo

Compartimientos medulares

A) Células germinales o Stem CellsB) Células germinales comprometidas: CFUC) Compartimento mitótico o ProliferativoD) Compartimento post-mitótico, de reserva o depósito.

Células con gran capacidad de dividirse y duplicarseMieloblastos y Promielocitos

PMN cumplen sus funcionesApoptosisVida 1/2 del PMN en tejidos: hasta 2 dias.

En los tejidos

Company Logo

En sangre periférica

Vida 1/2 del PMN: 6-10 hs.Factores que afectan la concentración

de PMN en sangre periférica:a) Rapidez de salida desde el

compartimento de reservab) Equilibrio entre el pool circulante y

marginalc) Rapidez con que los granulocitos

abandonan la sangre periférica

Company Logo

Cinética de una infección

Liberación de PMN maduros del pool de almacenamiento o reserva medular.

Proliferación del pool mitótico para compensar y/o amplificar la carga de PMN maduros.

PMN maduros salen a circulación, excepto que por el tenor del proceso infeccioso, la demanda produzca la salida de elementos inmaduros: Reacción leucemoide: Permite evaluar la severidad del proceso infeccioso.

Proliferación del Pool mitótico: ↑ en los CSF

Company Logo

PMNProvenientes

de la MO

PMNCirculantes

POOLMarginal

PMNTisulares

(sangre)

Company Logo

1.-Leucocitosis Aumento del nº de leucocitos. Infecciones bacterianas piógenas. Inflamaciones. Cánceres. Quemaduras. Infarto al miocardio.

2.-Leucopenias Reducción del nº de leucocitos. Aplasia medular. Enfermedades virales. Tuberculosis. Fiebre tifoidea. SIDA Hepatitis. Por drogas Sepsis

Company Logo

-Neutrofilia Aumento de neutrófilos. Infecciones Bacterianas Agudas. Comienzo de infecciones virales. Quemaduras. Drogas (prednisona 40 mg).

-Neutropenia Disminución de neutrófilos. Pueden darse por menor producción o maduración,

ó por mayor destrucción o secuestro. Anemia perniciosa o aplásicas

Company Logo

Leucocitos

ParasitosisAlergias

Infección Bacteriana

Infección Viral

Leucemia M./Inf. ViralesLeucemias

Company Logo

ALTERACIONES NUCLEARESO

ALTERACIONES CITOPLASMÁTICAS

Company Logo

CON ALTERACIÓN MORFOLÓGICA CITOPLASMÁTICA

- Granulación gruesa

Company Logo

Recuerdan cuál es su funciónY Cuál es su vida media?

Company Logo

Concentración de hemoglobina corpuscular

media(CMHG)

Hemoglobina x 100 Hematocrito

32-36µ3

Volumen globular medio (VCM)

Hematocrito x 10 millones de eritrocitos.

85-95 fL

Hemoglobina Corpuscular media (HCM)

Hemoglobina x 10 millones de eritrocito

29-32 pg

Company Logo

Del tamaño: Anisocitosis Diferentes tamaños. Microcitosis Menor tamaño. Macrocitosis Mayor tamaño.

De la coloración: Hipocromía C.H.C.M. disminuida ↓ 30%

Company Logo

De la forma: PoiquilocitosisDistintas formas Ovalocitosis Forma ovalada Eliptocitosis Forma elíptica Esferocitosis Forma esférica Esquizocitosis Fragmentos de G.R.

PolicromatofiliaPolicromatofiliaInclusiones citoplasmáticas:Inclusiones citoplasmáticas: PB, CHJ, Anillos de PB, CHJ, Anillos de

CabotCabot

Company Logo

Calcular el VCM y el CHCM de un sujeto con un recuento de eritrocitosde 4000000/ mm3, un hematocrito de 40% y una concentración dehemoglobina de 12 g/dl. Describe los glóbulos rojos del individuo: son normocitos?, normocrómicos?

Company Logo

Hemoglobina Hematocrito

Recién nacido19.5 ± 5.0 54 ± 10

Mujeres14.0 ± 2.0 42 ± 5

Hombres 16.0 ± 2.0 47 ± 7

Company Logo

n x 20 x 10 = nº GBl. 4

Company Logo

Mide indirectamente la concentración de proteínas en plasma. Se altera cuando cambia la proporción entre albúmina y globulinas

Aumenta con la edad, menstruación, embarazo, lactancia. Se modifica con alteraciones hemáticas, presenciade Ig, o aumento de fibrinógeno

Company Logo

Sugiere: Intensidad de la respuesta inflamatoria Actividad Generalización Organicidad

Utilidad: Ayuda al diagnóstico Control evolutivo (múltiples enfermedades reumáticas) Valor pronóstico Factible en laboratorio y económico

Company Logo

Características: INESPECÍFICA: no sirve para realizar un diagnóstico

etiológico y se eleva en gran número de procesosNO ES CONSTANTE: la ausencia de elevación no

supone ausencia de patología orgánicaVaría lentamenteAmbigüedad pronósticaSe modifica por otros factores

Company Logo

Hemostasia

Company Logo

Hemostasia

Company Logo

Coagulación Fibrinolisis

Hemostasia

Plaquetas Endotelio vascular

Company Logo

Trombina Plaquetas

Endotelio

TROMBOTROMBO

Sistema fibrinolítico

Lesión

Company Logo

LESION

Adhesividad Plaquetaria

Agregacion Plaquetaria

Relación Endotelio Vascular/Plaquetas

SISTEMA DE FLUJO MEDIO

Company Logo

LESION

Adhesividad Plaquetaria

Agregacion Plaquetaria

Relación Endotelio Vascular/Plaquetas

SISTEMA DE ALTO FLUJO

Company Logo

SUBENDOTELIO

ADHESIVIDAD PLAQUETARIA

Von Willebrand

GP Ib-IX-V

GP IIb-IIIa

(αIIbβ3)Plaqueta

Alto Flujo >>>

Company Logo

Celula Endotelial

fosfolipidos

Fosfolipasa A2

Acido araquidonico

Ciclo-oxigenasa

Prostaciclina

Prostaciclina sintetasa

PG G2 PGH2

Plaqueta

fosfolipidos

Fosfolipasa A2

Acido araquidonico

Ciclo-oxigenasa

Tromboxano A2

Tromboxano sintetasa

PG G2 PGH2

ASPIRINAAINE

Company Logo

• INHIBIDORES DE LA CICLO-OXIGENASA (COX-1)

• INHIBIDORES DE LA TROMBOXANO SINTETASA

• BLOQUEADORES DE LOS RECEPTORES DEL TROMBOXANO A2

• INHIBIDORES DE LA FOSFODIESTERASA

• INHIBIDORES DEL ACOPLE AL ADP

• INHIBIDORES DE LOS RECEPTORES PLAQUETARIOS

NIVEL DE ACCION DE LOS ANTIAGREGANTES PLAQUETARIOS

Company Logo

TROMBINA

COAGULAC. INTRINSECA COAGULAC. EXTRINSECA

ENDOTELIO FACTOR TISULAR

Company Logo

Serino Proteasa

Zimógeno

Serino Proteasa

Péptido de activación

MECANISMO DE ACTIVACIÓN EN CASCADA

Company Logo

Cal PreCal=QAPM

XII XIIa

QAPM=XI XIa

IXVIIIa CalcioFosfolipidos

X Va CalcioFosfolipidos

FIBRINOGENO

F.Tisular Calcio

VIIaIXa

Lesión Vascular

F. Tisular

TROMBINAII

FIBRINA S FIBRINA I

Company Logo

Cal PreCal=QAPM

XII XIIa

QAPM=XI XIa

IXVIIIa CalcioFosfolipidos

XVa CalcioFosfolipidos

FIBRINOGENO

F.Tisular Calcio

VIIaIXa

Lesión Vascular

F. Tisular

TROMBINAII

FIBRINA S FIBRINA I

ANTITROMBINA

PROTEINA CPROTEINA S

Company Logo

Cal PreCal=QAPM

XII XIIa

QAPM=XI XIa

IXVIIIa Calcio

Fosfolip.

XVa Calcio

Fosfolip.

FIBRINOGENO

F.Tisular Calcio

VIIaIXa

Lesión Vascular

F. Tisular

TROMBINAII

FIBRINA S FIBRINA I

ANTITROMBINA

PROTEINA C

PROTEINA S

Company Logo

TROMBINA

ACCION ACCION ACCION COAGULANTE INHIBIDORA ANTIFIBRINOLITICA

PLAQUETAS

FIBRINOGENO

FIBRINA

F V F VaF VIII F VIIIaF XIII F XIIIa

PROTEINA C

PROTEINA Ca

INHIBE

ACTIVATRANSFORMA

TrombomodulinaEPCR

Factor V

Company Logo

Factores Vitamina K dependientes

Company Logo

Información Genetica

Aminoacidos Sintesis Proteica

Pro-Factores II, VII, IX, X, PC, PS, etc.

Carboxilasa FACTORES K DEPENDIENTES

VITAMINA K

DICUMARINICOS

inhibe

Company Logo

VIDA MEDIA DE LOS FACTORES K DEPENDIENTES

Factor VII Proteina C Factor X Factor IX Factor II Proteina S

6 horas 6 horas 48 horas 30 horas 72 horas 50 horas

Company Logo

TIEMPO DE PROTROMBINAExpresion

A. CONCENTRACION

B. TASA

C. INR (Razon Internacional Normatizada)

Company Logo

Intensidad de la AnticoagulacionIntensidad de la Anticoagulacion

Ventana Terapeutica

sTromboem

bolias

Company Logo

PLASMINATROMBINA

AUMENTA

DISMINUYE

TROMBOSIS

HEMORRAGIA

Company Logo

PLASMINÓGENO PLASMINA

Prouroquinasa

Uroquinasa

pdfFIBRINA

α2APHRG

Uroquinasa

SKα2macroglobulina

Company Logo

MALLA DE FIBRINA FIBRINÓGENO

PLASMINA

l is isl isis

DÍMERO - D PDF

Company Logo

plasmina

trombina

F XIIIa

DIMERO D

Company Logo

ENFERMEDADES HEMORRAGICAS

Mecanismos de Hemostasia

InteracciónEndotelio-Plaquetas

Mecanismo Fibrinolítico

Extrínseca (Explosión)

Intrínseca (Ampliación)

Lesión AdhesiónAgregación

Company Logo

Laboratorio de Hemostasia

Company Logo

Tiempo de Protrombina

Company Logo

Equipamiento y Muestra

Company Logo

Técnica

Se utiliza plasma pobre en plaquetas (PPP) y tromboplastina cálcica

En un baño a 37ºC se coloca un tubo de vidrio de Khan o hemólisis Agregar 50 µ de PPP Incubar 30 segundos Agregar 100 µ de Reactivo y disparar el cronometro Detener el cronometro cuando se visualiza la formación del

coagulo.

Para obtener los resultados en % de actividad es necesario realizar la curva de calibrado donde se interpolan los resultados obtenidos en segundos

Company Logo

Curva de Calibración

Pool Buffer Porcentaje Tiempo

0,100 ml 0 100

0,70 ml 0,30 ml 70

0,50 ml 0,50 ml 50

0,25 ml 0,75 ml 25

Log de cc (%)

Tpo. (seg)

Company Logo

RIN = Fórmula para expresar el TQuick en pacientes anticoagulados con ACO que nos independiza de la tromboplastina de trabajo • RIN = ( PT pac/ MNPT) ISI

• MNPT: Media Geométrica del tiempo de Quick de 20 normales del día de la calibración de la tromboplastina de trabajo • PT pac: Tiempo de Quick del paciente

Company Logo

TP prolongado

CAUSAS MÁS FRECUENTES DE DÉFICIT

• Avitaminosis K: adquirida, iatrogénica sindromes de mala absorción, etc.• Hepatopatías: Obstructiva,funcional. • Inhibidores.

La anticoagulación con ACO se controla con el RIN

Company Logo

TP. prolongado

TP Prolongado

Corrección c/plasma Normal

Corrige No corrige

Déficit de factores InhibidoresDosar

Factores

Repetir

Secuencia de Trabajo

Company Logo

Corrección con Plasma Normal

El TQuick se puede prolongar por déficit de los factores o por presencia de inhibidores. Se hace una mezcla de partes iguales del plasma problema y de un normal de concentración conocida, se hace el TQuick de la mezcla Corrige si el valor en % es igual o mayor que el promedio de los TQuick del paciente y el normal TQuick teórico (%paciente +% normal) 2 Ejemplo de corrección• Plasma problema (P) TQuick de 50%• Plasma normal (N) TQuick de 80%• Mezcla P + N TQuick de 65% o más

Company Logo

KPTT o APTT

Es la prueba más sensible Es la prueba más reproducible Es sensible a los déficit de factores de

fase de contacto, IX y VIII Es sensible a inhibidores neutralizantes Es sensible a inhibidores de

interferencia Es sensible a la heparina

Company Logo

Fundamento

Se incuba el PPP del paciente con una mezcla de fosfolípidos y un activador de contacto entre 2 a 4 minutos y se recalcifica con CL 2Ca 25mM

Company Logo

Técnica

En baño termostatizado a 37ºC Colocar un tubo de hémolisis o Khan de vidrio Agregar 100µl de PPP y 100µl de Reactivo de

aPTT Incubar según indicación del fabricante Agregar 100µl de CL2Ca 25mM y disparar el

cronómetro Detener el cronómetro cuando aparece el

coágulo

Company Logo

Utilidad

El aPTT se utiliza para el seguimiento de pacientes heparinizados con heparina regular

Company Logo

Algoritmo de corrección

Índice de Rosner

(aPTT mezcla + aPTT normal/aPTT paciente).100

< de 10% corrige

≥ de 10% no corrige

Company Logo

Aplicación del Índice de Rosner

CORRIGE Dédicit de factores de la vía intrínseca

NO CORRIGE Inhibidor contra factor Inhibidor de interferencia Heparina

Company Logo

DOSAJE DE FACTORES DE LA VÍA INTRÍNSECA

Es un aPTT modificado

En un baño termostatizado colocar un tubos de vidrio

Agregar 50µl de plasma diluido 50µl de plasma deficiente 50µl de reactivo de aPTT Incubar según indicación del fabricante Recalcificar con 50µl de CL 2Ca 25mM Cronometrar Interpolar en la curva de calibración

Company Logo

DOSAJE DE FACTORES DE LA VÍA INTRÍNSECA

PPP de un pool normal o calibrador normal, diluir 1/5 en buffer Imidazol

1/5 100%1/10 50%1/20 25%1/40 12,5%Proceder igual que con el dosaje

Company Logo

Graficar en papel log-log tiempo vs concentración

Company Logo

Evaluación de la Vía final común

Company Logo

Tiempo de Trombina

Mide el tiempo que tarda en coagular una alícuota (100µl) de PPP por el agregado de una alícuota (100µl) de trombina de a 37ºC. Se informa tiempo del paciente/normal TT prolongado•Afibrinogenemia•Hipofibrinogenemia•Disfibrinogenemia•PDF/pdf muy elevados•Paraproteínas•Heparina

Company Logo

Criterio de Corrección del TT

TT de normal al medio N/2TT de la mezcla P+NCorrige si el TT de P+N es ≤ TT de

Ejemplo:TT paciente TT P+N > N/2 ↑TT cálcica Normal 18segTT cálcica Paciente 19seg

Company Logo

Dimero D

Company Logo

Dimero D

Técnicas de laboratorio ii

Education

PROGRAMACIÓN DEL MÓDULO Técnicas Generales de Laboratorio

Laboratorio escénico de técnicas performativas

Especificaciones Técnicas Laboratorio de genética médica

Manual de Laboratorio de Técnicas Microbiológicas

Técnicas de Laboratorio - Web viewGuía Química IIColegio Novel. Guía Química II. Colegio Novel. Primer Parcial3. Primer Parcial

NOMBRE DE LA ASIGNATURA: LABORATORIO DE … · 1 Cables, placa de montaje, instrumentos de laboratorio 2h 2 Instrumentos de laboratorio II, técnicas y caracterización de componentes

Técnicas laboratorio enzimología

Práctica Nº 03:TÉCNICAS DE LABORATORIO

Técnicas Instrumentales en el Laboratorio de Análisis Clínicos

Laboratorio II

TÉCNICAS DE LABORATORIO PARA EL DIAGNÓSTICO Y LA

Prácticas de laboratorio: técnicas básicas de genética

Técnicas de laboratorio en Parasitologia

Técnicas generales de laboratorio

Técnicas Instrumentales de Laboratorio Guía Docente

Guía Laboratorio Técnicas basicas

Técnicas del Laboratorio Metalográfico

para_public... · Web view11961146 GALINDO FEIJOO, ELENA Laboratorio y Técnicas de Biología, Química y Agroalimentación 2669076 GALINDO FERNANDEZ, PALOMA Laboratorio y Técnicas

Reglamento de Seguridad y Operatividad del Laboratorio de ... · Biología Superior II y Técnicas de Laboratorio, deberán estar avalados y autorizados por la Sección de Academia

Práctica8 técnicas de laboratorio