Die funktionelle Rolle von Optineurin Institut der Anatomie Fakultät für Humananatomie und...

Die funktionelle Rolle von Optineurin

Institut der AnatomieFakultät für Humananatomie und EmbryologieUniversität Regensburg

Glaukom

Optineurin

DMEM high glucose 37°C pH 7.4? Mikroskop

WT-OPTN

„gefloxtes“ OPTN

OPTN KO (frameshift)

komplett KO Mäuse (EIIA Cre Rekombinase, schneidet ab 2 Zell-Stadium, KO ist vererblich, Rekombinase wurde wieder raus gekreuzt)

CTGF: Überexpression unter beta B1 Crystallin Promotor, aktiv in der Linse -> erhöhter Augeninnendruck! Als Glaukommodell, um die Frage zu beantworten, ob Zellen ohne Optineurin evtl. sensibler auf schädigende Einflüsse reagieren

OPTN KO Mäuse mit und ohne CTGF-Überexpression

Genotypisierungen

200300400500

1000

3000

100

200

300400500

1000

3000

100

200300400500

1000

3000

CTGF-PCR (SV40) Flox-PCR

Exon 3-PCR

Spermien

Isolation aus Nebenhoden, in Zellkulturmedium unter dem Mikroskop

(Phasenkontrast) beobachtet. Medium: DMEM high glucose 37°C pH 7.4

Ergebnis: Morphologisch kein Unterschied zwischen KO und WT und

beide motil sowie fruchtbar.

WT KO

OPTN KO Mäuse 6 Monate alt: Axonanzahl und Retinadicke (noch nicht fertig) sowie Elektronenmikroskopie (deshalb haben wir perfundiert)

Ausblick