View
214
Download
0
Category
Preview:
Citation preview
1
A laboratóriumi medicina fejlődése az elmúlt 35 évben
Kovács L. Gábor Kovács L. Gábor egyetemi tanár, egyetemi tanár,
az MTA rendes tagjaaz MTA rendes tagja
Pécsi TudományegyetemPécsi Tudományegyetem
1976
2011?
INTÉZETIGAZGATÓ PROFESSZOROK KLINIKAI KÉMIA 1976
MérlegSpektrofotométerLángfotométerVan Slyke készülékKoloriméterCentrifuga
1976Nem volt kalkulátor, logarléc volt.Nem volt automatizáció. Nem volt modern minőségbiztosítás. Nem volt telefax, komputer. Nem volt modern laboratóriumi
információs rendszer.
A VIZSGÁLÓELJÁRÁSOK FEJLŐDÉSE
•• Specifikusabb A cél: klinikai
• Szenzitívebb
• Szélesebb méréstartomány
• Rövid analízis idő
•Automatizálható
• Környezetkímélő A cél: analitikai
2
TÖMEGSPEKTROMETRIA
1980
PCR
LIA
BIOLUMINESZCENCIA, EIA
1960
RIA, EIA, FIA
ATOMABSZORBCIÓ
FLUORIMETRIA
KROMATOGRÁFIA1940umol/l
nmol/l
pmol/l
NEPHELOMETRIA
FOTOMETRIAmmol/lTITRIMETRIA1890
2000fmol/l
amol/l2010
1920
Új analitikai eljárások a rutin diagnosztikában: tömegspektrometria
• Kis molekulák jövőbeli vizsgáló módszere.
• A kereszt-reakciók kiküszöbölve.
• Gyors, nem igényel minta előkezelést, nincs reagens költség.
• A berendezés drága, speciális felkészültséget igényel.
Nano diagnosztika
Nano chip/biochipNano array/protein
nano arrayGyógyszercélpontokGénterápia és RNS
interferencia
Proteomika
A B
AA
lokalizáció
modifikáció interakció
aktivitás
funkció
A proteomika technológiájaA proteomika technológiája
Tömegspektrometria
Biokémiaimódszerek
Bioinformatika
Fehérjékazonosítása
DIAGNOSZTIKUS BIOMARKEREK….
10%
Albumin
Össz IgG
TranszferrinFibrinogén
Össz IgA
α-2-Makroglobulin
Össz IgM
α-1-Antitripszin
C3 komplement
Hapto-globin 10%
H-faktor
komplement faktor B
Cöruloplazmin
1%
Apolipoprotein A-1Apolipoprotein Bα-1 savas Glycoprotein
Lipoprotein
C4 komplement
Prealbumin
C9 komplementC1q komplement
C8 komplement
BIOMARKEREK
1987: 60 különböző fehérje2011: 2.000 különböző fehérje 2030: 50.000 különböző fehérje
PROTEOMIKABIOINFORMATIKA
3
DIAGNOSZTIKUS BIOMARKEREK KUTATÁSA
• Új biomarkerek.• „Lab-on-a-chip” módszerek.• Nanotechnológia, nanodrót.• Transzlációs kutatások.• Asszisztált reprodukció.• Perinatalis károsodás.• Egyes immunológiai
kórképek (pl. scleroderma) prognosis.
Gének azonosítása
Fenotipus 1 Fenotipus 2 Fenotipus 3 Fenotipus 4
Betegségek iránti fogékonyságprediktív értékelése
Élettan
Metabolizmus Endokrin
Proteóma
Immunológia Transzkriptóma
BiomarkerMolekulák
Morfometria
Farmakokinetika
EtnikumKörnyezet
KorNem
Genetika és a betegségek iránti fogékonyság
Prediktív laboratóriumi Prediktív laboratóriumi medicinamedicina
• (MA MÉG) EGÉSZSÉGES EMBEREKET VIZSGÁL MOLEKULÁRIS BIOLÓGIAI MÓDSZEREKKEL
• ADOTT BETEGSÉG IRÁNTI FOGÉKONYSÉG STATISZTIKAI BECSLÉSE
• INDIVIDUÁLIS PREVENCIÓS PROGRAM
• TÖMEG-BETEGSÉGEK: DIABETES, HYPERTONIA, ARTERIOSCLEROSIS, MALIGNUS DAGANATOK
Farmakogenomika: a gének és a gyógyszerek kapcsolata
Gén Gyógyszer Válasz
Hatás
Mellékhatás
PCR fázis
Array fázis
Előkészítés
Scannelés és Analizálás
Amplifikáció Fragmentáció/ Jelölés
Hibridizáció
PCRFluoreszcens primerekkel
Lelet
Minta: alvadásgátolt perifériás vér
Cytochrom P450 microarray
Genomiális DNS izolálás
Rideg, Háber, Botz, Szűcs, Várnai, Miseta, Kovács: Cell Biochem Function 2011, in press
Molekuláris diagnosztika eljárások
• Multiple endokrin neoplasia
• Congenitalis adrenalishyperplasia
• Tg mRNA: differenciált sejtes pajzsmirigyrák
• Kallikrein mRNA: számos daganat
• Oestrogen receptor polimorfizmus
• Microarray (biochip)
FP/7 REGPOT PÁLYÁZAT: KORAI DIAGNOSZTIKAPÉCS, AMSTERDAM, DUNDEE, MILANO, ROUEN, TWENTE
4
•TRANSZKRIPCIÓ:•DNS metiláció (a replikáció megváltozik)• Hiszton modifikáció/varánsok
(megváltozik a DNS hozzáférhetősége az enzimek számára)
•POSZTTRANSZKRIPCIÓ:•Szabályozó, de nem kódoló RNS
(pl. mikro RNS)
AZ EPIGENETIKA MÓDSZEREI
•Reverzibilis, örökölhető változás a gének funkciójában, amely nem jár együtt a sej tmag DNS szekvencia módosulásával.
•A DNS-ben nem rögzült gén-szabályozási információ egy ik generációról (sej tről, szervezetről) átjut a másikra.
•CHROMATIN-IMMUNPRECIPITÁCIÓS (CHIP-SEQ) MIKROARRAY
•TÖMEGSPEKTROMETRIA (LCMS-MS)EPIGENOM TÉRKÉPEZÉS
O-Glikoziláció
• foszforilációval rokon, dinamikus poszt-transzlációs módosulás• szerepe: diabétesz, stresszfolyamatok, malignus betegségek• befolyásolhatja a fehérjék funkcióját, lokalizációját, lebomlását
O-Glikozilált fehérjék Jurkat sejtekben.
Nagy, Balasa, Frank, Rab, Rideg, Kotek, Magyarlaki, Bogner, Kovacs, Miseta: European Biophysics Journal , 39 (2010) 1207-17.
O-Glikoziláció target fehérjéi: - citoszkeletális- metabolikus enzimek- kinázok, jelátvitel fehérjéi- transzkripciós faktorok- kromatin/DNS asszociált fehérjék (hisztonok, RNS polimeráz, stb)Whelan és mtsai.: Circulation Research 93 (2003) 1047-1058. Teo és mtsai.: Nature Chemical Biology 6 (2010) 338-43.
Fujiki és mtsai.: GlcNAcylation of a histone methyltransferase in retinoic-acid-induced granulopoiesis. Nature 459 (2009) 455-9.
A hiszton metil-transzferáz aktivitás fokozódhat O-Glikoziláció hatására: (A H3K4 hisztonfehérje metilációja a kromatint transzkripcionálisan aktív
állapotba hozza) Mikkelsen és mtsai.: Nature 448 (2007) 553–560.
Foetalis mRNS, DNS az anyai vérben
kivon RNS, DNS
AUTOMATIZÁCIÓ, ROBOTIZÁCIÓ
5
The Quality Assurance Cycle
•Data and Lab Management•Safety•Customer Service
Patient/Client PrepSample Collection
Sample Receipt and Accessioning
Sample TransportQuality Control
Record Keeping
ReportingPersonnel CompetencyTest Evaluations
Testing
AKKREDITÁCIÓ
2001
2000 ISO 9001:2000
1998
1996
1994 ISO 9001-3:1994
1992
19901989 BS 5750:1989 EN 45001:1989
(ISO Guide 25)
MINŐSÉGÜGYI LABORATÓRIUMISTANDARD STANDARD
EC4 Essential & Additional
Criteria
ISO 15189
Magyar standard
ISO 17025CPA (UK)
A LABORATÓRIUM JÖVŐJEÚj módszerek:• Szelektív knock-out• Funkcionális genomika• Transcriptomika• Proteomika• Metabolomika• Glikomika• Lipidomika• Farmakogenomika• NutrigenomikaNanotechnológia, chip-
technológia: • Analitok• Sejtek
A PATOLÓGIAI-LABORATÓRIUMI VIZSGÁLAT: AZ ORVOSI DÖNTÉSHOZATAL EGYIK
LEGFONTOSABB TÁMPONTJA
• A modern medicina legfontosabb szegmense.
• Az Amerikai Patológusok Társasága: “ A patológiai/laboratóriumi szolgáltatások képezik a klinikai döntéshozatal 70-80 %-ának alapját mind a diagnosis, mind pedig a terápia és a prognosis során.” KONZILIUM ÉS FOLYAMATOS
KOOPERÁCIÓ A KLINIKUSSAL
6
A Pécsi Tudományegyetem Laboratóriumi Medicina Intézet minden dolgozója szeretettel gratulál a szegedi kollégáknak!
A Pécsi Tudományegyetem Laboratóriumi Medicina Intézet minden dolgozója szeretettel gratulál a szegedi kollégáknak!
A Pécsi Tudományegyetem Laboratóriumi Medicina Intézet minden dolgozója szeretettel gratulál a szegedi kollégáknak!
A Pécsi Tudományegyetem Laboratóriumi Medicina Intézet minden dolgozója szeretettel gratulál a szegedi kollégáknak!
Recommended